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Gelförmiges Mittel zur Abtötung von Spermien Die Erfindung bezieht
sich auf gelförmige spermicide Mittel, die zur Applikation auf die Mucosa-Oberflächen
des Vaginalhohlraumes bestimmt sind.
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Es sind bereits zahlreiche spermicide Mittel bekannt; beispielsweise
werden in der USA.-Patentschrift 2 330 846 spermicide Mittel beschrieben, die in
einem wäßrigen Träger eine ungesättigte Fettsäure mit 10 oder mehr Kohlenstoffatomen
und ein Mittel zur Herabsetzung der Oberflächenspannung enthalten, wobei die Fettsäure
in dem wäßrigen Träger dispergiert ist.
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Ferner sind aus der USA.-Patentschrift 2 556 567 wäßrige Duschlösungen
bekannt, die neben adstringierend wirkenden Zinksalzen Alkylarylpolyätheralkohole
als Netzmittel sowie die üblichen Puffersysteme auf der Basis von Wein-, Äpfel-
oder Fumarsäure enthalten. .
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In der USA.-Patentschrift 2 541 103 werden Mittel beschrieben, die
eine höhermolekulare ungesättigte Fettsäure mit wenigstens 10 Kohlenstoffatomen
und ein wasserlösliches Alkylphenoxyäthanol der allgemeinen Formel
enthalten, in der R insbesondere ein in Parastellung befindliches Diisobutylradikal
darstellt, x einen Durchschnittswert von 9,25 bis 10,25 und das durchschnittliche
Molekulargewicht einen Wert von 595 bis 639 aufweist.
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Es hat sich nun herausgestellt, daß die spermicide Wirkung der bekannten
Mittel, welche ein Puffersystem, ein wasserlösliches Alkylphenoxyäthanol der Formel
worin R ein Alkylradikal mit wenigstens 7, aber nicht mehr als 9 Kohlenstoffatomen
darstellt und x einen Wert von'mindestens 7, aber nicht mehr als 11 besitzt, oder
ein Gemisch mehrerer solcher Alkylphenoxyäthanole sowie gegebenenfalls eine höhere
ungesättigte Fettsäure mit wenigstens 10 Kohlenstoffatomen als zusätzlichen Bestandteil
enthalten, durch den Gehalt an einer aliphatischen Mono- oder Dicarbonsäure mit
wenigstens 3 bis höchstens 9 Kohlenstoffatomen erheblich gesteigert wird, wenn die
Konzentration dieser Säure so gewählt wird, daß pro Liter des fertigen Mittels neben
der Puffersäure und der gegebenenfalls vorhandenen höhermolekularen ungesättigten
Fettsäure wenigstens 20 Millimol an undissoziierter aliphatischer Mono- oder Dicarbonsäure
mit 3 bis 9 Kohlenstoffatomen vorhanden sind.
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Die in der angegebenen Mindestkonzentration vorliegende aliphatische
Säure kann eine gerade oder eine verzweigte Kette besitzen. Säuren, wie beispielsweise
Propion-, Butter-, Isobutter-, Capryl-, Bernstein- und Glutarsäure, sind besonders
geeignet, jedoch wird Bernsteinsäure vorzugsweise verwendet.
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Um ein Maximum an spermicider Wirkung zu erzielen, ist es erfindungsgemäß
notwendig, die aliphatische ein- oder zweibasische Säure in solchen Mengen dem Mittel
zuzusetzen, daß die Konzentration an undissoziierter Säure mindestens 20 Millimol
pro Liter enthält. Die zur Erreichung dieser Mindestkonzentration erforderliche
Säuremenge ist je nach der Art der verwendeten Säure verschieden; bei Bernsteinsäure
beträgt die Gesamtkonzentration mindestens 0,085 Mol pro Liter. Je größer das Molekulargewicht
der verwendeten Säure ist, desto weniger undissoziierte Säure ist notwendig. Besitzt
die aliphatische Säure 3 Kohlenstoffatome, so müssen in einem auf den pH-Wert 4,5
gepufferten System wenigstens 35 Millimol undissoziierte Säure pro Liter vorhanden
sein. Hat die aliphatische Säure jedoch 9 Kohlenstoffatome, so braucht die Konzentration
an undissoziierter Säure bei einem gleichen pH-Wert nur 20 Millimol zu betragen.
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In einer bevorzugten Ausführungsform beträgt der Durchschnittswert
von x in den wasserlöslichen AI-kylphenoxyäthanolen 9,25 bis 10,25 und das mittlere
Molekulargewicht 595 bis 639. R ist ein Diisobutylradikal der Formel
In einer vorzugsweise verwendeten besonderen Ausführungsform der Erfindung ist x
angenähert 9,75;
R wird durch ein tertiäres Octylradikal dargestellt.
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Das Säurepuffersystem kann auf einer aliphatischen ein- oder zweibasischen
Säure beruhen, welche mindestens 2, aber weniger als 10 Kohlenstoftatome enthält.
Die Säure kann eine gerade oder eine verzweigte Kette besitzen. Besonders gut als
Puffer verwendbar sind Bernstein-, Essig-, Wein- und Citronensäure.
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Man kann dem Gemisch außerdem noch eine höhermolekulare ungesättigte
Fettsäure mit wenigstens 10 Kohlenstoffatomen zusetzen, wodurch die spermicide Wirkung
weiter erhöht wird. Geeignete höhermolekulare ungesättigte Fettsäuren sind Ölsäure,
Linolsäure und vor allem die vorzugsweise verwendete Ricinolsäure.
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Das zur Herabsetzung der Oberflächenspannung dem Gemisch zugegebene
Netzmittel ermöglicht eine feine Verteilung der ungesättigten Fettsäure, wodurch
die spermicide Wirkung günstig beeinflußt wird.
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Als Träger kommen vorzugsweise Gele aus Wasser und gelbildenden Bestandteilen,
besonders Cellulosederivaten, in Frage, obwohl als Gelbildner auch Pflanzengummi
oder synthetischer Gummi verwendet werden können. Eine eingedickte Masse aus Wasser
und einem Pflanzengummi, wie z. B. Tragant oder Akazia oder einer Kombination dieser
beiden oder auch anderer, in einem pff-Bereich von 4,0 bis 8,5 stabiler Pflanzengummen,
kann beispielsweise ebenfalls als Träger verwendet werden. Cellulosederivate, wie
z. B. Celluloseäther, besonders Methylcellulose, Äthylcellulose, Carboxymethylcellulose
u. dgl., sind in einem pÄ Gebiet von 4,0 bis 8,5 stabil und liefern durch Vermischen
mit Wasser ausgezeichnete wäßrige Träger.
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Kombinationen von mehreren Cellulosederivaten oder Kombinationen von
einem Cellulosederivat und einem Pflanzengummi können in gleicher Weise zur Herstellung
des wäßrigen Trägers verwendet werden.
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Man kann den Träger mit einer oder mehreren aliphatischen ein- oder
zweibasischen Säuren, einem oder mehreren Alkylphenoxyäthanolen und einer oder mehreren
ungesättigten Fettsäuren vermischen. Die Menge der in dem wäßrigen Träger vorhandenen
Bestandteile, nämlich der aliphatischen Säure, des Alkylphenoxyäthanols und der
Fettsäure, ist gering. Vorzugsweise beträgt das Gewichtsverhältnis zwischen aliphatischer
Säure, ungesättigter Fettsäure und Alkylphenoxyäthanol einerseits und dem Träger
andererseits nicht mehr als ungefähr 5:100 oder 1:100.
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Nach Wunsch kann man dem Gemisch auch antiseptische Substanzen, wie
z. B. Borsäure, Oxychinolinsulfat, Phenole, Kresole, Thymole und bzw. oder chlorierte
Thymole, zusetzen, ferner eine Substanz, die eine Verflüssigung der gelartigen Masse
durch bakterielle Zersetzung verhütet, beispielsweise p-Oxybenzoesäurepropylester,
einen hygroskopischen Stoff, wie z. B. Glycerin, sowie Parfüme u. dgl, Die Erfindung
wird im nachfolgenden an Hand der Ausführungsbeispiele veranschaulicht.
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Die in den Beispielen verwendeten spermiciden Mittel werden nach der
folgenden allgemeinen Vorschrift zubereitet. Alle Zahlenangaben steilen Gewichtsteile
dar.
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Man löst den p-Oxybenzoesäureester in ungefähr zwei Dritteln des heißen
destillierten Wassers auf, kühlt auf etwa 77° C ab und fügt unter gutem Umrühren
die gelbildenden Bestandteile sowie das Glycerin oder Propylglykol zu (Lösung A).
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Unabhängig hiervon gibt man das zur Herabsetzung der Oberflächenspannung
verwendete Netzmittel in ein Gemisch aus der höhermolekularen ungesättigten Fettsäure
und dem Rest des destillierten Wassers und fügt dann die aliphatische ein- oder
zweibasische Säure hinzu; schließlich stellt man den gewünschten pH-Wert mit Natriumhydroxyd
ein (Lösung B).
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Man erhält das fertige Mittel, wenn man Lösung B langsam in schwachem
Strahl unter gutem Umrühren in Lösung A einrührt; das Umrühren ist dann noch mindestens
1 Stunde lang fortzusetzen. Beispiel I Destilliertes Wasser ........................
82,60 Natrium-carboxymethylcellulose .... ........ 3,50 Glycerin ................................
.... 5,00 p-Oxybenzoesäuremethylester ................ 0,20 Gemisch von p-Diisobutylphenoxy-polyäthanolen
der allgemeinen Formel
in der x einen Annäherungswert von 9,75 besitzt ...................................
1,00 Beinsteinsäure .............................. 5,00 Ricinolsäure .........
» ...................... 2,70 Beispiel II Destilliertes Wasser ........................
89,30 Natrium-carboxymethylcellulose ............. 3,50 Propylenglykol .............................
5,00 p-Oxybenzoesäuremethylester ........... . .... 0,20 Gemisch von p-Diisobutylphenoxy-polyäthanolen
der im Beispiel I dargestellten Formel ...... 1,00 Bernsteinsäure ..............................
1,00 Beispiel III Destilliertes Wasser ................ , ....... 89,06 Hydroxyäthylcellulose
...................... 3,50 Propylenglykol ............................. 5,00 p-Oxybenzoesäuremethylester
................ 0,20 Gemisch vonp-Diisobutylphenoxy-polyäthanolen der im Beispiel
I dargestellten allgemeinen Formel ......................... ''..
..... 1,00 Adipinsäure" ................................ 1,24
Beispiel
IV Destilliertes Wasser ........................ 88,94 Methylcellulose .............................
3,50 Propylenglykol ............................. 5,00 p-Oxybenzoesäuremethylester
................ 0,20 Gemisch von p-D i isobutylphenoxy-polyäthanolen der im Beispiel
I dargestellten allgemeinen Formel .................................. 1,00 Pimelinsäure
............................... 1,36 Beispiel V Destilliertes Wasser ........................
88,13 Natriumalginat ............................. 3,50 Propylenglykol .............................
5,00 p-Oxybenzoesäuremethylester ................ 0,20 Gemisch von p-Diisobutylphenoxy-polyäthanolen
der im Beispiel I dargestellten allgemeinen Formel ..................................
1,00 Bernsteinsäure ....................... ...... 1,00 Ölsäure
................. .................. 1,17 Beispiel VI Destilliertes Wasser
........................ 87,89 Tragantgummi .............................. 3,50
Propylenglykol . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5,00 p-Oxybenzoesäuremethylester
.......... .... 0,20 Gemisch von p-Diisobutylphenoxy-polyäthanolen der im Beispiel
I dargestellten allgemeinen Formel .................................. 1,00 Adipinsäure
................................ 1,24 Linolsäure ............. .................
1,17 Beispiel VII Destilliertes Wasser .............. ......... 87,77 Natrium-carboxymethylcellulose
............. 3,50 Propylenglykol ............................. 5,00 p-Oxybenzoesäuremethylester
................ 0,20 Gemisch von p-Diisobutylphenoxy-polyäthanolen der im Beispiel
I dargestellten allgemeinen Formel .................................. 1,00 Pimelinsäure
............................... 1,36 Ricinolsäure . » .... . .........................
1,17 Die spermicide Wirkung wurde auf folgende Weise bestimmt Je 1 g der spermiciden
Mittel gemäß den Beispielen I bis VII wurde in je ein Reagenzglas eingebracht, welches
99 g einer auf einen pH-Wert von 3,9 bis 4,1 gepufferten physiologischen Kochsalzlösung
enthielt. Die Kochsalzlösung besaß eine Konzentration von 9,0g Natriumchlorid pro
Liter Wasser, und der in der Kochsalzlösung verwendete Puffer bestand aus saurem
Kaliumphthalat und Natriumphosphat. Die gepufferte Salzlösung allein wirkt nicht
spermicid und besitzt nicht die Eigenschaft. Spermien unbeweglich zu machen. Das
Reagenzglas wurde kräftig geschüttelt, bis sich das Gel gleichmäßig in der Salzlösung
verteilt hatte. 1 ccm der Salzlösungen wurde jeweils in ein zweites Reagenzglas
eingebracht, welches 0,2 ccm frischen menschlichen Samen enthielt; der Inhalt des
zweiten Glases wurde schnell vermischt und mikroskopisch untersucht, um die Aktivität
der Spermatozoen zu bestimmen. Die Vermischung des Inhaltes des zweiten Reagenzglases,
das Aufbringen einer Probe auf einen Objektträger und die anschließende mikroskopische
Untersuchung erforderte mindestens 20 Sekunden; die als »weniger als 20 Sekunden«
angegebenen Testergebnisse bedeuten deshalb, daß die Spermatozoen bereits bei der
ersten Beobachtung unter dem Mikroskop unbeweglich waren. In den Fällen, in denen
die Spermatozoen bei der ersten Prüfung unter dem Mikroskop noch Beweglichkeit zeigten,
wurde die genaue Zeit bis zur vollständigen Unbeweglichmachung durch ständige Beobachtung
der untersuchten Probe auf den Objektträger festgestellt. Diese Zeit wird als »Abtötungszeitt<
definiert, denn unbewegliche Spermien sind unfähig, ein Ei zu befruchten oder ihre
Beweglichkeit wiederzuerlangen.
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Es wurden drei Reihen von Untersuchungen vorgenommen, und zwar im
Abstand von einigen Tagen, um die spermicide Aktivität der Mittel nach den. Beispielen
zu bestimmen. Jedes Mittel wurde dreimal untersucht. Jede Testreihe wurde mit Samenprobe
durchgeführt, welche durch Vereinigung individueller Specimen von drei Gebern entstand.
Die Samenproben wurden gesammelt, vereinigt und innerhalb weniger Stunden verwendet,
um sicherzustellen, daß die Spermatozoen zur Zeit der Untersuchungen ihre volle
Beweglichkeit besaßen. In allen Fällen waren die Spermatozoen in weniger als 20
Sekunden vollständig unbeweglich.
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Um zu zeigen, daß die angegebene Mindestkonzentration von 20 Millimol
undissoziierter Säure für die spermicide Wirkung entscheidend ist, wurde die folgende
Zusammensetzung geprüft: Destilliertes Wasser .................... 86,61 Natrium-carboxymethylcellulose
........ 3,50 Glycerin ............................... 5,00 p-Oxybenzoesäuremethylester
........... 0,20 Gemisch von p-Diisobutylphenoxy-polyäthanolen der Formel
| worin x einen ungefähren Wert vön |
| 9,75 besitzt .......................... 1,00 |
| Fumarsäure ............................ 0,99 |
| Ricinolsäure ........................... 2,70 |
| 100,00 |
Bei der Prüfung dieser Zusammensetzung nach der oben beschriebenen Methode ergab
sich eine Spermtötungszeit von 310 Sekunden, während der Ersatz der 0,99 Teile Fumarsäure
durch 1,00 Teil Bernsteinsäure die Spermtötungszeit auf 30 Sekunden abkürzte.
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Bernsteinsäure hat bekanntlich einen niedrigen Dissoziationsgrad,
so daß die Verwendung von 1 Teil auf 100 Teile Gemisch eine Konzentration von mindestens
20 Millimol undissoziierter Säure pro Liter ergibt. Fumarsäure dagegen ist viel
stärker dissoziiert, so daß diese Mindestkonzentration im vorliegenden Fall nicht
erreicht wird.
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Es ist möglich, aus den bekannten Dissoziationskonstanten auf den
Dissoziationsgrad in dem fertigen
gelartigeri Mittel nach der Erfindung
zu schließen, d. h. zu berechnen, welche Menge Säure zur Erreichung der erfindungsgemäß
verlangten Mindestkonzentration undissoziierter Säure zugegeben werden muß. Allgemein
beruht diese Berechnung auf der Henderson-Hasselbach-Gleichung, die auf Komplexsysteme,
wie sie hier vorliegen, erweitert worden ist. Anweisungen für die Berechnung finden
sich beispielsweise in H. S. S imms, »Journal of the American Chemical Society«,
48, S. 1251 (1926).
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Eine Mindestkonzentration von 20 Millimol undissoziierter Säure ist
notwendig, um einem Mittel eine Abtötungszeit von 20 Sekunden zu verleihen, wenn
es nach dem im vorstehenden beschriebenen Verfahren untersucht wird. Die Abtötungszeit
ist eine Funktion der restlichen undissoziierten Säure, die vorhanden ist, wenn
das Mittel und die Spermflüssigkeit vermischt worden sind, und ein Mittel mit wenigstens
20 Millimol undissoziierter Säure wird auch nach der Vermischung noch genügend undissoziierte
Säure aufweisen, um die Spermien in höchstens 20 Sekunden abzutöten.
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Die Mittel nach der Erfindung können über einen weiten pH-Bereich
gepuffert werden, aber dieser Bereich ist durch die Notwendigkeit begrenzt, eine
Reizung der Vaginalmucosa zu verhüten. Mittel mit einem pH-Bereich zwischen 4 bis
8,5 und einer Pufferkonzentration unter dem im nachstehenden angegebenen kritischen
Wert zeigen hinreichend niedrige Reizwirkung, um als kontrazeptive Mittel verwendet
werden zu können. Bei niedrigen, innerhalb des nicht reizenden Bereiches liegenden
p11-Werten ist eine geringere Menge undissoziierter Säure notwendig als bei pH-Werten,
die an der oberen Grenze liegen, wenn die spermicide Zeit entsprechend der oben
beschriebenen Untersuchungen weniger als 20 Sekunden betragen soll.
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Es ist notwendig, daß die Pufferkapazität des Mittels der Pufferkapazität
einer der oben als geeignet für das Säurepuffersystem aufgeführten Säuren äquivalent
ist, sofern diese in einer Konzentration von weniger als 0,775, aber mehr als 0,01
Mol pro Liter vorliegen. Die für das Puffersystem verwendete Säure muß so gut wasserlöslich
sein, daß die zur Erzielung einer im obenerwähnten Bereich liegenden Pufferkapazität
notwendige Konzentration der Lösung erreicht werden kann. Entspricht die Pufferkapazität
weniger als 0,01 Mol pro Liter, so wird die undissoziierte Säure nicht in der nötigen
Konzentration in dem Mittel vorliegen. Ist die Pufferkapazität größer als 0,775
Mol pro Liter, wird die Konzentration der Säure so hoch sein, daß Reizungen der
Vaginalmucosa eintreten.
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Als Pufferkapazität kann man das Produkt aus Pufferkonzentration und
Pufferindex definieren, wobei man unter Pufferindex die zur Erhöhung des p11-Wertes
innerhalb eines gegebenen Bereiches um eine Einheit nötige Menge Alkali versteht.
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Es folgt eine Zusammenfassung von Testergebnissen, die die Wirkung
der erfindungsgemäßen Mittel veranschaulichen Bei einer Reihe von Präparaten nach
Beispiel 1 wurde die Säuremenge variiert und in drei Fällen Bernsteinsäure durch
die in der Tabelle angegebenen Säuren ersetzt. Die gesamte Säurekonzentration jedes
Mittels ist in Mol pro Liter ausgedrückt. Alle Mittel wurden auf einen pH-Wert von
4,5 eingestellt. Tabelle 1 gibt die Abtötungszeiten wieder, die nach dem oben beschriebenen
Verfahren bei diesen Mitteln gemessen wurden.
| Tabelle 1 |
| Säure Konzentration Abtötungszeit |
| (Mol pro Liter) I (Sekunden) |
| Bernsteinsäure .... 0,0095 600 |
| Milchsäure ....... 0,001 800 |
| Pimelinsäure ..... 0,002 35 |
| Bernsteinsäure .... 0,010 weniger als 20 |
In Tabelle 2 sind Abtötungszeiten in Sekunden angegeben, die ebenfalls nach der
oben angegebenen Methode erhalten wurden, jedoch mit der Änderung, daß bei der Durchführung
der Versuche gleiche Volumina des Mittels und der Samenflüssigkeit vermischt wurden.
Es wurde eine Reihe von Mitteln entsprechend Beispiel I untersucht, bei denen die
Konzentration an undissoziierter Bernsteinsäure variiert wurde, um eine Reihe von
Gelen herzustellen, bei denen die Konzentration an undissoziierter Säure, ausgedrückt
in Millimol pro Liter, anstieg. Alle Mittel wurden auf einen pA Wert von 4,5 eingestellt.
| Tabelle 2 |
| Undissoziierte Säure Abtötungszeit |
| (Millimol pro Liter) , (Sekunden) |
| 35 weniger als 20 |
| 22 35 |
| 12 310 |
| 2,5 400 |
| 0,2 7200 |
In Tabelle 3 sind Abtötungszeiten in Sekunden angegeben, die ebenfalls nach der
oben beschriebenen Methode erhalten wurden, jedoch mit der Änderung, daß gleiche
Volumina des Mittels und der Samenflüssigkeit vermischt wurden. Es wurden mehrere
Präparate untersucht, die nach Beispiel 1 hergestellt wurden, in denen die Konzentration
an undissoziierter Bernsteinsäure jedoch variiert wurde. Die pH-Werte von Tabelle
3 beziehen sich auf die Mischung von spermicidem Mittel und Samenflüssigkeit. Die
Ergebnisse zeigen, daß die zur Erreichung einer AbtÖtungszeit von weniger als 20
Sekunden erforderliche Menge an undissoziierter Säure zunimmt, wenn der pH-Wert
von 4 auf 7,4 ansteigt. Die Säurekonzentration ist in Millimol pro Liter ausgedrückt.
| Tabelle 3 |
| Undissozüerte Abtötungszeit |
| pg Bernsteinsäure |
| (Millimol pro Liter) (Sekunden) |
| 4,5 35 weniger als 20 |
| 7,2 35 210 |
| 7,4 42 weniger als 20 |
Propionsäure ergibt die folgenden Werte:
| Undissoziierte Säure Abtötungszeit |
| PR I Millimol pro Liter) I (Sekunden) |
| 4,5 30 weniger als 20 |
| 7,4 30 500 |
| 7,4 40 weniger als 20 |
Isocapronsäure ergibt die folgenden Werte:
| undissoziierte Säure Abtötungszeit |
| PH I (Millimol pro Liter) I (Sekunden) |
| 4,0 23 weniger als 20 |
| 5,0 24 300 |
| 5,0 28 200 |
| 5,0 30 ' weniger als 20 |
Ferner wurde die spermicide Wirkung des erfindungsgemäßen Gemisches mit der des
Gemisches nach Beispiel II der USA.-Patentschrift 2 541
103 verglichen, das
in Gewichtsprozenten die folgende Zusammensetzung aufweist: Ricinusölsäure ........................
0,75 Borsäure ............................. 3,0 Oxychinolinsulfat .....................
0,025 Propyl-p-oxybenzoat .................. 0,05 Glycerin ..............................
5,0 Akazia ............................... 0,5 Tragant ..............................
3,0 Duftstoffe ............................ 0,025 Mischung von p-Diisobutylphenoxyäthanolen
der Formel
in welcher R Diisobutyl ist und x einen annähernden Wert von 9,75 besitzt .. 1,0
Wasser, dessen PH-Wert mit Essigsäure auf 4,5 eingestellt ist . ....... ... .. ...
87,65 Der Vergleichsversuch wurde wie folgt durchgeführt Mittels einer 1-ml-Spritze
wurde 0,05 ml Gel auf den Boden eines Reagenzglases von 9 mm Durchmesser und 4 bis
6 cm Länge aufgebracht. Darauf wurde 0,1 ml Samen in das Versuchsröhrchen gebracht
und sofort genau 10 Sekunden lang mittels eines Rührstabes mit dem Gel vermischt.
Ein Tropfen des Gemisches wurde auf ein Objektglas gebracht und unter dem Mikroskop
auf die Spermienbeweglichkeit untersucht. Falls alle Spermien dieses Tropfens innerhalb
20 Sekunden getötet waren, wurde wiederum 0,1 ml Samen zu dem gleichen Röhrchen
hinzugefügt, 10 Sekunden lang gemischt und wiederum ein Tropfen entnommen. Dieses
Verfahren wurde so lange fortgesetzt, bis bei der ersten Beobachtung nach dem Zusatz
lebende Spermien zu beobachten waren. Von diesem Gemisch wurden dann weitere Tropfen
genau nach 25, 45, 60 Sekunden entnommen. Falls nach 45 Sekunden eine Abtötung der
Spermien festzustellen war, wurde der Zusatz von Samen fortgesetzt, bis das Samenvolumen
erreicht war, bei dem eine Abtötung nach 60 Sekunden eintrat.
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Nach diesem Verfahren wurden die folgenden Versuchsergebnisse ermittelt:
| Versuche mit einem Mittel nach Beispiel I |
| Samendosis |
| (Einheit: Kontaktzeit - = tot Abtötungszeit |
| 0,1 ml (Sekunden) + = lebend |
| Samen) |
| 1 12 - |
| 2 12 - |
| . 3 12 - 20 Sekunden |
| 4 12 - |
| 5 14 - |
| 6 14 + |
| 12 + |
| 7 20 + 40 Sekunden |
| 40 - |
| 15 |
| 8 25 + 45 Sekunden |
| 30 + |
| 45 - |
| 15 + |
| 9 25 + 45 Sekunden |
| 45 - |
| 15 + |
| 25 + . |
| 10 45 + über 1 Minute . |
| 60 + |
| 140 + |
| Versuche mit einem Mittel nach Beispiel II |
| der USA.-Patentschrift 2 541103 |
| Samendosis Kontaktzeit - = tot Abtötungszeit |
| (Sekunden) I + = lebend |
| 12 + |
| 35 + |
| 1-0,1m1 60 + 70 Sekunden |
| 70 - |
Es wird noch darauf aufmerksam gemacht, daß die in der USA.-Patentschrift 2 541
103
angegebenen Abtötungszeiten bei Verwendung von Kochsalzlösungen gemessen wurden.
In einer Salzlösung ergeben sich jedoch beträchtlich kürzere Zeiten als bei einem
Gel, vermutlich, weil die aktiven Moleküle leichter beweglich sind und größeren
Bewegungsraum haben.