DE1767912A1 - Verfahren zur Herstellung hochreiner Maltose - Google Patents
Verfahren zur Herstellung hochreiner MaltoseInfo
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Description
u. LU
ouö Minchen 2 2
ouö Minchen 2 2
Hayashibara AG. 28. Juni 1968
Okayama / Japan SJ/Hu
hao 7012
Verfahren zur Herstellung hochreiner Maltose
■ i
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Maltose hoher Reinheit durch Verflüssigung von Stärke und
anschließende enzymatische Verzuckerung.
Bisher gewann man Maltose aus Stärke durch Verflüssigung beispielsweise mittels Beta-Amylase und nach Zusatz von
Malz durch Verzuckerung unter Einwirkung der Malz-Amylase,
d.h. einem Gemisch von Alpha- und Beta-Amylase. Die verzukkerte Lösung erhielt aber höchstens 70% reine Maltose, selbst
wenn die Menge an Beta-Amylase durch Anwendung von Malz mit
or
einem recht hohen Gehalt an Beta-Amylase vermehrt war.
einem recht hohen Gehalt an Beta-Amylase vermehrt war.
Das Aufarbeiten einer derart verzuckerten Lösung ist äußerst schwierig, da eine Reinigung durch Rekristallisation nicht
erfolgen kann, Deshalb wird das Erzeugnis in der Regel entweder durch fraktionierte Ausfällung mit Alkohol oder durch
Rekristallisation eines Derivats raffiniert. Jedoch kann sogar die beste der im Handel befindlichen Maltose nicht bis
109840/0486
zu einer Reinheit von über etwa 95% raffiniert werden;
sie enthält vielmehr Dextrine, Malz-Triose, Glucose und andere
Verunreinigungen.
-Die der vorliegenden Erfindung zugrundeliegende Aufgabe
"besteht in der Entwicklung eines einfachen und wirksamen Verfahrens zur Herstellung von Maltose hoher Reinheit durch
fc Verzuckerung verflüssigter Stärke mit Beta-Amylase. Überraschenderweise
wurde gefunden, daß durch eine Verzuckerung mit Beta-Amylase in Gegenwart der Enzyme Alpha-1,6-Glucosidasen,
die bekanntlich bei der Spaltung der^-1,6-glucosidischen
Bindungen im Amylopektin der Stärke spezifisch mitzuwirken befähigt sind, eine Maltose hoher Reinheit erzeugt
wird.
Das erfindungsgemäße Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, daß man in bekannter Weise verflüssigte und auf den p„-tfert
w von etwa 6 eingestellte Stärke mittels Beta-Amylase oder einem Gemisch von Beta- und Alpha-Amylase in Gegenwart einer
oder mehrerer Arten von Alpha-1,6-Glycosidasen verzuckert.
Die Verflüssigung der Stärke kann mit Säure, einem amylolytischen Enzym wie Alpha-Amylase oder durch Hitzegölatinierung
erfolgen.
Alpha-1,6-Glucosidasen bewirken, wie gesagt, die Spaltung
der alpha-1,6-glycosidischen Bindung am Ve rzweigungspunkt
109840/0486
der; Amylopektin« der .Jjärke zu einer ieradkettenstnxktur
v.'ie Amylose, die nicii durch Be ta-Amy läse leicht zerlegen
1-1..U» Iiierdurch wird das Verzuckerungsvermögen der verflüs-3ijl/i;i
o^Ileke .axt Hilfe von Beta-Ainyl-oe verbessert, ohne
daß '-'-i- Dcr-rtrir ra±\i einer alpha-ijö-giucosidisclien VmmBlndang
uar'-;clrt>i'--ibu. Aiiderersei-cc wird die Erzeugung von Kebe.ipro-hinten
v;ie II :lz-xriose und Glukose durch Benutzung
vo ; veiifl'issigter Stärke mit einen niedrigen D.E.-'iert ge-7or
allem durch di.a Zusammenwirken vorgen=rinnter ile.iäuird
eine Ilaltoselösung hoher Hciixlieit gev/onaen.
-Alpii-j-1,i&lucosidaseii schließen erstens die Pulluianase ein,
3ie rait iiilfe des 3akterieiist3rnmes Aerobacter aerogenes gemäß
Patentanmeldung P 17 67 654··9 gewonnen v/ird, Zeitens gehört
zu den -ilpha—1,6-Glycosidasen i.-aich die Iso-Amylase, die
mittels Bakterien des Pseudomonasstammes, mit Pseudonon^s
amyloder-juaosa gemäS Patentanmeldung P 17 67 633« b gev.'innbar
ist,
Die Verwendung eines Gemisches verschiedener Arten von Alpha
1f6-Glucosidasen statt nur einer einzigen Art bewirkt einen
erhöhten Maltose-Ertrag. Die verstärkte Erzeugung an Maltose durch gleichzeitige Verwendung verschiedener Alpha-1,6-Glucosidase—Arten
ist besonders auf da■ verschiedene Spaltungsvermögen der Pullulanase und der Iso-Amylase zurückzuführen»
109δΑ0/0Α86
ß*D original 4
Wenn eine aus verflüssigter Stärke mit Beta-Amylase und
Alpha-1,6~Glucosidase gewonnene verzuckerte Lösung in gewohnter Weise gereinigt wird» machen äußerst kleine Mengen an
hochmolekularen Dextrinen die Reinigung mit einem lonenaustauscherharz
sehr schwierig und ergeben leicht ein trübes Produkt. Diese Erscheinung wird durch Zusatz von Alpha-Amy-1εse
während der Verzuckerung behoben»
Die Aktivität der anwandten Enzyme wurde wie folgt bestimmt:
(a) Bestimmung der Aktivität der Alpha-1,6-Glucosidase :
Eine Reaktionslösung, bestehend aus
Enzymlösung 1 ml
1%iger Lösung twesr löslicher klebriger Reisstärke 5 ml
0,5 M-Essigsäure-Pufferlösung vom p„ 6 1 ml,
läßt man bei 4-00G 30 min reagieren. 0,5 ml des Reaktionsgemisches und 0,5 ml einer 0,01 M-Jodlösung werden zu
15 ml v/asser zugegeben. Nach 15 min wird die Absorption
bei einer Wellenlänge von 610 mü bestimmt und die enzymatische
Aktivität für eine Änderung von 0,1 zu 10 Einheiten angenommen.
(b) Bestimmung der Aktivität von Beta-Amylase :
Eine Mischlösung, bestehend aus
iVöiger löslicher Stärke 5 ml
0,1 M-Essigsäure-Pufferlösung 4· ml
Enzymlösung 1 ml
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läßt man bei 400O 30 min reagieren. Der so erhaltene
reduzierende Zucker wird als Glucose gewertet; wenn er 10 mg Maltose enthält, wird er als eine Einheit gewertet.
(c) Bestimmung der Aktivität der Alpha-Amylase:
Diese wird in Übereinstimmung mit Abschnitt II-12-1a
auf Seite 88 der "Analysis Methods of Starch Sugar in- · dustry" (herausgegeben von der Society for leehnical
Research of Starch Sugars) ermittelt.
I" ".:.;]. η: .".}ιΓ'-·ΐΓθ."τ/1οη Υοιυ.nclic-n *·:ογΊγ.γ. ~\i - :H":cl? ■'.'.:· :r..?i:n—
Versuch 1 : V/irkung der Pullulanase-Mitverwendung. "-' -'r1-r; ^-'^---■"■■.~r.:
Ein 10%iger wässriger Stärkebrei aus Süßkartoffeln wird mittels
Alpha-Amylase bis zu einem Dextrose-Äquivalent (D.Ee)
von 2,7 verflüssigt und hierauf auf zweierlei Weise bei 45°C in 16 h verzuckert :
Lösung (AJl f unter Anwendung von 25 Einheiten Beta-Amylase g
je g Stärke j
Lösung (ß); unter Benutzung von
25 Einheiten Beta-Amylase und
10 Einheiten Pullulanase
je g Stärke.
je g Stärke.
Die Zusammensitzung der in den erhaltenen verzuckerten Losungen enthaltenden feststoffe sind in Tabelle I wiedergegeben.
!
109840/0486
BAD ORIGINAL
Aus dieser ist ersichtlich, daß bei Anwendung von Beta-Amylase
für sich allein der Maltosegehalt der verzuckerten Lösung (A) nur 69,6£/o beträgt, während derjenige bei Kitverwendung
von Pullulanase (Lösung B) 90% übersteigt.
Tabelle . | Maltose | Glucose | Malz-Triose | Dextrin | > |
69,6 90,4 |
1,1 0,4 ; |
5,5 | 25,7 7,9 |
||
Lösung | Ii Wirkung des Alpha-Amylase-Zusatzes« | ||||
A B |
|||||
Versuch c | |||||
E |
Es werden aus verflüssigter Stärke folgende zwei Vergleichslösungen mit einem Zuckergehalt von 39,4$ bereitet:
Lösung (G): durch Verzuckerung mit Beta-Amjlase und Pullulanase
j
Lösung (D); durch Verzuckerung mit Beta~A»jlaset Pullulanase
und Alpha-Ämylase.
Beide Lösungen wurden mit Ionenaustauschharz gereinigt. Die
Ergebnisse sind in Tabelle II zusammengestellt· Wie hieraus zu ersehen, läßt sich die Lösung (0) mit Ionenaustauschharz
beinahe überhaupt nicht reinigen, wogegen sich die Lösung (D) leicht reinigen läßt.
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BAD ORIGINAL
Lösung
starke Säure / mittelstarke
Base Zweibett-Vorbehandlung
starke Säure / starke Base Gemischtbett-Behandlung
Smaliger Durchgang des Lösungsvolumens
auf Basis des sauren Harzvolumens
Kolonne 5 χ. Λ0 cm , ■
20maliger Durchgang des Lösungsvolumens
auf Basis sauren Harzvolumens
kolonne 1 χ 1O^ cm/' " T ".·"
2maliger Durchgang des Lösung svolumens auf Basis
des Harzvolumens/pTT 5» 7
Kolonne 8 χ 1CK cm
4-Omaliger Durchgang des Lösungsvolumens
auf Basis des Harzvolumens/pjT 5*0
Kolonne 1 χ 1Ck cm
Versuch 3: Wirkung eines Gemisches von Alpha-ijö-G-lycosidaseii.
Bei jedem Versuch verzuckerte man eine gelatinierte Lösung mit einem Gehalt von 2% Süßkartoffel-Stärke bei 45°C in 64 h
mittels der gleichen Enaymmenge, wobei die in Lösung E verwendete
Fullulanasemenge der in Lösung F benutzten vereinten Menge
an Pullulanase und Iso-Amylase gleich war. Die Ergebnisse,
d.h. die unterschiedlich hohe Maltoseausbeute, ist aus Tabelle
III zu ersehen.
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BAD ORfG.'NAL
Tlbelle III
... _ | Enzym gemisch |
ph | Zusammensetzung in % | Maltose | Glucose | Malz-Triose | Dextrin |
Jrullula- na3G Be ta- |
6,0 | 93,0 | 0,6 | 5,1 | V | ||
E | Auylase | ||||||
M.lui,- | |||||||
F | 95,1 | ο,;;. | 4,0 | ο, ν | |||
Versuoh 4: Wirkung verschiedener Stärken.
Breie mit je 2-/Ό verschiedener Stärken vjerden durch eine 5 min.
lange Druckbehandlung bei 1300C verflüssigt. Die ötärkekonaeatr.-:tion
bei Anwendung von v/achshaltiger Maisstärke kann bis
zu ~f/o gesteigert v/erden. Die erhaltenen Flüssigkeiten verzukkert
man in 16 h bei 45°C unter Zusatz von
100 Einheiten Beta-Amylase
20 Einheiten Pullulanase und
20 Einheiten Pullulanase und
5 Einheiten Alpha-Amylase.
Die erzielten Ergebnisse sind in Tabelle IV wiedergegeben.
Die erzielten Ergebnisse sind in Tabelle IV wiedergegeben.
1 0 9 8 A 0 / 0 k 8 6
otärkeart | iiüiylolyse- grad DoE, in '/j |
Zusammensetzung in /■> | li.:.lL'Ose | Glucose | Malz-Jrlose | iJexcrin |
Karbolfei- starke Maisstärke •jachshaliige Haisstärke |
59,55 59,97 63,3ö |
91, d
92,3 92,G |
1,1
1,7 2,2 |
4,3
3,3 |
3,1
1,7 1,9 |
>/io -ins dieser zn ersehen, verändern eich der Verzuckerung sgrt.d
und die Reinheit isr ;^e./innbaran Maltose je nach, dor Arb
des .jl;ärkerü:..."üc.rials : v;:·chijha.ltige Haisstärka üuitin;!' axe becttn
Ji'rgebnirj :;e j es ϊ ο ige η Maisstärke, Kartoffelstärke sowie
löü.L.Lcihe 3üä
Yer.':u3h 5: V/irkung verschiedener Stärkekonzentrationen.
Man verflüssigt Stärkebreie laib verschiedener Konzentration
von L·irtol'feljtärke unter /ori/endung von Alpha-^liaylD.se bei
ernohüen Lemper-'-^turen in ^ewohuüer Weise unter JJr ick br;i 1;'O
in > ;üin (i).E. ^(r/v) und vorzuckert dann jede / . r.\jiioli3misuhun^
nach /Juri'itij /όχι
25 iSinhoiben PuLluian-.üe und
7 Eirüioiton Beta-iliii^Lose
7 Eirüioiton Beta-iliii^Lose
je g iitärko b'.;i einem p,j-./'.'CG /on G,ü uxui *V~>
G in β ϊι. iJio
biiifjse .sind in !'.-,belle ■/ ,-/.Lodergegeben. r.7io au 'ir.s^dien,
1 O 9 8 A O / O A ß G BAD ORIGINAL
. ο Io
ist unter den genannten Bedingungen .-.ua geeignetesten eine
Konzentration des zu verflüssigenden obürkebreies von ebv/
libelle V
Stärkekon- zenbration |
JJ.E.in % | _ Zusammensetzung in | Glucose | Malz-Triose | /q |
10 20 |
56,62 55,7 |
Maltose | 0,2 0,5 |
O, O G,6 |
Dextrin |
77,7 75,4 |
ac n |
Versuch 6: Wirkung des Dtärkeverflüssigungsgrades.
1'1Ur die Verzuckerung v/irl das /erfahren gemäß Yerauah. 5 angewandt,
jedoch unter Benutzung von
15 Einheiten Beta-Amyläse und
22 Einheiben Pullulanase
Je g Stärke. Aus der die Ergebnisse zeigenden Tabelle VI ersieht
man, daß, je größer der VOrflüssigungsgrad, umso iiäh^r
der D.E.-./erb ist, je niedriger aber der 1).E.-wert, desto
honet1 die Maltose ausbeute ist.
ükärkeverflüs- | D.E.- | Maltose | Zusamiaen | aetzung in /» | iiexb viii |
sigungsgrad Dȣm in /o |
Endwe et | b2,0 | Glucose | Malz-Triose | 10,7 |
5,^ | J'J^- ■>' | 75,0 | 0,0 | G,7 | 1ü,3 |
11, {, | O, ) | 13,ο | |||
1ü,J | 55,1ό | 1#1 | 21,0 | ||
109840/0ΑΘ6
BAD ORIGINAL
...11
VdL'.; ich 7 · -Ji
unternchieJIieher
,1 ncse-Mengen
Eo >-;ird ei: xac- oü.-kartoffeln ge"ionneiior 10,'cdger otärkebroi
vor.'.^il·..^. Der 7er::"ln.o .-igung s^r ad beträgt 2,5^,und die 7er-
v/ird _ 0
oncj-:eraag bei einer.i ρ- von b,ü und 4^: C in 36 h durchgeführt,
v/o^-i ;>ΰ Eirüieiueii Je :r.\-Am3luse unJ verschiedene Mangen PuI-1"
. ;vu. ? ^<i " stärke benutzt v;;r.:e::., Die Er^ebnisne sind i)i
iabelie VIi ^.u:?--inrj;>
η je stellte
χ·:belle
J.I..- | Haltöse | Zusammensetzung in -,o | Ifeiz-'üriose | Dextrin | |
Bi.* | 6,3 | 7,5 | |||
η.: ο L | Glucose | 6,3 | 5,1 | ||
1. | 55,3 | V^,0 | 13,5 | ||
2ϋ | r7,5 | 69,6 | <v:· | 3,5 | 25,7 |
200 | 53,9 | 1,0 | |||
0 | 1,1 | ||||
Die günstige Menge an zuzugebenden Pullulanase beträgt vorzugsviexGe
etT.;a 20 Einheiten je g Stärke j größerer Zusatz; hat eine
unerv.'üiiacliüs .i/irkung auf die Verzuckeraiigavirkung der Beta.-Ainylase,
7ersuch o: -/ix^kung unterschiedlicher Beta-Amylase-Mengene
κ/enii man zur Verzuckerung
20 Einheiten Pullul-uiase und
5 Einlieiten Alpha-Amylose
109840/0486
...12
sowie verschiedene Mengen Beta-Amylase je g Stärke anwendet
und im übrigen gemäß Versuch 5 verfährt, werden die aus Tabelle VIII zu ersehenden Ergebnisse erhaltene
Einheiten | Verzuckerungs | DpE.- | Zusammensetzung ir | Glucose | Malz- Trio se |
Dextrin |
ßeta- Amylase |
dauer h | Endwert % |
Maltose | 0,5 | 11,0 | 15,5 |
20 | 5 | 53,7 | 75,0 | 2,2 | 12,2 | 6,7 |
20 | 12 | 57,6 | 78,9 | 1,6 | 11,8 | 3,3 |
20 | 24 | 59,51 | 83,3 | 1,4 | 13,1 | 3,0 |
20 | 46 | 60,0 | 82,5 | 1,1 | 9,0 | 10,3 |
60 | 6 | 55,5 | 79,6 | 2,2 | 9,0 | 6,0 |
60 | 12 | 59,5 | 02,8 | 2,0 | 8,4 | 2,5 |
60 | 24 | 61,3 | 87,1 | 2,2 | 7,0 | 2,5 |
60 | 46 | 61,9 | 88,3 |
Obwohl die Erzeugung der Maltose entsprechend der beigegebenen Beta-Amylase-Menge zunimmt, ist es vom technischen
Standpunkt zweckmäßig, 30 bis 60 Beta-Amylaee-Einheiten je
g Stärke zu verwenden; die Verzuckerungszeit beträgt etwa 46 h.
9840/0486
...13
Versuch 9 : Wirkung des Zeitpunkts der Alpha-Amylase-Zugabe.
Die Menge der während der Verzuckerung hinzuzufügenden Alpha-Amylase ist begrenzt, da sie, lediglich zur Zersetzung
des restlichen Dextrins bestimmt ist. Gewöhnlich sind für diesen Zweck 5 Einheiten Alpha-Amylase je g Stärke ausreichend
j eine größere Zugabe kann die Reinheit der Maltose verschlechtern.
Den Einfluß des Zeitpunkts der Alpha-Amylase-Zugabe zeigt die Tabelle IX, aus der zu ersehen ist, daß eine
Zugabe während der Verzuckerung die besten Ergebnisse lie-
zu
fert; jedoch würde eine Vspäte Zugabe die beabsichtigte l/ir-
fert; jedoch würde eine Vspäte Zugabe die beabsichtigte l/ir-
kung nicht eintreten lassen.
Zeitpunkt | ί/.-Ει· — | Zusammensetzung in % | Maltose | Glucose | Malz-Triose | Dextrin |
der Alpha- Ämylase- Zugabe |
Endwert % |
87,3 | 1,4 | 9,1 | 2,2 | |
anfangs | 62,82 | 87,3 | 2,2 | 7,4 | 3,1 | |
6 h später | 62,80 | 88,2 | 1,3 | 7,1 | 3,4 | |
12 h später | 62,80 | £9,ö | 1,4 | 2,9 | ||
24· h später | 62,90 |
Fo ·,. ■ /.
ffn- :' ' ' "J- ■■
L) '■
11 T» r {
iOO g Maisstärke v/erden mit 4500 ml kochendem ,•/asser gelatiniert.
Die Erhaltene wässrige Dispersion unterwirft man für
ORIGINAL
109840/0486
!5 min einem Druck bei 1300O, kühlt dann auf 45°C ab und
stellt den p^-Wert auf 6,0 ein. Nach Zugabe von 100 Einheiten Beta-Amylase und
20 Einheiten eines Pullulanase-aussalzenden Enzyms
20 Einheiten eines Pullulanase-aussalzenden Enzyms
(beschrieben in der Patentanmeldung P 17 67 654-·9)
je g Stärke wird die Mischung in 4-8 h bei 450C verzuckert.
Die verzuckerte Lösung wird dann in gewohnter Weise erhitzt*
^ filtriert, konzentriert und durch Entfärbung gereinigt. Nach Eindampfen bis auf einen Wassergehalt von 15$ erhält man farblose
Kristalle« Die Analyse der Trockenbestandteile ergibt$
daß eine aus 93,0% Maltose, 1,5% Glucose, 4,0% Malz-Trio se
und 1,5% anderen Bestandteilen bestehende hochreine Maltose
gewonnen ist,
Beispiel 2: f.
100 g wachshaltiger Maisstärke werden gemäß Beispiel 1 gelatiniert
und nach Zusatz von
100 Einheiten Beta-Amyläse und
20 Einheiten Pullulanase
je g Stärke bei 45°C 10 h und nach Zugabe von 5 Einheiten
je g Stärke bei 45°C 10 h und nach Zugabe von 5 Einheiten
Alpha-Amylase je g Stärke/45 h verzuckert. Das Reaktionsgemisch
wird nun gekocht, entfärbt, konzentriert und mit Hilfe eines Ionenaustauscherharzes auf Polystyrolgrundlage (Handelsprodukte
"Amberlite" IR 120, IRA 68 oder IRA 411 der
Rohm und Haas Go,) gereinigt. Nach einem weiteren Konzentrieren
erhält man ein völlig festes Produkt mit einem Wassergehalt
109840/0486
von 13%· Die Analyse der 'frockenbestandteile ergibt einen
Gehalt von 93»5% Maltose. Die 70%ige Lösung kristallisiert
unter Bildung von Mikrokristallen. Durch Fraktionierung der Kristalle gewinnt man Maltose mit einer Reinheit von 96 bis
100 Q wachshaltiger Maisstärke werden nach Gelatinieren ge- λ
mais Beispiel 1 mit
25 Einheiten Beta-Amyläse
20 Einheiten Pullulanase und
40 Einheiten Älpha-1,6-Glycosidase ; I. --LrI- τ:, "M^i-;
mit Hilfe des Bakterienstammes Psaudomonas amyloderamosa
nach Patentanmeldung P I7 67 653.8)
je g Stärke versetzt. Nach Einstellen des pH-.fertes des Gemisches
auf 5t5 verzuckert man es bei 45°C 46 hf kocht hierauf,
reinigt in üblicher v/eise mit Aktivkohle und konzentriert.
Der gewonnene Sirup enthält 13>& Wasser und kristallisiert
unmittelbar. Fe st stoff ausbeute 95/& mit einem Maltosegehalt
der Feststoffe von #
Ein aus 500 g Kartoffelstärke bereiteter Brei mit etwa 30%
Stärke mlüd nach Zugabe von 0,2% Alpha-Amylase (Handelsprodukt
"Neospitase" der Nagase Sangyo Go.) beim pH 6 und bei
109840/04 86 bad original
...16
38°ö bis zum ü.E.-Wert 2,7 verflüssigt. Sodann führt man
den Brei durch Zusatz von heißem Waseer in eine Losung mit
einem Feststoffgehalt von 10% über.
Nunmehr werden
50 Einheiten Beta-Amylase und
25 Einheiten Pullulanase
und nach 15stündigem Verzuckern "beim pjr-Wert 6 und bei 450O
5 Einheiten der obigen/Amylase Je g Stärke zugegeben. Die
Gesamtdauer der Verzuckerung beträgt 48 h. Das Reaktionsgemisch
wird nunmehr erhitzt, filtriert, mit Aktivkohle und Ionenaustauscherharz in der gewohnten Weise gereinigt und
durch Konzentrieren auf einen Wassergehalt von 15i# zum Kristallisieren
gebracht. Ausbeute an Feststoff 92% mit einem
Maltοsegehalt der Feststoffe von 94%.
109840/0486
Claims (2)
1. Verfahren zur Herstellung hochreiner Maltose aus Stärke durch Verflüssigung und anschließende Verzuckerung mittels
Amylase, dadurch gekennzeichnet, daß man in bekannter Weise verflüssigte und auf den p^-
Wert von etwa 6 eingestellte Stärke mittelg Beta-Amylase
oder einem Gemisch von Beta- und Alpha-Amyla^e in Gegenwart
einer oder mehrerer Arten von Alpha-1,6-Glycosidasen
verzuckert.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daia
man als Alpha-1,6-Glucosidase Pullulanase oder Iso-Amylase f
verwendet.
BAD ORIGINAL
109840/0486
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