CZ99797A3 - Purine and guanine compounds as pnp inhibitors - Google Patents

Description

(57) Anotace:

Sloučeniny obecného vzorce I, mající použitelnost jako inhibitory PNP.

CZ 997-97 A3 , \

Purinové a guáninové

Oblast techniky sloučeniny jai

Vynález se týká purinových a guaninových derivátů, které jsou, zvláště účinné purinonukleosidofosforylasóvé (PNP5 inhibitory, způsobů jejich přípravy, farmaceutických prostředků obsahujících tyto sloučeniny a jejich použití na inhibování purinnukleosidfosforylasy a pro léčení stavů u savců, které jsou citlivé na purinnukleosidfosforylasovou inhibicí.

Dosavadní stav techniky .

O 9~arylmethy1-substituovariých purinech (včetně guaninů? bylo referováno jako o PNP inhibitorech v evropské patentové přihlášce 178,178 v podstatě odpovídající U-S. patentu 4,772, 606; o 9-arylmethy1-Substituovaných purinech (včetně guaninů), ve kterých arylový kruh obsahuje skupiny kyseliny fósforité, bylo. rovněž referováno jako o PNP inhibitorech v evropské patentové přihlášce 463,297 a VO 92/05180. O modifikovaných purinech, jmenovitě 9-deazapurinech, rovněž jako o PNP inhibitorech bylo referováno v U.S. patentech US 4,985,434;

US 5,008,265; US 4,985,433; US 5,236,926 a US 5,008,270.

Údaje o PNP inhibitorech, uvedená v Drugs of the Futuře, 13, 654 (19885, Agénts and Actions, 21, 253 (1.9875,

Proč Nati flcad Sci USA, 88, 11540 (19915 a V0 90/01021 ukazují, že modifikace guartinóvé báze významně mění PNP inhibiční schopnost takovýchto sloučenin. Rovněž modifikace arylového kruhu 9-deza(9-aryImethyl 5puririů výrazně mění PNP inhibiční aktivitu. Jmenovitě nahrazení pyridinového kruhu piperidinem Silně sníží aktivitu, jak.je tó doloženo v IL Farmaco, 48 (25, 297 (19935.

•5

Podstata vynálezu

Tehto vynález se týká sloučenin obecného vzorce I

kde- n = 0 - 2;

R¹ je H, NHa nebo halogen:

R² je H nebo NH2 :

R³ je některá ze čtyřech skupin a), b), č), d):

kde m = 0 nebo 1;

X je 0. NR⁵ nebo S(O)o 2 a. ve skupině tO, jsou X stejné nebo různé:

R⁴ je H nebo jedna nebo více skupin nezávisle vybraných z Ci-ealkyl -Ř⁶ a .aryl-R⁶ ;

R^s jé Hi Ci-6alky 1-R⁶ , Cž-6-dlkenýl, aryl. -ařyl-Ci-ealkyl, -Gi-eaíkyl-aryl, -Ci-salkyl-heteroCCi-e >alkyl,

CO2C1-nalky 1-R⁶ , CONH-Ci-ealky 1-R⁶ , CO-Gi-ealky 1-R⁶ nebo SO2-Ci-ealky 1-R⁶ : a

I»

- 3 R⁶ je H, CQzH, GCfeCi-ealkyl, CONH2, COfKCi-6 a lky 1 >2 ,

CONHíCi-6alkyl), CO-Či-6alky1, CO-aryl. CO-heteroaryl, tertrazolyl, NHSO2CF3 , SQ2NH-C1-6alkyl, SEteHCCi-ealkyDz , StfeNH-arýl, NHCO-Ci-ealkyl, NHCONH-Ci-ealkyl, NHCONH-aryl, NHSO2-C1-6alkylNHS02-aryl, CN, NH2, OH, O-Ci-ealkyl nebo O-áry.l;

v jakékoliv tautomeřní formě., formě soli, šólvátové a/nebo hydratové formě.

Sloučeniny podle vynálezu jsou zejména prospěšné u savců jako purinonukleosidófósforylasově (PNP) inhibitory, jako selektivní inhibitory T-buněk a pro potlačení buněčně imunity. Mohou tak být použity pro léčění autoimunních chorob, odmítání transplantátů, psoriásy nebo dny savců. Mohou být rovněž použitý přo umocnění protiviřového a protinádorového efektu protivirových nebo protinádorových purinových riukleosidů.

Bude kladně oceněno, Že sloučeniny podle vynálezu obsahují jeden nebo více asymetrický substituovaných uhlíkových atomů. Přítomnost jednoho nebo více těchto asymetrických center ve sloučenině obecného vzorce I dává vzniknout stereoižoraerům a v každém případě se má vynález chápat tak, že zahrnuje všechny takové stereoižomery, včetně ěnantiomerů a diasteroizomerů a směsí včetně jejich racemátóvých šměsí:.

V tomto vzorci je čára ~ použita na potenciálních asymetrickýčh centrech pro Znázornění možnosti konfigurací R- a Š- a čára < a Čára ..... pro znázornění specifické konfigurace na asymetrickém centru.

Ták ják je použito v tomto popisu, termín Ci-ealky1, samotný nebo v kombinaci odkazuje ná nerozvětvený nebo rozvětvený řetězec alkylové skupiny, mající od jednoho do šesti uhlíkových atomů, včetně například skupin methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, t-butyl, pentyl. hexyl apod.

Termín ”G2-6.alkenyl odkazuje na nerozvětvený nebo rozvětvený řetězec álkylové skupiny, mající dva až sest uhlíkových atomů a mající dále jednu dvojnou vazbu, buď v E nebo Z stérochemické poloze, tam kde je to.aplikoyatelné. Tento termín bude zdhrnovat například skupiny vinyl, 1-prúpenyl, ia 2-butenyl. 2-inethy 1-2-propenýl atd.

Termín aryl znamená volitelně substituovanou fenylovou nebo naftylovou skupinu se substituentera (substituenty) vybraným např. z halogehu, trif1uormethy1u, Či-éalkylu, feriylu apod Termín halogen znamená fluor, chlor, brom nebo jód.

Termín “hetero znamená kyslík, síru (ve všěch možných oxidačních stupních) nebo dusík volitelně substituovaný H nebo Ci-eakylemTěrmín heteroaryl znamená aromatický systém, obsahující

5-10 atomfi. z nichž nejméně jeden atom je ze skupiny O, S nebo W.

Termín cykloalkyl znamená nasycený kruhový řetězec, obsahující 3-9 uhlíkových atomů a substituovaný cykloalkyl. znamená cykloalkylóvý řetězec volitelně substituovaný substituenty vybranými například z halogenu, trif1uormethylu, Ci-éalkylu, fénýlu apod.

Soli sloučenin vzorce I zahrnují farmaceuticky přijatelné soli, např. kyselé adiční soli odvozené ód anorganických.nebo organických solí, jako chloridy, bromidy, jodidy, p-toluensulfonaty, fosforečnany, sírany, chloristany, oetany, trifluoracetáty, propionaty, citrany, malonaty, sukeinaty, laktatys óxalaty, tartařaty a benzoatySoli jsou rovněž tvořeny zásadami- Takové soli zahrnují soli odvozené oď anorganických nebo organických zásad., napřsoli alkalických kovů jako hořčíku nebo vápenaté soli a soli organických aminů jako soli moříolinu, piperidinu, dimethyláminu nebo d i ethyl aminu.

Jako část tohoto vynálezu, jakákoliv, skupina sloučenin, ve které je přítomna esterová funkční skupina ínapříklad jestliže R⁵ je GO2-Ci-6alky1-R⁶), takový ester smí nabývat formu matabolíčky labilního esteru, ve kterém alkoholovou část představuje například ethylová, benzylová, fenethylová, . fenylpropylová, «- nebo β-naftylová, 2,4-dimethýlfenylová,

4-terc.butyfenylová, 2,2,2-trifluorethylová* 1-<benzyloxy)benzylová, l-<behzyloxy)ethylová, 2-methýl^l-propioriyloxy- ... própylová, 2,4* 6-triméthylbenzyloxymethylová nebo pivaloyloxymethylová skupina.

Odborník rovněž pozná, že guaniny vzorce I existují v tautomerních formách, vyobrazených dole.

.Výhodné sloučeniny podle vynálezu zahrnují ty, ve kterých nezávisle nebo v konbinacích:

η = 1;

R¹ j é nH2 nebo halogen; .

R² je NH2;

R³ je některá ze skupin a), b) nebo c) a X je 0, S nebo NR⁵;

R⁴ je H nebo Ci-ealkyl-RÁ;

R⁵ jé 'Ci-ealkyl-R⁶; a

R⁶ je H. CO2H, CCte-Ci-ealkyl, OH, NH2, tetrazolyl nebo NHSO2CF3.

Výhodné sloučeniny zahrnují soli, solváty a hydráty takovýchto sloučenin. V každém z případů a) nebo b) nebo c) sloučeniny zahrnují všechny-možné substituční modely R⁴ na kruzích a mnohé rovněž obsahují Ř⁴ substituci na více než jedné poloze na kruhu.

'Sloučeniny podle vynálezu jsou Zejména užitečné pro selektivní potlačování T-buňkové zprostředkované imunity u savců a pro léčení stávfi Savců, na kterých sé podílejí T-buňky: ty zahrnují, ale nejsou na ně omezeny, autoimunní choroby, odmítání transplantátů, psOriasu a driu. Poruchy, ža jejichž původ se považuje autoimunita zahrnují, ale nejsou na ně omezeny, rheumatickou arthritidu. systémový lupus erýthernatosus, myasthenia gravis, diabetes typu I a roztroušenou sklerózu.

Sloučeniny podle vynálezu jsou rovněž užitečné pro inhibici in vivo metabolické degradace purinnukleosidů prostřednictvím fosforolašy a tak jsou užitečné pro umocnění protivirově a protinádorové účinnosti 2’ a/nebo 3*-mono- nebo dideoxypurinonukleošidů. Například jsou užitečně pró umocnění 2’·., 3’ -dideoxyadenosinu, 2* , 3'-diděoxyguanosinu nebo 2',3*dideoxyinosinu pro léčení retrovirových infekcí jako je. syhdrom získané imunitní nedostatečnosti (AIDS). Rovněž jsou užitečné pro.umocnění protinádorového/cytotoxického efektu například 2’-deoxyguanos.i nu u savců.

Sloučeniny podle vynálezu jsou rovněž užitečné pro léčení parazitických poruch, ve kterých parazit využívá PNP pro generování vlastních složek DNA (tj. purinových bází)- Inhibice parazitní PNP sloučeninámi podle tohoto vynálezu, například malárie, způsobí smrt parazita.

Shora uvedené vlastnosti jsou demonstrovatelné při testech in vitro a in vivo, používajících výhodně savce, například krysy, myši, psy, telata a na buňkách 2 nich izolovaných. Tyto sloučeniny je možno aplikovat in vitro ve formě roztoků, např.

výhodně vodných roztoků a in vivo buď vnitřně nebo parenterálně; výhodně orálně nebo intravenozhě- Dáívkování in vitro je v Diezích molárních koncentrací 10⁵ a ÍO '¹ Dávkování ín vivo se pohybu je v mezích, v závislosti, na.cestě podávání, mezi 0,01 a 50 mg/kgPŇP inhibiče se měří radiócheroicky měřením tvorby ¹⁴C-guaninu z ¹⁴C-guanosinu s použitím modifikace metody použité dříve <J-C, Sircar a kol l J. Med. Chem. 29 1804 <19860, používající telecí slezinu jako enzymový zdroj a lmM fosforečnan. Výsledky jsou vyjádřeny jako hodnoty ÍC50, odpovídající koncentraci sloučeniny, požadované pro dosažení 50% snížení tvorby guanihu.

Umocnění inhibiční aktivity buňkového růstu Ccýtótoxicity) 2'-deoxyguanosinu <D-Gúo) sloučeninami podle vynálezu je stanovováno následovně: buňky MOLT-4 se pěstují v médiu RPMT-1640- K suspenzh.ím kulturám těchto buněk se přidá d-Guo v konstantní koncentraci <10 mM) á ověřovaný inhibitor PNP v koncentracích proměnných. Stupen buněčné proliferace Se měří přidáním ³H-thymídinu v posledních Ϊ6 hodinách, celkové kultivační periody 72 hodin. Úroveň začlenění ³H-thymidinu se stanovuje kapalnou scintilační spektrometrií. Z těchto dat se vypočítává ICbo jako koncentrace inhibitoru PNP, potřebná pro snížení začlenění ³H-thymidinu na 50% téhož v kontrolních kulturách- Táto metoda je podobná původně používané pro stanovení účinnosti PNP inhibitorů na umocnění toxicity d-Guo <I.S. Kázmers, Science, 24, 1137-1139 <1981); a další odkazy). PNP inhibiče je rovněž stanovována in vivo v podstatě tak, jak je popsáno v Ágents and Actions, 22, 379 <1987) měřením sloučeninou vyvolaným zvýšením hladiny plasmového ínosinu u krys.

Účinnosti sloučenin vzorce I v in vivo modelu T-bunkami zprostředkovaného onemocnění se demonstruje pomocí použití dinitrofluorbenzenem <ĎNFB) senzitivovaného modelu kontaktní dermatiďy. DNFB se ve vhodném nosiči aplikuje lokálně na mladé dospělé myší samice Balb/c ve dnech Ϊ a 2- V den 6 se zvířata imunologicky testují aplikací DNFB do jednoho ucha. Sloučeniny podle vynálezu se dávkují vhodnou cestou ve vhodném nosiči. Stanovení účinnosti se provádí.řadou způsobů, jejichž jedním příkladem je měření tlouštky ucha pomocí posuvného měřítka. Výsledky se vyjadřují jako procentické snížení Zánět1 ivé odezvy. Tato metoda je podobná metodě., uvedené v W094/23309.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou připravovány jakýmkoliv vhodným technicky známým způsobem a/nebo následujícím způsobem, který sám tvoří část tohoto vynálezu:

Podle druhého aspektu vynálezu je poskytován způsob přípravy sloučeniny obecného vžořce X, jak byl definován shora Bude kladně oceněno, že tam, kde je požadovali specifický stereoizomeř vzorce I, použije se zde popsaný postup syntézy s příslušným homoizomerním (homochiřalní) výchozím materiálem a/nebo se izomery oddělí ze směsí š použitím konvenčních Separáčních technologií (např- hplc - vysokotlaké kapalné chromátograf ie).

Sloučeniny podle vynálezu se připravují, následujícím způsobem. V popisu a ve vzorci dole jsou skupiny R¹, R², R³,

R4, R⁵, R⁶, X, nám definovány jak bylo uvedeno shora, pokud s výjimkou není uvedeno jinak. Bude oceněno, že funkční skupiny jako aminové, hydroxylové nebo karboxylové skupiny, přítomně v různých dole popsaných sloučeninách a které je žádoucí zachovati vyžadují, aby byly v chráněné formě, dříve než je nastartována jakákoliv reakce. V takovýchto případech je odstranění chránící skupiny konečným krokem konkrétní reakce. Vhodné ochranné skupiny jako takovéto funkční skupiny jsou odborníkovi zřejmé. Specifické podrobnosti viz Protective Groups in the Organic Šýnthesis (Ochranné skupiny v organické syntéze)“, Wíleý Intersciene, T.V. Greené, P.,G.M- Vutts.

‘1 'Takto tedy způsob, požadovaný pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde R¹ = NH2 zahrnuje:

sejmutí chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce Ií

kde R⁸ zastupuje vhodnou nestálou skupinu jako je alkylová skupina, např. ethyl nebo. arylalkylová skupina, např. benzyl.

Reakce Sejmutí ochranné skupiny se provádí s použitím ..standardních postupů pro hydřolytické reakce tohoto typu. Tak například reakce se provádí v rozpustidlu jako je voda, obsahující inertní organické řozpustidlo jako je ether, např, ·

cyklický ether jako jé tetrahydrofuran, amid, , napřsubstituovaný amid jako je dimethylforroamid nebo nějaký alkohol, riápř, ethanol, v přítomnosti anorganické zásady jako je uhličitan draselný nebo hydroxid sodný, při teplotě sahající Od teploty místnosti po rěfluxní teplotu rozpustidlové směsi, výhodně při rěfluxní teplotě rozpustidlové směsi.

Alternativně,· jestliže R® obsahuje skupiny, které jsou nestálé vůči hydrogenaci, využije se toto jako metoda ochrany. Tak například se reakce provede v inertním rozpustidlu jako je alkohol, např. ethanol, v přítomnosti přechodného kovu jako katalyzátoru, např. palladia ná uhlíku, při nízké teplotě, výhodně při teplotě místnosti.

Bude oceněno, že tam, kde je požadován specifický stereoizomer vzorce I, doSáhné Se toho konvenčními dělicími technologiemi, jako je vysokotlaká kapalná chromatografie- Kde je to požadováno, použije se v kopolační reakci patřičný homoizoraerní výchozí materiál, aby se získal specifický stereoizomer vzorce I. Meziprodukty obecného-vzorce II še- připraví presmykem sloučenin meziproduktu III

Cíli)

Reakce prešinykování se. provádí s. využitím standardních podmínek pro tyto reakce, jak je načrtl J. Vang a kol-, J. Org. Chem., 53, 5617 (1988); Takto například.se reakce docílí v rozpustídlu např- v organickém rozpustidlu jako je ether, např. cyklický ether jako tetrahydrofuran, amid, např.

substituovaný amid jako je dimethylformámid nebo nějaký alkohol, např- ethanol, při teplotě sahající od teploty okolí“ pó refluxní teplotu rožpustidla., výhodně při řefluxní teplotě požadovaného rožpustidla, v přítomnosti anorganické zásady jako je uhličitan draselný nebo natrium-methoxidMeziprodukty obecného vzorce III sě připraví z thiomóčóvin obecného vzorce IV

NHCSNHCqR (IV)

Tato transformace se provádí použitím postupu, který načrtl J-Waňg a kól., J- Org. Chem., 53 5617 (1988). Takto například še reakce provede v přítomnosti inertního organického rozpustidla jako jé ether, např. cyklický ether jako tetrahydrofuran, amid např. substituovaný amid jako je dimethylformamid nebo nitril jako je acetonitril při teplotě okolí, výhodně při. 20-30°C, v přítomnosti.diimidu, např-. dicyklohexylkarbodidimidu. Aspektem tohoto vynálezu je rovněž to, že meziprodukty vzorce ÍI se připraví z meziproduktů vzorce IV kombinací shora uvedených postupů v jednom kroku.

Thioraočoviny obecného vzorce IV se připraví z aminů obecného vzorce V

á isokyanatů obecného vzorce VI

S=C=NC0₂R⁸ CVI)

Tato transformace se provádí s použitím postupu, který načrtl J.Vang a kol- J- Org. Chem., 53 5617 <1988). Takto například se reakce provede v přítomnosti inertního organického rozpustidla jako je ether, např. cyklický ether jako tetrahydrofuran, a nitriiu jako je acetonitril nebo halogenuhlovodíku jako je dlchlormethan, při nízké teplotě, výhodně při teplotě okolí i podle volby v přítomnosti zásady, např- organické zásady jako je amin, např. triethylamin.

Thioraočoviny obecného vzorce VI se připraví obecným postupem podle J.Vanga a kol. J. Org. Chem-, 53 5617 <1988)Aminy obecného vzorce V se připraví redukcí nitroderivátů obecného vzorce VII

O

n/^R³

CVII)

Odborníky bude oceněno i že redukční reakce tohoto typu se uskutečňují několika metodami, jak je načrtnuto v Advanced Organič Chemistry (Moderní organická-chemie) <4. vydání)., J. .March, Vileý Interscience, s. 1216^1218. Neomezující příklad této transformace zahrne použití vody jako rúzpustidlá, volitelně v přítomnosti inertního organického rozpustidla jako je ether, např- cyklický ether jako je tetrahydrofuran nebo amid, např- substituovaný amid jako je dimethylformamid, v přítomnosti·dithioničitanu sodného při zvýšené teplotě, výhodně při 65-80°CNitroderiváty obecného vzorce VII se připraví reakcí pyrimidinonfl obecného vzorce VIII

O

NQj a

<VIII) s aminy obecného vzorce IX

<IX)

Tato reakce še provádí š použitím standardních podmínek, které odborník předpokládá. Takto například se reakce uskuteční v rozpustidlu, například v organickém rozpustidlii jako je ether, např; cyklický ether jako tetrahydrofuran, amid např. substituovaný amid jako je dimethylformámid nebo v alkoholu jako je ethaiiol, při zvýšené teplotě, výhodně' při teplotě varu rožpustidla, v přítomnosti zásady, např. organické zásady jako je amin, např. triéhylamin nebo Cyklický amin jako jě

N-methylinorf ol ih.

Příprava rtitroderivátfl VIII je popsána v G. Temple a kol., Nucíeic Acid Chemistry (Chemie kyseliny nukleové), svažek I (1978), Wileý New York, vyd. L.B- Townseňd a kol., s. 47-52.

Jáko další rozšíření vynálezu se meziprodukty vzorce V rovněž připraví z pýrimidinů Vzorce X reakcí s činidly, která jsou odborníkovi známa pro zavádění dušíkoVé substituce.

(X)

Takto se reakce provádí s použitím standardních podmínek pro amináční reakce tohoto typu. Takto například se reakce docílí v rózpuštidlu, například ve vodě nebo v organické kyselině jako je kyselina octová nebo v jejích vodných směsích, v přítomnosti dusitanu sodného, při nízké teplotě, např. 0°C až po teplotu okolí jako je pří okolní teplotě 10°G- Po ukončení postupu, zřejmého _:pro odborníka, še zbytek rozpustí ve vhodném rózpuštidlu jako ie voda, volitelně v přítomnosti vedlejšího rožpustidla. například inertního organického rozpustídla jako je ether, např. cyklický ether jako je tetrahydrofuran amid, např. substituovaný, amid jako je d i methyl formani id, v přítomnosti redukčního Činidlai například dithioničitanu sodného, při teplotě υ rozsahu od okolní teploty až pó rěfluxní teplotu rozpustidla.

Pýrimidiny obecného vzorce X se připraví z meziproduktu vzorce XI

a aminů obecného vzorce IX, s použitím srovnatelných podmínek k podmínkám pro přípravu meziproduktů obecného vzorce VII á podmínkám, které jsou popsané v C-W. Roell a kol-, J. Med. Chem., 5, 558 <1962). Aminy obecného vzorce IX jsou buď dostupné komerčně nebo jsou snadno dostupné z komerčních sloučenin, s využitím metodiky, která je odborníkům známa- Toto zahrnuje, tam kde je to vhodné, homoizomerní výchozí materiál pro přípravu jednotlivých izomerních sloučenin vzorce I- Jako ještě další rozšíření tohoto vynálezu, sloučeniny vzorce I, ve kterých R⁴ je H a R² je H nebo NHz, se připraví z meziproduktů obecného vzorce XII prostřednictvím hydrolýzy.

Hydrolyzní reakce se provádí za standardních podmínek pro hydrolyzní reakce tohoto typu. Takto například v rozpustidlu jako je vóda^ volitelně v přítomnosti vedlejšího rozpustidla, například inertního organického rozpustidla. jako je alkohol, např, methanol nebo amidu, např. substituovaného amidu jako je dimethylformamid v přítomnosti anorganický hydroxid obsahující Zásady, např. hydroxidu sodného, při zvýšené teplotě jako je teplota varu rozpustidla.

Meziprodukty obecného vzorce XII še připraví kopulací purinu obecného vzorce XIII

(XIII) s meziproduktem obecného vzorce XIV l· (XIV) ve kterém R⁹ zastupuje halogen nebo vhodnou odstupující skupinu jako jé alkylsulfonatový ester, např- methansulfonat nebo árylsulfohatový ester, např. 4-toluensulfonát.

Meziprodukty obecného vzorce XIII jsou bud' komerčně dostupné nebo je lze připravit s použitím metod, které jsou odborníkovi zřejmeKopulační reakce se provádějí s využitím standardních podmínek pro reakce tohoto typu. Tak například.še reakce uskuteční v rozpustidlu, například v inertním organickém rozpuštidlu jako je ether, např. cyklický ether jako je tetrahydrofuran, amid, např. substituovaný amid jako je dimethyIfórmamid, alkohol jako je methanol, v přítomnosti vhodné zásady, například anorganické Zásady jako je uhličitan draselný nebo organické zásady jako amin, např. triethylamin, při teplotě od okolní teploty po refluxní teplotu rozpustidlové směsi, výhodně při 80°C.Meziprodukty.obecného, vzorce XIV jsou buď dostupné ' komerčně nebo jsou snadno dostupné z komerčních sloučenin, s využitím metodiky, která je odborníkam známa. Toto zahrnuje* tam kde je to vhodné, homoizomerní výchozí materiál pro přípravu jednotlivých izomerních sloučenin vzorce I.

Jako ještě dálší rozšíření tohoto vynálezu, sloučeniny vzorce I se připraví z meziproduktů obecného vzorce XV cestou sejmutí Chrániči skupiny. Kde R^1Q zastupuje skupinu jako je benzyl nebo substituovaný benzyl, která se odstraní použitím standardních podmínek pro odstraňování takovýchto Skupin. Tak například se reakce provede v rožpustidlu jako je alkohol, jako. je ethanol, volitelně v přítomnosti kyseliny, například anorganické kyseliny jako je kyselina chlorovodíkováV přítomnosti katalyzátoru, např. palladia na aktivním uhlí pod atmosférou plynného vodíku při okolní teplotě

CXV)

Meziprodukty obecného vzorce XV se připraví kopulací ' purinu obecného vzorce XVI

XXVI) s meziproduktem obecného vzorce XIV, ve kterém R⁹ a R³ jiz byly popsány v předchozím.

Kopulacní reakce se provádí s využitím standardních podmínek pro reakce tohoto typu. Tak například se reakce uskuteční v rozpustidlu, například v inertním organickém rozpustidlu jako je amid, např. substituovány amid jako je dímeťhylfórmamid, v přítomnosti vhodné zésaďý, například anorganické zásady jako je hýdrid sodný, při teplotě od okolní teploty po refluxní teplotu rožpustidla směsi, výhodné při 80°C.

Meziprodukty obecného vzorce XVI se připraví modifikací postupu podle S. Raro a kol., Háterocykles 1978, 22 (1984) nebo M-Y. Chae a kol., J. Med- fchem., 359, 38<2), (19959.

Jako.další aspekt tohoto vynálezu se pro výrobu Sloučenin obecného vzorce I, kde R³ je jiná skupina než původně definovaná, použije meziprodukt obecného vzorce XVI; s použitím téže metodiky jako pro výrobu meziproduktů obecného vzorce XV, kde.R³ rovněž zastupuje H, Ci-ealkyl-R⁶, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl, substituovaný heteroayl, Cs-gcykloalky1 nebo substituovaný C3-Sčykloalkyl á R⁶ podle předchozí děfinicePro R³=arýl nebo heteroaryl, n=l nebo 2Sloťičeniny vžorCe I se rovněž připrav/í vnitřní konverzí jiných sloučenin vzorce I. Tak například sloučenina vzorce I, kďe R³ Obsahuje skupinu R⁴, kde R⁴ je Ci-ealkyl-R⁶ á R⁶ je CO2H se konvertuje na jinou takovou sloučeninu vzorce I, kde R⁶ představuje CŮ2C1-6alkyl s použitím metod, které jsou odborníkovi zřejméVynález se rovněž týká nových výchozích materiálů a způsobů jejich přípravyJakékoliv směsi získaných finálních produktů nebo meziproduktů se Separují na základě fyzikálně-chemických vlastností složek známými způsoby, na čisté finální produkty nebo meziprodukty, například chromatograficky, destilací, frakční krýstalizací nebo tvorbou soli, je-li to podle okolností vhodné nebo možné.

Sloučeniny podle vynálezu nebo meziprodukty jsou rovněž žískateiné ve formě jejich hydrátů nebo obsahují jiná rozpustidla pro jejich krystalizači.

Tento vynález še rovněž týká způsobu léčení pacientů Cvčetně lidí a/nebo živočiehů-savců, pěstovaných pro mlékárenský masný nebo kožedělný průmysl nebo jako domácí zvířata), trpících poruchami nebo chorobami, spojenými s purinriiikleosíodfosforylasou, jak bylo uvedeno shora á specifičtěji, Způsobu léčení, který zahrnuje podávání purinnukleosiďfosforylasových inhibitorů vzorce I jako aktivních složek.

Tudíž sloučeniny vzorce I jsou mimo jiné použitelné pro léčení autoimunních chorob, odmítání transplantátů, psoriasy, dny, rheumatické arthritidy, mýastheníe gravis, diabetů typu I, discoidního lupusu erýthematosus, roztroušené sklerózy, T-bunkové rakoviny včetně, ale neomezeno na T-buňkovou leukémii a kožní T-buňkový lymphom, atopické dermatidiiý kontaktní dermatidy nebo jiných chronických alergických jevů, ekzémů, -podráždění střev nebo malárie. Kromě toho sloučeniny vzorce I jsou použitelné pro umocnění protivirového a protinádorového účinku protivirových a protinádorových purinnukleosidů, které jsou metabolicky degradovateíné pomocí PNP.

Proto další provedení vynálezu se týká způsobu inhibice fosforólysy a metabolického odbourávání protivirových a protinádůrových purinnukleosidů u savců, který zahrnuje podávání ve spojení s tímto savcům, kteří to potřebují, buď samostatně nebo v kombinaci s tímto, účinného purinnukleosidfosforylasoyého inhibičního množství sloučeniny podle vynálezu nebo této sloučeniny v kombinaci s jedním nebo

- 19 více farmaceuticky přijatelnými nosiči- Přesněji takové, týkající se způsobu inhibice fosforolyšy a metabolického odbourávání v technice známých purinnukleosidů, například 2*-deoxygúanosinu, .2* 3’-didéoxýguanosinu nebo .

2’3’-d iděoxyadenos i nu Dále, vynález še takto týká způsobu umocnění protivirového a protinádorového účinku*2*- nebo 3'-monodeoxypůrinnukleosidů nebo 2’,3’-dideoxypúrinnukléosidů u savců, který zahrnuje podávání ve spojení š tímto savcům, samostatně nebo v kombinaci s tímto kteří to potřebují, buď nukleosidem, účinného purinnukleosidfosforylasového inhibičního množství sloučeniny podle vynálezu výhodné v kombinaci s jedním nebo více f arraaceut i cky při jaté1nými nos i či.

Přesněji takové, týkající se způsobu umocnění účinku v technice známých 2'3'-dideoxypurinnukleosidů, např.

2'3’-dideoxyinósinu, 2'3*-dideoxyguánosinu nebo 2'3'-dideoxyadenosinu, pro: léčení retrovirových infekcí, např. HlV-retrovi lOvých infekcí (Syndrom získané imunitní nedostatečnosti, AIDS). 2*,3'-dideoxypurinnukleosidy jsou v technice známé jako inhibitory HIV retrovirové infekčnosti

a. metabolieky odbouratelné prostřednictvím PNP, např. jak popisuje Biochemical Pharnacology, 22, 3797 (1987). Tak jsou podávané ve farmaceuticky přijatelně dávce,, která je účinná v inhibicí HIV-retrovirových infekcí- Výhodně se používá nejnižší možná účinná dávka.

Vynález se dále týká farmaceutických prostředků, vhodných pro vnitrní, jako je orální nebo rektální, topické nebo parenteralní podávání nebo i nha 1 áč.n í. Sprej ování pro savce včetně lidí, které jsou prospěšně pro inhibicí aktivity purinnukleosidfosforylasy a pro léčení na to citlivých poruch., zahrnující účinné množství farmákologicky aktivní sloučeniny podle vynálezu, samotné nebo v kombinaci, s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči. Termín parenterálni, tak jak

-20je zde použit, zahrnuje subkutánní injekce, iritravenozní, intrasternalní injekce nebo iňfuzní techniky.

Fármaceutické prostředky, obsahující aktivní přísadu; jsou ve formě vhodné pro orální použití, například jako tablety, pastilky, zdravotní bonbony; vodní nebo olejové suspenze, dispergovatelné prášky nebo granule, emulze, tvrdé nebo měkké kapšlé nebo sirupy nebo tinktury. Prostředky určené pro orální použití se připravují podle jakékoliv v technice známé metody pro výrobu farmaceutických prostředků a takové prostředky obsahují jedno nebo více činidel, vybraných ze skupiny skládající se ze sladících činidel, aromatických Činidel, barvicích činidel a konzervačních činidel, aby byla poskytnuta farmaceuticky elegantní a přijatelná úprava. Tablety obsahující aktivní přísadu ve směsi s nétoxickými, farmaceuticky přijatelnými exčipienty (inertními tabletovacími pojidly), které jsou vhodné pro přípravu tablet. Tyto exčipienty jsou například inertní zřeďovací látky jako je uhličitan vápenatý, uhličitan sodný, laktosa, fosforečnan vápenatý nebo fosforečnan sodný; granulační a desintegrační činidla, například kukuřičný škrob nebo kyselina alginová: pojící Činidla, například škrob, želatina nebo klovatina a mazací činidla, například štearat hořecnatý, kyselina stearová nebo talek- Tablety jsou nepovlékané nebo povlékané známými technologiemi, aby se zpomalila dezintegrace a absorpce v zažívacím traktu a aby se tím poskytla nepřerušována působnost po dlouhou dobu. Například je použit materiál působící jako časový zpozďováč jako je glýcerylmonostearat nebo glyceryldištearat. Rovněž jsou povlékané technologiemi popsanými v US patentu 4,256,108; 4, 166,452 a 4,265,874, aby se, vytvořily osmotickoterapeutické tablety pro řízené uvolňování.

.Formulace pro orální používání se rovněž vyskytují jako tvrdé želatinové kapsle, kde aktivní přísada je smíchána s inertní tuhou zřeďovací látkou, například uhličitanem vápenatým, fosforečnanem vápenatým nebo kaolinem nebo· jako měkké želatinůvé kapsle, kde. aktivní přísada je smíchána s vadou nebo olejovým médiem, například arašídovým olejem, kapalným parafinem nebo olivovým olejem.

Vodné suspenze obsahují aktivní látky ve směsi s excipienty vhodnými pro výrobu vhodných suspenzí- Takové ěxcipiěnty jsou suspenzační činidla, například natriumkarboxymethylceluloza, hýdroxypropylmethylcelulozá, alginat sodný, polivinyl-pýrrolidon, tragantová guma, arabská guma; dispergaČní nebo smáčécí činidla jsou přírodní fdsfatidy, například lecithín nebo kondenzační produkty jako alkylenoxidu s mastnými kyselinami, například polyoxyéthyleňstearat nebo kondenzační produkty ethylenoxidu s dlouhými řetězci alifatičkýčh alkoholfi, například heptaďekáethylénoxycetaňol nebo kondenzační produkty ethylenoxidu s parciálními estery odvoženými od mastných kyselin a hexitolu jako polyoxyethylen s parciálním esterem odvozeným od mastných kyselin a hexitolanhydridfl, například polyoxyethylensOrbitaňmonooleat. Vodné suspenze rovněž Obsahují jedno nebo více konzervačních Činidel, například ethyl- nebo ri-propyl-p-hydroxybenzoat, jedno nebo více barvicích činidel, jedno nebo více áromatizačních činidel á jedno.nebo více sladících činidel jako jě sacharosa nebo sacharin.

Olejové suspenze se formulují suspenzací aktivních přísad do rostlinného oleje, například arašídového Oleje, olivového oleje, sezamoyého Olejé nebo kokosového.Oleje nebo do minerálního oleje jako je kapalný parafin. Olejové suspenze obsahuji zahušťovací činidlo, například včelí vosk, tvrdý parafin nebo četylalkohohol.

Sladící činidla jako ta', která bylá uvedena shora a aromatizační činidla še přidávají, aby se zajistil chutný orální, přípravek. Tyto prostředky se konzervují přídavkem antioxidantů jako je kyselina askorbová.

Dispérgovatelné prášky a granule, vhodné pro přípravu vodních suspenzí přidáním vody, poskytují aktivní přísadu ve směsi;· s díspergačním nebo siiiáčecím činidlem, suspenzáčními činidly a jedním nebo více konzervačními činidly. Vhodná dispergační nebo smáčecí a suspenzační činidla jsou uvedena příklady, například jsou přítomna sladící, aromatizační .....

á barvicí Činidla.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu jsou rovněž ve formě emulzí typu olej-ve-vodě. Olejová fáze je rostlinný olej, například olivový olej nebo arašídový olej nebo minerální' olej, například kapalný parafin nebo jejich Směs. Vhodná emulgační činidla jsou přírodní gumy, například arabská guma nebo tragantová guma, přírodní fosfatidy/ například sójové boby, íecithiň a estery nebo parciální estery odvozené od mastných kyselin a hexitolanhydridů, například sorbitanmonooleat a kondenzační produkty těchto parciálních esterů s ethylenoxidém, například pól-yoxyethylensórbitanmonooleátEmulze rovněž obsahují sladící a aromatizační činidla. Sirupy a tinktury se formulují sladícími činidly, například glycerolem, propylenglýkolem, sorbitolem á sačharosou. Takové formulace rovněž obsahují demulgenš Cukl idňiij ící lék), konzervační, aromatizační a barvicí Činidla. Farmaceutické prostředky jsou rovněž ve formě sterilních injektovatelných vodných nebo olejových suspenzí. Tyto suspenze jsou formulovány Způsoby známými v technice s použitím vhodných dispergačních nebo smáčecích činidel a suspenzačníčh Činidel, která byla uvedena shora. Sterilní iηjektovatelné přípravky jsou rovněž ve sterilních injektovatelných roztocích nebo suspenzích v netoxlckěm parenteralně přijatelném ředidlu nebo rozpouštědlu, například roztok v 1,3-butandiolu. Mezi přijatelnými nosiči a rozpouštědly je i voda, Ringersův roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Kromě toho še při přípravě injektovatelných přípravků používají mastné kyseliny jako je kyselina listová.

Sloučeniny vzorce 1 se rovněž podávájí ve formě čípků pro rektální podávání léků. Prostředky se připravují smísením drogy s vhodným nedráždivým exčipientem, který je tuhý při normální teplotě, ale kapalný při rektální teplotě a proto se v réctum roztaví a uvolní drogu. Takové látky jsoii kakaové máslo a pólyehyienglykoly.

Pro topické aplikace se používají krémy, masti, želé, roztoky nebo suspenze atd., obsahující sloučeniny vzorce I(Pro účely této aplikace zahrnují topické aplikace ústní vody a kloktadla.) Hladiny dávkování řádu od 0,05 mg do 2000 mg na kilogram tělesné hmotnosti denně jsou použitelné pro shora uvedené případy (2,5 mg až 100 g na pacienta a den).. Například rheumatická arthritida je účinně léčena podáváním 0,01 až 1Ó0 mg sloučeniny ria kilogram tělesné hmotnosti a den (0,5 mg až 7 g na pacienta a den).

Množství aktivní přísady, která se kombinuje s materiály nosiče.pro vyrobení jednotlivé dávkovači formy, se bude měnit v závislosti na ošetřovaném hostiteli a na specifickém způsobu podávání. Například formulace, která je určena pro orální podávání lidem, se pohybuje od 5 do 95 procent celkového prostředku. Dávkovači jednotkové formy obecně obsahují od 1 mg do 500 mg aktivní přísady Je však pochopitelně, že specifická dávková hladina pro určitého specifického pacienta bude záviset na řadě faktorů, včetně aktivity specifické použité sloučeniny., věku, tělesné hmotnosti, obecného stavu zdraví, pohlaví, diety, času podávání, cesty podávání, míry vyměšování, drogové kombinace a vážnosti specifické choroby

*)

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady 1 až 19 ilustrují sloučeniny podlé vynálezu a jejich přípravu (tam kde. je to vhodné, ták přes dané meziprodukty).

V příkladech jsou použity následující zkratky:

DEAD	d i ethyId iazódikarboxylat
DMF	dimethylformámid
DCC	dicyklohexylkarbodiimid
RŤ	teplota místnosti
THF	tetrahydrofuran
MsCl	methansu1fony1ch1ori d

Meziprodukt 1

2-aminO-5-ni^:tró-4-(2'-tetrahydrofuranylmethylamino)-pyrimidin6-[lH]-on . K míchané suspenzi 2-amino-4-chloro-5-nitropyrimídin-6[1H]-onu (2 g) (C- Temple a kol-, Nucleic Acid Chemistry, šv.I (1978), Viley NY, s. 47-52) v ethanolu (45 ml) se přidá triethyl amin (1,1 g) a tetrahydrofurylamin (1,1 g) a zahřívá se pod refluxem 1,5 hodiny- Reakční směs se ochladí na RT a přefiltruje se. Reziduum se promyje vodou (2x20 ml) a ethánolem (5 ml) a pevná látka se vakuově přes noc suší atak se získá žlutá tuhá látka (2,5 g).

TLC Rf = 0,10 (20¾ MeOH/CH2Cl2) (TLC- = thin-laýer chromátography, tenkovrstvá chromatografie)

Meziprodukt 2

-am i no -4 - ( 2 ’ -tetrahydrof urany1methy1am i no)-5-11-13-(ethoxy karbony1)thiouréido]]pyrimidin-6-[1H1-on

Meziprodukt 1 (1,0 g) se suspenzuje ve vodě při 65-80°C a po malých částech se přidá dithioničitan sodný (4;5 g). Po 0,5 hodině se vysrážená tuhá látka odfiltruje a znovu se suspenzuje do acetonitrilu (40 ml). Potom se přidá ethóxykarbonylisokyanat (1.5 g) a reakční směs se pod refluxem z* <· zahřívá 3 hodiny. Po ochlazení ledem se suspendovaná tuhá látka odfiltruje a promyje se acetonitrilem CIO ml) a vakuově se vysuší, aby se získala'sloučenina meziprodukt 2 (0,5 g).

TLC Rf = 0,3 <10% MeOH/CHaClž)

Meziprodukt 3 ethyl-6-amino-4-<2’-tetrahydrofuranylmethy1am i no)oxazo1o-[5,4dl-rpyrlmidin-2-karbamat : Meziprodukt 2 (0,42 g) se přidáván, po částech rozpustí v DMF (20 ml) a DCČ (0,73 g). Po 48 hodinách při RT se rozpustidlo ve vakuu odstraní. Reziduum se ošetří horkým toluenem a tuhá látka se odfiltruje a promyje se horkým toluenem. Reziduum se vakuově usuší, aby se získala sloučenina meziprodukt 3 (0/31 g).

TLC Rf = 0,45 (10% MeOII/ClbCl₂)

Meziprodukt 4

2-amino-5-nitro-4-(2'-tetřáhydropyránylmethylamino)pyrimidin6-IlH]-on

Sloučenina meziprodukt 4 se připraví z 2-aminomethýltetrahydropyranu (GB 1031916) podobným způsobem jako meziprodukt i.

TLC Rf = 0,6 (10% MeOH/ClhClz)

Meziprodukt 5

2-amino-4-(2' -tetrahydropyranylmethy lam i nd )-$-.[ l-t3-(éthoxy karbonyl)thiouréídollpyrimidin-6-llHl-on

Sloučenina meziprodukt .5 se připraví z meziproduktu 4 podobným· Způsobem jako meziprodukt 2TLC Rf = 0,3 (10% MeOH/CH2Cl2)

Meziprodukt 6 ethyl -6-am i no-4-(2'tetrahydropyranylmethy1am i no)oxázo1o (5,4-dl-pyrjmidin-2-karbamat

Sloučenina meziprodukt 6 se připraví z meziproduktu 5 podobným způsoben jako meziprodukt 3.

TLC Rf = 0,5 (10% MeOH/CH₂Cl₂)

Meziprodukt. 7 (R)-2-hydroxymethy1tetrahydropyraň

K promíchávanému roztoku (R)2-hydroxyinethy 1-2,3-dí hydropyranu CO,23 g) (S.-Kang a kol. Tet. ftsyin. , 1995, 6(i), 97^

100) v.ethamolu <40 ml) se přidá katalyzátor paládiuin na uhlíku (10¾ Rd). To vše se umístí do reakční nádoby Parr a 5 hodin se míchá pod vodíkem o tlaku689,5 kPa <100 psi). Po této době še roztok přefiltruje a vakuově se zakoncentruje, aby byla získána sloučenina meziprodukt 7 <0,2 g) jako žlutý olej.

¹H NMR <400 MHz, DMSOde): 1.0<m,lH), l,5<m,5H), !,8<bs,lH), 3,3<m,3H), 3,8<d,lH), 4.5<bs,lH).

<NMR - nuclear magnetic resonance - nukleární magnetická rezonance)

Meziprodukt 8 < R ).-2-methý 1 su 1 f oný 1 oxyme thy 1 tetr ahy dropy ran

Meziprodukt 7 <0,85 g), CIfeCLa <27 ml) a triethylamin <2 ml) se smísí a ochladí na 0°C <v ledové lázni).pod N2 K tomu se přidá, po kápkách injekční stříkačkou MsCl <0,62 ml) a pokračuje se v míchání, Jak sé reakční směs ohřívá na RT.

V míchání se pokračuje dalších 5 hodin a po této době se produkt zakoncentruje na oxidu křemičitém a chromatografleky se vyčistí, aby se získala sloučenina meziprodukt 8 (1,31 g) jako žlutý olejTLC Rf .= 0,6 (50¾ EtiOflc/hexan)

Meziprodukt 9 (R)-2,8-diaminó-6-benžýloxy~9~t2Ctetrahydropyranylměthyl)]purin K promíchávanému roztoku 2,8-diamino-6benzyloxypurinu (Chaeakol., J. Med. Chem., 1995, 38(2), 359-365) (0,23 g) v DMF (2 ml) se přidá LiH (8,2 g) a směs se míchá 45 minut pod N2. Potom se přidá meziprodukt 8 <0,17 g) jako roztok v DMF <1,5 ml) a to celé še postupně zahřívá na 80°C a na této teplotě se udržuje 20 hodin. Produkt se potom zakoncentruje na oxidu křemičitém a chromatograficky se vyčistí, aby se získala sloučenina meziprodukt 9 (43,7 mg) jako žlutohnědá tuhá látka. TLC Rf = 0,8 (10¾ Me0H/CHaCl2)

Meziprodukt 10 .... .. ..

( S)-2-hydroxymethy1tetrahydropyran

Meziprodukt 10 se připraví stejným způsobem jako meziprodukt 7 a získá se světle žlutý olej.

¹H NMR (400 MHz, CDC1₃)- l,3(m,lH), l,5(m,4H), l,8(m,lH), 2,3(bs,lll), 3,5(m.4H), 4,0(m,lH)

Meziprodukt 11 <Š)-2-méthylsulfonyloxymethy1tetrahydropyran

Meziprodukt 11 se připraví stejným způsobem jako meziprodukt 8 a získá se světle žlutý viskozní olej.

TLC Rf = 0,49 (50¾ EtORc/hexan)

Meziprodukt 12 ( 5 ) -2, 8-d i ani ino-6-benzyloxy-9-[ 2 ’ - (tetrahydřopyrany1 methy1)1purin

Sloučenina meziprodukt 12 se připraví z meziproduktu 11 stejným způsoben jako meziprodukt 9.

TLC Rf « 0,8 (10¾ MeOH/CIteClz)

Meziprodukt 13

2-methylsulfonyloxymethy1-6-methyltetrahydropyran.

Meziprodukt 13 se připraví z 2-hydroxymethyl-6-methyl tetrahýdropyranu (Ε. I . Klímovaa kol., Sb. Org. Chim-, 1970, 6, 413-418) podobným způsobem jako meziprodukt 8.

TLC Rf =0,26 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 14

2,8-di amino-6-benzy1oxy1-9-12’ -(6'-methy1tetrahydřopyrany1) methyl]purin

Sloučenina meziprodukt 14 se připraví z meziproduktu 13 podobným Způsobem jako meziprodukt 9.

TLC Rf = 0,82 (10¾ MeOH/CH2Cl2)

Meziprodukt 15

2-methy -lsul £ ony loxymethy 1 -4-methy 1 tetrahydropyran

Meziprodukt 15 se připraví stejným způsobem jako meziprodukt 8, tudíž z 2-hydroxymethyl-4-metby1-tetrahydro Pýranu (B.L. Eliel a kol., Org. Mag. Res. 1983, 21,95-107) (0,35 g) vznikne 0,43 g meziproduktu 15 jako.žlutý olej.

TLC Rf = 0,64 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 16

2.8- diamíno-6-benZyloxyl-9-F2·-(4’-methyltetrahydropyrany1) methyl]purin

Sloučenina· meziprodukt 16 se připraví z meziproduktu 15 podobným způsobeia jako meziprodukt 9TLC Rf = 0,87 (10¾ MeOH/CH2Cl₂)

Meziprodukt 17

2-methylsuÍfony1oxymethy1-trans-4,6-d imethyltetrahydropyran

Meziprodukt 17 se připraví z 4,6-diinethyl-2-hydroxymethyltetrahydropyranu (B.L. Eliel a kol., Org. Mag. Res. 1983, 21, 95-1Ó7) stejným způsobem jako meziprodukt 8TLC Rf = 0,83 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 18

2.8- diamino~6-benzylóxy-9-[2^J-(4*,6’-dimethyltetrahydropyrany1) methyllpurin

Meziprodukt 18 se připraví z meziproduktu 17 podobným Způsobem jako meziprodukt 9TLC Rf - 0.85 (10¾ MeOH/CH₂Cl2)

Meziprodukt 19 terč.buty1-6-Cacétoxymethy1)tetrahydro-2H-pyran-2-acetat

Chlorid hlinitý (1 g) še ochladí na -78°C pod dusíkovou atmosférou a přidá sé dichlormethan (15 inl). Potom se po kapkách přidá roztok tranš-6-(benzensulfonyl)tetráhydro-2H_i-pyran-2methariolacetatu (1 g) (S.V. Ley a kol., Tetrahědron (1989),. 45 (13), 4293) a 1-terc- buty.loxy-l-tr imethylsi lyoxyettienu (1,37 g) v dichlormethanu <10 ml). Reakční směsí ,se míchá při

-78°C po 2,5 hodiny a potom při teplotě místnosti 1,5 hodiny.

Po otupení IN HČ1 a extrakci dichlormethaňem se surový produkt chromatograf íčky vyčistí. ¢50¾ EtOAc/hexan) a dostane se sloučenina meziprodukt 19 <187 mg).

TLC Rf = 0,6 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 20 terč.buty 1-6-(hydroxyměthyl)tetrahydro-2H^;;-pyran-2-acetat

Meziprodukt 19 <0,19 g), uhličitan draselný (0,19 g) a methanol <3,5 ml) se smísí a míchá se při teplotě místnosti

2,5 hodiny. Zředí se vodou a extrahuje ethylacetatem á. získá se sloučenina meziprodukt 20 <0,11 g).

TLC Rf = 0.33 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 21 terč.bu ty1-6-(methy1šů1fony1oxy m e t hyi)tetrahydro-2H-pyra ri 2-acetat

Sloučenina meziprodukt 21 se připraví z meziproduktu 20 podobným způsobem jako meziprodukt 8.

TLC Rf = 0,4 ¢50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 22

2,8-diamino-6-bérizylóxy-9-(2’ -<6’ -^terc. butyloxykarboxymethy 1) tetrahýdro-12H]-pyranmethyl)purin

Sloučenina meziprodukt 22 se připraví z meziproduktu 21 podobným způsobem jako meziprodukt 9.

TLC Rf = 0,3 (EtOAc)

Meziprodukt 23 trans - te trahydro 2 acetoxymethy 1-6-prop-2-eny) -t 2H] -jpyran

Chlorid hlinitý <1 g) se Ochladí ria -78°C pod dusíkovou atmosférou a přidá se dichlormethan (15 ml). Potom se po kapkách přidá roztok trans-6-(benzenšulfoiiýl)-tetrahýdro-2H-pyran-2methanolácetátu (S.V. Léy a kol , Tetřahedron (1989), 45 (13), 4293) <1 g) a ally ltrimethylsi lanu (835 mg) v dichlormethanu (10 ml). Reakční směsí se míchá při -78®.6 po 2 hodiny, a potom při ^35°C 1 hodinu. Po otupení IN HC1 a extrakci dichlOnnethanem se surový produkt chromatograf i cky vyčistí (40¾ EtOAc/hexan) a dostane se sloučenina meziprodukt 23 (414mg).

TLC Rf = 0_;6 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 24 trans“tetrahydro-2-hydroxynethýl-6-prop-2-enyl-2H-pyran

Sloučenina meziprodukt 24 se připraví z meziproduktu 23 podobným způsobem jako meziprodukt 20.

TLE Rf = Ó.37 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 25 trans -tetrahydro- 2 -met hy 1 s u 1 f ony 1 oxyjie t hy 1 - 6 - próp -2~ eny12H-pyran

Sloučenina meziprodukt 25 se připraví z meziproduktu 24 podobným způsobem jako meziprodukt 21.

TLC Rf = 0,45 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 26 .

(Sx,Sx)-2,8-ď iamino-6-benzy1oxy-9-(2 * -(6'-propy1)-tetrahydro2H-pyranylmethyl)purirt

Meziprodukt 26 se připraví z. meziproduktu 25 podobným způsobem jako meziprodukt 9.

TLC Rf = 0,55 (10¾ MeOH/CHzCl?)

Meziprodukt 27 tranš-tetrahydro-2-terc.bůtyIdimethyIsiloxymethy1-6-prop-2eny1-2H~pyran

Meziprodukt 24 (3,75 g), DMF (20 ml), imidazol (3,6 g) a terč.. buty Idimethy Isi lylchlorid (4 g) sé smísí a míchají při teplotě místnosti 18 hodin..Po zředění vodou a extrakci dichlorinethanem se surový produkt chromatograf i cky vyčistí (50¾ EtOAc/hexan) a získá se sloučenina meziprodukt 27 (5,18 g).

TLC Rf = 0,65 (50¾ EtOAc/hexan) <1

- 31 Meziprodukt 28 trans-2-teřc-butyldimethyIs iloxymethy1-6-hydroxypropy1tetra hydro^2H-pyran

Meziprodukt 27 (2,7 g) a tertrahydrofUran (10 ml) še smísí a pod dusíkovou atmosférou ochladí v.ledové lázni. BH3. THF (1M rožt.v THF) (5 ml) se přidá po kapkách a reakční směs Se míchá při teplotě místnosti 18 hodin. Reakční směs opět ochladí na 0°C a přidá se IN NaOH (30 ml) a peroxid vodíku (27¾ hmotnostních) (10 ml). Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 3,5 hodiny. Extrahuje se ethylacetatem a vyčistí chromatograficky (30¾ EtŮÁc/hexan), aby se získala sloučenina meziprodukt 28 (0,54 g).

TLČ Rf = 0,3 (50¾ EtOAc/hexan) t

Meziprodukt 29 trans-6-benzy1oxypropý1 2-terč.buty1dimethy1Si 1oxymethy1tetra hydro-2H-pyran

K promíchávané suspenzi hydridu sodného (60¾ disperze v minerálním oleji). (90 mg) v bézvodém tetrahydrofuranu. (5 ml.) se přidá meziprodukt 28 (0,54 g) při RT pod'dusíkem- Směs se zahřeje na 30°C,. nechá še 15 minut míchat a znovu se ochladí na ŘT. Přidá se benzylbrómid (0,27 ml) a reakční směs se míchá při RT 4,5 hodiny. Reakční směs se Odpaří ve vakuu na oxidu křemičitém a chromatograficky se vyčistí (S1O2, 50¾

EtOAc/hexan), aby se získala čirá bezbarvá kapalina <1,1 g).

TLC Rf - 0,6 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 30 trans-6-benzyloxypropyl-2-hydroxymethyltetrahydro-[2Hd-pyran

Meziprodukt 29.(0,6 g) v 1M roztoku tetrabuty1arnoniumfluroridú v THF (3,5 ml) se při RT míchá 16 hodin. Reakční se Odpaří ve vakuu na oxidu křemičitém a chromatograficky se vyčistí (S1O2, 50¾ EtOAc/hexan), aby se získala čirá bezbarvá kapalina (0.28 g).

TLC Rf = 0,2 (50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 31 trans-6-benZyloxypropyl-2^methylsulfOnyloxymethyltetrahydro[2H]-pyraň

- Sloučenina meziprodukt 31 se připraví z meziproduktu 30 podobným způsobem jako meziprodukt 8.

TLC Rf =0,3 ¢50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 32

6-benzyloxy-9[transů’ C6' -benzýloxypropy 1)tetrahydro-[2Hl pyranylmethý11-2,8-di am i nopúr i n

Meziprodukt 32 še připraví z meziproduktu 31 podobným Způsobem jako meziprodukt 9TLC Rf = 0,7 ¢10¾ MeOH/CH2Cl₂)

Meziprodukt 33 tranš-2-terc-butyld imethyls iloxymethy1-6-methoxykarbony1ethyl tetrahydro-[2Hl-pyran

Acetonitril <4 ml), tetrachlormethan (4 ml) a voda <6 ml) se přidají k meziproduktu 28 (0,98 g) a jodistanu sodnému <2,

g)- Přidá se hydrát chloridu ruthenítéhp ¢5 mg) a směs se intenzivně míchá při RT, po 2,5 hodiny. Reakční směs se zředí 1M HCL a extrahuje CH2CI2- Organické extrakty se spojí, vysuší še CMgSEhj) a rozpustidlo se odstraní ve vakuu a vznikne pryskyřice, která se rozpustí v diethyletheru. Roztok se ochladí na 0°C a ošetří se diazomethanem <H.J. Backer a kol., Organ i č Sýnthes i.s, Gól. Vol-. V, 351) <8,3 mmol). Reakční směsí se míchá při RT pó 22 hodin. Rozpustidlo se potom odstraní ve vakuu a reziduum se chromatograficky vyčistí <SiO2, 50¾

EtOAc/hexan), aby se získala Čirá bezbarvá kapalina <0,50 g)

TLC Rf = 0,6 ¢50¾ EtOAc/hexan)

Meziprodukt 34 trans-2-hydroxymethy1-6-methoxykarbonylethyltetrahydro-2H-pyran Sloučenina meziprodukt 34 se připravuje z meziproduktu 33 podobným způsobem jako meziprodukt 30.

TLC Rf =0,1 ¢50¾ EtOAč/hexan)

Meziprodukt 35 trans ^6-methoxykarbony 1 ethy 1 -2-methy 1 su 1 f ony 1 oxyinethy 1 tetra hydro-2H-pyran

Sloučenina meziprodukt 35 še připravuje z meziproduktu 34 podobným způsobem jako meziprodukt 8.

TLC Rf = 0,7 (EtOAc)

Meziprodukt 36

6-benzyloxy-2,8-diamino-9-(trans-2*-(6’-methóxykarbony1ethyl) tetrahydro-[2H]-pyranymethy 1 jpiirin

Sloučenina meziprodukt 36 se připravuje z meziproduktu 35 podobným způsobem jako meziprodukt 9.

TLC Rf = 0,7 ¢10¾ MedH/CH₂Cl2>

Meziprodukt 37

C±> methylsulfonyloxyHiethyl-l,4-dioxan

Sloučenina meziprodukt 37 še připraví z (±) hydroxy methyl-1,4-dioxanu <R.I.Duclos a kol-, Journal of Organic Chemistry, 1992, 57, 6156-6163) podobným způsobem jako meziprodukt 8.

TLC Rf = 0,4 ¢50¾ MeOH/CHzClž)

Meziprodukt 38

6-benzyloxy-2,8-dianiinó-9-[2' -<1* ,4’ -dioxany 1 jmethyllpurin

Sloučenina meziprodukt 38 se připravuje z meziproduktu 37 podobným způsobem jako meziprodukt 9.

TLC Rf = 0,7 ¢10¾ MeOH/CH2Cl2)

Meziprodukt 39

2-hydroxymethy1te t rahý dro th i ofen

Chlorid vápenatý CIO g) se přidá k roztoku methyltetrahydřothiofen-2-karboxylatu (J. Vróbel a E. Hejchman, Bul}. Polish Acad. Sci. Chera. , 1987, 3521) ¢10,,0 g) v ethanolu ¢200 ml) a směs se míchá 30 minut- Přidá se tetrahydróboritan sodný ¢5,.2 g) a suspenze se míchá přes noc, potom se nalije do ledově, chladné 1 M HCl ¢500 ml) a extrahuje se CIfeCl2. Smíchané extrakty se proiayjí vodou a solným roztokem, vysuší á odpaří se ve vakuu, aby se získala sloučenina meziprodukt 39 jako bezbarvá kapá1 i na (7,05 g).

TLC Rf = 0,22 <20% WeOH/CH2.Cl2)

Meziprodukt 40

2-ftalimidomethyltetrahydrothiořěn

Roztok DEAD <11 g) v suchém THF (20 ml) se přidá lt roztoku meziproduktu 39 <7,3 g), ftalimidu (10,2 g) a trifenylfósfinu (17 g) v siichém THF a. roztok se přes noř míchá, potom se Odpaří a residuum se rozmělní v etheru. Tuhé reziduum se odfiltruje a filtrát se odpaří a vyčistí sě chromatograficky <15% EtOAc/ hesian), aby se získal meziprodukt 40 jako bílá tuhá látka <10,5 g).

TLC Rf = 0,38 <20% MeOH/CH2Cl2)

Meziprodukt 41

2-áminomethy1tetrahydrothiofen

Hydrát hydrazinu (2,52 g) se přidá k roztoku meziproduktu v EtOH (60 ml) a směs se vaří pod refluxem 3 hodiny, potom se ochladí a filtruje a a filtrát se odpaří. Residuum se chromatografuje (5% MeOH/CH2Cl2 ), aby se získala sloučenina meziprodukt 41 jako světle žlutá kapalina (3,25 g).

TLC Rf =0,41 (5% MeOH/CH₂Cl2)

Meziprodukt 42

2-am i no-5-n i tro-4-< 2’-tetrahydroth i enylmethy1ámi ono)pyrimidin-6-[1H]-on

Sloučenina meziprodukt 42 se připravuje z meziproduktu 41 podobným způsobem jako meziprodukt 1.

TLC Rf = 0il5 (20% MeOH/CH₂Cl2)

Meziprodukt 43

2-am i no-4-<2'-tetrahydroth ienylmethy1am i nó)-5-[1-(3(ethoxykarbony1)th ioure i do ]1pyrimi d i n-6-11H]-on

Sloučenina meziprodukt 43 se připravuje z meziproduktu 42 podobným způsobem jako meziprodukt 2TLC Rf = 0,32 <10% MeOH/CH2Cl2)

Meziprodukt 44 ethy l-6-am i no-4-<2'-tetrahydroth i énylmethylami no)oxazólo[5,4d] pýr.imidín-2-karboxy lat

- - Sloučenina meziprodukt 44 se přípravuje z meziproduktu 43 podobným způsobem jako meziprodukt 3.

TLC Rf = 0,53 <10% MeOH/CífeClz)

Meziprodukt 45

2-amino-5-nitro-4-<2‘-<1-terc.butoxykarbony1)-pyrrolidiny1 methylainíno-5-nitropyrimidin-6-[ 1H] -on

Sloučenina meziprodukt 45 se připravuje z 1-terc.butoxykarbony 1-2-am i nomethylpyrrol id i nu podobným způsobem jako meziprodukt 1.

TLC Rf - 0,14 <20% MeOH/CHaCl₂)

Meziprodukt- 46

2-aminO-4-<2'-<1-terc-butoxykarbonyIpyřrolidinylmethy1 )emino)5-[ 1-13-ethoxykarbonylthioiireido] ] pyrimidih-6-οη

Sloučenina meziprodukt 46 se připravuje z, meziproduktu 45 podobným způsobem jako meziprodukt 2.

TLC Rf - 0,23 <10% MeOH/CH2Cl2)

Meziprodukt 47 ethy 1 -6-ainino-4-<2’ - < 1-terc. butoxykarbonyIpyřrol idiny lmethy 1) amino)dxazólot5,4-d3pyrimidih-2-karbamat

Sloučenina meziprodukt 47 se připravuje z meziproduktu 46 podobným způsobem jako meziprodukt 3.

TLC Rf = 0,42 <10% Me0H/CH2Cl₂)

Meziprodukt 48

8-amino-9-<2' -(1-terc .biitoxýkarbonylpýrrol idiny 1 ))guanin

Sloučenina meziprodukt 48 še připravuje z meziproduktu 47 podobným způsobem jako v příkladu 1TLC Rf = 0,45 <25% Me0H/CH₂Čl₂)

Mezi produkt 49

5-<térc.butyldimethylsilyloxymethyl)pyrrolidin-2-on

Sloučenina meziprodukt 49 se připravuje z 5-hydroxymethylpyrrolidin-2-onu podobným způsobem jako v meziproduktu 27.

TLC Rf = 0,4 <5fc MeOH/ClfeCla)

Meziprodukt 50

-terč.-butoxykarbony lmethy1 -5 - terč -butyld imethylš i 1yloxy 1 methylpyrrolidih-2-on

Roztok meziproduktu 49 <1,0 g) v tetrahydrofuranu <5 ml) se přidá k suspenzi hydřidu sodného <0,21 g) v-tetrahydrofuranu <20 ml) a míchá se 0,5 hodiny, přidá se teřc.butylbromacětat <0,94 g) v THF <5 ml). Po 1,5 h se směs zředí vodou a extrahuje dichlormethanem, promyje se vodou a usuší <MgS04). Koncentrací se získá bezbarvý olej, který se dále čistí chromatograficky na oxidu křemičitém.. Získaná sloučenina meziprodukt 50 je bezbarvý olej <1,5 g).

TLC Rf = 0,65 <5^ MeOH/CH2Cl₂)

Meziprodukt 51

1-terc-butoxykarbonylmethyI-5-hydroxymethylpyrrolid in-2-on

Sloučenina meziprodukt 51 se připravuje z meziproduktu 50 podobným způsobem jako meziprodukt 30TLC Rf = 0,3 <5% MeOH/CIfeCl2)

Meziprodukt 52

1-terc - butoxykarbony lmethy 1 -^5-methansuÍf ony loxymethyl pyrrolidin-2-oh

Sloučenina meziprodukt 52 se připravuje ž meziproduktu 51 podobným způsobem jako meziprodukt 8.

TLC Rf = 0,45 <5£ MeOH/ClfeClz)

Meziprodukt 53

1-terč.butoxykarbonylmethy1-5-až i domethy1pyrro1 i d i n-2-on

Azid sodný <0,55 g) še.přidá k roztoku meziproduktu 52 <1, 3 g) v ĎMF <15 ml) a zahřívá se na 50°C 48 h- Reakční směs se zředí vodou (50 ml) a extrahuje etherem (3x100 ml). Spojené etherové extrakČní podíly se promyjí vodou <4x50 ml), usuší (MgSttj) a vysušený koncentrát dá sloučeninu meziprodukt 53 jako světle žlutý olej (0,7 g).

TLC Rf = 0.6 (5¾ MeOH/CHzClž)

Meziprodukt 54

1- terc-butoxykarbonylmethy1-5-arainomethylpýrrolidih-2-on

Meziprodukt 53 (4,8 g) a trifenylfósfin <10.5 g) se rozpustí v THF tlOO ml) a vodě (8 ml). Po 48 hodinovém míchání še reakční směs odpaří do sucha a chromatografleky se vyčistí ha oxidu křemičitém (5¾ MeOH/CH2CI2)- Získá se sloučenina meziprodukt 54 jako žlutý olej (2,7 g).

TLC Rf = 0,4 (5¾ MeOH/CtfeCl2l

Meziprodukt 55

2- aimino-4-( 1 ’ -terč. butoxykarbohylmethý1)pýrrol idin-2onylmethylamino)-5-nitropyrimidiri-6-[1H]-on

Sloučenina meziprodukt 55 se připravuje z meziproduktu 54 podobným způsobem jako.meziprodukt 1- .

TLC Rf = 0,6 (10¾ MeOH/ClfeClž)

Meziprodukt 56

2-amino-4-(l’ terč.butóxykarbonylmethylpyřrolidin-2'-onyl-5’methy lam i rio ) -5 -11 - [ 3 - ( ethóxy kar bony i ) th i oure i doj 1 pyr im i d i n-6 Γ.1Η1 -on

Sloučenina meziprodukt 56 se připravuje z meziproduktu 55 podobným způsobem jako meziprodukt 2.

TLC Rf = 0,45 ¢10¾ MeOH/CífeClz)

Meziprodukt 57 ethy1-6-am i no-4-(1’-teťc.butoxykarbony1methy1pyrr01 i d i n-2’-ony1 -5 ’ methy lam i no ) -oxazo lot 5/ 4, dlpyri in i di π-2-karbamet

Sloučenina meziprodukt 57 sé připravuje z meziproduktu 56 podobným způsobem jako meziprodukt 3.

TLC Rf = 0,55 (10¾ MeOH/CH2Cl2)

Meziprodukt 58

9-(i'.-karboxymethy lpyrrol idin-2' -on-5' -y lmethy 15-8e tlioxy karbony 1 am i noguan i d i n

K roztoku meziproduktu 57 (0,85 g) ve vodě (30 ml 5 se přidá uhličitan draselný (0,14 g) a refluxuje se 24 hodin. Výsledná směs se potom míchá při okolní teplotě 1 týden a sraženina se oddělí filtrací. Filtrát sě odpaří do sucha a získá se sloučenina meziprodukt 58 (0,36 g5[M+H]* = 394

Příklad 1

8-am i no-9-(2’-tetrahydrofuranylmethy1iguanin

Meziprodukt 3 (0,27 gi se pód refluxem zahřívá s uhličitanem draselným (0,23 gi v methanolu (25 ml5 po 6 hodin. Methanol sě odstraní ve vakuu a nahradí se vodou¹ (25 mi 5 a pod refluxem se zahřívá 6 hodin. Ochlazená reakční směs se neutralizuje nasyceným roztokem Chloridu amonného. Vzniklá tuhá látka se rozpustí ve vodném roztoku hydroxidu sodného a vysráží se přidáním kyseliny octové- Sraženina se odfiltruje, promyje (vodui a usuší a získá se sloučenina 8amino9(2’ -tetrahydrof urany lmethy1iguanin (0.,-23 gi.

TLC Rf = 0,2 (30¾ MeOH/ClfeClzi ¹H NMR (200 MHz: DMŠO-de5, 1,6-2,1 (m,4H5, 3,7 (m.lHi, 3,95 (m,3H5, 4,25 (m,lH5, 5,5 (bs,2H5, 6,1 (bs^Hi, 10,3 (bs.lHi.

Přiklaď 2

8-ant intj-9-(2’ - té trahy dropy ranyl methyl iguanin

Tato sloučenina se připraví z meziproduktu 6 podobným způsobem, jaký je uveden v příkladu 1TLC Rf = 0,1 (10¾ MeOH/CH2d2Í ’H NMR (200 MHz: DMS0-d&i, S 1,0-1,9 (m,6H5, 3,3 (m,lH5, 3,6 (m,lH5, 3,8 (m,3H5, 5,8 (bs,2H5, 6,3 (bs,2H5, 10,6 (bs,lH539

Příklad 3

-am ino -9- < 2' - tetrahydropyrany líne thy 1) guan i nhydroch 1 or i d

Aeetýlchlorid (14 ml) se přidá k methanolu při, 0°C.......

a roztok se míchá 10 minut- K roztoku se přidá sloučenina připravená podle příkladu 2 a směs se míchá při RT I hodinu. Rozpustidlo se ve vakuu odstraní a získá se bílá tuhá látka, která se usuší při 80°C ve vakuově sušárně (0,64 g).

HPLC (vysokotlaká kapalná chromatografie) (Novapak C-18 lOOx 8mm, 2^:3 MeOH/HzO, 1 ml/min); Rt 8,75 minut¹H NMR (200 MHz; DMSO-de), 1,1-1,9 (ιη,6Η), 3,3 (m,lH), 3,7 (m.lH), 3,8-4,2 (m,3H), 7,1 (bs,2H), 8,2 (s,2H), 11,4 (s,lH).

í .

Příklad 4 ť r I (R) -8-amino-9-[2' -(tetrahydropyrany linethy 1)1 guanindihydro chlorid

Meziprodukt 12 (38 mg) se smíchá v proudu N2 s HC1 (1 ml) v ethanolu (9 ml)- Potom se přidá katálysátor Pd/uhlík (10¾ d) (5 mg) a celek se míchá pod vodíkovou atmosférou 3 hodiny. Reakční směs sé přefiltruje. a rozpust idlo se ve vakuu odpaří a získá .se bílá tuhá látka (22,6 mg).

TLC Rf = 0,43 (20¾ MeOH/CH₂Cl2)

LM+Hl- = 338

Příklad 5 (S)-8-am i no-9- ( 2' -tetrahydropyrany1methy1)guan i nď i hýdroc h1or i d Tato sloučenina se připraví z meziproduktu 9 podobným i Způsobem, jaký je uveden v příkladu 4.

TLC Rf = 0,25 (20¾ MeOH/CH₂Cl2) [M+Hl* = 338

Příklad 6

8-aiiiino-9-[2‘ -(6‘ -methy 1 tetrahydropyrany 1 )methyl 1 guan i nd i hydro chlórid i

- 40 Tato sloučenina se připraví z meziproduktu 14 podobným způsobem, jaký je uveden v příkladu 4TLC Rf = 0,05 (10¾ MeOH/CIfeCl₂)

1M+H1* =279

Přiklaď 7

8-amino-9-[2'-C4’-methyltetrahydropyrany1ímethyl]gúanln dihydrochlorid

Tato sloučenina se připraví z meziproduktu 16 podobným způsobem, jaký je uveden V příkladu 4.

TLC Rf = 0,1 (10¾ MeOH/CH₂Cl₂)

1M+H1* = 279

Příklad 8 . +·

8-amino-9-[2'-C4’ ,6'-dimethyltetrahydropyranýImethy1ÍTguahin dihydrochlorid

Tato sloučenina se připraví z meziproduktu 18.podobným způsobem, jaký jé uveden v příkladu .4.

TLC Rf = 0,15 ¢10¾ MeOH/CIfe Cl₂) (M+H]⁺ = 293

Příklad 9

8-amino-9-C2’-C6'-karboxymethyl)tetrahydropyranyImethy1jguanin dihydrochlorid

Tato sloučenina se připraví z meziproduktu 22 podobným způsobem, jaký je uveden v příkladu 4TLC Rf = 0,1 ¢10¾ MeOH/CIfe Cl₂) [M+Hl·* = 323

Příklad 10

CS”,R^)-8-amino-9-(2’-(6’-propy1>tetrahydro-2H-pyranylméthyl) guan i nd ihydroch1 or i d

Táto sloučenina se připraví z meziproduktu 26 podobným způsobem, jaký je uveden v příkladu 4TLC Rf = 0,1 (10¾ MeÓH/CHzCl₂) [M+Hl·*· = 307

Přiklad 11 tranS“8~:amino-9-(2' -(6' -hydroxypropy1) tetrahy dro211-py raný 1 methy 1) guan i nd i hy dr oe h 1or í d

Tato sloučenina se připraví, z meziproduktu 32 podobným způsobem, jaký je uveden v příkladu 4.

TLC Rf = 0,05 (10¾ MéOH/CH2Cl2) [M+Hl* = 323

Příklad 12 trans-Ť8-amlno-9-(2’ -(6' -methoxykarbony1 ethyl itetrahy dropy raný 1 methyljguanindihydrochlorid

Tato sloučenina se připraví z meziproduktu 36 podobným způsobem, jaký je uveden v příkladů 4TLC Rf = 0,1 (10¾ MeOH/CH2Cl2>

(M+líJ·*· = 351

Příklad 13

8-ami no-9-(2* 1,4-dioxany1Imethyl) guan i nd i hydrochlorid

Tato sloučenina se připraví z meziproduktu 38 podobným způsobem, jaký je uveden v příkladu 4.

TLC Rf = 0,12 (10¾ MeOH/CH₂Cl2>

1M+H1⁺ = 267

Příklad 14

8-ami no-9-(2'-tetráhydrothi eny1)guaniů

Tato sloučenina se připraví z meziproduktu 46 podobným způsobem, jaký je uveden v příkladů 1TLCRf = 0,26 (25¾ MeOH/CIfeCh) ¹H NMR (DMSO), 1,65 (2 H, m) , 1,92-2,20 ¢2 H, m), 2,62-2*90 (2 Η, m), 3,70-3,97 (3 Η, m), 6,00 <2 H, br s), 6,38 <2 H, br s), 10,81 Cl H, br s).

Příklad 15

9-amíno-9-.C2* -ď -oxótetrahydrdthienylmethyl)guanin

Peroxid vodíku <18 ml) še přidá k roztoku sloučeniny z příkladu 14 <41 mg),v kyselině octové <3 ml) a roztok se míchá 3 b, poton se odpaří a résiduum sé rozpustí v roztoku hydróxydu sodného. Přidá še nasycený vodný roztok chloridu amonného a filtrací se oddělí a promyje vodou sloučenina příkladu 15Výtěžek 17.5 mgTLC Rf = 0,20 (20¾ MeOH/CHžClz ) [Μ+ΗΪ+ = 283

Příklad· 16

8-amino-9-(2' -^(1, ’ 1’ -dióxytetráhydrothienylmethyl)guanin

Peroxid vodíku (100 ml) se přidá k roztoku sloučeniny z příkladu.14 (67 mg) v kyselině octové (3 ml) á roztok se míchá 18 h, potom se odpaří a résiduum se zamíchá do vodného roztoku uhličitanu draselného- Sražená tuhá. látka se oddělí filtrací, promyje še vodou a získá se sloučenina příkladu 16 jako béžová tuhá látka (40 mg).

TLC Řf = 0,32 (20¾ MeOH/CfcClz)

ÍM+H3+ = 299

Příklad 17

8-amino-9-<2‘-pyrrolidinylmethy1)guanintrihyďrochloriddihydrat Meziprodukt 48 (56 mg), methanol (4,5 ml) a 3N kyselina chlorovodíková (4,5 ml) šé smísí a míchají, se při teplotě místnosti 1 h. Směs se potom odpaří ve vaku, aby se získala jmenovaná sloučenina (35 mg)43

TLC Rf - 0,2 (20¾ MeOH/CH2Cl2> [M+H]* - 250

Příklad 18

8-amino-9-(2*-pyrrolidinylmethyl)guanin

Sloučenina podlé příkladu 18 šé připraví že .sloučěníhý příkladu 17 způsobem podobným jako v příkladu 1.

¹H NMR (200 MHz, 3,2-4,0 (m, 4H),

IM+H1* = 250

Příklad 19

DMSO-de )·. 1,4-2,0 (m, 4H), 2,8-3,0 (m, 2H), 6,1-6.,5 (in, 4HT, 9í7 (brSi IH)

8-am i no-9-(1’-karboxymethy1pyrró1 i d i n-2’-on-5'-y1methyI ) guanindihýdróch1ořid

Meziprodukt 58 (0,1 g) se rozpustí v 2M kyselině chlorovodíkové (10 rol) a pod refluxem še zahřívá 48 hodin. Pó odpaření dó sucha se získá jmenovaná sloučenina jako bílá tuhá látka (0,10 g).

Claims (9)

1. PATENTOVÉ

   NÁROKY

   1- Sloučenina obecného vzorce I ·>*>

   kde n « 0 R¹ je R2 je R³ je

   (?) (^c)

   - 2;

   Η, NH2 nebo halogen;

   H nebo NH2;

   některá ze čtyřech skupin a)

   b)

   c) nebo d) kde m = 0 nebo 1;

   X je O, NR⁵ nebo S(0)o-2 a ve skupině b) jsou X stejné nebo různé;

   R⁴ je H ňébů jedna nebo více skupin nezávisle vybraných z Ci-ealky 1-R⁶ a aryl-R⁶;

   R⁵ je H, Ci-ealkyi-R⁶, C2-6alkenyl, aryl, -aryl-Ci-salkyl, -Ci-ealkyl-aryl, -Ciealkyl-heteroCCi-elaiky1,

   CO2C1-6 alkyl-R⁶, CONH-Ci-₆alky1-R⁶. CO-Ci^ealky 1-R⁶ nebo SO2 -Ci -6 a 1 ky 1 -R⁶ :

   R⁶ je H. CQ2H, C02Ci-6alkyl, CONIfe , CONCGi-ealky 1 >2 , CONHCCj-ealky1), CO-Ci-ealkyl, CO-aryl, CO-heteroaryl· tertrazolyl, NHSO2CF3 , SO2NH-C1-6alkyl, SQzNfCi-ealkyl>2 , . SífeKH-aryl, NHCO-Ci-ealkyl, NHCONH-Ciealkyl, NHCONH-aryl, ŇHSO2-Ci-ealkyl, ŇHŠCte-áryí, CN, NH2, OH, O-Ci-ealkyl nebo O-aryl:

   v jakékoliv tauťomerní formě, formě soli, solvatové a/nebo hydratové formě.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1,'kde n = 1.
3. 3. Sloučenina podle nároku 1 nebo nároku 2, kde R¹ je NHz nebo halogen. ,, ¹
4. 4. Sloučenina podle kteréhokoliv předchozího nároku 1 až 3, kde R² je NH25. Sloučenina podle kteréhokoliv předchozího nároku 1 až 4, kde R³ je skupina a), b) nebo c) a X je O, S nebo NR®6- Sloučenina podle kteréhokoliv předchozího nároku 1 až
5. 5, kde R⁴ je H nebo Ci-
6. 6alky1-R⁶.
7. 7. Sloučenina podle kteréhokoliv předchozího nároku 1 až 6, kde R® je H nebo Ci-e alky 1-R⁶.
8. 8. Sloučenina podle kteréhokoliv předchozího nároku 1 až 7, kde R⁶ není SQ2N<Ci-e alky 1)2 nebo CN.
9. 9. Sloučenina podle nároku 8, kde R⁶ je H, CO2H,

   CQ2 -^Ci-ealkyl, OH, NH2. tetrazolyl nebo NHSQ2GF3 10. Sloučenina podle nároků 8 nebo 9, kde R³ je skupina a) nebo c), kde m = 0 !J , *

   - 46 11.

   12.

   13.

   Sloučenina podle nároků 8 nebo 9, kde R³ je skupiha a> nebo c), kde m = 1.

   Sloučenina podle nároků 8 nebo 9, kde R³ je Skupina b) nebo d).

   Sloučenina podle nároku 1, která je 8-amino-9-(2'tetřahýdropyranylmethy1jguanin nebo 8-amino-9-C2'tetrahydrofuranylmethy1jguanin.

   14.

   Sloučenina podle kteréhokoliv předchozího nároku 1 až 13, ve formě jednoduchého enantiomeřu, diastereoisomerů nebo směsi takovýchto izomerů.

   15.

   16.

   Farmaceutický prostředek pro použití v terapii, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14. a farmaceuticky přijatelnou zřeďovací látku a nosič.

   Způsob přípravy sloučeniny podlé kteréhokoliv z nároků 1 až 14, jestliže R² je NHž, vyznačující Se t í m, že zahrnuje:

   a.) reakci sloučeniny obecného vzorce XVI (XVI) kde R^1<J je snadno Odstranitelná chránící skupina, např. benzy1, Se sloučeninou obecného vzorce XIV u <XIV) kde R⁹ je halogenový atom nebo odstupující skupina: a

   b) odstranění ochranné skupiny R¹⁰ ze vzniklého meziproduktů obecného vzorce XV.

   například v přítomnosti plynného vodíku a katalyzátoru v rozpustidlu nebo kyselém roztoků17. Způsob přípravy 9-substituúyaného-8-éU[iinoguanínu se substituentem 9-, který jest -<CH2)n-R. kde n = 0-2 á R je .·.Ci-6alkyl-R⁶ , aryl, substituovaný aryl, heteroaryl, substituovaný heteroaryl, Ca-9cykloalkyl nebo substituovaný C3-9cykloálkyl, v y z n a č u j í se t í in, že zahrnuje reakci sloučeniny vzorce XIV, tak jak je definováno v nároku 16, s odpovídající sloučeninou vzorce R³-<CH2)_n-R a reakci vzniklého meziproduktu v přítomností vodíku a katalyzátoru v rozpustidlu nebo kyselém roztoku.

   18. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14 pro výrobu léků pro léčení nebo prevenci stavu spojeného s Ť-buňkovou proliferací nebo stavu zprostředkovaného *' T-buňkovou proliferací, jako je autoimunhí onemocnění.

   * 19- Použití podle nároku 18, kde stav je psoriasa, atopické dermatida, kontaktní dermátida nebo ekzém20. Použití podle nároku 18, kde stavem je chronický alergický stav jako astma.

   - 48 21- Použití podle nároku 18, kde stav je myasthenia gravis nebo roztroušená skleróza- 22.- Použití podle nároku 18, kde stav je rheumatická arthritida, systémový lupus erythemátósus nebo dna.

   23. Použití podle nároku 18, kde stav je T-bunková leukemie, .kožní T-buňkový lymphóm nebo T-bunková rakovina.

   24. Použití podle nároku 18, kde stav je odmítání transplantátu orgánu nebo kostního morku.

   25. Použití podle nároku 18, kde stav je vírová nebo protozoalní infekce nebo malarie.

   26. Použití podle nároku 18, kde stav je dráždivě onemocnění, zažívacího ústrojí jako je Grohnova Choroba nebo vředový zánět.

   27.. Použití podle nároku 18. kde stav je. diabetes typu I.

   28. Prostředek vyznačující se tím, že ' obsahuje sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 áž 14 +

   a protivirové činidlo, metaboližující se purinnukleosidfosforylasou, jako kombinovaný přípravek pro odděleně, simultánní nebo po sobě následující použití pro léčení stavu, pro který je toto činidlo prospěšné29. Prostředek vyznačující se tím, že

   i. obsahuje sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14 a protirakovinové činidlo, metabolízující se purinř nukleosidfosforylášoui jako kombinovaný přípravek pro odděleně, simultánní nebo po sobě následující použití pro léčení stavu, pro který je toto Činidlo prospěšné.

   30. Způsob přo selektivní potlačování savčí T-buněČné funkce j bez zmenšeného účinku na humorální CB-buněčnou) imunitu, vyznačující setím, že se subjektu podává účinné množství sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14.