DE1165605B - Verfahren zur Herstellung von Alkylestern des Antibiotikums BA-163 - Google Patents

Description

• Verfahren zur Herstellung von Alkylestern des Antibiotikums BA-163 Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Alkylestern des Antibiotikums BA-163. Das erfindungsgemäße Verfahren besteht darin, daß man das Antibiotikum BA-163 mit einem Alkanol in Gegenwart eines sauren Katalysators oder zur Herstellung des Methylesters mit Diazomethan in Gegenwart von Äther umsetzt. Als saure Katalysatoren eignen sich z. B. Mineralsäuren, die Säureform eines Sulfonsäuregruppen enthaltenden Styrol-Divinylbenzol-Kationenaustauscherharzes oder aromatische Sulfonsäuren. Das als Ausgangsmaterial dienende Antibiotikum BA-163 wird gemäß dem Verfahren des Patents 1089 928 unter Verwendung von Streptomyces flocculus ATCC 13257, ATCC 13 535 und ATCC 13 536 oder von deren Mutanten oder Varianten auf üblichem fermentativem Wege unter submersen aeroben Bedingungen hergestellt.
• Die Alkylester des Antibiotikums BA-163 und insbesondere der Methylester besitzen starke therapeutische Wirksamkeit und eignen sich zur Behandlung von bösartigen Geschwülsten bei Menschen und Tieren. Ferner bekämpfen sie grampositive und gramnegative Bakterien. Sie haben daher viele Anwendungsmöglichkeiten in der Human- und Veterinärmedizin, in der Industrie sowie in der Landwirtschaft. Sie sind ferner als Desinfektionsmittel und zur Trennung von Mikroorganismengemischen für medizinisch-diagnostische und wissenschaftliche Zwecke wertvoll.
• Der Methylester ist in Wasser und den üblichen organischen Lösungsmitteln, wie niederen Alkoholen, Äthylacetat und Aceton, nur schwach löslich und in wäßrigem Natriumbicarbonat unlöslich. Eine alkoholische Ferrichlorid-Testlösung wird von ihm nicht gefärbt. Die Absorptionsmaxima liegen bei Verwendung eines KBr-Kügelchens, das 10/" des Äthers enthält (s. Figur), im infraroten Bereich bei folgenden Wellenlängen: 3472, 3322, 2933, 2841, 1715, 1689, 1610, 1595, 1555, 1513, 1471, 1443, 1410, 1383, 1351, 1311, 1294, 1230, 1205, 1116, 1089, 1076, 915, 868, 801, 754 cm-'.
• Die Antitumorwirksamkeit des Methylesters von BA-163 ist in Tabelle I wiedergegeben.

  Tabelle 1

  Antitumorwirksamkeit des Methylesters von BA-163

  Tumor- Dosis mg/kg Anzahl der überlebenden Tiere Hemmung

  art 0/0

  S-180 2,0 6/6 64

  S-180 1,0 6/6 21

  S-180 0,5 6/6 29

  CA-755 1,5 10/10 97

  CA-755 1,0 10/10 95 Durchschnitt von zwei Versuchen

  CA-755 0,5 10/10 74 Durchschnitt von zwei Versuchen

  L-1210 1,25 die behandelten Tiere überleben die Kontroll- 98

  tiere um das 1,7fache

  L-1210 0,75 97

  L-1210 0,25 98

  HS@; . 1 0,8 8/8 86

  HS_,:-- 1 0,5 8/8 53

  HS-: @ 1 0,3 8/8 45

  Ähnlich wie viele carcinostatische Mittel ist das Antibiotikum BA-163 und sein Methylester toxisch. Jedoch können therapeutische Dosen ohne wesentliche nachteilige Nebenwirkung verabreicht werden, wie durch die Daten in Tabelle Il veranschaulicht wird. Weiße schweizer Mäuse erhielten 5 Tage hintereinander eine Injektion von 1 cm3 wäßriger Lösung oder Suspension des Methylesters von BA-163. Nachfolgend sind die verabreichten Dosen und die überlebenden Tiere tabellarisch zusammengestellt.

  Tabelle 11

  Toxizität des Methylesters von BA-163

  Dosis Anzahl der überlebenden Tiere

  20 mg/kg 0/3

  15 mg/kg 2/3

  10 mg/kg 2/3

  Die Überlegenheit des Methylesters von BA-163 gegenüber den bekannten carcinostatischen Mitteln Triäthylenphosphoramid und Triäthylenthiophosphoramid geht aus der folgenden Tabelle III hervor.
• Die LD.O von Triäthylenphosphoramid beträgt bei Mäusen 40 mg/kg (Chemical Abstracts, Bd. 55, Sp. 7660 f). Die LD50 von Triäthylenthiophosphoramid beträgt bei intraperitonealer Verabreichung an Mäuse 24 mg/kg, bei oraler Verabreichung 45 mg/kg. Bei Ratten wurde eine LD" von 9,4 bzw. 55 mg/kg festgestellt (S 1 o b o d a und Mitarbeiter, Cancer Chemotherapy Reports, 24 [l962]. S. 7 bis 17).

  Tabelle III

  Dosis Anzahl der Hemmung

  Tumorart überlebenden

  mg/kg

  Tiere

  9/0

  Methylester von BA-163

  CA-755 5,0 5/6 97

  CA-755 3,12 10/10 98

  CA-755 2,5 6/6 94

  CA-755 1,56 10/10 98

  HS- 1 5,0 6/6 92

  HS-- 1 5,0 8/8 99

  HS-- - 1 2,5 7/8 77

  Triäthylenphosphorarnid

  CA-755 2,0 9/10 ' 82

  CA-755 1,0 101/10 78

  CA-755 0,5 10/10

  36

  Triäthylenthiophosphoramid

  HS- 1 3,75 ''`8 91

  HS@ 1 2,50 8/8 77

  HST 1 1,25 8;'8 29

  Zur Bewertung der Tumoren wurden die folgenden, in der Literatur beschriebenen Verfahren angewandt: S-180-Sarcoma 180 (R e i 11 y und Mitarbeiter, Cancer Research, Bd. 13 [1953], S. 684). HS-1-Humanes Sarcoma Nr. 1 (T o o 1 a n, a.a.0., Bd. 13 [1953], S. 389). CA-755-Mammary adenocarcinoma 755 (G e 11 h o r n und Mitarbeiter, Cancer Research, Ergänzungsband 3 [1955], S. 38). L-1210-Lymphoide Leukämie 1210 (L. W. L a w, Journal Nat. Cancer Inst., Bd. 10 [1949], S. l79).
• Die folgenden Beispiele erläutern das erfindungsgemäße Verfahren.
• Beispiel 1 Zu einer Lösung des Antibiotikums BA-163 in Dioxan wird die Diazomethanlösung in Äther in geringem Überschuß zugegeben. Nach etwa Istündigem Stehen bei Raumtemperatur wird die Lösung zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in Methylenchlorid aufgenommen und zur Entfernung des nicht umgesetzten BA-163 einmal mit 20/0igem wäßrigem Natriumbicarbonat gewaschen. Die Methylenchloridschicht wird mit Wasser gewaschen und auf ein kleines Volumen eingeengt. Danach wird die gleiche Volummenge Äther zugegeben. Der Methylester kristallisiert in Form graubrauner rechteckiger Platten, die bei 270 bis 275°C unter Zersetzung schmelzen. Ausbeute 7'1°,!o.
• Beispiel 2 Eine Mischung aus dem Antibiotikum BA-163 (1 g), Methylalkohol (25 cm3) und 1 g eines Sulfonsäuregruppen enthaltenden Styrol- Divinylbenzol-Kationenaustauscherharzes wird etwa 2 Stunden vorsichtig unter Rückfiuß erhitzt. Das Ende der Umsetzung wird durch Behandlung einer Probe mit Ferrichlorid festgestellt. Das Ausbleiben einer Farbreaktion zeigt die Vollständigkeit der Umsetzung an. Das Gemisch wird dann filtriert und das Filtrat zur Trockne eingedampft, wodurch der Methylester erhalten wird. Zusätzlicher Methylester wird durch Extraktion des Harzes mit Pyridin (30 cm), Einengen des Extraktes und Ausfällen des Methylesters durch Zugabe von Methylalkohol erhalten. Ausbeute 75 0/0.
• Beide oben angegebene Verfahren führen zum gleichen Produkt. Es handelt sich um einen graubraunen kristallinen Stoff; der bei 270 bis 275`C unter Zersetzung schmilzt. i"Zax = 245 bzw. 375 m#t; F = 43 000 bzw. 19 500.
• Analyse für C=sH",O,N.: Gefunden C 59,88V@p, H 4,75°/0, N 10.51 °/0, 0 24,860,!O,Methoxyl 23,7711,/0.
• Höhere Alkylester können in gleicher Weise unter Verwendung von Äthyl-, Propyl- oder Butylalkohol an Stelle von Methylalkohol erhalten werden.

Claims (1)

1. Patentanspruch: Verfahren zur Herstellung von Alkylestern des Antibiotikums BA-163, d a d u r c h g e k e n n -z e i c h n e t, daß man das Antibiotikum BA-163 mit einem Alkanol in Gegenwart eines sauren Katalysators oder zur Herstellung des Methylesters mit Diazomethan in Gegenwart von Äther umsetzt.