DE2522087A1 - Biologische analyse - Google Patents
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Description
Paiksiraße 13
Claims (35)
- - 22 - 252208Patentansprüche1 J Verfahren zum Analysieren einer biologischen Fluidprobe auf Ak, Ag oder Ak:Ag-Komplexe, dadurch gekennzeichnet, daß der Probe vor oder nach der Zugabe von anderen Reagenzien eine Lösung von RF oder C1q zugesetzt wird, um zwischen diesen Stoffen und den vorhandenen Ak:Ag-Komplexen eine Bindung zu bewirken.
- 2. Verfahren zum Bestimmen eines Ak oder Ag in einer biologischen Fluidprobe,dadurch gekennzeichnet,(a) daß der Probe ein Überschuß eines gegenüber dem in der Probe befindlichen Ak spezifischen Ag oder eines gegenüber dem in der Probe befindlichen Ag spezifischen Ak zugesetzt wird, um einen Ak:Ag-Komplex zu bilden,(b) daß dem beim Schritt (a) gebildeten Gemisch eine bekannte Menge einer Lösung von RF oder C1q zugesetzt wird, die einen Überschuß gegenüber derjenigen Menge darstellt, die zum Binden des gesamten vorhandenen Ak:Ag-Komplexes erforderlich ist, wobei das in dem Gemisch gebildete RF/Ak:Ag oder C1q/Ak:Ag agglomeriert,(c) daß das agglomerierte RF/Ak;Ag oder C1q/Ak: Ag von dem Gemisch abgetrennt wird und(d) daß die Menge des RF oder C1q, die nach Ausführen des Schrittes (c) in dem Gemisch verbleibt oder die durch den Schritt (c) von dem Gemisch getrennt wurde, gemessen wird und aus dem erhaltenen Meßergebnis die in der ursprünglichen Probe vorhandene Menge des Ak oder Ag berechnet wird.509850/0699
- 3. Verfahren nach Anspruch 2,
dadurch gekennzeichnet, daß zur Durchführung des Schrittes (d)(i) dem nach dem Schritt (c) übrigbleibenden Gemisch eine bekannte Menge eines Komplexes Ak':Ag' zugesetzt wird, die einen Überschuß gegenüber derjenigen Menge darstellt, die zum Binden des in dem Gemisch befindlichen gesamten RF oder C1q erforderlich ist, wobei der Komplex Ak1:Ag' eine Identifizierungskennung trägt, und(ii) die Menge des Ak1:Ag1 gemessen wird, die ohne Bindung an RF oder C1q in dem Gemisch frei vorhanden ist. - 4. Verfahren nach Anspruch 3,
dadurch gekennzeichnet, daß als Identifizierungskennung ein Enzym oder Koenzym gewählt wird, derart, daß die Aktivität des Enzyms oder Koenzyms nach erfolgter Bindung des Ak1:Ag'-Komplexes mit RF oder C1q gehemmt ist, und daß die Menge des freien AkMAg1 durch Messen der Enzym- oder Koenzymaktivität des Gemisches bestimmt wird, ohne daß vorher das RF/Ak'rAg1 oder Ciq/AkMAg' entfernt wird. - 5. Verfahren nach Anspruch 3 oder 4, dadurch gekennzeichnet, daß das Ak'rAg1 als Identifizierungskennung Katalyse oder Amylase trägt,
- 6. Verfahren nach Anspruch 3t
dadurch gekennzeichnet, daß das RF/Ak'tAg« oder C1q/Ak':Ag! aus dem Gemisch entfernt wird und anschließend die in dem Gemisch verbleibende Menge an Ak1:Ag· gemessen wird.509850/0699 - 7. Verfahren zum Bestimmen eines Ak:Ag-Komplexes in einer biologischen Fluidprobe,dadurch gekennzeichnet,(a) daß der Probe eine bekannte Menge einer Lösung von RF oder C1q zugesetzt wird, die einen Überschuß gegenüber derjenigen Menge darstellt, die zum Binden des gesamten in der Probe befindlichen Ak:Ag-Komplexes benötigt wird, um RF/Ak:Ag oder C1q/Ak:Ag zu bilden, wobei das in dem Gemisch gebildete RF/Ak:Ag oder Ciq/AkiAg agglomeriert,(b) daß von dem Gemisch das agglomerierte RF/Ak:Ag oder C1q/Ak:Ag entfernt wird und(c) daß die Menge von RF oder C1q, die nach dem Schritt (b) in dem Gemisch verbleibt oder die durch den Schritt (b) von dem Gemisch getrennt wird, gemessen wird und aus diesem Meßergebnis die in der ursprünglichen Probe vorhandene Menge des Ak:Ag-Komplexes berechnet wird,
- 8. Verfahren nach Anspruch 7,
dadurch gekennzeichnet, daß zum Durchführen des Schrittes (c)(i) dem nach dem Schritt (b) verbleibenden Gemisch eine bekannte Menge eines Komplexes Ak1:Ag1 zugesetzt wird, die einen Überschuß gegenüber derjenigen Menge darstellt, die zum Binden des gesamten in dem Gemisch befindlichen RF oder C1q benötigt wird, wobei der Komplex Ak1:Ag» eine Identifizierungskennung trägt, und (ii) die Menge des Ak1:Ag» gemessen wird, die ungebunden an RF oder C1q in dem Gemisch frei verbleibt.509850/0699 - 9. Verfahren nach Anspruch 8,
dadurch gekennzeichnet, daß als Identifizierungskennung ein Enzym oder Koenzym ausgewählt wird, derart^daß die Aktivität des Enzyms oder Koenzyms nach erfolgter Bindung des Ak': Ag •-Komplexes mit RF oder C1q gehemmt ist, und daß die Menge des freien Ak1 :Ag* durch Messen der Enzym- oder Koenzymaktivität des Gemisches bestimmt wird, ohne daß zuvor das RF/Ak'tAg* oder C1q/Ak':Ag· entfernt wird. - 10· Verfahren nach Anspruch 8 oder 9, dadurch gekennzeichnet, daß das Ak1 :Ag* als Identifizierungskennung Katalyse oder Amylase trägt.
- 11. Verfahren nach Anspruch 8,
dadurch gekennzeichnet, daß das RF/Ak':Ag* oder Ciq/Ak'rAg1 aus dem Gemisch entfernt wird und daß danach die in dem Gemisch verbleibende Menge an Ak1 :Ag* gemessen wird. - 12. Verfahren zum Bestimmen eines Ak oder Ag in einer biologischen Fluidprobe,dadurch gekennzeichnet,(a) daß der Probe ein Überschuß eines gegenüber dem in der Probe befindlichen Ak spezifischen Ag* oder eines gegenüber dem in der Probe befindlichen Ag spezifischen Ak1 zugesetzt wird, um einen Ak :Ag* -Komplex oder einen Ak* :Ag-Komplex zu bilden, wobei Ak* oder Ag* eine Identifizierungskennung tragen,(b) daß dem im Schritt (a) gebildeten Gemisch eine Lösung von RF oder C1q in einer solchen Menge zugesetzt wird, die unzureichend ist, um den gesamten Ak: Ag '-Komplex oder den gesamten Ak* :Ag-Komplex in dem Gemisch zu binden, und509850/0699(c) daß die Menge an Ak1 oder Ag1, die frei in der Probe ist oder die an RF oder C1q gebunden ist, gemessen wird und aus diesem Meßergebnis die in der ursprünglichen Probe vorhandene Menge von Ak oder Ag berechnet wird.
- 13· Verfahren nach Anspruch 12,
dadurch gekennzeichnet, daß als Identifizienmgskennung ein Enzym oder Koenzym gewählt wird, derart, daß die Aktivität des Enzyms oder Koenzyms nach erfolgter Bindung des Ak* :Ag-Komplexes oder des Ak:Ag·-Komplexes an RF oder C1q gehemmt ist, und daß die Menge des freien Ak1 oder Ag1 durch Messen der Enzym- oder Koenzymaktivität in dem Gemisch bestimmt wird, ohne daß zuvor das mit RF oder C1q gebundene Ak':Ag oder Ak:Ag' entfernt wird. - 14. Verfahren nach Anspruch 12 oder 13, dadurch gekennzeichnet, daß das Ak* oder Ag* als Identifizierungskennung Kataläse oder Amylase trägt.
- 15. Verfahren nach Anspruch 12,
dadurch gekennzeichnet, daß das mit RF oder C1q gebundene Ak':Ag oder Ak:Ag1 aus dem Gemisch entfernt wird und daß danach die in dem Gemisch verbleibende Menge von Ak1 oder Ag1 gemessen wird.503850/0899 - 16. Verfahren zum Bestimmen eines Ak:Ag-Komplexes in einer biologischen Probe,dadurch gekennzeichnet,(a) daß der Probe eine bekannte Menge einesAk1:Ag'-Komplexes, der eine Identifizierungskennung trägt, und eine Lösung von RF oder C1q in einer solchen Menge zugesetzt werden, die unzureichend ist, um die Gesamtmenge an Ak: Ag- und Ak1: Ag'-Komplexen in dem Gemisch zu binden, und(b) daß die Menge des Ak':Ag', die in dem Gemisch frei ist oder die an RF oder C1q gebunden ist, gemessen wird und aus diesem Meßergebnis die in der ursprünglichen Probe vorhandene Menge an Ak:Ag berechnet wird.
- 17. Verfahren nach Anspruch 16,
dadurch gekennzeichnet, daß als Identifizierungskennung ein Enzym oder Koenzym gewählt wird, derart, daß die Aktivität des Enzyms oder Koenzyms nach erfolgter Bindung des Ak1:Ag'-Komplexes an RF oder C1q gehemmt ist, und daß die Menge des freien Ak':Ag' durch Messen der Enzym- oder Koenzymaktivität des Gemisches bestimmt wird, ohne daß zuvor das an RF oder C1q gebundene Ak':Ag oder Ak:Ag' entfernt wird. - 18. Verfahren nach Anspruch 16 oder 17, dadurch gekennzeichnet, daß das Ak':Ag' als Identifizierungskennung Katalyse oder Amylase trägt.
- 19. Verfahren nach Anspruch 16,
dadurch gekennzeichnet, daß das RF/Ak1:Ag' oder C1q/Ak':Ag' aus dem Gemisch entfernt wird und daß anschließend das in dem Gemisch verbleibende Ak1:Ag' gemessen wird.509850/0699 - 20. Verfahren zum Bestimmen eines Ak oder Ag in einer "biologischen Fluidprobe,dadurch gekennzeichnet,(a) daß der Probe ein in bezug auf den in der Probe befindlichen Ak spezifisches Ag oder ein in bezug auf das in der Probe befindliche Ag spezifischer Ak zugesetzt wird, um einen Ak:Ag-Komplex zu bilden,(b) daß dem sich beim Schritt (a) ergebenden Gemisch eine bekannte, eine Identifizierungskennung tragende Menge des zu bestimmenden Ak oder Ag zugesetzt wird,(c) daß dem beim Schritt (b) gebildeten Gemisch eine Lösung von RF oder C1q in einer Menge zugesetzt wird, die wenigstens ausreicht, um den gesamten Ak:Ag-Komplex in dem Gemisch zu binden, und(d) daß die Menge des kenntlich gemachten Ak oder Ag, die frei in dem Gemisch verbleibt oder die an RF oder C1q gebunden ist, gemessen wird.
- 21. Verfahren nach Anspruch 20,
dadurch gekennzeichnet, daß als Identifizierungskennung ein Enzym oder Koenzym gewählt wird, derart daß die Aktivität des Enzyms oder Koenzyms nach erfolgter Bindung des kenntlich gemachten Ak- oder Ag-Komplexes mit RF oder C1q gehemmt ist, und daß die Menge des freien, kenntlich gemachten Ak oder Ag durch Messen der Enzym- oder Koenzymaktivität in dem Gemisch bestimmt wird, ohne daß zuvor das mit RF oder C1q gebundene Ak:Ag entfernt wird. - 22. Verfahren nach Anspruch 21,
dadurch gekennzeichnet, daß das Ak1 oder Ag1 als Identifizierungskennung Katalase oder Amylase trägt.509850/0699 - 23. Verfahren nach Anspruch 20,
dadurch gekennzeichnet, daß das mit RF oder C1q gebundene Ak:Ag aus dem Gemisch entfernt wird und daß danach die Menge des in dem Gemisch verbleibenden, kenntlich gemachten Ag oder Ak gemessen wird· - 24. Verfahren nach Anspruch 20 oder 21, dadurch gekennzeichnet, daß bei der Morphinbestimmung das im Schritt (b) zugesetzte, kenntlich gemachte Morphin als Identifizierungskennung das Enzym Amylase trägt.
- 25. Verfahren zum Bestimmen der Anwesenheit oder Abwesenheit eines Ak:Ag-Komplexes in einer biologischen Fluidprobe,dadurch gekennzeichnet, daß der Probe eine Lösung von RF öder C1q und ein Material zugesetzt wird, das bei Berührung mit RF oder C1q zur Agglutination veranlaßt wird, und daß festgestellt wird, ob eine Agglutination des Materials auftritt.
- 26. Verfahren nach Anspruch 25,
dadurch gekennzeichnet, daß das Material ein Immunglobulin enthält, mit dem inerte Trägerteilchen überzogen sind. - 27. Verfahren nach Anspruch 26,
dadurch gekennzeichnet, daß die Teilchen Polystyrol enthalten. - 28. Verfahren zum Bestimmen der Anwesenheit eines besonderen Ak oder Ag in einer biologischen Fluidprobe, dadurch gekennzeichnet, daß der Probe ein in bezug auf den besonderen, zu bestimmenden Ak spezifisches Ag oder ein in bezug auf das509850/0699besondere, zu bestimmende Ag spezifischer Ak zugesetzt wird, um mit irgendeinem der besonderen vorhandenen Ak oder Ag einen Ak:Ag-Komplex zu bilden, und daß die Gegenwart oder Abwesenheit eines solchen Komplexes durch ein Verfahren nach einem der Ansprüche 25 bis 27 festgestellt wird.
- 29. Verfahren zur Immunprüfung einer biologischen Fluidprobe auf Ak, Ag oder Ak:Ag-Komplexe, dadurch gekennzeichnet,(a) daß der Probe ein eine Enzymkennung tragender Ak, ein eine Enzymkennung tragendes Ag oder ein eine Enzymkennung tragender Ak:Ag-Komplex zugesetzt wird,(b) daß eine Lösung von RF oder C1q zugesetzt wird, um mit irgendeinem vorhandenen Ak:Ag-Komplex eine Bindung einzugehen, und(c) daß zur Prüfung der Probe' der Hemmungseffekt von RF oder C1q auf die Enzymaktivität irgendeines mit RF oder C1q gebundenen, kenntlich gemachten Ak:Ag-Komplexes verwendet wird.
- 30. Lösung von RF oder C1q,
dadurch gekennzeichnet, daß das RF oder C1q eine Identifizierungskennung trägt. - 31. Lösung nach Anspruch 30,
dadurch gekennzeichnet, daß es sich bei der Identifizierungskennung um ein radioaktives Atom, ein Enzym, ein Koenzym, ein Enzyminhibitor oder eine Fluoreszenzgruppe handelt. - 32. Verfahren zur kontinuierlichen Durchflußanalyse biologischer Fluidproben,dadurch gekennzeichnet, daß den Proben eine Lösung von RF oder C1q zugesetzt509850/0699
- 33. Verfahren zur Analyse einer biologischen Fluidprobe, im wesentlichen wie in einem der Beispiele 1 bis 3 und 5 beschrieben.
- 34. Lösung aus kenntlich gemachtem RF oder C1q, im wesentlichen wie im Beispiel 6 beschrieben.
- 35. Verfahren zur kontinuierlichen Durchflußanalyse, im wesentlichen wie im Beispiel 4 beschrieben.509850/0699
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