DE3884139T2

DE3884139T2 - L-Prolin-Derivate, deren Herstellung und deren biologische Anwendungen.

Info

Publication number: DE3884139T2
Application number: DE88402761T
Authority: DE
Inventors: Pierre-Yves Fiez-Vandal
Original assignee: Ekita Investments NV
Current assignee: Neurotell Ag Hergiswil Ch
Priority date: 1987-11-03
Filing date: 1988-11-03
Publication date: 1994-05-05
Anticipated expiration: 2008-11-04
Also published as: JPH01157998A; IE883321L; CA1340227C; ES2061710T3; EP0316218A1; FI885083A0; KR890008091A; US5212158A; IL88275A0; FR2622581A1; IE64509B1; JP2694191B2; FI885083A; EP0316218B1; ATE94560T1; KR0121793B1; FR2622581B1; DE3884139D1

Description

Die Erfindung bezieht sich auf neue L-Prolinderivate, auf deren Herstellung und auf deren biologische Anwendungen.
Die Erfindung bezieht sich im spezielleren auf Derivate des L-Prolins, die eine therapeutische Aktivität zeigen, insbesondere eine psychotrope Aktivität und im spezielleren eine nootrope Aktivität.
Es sind bereits zahlreiche L-Prolinderivate beschrieben worden, jedoch für andere Wirksamkeiten. So werden in der europäischen Patentanmeldung 0 173 510 Tripeptidderivate beschrieben, die zwei Prolinreste einschließen, zu denen angegeben wird, daß diese Produkte eine antihypertensive Aktivität zeigen.
In Chemical Abstracts, Bd. 105, 1986, 4622b, wird ein L-Prolinderivat beschrieben, nämlich das [³H]-Benzoylphenylalanyl-alanyl-prolin, um seine Nützlichkeit als Substrat für das Angiotensin-Konversionsenzym anzuführen.
Was die bekannten Produkte mit nootroper Aktivität anlangt, so umfassen diese das Mutterkorn, das Piracetam und bestimmte Peptidneurohormone. Der Urheber der vorliegenden Erfindung hat festgestellt, daß diese Produkte eine Strukturanalogie zeigen, und hat danach gesucht, L-Prolinderivate zu erarbeiten, die insbesondere einen nootropen Effekt zeigen, nicht aber die pharmakologischen Wirkungen des Mutterkorns zeigen, die an Ergolin gebunden sind, weiterhin wirksamer als Piracetam sind und über oralen Weg aktiv sind.
Die ausgeführten Arbeiten haben zur Entwicklung einer Familie von L-Prolinderivaten geführt, die die gewünschten Eigenschaften aufweisen und in vorteilhafter Weise bei niedrigen Dosen aktiv sind.
Die L-Prolinderivate gemäß der Erfindung zeichnen sich dadurch aus, daß sie der Formel I entsprechen, worin
- R&sub1; eine Gruppe der Formel II
darstellt, worin R einen Carbonylrest CO-, einen Acylrest Y-CO- oder einen Oxyacylrest O-Y-CO- bedeutet, worin Y eine Alkyl- oder Alkenylkette mit insbesondere 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet, Z ein oder mehrere Wasserstoffatome oder einen oder mehrere Substituenten in den Stellungen ortho und/oder ortho' und/oder meta und/oder meta' und/oder para, ausgewählt unter Halogenatomen, einer CF&sub3;-Gruppe, den Alkyl- oder Alkoxyresten mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und, bei zwei benachbarten Substituenten, einer Alkylendioxygruppe, darstellt, wobei die Alkylengruppe 1 bis 3 Kohlenstoffatome umfaßt,
- R&sub2; einen Rest NH&sub2; oder OH darstellt, oder funktionelle Derivate dieser Reste,
- A&sub1; und A&sub2;, die gleich oder voneinander verschieden sind, Aminosäurereste darstellen und
- B&sub1; und B&sub2;, die gleich oder voneinander verschieden sind, ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeuten,
und die pharmakologisch annehmbaren Salze dieser Derivate.
In einer bevorzugten Familie stellt der Substituent Z in Formel II ein Wasserstoffatom dar.
In einer anderen bevorzugten Familie stellt der Substituent Z ein unter Chlor oder Fluor ausgewähltes Halogenatom, eine CF&sub3;-Gruppe, einen unter Methoxy oder Ethoxy ausgewählten Alkoxyrest und, für zwei benachbarte Positionen, einen unter 3,4-Methylendioxy oder 3,4-Ethylendioxy ausgewählten Alkylendioxyrest dar.
In diesen Familien ist der Substituent R vorteilhaft unter den Gruppen CO-, CH&sub2;-CO-, CH&sub2;-CH&sub2;-CO-, CH&sub2;-CH&sub2;-CH&sub2;-CO-, CH=CH-CO- oder O-CH&sub2;-CO- ausgewählt.
Eine bevorzugte Gruppe der L-Prolinderivate gemäß den vorstehend angeführten Familien umfaßt natürliche Aminosäurereste A&sub1; und A&sub2;. Unter den vorteilhaften Produkten wird A&sub1; unter den Glycin-, L-Alanin- und L-Valinresten gewählt, und A&sub2; unter den Resten von Glycin, L-Phenylalanin, L-Histidin, L-Leucin, L-Valin und L-Alanin.
Die Erfindung bezieht sich gleichermaßen auf ein Verfahren zur Herstellung der oben definierten L-Prolinderivate.
Dieses Verfahren zeichnet sich dadurch aus, daß man eine Verbindung der Formel III:
mit einer Verbindung der Formel IV
R&sub1;-A&sub1; (IV)
zur Umsetzung bringt.
In diesen Formeln haben B&sub1;, B&sub2;, A&sub1;, A&sub2;, R&sub1; und R&sub2; die oben angegebenen Bedeutungen.
Zur Gewinnung einer Verbindung der Formel III setzt man vorteilhaft ein Prolinderivat der Formel V
und eine Aminosäure A&sub2; ein.
Die Kondensationsreaktion wird vorzugsweise bei einer unter der Umgebungstemperatur liegenden Temperatur ausgeführt, im spezielleren unter 0ºC. Bevorzugte Temperaturen liegen unter -10ºC, insbesondere in der Größenordnung von -15ºC.
In vorteilhafter Weise arbeitet man in einem organischen Lösungsmittel, wie Tetrahydrofuran (THF) oder Dimethylformamid (DMF).
Die Aminofunktion der eingesetzten Aminosäure A&sub2; ist vorteilhaft durch eine anschließend mittels Säuren eliminierbare Gruppe geschützt. Es werden für die Peptidsynthese klassische Schutzgruppen verwendet, wie die tert.Butyloxycarbonylgruppe, Benzyloxycarbonylgruppe oder 9-Fluorenylmethyloxycarbonylgruppe, oder jede andere, in der Peptidchemie eingesetzte und dem Fachmann bekannte Gruppe.
Die Schutzgruppe wird im Hinblick auf die Kondensation von A&sub2; mit dem Prolinderivat der Formel III eliminiert, vorteilhaft unter stark sauren Bedingungen. Zu diesem Zweck wird eine wasserfreie Säure wie eine Lösung von gasförmigem Chlorwasserstoff in einem organischen Lösungsmittel angewendet, beispielsweise Dioxan.
In gleicher Weise können stark saure Bedingungen in wäßrigem Milieu angewendet werden. Unter diesen Bedingungen wird die Anwendung von Chlorwasserstoffsäure oder Schwefelsäure in konzentrierter wäßriger Lösung angeführt.
Die Verbindung R&sub1;-A&sub1; der Formel IV ergibt sich aus der Kondensation von reaktionsfähigen Derivaten von R&sub1; mit A&sub1; (wobei die Carboxylfunktion von A&sub1; durch eine Schutzgruppe blockiert ist), gefolgt von einer Verseifung mit Hilfe einer starken Base. Die reaktionsfähigen Derivate von R&sub1; umfassen beispielsweise die Halogenide, insbesondere das Chlorid, wobei diese reaktionsfähigen Gruppen einsetzbar sind, da es keine Möglichkeit zu Nebenreaktionen mit den geschützten Aminosäurederivaten gibt. Die Carboxylfunktion von A&sub1; ist mit Gruppen blockiert, die üblicherweise in der Peptidsynthese eingesetzt werden. Diese Funktion ist vorzugsweise in Form von Estern blockiert, insbesondere als Alkylester, wobei die Alkylgruppe vorzugsweise 1 bis 4 Kohlenstoffatome aufweist, oder auch als Benzylester. In vorteilhafter Weise liegen die Ester von A&sub1; in Form von Salzen vor, beispielsweise als Hydrochloride.
Die Kondensationsstufe zwischen den reaktionsfähigen Derivaten wird vorzugsweise bei Temperaturen unter der Umgebungstemperatur ausgeführt, vorzugsweise unter 0ºC, insbesondere in der Größenordnung von -5 bis -10ºC.
Die Verseifungsstufe mit einer Base wird in einem organischen Lösungsmittel vorgenommen, insbesondere in einem alkoholischen Lösungsmittel wie Methanol. Die Reaktion erfolgt vorteilhaft bei Umgebungstemperatur.
Damit das Produkt ausfällt, wird der pH-Wert auf saure Werte unter 3 eingestellt, insbesondere unter 2, vorzugsweise um 1,5.
Die in den vorstehenden Kondensationsreaktionen eingesetzten Aminosäuren A&sub1; und A&sub2; sind vorzugsweise geschützt und hinsichtlich der Kupplung aktiviert. Zu diesem Zweck sind zahlreiche Methoden geeignet.
Befriedigende Ergebnisse werden erhalten, wenn beispielsweise das N-Methylmorpholin verwendet wird, um das Salz des Aminosäurederivats auszubilden, das man anschließend mit Isobutylchlorformiat umsetzt, um ein gemischtes Carbonsäure-Kohlensäureanhydrid auszubilden, das ein aktiviertes Derivat der Aminosäure ist. Um jegliche Nebenreaktion infolge der Verwendung von Isobutylchlorformiat zu vermeiden, wird ein Additiv eingesetzt, das vorteilhaft aus einer Triazolverbindung gebildet ist, insbesondere das 1-Hydroxybenzotriazol.
Unter den anderen, in klassischer Weise zum Aktivieren der Aminosäure hinsichtlich einer Kupplung verwendeten Methoden kann die Ausbildung von aktiven Estern erwähnt werden, wie jene, die insbesondere von N-Hydroxysuccinimid, 4-Nitrophenol, Pentafluorphenol oder analogen Derivaten abgeleitet sind, sowie der Einsatz von Carbodiimiden, Succinimiden und analogen Derivaten für die Kupplungsreaktion.
Die pharmakologische Überprüfung der erfindungsgemäßen L-Prolinderivate hat eine erhöhte psychotrope Aktivität ergeben.
Diese Aktivität hat sich insbesondere in den pharmakologischen Tests der Passivvermeidung gezeigt, die allgemein zur Bestimmung der potentiellen Aktivität von Produkten insbesondere auf das Gedächtnis verwendet werden.
Unter Induzieren einer Amnesie durch Absorption von Scopolamin stellt man solcherart fest, daß die erfindungsgemäßen Produkte befähigt sind, und dies gemäß einem Gesichtspunkt, dem großes Interesse zukommt, bei niedriger Dosis, eine solcherart induzierte Amnesie zu korrigieren.
Überdies sind die vorteilhaften Eigenschaften der erfindungsgemäßen Verbindungen von einer großen Unschädlichkeit begleitet.
Tatsächlich haben nach dem Irwin-Test an Mäusen vorgenommene Versuche gezeigt, daß die erfindungsgemäßen Produkte bis zu Dosen von über 1000 mg/kg weder Mortalität noch Krämpfe bei den Tieren hervorrufen.
Diese Produkte eignen sich daher ganz besonders zur Schaffung von pharmazeutischen Zusammensetzungen.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung umfassen eine wirksame Menge wenigstens eines L-Prolinderivats, wie vorstehend definiert, in Assoziation mit einem pharmazeutischen inerten Träger.
Vorteilhafte pharmazeutische Zusammensetzungen umfassen diese Derivate allein oder in Assoziation mit psychotropen Antidepressiva, Neuroleptika oder L-Dopa.
Im Hinblick auf ihre nootrope Aktivität sind diese pharmazeutischen Zusammensetzungen insbesondere bei den nachfolgenden therapeutischen Indikationen anwendbar:
Gedächtnisstörungen, senile Dementia, Alzheimer'sche Krankheit, Parkinson-Krankheit, Schizophrenie, Depressionen, periphere Neuropathien und neuromotorische Störungen.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen der Erfindung können in unterschiedlichen Formen verabreicht werden, nämlich auf dem Injektionsweg, nasal, rektal oder oral.
Für die Verabreichung auf oralem Wege werden insbesondere Tabletten, Pillen, Kapseln, Tropfen oder auch Liposome verwendet. Diese Zusammensetzungen umfassen vorteilhaft 1 bis 100 mg je Dosiseinheit, vorzugsweise 2,5 bis 50 mg.
Weitere Verabreichungsformen umfassen intravenös, subkutan oder intramuskulär injizierbare Lösungen in Form von sterilen oder sterilisierbaren Lösungen.
Diese Lösungen enthalten je Einheitsdosis 1 bis 50 mg, vorzugsweise 0,5 bis 50 mg.
Zur Orientierung sei angegeben, daß die beim Menschen anwendbare Dosierung den folgenden Dosen entspricht: beispielsweise werden dem Patienten 5 bis 300 mg/Tag in einer Dosis oder in mehreren Dosen verabreicht.
Die Erfindung bezieht sich weiterhin auf biologische Reagentien, deren Wirkstoffe aus den weiter oben definierten L-Prolinderivaten bestehen.
Diese Reaktionsmittel können als Bezugssubstanzen oder Muster beim Studium eventueller nootroper Aktivitäten eingesetzt werden.
Weitere Merkmale und Vorteile der Erfindung werden aus den nachstehenden Beispielen ersichtlich, die sich auf die Herstellung der L-Prolinderivate und auf die Untersuchung ihrer nootropen Aktivität beziehen.

BEISPIEL 1:

Synthese von Cinnamoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid der Formel VI:
Diese Synthese umfaßt fünf Stufen, die in folgender Weise ausgeführt werden:
1/ Herstellung von t-Boc-L-Phenylalanyl-L-prolinamid Es werden die folgenden Verbindungen in den angegebenen Mengen eingesetzt:
t-Boc-L-Phenylalanin 40 g
Tetrahydrofuran 200 ml
N-Methylmorpholin 21 ml
Isobutyl-chlorformiat 19,5 ml
1-Hydroxybenzotriazol 23 g
Dimethylformamid 75 ml
L-Prolinamid 17,12 g
Dimethylformamid 75 ml
Das t-Boc-L-Phenylalanin (tert.Butyloxycarbonyl-L-phenylalanin) wird in Tetrahydrofuran gelöst, die Lösung wird unter Rühren mit dem Magnetrührer auf -15ºC abgekühlt und mit N-Methylmorpholin und anschließend mit Isobutyl-chlorformiat behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 5 bis 10 Minuten bei niedriger Temperatur gerührt und anschließend mit einer vorgekühlten Lösung von 1-Hydroxybenzotriazol in Dimethylformamid behandelt.
Nach einem Rühren während 5 bis 10 Minuten wird eine vorgekühlte Lösung von Prolinamid in Dimethylformamid dem Reaktionsgemisch zugesetzt.
Das Gemisch wird etwa 1 Stunde bei tiefer Temperatur gerührt, dann läßt man es auf Umgebungstemperatur kommen und rührt etwa 14 Stunden lang.
Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat (etwa 800 ml) verdünnt, worauf es aufeinanderfolgend mit einer gesattigten Natriumchloridlösung (zweimal), 5%igen Natriumbicarbonatlösung (dreimal), gesättigter Natriumchloridlösung (einmal), einer 0,5N wäßrigen Salzsäurelösung (dreimal) und einer gesättigten wäßrigen Natriumchloridlösung (dreimal) gewaschen wird. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und unter verringertem Druck eingedampft. Der zurückbleibende Sirup wird mit Petrolether digeriert, um die Kristallisation zu bewirken, und das erhaltene Produkt wird filtriert, mit Petrolether gewaschen und im Vakuum getrocknet.
Es werden 43,7 g Produkt erhalten. Die Dünnschichtchromatographie (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1) ergibt einen Rf-Wert von 0,5.
2/ Herstellung des Cinnamoyl-glycinmethylesters
Glycinmethylester-hydrochlorid 28 g
N-Methylmorpholin 39 ml
Cinnamoylchlorid 33 g
Tetrahydrofuran 250 ml
N-Methylmorpholin 35 ml
Das Glycinmethylester-hydrochlorid wird in Tetrahydrofuran suspendiert, die Lösung wird auf -5 bis -10ºC abgekühlt und anschließend mit einem ersten aliquoten Anteil von N-Methylmorpholin behandelt. Es wird sofort das Cinnamoylchlorid und der zweite aliquote Anteil von N-Methylmorpholin zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wird 30 Minuten lang bei niedriger Temperatur gerührt, worauf es auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und noch 2 bis 3 Stunden gerührt wird. Nach Verdünnung mit Ethylacetat (etwa 750 ml) wird die Lösung mit Wasser (dreimal) einer 0,5N wäßrigen Salzsäurelösung (dreimal) und schließlich mit Wasser gewaschen. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird mit Petrolether digeriert, um seine Kristallisation herbeizuführen. Das Produkt wird etwa 14 Stunden bei 4ºC belassen, dann abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Es wird in der nächsten Stufe ohne erneute Reinigung eingesetzt. Es werden 31 g Produkt erhalten.
3/ Herstellung von Cinnamoyl-glycin:
Es werden die nachstehenden Verbindungen in den angegebenen Mengen verwendet:
Cinnamoyl-methyl-glycinester 31 g
Methanol 300 ml
Natriumhydroxid (2N in Methanol) 150 ml Der Cinnamoyl-methyl-glycinester wird in Methanol gelöst und anschließend mit einer 2N Natriumhydroxidlösung in Methanol behandelt. Das Reaktionsgemisch wird bei Umgebungstemperatur 2 Stunden lang gerührt und anschließend mit Wasser (300 ml) verdünnt. Der pH-Wert des Gemisches wird mit Chlorwasserstoffsäure auf 1,5 eingestellt, damit das Produkt ausfällt. Das Gemisch wird etwa 14 Stunden lang auf 4ºC gehalten, um die Kristallisation zu vervollständigen, anschließend wird filtriert und mit Wasser gewaschen und im Vakuum getrocknet. Die Ausbeute beträgt 23 g. Der Schmelzpunkt des Produktes liegt bei 189 bis 192ºC. Die Dünnschichtchromatographie (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1) ergibt einen Rf-Wert von 0,2.
4/ Herstellung von L-Phenylalanyl-L-prolinamid-trifluoracetat:
Es werden die folgenden Produkte eingesetzt
t-Boc-Phenylalanyl-L-prolinamid 30 g
Dichlormethan 300 ml
Trifluoressigsäure 300 ml Das t-Boc-L-Phenylalanyl-L-prolinamid wird in Dichlormethan gelöst und bei Umgebungstemperatur 30 Minuten mit Trifluoressigsäure behandelt. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck abgedampft und der Rückstand wird aus Toluol nochmals eingedampft. Der ölige Rückstand wird mit Ether digeriert, um das Produkt auszufällen, das abfiltriert und im Vakuum getrocknet wird. Es werden 33,1 g Produkt erhalten. Die Dünnschichtchromatographie (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1) ergibt einen Rf-Wert von 0,3.
5/ Herstellung von Cinnamoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid:
Die Umsetzung wird unter Einsatz der folgenden Produkte mit den angegebenen Mengen ausgeführt:
Cinnamoyl-glycin 20 g
Dimethylformamid 200 ml
1-Hydroxybenzotriazol 16,3 g
Dicyclohexylcarbodiimid 20 g
L-Phenylalanyl-L-prolinamid.TFA 33 g
Dimethylformamid 200 ml
N-Methylmorpholin 11 ml
Das Cinnamoyl-glycin wird in Dimethylformamid gelöst, auf 0ºC abgekühlt und mit 1-Hydroxybenzotriazol versetzt, worauf das Gemisch mit Dicyclohexylcarbodiimid behandelt wird.
Das Reaktionsgemisch wird 1 Stunde lang bei 0ºC und anschließend 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt.
Während dieser Zeit wird das L-Phenylalanyl-L-prolinamid-trifluoracetat in 200 ml Dimethylformamid gelöst. Die Lösung wird auf 0ºC abgekühlt und mit N-Methylmorpholin behandelt. Die Lösung wird zu der zuvor bereiteten Lösung des aktivierten Cinnamoyl-glycinesters zugesetzt und das Gemisch wird etwa 14 Stunden lang bei Umgebungstemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat (1,5 Liter) verdünnt, filtriert und mit gesättigter Natriumchloridlösung (zweimal), einer 5%igen Natriumbicarbonatlösung (dreimal), einer gesättigten Natriumchloridlösung (einmal), einer 0,5N Chlorwasserstoffsäurelösung (dreimal) und schließlich mit gesättigter Natriumchloridlösung (dreimal) gewaschen.
Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet, abfiltriert und das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck verdampft. Der Rückstand wird in Aceton wieder gelöst, filtriert und das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Zur Beseitigung von restlichem Dicyclohexylharnstoff wird dieser Vorgang zweimal wiederholt. Das gewonnene Produkt (13,5 g) wird an Silicagel (500 g) gereinigt und mit Dichlormethan, das 1 bis 5% Methanol enthält, eluiert. Die das Reinproduktenthaltenden Fraktionen werden gesammelt und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wird mit Petrolether digeriert, filtriert und im Vakuum getrocknet.
Es werden 11,5 g Produkt mit einem Schmelzpunkt 95-115ºC erhalten. (Dieser Schmelzbereich kann auf eine cis-trans-Isomerisation zurückzuführen sein.) Die Dünnschichtchromatographie (CHCl&sub3;:NeOH:AcOH = 45 : 4:1) ergibt einen Rf-Wert von 0,4, eine weitere Dünnschichtchromatographie (n-BuOH:AcOH:H&sub2;O = 4 : 1:1) ergibt einen Rf-Wert von 0,8.
[α]D = -49,62º (c = 1, MeOH).
Das erhaltene Produkt ist in Wasser unlöslich und im Ausmaß von wenigstens 1 bis 5% in organischen Lösungsmitteln wie Methanol, Chloroform, Ethylacetat oder Dimethylformamid löslich.

BEISPIEL 2:

Herstellung von 4-Fluorcinnamoyl-glycyl-L-phenylalanin-L-prolinamid der Formel VII

1.4-Fluorcinnamoyl-glycin-methylester

Nach der in Beispiel 1, Stufe 2, für den Cinnamoyl-glycinmethylester allgemein beschriebenen Methode werden 7,5 g Glycinmethylester-hydrochlorid in Tetrahydrofuran suspendiert, auf 0ºC abgekühlt und mit 8,4 ml (1 Äquivalent) N-Methylmorpholin behandelt, worauf sofort eine vorgekühlte Lösung von 10,0 g 4-Fluorzimtsäure in Tetrahydrofuran zugesetzt wird, die durch Behandlung mit 12,4 g (1 Äquivalent) Dicyclohexylcarbodiimid und 9,2 g 1-Hydroxybenzotriazol voraktiviert worden ist. Der 4-Fluorcinnamoyl-glycinmethylester wird in Form eines weißen Feststoffes erhalten, der in der anschließenden Synthesestufe ohne erneute Reinigung eingesetzt wird.
Ausbeute: 8,5 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1): Rf = 0,8

2.4-Fluorcinnamoyl-glycin

8,5 g des aus der vorstehenden Stufe resultierenden Produktes werden durch Behandlung mit Natronlauge in Methanol, wie vorstehend in Beispiel 1, Stufe 3, für die Herstellung von Cinnamoyl-glycin beschrieben, einer Verseifungsreaktion unterworfen.
Ausbeute: 3,4 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1): Rf = 0,2

3.4-Fluorcinnamoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid

Die Kupplung des Produktes der Stufe 2 (1,78 g) an L-Phenylalanyl-L-prolinamid-trifluoracetat (3,0 g) wird unter Anwendung von Dicyclohexylcarbodiimid in Gegenwart von 1-Hydroxybenzotriazol vorgenommen. Das erhaltene Produkt liegt in Form eines weißen Feststoffes vor.
Ausbeute: 1,4 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1): Rf = 0,4
Schmelzpunkt: 125ºC

BEISPIEL 3:

Herstellung von 3,4-Methylendioxycinnamoyl-glycyl- L-prolinamid der Formel VIII

Das Produkt wird unter Anwendung der gleichen generellen Methode, wie zuvor für die Cinnamoyl- und 4-Fluorcinnamoyl- Analoga beschrieben, synthetisiert.

1. 3,4-Methylendioxycinnamoyl-glycin-methylester

15,0 g 3,4-Methylendioxyzimtsäure werden mit 9,78 g Glycinmethylester-hydrochlorid gekuppelt.
Ausbeute: 12,2 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1): Rf = 0,6

2. 3,4-Methylendioxycinnamoyl-glycin

Das Produkt der vorstehenden Stufe (12,2 g) wird wie vorstehend beschrieben verseift.
Ausbeute: 7,2 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1): Rf = 0,2; (n-BuOH:AcOH:H&sub2;O = 4 : 1:1)

3. 3,4-Methylendioxycinnamoyl-glycin-L-phenylalanyl-L-prolinamid

Die Kupplung des Produktes aus der vorstehenden Stufe (3,9 g) mit L-Phenylalanyl-L-prolinamid-trifluoracetat (5,55 g) wird vorgenommen und führt zu dem gewünschten Produkt.
Ausbeute: 1,3 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1): Rf = 0,5 Schmelzpunkt: 92-93ºC (Zers.)

BEISPIEL 4:

Herstellung von 3,4,5-Trimethoxycinnamoyl-glycyl-L- phenylalanyl-L-prolinamid der Formel IX

Es werden die vorstehend für die Synthese von 4-Fluorcinnamoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid und des Cinnamoyl- Analogons beschriebenen allgemeinen Methoden angewendet.

1. 3,4,5-Trimethoxycinnamoyl-glycin-methylester

15,0 g 3,4,5-Triinethoxyzimtsäure werden mit 7,9 g Glycinmethylesterhydrochlorid gekuppelt.
Ausbeute: 13,2 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1): Rf = 0,7

2. 3,4,5-Trimethoxycinnamoyl-glycin

Das Produkt aus der vorstehenden Stufe (13,2 g) wird einer Verseifungsoperation unterworfen, wie vorstehend beschrieben.
Ausbeute: 5,8 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1): Rf = 0,2 (n-BuOH:AcOH:H&sub2;O = 4 : 1:1): Rf = 0,6

3. 3,4,5-Trimethoxycinnamoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid

Das Produkt aus der vorangehenden Stufe (3,0 g) wird mit L-Phenylalanyl-L-prolinamid-trifluoracetat (4,0 g) gekuppelt, um das gewünschte Produkt zu ergeben.
Ausbeute: 2,3 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 45 : 4:1): Rf = 0,7
Schmelzpunkt: 122ºC

BEISPIEL 5:

Herstellung von Cinnamoyl-glycyl-L-leucyl-L-prolinamid der Formel X

1. t-Butyloxycarbonyl-L-leucyl-L-prolinamid

Indem der zuvor für die Synthese von t-Butyloxycarbonyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid beschriebenen allgemeinen Methode gefolgt wird, wird eine Aktivierung einer Lösung von 32,64 g t-Butyloxycarbonyl-L-leucin in Tetrahydrofuran durch Behandlung mit 18,22 ml N-Methylmorpholin, gefolgt von 16,99 ml Isobutylchlorformiat bei -5ºC, vorgenommen. Nach 15 Minuten werden 15,0 g L-Prolinamid-hydrochlorid, gelöst in Dimethylformamid, zugesetzt, anschließend werden 18,22 ml N-Nethylmorpholin zugegeben, und das Gemisch wird etwa 14 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt. Das erhaltene Produkt wird ohne weitere Reinigung für die anschließende Synthesestufe eingesetzt.
Ausbeute: 30,0 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 85 : 10;5): Rf = 0,6

2. L-Leucyl-L-prolinamid-trifluoracetat

Aus dem Produkt der vorangehenden Stufe (30,0 g) werden die Schutzgruppen, wie zuvor beschrieben, durch Behandlung mit Trifluoressigsäure und Methylenchlorid (1 : 1, 150 ml) bei Umgebungstemperatur abgespalten. Das Reaktionsgemisch wird eingedampft und mit Ether digeriert, um das gewünschte Produkt zu ergeben, das ohne weitere Reinigung in der anschließenden Synthesestufe eingesetzt wird.
Ausbeute: 29,5 g
Dünnschichtchromatogramm (n-BuOH:AcOH:H&sub2;O = 4 : 1:1): Rf = 0,6 (CHCl &sub3;:MeOH:AcOH = 85 : 15 : 5): Rf = 0,2

3. Cinnamoyl-glycin-methylester

Die Kupplung der Zimtsäure (38,0 g) mit dem Glycin-methylester-hydrochlorid in Dimethylformamid wird durch Behandlung mit 52,84 g Dicyclohexylcarbodiimid und 39,24 g 1-Hydroxybenzotriazol, gefolgt von 37,56 ml N-Methylmorpholin, vorgenommen. Das Reaktionsgemisch wird 14 Stunden bei Umgebungstemperatur gerührt, und das gewünschte Produkt wird gewonnen.
Ausbeute: 34,5 g

4. Cinnamoyl-glycin

Das Produkt der vorstehenden Stufe (35, 0 g) werden durch Behandlung mit 7,4 g Natriumhydroxid in Methanol während 1 Stunde bei Umgebungstemperatur einer Verseifungsreaktion unterworfen.
Das gewünschte Produkt wird gewonnen und als solches in der nachfolgenden Stufe verwendet.
Ausbeute: 30,2 g
Dünnschichtchromatogramm (n-BuOH:AcOH:H&sub2;O = 4 : 1:1): Rf = 0,4 (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 85 : 15 : 5): Rf = 0,8

5. Cinnamoyl-glycyl-L-leucyl-L-prolinamid

Das Produkt aus der vorstehenden Stufe (15,0 g) wird mit 24,42 g L-Leucyl-L-prolinamid-trifluoracetat in Dimethylformamid unter Anwendung von 15,05 g Dicyclohexylcarbodiimid und 11,2 g 1-Hydroxybenzotriazol, gefolgt von 7,37 ml N-Methylmorpholin, gekuppelt. Nach etwa 14 Stunden wird das Produkt in Form eines weißen Feststoffes aus dem Reaktionsgemisch gewonnen.
Ausbeute: 5,8 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 85 : 15 : 5): Rf = 0,6
Schmelzpunkt: 107,5-116,5ºC

BEISPIEL 6:

Herstellung von Benzoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L- prolinamid der Formel XI

Man geht so vor, wie oben für die gleichen Produkttypen angegeben ist.

1. Benzoyl-glycin-tert.butylester

Unter Anwendung der vorstehend für die Herstellung des Cinnamoyl-glycin-methylesters beschriebenen allgemeinen Methode werden 10,88 g Glycin-tert.butylester-hydrochlorid in Dimethylformamid (etwa 100 ml) gelöst, das Reaktionsgemisch wird auf 0ºC abgekühlt und anschließend mit 9,04 ml (1 Äquivalent) N-Methylmorpholin behandelt, unmittelbar gefolgt von einer vorgekühlten Lösung von 7,94 g Benzoesäure in etwa 75 ml Ethylacetat, die zuvor durch Behandlung mit 9,04 ml N-Methylmorpholin, gefolgt von 8,4 ml Isobutylchlorformiat, bei -20ºC voraktiviert worden ist.
Der Benzoyl-glycin-tert.butylester wird in Form eines weißen Feststoffes erhalten, der ohne weitere Reinigung in die nächste Stufe eingesetzt wird.
Ausbeute: 8,1 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 85 : 10 : 5): Rf = 0,9

2. Benzoyl-glycin

Das Produkt der vorstehenden Stufe (8,1 g) wird mit 90 ml Trifluoressigsäure 1 Stunde lang bei Umgebungstemperatur behandelt. Nach Verdampfen der Trifluoressigsäure und nach dem Digerieren des Rückstandes mit Ether wird ein Produkt in Form eines weißen Feststoffes erhalten, der ohne weitere Reinigung verwendet wird.
Ausbeute: 5,2 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 85 : 10 : 5): Rf = 0,35
Schmelzpunkt: 181-184ºC

3. Benzoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid

Das Produkt aus der vorstehenden Stufe (2,61 g in Form einer Lösung in Dimethylformamid) wird an 5,5 g L-Phenylalanyl-L-prolinamid-trifluoracetat (in Form einer Lösung in Tetrahydrofuran) nach der Methode über das gemischte Anhydrid gekuppelt. Das erhaltene Produkt liegt in Form eines weißen Feststoffes vor.
Ausbeute: 1,67 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 85 : 10 : 5): Rf = 0,6
Schmelzpunkt: 95-113ºC

BEISPIEL 7:

Herstellung von Phenylacetyl-glycyl-L-phenylalanyl- L-prolinamid der Formel XII

1. Phenylacetyl-glycin-tert. butylester

Indem der vorstehend beschriebenen Methode zur Herstellung des Benzoylglycin-tert.butylesters gefolgt wird, wird eine Lösung von Phenylessigsäure (11,44 g) in Ethylacetat unter Anwendung der Methode mit dem gemischten Anhydrid aktiviert, wobei 11,66 ml N-Methylmorpholin, gefolgt von 10,89 ml Isobutylchlorformiat, bei -20ºC eingesetzt werden, und die aktivierte Säure wird mit dem Glycin-tert.butylester-hydrochlorid (14,04 g) in 150 ml Methylenchlorid, neutralisiert durch Zugabe von 11,66 ml N-Methylmorpholin, gekuppelt.
Das erhaltene Produkt liegt in Form eines Öls vor, das ohne weitere Reinigung in der anschließenden Stufe verwendet wird.

2. Phenylacetyl-glycin

Das Produkt aus der vorstehenden Stufe wird mit 250 ml Trifluoressigsäure 1 Stunde lang bei Umgebungstemperatur behandelt. Die Eindampfung des Reaktionsgemisches und das Digerieren des Rückstandes mit Ether führt zur Ausbildung des gewünschten Produktes, das in Form eines weißen Feststoffes vorliegt.
Ausbeute: 6,8 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 85 : 10 : 5): Rf = 0,25
Schmelzpunkt: 132-135ºC

3. Phenylacetyl-glycin-L-phenylalanyl-L-prolinamid

Indem wie oben beschrieben vorgegangen wird, wird die Kupplung des Phenylacetyl-glycins (4 g in Form einer Lösung in Tetrahydrofuran) mit dem L-Phenylalanyl-L-prolinamid-trifluoracetat (7,87 g in Form einer Lösung in Methylenchlorid) ausgeführt, wobei die Methode mit dem gemischten Anhydrid angewendet wird. Das erhaltene Produkt liegt in Form eines weißen Feststoffes vor.
Ausbeute: 5,05 g
Dünnschichtchromatogramm (CHCl&sub3;:MeOH:AcOH = 85 : 10 : 5): Rf = 0,7
Schmelzpunkt 81-98ºC

BEISPIEL 8:

Herstellung des L-Prolinderivats der Formel XIII

Es wird wie in Beispiel 1 beschrieben vorgegangen, jedoch unter Anwendung von Dimethylprolinamid. Dieses Derivat wird durch Adaptieren der Methode des britischen Patentes 1 523 598 synthetisiert, das das L-Pyroglutamoyl-L-histidyl-L-3,3-dimethylprolinamid betrifft.

BEISPIEL 9:

Pharmakologische Studien:

1/ Irwin-Test:
An männliche Mäuse vom Stamm NMRI werden auf intraperitonealem Wege 0,25 ml/20 g Körpergewicht einer Suspension in 5% Gummi arabikum des Produktes gemäß der Erfindung verabreicht.
Die Kontrolltiere erhalten ausschließlich die Suspension mit 5% Gummi arabikum.
Die Änderungen des Verhaltens, die Symptome der Neurotoxizität, der Pupillendurchmesser und die Rektaltemperatur werden nach dem standardisierten Beobachtungsmuster registriert, gemäß Irwin in Psychopharmacologia, 1968, 13, 222-257.
Diese Beobachtungen werden 15, 30, 60, 120 und 180 Minuten nach der Injektion und 24 Stunden danach vorgenommen.
Die erfindungsgemäßen Produkte wurden bei Dosen von 1024, 512 und 256 mg·kg&supmin;¹ überprüft.
Bei den überprüften Dosen wird weder eine Mortalität noch ein Krampf bei den Tieren festgestellt.
Mit der Verbindung der Formel VI wird eine mäßige Sedierung (1 Maus/3) oder Erregung (1 Maus/3) zwischen 1 und 2 Stunden nach Verabreichung von 1024 mg·kg&supmin;¹ beobachtet, mit einer mäßigen Ptosis (3 Mäuse/3) und einer Hypothermie (2 Mäuse/3).
Bei der Dosis von 512 mg·kg&supmin;¹ führt die Verbindung der Formel VI nur zu einer mäßigen Hypothermie. Bei 256 mg·kg&supmin;¹ tritt gegenüber den Kontrolltieren keine Änderung auf.
2/ Passiver Vermeidungstest
a) - Durch Scopolamin induzierte Amnesie:
Es wird so vorgegangen, wie von Glick und Zimmerberg in Behavioral Biology, 1972, 7 : 245-254, und von Lenegre et al. in Pharmacol.Biochem.Behav. 29(3), 1988, beschrieben wurde.
Die Maus wird in das beleuchtete Abteil eines Behälters mit zwei Abteilen eingebracht. Wenn sie sich gegen das dunkelste Abteil hin bewegt, erhält sie einen elektrischen Schlag von 0,3 mA auf die Pfoten, damit sie zum beleuchteten Abteil zurückkehrt (Versuch 1).
Wird die Maus 24 Stunden danach in den Behälter zurückgebracht (Versuch 2), vermeidet sie das Eintreten in das dunkelste Abteil. Eine intraperitoneale Injektion von 1 mg·kg&supmin;¹ an Scopolamin 30 Minuten vor dem Versuch verringert das Erinnerungsvermögen, wie dies die Reaktionszeit der Maus zum Bewegen gegen das dunkelste Abteil im Versuch 2 zeigt.
Die erfindungsgemaßen Produkte werden bei den folgenden Dosen getestet: 0,25, 1, 4, 8 und 16 mg·kg&supmin;¹ und werden auf intraperitonealem oder auf oralem Weg 60 Minuten vor S1 verabreicht.
Als Bezugsverbindung wird Piracetam verwendet.
Die mit den Verbindungen der Beispiele erhaltenen Ergebnisse zeigen, daß diese Produkte, die auf intraperitonealem oder oralem Wege 60 Minuten vor dem Versuch verabreicht worden sind, keine Änderung der Latenzzeiten für das Bewegen gegen das dunkle Abteil hin oder für das Entweichen aus diesem Abteil während des Versuches 1 hervorrufen.
Das Piracetam ergibt unter den gleichen Versuchsbedingungen keine Auswirkung auf die im Versuch 1 bestimmten beiden Parameter.
Im Versuch 2 stellt man fest, daß das Scopolamin, das 30 Minuten vor dem Versuch 1 verabreicht worden ist, eine Verringerung der Zeit für das Bewegen gegen das dunkle Abteil hin hervorruft.
Das auf intraperitonealem Wege 60 Minuten vor dem Versuch 1 verabreichte Produkt von Beispiel 1 ruft eine antagonistische Wirkung gegenüber den Scopolamineffekten bei Dosen von 1,4 und 16 mg/kg hervor, wobei die Wirkung bei der Dosis 1 mg/kg signifikativ ist.
Im gleichen Versuch ruft das Piracetam einen Antagonismus zu der durch Scopolamin induzierten Amnesie hervor, aber bei einer Dosis von 512 mg/kg, was die vorteilhaften Eigenschaften der erfindungsgemäßen Produkte unter Beweis stellt, die bei einer niedrigeren Dosis aktiv sind.
In gleicher Weise haben mit Verabreichung der erfindungsgemäßen Produkte auf oralem Wege ausgeführte Versuche gezeigt, daß die Produkte einen starken Antagonismus gegenüber der durch Scopolamin induzierten Amnesie hervorrufen, verglichen mit dem bekannten Produkt des Standes der Technik.
Die Produkte der Beispiele 1, 2, 3, 6 und 7 sind in diesem Test bei 2,8 und 32 mg/kg wirksam. Diese Aktivität ist ab einer Dosis von 2 mg/kg signifikativ. Das Interesse an den erfindungsgemäßen Produkten wird durch die Tatsache unterstrichen, daß das Piracetam in diesem Test wirksam ist, aber bei einer deutlich über 2048 mg/kg liegenden Dosis.
b) - Durch Diazepam induzierte Amnesie:
An Mäuse vom Stamm NMRI werden 0,25 ml/20 g Körpergewicht des Produktes von Beispiel 1 (Suspension in 5% Gummi arabikum) oder, als Bezugsverbindung, einer wäßrigen Piracetam-Lösung oder auch Diazepam-Lösung (Suspension mit 5% in Gummi arabikum) verabreicht. Die Kontrolltiere erhalten nur Injektionen des Trägers (Suspension von Gummi arabikum).
Der Test wird wie oben beschrieben ausgeführt, in welchem die Amnesie durch Injektion von Scopolamin induziert wird, jedoch unter Ersatz dieser letztgenannten Verbindung durch Diazepam. Eine intraperitoneale Injektion von Diazepam 30 Minuten vor dem Versuch 1 mit einer Dosis von 1 mg·kg&supmin;¹ vermindert in signifikativer Weise das Erinnerungsvermögen, wie die verringerte Reaktionszeit bei der Maus zum Traversieren des dunklen Abteils im Versuch 2 zeigt.
Mit den Produkten gemäß der Erfindung wird eine deutliche Verringerung der Amnesie bei einer schwachen Dosis des Produktes festgestellt.
Ebenso stellt man fest, daß das Produkt von Beispiel 1, überprüft bei den Dosen von 0,25, 1 und 4 mg·kg&supmin;¹ und 60 Minuten vor dem Versuch 1 verabreicht, einen Dosis-abhängigen antagonistischen Effekt gegenüber Diazepam ausübt.
Dieser Effekt tritt statistisch signifikativ bei Verabreichung von 4 mg·kg&supmin;¹ des Produktes auf.
Die Amnesie wird durch Mittel mit nootroper Wirkung wie Piracetam oder dessen Derivate verringert, wobei das Piracetam in diesen Versuchen aber mit einer Dosis von 512 mg·kg&supmin;¹ auf intraperitonealem Wege 60 Minuten vor dem Versuch 1 eingesetzt wurde.
Diese Beispiele zeigen, daß die erfindungsgemäßen Produkte bei niedriger Dosis eine sowohl durch Scopolamin als auch durch Diazepam induzierte Amnesie korrigieren, wobei unter ähnlichen Versuchsbedingungen gearbeitet wird.
3/ Barbiturschlaf-Antagonismus Eine Stunde vor der intraperitonealen Verabreichung von Barbital mit einer Dosis von 50 mg/kg wird an Mäuse vom Stamm NMRI ein erfindungsgemäßes Produkt auf oralem Wege mit den Dosen von 2,8 und 32 mg·kg&supmin;¹ verabreicht.
Das Produkt von Beispiel 1 verringert in signifikativer Weise bei den Dosen von 2 und 8 mg/kg die Schlafdauer gegenüber einer Kontrollgruppe.
4/ Potenzierung der Wirkungen von L-Dopa Eine Stunde vor der intraperitonealen Verabreichung von 150 mg/kg L-Dopa wird an Mäuse vom Stamm NMRI ein erfindungsgemäßes Produkt mit den Dosen 2,8 und 32mg/kg oral verabreicht. Diese L-Dopa-Dosis ruft bei der Kontrollgruppe keine Verhaltensänderung hervor. Bei den Dosen 8 und 32 mg/kg führt das Produkt von Beispiel 1 zum Auftreten von Verhaltensänderungen bei den behandelten Tieren, wie rasches Laufen und Springen.
Die Gesamtheit dieser Ergebnisse beweist die vorteilhaften Eigenschaften der erfindungsgemäßen Produkte, im spezielleren als Wirkstoffe von Medikamenten mit nootropem Effekt.
5/ Überprüfung der Adenohypophysenhormon-Sekretion Männliche Ratten erhalten 2 mg/kg, 8 mg/kg oder 32 mg/kg des Produktes von Beispiel 1 auf intraperitonealem Wege in Suspension in Gummi arabikum (2,5%) und 32 mg/kg der Produkte der Beispiele 2 und 3 auf intraperitonealem Wege verabreicht. Die Ratten werden 30 Minuten danach durch Dekapitierung getötet und ein aliquoter Teil der Plasmaproben wird durch Gefrieren (-20ºC) bis zur Analyse konserviert. Vor dem Versuch werden die Ratten an die Manipulation gewöhnt, um jeglichen Stresseffekt zu vermeiden.
Prolactin, GH und TSH werden durch radioimmunologische Methoden bestimmt.
Das Produkt von Beispiel 1 erhöht geringfügig, aber in Abhängigkeit von der Dose, den Prolactingehalt und erhöht in sehr geringem Ausmaß den TSH-Gehalt bei 8 mg/kg. Die Produkte der Beispiele 2 und 3 haben bei 32 mg/kg keinerlei Aktivität auf die Gehalte an Prolactin, TSH und GH.

Claims

1. L-Prolin-Derivate, dadurch gekennzeichnet, daß sie der Formel I:

entsprechen, worin

- R&sub1; eine Gruppe der Formel II

darstellt, worin R einen Carbonylrest CO-, einen Acylrest y-CO- oder einen Oxyacylrest O-y-CO- bedeutet, worin Y eine Alkyl- oder Alkenylkette mit insbesondere 1 bis 4 Kohlenstoffatomen bedeutet, Z ein oder mehrere Wasserstoffatome oder einen oder mehrere Substituenten in den Stellungen ortho und/oder ortho' und/oder meta und/oder meta' und/oder para, ausgewählt unter Halogenatomen, einer CF&sub3;-Gruppe, den Alkyl- oder Alkoxyresten mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und, bei zwei benachbarten Substituenten, einer Alkylendioxygruppe, darstellt, wobei die Alkylengruppe 1 bis 3 Kohlenstoffatome umfaßt,

- R&sub2; einen Rest NH&sub2; oder OH darstellt, oder funktionelle Derivate dieser Reste,

- A&sub1; und A&sub2;, die gleich oder voneinander verschieden sind, Aminosäurereste darstellen und

- B&sub1; und B&sub2;, die gleich oder voneinander verschieden sind, ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeuten,

und die pharmakologisch annehmbaren Salze dieser Derivate, mit der Maßgabe, daß einerseits A&sub1; von einem Phenylalanylrest verschieden ist, wenn B&sub1; und B&sub2; ein Wasserstoffatom bedeuten, R&sub2; eine Gruppe -OH darstellt, R&sub1; einen Benzoylrest bedeutet und A&sub2; einen Alanylrest bezeichnet, und anderseits A&sub2; von einem Prolinrest verschieden ist, wenn R eine Gruppe -CO oder -YCO darstellt, worin Y eine Alkylgruppe bedeutet, B&sub1; und B&sub2; ein Wasserstoffatom bezeichnen und R&sub2; eine -OH-Gruppe oder -NH&sub2;-Gruppe oder ihre funktionellen Derivate bezeichnet.

2. Derivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Z in der Formel II ein Wasserstoffatom bedeutet.

3. Derivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Z in der Formel II ein unter Chlor oder Fluor ausgewähltes Halogenatom, eine CF&sub3;-Gruppe, einen unter Methoxy oder Ethoxy ausgewählten Alkoxyrest und, für zwei benachbarte Positionen, einen unter 3,4-Methylendioxy oder 3,4-Ethylendioxy ausgewählten Alkylendioxyrest bedeutet.

4. Derivate nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß R in Formel II unter den Gruppen CO-, CH&sub2;-CO-, CH&sub2; -CH&sub2;-CO-, CH&sub2; -CH&sub2;-C H&sub2;-CO-, CH=CH-CO- oder O-CH&sub2;-CO- ausgewählt ist.

5. Derivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R&sub1; eine gegebenenfalls substituierte Cinnamoylgruppe bedeutet.

6. Derivate nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß A&sub1; und A&sub2; natürliche Aminosäuren sind.

7. Derivate nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß A&sub1; einen Glycylrest bedeutet.

8. Derivate nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß A&sub1; unter den L-Alanyl- und L-Valylresten ausgewählt ist.

9. Derivate nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß A&sub1; unter den Resten L-Glycyl, L-Alanyl und L-Valyl ausgewählt ist und A&sub2; unter den Resten Glycyl, L-Phenylalanyl, L-Histidyl, L-Leucyl, L-Valyl und L-Alanyl ausgewählt ist.

10. L-Prolin-Derivate, ausgewählt unter Cinnamoyl-glycyl-L- -phenylalanyl-L-prolinamid, 4-Fluorcinnamoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid, 3,4-Methylendioxycinnamoyl-glycyl-L-prolinamid, 3,4,5-Trimethoxycinnamoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid, Cinnamoyl-glycyl-L-leucyl-L-prolinamid, Benzoyl-glycyl-L- -phenylalanyl-L-prolinamid, Phenylacetyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-prolinamid und Cinnamoyl-glycyl-L-phenylalanyl-L-3,3'-dimethyl-prolinamid.

11. Pharmazeutische Zusammensetzung, dadurch gekennzeichnet, daß sie eine wirksame Menge wenigstens eines L-Prolinderivats nach einem der Ansprüche 1 bis 10 im Gemisch mit einem pharmazeutischen Träger enthält.

12. Zusammensetzung nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß sie auf oralem, rektalem oder nasalem Weg verabreichbar oder injizierbar ist.

13. Zusammensetzung nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß es sich um Tabletten, Kapseln, Tropfen, Pillen oder Liposome handelt und daß sie 1 bis 100 mg Wirkstoff je Dosiseinheit, vorzugsweise 2,5 bis 50 mg enthält.

14. Zusammensetzung nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß es sich um injizierbare Lösungen handelt, welche Lösungen vorteilhaft je Dosiseinheit 1 bis 50 mg L-Prolinderivat, vorzugsweise 0,5 bis 50 mg enthalten.

15. Biologisches Reaktionsmittel, dadurch gekennzeichnet, daß es, ausgehend von einem L-Prolinderivat nach einem der Ansprüche 1 bis 10, erarbeitet ist.

16. Verfahren zur Herstellung von L-Prolinderivaten nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man ein Derivat der Formel III:

mit einem Derivat der Formel IV

R&sub1;-A&sub1; (IV),

worin B&sub1;, B&sub2;, A&sub1;, A&sub2;, R&sub1; und R&sub2; wie in Anspruch 1 definiert sind, miteinander reagieren läßt.

17. Verfahren nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß man zur Gewinnung des Derivats der Formel III ein Prolinderivat der Formel V:

und eine Aminosäure A&sub2; einsetzt, wobei B&sub1;, B&sub2;&sub1; R&sub2; und A&sub2; wie in Anspruch 1 definiert sind.

18. Verfahren nach Anspruch 16 oder 17, dadurch gekennzeichnet, daß das Derivat R&sub1;-A&sub1; der Formel IV durch Kondensation von reaktionsfähigen Derivaten von R&sub1; und von A&sub1; erhalten wird, wobei die Carboxylfunktion von A&sub1; durch eine Schutzgruppe blockiert ist, nach welcher Kondensation eine Verseifung mit Hilfe einer starken Base vorgenommen wird.