DE2030402C3

DE2030402C3 -

Info

Publication number: DE2030402C3
Application number: DE2030402A
Authority: DE
Inventors: Barry Edward Amersham Ayres; Martin Christopher Chalfont St. Peter Buckinghamshire Cook; Benjamin Chalfont St. Peter Buckinghamshire Davis; Gordon Ian Chalfont St. Peter Gregory; Christopher Earle Newall; Derek Roger Bracknell Berkshire Pearce; Gordon Hanley Wembley Middlesex Phillips; Niall Galbraith Weir
Original assignee: Glaxo Laboratories Ltd
Current assignee: Glaxo Laboratories Ltd
Priority date: 1969-06-20
Filing date: 1970-06-19
Publication date: 1975-12-11
Also published as: BE752165A; ZA703861B; FR2052999A1; JPS5140135B1; DK129390C; NL7009002A; NL169480B; FR2052998B1; NO133716B; FR2052998A1; AT315375B; PH11156A; CH578016A5; NL169480C; SE401512B; DK129390B; IL34713A0; IE35203B1; ATA710872A; GB1317184A

Description

wobei R eine geradkettige oder verzweigte Alkanoylgruppe, die 2 bis 4 Kohlenstoffatome enthält und die gewünschtenfalls durch eine Carboxylgruppe substituiert sein kann, oder eine Benzoylgruppe bedeutet.

2. 21-Acetoxy-3ij-hydroxy-5a-pregnan-l 1,20-dion.

3. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel II gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der Formel III

COCH₃
O I

(IH)

R¹

wobei R¹ eine Hydroxy- oder geschützte Hydroxygruppe bedeutet mit einem Bleitetraacylat umgesetzt wird und wenn R¹ eine geschützte Hydroxygruppe bedeutet, man anschließend die Umwandlung dieser Gruppe in eine Hydroxygruppe bewirkt.

4. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel II gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel VI

COCH₇OR

(VI)

wobei R die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung besitzt, reduziert wird.

5. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel II gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel V

COCH₂X

(V)

Salz der Carbonsäure der Formel RCO₂H (wobei R die in Anspruch I angegebene Bedeutung besitzt), umgesetzt wird.

6. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel II gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel IV

COCH₁OH

(IV)

R²

wobei R² eine geschützte Hydroxygruppe bedeutet, mit einem Acylierungsmittel umgesetzt wird und die Schutzgruppe R² in eine 3u-Hydroxygruppe umgewandelt wird.

Die vorliegende Erfindung betrifft 3a-Hydroxy-21-hydroxy-5«-pregnan-ll,20-dion-21-ester, die in pharmazeutischen Zusammenseizungen mit anästhetischer Wirksamkeit, und insbesondere wäßrigen Präparationen, die zur intravenösen Injizierung geeignet

sind, verwendet werden können, sowie Verfahren zu ihrer Herstellung.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen entsprechen der allgemeinen Formel

CH₂OR

HO

wobei R eine geradkettige oder verzweigte Alkanoylgruppe, die 2 bis 4 Kohlenstoffatome enthält und gewünschtenfalls durch eine Carboxylgruppe substituiert sein kann, oder eine Benzoylgruppe bedeutet. Die bevorzugten Verbindungen der Formel II, die als löslichmachende Mittel der pharmazeutischer Zusammensetzungen verwendet werden, sind jene in denen die 21-Acyloxygruppe eine 21-Acetoxy-21-Propionyloxy-, 21-Isobutyryloxy- oder 21-Benzoyloxygruppe ist.

Die 21-Acyloxyverbindungen der Formel II könnei durch das übliche Verfahren hergestellt werden. Ein« vorteilhafte Arbeitsweise besteht darin, daß man Verbindung der Formel III

COCH₃

(ΠΙ)

HO H R¹ H

wobei X ein Halogenatom bedeutet mit einem wobei R¹ eine Hydroxy- oder geschützte Hydroxy

gruppe bedeutet, mit einem Bleitetraacylat umsetzt und wenn R¹ eine geschützte Hydroxygruppe bedeutet, anschließend die Umwandlung dieser Gruppe in eine Hydroxygruppe bewirkt. Die Schutzgruppe R¹ kann z. B. ein Nitrat, eine Trimethylsilyloxy- oder Trichloräthoxycarbonyloxygruppe sein. Die Umsetzung wird vorzugsweise in Anwesenheit einer Lewissäure durchgeführt. Das Schützen der 3a-Hydroxygruppe der Verbindung der Formel III ist jedoch vor der Acyloxylierungsreaktion nicht notwendig.

Das verwendete Bleitetraacylat kann z. B. Bleitetraacetat sein. Die Lewissäure kann z. B. Bortrifluorid sein, das bequemerweise in Form des Ätherats verwendet wird. Es wurde gefunden, daß z. B. die Anwesenheit von Bortrifluorid die Reaktionsgeschwindigkeit verbessert und niedrige Reaktionstemperaturen ermöglicht, so daß in vielen Fällen die Reaktion zufriedenstellend bei Raumtemperatur, d. h. in Abwesenheit von angewandter Wärme, verläuft.

Die durch dieses Verfahren erzielte Ausbeute ist oft besser als jene, die bei einer erhöhten Temperatur in Abwesenheit von Bortrifluorid erzielt wird und die Tatsache, daß die Reaktionsgeschwindigkeit schneller ist und man somit öfter niedrigere Temperaturen anwenden kann, bedeutet, daß dieses Verfahren wirtschaftliche Vorteile im großen Maßstab aufweist. Die Möglichkeit, bei niedrigeren Temperaturen arbeiten zu können, bedeutet auch, daß die Wahrscheinlichkeit, daß unerwünschte Nebenreaktionen auftreten, geringer ist.

Die Acyloxylierung von Verbindungen der Formel III kann in einem Lösungsmittelmedium durchgeführt werden, das eine Mischung eines Kohlenwasserstofflösungsmittels und eines Alkohols darstellt. Geeignete Kohlenwasserstofflösungsmittel sind z. B. Benzol oder Toluol, und der Alkohol kann z. B. Methanol sein. Vorteilhafterweise umfaßt das Lösungsmittel eine Mischung von Benzol und Methanol im Verhältnis von 19:1.

Die Acyloxylierung ist besonders geeignet für die Acetoxylierung unter Verwendung von Bleitetraacetat, jedoch können natürlich andere Bleiacylate, z. B. Bleitelrapropionat, verwendet werden, bei der Bildung der entsprechenden 21 -Propionyloxyverbindung.

Die 3«-Trimethylsilyloxyverbindungen der Formel III (R¹ stellt eine Trimethylsilyloxygruppe dar) können z. B. hergestellt werden durch Reaktion der Ausgangs-3«-hydroxy-verbindung der Formel III (wobei R¹ eine Hydroxygruppe bedeutet), mit einem Trimethylsilylhalogenid, z. B. Trimethylchlorsilan oder Hexamethyldisilazan in Anwesenheit einer tertiären Base, z. B. Pyridin, und gewünschtenfalls in Anwesenheit eines Lösungsmittels, z. B. eines halogenieren Kohlenwasserstoffs, wie Methylenchlorid oder Tetrahydrofuran. Die Reaktion kann bequemerweise bei Raumtemperatur oder gewünschtenfalls bei niedrigeren Temperaturen, z. B. O⁰C, durchgeführt werden. Die Trimethylsilyloxyschutzgruppe wird im allgemeinen während der Acyloxylierung automatisch entfernt.

Die 3(i-Trichloräthoxycarbonyloxyverbindung der Formel III kann hergestellt werden durch Umsetzen der Ausgangs-3a-hydroxyverbindung mit einem Alkylihlorameisensäureester, z. B. Chlorameisensäuretrichloräthylester, vorzugsweise in Anwesenheit eines ■iüurebindenden Mittels, z. B. einem tertiären Amin. wie Pyridin, geeigneterweise in einem Lösungsmittel, wie Dioxan oder Tetrahydrofuran. Die Trichloräthoxycarbonylschutzgruppe kann anschließend durch Reduktion, z. B. unter Verwendung eines Metall/Säure-Systems, wie Zink und Essigsäure, entfernt werden.

Das 3u-Nitrat der Formel III kann hergestellt werden durch Umsetzen der Ausgangs-3u-hydroxyverbindung mit rauchender Salpetersäure und Essigsäureanhydrid, vorzugsweise in Anwesenheit eines Lösungsmittels, z. B. Chloroform. Die Nitratschutzgruppe kann anschließend durch Reduktion, ζ. Β

unter Verwendung eines Metall/Säure-Systems, wie Zink und Essigsäure, oder durch katalytische Hydrierung unter Verwendung von z. B. Palladium auf Aktivkohle als Katalysator, entfernt werden.

Eine andere Verfahrensweise zur Herstellung der erfindungsgemäßen 21-Acyloxyverbindungen der Formel II besteht darin, daß man ein 21-Acyloxy-5a-pregnan-3,11,20-trion der Formel

COCH₇OR

(VI)

wobei R die oben angegebene Bedeutung besitzt, reduziert. Die Reduktion kann z. B. unter Verwendung einer enzymatischen Methode, wie beispielsweise durch Reduktion mit Brewershefe (Saccharomyces cerevisiae) durchgeführt werden. Dieses Verfahren ist geeignet zur Herstellung von 21-Alkanoyloxyverbindungen, wie der 21-Acetoxyverbindung.

Die Verbindungen der Formel II können auch dadurch hergestellt werden, daß eine Verbindung der Formel V

COCH₂X
O

HO

ι wobei X ein Halogenatom bedeutet, mit einem Salz der Carbonsäure der Formel RCO₂H (wobei R die oben angegebene Bedeutung besitzt), umgesetzt wird.

Man verwendet vorteilhaft die entsprechenden 2I-Chlor-, 21-Brom- oder 21-Jodverbindungen. Es ist bevorzugt, über das 21-Bromzwischenprodukt vorzugehen, das aus 5a-Pregnan-3a-ol-11,20-dion hergestellt werden kann. Die Bromierung wird z. B. unter Verwendung von molekularem Brom in einem Lösungsmittel, wie Methanol oder Äthanol, vorteilhafterweise bei einer Temperatur von -10 bis +30⁰C durchgeführt. Die Reaktion wird vorzugsweise in Anwesenheit eines Katalysators, wie Acetylchlorid oder Bromwasserstoff, in Essigsäure durchgeführt. Die 21-Halogenverbindung kann dann in die 21-Acyloxy verbindung durch Reaktion mit dem Salz der entsprechenden Carbonsäure, wie dem Alkalimetallsalz, z. B. dem Kaliumsalz oder einem tertiären Aminsalz, geeigneterweise N-Melhylmorpholin oder N-Äthylpiperidin, oder einem Trialkylammoniumsalz, z. B. dem Triäthylammoniumsalz, überführt werden. Die Reaktion wird vorzugsweise in einem Lösungsmittel, 2:. B.

aceton oder Methanol, vorteilhafterweise unter waserfreien Bedingungen durchgeführt.

Eine alternative Verfahrensweise, die besonders geeignet ist zur Herstellung von Verbindungen der -ormel II, in denen R eine andere Gruppe als die \cetylgruppe bedeutet, besteht darin, daß man eine Verbindung der Formel IV

COCH.OH

R²

IO

(IV)

wobei R² eine geschützte Hydroxygruppe darstellt, acyliert und die Schutzgruppe R₂ in der 3u-Hydroxygruppe des gebildeten 21-Acyloxyderivates der Verbindung der Formel IV abspaltet. Die Verbindung der Formel IV wird bequemerweise durch Deacylierung eines 21-Acyloxyderivats der Verbindung der Formel IV, z. B. einem 21-Acetoxyderivat davon, hergestellt und schafft ein Verfahren zur Umwandlung einer Verbindung der Formel II, in der z. B. R Acetyl bedeutet, in eine andere Verbindung der Formel II, in der R eine andere Acylgruppe bedeutet. Die 21-Acetylverbindung der Formel II kann somit z. B. in eine andere 21-Acylverbindung der Formel II übergeführt werden, indem man zunächst die 3u-Hydroxygruppe mit einem schützenden Substituenten schützt, der unter sauren, reduzierenden oder anderen Bedingungen entfernt werden kann, der jedoch unter alkalischen Bedingungen stabil ist, wie z. B. ein 3a-Äthersubstituenl, z. B. ein Tetrahydropyranyl- oder Triphenylmethylsubsütuent oder vorzugsweise ein 3«-Nitratester, man die 3u-geschützte Verbindung unter basischen Bedingungen hydrolysiert, um die entsprechende 21-Hydroxyverbindung zu erhalten, vorzugsweise in Anwesenheit von Kalium oder Natriumhydrogencarbonat, geeigneterweise in Anwesenheit eines Lösungsmittels, z. B. Methanol, Äthanol oder Tetrahydrofuran, man das entstehende Produkt wieder verestert und den 3«-Schutzsubstituenten entfernt.

Die Wiederveresterung wird vorzugsweise durchgeführt unter Verwendung des An'.iydrids oder ChIorids der gewünschten Säure, vorzugsweise in Anwesenheit eines tertiären Amins (z. B. Pyridin, Collidin oder Dimethylanilin), das auch als Lösungsmittel für die Reaktion dienen kann.

Die Schutzgruppe in der 3-Stellung kann in üblicher Weise entfernt werden, wobei die Bedingungen so gewählt werden, daß sie den Rest des Moleküls nicht beeinflussen. So kann z. B., wenn die 3«-Hydroxygruppe der Verbindung der Formel II durch die Bildung eines Nitratesters geschützt ist, die Nitratgruppe durch saure Hydrolyse der Verbindung, z. B. unter Verwendung wäßriger Mineralsäure oder durch Reduktion unter Verwendung von beispielsweise Zink und Essigsäure oder durch katalytische Hydrierung unter Verwendung von z. B. Palladium auf Aktivkohle als Katalysator, entfernt werden.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen eignen sich hervorragend zur Steigerung der Löslichkeil von 3u-Hydroxy-5a-pregnan-ll,20-dion (im folgenden als »Steroid I« bezeichnet)in wäßrigen, ein nicht-ionisches oberflächenaktives Mittel enthaltenden Lösungen, so daß sich daraus hervorragende Anästhetika ergeben. Das Steroid I besitzt zwar bemerkenswerte Eigenschaften als Anästhetikum; es ist jedoch in Wasser nur schwach löslich und wurde daher, trotzdem in der Literatur seine anästhetischen Eigenschaften bereits erwähnt wurden, als Anästhetikum, insbesondere Tür die intravenöse Verabreichung bisher nicht in Betracht gezogen. Erst mit Hilfe der ertindungsgemäßen Verbindungen ist es möglich geworden. Lösungen des Steroids I in Gegenwart eines nichtionischen oberflächenaktiven Mittels herzustellen, die bei der Injektion ausgezeichnete anästhetische Eigenschaften zeigen.

Somit rufen diese wäßrigen Lösungen des Steroids I eine Betäubung (Anästhesie) hervor und besitzen kurze Induktionsdauer, wobei die anästhetische Wirkung in geeigneten Dosen tatsächlich augenblicklich ist; so daß diese Lösungen somit ausgezeichnete Anästhetika sind zur Einleitung von Anästhesie, die aufrechterhalten werden soll, z. B. durch ein Inhalierungsanästhetikum, wie Äther, Halothan, Lachgas. Trichloräthylen usw. Die Lösungen sind jedoch in der Lage, die Anästhesie und die Analgesie in einem ausreichenden Maße aufrechtzuerhalten, um verschiedene chirurgische Operationen durchzuführen ohne Hilfe eines Inhalierungsanästhetikums. wobei der erforderliche Grad der Anästhesie, wenn nötig, durch wiederholte Verabreichung (oder sogar kontinuierliche Verabreichung) aufrechterhalten wird. Die Wiederherstellung aus der Anästhesie (wenn sie nur durch die erfindungsgemäßen Lösungen induziert wird) ist ausgezeichnet, und der Patient fühlt sich wohl im Unterschied zu den unerfreulichen Nacheffekten, die im allgemeinen mit üblichen Anästhetika verbunden sind. Weiterhin führen diese anästhetischen Lösungen im allgemeinen zu keinem der unerwünschten Nebeneffekte, die bislang mit Steroidanästhetika verbunden sind.

Die erfindungsgemäßen Steroide der Formel II besitzen zwar selbst auch eine anästhetische Wirksamkeit, obwohl diese im allgemeinen niedriger ist als die des Steroids I. Lösungen, die das Steroid I zusammen mit einem Steroid der Formel II enthalten, können somit mit einer wesentlich größeren anästhetischen Wirksamkeit hergestellt werden als eine Lösung des Steroids I allein auf Grund der gesteigerten Menge des Steroids I, das gelöst werden kann und auf Grund der anästhetischen Wirkung des Steroids der Formel II per se.

Aus der DT-AS 12 49 271 sind zwar den erfindungsgemäßen Verbindungen strukturell nahekommende Verbindungen bekannt, welche jedoch ganz andere Eigenschaften besitzen als die erfindungsgemäßen Verbindungen. Ferner war es aus der DT-AS 11 86 172 und der DT-AS 12 62 509 bekannt, eine in Wasser schwerlösliche, antiinflammalorisch wirkende Steroidverbindung durch eine wasserlösliche Steroidverbindung in Lösung zu bringen und dadurch sogar einen verstärkten pharmazeutischen Effekt zu erhalten; es war jedoch nicht naheliegend, mittels der wasserunlöslichen erfindungsgemäßen Verbindungen die Löslichkeit des ebenfalls wasserunlöslichen 3a-Hydroxy-5«-pregnan-l 1,20-dions in Gegenwart eines nichtionischen oberflächenaktiven Mittels so zu steigern, daß eine vorteilhafte anästhetische Wirkung erzielt

wird, wobei die so zusammengesetzten Anästhetika üblichen Anästhetika in ihrer Wirkung weitaus überlegen sind. Bei den in den genannten DT-ASen beschriebenen Steroidvcrbindungen handelt es sich um Salze saurer Ester bzw. um quartäre Salze basischer Ester, während bei der vorliegenden Erfindung nicht die Estersalze, sondern die Ester diese Eigenschaft zeigen.

Es handelt sich um ein ganz neues Phänomen, was bei den Steroiden bisher noch nie beobachtet wurde, nämlich daß ein wasserunlösliches Steroid die Löslichkeil eines anderen wasserunlöslichen Steroids steigert, so daß dessen anästhetische Eigenschaften wirksam ausgenützt werden können; es ist vollkommen neu und überraschend, daß durch die erfindungsgemäßen Verbindungen eine solche Wirkung erzielt wird.

Die folgenden Beispiele sollen die Erfindung näher erläutern; die Temperaluren sind in Grad C angegeben.

Beispiel 1
21 -Acetox y-3«-h ydroxy-Sii-prcgnan-11,20-dion

Man gab 37,9 ml Bortrifluoridätherat zu einer gerührten Lösung von 3<i-Hydroxy-5r<-pregnan-11,20-dion (6,64 g, 2OmMoI) und Bleitetraacetat (10,1 g, 22 mMol) in trockenem Benzol (280 ml) und 15,1 ml Methanol bei Raumtemperatur. Nach 2 Stunden wurde die Mischung in 2 1 Wasser gegossen und mit 1 1 Äther extrahiert. Die vereinigten Ätherextrakte wurden nacheinander mit Natriumbicarbonatlösung und Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt, so daß man eine weiße kristalline Masse erhielt. Die vierfache Umkristallisation aus Aceton/Petroläther (Sp. 40-60") ergab 21-Acctoxy-3u-hydroxy-5a-pregnan-l 1,20-dion in Form von feinen Nadeln (4.22 g, 54%), Schmp. 172-173 . [«]„ +104"(C = 1,0, CHCl₃).

C₂₃H₃₄O₅:

Berechnet ... C 70,8, H 8.8%;
gefunden .... C 70.8, H 8,9%.

45 Beispiel 2

21 -Acetoxy-Sn-hydroxy-Sd-pregnan-11,20-dion
über das Trimethylsilylderivat

Trimethylchlorsilan (0.3 ml, l,5Äquiv.) und Pyridin (0,485 ml, 2Äquiv.) wurden zu einer Lösung von 3«-Hydroxy-5u-pregnan-11,20-dion (1,0 g) in 16,6 ml Methylenchlorid bei Raumtemperatur gegeben. Nach 16 Stunden bei 0" gab man weiteres Trimethylchlorsilan (0.33 ml, 1 Äquiv.) hinzu, und nach weiteren I¹Z₂ Stunden wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Man gab Äther zu dem Rückstand und filtrierte den weißen Feststoff ab. DeT Äther wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand mit etwas Petroläther (Sp. 40—60°) verrieben, so daß man 3ri - Trimethyisiloxy - 5a - pregnan -11,20 - dion (0,2 g), Schmp. 95—96°, erhielt. Diese Verbindung wurde auch hergestellt unter Verwendung von Hexamethyldisilazan und Trimethylchlorsilan in Tetrahydrofuran.

Die 21-Acetoxylierung wurde wie im Beispiel 1 beschrieben durchgeführt, wobei eine Umkristallisation aus AcetonZPetroläther (Sp. 40—60°) das 21-Acetat ergab, Schmp. 170—173°.

Beispiel 3

21 -Acetoxy-3'i-hydroxy-5d-pregnan-11,20-dion
über das Trichloräthoxycarbonylderival

Chlorameisensäure-2,2,2-trichloräthylester (1,1 ml) wurde zu einer gekühlten, gerührten Lösung von 3«-Hydroxy-5«-pregnan-l 1,20-dion in 0,74 ml Pyridin und 5,6 ml Dioxan gegeben. Nach 10 Minuten wurden 14,5 ml verdünnter Chlorwasserstofisäure zugegeben, und die Lösung wurde 30 Minuten auf 100° erhitzt. Das entstehende öl kristallisierte beim Kühlen aus, und man erhielt 3«-(2,2,2-Trichloräthoxycarbonyloxy)-5«-pregnan-11,20-dion (1,45 g) Schmp. 130—131°, O]₀ + 56° (C- = 1,0, CHCl₃).

C₂₃H₃₃Cl₃O₅:
Berechnet
gefunden .

C 55,6, H 6,6, Cl 20,7%;
C 56,0, H 6,5, Cl 21,1%.

Die 21-Acetoxylierung dieser Verbindung (0,5 g) unter Verwendung des Verfahrens, wie es im Beispiel 1 beschrieben wurde, ergab einen sirupartigen Rückstand, der bei Zugabe von Äther und Petroläther auskristallisierte. Die Umkristallisation aus ÄtherZ Petroläther (Sp. 40—60°) ergab 21-Acetoxy-3« - (2,2,2 - trichloräthoxycarbonyloxy)5« - pregnan-11,20-dion (0,325 g), Schmp. 143—146° (Zers.), O]₀ +75,2ⁿ(c = 1,0,CHCl₃).

C₂₅H₃₅Cl₃O₇:
Berechnet ..
gefunden ...

C 54,3, H 6,4, Cl 19,2%;
C 55,1. H 6,0, Cl 18,6%.

Die Entfernung der 2,2,2-Trichloräthoxycarbonylgruppe wurde durch Rühren einer Lösung des Steroids (0,10 g) in Äthanol (2 ml) und 2,5 ml Eisessig während 5 Stunden unter Zugabe von Zinkstaub (0,3 g) im Verläufe dieser Periode bewirkt. Die Feststoffe wurden abfiltriert, mit Äthanol gewaschen, und das vereinigte Filtrat wurde im Vakuum eingeengt. Die Zugabe von Wasser zur verbleibenden Lösung ergab 21 - Acetoxy - 3a - hydroxy - 5« - pregnan -11,20 - dion (0,036 g), Schmp. 168—172°.

Beispiel 4
21 -Acetoxy-Su-pregnan-Sa-ol-11,20-dion

Getrocknete Hefe (Saccharomyces cerevisiae 50 g) wurde bei Raumtemperatur mit Leitungswasser (2 1), das 200 g Sucrose und 4 g Diammoniumhydrogenphosphat enthielt, verrührt. Nach 2 Stunden gab man Ig 21-Acetoxy-5a-pregnan-3,11,20-tri on (Mancara et al., J. Amer. Chem. Soc, 1955, 77, 5669) in 100 ml Äthanol hinzu. Die Fermentation wurde weitere 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, und die Hefe wurde durch Filtration entfernt, teilweise mit der Pumpe getrocknet und mit heißem Chloroform (4 χ 250 ml) extrahiert. Die Extrakte wurden mit dem Filtrat geschüttelt, mit Wasser gewaschen, über (Na₂SO₄.) getrocknet und zu einem braunen Harz eingedampft (634 mg). Dieses Harz wurde der präparativen Dünnschichtchromatographie unterworfen, die zwei reine Substanzen ergab. Von diesen war die weniger polare das Ausgangsmaterial 21-Acetoxy-5a-pregnan-3,ll,20-trion (68 mg), das aus Aceton/ Hexan in Form von farblosen Nadeln umkristallisiert wurde. Schmp. 169—172°, [α] „ + 127,5° (c = 0,87 CHCl₃). Die Gaschromatographie zeigte, daß diese Substanz mit dem Ausgangsmaterial identisch war.

509 650/149

ίο

Die polare Substanz (70 mg) wurde aus Aceton Hexan umkristallisiert, so daß man 21-Aectoxy-5n-pregnan-3ii-ol-l 1,20-dion (57 mg) in Form von farblosen Nadeln erhielt. Sehmp. 179 182, f.,], + 107 , (c = 1,09, CHCl₃). Die Gaschromatographie zeigte die Identität dieses Materials.

Beispiel 5

i-Sn-Ol-11,20-dion

H 7,6, Br 19,45%: H 7,9. Br 19,7%.

(a) 2l-Brom-5u-pregnan-3«-ol-l 1,20-dion

5«-Pregnan-3«-ol-l 1,20-dion (1 g, 3 mMol) in gerührten Methanol (7 ml) wurde bei 30" mit Acetylchlorid (1 Tropfen) behandelt. Nach 2 Minuten wurden 0,19 ml (3,52 mMol) Brom in 4,5 ml Methanol tropfenweise hinzugegeben, wobei man die Lösung zwischen der Zugabe jeden Tropfens sich entfärben ließ. Die entstehende klare Lösung wurde in 100 ml Chloroform gegossen, mit Wasser (3 χ 50 ml) gewaschen, über (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem weißen Schaum (1,40 g) eingedampft. Die präparative Dünnschichtchromatographie ergab 2l-Brom-5u-pregnan-3(/-oI-l 1,20-dion (715 mg), das aus Chloroform/ Äther in Form von Aggregaten von farblosen Nadeln auskristallisierte. Schmp. 160-163, [«]„ +109 (c = 0.82. CHCI.,).

C₂₁H₂₁BrO.,:

Berechnet . . . C 61,3,
gefunden .... C 61,0.

Eine zweite, unstabile Substanz (415 mg), das aus dieser Reaktionsmischung isoliert werden konnte, wurde spektroskopisch untersucht und als 17«-Brom-5«-pregnan-3d-ol-l 1,20-dion identifiziert.

(b) 21-Acetoxy-5u-pregnan-3</-ol-11,20-dion

5<j-Pregnan-3-j-ol-l 1,20-dion (Ig, 3 mMol) wurde in der oben beschriebenen Weise bromiert. Das Gesamtprodukt der Reaktion (1,38 g) wurde unter Rühren mit trockenem Aceton (25 rnl) und wasserfreiem Kaliumacetat (2 g) am Rückfluß gehalten. Nach 4 Stunden wurde die Reaktionsmischung in Chloroform (100 ml) eingegossen, mit Wasser (3 χ 50 ml) gewaschen, mit (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem weißen Schaum (1,19 g) eingedampft. Die präparative Dünnschichtchromatographie ergab 21-Acetoxy-5(i-pregnan-3a-ol-l 1,20-dion (634 mg) in Form eines weißen Schaumes, der bei Umkristallisation mit Aceton/Äther farblose Nadeln ergab. Schmp. 177-180°, [«]₀ +102.5, (c = 0,95. CHCl₃). Die Gaschromatographie zeigte die Identität dieses Materials.

Beispiel 6 21 -Acetoxy-Su-pregnan-Sfi-ol-11,20-dion

5(i-Pregnan-3d-ol-l 1,20-dion (5 g, 15,OmMoI) in 35 ml bei CT gerührtem Methanol wurde mit 5 Tropfen einer 50%igen Gew./Vol.-Lösung von Bromwasserstoff in Eisessig behandelt. Nach einigen Minuten gab man portionsweise im Verlaufe von 10 Minuten Brom (0,95 ml, 2,815 g, 17.6 mMol) in 22,5 ml Methanol hinzu. Man rührte die Lösung, bis die Farbe verschwand und goß sie dann in Wasser. Das Produkt wurde durch Filtration isoliert, mit Wasser gewaschen und im Vakuum 5 Stunden lang bei 40° getrocknet. Die endgültige Trocknung wurde über Nacht über

Phosphorpentoxyd in einem Exsikkator durchgeführt. Ausbeute: praktisch quantitativ.

Das rohe Brom-Zwischenprodukt wurde in Aceton (100 ml, getrocknet über Kaliumcarbonat) gelöst und in Anwesenheit von Kaliumacetal (10 g) 4 Stunden am Rückfluß gehallen.

Die Reaktionsmischung wurde in 1 1 Wasser gegossen; mit Äther (300 ml und 250 ml) extrahiert. Der Äther wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck eingedampft.

Der verbleibende Schaum wurde aus Aceton/ Petroläther umkristallisiert und ergab 21-Aceloxy-5d-pregnan-3u-ol-l 1,20-dion in Form von weißen Nadeln. Ausbeute: 63%; Schmp. 173-175°, [«]₀ + 109", (c = 1,0, CHCl,).

Beispiel 7
21-Propionyloxy-5«-pregnan-3(/-ol-l 1,20-dion

5</-Pregnan-3rj-ol-l 1,20-dion (2 g, 6 mMol) in 14 ml Methanol wurde bei 30" mit 2 Tropfen Acetylchlorid behandelt. Die Lösung wurde 2 Minuten gerührt und wurde dann tropfenweise mit 0,38 ml (7 mMol) Brom in 9 ml Methanol in der oben beschriebenen Weise behandelt. Die Reaktionsmischung wurde in gerührtes Wasser (250 ml) gegossen. Das Produkt wurde isoliert, gewaschen und an der Wasserstrahlpumpe getrocknet und über Phosphorpentoxyd im Vakuum nachgetrocknet, so daß man ein weißes Pulver (2,49 g) erhielt. Dieses Pulver wurde mit Propionsäure (11,1ml, 0,15 Mol) und 7,25 ml Triäthylamin (0,1 Mol) in trockenem Aceton (60 ml) am Rückfluß gehalten. Nach 5 Stunden wurde die Lösung in 300 ml Chloroform gegossen, mit wäßrigem Kaliumhydrogencarbonat (2 χ 200 ml) und Wasser (2 χ 200 ml) gewaschen, über (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem weißen Schaum (2,59 g) eingedampft. Die präparative Dünnschichtchromatographie ergab ein Material, das nach Umkristallisation aus Chloroform/ Äther/Hexan 21 - Propionyloxy-5«-pregnan-3«-ol-11,20-dion (589 mg) in Form von farblosen irregulären Prismen ergab. Schmp. 159—170°, [a]„ +99°, (c· = 0,92, CHCl₃).

C₂₄H₃₆I₅ '/4H₂O:

Berechnet ... C 70,45, H 9.0%;

gefunden

C 70,5, H 8,9%.

Beispiel 8
2 l-Isobutyryloxy-5a-pregnan-3«-ol-l 1,20-dion

5u-Pregnan-3a-ol-l 1,20-dion (2 g, 6 mMol) in 14 ml Methanol wurde bei 30° mit Acetylchlorid (2 Tropfen) behandelt. Die Lösung wurde 2 Minuten gerührt, bevor man sie tropfenweise mit 0,38 ml (7 mMol) Brom in 9 ml Methanol in der oben beschriebenen Weise behandelte. Nach vollständiger Reaktion wurde die Lösung in 250 ml gerührten Wassers gegossen.

Das Produkt wurde abgetrennt, gewaschen und an der Pumpe getrocknet. Das endgültige Trocknen über Phosphorpentoxyd im Vakuum ergab ein weißes Pulver (2,5 g). Dieses Pulver wurde mit 14,1 mi (0,15 Mol) Isobuttersäure und 7,25 ml (0,10 Mol) Triäthylamin in trockenem Aceton (60 ml) am Rückfluß gekocht. Nach 4 Stunden wurde die Lösung in 300 ml Chloroform gegossen, mit wäßrigem Kaliumhydrogencarbonat (2 χ 200 ml) mit Wasser (2 χ 200 ml) giwa-

sehen, über (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem weißen Schaum (2,54 g) eingedampft. Die präparalivc Dünnschichtchromatographie ergab 21-lsobutyryloxy-5((-pregnan-3«-ol-11.20-dion (1,45 g) in Form eines weißen Schaumes, [u], + 93,5 . (<· = 0,66, CHCl.,).

C₂₅II_3nO₅ V₂H₂O:

Berechnet . .. C 70,25. 119,2%:
gefunden .... C 70.4, H 8.8%.

IO

Beispiel 9
21 -Ben/oyloxy-Siz-pregnan^n-ol-11,20-dion

5u-Prcgnan-3</-ol-l 1,20-dion (2 g, 6 mMol) in 14 ml Methanol wurde mit 2 Tropfen Acetylchlorid und ,₅ 0,38 ml (7 mMol) Brom in der oben beschriebenen Weise behandelt. Die Isolierung des rohen Bromierungsproduktes in der üblichen Weise ergab ein weißes Pulver (2,498 g). Dieses Pulver wurde mit Benzoesäure (18,3 g, 0.15 Mol) und 7,25 ml (0,1 MoI) Triethylamin in 100 ml trockenem Aceton am Rückfluß gehalten. Nach 5 Stunden wurde die Lösung in Chloroform (5(K) ml) eingegossen und mit wäßrigem Natriumhydrogencarbonat (2 χ 200 ml) mit 3 χ 2CX) ml Wasser gewaschen, über (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem weißen Schaum eingedampft. Die präparative Dünnschichtchromatographie ergab 21-Benzoyloxy-5«-pregnan-3a-ol-l 1.20-dion (1,27 g) in Form eines weißen Schaumes, [«]„ + 104 (<· ---· 0,65,CHCl₃).

C₂₈H₃₁₁O₅ ¹Z₂H₂O:

Berechnet ... C 72.85, H 8.05%:
gefunden .... C 72.6, H 7,7%.

Beispiel 10

21 -Isobutyryloxy-S-i-pregnan^i-ol-11,20-dion-3-nitrat

ι) Rauchende Salpetersäure (1,3 ml) wurde zu einer gerührten Lösung von Essigsäureanhydrid (5 ml) ^₀ gegeben. Die Lösung wurde auf —5 abgekühlt, und man gab 500 mg(l,28 mMol) 21-Acetoxy-5u-pregnan-3ti-ol-11,20-dion in 2,5 ml Chloroform hinzu. Die entstehende Lösung wurde 1 Stunde bei —5 gerührt, bevor man sie in verdünnte wäßrige Natriumhydroxydlösung (100 ml) goß, mit Chloroform (2 χ 75 ml) extrahierte, und der Extrakt wurde dann mit wäßriger Natriumbicarbonatlösung (50 ml) mit Wasser (3 χ 50 ml) gewaschen, über (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem Bad eingedampft (527 mg). Die Umkristaliisation aus Äther/Aceton ergab 21-Acetoxy-5(j-pregnan-3(j-ol-l I,20-dion-3-nitrat (386 mg) in Form von farblosen Nadeln, Schmp. 147—149^r. [u]_D +103 ic = 1,06,CHCl₃).

C₂₃Hj₃NO₇:

Berechnet ... C 63,45, H 7,65. N 3,2%:
gefunden .... C 63.6. H 7,5, N 3,1 %.

ii) 5u-Pregna-3<i,21-diol-! l,20-dion-3-nitrat

(a) 21 - Acetoxy-5(x-pregnan-3u-öl -11,20-dion-3-nitrat (837 mg, 2 mMol) in 42 mg Äthanol und 42 ml Tetrahydrofuran wurden mit 10%iger wäßriger Kaliumhydrogencarbonatlösung(4 ml (und 2 n-wäßrigem Natriumhydroxyd (2 ml) gerührt. Nach 3 Stunden gab man 1 ml Eisessig hinzu, goß die Lösung in 400 ml Wasser und extrahierte mit Chloroform (3 χ 120 ml). Die Extrakte wurden mit Wasser (2 χ 50 ml) ge

35 waschen, über (MgSO₄) getrocknet und zu einem Schaum eingedampft. Die präparative Dünnschichtchromatographie ergab ein reines Material, das nach der Umkristallisation aus Äther/Aceton 5u-Pregna-3(/,21-diol-l l,20-dion-3-nitrat (219 mg) in Form von farblosen irregulären Prismen ergab. Schmp. 172 bis 176 . ['<] „ +91 (c = 0,97, CHCl₃).

C₂₁H₃₁NO,,:

Berechnet ... C 64,1. 117,95, N 3,55%;
gefunden .... C 63,9, H 7,8, N 3,5%.

(b) 21 - Acetoxy - 5<t - pregnan - 3« - öl - 11,20 - dion (5 g, 13,3 mMol) in 25 ml Chloroform wurde zu einer gerührten Lösung von rauchender Salpetersäure (13 ml) in Essigsäureanhydrid (50 ml) bei — 5" gegeben. Die Reaktionsmischung wurde 1 Stunde bei — 5^C gerührt, in gerührtes wäßriges Natriumhydroxyd (1 1) eingegossen und mit Chloroform (2 χ 200 ml) extrahiert. Der Extrakt wurde mit wäßrigem Natriumhydrogencarbonat (100 ml) mit Wasser (2 χ 100 ml) gewaschen, über (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem weißen Schaum eingedampft. Dieser Schaum wurde in Methanol (500 ml) gelöst, die Lösung wurde mit Stickstoff gespült, mit 10%igem wäßrigem Kaliumhydrogencarbonat (17,5 ml) 4 Stunden gerührt. Man gab 3 ml Eisessig hinzu und dampfte die Lösung zu einem kleinen Volumen ein, goß sie in Wasser (1 I) und extrahierte mit Chloroform (2 χ 200 ml). Der Extrakt wurde mit Wasser (2 χ 100 ml) gewaschen, über (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem weißen Schaum eingedampft. Die Umkristallisation aus Aceton/Äthcr ergab 5«-Pregna-3(z,21-diol-l l,20-dion-3-nitrat (4,31 g) in Form von farblosen irregulären Prismen. Schmp· 174—181".

iii) 21-Isobutyryloxy-5«-pregnan-3(i-ol-ll,20-dion-3-nitrat

5«-Pregna-3(i,21 -diol-11,20-dion-3-nitrat (2.0 g. 5,08 mMol) in 20 ml trockenem Pyridin wurde mit 2 ml Isobutyrylchlorid behandelt. Die rose Lösung ließ man 20 Stunden bei Raumtemperatur stehen, bevor man sie in gerührtes Wasser goß und mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure ansäuerte. Das Produkt wurde isoliert, gut mit Wasser gewaschen und an der Pumpe getrocknet. Die Kristallisation aus Aceton/Hexan ergab 21-Isobutyryloxy-5«-pregnan-3(x-ol-11.20-dion-3-nitrat (1,01 g) in Form von farblosen Nadeln. Schmp. 167—169°, [«]„ +97,5'. (c = 1.48. CHCl₃).

C₂₅H₃₇NO₇:

Berechnet ... C 64,8, H 8,05, N 3,0%;
gefunden .... C 64,5, H 7,8, N 3,2%.

iv) 21-Isobutyryloxy-5«-pregnan-3a-ol-l 1,20-dion

21 - Isobutyryloxy - 5« - pregnan - 3α - öl -11,20 - dion-3-nitrat (1,35 g, 2,91 mMol) in 35 ml Eisessig wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur mit Zinkpulver (4 g] verrührt. Das Zink wurde abgetrennt, mit heißem Chloroform (200 ml) gewaschen, und die vereinigter Waschwasser und Filtrate wurden mit Wassei (4 χ 100 ml) gewaschen, über (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem weißen Schaum eingedampft. Die präparative Dünnschichtchromatographie ergab 21 -Isobutyryloxy-5(i-pregnan-3d-öl-11,20-dion in Form eines weißen Schaumes, [α] _c + 97,5° (c = 1,05. CHCl₃). Die analytische Dünnschichtchromatographie und Gaschromatographie zeigte an, daß dieses

Material identisch war mit einer Probe, die gemäß dem Verfahren, wie es im Beispiel 12 beschrieben wurde, hergestellt wurde.

C₂₁H₂₈O₂:

Berechnet ... C 80,8, H 9.0%; gefunden .... C 80.5. H 8.9%.

Beispiel 1! 5«- Pregna-3«,21 -diol-11,20-dion-21 -hemisuccinal

5«- Pregna-3«,21 -diol-11,20-dion-3-nitral-21 -hemisuccinat (1,03 g, 2,09 mMol) und 3 g Zinkpulver wurden mit 25 ml Essigsäure 90 Minuten verrührt. Das Zink wurde abgetrennt, mit Chloroform (100 ml), 2 n-wäßriger Chlorwasserstoffsäure (2(X) ml) und Chloroform (HX) ml) gewaschen. Die vereinigten Filtrate wurden ausgeglichen und die organische Phase wurde mit Wasser gewaschen (3 χ 100 ml), über (Na₂SO₄) getrocknet und zu einem weißen Schaum eingedampft. Umkristallisation aus Benzol/Hexan Chloroform ergab 5<i-Pregna-3u,2l-diol-l 1.20-dion-21-hemisuccinat (800 mg) in Form von farblosen Nadeln. Schmp. 166 -168 ,[«],. +90,5. U = 1,32 in CHCI,).

C₂₅H₃₁₁O₇:
Berechnet
gefunden .

C 66.95. H 8.1%; C 66,9. H 8,0%.

Das Ausgangsmaterial für diese Herstellung wurde aus 5i(-Pregna-3a.21-diol-l l,20-dion-3-nitrat (vgl. Beispiel lOii) wie folgt beschrieben, erhalten;

5<i- Pregna-3(i,21 -diol-1 l,20-dion-3-nitrat (2 g. 5,08 mMol)und Bernsteinsäureanhydrid(2 g, 20mMol) in 20 ml trockenem Pyridin ließ man bei Raumtemperatur 18 Stunden stehen. Die Lösung wurde in 300 ml gerührtes Wasser eingegossen, welches dann angesäuert wurde. Nach 2 Stunden wurde der Niederschlag gesammelt, gut mit Wasser gewaschen und getrocknet. Die Umkristallisation aus Benzol/ Hexan ergab 5u-Pregna-3«.21-diol-l l,20-dion-3-nitrat-21-hemisuccinat(l,51 g)in Form von farblosen Mikronadeln. Schmp. 160-163. [«], +89.5. U = 1.14. CHCl₃).

C₂₅H₃₅NO,:

Berechnet . .
gefunden . . .

C 60,8. H 7.15. N 2.85%; C 60.8. H 7.3. N 2.6%.

Beispiel 12

0.035 g des Steroids 1, das wie im Beispiel 20 in der Teilchengröße reduziert wurde, wurde mit 0,035 g des Steroids Il (R = CH₃CO-). das ebenfalls wie das Steroid I in der Teilchengröße verkleinert wurde, vermischt. Die Steroide wurden zu 10 ml einer 20%igen Gew./Vol.-Lösung eines Lösungsvermittlers, bekannt unter dem Handelsnamen Cremophor EL, die 0,025 g Natriumchlorid enthielt, gegeben, und die Mischung wurde mindestens 24 Stunden mechanisch gerührt. Jede Spur von unlöslichem. Rückstand wurde unter Verwendung des gesinterten Glasfilters abfiltriert.

Beispiel 13

13.5 g gemahlenes Steroid I und 4,5 g Steroid II (R = CH₃CO —) wurden durch mechanisches Rühren mit 300,0 g eines Lösungsvermittlers, bekannt unter dem Handelsnamen Cremophor EL, bei 7(F in einer Stickstoffatmosphäre vermischt. Man setzte das Erliitzen und Rühren fort, bis sich die Steroide vollständig gelöst hatten. Die Mischung wurde mit sterilem, destilliertem Wasser, das 3,75 g Natriumchlorid enthielt, verdünnt, so daß man ein Endvolumen von 1500 ml erhielt. Das Rühren wurde fortgesetzt, bis die Lösung homogen war.

Beispiel 14

0.045 g des Steroids I und 0,015 g des Steroids Il ίο (R = CH₁CO-) wurden in 2 ml Aceton bei 20 gelöst. Die entstehende Lösung wurde zu 1 g eines Lösungsvermittlers, bekannt unter dem Handelsnamcn Cremophor EL, bei 20' gegeben, und es wurde gerührt, bis die Lösung homogen war. Man entfernte das Aceton mit einem heftigen Stickstoffstrom. Die Lösung wurde mit sterilem, destilliertem Wasser verdünnt, das 0,0125 g Natriumchlorid enthielt, bis man ein Endvolumen von 5 ml erhielt. Ähnliche Lösungen wurden hergestellt unter Verwendung von Chloroform oder Methylenchlorid an Stelle von Aceton.

Beispiel 15

0,09 g gemahlenes Steroid I wurde mit 0,03 g gemahlenes Steroid I! (R = CH₃CO-) vermischt, und man gab diese Mischung zu 2,0 g eines Lösungsvermittlers, bekannt unter dem Handelsnamen Tween 80. Wie im Beispiel 14 wurde die Mischung bei 70 in einem Stickstoffstrom mechanisch gerührt, bis sich die Steroide gelöst hatten. Die Mischung wurde mit sterilem, destilliertem Wasser, das 0,025 g Natriumchlorid enthielt, auf ein Endvolumen von IO ml verdünnt.

Beispiel 16

3s O,O45g Steroid I und 0,015 g Steroid II (R = (CH₃J₂CHCO —) wurden wie im Beispiel 14 beschrieben formuliert. Ähnliche Lösungen wurden erhallen unter Verwendung des Steroids II, wobei R = Q₁H₅CO-HO₂CCH₂CH₂CO-oderC₂H₅-CO ~

bedeutete.

Beispiel 17

0.045 g Steroid I und 0,015 g Steroid H(R = CH₃CO wurden in 2 ml Aceton bei 20' gelöst. Die entstehend« Lösung wurde zu 1 g eines Lösungsvermittlers, be kannl unter dem Handelsnamen Tween 40. bei 20 gegeben und bis zur Homogenität gerührt. Das Acetor wurde durch einen heftigen Stickstoffstrom entfernt Die Lösung wurde mit sterilem, destilliertem Wasser das 0,025 g Natriumchlorid enthielt, verdünnt, so dai man ein EndVolumen von 10 ml erhielt.

Beispiel 18

0.036 g gemahlenes Steroid I wurden mit 0,012 j gemahlenem Steroid II (R = CH₃CO) vermischt Diese Mischung gab man zu 0,8 g eines Lösungsver mittlers, bekannt unter dem Handelsnamen Tween 6C Die Mischung wurde mechanisch in einem Stickstof!

strom bei 70° C gerührt, bis sich die Steroide gelös haben. Die Mischung wurde mit sterilem, destillierter Wasser, das 0,025 g Natriumchlorid enthielt, verdünn' bis man ein Endvolümen von 10 ml erhielt.

Beispiel 19

16 mg Steroid I und 4 mg Steroid II (R = CH₃CC wurden in 0,2 ml Aceton gelöst, und man vermischt 0,2 ml eines Lösungsvermittlers, bekannt unter der Handelsnamen Cremophor EL, mit dieser Lösuni

Das Aceton wurde durch Einleiten eines Stickstoff-Stromes in die Mischung entfernt. Die entstehende Lösung wurde mit 0,8 ml sterilem Wasser vermischt.

Beispiel 20

0,135 g Steroid I und 0,045 g Steroid II (R = CH₃CO) wurden in 2 ml Aceton bei 20" gelöst. Die entstehende Lösung wurde zu 3 g eines Lösungsvermittlers, bekannt unter dem Handelsnamen Cremophor EL, bei 20° gegeben und gerührt, bis die Lösung homogen war. Das Aceton wurde durch einen heftigen Stick stoffstrom entfernt. Die Lösung wurde mit sterilem, destilliertem Wasser, das 0,025 g Natriumchlorid ent-

hielt, verdünnt, so daß man ein Endvolumen von 10 ml erhielt.

Beispiel 21

0,045 g gemahlenes Steroid I wurde mit 0,012 g gemahlenem Steroid II (R = CH₃CO) vermischt und die Mischung zu 1 g eines Lösungsvermittlers, bekannt unter dem Handelsnamen Cremophor EL, gegeben. Die Mischung wurde mechanisch bei 70° in einem ίο Stickstoffstrom gerührt, bis sich die Steroide gelöst hatten. Die Mischung wurde mit sterilem, destilliertem Wasser verdünnt, das 0,025 g Natriumchlorid enthielt, so daß man ein Endvolumen von iO ml erhielt.

Claims

Patentansprüche:

1. Verbindungen der allgemeinen Formel II

CH, OR

C=O

HO

(H)