CZ35289U1 - Neutrální lidské mléčné oligosacharidy (HMO) z mikrobiální fermentace - Google Patents
Neutrální lidské mléčné oligosacharidy (HMO) z mikrobiální fermentace Download PDFInfo
- Publication number
- CZ35289U1 CZ35289U1 CZ201936835U CZ201936835U CZ35289U1 CZ 35289 U1 CZ35289 U1 CZ 35289U1 CZ 201936835 U CZ201936835 U CZ 201936835U CZ 201936835 U CZ201936835 U CZ 201936835U CZ 35289 U1 CZ35289 U1 CZ 35289U1
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- hmo
- lacto
- solution
- fucosyllactose
- neutral
- Prior art date
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims description 74
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims description 74
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 title claims description 47
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 title claims description 45
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 title claims description 45
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 title claims description 27
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 title claims description 27
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 title claims description 18
- HWHQUWQCBPAQQH-BWRPKUOHSA-N 2-fucosyllactose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O HWHQUWQCBPAQQH-BWRPKUOHSA-N 0.000 claims description 37
- 229940062827 2'-fucosyllactose Drugs 0.000 claims description 36
- HWHQUWQCBPAQQH-UHFFFAOYSA-N 2-O-alpha-L-Fucosyl-lactose Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O HWHQUWQCBPAQQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- SNFSYLYCDAVZGP-UHFFFAOYSA-N UNPD26986 Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)OC(CO)C(O)C1O SNFSYLYCDAVZGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 21
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 20
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 15
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 14
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 11
- AUNPEJDACLEKSC-ZAYDSPBTSA-N 3-fucosyllactose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@H](CO)[C@@H]1O AUNPEJDACLEKSC-ZAYDSPBTSA-N 0.000 claims description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 7
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 claims description 6
- AXQLFFDZXPOFPO-UHFFFAOYSA-N UNPD216 Natural products O1C(CO)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(NC(=O)C)C1OC(C1O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)OC1CO AXQLFFDZXPOFPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- AXQLFFDZXPOFPO-UNTPKZLMSA-N beta-D-Galp-(1->3)-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp-(1->4)-beta-D-Glcp Chemical compound O([C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]([C@H]1O)O[C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O1)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)O)NC(=O)C)[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO AXQLFFDZXPOFPO-UNTPKZLMSA-N 0.000 claims description 6
- USIPEGYTBGEPJN-UHFFFAOYSA-N lacto-N-tetraose Natural products O1C(CO)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(NC(=O)C)C1OC1C(O)C(CO)OC(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)C1O USIPEGYTBGEPJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- ODDPRQJTYDIWJU-UHFFFAOYSA-N 3'-beta-D-galactopyranosyl-lactose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)OC(CO)C1O ODDPRQJTYDIWJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- TVVLIFCVJJSLBL-SEHWTJTBSA-N Lacto-N-fucopentaose V Chemical compound O[C@H]1C(O)C(O)[C@H](C)O[C@H]1OC([C@@H](O)C=O)[C@@H](C(O)CO)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](OC2[C@@H](C(OC3[C@@H](C(O)C(O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 TVVLIFCVJJSLBL-SEHWTJTBSA-N 0.000 claims description 5
- RJTOFDPWCJDYFZ-SPVZFZGWSA-N Lacto-N-triaose Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@H](CO)[C@@H]1O RJTOFDPWCJDYFZ-SPVZFZGWSA-N 0.000 claims description 5
- FZIVHOUANIQOMU-YIHIYSSUSA-N alpha-L-Fucp-(1->2)-beta-D-Galp-(1->3)-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp-(1->4)-D-Glcp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2[C@H]([C@H](O[C@@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]4[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]4O)CO)O[C@H](CO)[C@@H]3O)O)O[C@H](CO)[C@H]2O)NC(C)=O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O FZIVHOUANIQOMU-YIHIYSSUSA-N 0.000 claims description 5
- CMQZRJBJDCVIEY-JEOLMMCMSA-N alpha-L-Fucp-(1->3)-[beta-D-Galp-(1->4)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp-(1->4)-D-Glcp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H]([C@H](O[C@@H]3[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)O[C@H](CO)[C@@H]2O)O)[C@@H]1NC(C)=O CMQZRJBJDCVIEY-JEOLMMCMSA-N 0.000 claims description 5
- RQNFGIWYOACERD-OCQMRBNYSA-N alpha-L-Fucp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->2)-beta-D-Galp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp-(1->4)-D-Glcp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]4[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]4O)CO)O[C@H](CO)[C@@H]3O)O)[C@@H]2NC(C)=O)O[C@H]2[C@H]([C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O2)O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O RQNFGIWYOACERD-OCQMRBNYSA-N 0.000 claims description 5
- DUKURNFHYQXCJG-JEOLMMCMSA-N alpha-L-Fucp-(1->4)-[beta-D-Galp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp-(1->4)-D-Glcp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](NC(C)=O)[C@H](O[C@@H]2[C@H]([C@H](O[C@@H]3[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)O[C@H](CO)[C@@H]2O)O)O[C@@H]1CO DUKURNFHYQXCJG-JEOLMMCMSA-N 0.000 claims description 5
- PDWGIAAFQACISG-QZBWVFMZSA-N beta-D-Gal-(1->3)-beta-D-GlcNAc-(1->3)-[beta-D-Gal-(1->4)-beta-D-GlcNAc-(1->6)]-beta-D-Gal-(1->4)-D-Glc Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@H]([C@@H](O[C@@H]1CO)OC[C@@H]1[C@@H]([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O1)O)NC(=O)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O PDWGIAAFQACISG-QZBWVFMZSA-N 0.000 claims description 5
- NPPRJALWPIXIHO-PNCMPRLYSA-N beta-D-Gal-(1->4)-beta-D-GlcNAc-(1->3)-[beta-D-Gal-(1->4)-beta-D-GlcNAc-(1->6)]-beta-D-Gal-(1->4)-D-Glc Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@H]([C@@H](O[C@@H]1CO)OC[C@@H]1[C@@H]([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O1)O)NC(=O)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NPPRJALWPIXIHO-PNCMPRLYSA-N 0.000 claims description 5
- DMYPRRDPOMGEAK-XWDFSUOISA-N beta-D-Galp-(1->3)-[alpha-L-Fucp-(1->4)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->3)]-D-Glcp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O[C@H]4[C@H]([C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O4)O)[C@@H](CO)O3)NC(C)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)OC(O)[C@@H]1O DMYPRRDPOMGEAK-XWDFSUOISA-N 0.000 claims description 5
- ODDPRQJTYDIWJU-OAUIKNEUSA-N beta-D-Galp-(1->3)-beta-D-Galp-(1->4)-beta-D-Glcp Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@H](CO)[C@@H]1O ODDPRQJTYDIWJU-OAUIKNEUSA-N 0.000 claims description 5
- RQNFGIWYOACERD-UHFFFAOYSA-N lacto-N-Difucosylhexaose I Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(C(CO)OC(OC3C(C(OC4C(OC(O)C(O)C4O)CO)OC(CO)C3O)O)C2NC(C)=O)OC2C(C(O)C(O)C(C)O2)O)OC(CO)C(O)C1O RQNFGIWYOACERD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- OQIUPKPUOLIHHS-UHFFFAOYSA-N lacto-N-difucohexaose I Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(C(CO)OC(OC3C(C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C3O)O)C2NC(C)=O)OC2C(C(O)C(O)C(C)O2)O)OC(CO)C(O)C1O OQIUPKPUOLIHHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- DMYPRRDPOMGEAK-UHFFFAOYSA-N lacto-N-difucohexaose II Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(C(OC3C(C(OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C(OC4C(C(O)C(O)C(C)O4)O)C(CO)O3)NC(C)=O)C(O)C(CO)O2)O)C(CO)OC(O)C1O DMYPRRDPOMGEAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- FZIVHOUANIQOMU-UHFFFAOYSA-N lacto-N-fucopentaose I Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(C(OC3C(C(OC4C(OC(O)C(O)C4O)CO)OC(CO)C3O)O)OC(CO)C2O)NC(C)=O)OC(CO)C(O)C1O FZIVHOUANIQOMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- FKADDOYBRRMBPP-UHFFFAOYSA-N lacto-N-fucopentaose II Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(NC(C)=O)C(OC2C(C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C2O)O)OC1CO FKADDOYBRRMBPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- CMQZRJBJDCVIEY-UHFFFAOYSA-N lacto-N-fucopentaose III Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(CO)OC(OC2C(C(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)OC(CO)C2O)O)C1NC(C)=O CMQZRJBJDCVIEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- IEQCXFNWPAHHQR-UHFFFAOYSA-N lacto-N-neotetraose Natural products OCC1OC(OC2C(C(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)OC(CO)C2O)O)C(NC(=O)C)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O IEQCXFNWPAHHQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940062780 lacto-n-neotetraose Drugs 0.000 claims description 5
- RBMYDHMFFAVMMM-PLQWBNBWSA-N neolactotetraose Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@H]([C@@H](O[C@@H]1CO)O[C@@H]1[C@H]([C@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@H](CO)[C@@H]1O)O)NC(=O)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O RBMYDHMFFAVMMM-PLQWBNBWSA-N 0.000 claims description 5
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 208000018685 gastrointestinal system disease Diseases 0.000 claims description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 3
- LKOHREGGXUJGKC-UHFFFAOYSA-N Lactodifucotetraose Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(C(O)C(O)OC2CO)OC2C(C(O)C(O)C(C)O2)O)OC(CO)C(O)C1O LKOHREGGXUJGKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LKOHREGGXUJGKC-GXSKDVPZSA-N alpha-L-Fucp-(1->3)-[alpha-L-Fucp-(1->2)-beta-D-Galp-(1->4)]-beta-D-Glcp Chemical compound C[C@@H]1O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]2O[C@@H]2[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]2O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O LKOHREGGXUJGKC-GXSKDVPZSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 79
- 238000000034 method Methods 0.000 description 56
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 33
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 description 31
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 30
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 26
- 230000008569 process Effects 0.000 description 25
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 description 23
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 16
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 16
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 14
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 13
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 238000004977 Hueckel calculation Methods 0.000 description 11
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 10
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 8
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 8
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 8
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 7
- -1 cationic ion Chemical class 0.000 description 7
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 7
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 6
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 239000002801 charged material Substances 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 5
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 5
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 5
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 5
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 5
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 5
- WJPIUUDKRHCAEL-UHFFFAOYSA-N 3FL Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(CO)OC(O)C1O WJPIUUDKRHCAEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 4
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 4
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 4
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 4
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000007738 vacuum evaporation Methods 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 239000002178 crystalline material Substances 0.000 description 3
- 230000002328 demineralizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 description 3
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 3
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical group [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 102000004366 Glucosidases Human genes 0.000 description 2
- 108010056771 Glucosidases Proteins 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 229910003424 Na2SeO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- 238000005575 aldol reaction Methods 0.000 description 2
- FRHBOQMZUOWXQL-UHFFFAOYSA-L ammonium ferric citrate Chemical compound [NH4+].[Fe+3].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O FRHBOQMZUOWXQL-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003011 anion exchange membrane Substances 0.000 description 2
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 2
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005115 demineralization Methods 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000011013 endotoxin removal Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 239000004313 iron ammonium citrate Substances 0.000 description 2
- 235000000011 iron ammonium citrate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 2
- MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N nitrilotriacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000011781 sodium selenite Substances 0.000 description 2
- 235000015921 sodium selenite Nutrition 0.000 description 2
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 2
- VYECFMCAAHMRNW-UHFFFAOYSA-N sulfamic acid Chemical compound NS(O)(=O)=O.NS(O)(=O)=O VYECFMCAAHMRNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010005094 Advanced Glycation End Products Proteins 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910021591 Copper(I) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241001198387 Escherichia coli BL21(DE3) Species 0.000 description 1
- 101100022282 Escherichia coli O157:H7 manC2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150102398 Galt gene Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241001446467 Mama Species 0.000 description 1
- 229910017621 MgSO4-7H2O Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 1
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 1
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 1
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- LFVGISIMTYGQHF-UHFFFAOYSA-N ammonium dihydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].OP(O)([O-])=O LFVGISIMTYGQHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 235000015197 apple juice Nutrition 0.000 description 1
- 229910052785 arsenic Inorganic materials 0.000 description 1
- RQNWIZPPADIBDY-UHFFFAOYSA-N arsenic atom Chemical compound [As] RQNWIZPPADIBDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008452 baby food Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M copper(I) chloride Chemical compound [Cu]Cl OXBLHERUFWYNTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000005868 electrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008151 electrolyte solution Substances 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 101150002054 galE gene Proteins 0.000 description 1
- 101150045500 galK gene Proteins 0.000 description 1
- 101150054547 galM gene Proteins 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003014 ion exchange membrane Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000013541 low molecular weight contaminant Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 101150032120 manC gene Proteins 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 101150062829 napH gene Proteins 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- LGQLOGILCSXPEA-UHFFFAOYSA-L nickel sulfate Chemical compound [Ni+2].[O-]S([O-])(=O)=O LGQLOGILCSXPEA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000363 nickel(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 235000015205 orange juice Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- JXKPEJDQGNYQSM-UHFFFAOYSA-M sodium propionate Chemical compound [Na+].CCC([O-])=O JXKPEJDQGNYQSM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004324 sodium propionate Substances 0.000 description 1
- 235000010334 sodium propionate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003212 sodium propionate Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011686 zinc sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000009529 zinc sulphate Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/163—Sugars; Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/30—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols, e.g. xylitol; containing starch hydrolysates, e.g. dextrin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/20—Reducing nutritive value; Dietetic products with reduced nutritive value
- A23L33/21—Addition of substantially indigestible substances, e.g. dietary fibres
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/702—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
- C07H1/08—Separation; Purification from natural products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pediatric Medicine (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Předkládané řešení popisuje purifikované neutrální lidské mléčné oligosacharidy (HMO) získané mikrobiální fermentací. Tento způsob používá kombinaci zpracování s kationtovým iontoměničem, zpracování s aniontovým iontoměničem a kroku nanofiltrace a/nebo elektrodialýzy, což umožňuje účinnou purifikaci velkých množství neutrálních HMO ve vysoké čistotě. Na rozdíl od purifikace, která se používá v dnešní době při fermentační výrobě neutrálních HMO, předkládaný způsob umožňuje poskytnutí HMO bez potřeby chromatografické separace. Takto purifikované HMO podle předkládaného technického řešení se mohou získat v pevné formě prostřednictvím sprejového sušení, jako krystalický materiál nebo jako sterilní zfiltrovaný koncentrát. Poskytnuté HMO podle předkládaného technického řešení jsou bez proteinů a rekombinantního materiálu, který vzniká z používaných rekombinantních mikrobiálních kmenů, a proto jsou velmi dobře vhodné pro použití v aplikacích v oblasti potravin, lékařských potravin a krmiv (např. krmivo pro domácí zvířata).
Dosavadní stav techniky
Lidské mléko představuje složitou směs sacharidů, tuků, proteinů, vitaminů, minerálních látek a stopových prvků. Zdaleka převládající podíl představují sacharidy, které se mohou dále rozdělit na laktózu a složitější oligosacharidy. Zatímco se laktózapoužívájako zdroj energie, nejsou složité oligosacharidy novorozenci metabolizovány. Frakce složitých oligosacharidů tvoří až 1/10 z celkové sacharidové frakce a sestává pravděpodobně zvíce než 150 různých oligosacharidů. Výskyt a koncentrace těchto složitých oligosacharidů jsou specifické pro lidi, a proto je nelze nalézt ve velkých množstvích v mléku ostatních savcům, jako jsou, například, domestikovaná mléčná zvířata.
Existence těchto složitých oligosacharidů v lidském mléku je známá již dlouhou dobu a fýziologické funkce těchto oligosacharidů byly podrobeny lékařskému výzkumu po mnoho desetiletí (Gura, T. (2014) Nature's first functional food. Science 345(6198) 747-749). Pro některé z nejhojnějších lidských mléčných oligosacharidů byly již identifikovány specifické funkce (Bode, L. (2012) Human milk oligosaccharides: every baby needs a sugar mama.
Glycobiology 22(9), 1147-1162.; Bode L, Jantscher-Krenn E (2012) Structure-function relationships of human milk oligosaccharides. Adv Nutr 3(3) 3835-3915; Morrow AL, RuizPalacios GM, Altaye M, Jiang X, Guerrero ML. Meinzen-Derr JK, Farkas T, Chaturvedi P, Pickering LK, Newburg DS (2004) Human milk oligosaccharides are associated with protection against diarrhea in breast-fed infants. J Pediatr 145(3) 297-303).
Omezená zásoba a složitosti při získání čistých frakcí jednotlivých lidských mléčných oligosacharidů vedou k rozvoji chemických cest k některým z těchto složitých molekul. Nicméně, syntéza lidských mléčných oligosacharidů prostřednictvím chemické syntézy, enzymatické syntézy nebo fermentace dokázala být náročná. Až do dnešního dne nebylo možné poskytnutou alespoň množství ve velkém měřítku, jakož i kvality dostatečné pro potravinářské aplikace. V tomto ohledu zahrnují zejména chemické syntetické cesty k lidským mléčným oligosacharidům (např., 2'-fůkosyllaktóza; viz WO 2010/115935 Al) několik škodlivých chemických látek, které představují riziko kontaminace konečného produktu.
Kvůli výzvám spojeným s chemickou syntézou lidských mléčných oligosacharidů se vyvinuly některé enzymatické způsoby a fermentační přístupy (Miyazaki et al., (2010) Methods in Enzymol. 480, 51 1-524: Murata et al., (1999) Glycoconj. J. 16, 189-195; Baumgartner, F. et al., (2013) Microb. Cell Fact. 12, 40; Lee et al., (2012) Microb. Cell Fact. 11, 48; US 7 521 212 B1 nebo
- 1 CZ 35289 UI
Albermann et al, (2001) Carbohydr. Res. 334(2) p 97- 103). Nicméně, tyto způsoby dávají složité směsi oligosacharidů, tj. požadovaný produkt je kontaminovaný výchozím materiálem, jako je laktóza, biosyntetické meziprodukty a substráty, jako jsou jednotlivé monosacharidy a polypeptidy atd.
Způsoby z dosavadního stavu techniky pro purifikaci jednotlivých oligosacharidových produktů z těchto složitých směsí jsou technicky složité a také neekonomické pro potravinářské aplikace. Pro purifikaci disacharidů, laktózy nebo sacharózy, ze složitých směsí, jako je syrovátka nebo melasa, se vyvinuly způsoby v průmyslovém měřítku, které zahrnují násobné krystalizace. Nevýhoda uvedených způsobů je, že jsou komplikované a vedou pouze k nízkým výtěžkům.
Pro purifikaci složitých oligosacharidů z mikrobiální fermentace, jako jsou určité lidské mléčné oligosacharidy, je gelová filtrační chromatografie způsobem volby, až do teď.
Nevýhoda gelové filtrační chromatografie je, že u ní nelze účinně zvýšit měřítko a je nevhodná pro kontinuální operaci. A proto není gelová filtrační chromatografie ekonomická a znemožňuje poskytnutí určitých lidských mléčných oligosacharidů - jako je 2'-fúkosyllaktóza nebo lakto-N-tetraóza - v rozumných množstvích a kvalitě pro jejich použití v lidských potravinách a dalších aplikacích, jako je krmivo pro zvířata (např., krmivo pro domácí zvířata). Aplikace jako krmivo pro zvířata nebo krmivo pro domácí zvířata je zajímavá na základě toho, že také další savci obsahují stejné nebo podobné neutrální složité oligosacharidy v jejich mléku jako lidé (např., 2'-fúkosyllaktózu lze také nalézt v mléku psů, prasat, šimpanzů) (Castanys-Munzo , E., Martin, J. M & Prieto, P. A. (2013) 2'-fukosyllaktóza: an abundant, genetically determined soluble glycan present in human milk. Nutr. Rev. 71(12) 773-789).
Jiný problém je představovaný použitím rekombinantních kmenů (rekombinantní bakteriální nebo kvasinkové kmeny) při mikrobiální fermentaci, což má za následek kontaminaci fermentačního produktu rekombinantním materiálem. Nicméně, kontaminace rekombinantní DNA nebo proteiny není v dnešní době přijatelná nařízeními a spotřebiteli. Detekční limity jsou konkrétně pro rekombinantní DNA molekuly velmi nízké. V případě, že se použije detekce na základě qPCR, která se v současné době považuje za zlatý standard pro detekci, se může detekovat i malé množství jednotlivých DNA molekul. Proteiny, navíc k tomu, představují riziko alergických reakcí, a proto by se měly účinně odstranit z požadovaného oligosacharidového produktu.
Elektrodialýza (ED) představuje techniku, která kombinuje dialýzu a elektrolýzu, a může se použít pro separaci nebo koncentraci iontů v roztocích na základě jejich selektivní elektromigrace přes semipermeabilní membrány. První průmyslové aplikace elektrodialýzy se datují do raných 1960 s demineralizací sýrové syrovátky pro použití v umělé kojenecké výživě. Další vyvinuté aplikace elektrodialýzy zahrnují úpravu pH nápojů, jako jsou vína, hroznový mošt, jablečný džus a pomerančový džus.
Odsolení poloslané vody pro výrobu pitné vody a demineralizace mléčné syrovátky pro výrobu umělé kojenecké výživy představují v dnešní době největší oblasti aplikace.
Základní princip elektrodialýzy sestává z elektrolytického článku složeného z páru elektrod ponořených do elektrolytu pro vedení iontů spojeného s generátorem stejnosměrného proudu.
Elektroda připojená ke kladnému pólu generátoru stejnosměrného proudu je anoda, a elektroda připojená k zápornému pólu je katoda. Elektrolytevý roztok pak podporuje tok proudu, který vychází z pohybu iontů se záporným a kladným nábojem směrem k anodě nebo katodě, v daném pořadí. Membrány používané při elektrodialýze jsou v podstatě desky porézních iontově výměnných pryskyřic, které mají skupiny se záporným nebo kladným nábojem, a proto se popisují jako kationtová nebo aniontová membrána, v daném pořadí. Iontově výměnné membrány jsou obvykle vyrobené z polystyrenu, který nese vhodnou fimkční skupinu (jako je kyselina sulfonová nebo kvartémí amoniová skupina pro kationtové a aniontové membrány, v daném pořadí)
- 2 CZ 35289 UI zesíťovaného divinylbenzenem. Jako elektrolyt se může použít chlorid sodný nebo octan sodný, propionát sodný atd. Elektrodialýzní stoh se pak sestaví takovým způsobem, že jsou aniontové a kationtové membrány paralelní jako ve filtračním lisu mezi dvěma elektrodovými bloky, tak, že se proud podstupující iontovou depleci dobře separuje od proudu podstupujícího iontovým obohacením (tyto dva roztoky se také označují jako diluát (podstupující iontovou depleci) a koncentrát (podstupující iontové obohacení)). Podstatou elektrodialýzního procesu je membránový stoh, který sestává z několika aniontové a kationtové výměnných membrán oddělených pomocí spacerů, instalovaných mezi dvěma elektrodami. Aplikováním stejnosměrného elektrického proudu budou anionty a kationty migrovat přes membrány směrem k elektrodám, které generují proud diluátu (odsolený) a koncentrátu.
Obecně je velikost pórů použitých membrán spíše malá, aby se zabránilo difúzi produktu z diluátu do proudu koncentrátu, poháněnou často vysokými koncentračními rozdíly mezi těmito dvěma proudy. Po separaci z biomasy se musí proteiny a zejména rekombinantní DNA molekuly (ve velikosti celých genomů) odstranit kvantitativně z požadovaného produktu. Jestli je to vůbec možné, byla by elektrodialýza takových velkých molekul (ve srovnání s molekulární velikostí UMO) poměrně zdlouhavá a jistě doprovázená s významnými ztrátami požadovaného produktu z diluátu do koncentrátu.
Diafiltrace je procesem, který zahrnuje přidání čerstvé vody do roztoku za účelem „vypláchnutí“ nebo odstranění membránově permeabilních složek. A tak se diafiltrace může použít pro separaci složek na základě jejich molekulární velikosti prostřednictvím použití vhodných membrán, s tím, že se účinně zadrží jedna nebo více látek, a ostatní látky jsou membránově permeabilní. Zejména je pro separaci sloučenin s nízkou molekulární hmotností ze solí účinná diafiltrace pomocí použití nanofiltrační membrány. Obecně mají nanofiltrační membrány mezní molekulární hmotnost v rozmezí 150 až 300 Daltonů. Dnes se nanofiltrace (NF) široce používá v mlékárenském průmyslu pro zakoncentrování a demineralizaci syrovátky. Nanofiltrace se již používá pro obohacení frakce lidských mléčných oligosacharidů z lidského mléka. Při tomto přístupu se nanofiltrace používá v kombinaci s enzymatickou degradací laktózy, aby se oddělila UMO frakce od mléčné laktózy (Samey D.B, Hale, C., Frankel, G & Vulfson, E.N. (2000) A novel approach to the recovery of biological active oligossacharides from milk using a combination of enzymatic treatment and nanofiltration. Biotechnol. Bioeng 69, 461-467).
Ve vyvinutém způsobu pro účinnou purifikaci lidských mléčných oligosacharidů v potravinářské kvalitě z mikrobiální fermentace se použije nanofiltrace za účelem zakoncentrování požadovaného produktu a také aby se odstranily membránově permeabilní soli.
Pokud se vychází z tohoto stavu techniky je technickým problémem poskytnutí nového způsobu pro získání neutrálních HMO ve vysokých množstvích, vysoké čistotě a výborných výtěžcích.
Podstata technického řešení
Tento technický problém je vyřešený pomocí lidského mléčného oligosacharidů (HMO) a pomocí jeho použití.
Předkládané technické řešení poskytuje způsob pro purifikaci neutrálních lidských mléčných oligosacharidů (HMO) vsádkovým způsobem nebo kontinuálním způsobem z fermentačního bujónu získaného prostřednictvím mikrobiální fermentace, s tím, že se poskytuje purifikovaný roztok, který obsahuje neutrální HMO v čistotě 80 %. Tento fermentační bujón obsahuje neutrální HMO, biomasu, složky z média a kontaminanty. Čistota neutrálního HMO ve fermentačním bujónu je < 80 %.
- 3 CZ 35289 UI
V průběhu tohoto způsobu se fermentační bujón aplikuje do následujících purifikačních kroků:
i) Separace biomasy z fermentačního bujónu, ii) Zpracování s kationtovým iontoměničem pro odstranění kladně nabitého materiálu, iii) Zpracování s aniontovým iontoměničem pro odstranění záporně nabitého materiálu.
iv) Nanofíltrační krok (který zahrnuje nebo sestává z koncentrace a/nebo diafiltrace neutrálního HMO) a/nebo elektrodialýzní krok (obzvláště pro odstranění solí a dalších sloučenin s nízkou molekulární hmotností).
Kontaminanty přítomné ve fermentačním bujónu bez buněk jsou, například, další oligosacharidy jiné než požadovaný neutrální HMO, třeba monovalentní a divalentní soli, aminokyseliny, polypeptidy, proteiny, organické kyseliny, nukleové kyseliny atd. Požadovaný neutrální HMO se může získat v čistotě > 80 % v purifíkovaném roztoku.
Původci zjistili, že s požadovaným purifikačním způsobem se může dosáhnout účinné purifikace neutrálních HMO z mikrobiální fermentace, která dodává HMO v čistotě vhodné pro aplikace v potravinách a krmivech. Navíc je tento způsob vysoce nákladově efektivní, protože není potřeba žádaný chromatografícký separační krok. Navíc se zjistilo, že se dosahuje čistoty > 80 %, ať už se provádí elektrodialýzní krok, nebo nanofíltrační krok v kroku iv), nebo pokud se provádějí oba kroky za sebou.
Jednou výhodou způsobu podle předkládaného technického řešení je, že se požadované neutrální HMO získají bez DNA a proteinů z použitého rekombinantního mikrobiálního fermentačního kmene. Obzvláště implementace zpracování s kationtovým iontoměničem (krok ii) umožňuje odstranění kladně nabitého materiálu, jako jsou, např., kladně nabité proteiny. V důsledku toho poskytuje inventivní způsob HMO, který zahrnuje méně kladně nabitý kontaminující materiál ve srovnání se schématy běžné purifikace, které jsou známé v dosavadní stavu techniky, které neimplementují zpracování s kationtovým měničem. Dále se zjistilo, že po průchodu fermentačního bujónu separovaného z biomasy (výhodně pomocí ultrafiltrace) přes kationtový iontoměnič (v protonové formě), byl získaný roztok stabilní a mohl se skladovat pří pokojové teplotě nebo za ochlazování po několik týdnů. Navíc je získaný neutrální HMO bez rekombinantního materiálu, jak se hodnotí kvantitativní PCR s až 50 amplifikačními cykly. Navíc je tento produkt podle technického řešení charakterizovaný nízkými množstvími nebo nepřítomností proteinů.
Navíc je neutrální HMO purifikace podle tohoto technického řešení vysoce účinná s ještě neznámými výtěžky > 70 % (případně > 75 %) purifikováného HMO (stanoveno z fermentačního média bez buněk až do HMO koncentrátu).
A proto se poskytuje hybridní způsob, který zahrnuje kroky separace biomasy, iontoměniče, a krok nanofiltrace a/nebo elektrodialýzy, a výhodně který dále zahrnuje zpracování s aktivním uhlím, pro účinné poskytnutí neutrálních HMO ve vysoké čistotě bez rekombinantního genetického materiálu, endotoxinů a proteinů z fermentačních způsobů za použití rekombinantních fermentačních kmenů. Pomocí způsobu podle technického řešení se mohou poskytovat vysoká množství lidských mléčných oligosacharidů s vysokou kvalitou velmi výhodným a ekonomickým způsobem.
Neutrální HMO se může purifikovat z fermentačního bujónu získatelného mikrobiální fermentací za použití rekombinantního mikroorganismu, výhodně bakterie nebo kvasinky, výhodněji za použití rekombinantního mikroorganismu, který roste v chemicky definovaném médiu. Případně se biomasa separovaná v kroku i) recykluje do mikrobiální fermentace.
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení je čistota neutrálního HMO ve fermentačním bujónu < 70 %, < 60 %, < 50 %, < 40 %, < 30 %, < 20 %, < 10 % nebo < 5 % a/nebo purifikovaný roztok obsahuje neutrální HMO v čistotě > 85 %, výhodně > 90 %.
- 4 CZ 35289 UI
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení je výtěžek neutrálního HMO > 70 % (případně > 75 %) a/nebo je purifikovaný roztok bez DNA, proteinů a/nebo rekombinantního genetického materiálu.
V jiném výhodném provedení je neutrální HMO vybraný ze skupiny sestávající z 2-fukosyllaktózy, 3-fůkosyllaktózy, 2',3-difukosyllaktózy, lakto-N-triózy II, lakto-N-tetraózy, lakto-N-neotetraózy, lakto-N-fůkopentaózy I, lakto-N-neofůkopentaózy, lakto-N-fůkopentaózy II, lakto-N-fůkopentaózy III, lakto-N-fůkopentaózy V, lakto-N-neofukopentaózy V, lakto-N-difůko-hexaózy I, lakto-N-difukohexaózy II, 6'-galaktosyllaktózy, 3'-galaktosyllaktózy, lakto-N-hexaózy a lakto-N-neohexaózy.
V zejména výhodném provedení je neutrálním HMO 2'-fůkosyllaktóza.
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení se dosáhne separace biomasy z fermentačního bujónu
a) ultrafiltrací, výhodně separací biomasy a materiálů > 500 kDa, výhodněji > 150 kDa; a/nebo
b) filtrací přes cross-flow filtr, výhodně s mezní hodnotou < 100 kDa, výhodněji s mezní hodnotou <10 kDa, ještě výhodněji s mezní hodnotou < 5 kDa;
s tím, že je krok a) výhodně implementovaný před krokem b).
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení se alespoň jeden z purifikačních kroků ii) až v) ze způsobu opakuje alespoň jednou v průběhu tohoto způsobu.
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení se fermentační bujón aplikuje alespoň jednou do zpracování s aktivním uhlím po alespoň jednom z purifikačních kroků i) až iv) pro adsorpci materiálu, který dává barvu, a větších oligosacharidů do aktivního uhlí. Aplikováním fermentačního bujónu do tohoto dodatečného purifikačního kroku se z fermentačního bujónu může odstranit materiál, který dává barvu, a větší oligosacharidy.
Způsob podle technického řešení se může vyznačovat tím, že
a) po alespoň jednom z purifikačních kroků i) až iv); nebo
b) po alespoň jednom zpracování s aktivním uhlím pro adsorpci materiálu, který dává barvu, a větších oligosacharidů do aktivního uhlí; nebo
c) před krokem zakoncentrování, který je implementovaný po alespoň jednom z purifikačních kroků i) až iv);
se ten roztok, který obsahuje neutrální lidský mléčný oligosacharid, diafiltruje a/nebo zakoncentruje. Výhodně se uvedený roztok diafiltruje a/nebo zakoncentruje pomocí nanofíltrační membrány, výhodněji pomocí nanofíltrační membrány, která má limit propustnosti SEL (z angl. size exclusion limit) < 20 Á. Nejvýhodněji se tento roztok diafiltruje, až dokud se nedosáhne vodivosti < 15 mS/cm, výhodně < 10 mS/cm, výhodněji < 5 mS/cm.
Zjistilo se, že je diafiltrace za použití nanofiltrace účinná jako předzpracování pro odstranění významných množství kontaminantů před elekrodialýzním zpracováním roztoku, který obsahuje HMO. Kromě toho se zjistilo, že nanofiltrace je také účinná při odstraňování nízkomolekulámích kontaminantů po ultra filtračním kroku, s tím, že uvedené odstranění je prospěšné pro zakoncentrování a demineralizaci HMO roztoku před zpracováním s iontoměničem. Použití nanofiltračních membrán pro zakoncentrování a diafiltraci při purifikaci lidských mléčných oligosacharidů má za následek nižší energetické a provozní náklady, jakož i vylepšenou kvalitu produktu, kvůli sníženému tepelnému vystavení, což vede k redukovaným Maillardovým reakcím a aldolovým reakcím.
- 5 CZ 35289 UI
V kroku před krokem i) se může s fermentačním bujónem provádět zpracování s glukosidázou, výhodně zpracování s β-glukosidázou, přičemž se uvedené zpracování výhodně provádí
a) přidáním kmene mikroorganismu, který je schopný exprimovat jeden nebo více glykosidázových enzymů, které jsou vhodné pro degradaci nežádoucích meziproduktů, substrátů a/nebo oligosacharidových vedlejších produktů; a/nebo
b) za použití fermentačního kmene, který exprimuje jeden nebo více glykosidázových enzymů, výhodně přidáním induktoru do fermentačního bujónu a/nebo posunováním teploty fermentačního bujónu; a/nebo
c) přidáním jedné nebo více glykosidáz, výhodně alespoň β-glukosidázy, do fermentačního bujónu jako surový enzym nebo jako puntíkovaný enzym.
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení se fermentační bujón zakoncentruje po alespoň jednom z purifikačních kroků i) až iv), výhodně po purifikačním kroku iv), za použití vakuového odpaření nebo reverzní osmózy nebo nanofiltrace (např., nanofiltrace pomocí nanofiltrační membrány, která má limit propustnosti SEL < 20 Á)
a) na koncentraci >100 g/1, výhodně > 200 g/1, výhodněji > 300 g/1; a/nebo
b) při teplotě < 80 °C, výhodně < 50 °C. výhodněji 20 °C až 50 °C, ještě výhodněji 30 °C až 45 °C, nejvýhodněji 35 °C až 45 °C (obzvláště důležité pro vakuové odpaření nebo reverzní osmózu); a/nebo
c) při teplotě < 80 °C, výhodně < 50°C, výhodněji 4 °C až 40 °C (obzvláště důležité pro nanofiltraci).
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení se puntíkovaný roztok sterilně zfiltruje a/nebo podrobí endotoxinovému odstranění, výhodně pomocí filtrace purifikovaného roztoku přes 3kDa filtr.
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení se roztok, který obsahuje neutrální HMO, podrobí elektrodialýze za účelem dalšího odstranění nabitých materiálů, jako jsou monoa divalentní soli.
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení se purifikovaný roztok zakoncentruje na koncentraci > 1,5 M a ochladí na teplotu < 25 °C, výhodněji < 8 °C, aby se získal krystalický materiál neutrálního HMO.
V jiném výhodném provedení způsobu podle technického řešení se purifikovaný roztok sprejově suší, zejména sprejově suší při koncentraci neutrálního HMO 20 až 60 (hmotn./obj.), výhodně 30 až 50 (hmotn./obj.), výhodněji 35 az 45 (hmotn./obj.), při teplotě trysky 110 až 150 °C, výhodně 120 až 140 °C, výhodněji 125 až 135 °C a/nebo při výstupní teplotě 60 až 80 °C, výhodně 65 až 70 °C.
Navíc předkládané technické řešení zahrnuje neutrální lidský mléčný oligosacharid (HMO), který je vyrobitelný způsobem zde popsaným.
Ve výhodném provedení je HMO přítomný ve sterilní zfiltrovaném koncentrátu, např. sterilní koncentrát, který obsahuje neutrální HMO produkt s koncentrací > 30 % (hmotn./obj.), výhodněji > 40 % (hmotn./obj.).
V jiném výhodném provedení se HMO sprejově suší nebo krystalizuje.
V jiném výhodném provedení se HMO vybere ze skupiny sestávající z 2'-fukosyllaktózy, 3-fúkosyllaktózy, 2',3-difukosyllaktózy, lakto-N-triózy II, lakto-N-tetraózy, lakto-N-neotetraózy, lakto-N-fúkopentaózy I, lakto-N-neofúkopentaózy, lakto-N-fúkopentaózy II, lakto-N-fúko-pentaózy III, lakto-N-fúkopentaózy V, lakto-N-neofúkopentaózy V,
-6CZ 35289 UI lakto-N-difukohexaózy I, lakto-N-difukohexaózy II, 6'-galaktosyllaktózy, 3'-galaktosyllaktózy, lakto-N-hexaózy a lakto-N-neohexaózy.
V zejména výhodném provedení je HMO 2'-fukosyllaktóza.
V jiném výhodném provedení má HMO
a) vodivost menší než 1 mSi/cm v 300 g/1 roztoku;
b) je bez rekombinantního DNA materiálu, případně bez jakékoliv DNA; a/nebo
c) je bez proteinů odvozených z rekombinantního mikroorganismu, případně bez jakýchkoliv proteinů.
Jiné výhodné provedení je zaměřené na HMO pro použití v lékařství, výhodně pro použití při profylaxi nebo terapii gastrointestinální poruchy.
Navíc, předkládané technické řešení zahrnuje použití HMO podle technického řešení jako potravinový doplněk v potravinách, výhodně jako potravinový doplněk v lidských potravinách a/nebo v krmivu pro domácí zvířata, výhodněji jako aditivum v lidské dětské výživě.
Objasnění výkresů
Má se zato, že předmět podle technického řešení je vysvětlený podrobněji s odkazem na následující výkresy a příklady, aniž bychom si přáli omezit uvedený předmět na zvláštní provedení.
Obr. 1 ukazuje schéma výhodného provedení způsobu podle předkládaného technického řešení pro purifikaci 2'-fukosyllaktózy z fermentačního bujónu, který zahrnuje tyto kroky; ultrafiltrace, zpracování s kationtovým a aniontovým iontoměničem, zpracování s aktivním uhlím, nanofiltrace. elektrodialýza a zakoncentrování.
Obr. 2 ukazuje schéma jiného výhodného provedení způsobu podle předkládaného technického řešení pro purifikaci 2'-fukosyllaktózy z fermentačního bujónu, který zahrnuje tyto kroky; ultrafiltrace, nanofiltrace. zpracování s kationtovým a aniontovým iontoměničem, zpracování s aktivním uhlím, elektrodialýza a zakoncentrování.
Obr. 3 ukazuje schéma jiného výhodného provedení způsobu podle předkládaného technického řešení pro purifikaci 2'-fukosyllaktózy z fermentačního bujónu, který zahrnuje tyto kroky; ultrafiltrace, zpracování s kationtovém a aniontovým iontoměničem, nanofiltrace. zpracování s aktivním uhlím, elektrodialýza a zakoncentrování.
Příklady uskutečnění technického řešení
Příklad 1: Purifikace 2'-fůkosyllaktózy z fermentace za použití rekombinantního mikrobiálního produkčního kmene I.
Vsádková fermentace s přívodem 2'-fukosyllaktózy za použití rekombinantního 2'-fukosyllaktózu syntetizujícího E. coli kmene (E. coli BL21(DE3) illacZ), který obsahoval genomovou integrační 2'-fůosyltranferázu, kódovanou wbgL genem (viz EP 11 1151 571.4), a který měl další kopii E. coli lacY, monB. manC, gmd a fcl, vše pod kontrolou silného konstitutivního tetracyklinového promotoru, který obsahoval funkční gal operon, který zahrnoval geny galM, galK, galT a galE, se nechala růst v definovaném solném médiu. Toto definované solné médium zahrnovalo 7 gl1 NH4H3PO4, 7 gl1 K2HPO4, 2 gl1 KOH, 0,37 gl1 citrónové kyseliny, 1 mil1 protipěnidla (Struktol J673, Schill + Seilacher), 1 mM CaCE. 4 mM MgSO4, stopové prvky a 2 % glycerolu jako zdroj uhlíku.
- 7 CZ 35289 UI
Stopové prvky sestávaly z 0,101 gl1 nitrilotrioctové kyseliny, pH 6,5, 0,056 gl1 citronanu amonno-železitého, 0,01 gl1 MnCL x 4 H2O, 0,002 gl1 C0CI2 x 6 H2O, 0,001 gl1 CuCL x 2 H2O· 0,002 g!1 kyseliny borité, 0,009 gl1 ZnSO4 x 7 H2O, 0,001 gl1 Na2MoO4 x 2 H2O, 0,002 gl’1 Na2SeO3, 0,002 gl’1 NiSO4 x 6 H2O.
Přívod glycerolu sestával z glycerolu 800 gl1, MgSO4 2.64 gl1 a roztoku stopových prvků 4 mil1. Pro tvorbu 2'-fukosyllaktózy se použil laktózový přívod 216 gl1. pH se kontrolovalo použitím roztoku amoniaku (25% v/v). Vsádková fermentace přívodu se kultivovala při 30 °C pod konstantním provzdušňováním a mícháním po dobu 90 hodin. V 90 hodinách po začátku fermentace se většina přidané laktózy převedla na 2'-fůkosyllaktózu. Za účelem odstranění laktózy, která byla stále přítomná ve fermentačním supematantu, se do fermentační nádoby přidal druhý bakteriální kmen 90 hodin po začátku fermentace.
Přidaný druhý bakteriální kmen byl geneticky identický s prvním použitým bakteriálním kmenem, který se však lišil pouze v expresi genomově integrované beta-galaktosidázy. Inkubace přidaného sekundárního bakteriálního kmene měla za následek vymizení zbytkové laktózy během 5 hodin. Přibližně 10 ml startovací kultury druhého bakteriálního kmene, který exprimoval betagalaktosidázu, se přidalo na 1 1 fermentační ho bujónu.
Biomasa se pak oddělila z fermentačního média pomocí ultrafíltrace za použití cross-flow filtru s mezní hodnotou 10 kDa (Microdyn Nardir).
Získalo se přibližně 1 m3 fermentačního média bez buněk, který obsahoval 42 g/12'-fúkosyllaktózy. Fermentační médium bez buněk se pak nechalo procházet přes silný kationtový iontoměnič (Lewatit S 6368 A (Lanxess) v H+ formě, velikost objemu lože iontoměniče byla 100 1), za účelem odstranění kladně nabitých kontaminantů. Získaný roztok se pak upravil na pH 7 přidáním 2M roztoku hydroxidu sodného.
Tento roztok se pak (bez prodlení) nechal procházet přes kolonu aniontového iontoměniče (objem lože iontoměniče byl 100 1). Použitý silný aniontový iontoměnič Lewatit S 2568 (Lanxess) byl v chloridové (Cl ) formě. Získaný roztok se znovu neutralizoval na pH 7. Takto získaný roztok se pak diafiltroval za použití Alfa-Laval NF99HF nanofiltrační membrány a šesti objemů sterilní deionizované vody. Tento roztok se pak dále koncentroval za použití nanofiltrační membrány, přičemž se získal 2'-fukosyllaktózový roztok 200 g/1 a vodivost 7 mS/cm.
Zakoncentrovaný 2'-fukosyllaktózový roztok se pak zpracoval s aktivním uhlím, aby se odstranil materiál, který dává barvu, j ako j sou produkty Maillardových reakcí a produkty aldolových reakcí. Jako aktivní uhlí se použilo 20 g Nořit GAC EN na I zakoncentrovaný 2'-fúkosyllaktózový roztok za zisku výrazně odbarveného roztoku.
Takto získaný zakoncentrovaný 2'-fukosyllaktózový roztok se pak elektrodialyzoval na 0,3 mS/cm za použití PC-Cell BED 1-3 elektrodialýzního přístroje (PC-Cell, Heusweiler, Německo) vybaveného PC-Cell E200 membránovým stohem. Uvedený stoh obsahoval následující membrány: kationtově výměnná membrána CEM: PC SK a aniontově výměnná membrána AEM:PcAcid60, která má limit propustnosti SEL 60 Da. 0,025M roztok sulfamové kyseliny (amidosulfonová kyselina) se použil jako elektrolyt při ED procesu.
Pak, získaný roztok se pak zakoncentroval za vakua při 40 °C za zisku 45% roztoku 2'-fúkosyl-laktózy. Zakoncentrovaný roztok se pak znovu zpracoval s iontoměniči, Lewatit S6368 A (Lanxess) vNa+ formě (objem lože použitého iontoměniče byl 10 1) a po neutralizaci s aniontovým iontoměničem Lewatit S 2568 (Lanxess) v CF formě (objem lože použitého iontoměniče byl 101).
-8CZ 35289 UI
Získaný 2'-fukosyllaktózový roztok se pak zpracoval s aktivním uhlím (Nořit DX1 Ultra). Pro 1 1 45% roztoku 2'-fukosyllaktózy se použilo 30 g aktivního uhlí.
Tento roztok se pak znovu podrobil elektrodialýze, až dokud se nezískala vodivost menší než 0,3 mSi/cm.
Následně se roztok podrobil sterilní filtraci procházením tohoto roztoku přes 3kDa filtr (Pali Microza ultrafiltrační modul s dutými vlákny SEP-2013, Pali Corporation, Dreieich).
Část získaného 2'-fiikosyllaktózového roztoku se pak sprejově sušil pro analýzu.
[Pro zaznamenání NMR spekter se sprejově sušený produkt rozpustil v hexadeuterodimethyl sulfoxidu (DMSO-d6). Pro proton a 13C analýzu se pozorovaly následující charakteristické chemické posuny:
ÍH NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6,63 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 6,28 (d, J= 4,7 Hz, 1H), 5,21 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,19 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,01 (d, J = 2,2, 2H), 4,92 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4,89 (dd, J = 4,6, 1,3 Hz, 2H), 4,78 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,74 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 4.63 (m, 6H), 4,53 (t, d, J= 5,5, 1H), 4,46 (d, J= 5,2 Hz, 1H), 4,44 (d, J= 5,0 Hz, 1H), 4,38 - 4,26 (m, 5H), 4,23 (d, J = 0,9, 1H), 4,05 (d, J= 0,9, 1H), 4,00 (kvin, J = 3,3, 1H), 3,68 - 3,60 (m, 7H), 3,59 - 3,50 (m, 13H), 3,50 - 3,37 (m, 6H), 3,24 (dt, J = 8,8. 2,2 Hz, 1H), 3,14 (m, 2H), 2,96 (td, J= 8,4, 4,7 Hz, 1H), 1,04 (d, 7=6,1 Hz, 3H), 1,03 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 13C NMR (126 MHz, DMSO-d6) δ 100,99, 100,85, 100,35, 100,25, 96,59, 92,02, 78,13, 77,78, 77,16, 77,01, 75,27, 75,05, 74,67, 73,70, 72,33, 71,62, 71,56, 70,91, 69,90, 69,64, 68,75, 68,16, 66,33, 60,17, 59,82, 59,67, 16,37, 16,36.
Zjistilo se, že chemické posuny byly konzistentní s 2'-fiikosyllaktózovou strukturou.
Za použití tohoto protokolu se mohl získat 45% 2'-fiikosyllaktózový koncentrát s čistotou 94,5 % (stanoveno pomocí HPLC analýzy). Hlavními kontaminanty byly 3'-fiikosyllaktóza (1,8 %), difiikosyllaktóza (2,9 %) a laktóza (0,3 %).
Výtěžek z purifikace byl přibližně 70 %.
Důležité je to, že se nemohl stanovit žádný rekombinantní materiál v 10 g zmrzlého materiálu za použití 50 cyklů qPCR. Množství proteinů získaného materiálu se stanovilo jako <50 pg/g mrazem sušeného materiálu použitím nano-Bradfordova testu (Roth, Karlsruhe Německo). Celkové množství popela se stanovilo s 0,19 %. Koncentrace těžkých kovů byla (arzen, kadmium, olovo a rtuť) pod 0,1 pg/g materiálu.
Hladiny endotoxinu se stanovily na < 0,005 EU/ml 2'-fůkosyl-laktózového koncentrátu.
Příklad 2: Purifikace 2'-fůkosyllaktózy z fermentace za použití rekombinantního mikrobiálního produkčního kmene II.
m3 mikrobiální fermentace, která zahrnovala 2'-fůkosyllaktózu v koncentraci 47 g/1, se zfiltrovala přes cross-flow filtr s mezní hodnou 100 kDa (Microdyn Nadir) za zisku fermentačního média bez buněk.
Jako fermentační médium se použilo následující médium: Hlavní složky média: glycerol 30 g/1, NH4H2PO4 7 g/1. K2HPO4 7 g/1, citronan 0,3 g/1, KOH 2 g/1, MgSO4-7H2O 2 g/1: stopové prvky: CaCL 6H2O 20 mg/1, nitrilotrioctová kyselina 101 mg/1, citronan amonno-železitý 56 mg/1, MnCL 4H2O 9,8 mg/1, C0CI2 6H2O 1,6 mg/1, CuCl2 2H2O 1 mg/1, H3BO3 1,6 mg/1, ZnSO4-7H2O 9 mg/1, Na2MoO4-2H2O 1,2 mg/1, Na2SeO3 1,2 mg/1; přívodní látky: glycerol a laktóza.
Fermentační médium bez buněk se pak nechalo procházet před kationtový iontoměnič (Lewatit S 6368 A (Lanxess) v H+ formě (objem lože iontoměniče byl 100 1) za účelem odstranění kladně
-9CZ 35289 UI nabitých kontaminantů. Získaný roztok se pak upravil na pH 7 přidáním 2M roztoku hydroxidu sodného. Tento roztok se pak, bez prodlení, nechal procházet přes aniontově výměnnou kolonu (objem lože iontoměniče byl 100 1), která zahrnovala silný aniontový iontoměnič Lewatit S 2568 (Lanxess) v chloridové (Cl ) formě. Získaný roztok se znovu neutralizoval napH 7. Takto získaný roztok se pak diafiltroval (za použití 10 objemů sterilní deionizované vody) a zakoncentroval za použití nanofiltrační membrány (Alfa-Laval NF99HF) za zisku 2'-fukosyllaktózového roztoku 200 g/1 a vodivost přibližně 7 mSi/cm.
Zakoncentrovaný 2'-fukosyllaktózový roztok se pak zpracoval s aktivním uhlím, za použití 20 g Nořit GAC EN na I zakoncentrovaný 2'-fukosyllaktózový roztok. Do zfiltrovaného 2'-fukosyl-laktózového roztoku se přidalo 40 g/1 Nořit DX1 Ultra aktivního uhlí. Tento roztok se pak vystavil aktivnímu uhlí při 4 °C po dobu přibližně 18 h. Po 18 h se aktivní uhlí odstranilo z 2'-fukosyl-laktózového roztoku pomocí filtrace.
Tento roztok se pak elektrodialyzoval na vodivost < 0,3 mS/cm za použití PC-Cell BED 1-3 elektrodialýzního přístroje (PC-Cell, Heusweiler, Německo) vybaveného PC-Cell E200 membránovým stohem. Uvedený stoh obsahoval následující membrány: kationtově výměnná membrána CEM: PC SK a aniontově výměnná membrána AEM:PcAcid60, která má limit propustnosti SEL 60 Da. 0.025M roztok sulfamové kyseliny (amidosulfonová kyselina) se použil jako elektrolyt v ED procesu.
Získaný roztok se pak zakoncentroval za zisku 40% 2'-fukosyllaktózového roztoku. Získaný 2'-fukosyllaktózový roztok se pak nechal projít přes Lewatit S 2568 (Lanxess) CL forma (objem lože 10 1) a zpracoval s aktivním uhlím (Nořit DX1 Ultra) při 8 °C po dobu 18 h. Tento roztok se pak podrobil sterilní filtraci procházením tohoto roztoku přes 3kDa filtr (Pali Microza ultrafiltrační modul s dutými vlákny SEP-2013, Pali Corporation, Dreieich) a sprejově sušil za použití NUBILOSA LTC-GMP sprejově sušárny (NUBILOSA, Konstanz, Německo).
Za použití tohoto protokolu se mohla získat 2'-fukosyllaktóza s čistotou 94 % (stanoveno pomocí HPLC analýzy). Hlavními kontaminanty byly 3'-fukosyllaktóza (1,8 %), difukosyllaktóza (3,2 %) a laktóza (0,2 %). Výtěžek z purifikace byl přibližně 70 %.
Toto technické řešení se může charakterizovat následujícími aspekty:
Způsob pro purifikaci neutrálních lidských mléčných oligosacharidů (HMO) vsádkovým způsobem nebo kontinuálním způsobem z fermentačního bujónu získaného mikrobiální fermentací, s tím, že tento fermentační bujón obsahuje neutrální HMO, biomasu, složky z hmotn./obj .média a kontaminanty, přičemž čistota neutrálního HMO ve fermentačním bujónu je < 80 %, vyznačující se tím, že se fermentační bujón aplikuje do následujících purifikačních kroků:
i) Separace biomasy z fermentačního bujónu, ii) Zpracování s kationtovým iontoměničem pro odstranění kladně nabitého materiálu, iii) Zpracování s aniontovým iontoměničem pro odstranění záporně nabitého materiálu, iv) Nanofiltrační krok a/nebo elektrodialýzní krok, s tím, že se poskytuje purifikovaný roztok, který obsahuje neutrální HMO v čistotě > 80 %.
2. Způsob podle aspektu 1, vyznačující se tím, že se neutrální HMO purifikuje z fermentačního bujónu získaného mikrobiální fermentací za použití rekombinantního mikroorganismu, výhodně bakterie nebo kvasinky, výhodněji rekombinantního mikroorganismu, který vyrostl v chemicky definované médiu, přičemž se biomasa separovaná v kroku i) případně recykluje do mikrobiální fermentace.
- 10 CZ 35289 UI
3. Způsob podle jednoho z aspektů 1 nebo 2, vyznačující se tím, že je čistota neutrálního HMO ve fermentačního bujónu < 70 %, < 60 %, < 50 %, < 40 %, < 30 %, < 20 %, < 10 % nebo < 5 % a/nebo purifikovaný roztok obsahuje neutrální HMO v čistotě > 85 %, výhodně > 90 %.
4. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 3, vyznačující se tím, že je výtěžek neutrálního HMO > 75 % a/nebo purifikovaný roztok je bez DNA, proteinů a/nebo rekombinantního genetického materiálu.
5. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 4, vyznačující se tím, že se neutrální HMO vybere ze skupiny sestávající z 2'-fůkosyllaktózy, 3-fukosyllaktózy, 2',3-difůkosyllaktózy, lakto-N-triózy II. lakto-N-tetraózy, lakto-N-neotetraózy, lakto-N-fůkopentaózy I, lakto-N-neofukopentaózy. lakto-N-fůkopentaózy II, lakto-N-fukopentaózy III, lakto-N-fůkopentaózy V, lakto-N-neofůkopentaózy V, lakto-N-difůkohexaózy I, lakto-N-difůkohexaózy II, 6'-galaktosyllaktózy, 3'-galaktosyllaktózy. lakto-N-hexaózy a lakto-N-neohexaózy.
6. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 5, vyznačující se tím, že se dosáhne separace biomasy z fermentačního bujónu pomocí
a) ultrafiltrace, výhodně separací biomasy a materiálů > 500 kDa. výhodněji >150 kDa; a/nebo
b) filtrace přes cross-flow filtr, výhodně s mezní hodnotou <100 kDa, výhodněji s mezní hodnotou <10 kDa, ještě výhodněji s mezní hodnotou < 5 kDa;
přičemž krok a) je výhodně implementovaný před krokem b).
7. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 6, vyznačující se tím, že se alespoň jeden z purifikačních kroků ii) až iv) opakuje alespoň jednou v průběhu tohoto způsobu.
8. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 7, vyznačující se tím, že se fermentační bujón aplikuje alespoň jednou do zpracování s aktivním uhlím po alespoň jednom z purifikačních kroků i) až iv) pro adsorpci materiálu, který dává barvu, a větších oligosacharidů do aktivního uhlí.
9. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 8. vyznačující se tím, že
a) po alespoň jednom z purifikačních kroků i) až iv); nebo
b) po alespoň jednom zpracování s aktivním uhlím pro adsorpci materiálu, který dává barvu, a větších oligosacharidů do aktivního uhlí;
nebo
c) před krokem zakoncentrování, který je implementovaný po alespoň jednom z purifikačních kroků i) až i v);
se roztok, který obsahuje neutrální lidský mléčný oligosacharid, diafiltruje a/nebo zakoncentruje, výhodně pomocí nanofiltrační membrány, výhodněji pomocí nanofiltrační membrány, která má limit propustnosti SEL< 20 Á, přičemž nejvýhodněji se tento roztok diafiltruje, až dokud se nedosáhne vodivosti < 15 mS/cm. výhodně < 10 mS/cm, výhodněji < 5 mS/cm.
10. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 9, vyznačující se tím, že v kroku před krokem i), se s fermentačním bujónem provádí glukosidázové zpracování, výhodně β-glukosidázové zpracování, přičemž uvedené zpracování se výhodně provádí
a) přidáním kmene mikroorganismu, který je schopný exprimovat jeden nebo více glykosidázových enzymů, které jsou vhodné pro degradaci nežádoucích meziproduktů, substrátů a/nebo oligosacharidových vedlejších produktů; a/nebo
b) použitím fermentačního kmene, který exprimuje jeden nebo více glykosidázových enzymů, výhodně přidáním induktoru do fermentačního bujónu a/nebo posouváním teploty fermentačního
- 11 CZ 35289 UI bujónu; a/nebo
c) přidáním jedné nebo více glykosidáz, výhodně alespoň β-glukosidázy, do fermentačního bujónu jako surový enzym nebo jako puntíkovaný enzym.
11. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 10, vyznačující se tím, že se fermentační bujón zakoncentruje po alespoň jednom z purifikačních kroků i) až iv), výhodně po purifikačním kroku iv), za použití vakuového odpaření nebo reverzní osmózy nebo nanofiltrace
a) na koncentraci >100 g/1, výhodně > 200 g/1, výhodněji > 300 g/1; a/nebo
a) při teplotě < 80 °C, výhodně < 50 °C, výhodněji 20 °C až 50 °C, ještě výhodněji 30 °C až 45 °C, v průběhu vakuového odpaření nebo reverzní osmózy; a/nebo
b) při teplotě < 80°C, výhodně < 50 °C, výhodněji 20 °C až 50 °C.
12. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 11, vyznačující se tím, že se puntíkovaný roztok sterilně zfiltruje a/nebo se podrobí endotoxinovému odstranění, výhodně filtrací purifikované roztoku přes 3kDa filtr.
13. Způsob podle jednoho z aspektů 1 až 12, vyznačující se tím, že se puntíkovaný roztok koncentruje na koncentraci > 1,5 M a ochladí na teplotu < 25 °C, výhodněji < 8 °C, za zisku krystalického materiálu neutrálního HMO.
14. Způsob podle j ednoho z aspektů 1 až 13, vyznačuj ící se tím, že se purifikovaný roztok sprej ově suší, zejména sprejově suší při koncentraci neutrálního HMO 20 až 60 (hmotn./obj.), výhodně 30 až 50 (hmotn./obj.), výhodněji 35 až 45 (hmotn./obj.), při teplotě trysky 110 až 150 °C, výhodně 120 až 140 °C, výhodněji 125 až 135 °C a/nebo při výstupní teplotě 60 až 80 °C, výhodně až 70 °C.
15. Neutrální lidský mléčný oligosacharid (HMO) vyrobitelný způsobem podle jednoho z aspektů 1 až 14, s tím, že tento neutrální HMO se výhodně sprejově suší nebo krystalizuje.
16. HMO podle aspektu 15, vyznačující se tím, že je neutrální HMO vybraný ze skupiny sestávající z 2'-fukosylIaktózy, 3-fůkosyllaktózy, 2',3-difůkosyllaktózy, lakto-N-triózy II, lakto-N-tetraózy, lakto-N-neotetraózy, lakto-N-fůkopentaózy I, lakto-N-neofůkopentaózy, lakto-N-fůkopentaózy II, lakto-N-fukopentaózy III, lakto-N-fukopentaózy V, lakto-N-neofukopentaózy V, lakto-N-difuko-hexaózy I, lakto-N-difukohexaózy II, 6'-galaktosyllaktózy, 3'-galaktosyllaktózy, lakto-N-hexaózy a lakto-N-neohexaózy.
17. HMO podle jednoho z aspektů 15 nebo 16, vyznačující se tím, že HMO
a) má vodivost menší než 1 mSi/cm v 300 g/1 roztoku;
b) je bez rekombinantního DNA materiálu, případně bez jakékoliv DNA; a/nebo
c) je bez proteinů odvozených z rekombinantního mikroorganismu, případně bez jakýchkoliv proteinů.
18. HMO podle jednoho z aspektů 15 až 17 pro použití v lékařství, výhodně pro použití při profylaxi nebo terapii gastrointestinální poruchy.
19. Použití HMO podle jednoho z aspektů 15 až 18 jako potravinový doplněk v potravinách, výhodně jako potravinový doplněk v lidských potravinách a/nebo krmivu pro domácí zvířata, výhodněji jako potravinový doplněk v lidské dětské výživě.
Claims (9)
- NÁROKY NA OCHRANU1. Sprejově sušený nebo vykrystalizovaný neutrální lidský mléčný oligosacharidový - HMO produkt, který obsahuje požadovaný HMO a jednu nebo více nečistot, uvedený HMO produkt získaný z mikrobiálního fermentačního bujónu, ve kterém je mikroorganismem rekombinantní mikroorganismus, vyznačující se tím, že požadovaný HMO je vybraný ze skupiny sestávající z 2'-fukosyllaktózy, 3'-fukosyllaktózy, 2',3'-difukosyllaktózy, lakto-N-triózy II, lakto-N-tetraózy, lakto-N-neotetraózy, lakto-N-fukopentaózy I, lakto-N-neofukopentaózy, lakto-N-fukopentaózy II, lakto-N-fukopentaóza III, lakto-N-fukopentaózy V, lakto-N-neofukopentaózy V, lakto-N-difuko-hexaózy I, lakto-N-difukohexaózy II, 6'-galaktosyllaktózy, 3'-galaktosyllaktózy, lakto-N-hexaózy a lakto-N-neohexaózy, s tím, že čistota požadovaného HMO je větší než nebo rovná 80 procentům, a nečistotami jsou jeden nebo více dalších oligosacharidů než požadovaný neutrální HMO, a přičemž uvedený HMO produkt je bez rekombinantního DNA materiálu.
- 2. HMO produkt podle nároku 1, vyznačující se tím, že je tímto HMO 2'- fukosyllaktóza.
- 3. HMO produkt podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že je kompozice bez jakékoliv DNA.
- 4. HMO produkt podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že je kompozice bez proteinů odvozených z rekombinantního mikroorganismu.
- 5. HMO produkt podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že je tento HMO produkt bez jakýchkoliv proteinů.
- 6. HMO produkt podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5, vyznačující se tím, že má tento HMO produkt vodivost menší než 1 mSi/cm v 300 g/1 roztoku.
- 7. HMO produkt podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6, vyznačující se tím, že nečistoty zahrnují laktózu.
- 8. HMO produkt podle kteréhokoliv z nároků 2 až 7, vyznačující se tím, že obsahuje 3'-fůkosyllaktózu, difukosyllaktózu a/nebo laktózu.
- 9. HMO produkt podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8 pro použití v lékařství, výhodně pro použití při profýlaxi nebo terapii gastrointestinální poruchy.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP14151737 | 2014-01-20 | ||
EP14151737.5A EP2896628B1 (en) | 2014-01-20 | 2014-01-20 | Process for efficient purification of neutral human milk oligosaccharides (HMOs) from microbial fermentation |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ35289U1 true CZ35289U1 (cs) | 2021-08-03 |
Family
ID=49949589
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ201936834U CZ35288U1 (cs) | 2014-01-20 | 2014-12-23 | Neutrální lidské mléčné oligosacharidy (HMO) z mikrobiální fermentace |
CZ201936835U CZ35289U1 (cs) | 2014-01-20 | 2014-12-23 | Neutrální lidské mléčné oligosacharidy (HMO) z mikrobiální fermentace |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ201936834U CZ35288U1 (cs) | 2014-01-20 | 2014-12-23 | Neutrální lidské mléčné oligosacharidy (HMO) z mikrobiální fermentace |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US10377787B2 (cs) |
EP (5) | EP2896628B1 (cs) |
JP (2) | JP6901857B2 (cs) |
KR (1) | KR102137027B1 (cs) |
CN (1) | CN106132977B (cs) |
AT (2) | AT17418U1 (cs) |
AU (1) | AU2014377374B2 (cs) |
BR (1) | BR112016016705A8 (cs) |
CZ (2) | CZ35288U1 (cs) |
DE (2) | DE202014011399U1 (cs) |
DK (6) | DK2896628T3 (cs) |
ES (4) | ES2701163T3 (cs) |
FI (2) | FI3686211T3 (cs) |
MX (2) | MX369375B (cs) |
PH (2) | PH12016501421A1 (cs) |
PL (4) | PL2896628T3 (cs) |
RU (1) | RU2682445C2 (cs) |
WO (1) | WO2015106943A1 (cs) |
Families Citing this family (54)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK2896628T3 (en) | 2014-01-20 | 2019-01-14 | Jennewein Biotechnologie Gmbh | Process for Effective Purification of Neutral Milk Oligosaccharides (HMOs) from Microbial Fermentation |
EP3227309A4 (en) * | 2014-12-05 | 2019-01-16 | Glycom A/S | CRYSTALLINE DIFUCOSYLLACTOSIS |
EP3141610A1 (en) | 2015-09-12 | 2017-03-15 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Production of human milk oligosaccharides in microbial hosts with engineered import / export |
WO2017101958A1 (en) | 2015-12-18 | 2017-06-22 | Glycom A/S | Fermentative production of oligosaccharides |
WO2017152918A1 (en) * | 2016-03-07 | 2017-09-14 | Glycom A/S | Separation of oligosaccharides from fermentation broth |
US11312741B2 (en) | 2016-04-19 | 2022-04-26 | Glycom A/S | Separation of oligosaccharides from fermentation broth |
EP3645146A4 (en) | 2017-06-30 | 2021-05-05 | Glycom A/S | SYNTHESIS OF OLIGOSACCHARIDES |
WO2019012461A1 (en) | 2017-07-12 | 2019-01-17 | Glycom A/S | AMORPHOUS MIXTURE COMPRISING A NEUTRAL MONO- OR OLIGOSACCHARIDE AND A NON-GLUCIDIC ACID COMPONENT |
EP3450443A1 (en) | 2017-08-29 | 2019-03-06 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Process for purifying sialylated oligosaccharides |
US11377462B2 (en) | 2017-09-29 | 2022-07-05 | Frieslandcampina Nederland B.V. | Process for the purification of a neutral human milk oligosaccharide (HMO) from microbial fermentation |
EP3486326A1 (en) * | 2017-11-21 | 2019-05-22 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Method for the purification of n-acetylneuraminic acid from a fermentation broth |
EP3494807A1 (en) | 2017-12-11 | 2019-06-12 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Spray-dried sialyllactose |
EP3524067A1 (en) * | 2018-02-08 | 2019-08-14 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Spray-dried mixture of human milk oligosaccharides |
EP3494804A1 (en) | 2017-12-08 | 2019-06-12 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Spray-dried 3-fucosyllactose |
EP3494805A1 (en) | 2017-12-08 | 2019-06-12 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Spray-dried tetrasaccharides |
AU2018380957B2 (en) * | 2017-12-08 | 2023-04-13 | Chr. Hansen HMO GmbH | Spray-dried 3-fucosyllactose |
EP3494806A1 (en) | 2017-12-08 | 2019-06-12 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Spray-dried lacto-n-fucopentaose |
EP3546060A1 (en) * | 2018-03-27 | 2019-10-02 | DuPont Nutrition Biosciences ApS | Process for spray drying fucosyllactose solutions and related product compositions |
KR20210006916A (ko) | 2018-05-07 | 2021-01-19 | 젠와인 바이오테크놀로지 게엠바하 | 미생물 발효에 의해 수득된 탄수화물로부터 락토-N-네오테트라오스 (LNnT)를 정제하기 위한 간단한 방법 |
EP3799594A4 (en) * | 2018-05-23 | 2022-06-15 | DSM IP Assets B.V. | PRODUCTION OF OLIGOSACCHARIDS |
FI3801037T3 (fi) * | 2018-06-01 | 2023-01-13 | Yksinkertainen menetelmä sialylaktooinin puhdistamiseen | |
CN109111043B (zh) * | 2018-09-16 | 2021-11-09 | 苏州渭中科技发展有限公司 | 一种高盐高cod废水的处理方法 |
JP2022514350A (ja) | 2018-12-19 | 2022-02-10 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | バイオマス及び少なくとも1種のオリゴ糖を含む溶液からバイオマスを分離する方法 |
US20220081732A1 (en) * | 2019-01-21 | 2022-03-17 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Process for making l-fucose |
EP3686210A1 (en) * | 2019-01-24 | 2020-07-29 | DuPont Nutrition Biosciences ApS | Process for purifying a human milk oligosaccharide and related compositions |
WO2020174386A1 (en) | 2019-02-25 | 2020-09-03 | Nutribam Bvba | Composition, food supplement and method for supporting and/or improving intestinal health |
BE1027078A9 (nl) * | 2019-02-25 | 2020-09-28 | Nutribam Bvba | Samenstelling, voedingssupplement en werkwijze voor het ondersteunen en/of verbeteren van de darmgezondheid |
EP3741770A1 (en) * | 2019-05-21 | 2020-11-25 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Purification of oligosaccharides from a fermentation broth by using filtration |
EP3979827B1 (en) * | 2019-06-04 | 2023-08-02 | N.V. Nutricia | Nutritional composition comprising 2'fucosyllactose and 3'galactosyllactose |
EP3822282A1 (en) * | 2019-11-18 | 2021-05-19 | DuPont Nutrition Biosciences ApS | Process for removing an antifoam agent from a solution comprising a human milk oligosaccharide and related compositions |
EP4025072A4 (en) * | 2019-09-04 | 2023-12-20 | Inbiose N.V. | METHOD FOR REMOVAL OF AN ANTIFOAM AGENT FROM A HUMAN MILK OLIGOSACCHARIDE SOLUTION AND ASSOCIATED COMPOSITIONS |
KR20220066904A (ko) | 2019-09-24 | 2022-05-24 | 프롤랙타 바이오사이언스, 인코포레이티드 | 염증 및 면역 질환의 치료용 조성물 및 방법 |
BR112022014823A2 (pt) * | 2020-01-29 | 2022-10-04 | Dsm Ip Assets Bv | Processo para recuperação e purificação de oligosacarídeos do leite humano |
CN111540125B (zh) * | 2020-04-20 | 2021-01-05 | 中国人民解放***箭军工程设计研究院 | 一种充电桩的充电管理方法、设备及计算机可读存储介质 |
US20230227487A1 (en) | 2020-06-12 | 2023-07-20 | Basf Se | Improved demineralization of fermentation broths and purification of fine chemicals such as oligosaccharides |
US20240139222A1 (en) | 2020-08-14 | 2024-05-02 | Prolacta Bioscience, Inc. | Human milk oligosaccharide compositions for use with bacteriotherapies |
CN112568439A (zh) * | 2020-12-21 | 2021-03-30 | 湖北福星生物科技有限公司 | 一种从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法及其应用 |
AU2022207078A1 (en) | 2021-01-12 | 2023-06-29 | Prolacta Bioscience, Inc. | Synbiotic treatment regimens |
CN112920234B (zh) * | 2021-01-27 | 2022-03-29 | 南开大学 | 一种2′-岩藻糖基乳糖的富集纯化方法 |
CN117355228A (zh) | 2021-04-30 | 2024-01-05 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 砷含量低的婴幼儿配方品 |
WO2022263425A1 (en) | 2021-06-15 | 2022-12-22 | Dsm Ip Assets B.V. | Separation of human milk oligosaccharides from a fermentation broth |
BE1029435B1 (nl) | 2021-06-15 | 2023-07-31 | Dsm Ip Assets Bv | Scheiding van moedermelkoligosachariden uit een fermentatiebouillon |
EP4355465A1 (en) | 2021-06-15 | 2024-04-24 | DSM IP Assets B.V. | Separation of human milk oligosaccharides from a fermentation broth |
BE1029434B1 (nl) | 2021-06-15 | 2023-07-31 | Dsm Ip Assets Bv | Scheiding van moedermelkoligosachariden uit een fermentatiebouillon |
WO2023066907A1 (en) | 2021-10-18 | 2023-04-27 | Dsm Ip Assets B.V. | A method for providing an amorphous hmo product by drying |
CN114539433B (zh) * | 2021-12-29 | 2022-11-01 | 北京三元食品股份有限公司 | 一种乳低聚糖的制备方法及制备的低聚糖粉、食品 |
WO2023182527A1 (ja) * | 2022-03-25 | 2023-09-28 | キリンホールディングス株式会社 | ラクトジフコテトラオース(ldft)の製造法 |
CN115873051B (zh) * | 2022-05-17 | 2024-06-25 | 山东恒鲁生物科技有限公司 | 三糖的新晶型 |
WO2023242184A1 (en) | 2022-06-14 | 2023-12-21 | Dsm Ip Assets B.V. | Separation of human milk oligosaccharides from a fermentation broth |
WO2024047096A1 (en) | 2022-08-30 | 2024-03-07 | Inbiose N.V. | Process for purification of an oligosaccharide |
WO2024130119A2 (en) | 2022-12-16 | 2024-06-20 | Prolacta Bioscience, Inc. | Synbiotic compositions for short chain fatty acid production |
CN115651039A (zh) * | 2022-12-27 | 2023-01-31 | 保龄宝生物股份有限公司 | 一种高密度2’-岩藻糖基乳糖的生产方法 |
CN116425810B (zh) * | 2023-06-14 | 2023-08-11 | 山东合成远景生物科技有限公司 | 一种混合液中3-岩藻糖基乳糖的纯化方法 |
CN117089503B (zh) * | 2023-10-17 | 2024-01-02 | 保龄宝生物股份有限公司 | 一种大肠杆菌k-12 mg1655 blbyzt6及其应用 |
Family Cites Families (59)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS61271296A (ja) | 1985-05-28 | 1986-12-01 | Kyogyo Kumiai N F I | N−アセチルキトオリゴ糖の製造方法 |
JPH0614870B2 (ja) * | 1986-12-15 | 1994-03-02 | 株式会社ヤクルト本社 | ガラクトオリゴ糖の製造法 |
CA2268168C (en) | 1996-10-10 | 2008-04-29 | Cytel Corporation | Carbohydrate purification using ultrafiltration, reverse osmosis and nanofiltration |
US5945314A (en) | 1997-03-31 | 1999-08-31 | Abbott Laboratories | Process for synthesizing oligosaccharides |
US6323008B1 (en) * | 1997-08-14 | 2001-11-27 | Neose Technologies, Inc. | Methods for producing sialyloligosaccharides in a dairy source |
US6017433A (en) | 1997-11-12 | 2000-01-25 | Archer Daniels Midland Company | Desalting aqueous streams via filled cell electrodialysis |
AU1234400A (en) | 1998-10-27 | 2000-05-15 | Cargill Incorporated | Method for purifying a polyol product stream |
DE19906865C2 (de) | 1999-02-18 | 2003-03-13 | Infineon Technologies Ag | Verfahren und Einrichtung zur Entzerrung und Decodierung eines Datensignals |
FR2796082B1 (fr) | 1999-07-07 | 2003-06-27 | Centre Nat Rech Scient | Procede de production d'oligosaccharides |
FR2799754A1 (fr) | 1999-10-18 | 2001-04-20 | Roquette Freres | Procede de separation et de purification d'acide lactique a partir d'un milieu de fermentation |
US6288222B1 (en) | 2000-02-16 | 2001-09-11 | Neose Technologies, Inc. | Method of filtration of a dairy stream |
US6618584B1 (en) | 2000-08-30 | 2003-09-09 | Telefonaktiebolaget Lm Ericsson (Publ) | Terminal authentication procedure timing for data calls |
JP2003047402A (ja) * | 2001-08-06 | 2003-02-18 | Meiji Milk Prod Co Ltd | 中性オリゴ糖含有育児用調製乳 |
JP2003048901A (ja) | 2001-08-09 | 2003-02-21 | Oji Paper Co Ltd | 長鎖キシロオリゴ糖組成物およびその製造方法 |
FR2844209B1 (fr) | 2002-09-06 | 2007-10-19 | Applexion Ste Nouvelle De Rech | Procede de purification par nanofiltration d'une solution aqueuse sucree contenant des anions et cations monovalents et polyvalents |
BRPI0410685B8 (pt) | 2003-05-06 | 2017-05-30 | Du Pont | processos de purificação do 1,3-propanodiol e composição |
BRPI0408911B1 (pt) * | 2003-06-30 | 2016-07-26 | Clasado Inc | composição de galactooligossacarídeos e a preparação da mesma |
US20080145899A1 (en) | 2004-09-17 | 2008-06-19 | Neose Technologies Inc | Production of Oligosaccharides By Microorganisms |
US20070298111A1 (en) * | 2004-10-01 | 2007-12-27 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Fine Particle-Containing Composition and Manufacturing Method Therefor |
CA2597499A1 (en) | 2005-02-11 | 2006-08-17 | Dsm Ip Assets B.V. | Recombinant microorganisms in fermentative production of vitamin c and a process thereof |
US20070256936A1 (en) | 2006-05-04 | 2007-11-08 | Robert Jansen | Method for Deashing Syrup by Electrodialysis |
JPWO2009008362A1 (ja) * | 2007-07-12 | 2010-09-09 | よつ葉乳業株式会社 | シアル酸化合物含有組成物の製造方法 |
BRPI0923433B1 (pt) | 2008-12-19 | 2021-06-01 | Jennewein Biotechnologie Gmbh | Método para produzir uma célula geneticamente modificada tendo a capacidade de produzir compostos fucosilados e método para fazer um composto fucosilado |
GB0904562D0 (en) | 2009-03-17 | 2009-04-29 | Separation Technologies Invest | Isolation and purification of components of whey |
CA2758097A1 (en) | 2009-04-07 | 2010-10-14 | Glycom A/S | Synthesis of 2'-o-fucosyllactose |
ES2660698T3 (es) * | 2009-06-08 | 2018-03-23 | Jennewein Biotechnologie Gmbh | Síntesis de HMO |
US9034847B2 (en) * | 2009-07-06 | 2015-05-19 | Children's Hospital Medical Center | Inhibiting inflammation with milk oligosaccharides |
IT1395068B1 (it) | 2009-08-07 | 2012-09-05 | Inalco Spa | Processo per la produzione di galatto-oligosaccaridi ultrapuri |
CN101691538B (zh) | 2009-09-29 | 2012-05-09 | 保龄宝生物股份有限公司 | 一种米曲霉菌种及其制备高纯度低聚半乳糖的方法 |
EP2525811B2 (en) * | 2010-01-19 | 2019-02-27 | Abbott Laboratories | A composition comprising lactobacillus rhamnosus hn001 and prebiotics for use in the treatment of allergic lung disease |
CA2798675A1 (en) | 2010-06-01 | 2011-12-08 | Glycom A/S | Polymorphs of 2'-o-fucosyllactose and producing thereof |
DK2944690T3 (en) | 2010-10-11 | 2018-04-03 | Jennewein Biotechnologie Gmbh | UNKNOWN FUCOSYL TRANSFERASES AND THEIR APPLICATIONS |
EP2455387A1 (en) | 2010-11-23 | 2012-05-23 | Nestec S.A. | Oligosaccharide mixture and food product comprising this mixture, especially infant formula |
TW201233340A (en) * | 2010-12-31 | 2012-08-16 | Abbott Lab | Human milk oligosaccharides for modulating inflammation |
EP3338784B1 (en) | 2010-12-31 | 2020-07-22 | Abbott Laboratories | Human milk oligosaccharides for modulating inflammation |
CN102154163A (zh) | 2010-12-31 | 2011-08-17 | 朱莉 | 一种3′-唾液酸乳糖的制备方法 |
SG191393A1 (en) * | 2010-12-31 | 2013-08-30 | Abbott Lab | Neutral human milk oligosaccharides to promote growth of beneficial bacteria |
DK2479263T3 (da) | 2011-01-20 | 2014-02-03 | Jennewein Biotechnologie Gmbh | Nye fucosyltransferaser og deres anvendelser |
CA3098403C (en) * | 2011-02-16 | 2022-05-10 | Glycosyn LLC | Biosynthesis of human milk oligosaccharides in engineered bacteria |
CN102095181A (zh) | 2011-03-16 | 2011-06-15 | 黎昌兴 | Led强光源流体巡回散热装置 |
JP6129821B2 (ja) * | 2011-05-13 | 2017-05-17 | グリコシン リミテッド ライアビリティー カンパニー | プレバイオティクスとしての、精製された2’−フコシルラクトース、3−フコシルラクトース、およびラクトジフコテトラオースの使用 |
EP2526784A1 (en) | 2011-05-24 | 2012-11-28 | Nestec S.A. | Milk oligosaccharide-galactooligosaccharide composition for infant formula containing the soluble oligosaccharide fraction present in milk, and having a low level of monosaccharides, and a process to produce the composition |
ES2671555T3 (es) * | 2011-06-07 | 2018-06-07 | Hero Ag | Obtención de oligosacáridos mediante un proceso biotecnológico |
NL2007268C2 (en) * | 2011-08-16 | 2013-02-19 | Friesland Brands Bv | Nutritional compositions comprising human milk oligosaccharides and uses thereof. |
JP6017133B2 (ja) * | 2011-12-12 | 2016-10-26 | Mcフードスペシャリティーズ株式会社 | 風味改良剤 |
TR201802109T4 (tr) | 2011-12-19 | 2018-03-21 | Coca Cola Co | Steviol glikositlerini içeren içecek. |
WO2013182206A1 (en) | 2012-06-08 | 2013-12-12 | Glycom A/S | Method for producing oligosaccharides and oligosaccharide glycosides by fermentation |
EP2861609A4 (en) | 2012-06-14 | 2015-11-04 | Glycom As | IMPROVING STABILITY AND PURITY AND INCREASING THE BIOAVAILABILITY OF HUMAN MILK OLIGOSACCHARIDES OR PRECURSORS OR MIXTURES THEREOF |
ITFI20120143A1 (it) * | 2012-07-12 | 2014-01-13 | Inalco S A S Di Giovanni Cipollett I & C | Polimorfi idrati e anidri del 2'-o-fucosillattosio e loro metodi di produzione. |
US9029136B2 (en) | 2012-07-25 | 2015-05-12 | Glycosyn LLC | Alpha (1,2) fucosyltransferases suitable for use in the production of fucosylated oligosaccharides |
WO2014086373A1 (en) | 2012-12-07 | 2014-06-12 | Glycom A/S | Crystallisation of human milk oligosaccharides (hmo) |
EP3572520A1 (en) | 2013-09-10 | 2019-11-27 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Production of oligosaccharides |
CN103468766B (zh) | 2013-09-18 | 2015-07-01 | 恩施天天佳生物科技有限公司 | 一种高纯度甘露低聚糖的制备方法 |
EP2857410A1 (en) | 2013-10-04 | 2015-04-08 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Process for purification of 2´-fucosyllactose using simulated moving bed chromatography |
DK2896628T3 (en) | 2014-01-20 | 2019-01-14 | Jennewein Biotechnologie Gmbh | Process for Effective Purification of Neutral Milk Oligosaccharides (HMOs) from Microbial Fermentation |
EP3461890A1 (en) | 2014-03-31 | 2019-04-03 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Total fermentation of oligosaccharides |
WO2015161170A2 (en) | 2014-04-17 | 2015-10-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulation of smn2 splicing in a subject |
EP3154995B1 (en) | 2014-06-11 | 2023-11-01 | Glycom A/S | Separation of 2'-o-fucosyllactose from fermentation broth |
EP3141610A1 (en) | 2015-09-12 | 2017-03-15 | Jennewein Biotechnologie GmbH | Production of human milk oligosaccharides in microbial hosts with engineered import / export |
-
2014
- 2014-01-20 DK DK14151737.5T patent/DK2896628T3/en active
- 2014-01-20 ES ES14151737T patent/ES2701163T3/es active Active
- 2014-01-20 EP EP14151737.5A patent/EP2896628B1/en active Active
- 2014-01-20 PL PL14151737T patent/PL2896628T3/pl unknown
- 2014-12-23 AT ATGM50013/2020U patent/AT17418U1/de unknown
- 2014-12-23 DK DK19215076.1T patent/DK3680249T3/da active
- 2014-12-23 DE DE202014011399.8U patent/DE202014011399U1/de active Active
- 2014-12-23 DK DK14827224.8T patent/DK3131912T3/da active
- 2014-12-23 EP EP20152200.0A patent/EP3686211B1/en active Active
- 2014-12-23 EP EP18169031.4A patent/EP3375786A1/en active Pending
- 2014-12-23 WO PCT/EP2014/079212 patent/WO2015106943A1/en active Application Filing
- 2014-12-23 MX MX2016009394A patent/MX369375B/es active IP Right Grant
- 2014-12-23 JP JP2016547592A patent/JP6901857B2/ja active Active
- 2014-12-23 ES ES20152200T patent/ES2942630T3/es active Active
- 2014-12-23 RU RU2016128955A patent/RU2682445C2/ru active
- 2014-12-23 EP EP19215076.1A patent/EP3680249B1/en active Active
- 2014-12-23 PL PL19215076.1T patent/PL3680249T3/pl unknown
- 2014-12-23 AT ATGM50165/2019U patent/AT17271U1/de unknown
- 2014-12-23 PL PL14827224T patent/PL3131912T3/pl unknown
- 2014-12-23 BR BR112016016705A patent/BR112016016705A8/pt not_active Application Discontinuation
- 2014-12-23 PL PL20152200.0T patent/PL3686211T3/pl unknown
- 2014-12-23 ES ES19215076T patent/ES2942586T3/es active Active
- 2014-12-23 DE DE202014011358.0U patent/DE202014011358U1/de active Active
- 2014-12-23 CZ CZ201936834U patent/CZ35288U1/cs active Protection Beyond IP Right Term
- 2014-12-23 FI FIEP20152200.0T patent/FI3686211T3/fi active
- 2014-12-23 DK DK20152200.0T patent/DK3686211T3/da active
- 2014-12-23 ES ES14827224T patent/ES2779414T3/es active Active
- 2014-12-23 FI FIEP19215076.1T patent/FI3680249T3/fi active
- 2014-12-23 CN CN201480073484.0A patent/CN106132977B/zh active Active
- 2014-12-23 KR KR1020167022587A patent/KR102137027B1/ko active IP Right Grant
- 2014-12-23 AU AU2014377374A patent/AU2014377374B2/en active Active
- 2014-12-23 CZ CZ201936835U patent/CZ35289U1/cs active Protection Beyond IP Right Term
- 2014-12-23 US US15/112,724 patent/US10377787B2/en active Active
- 2014-12-23 EP EP14827224.8A patent/EP3131912B1/en active Active
-
2016
- 2016-07-19 PH PH12016501421A patent/PH12016501421A1/en unknown
- 2016-07-19 MX MX2019013267A patent/MX2019013267A/es unknown
-
2019
- 2019-02-15 US US16/277,731 patent/US10882880B2/en active Active
- 2019-06-28 DK DKBA201900054U patent/DK201900054Y4/da active IP Right Grant
- 2019-09-19 DK DKBA201900072U patent/DK201900072U1/en not_active Application Discontinuation
- 2019-10-18 JP JP2019191254A patent/JP7000396B2/ja active Active
-
2020
- 2020-01-27 PH PH12020500199A patent/PH12020500199A1/en unknown
- 2020-04-07 US US16/842,606 patent/US11661435B2/en active Active
- 2020-11-13 US US17/097,488 patent/US11597740B2/en active Active
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11661435B2 (en) | Spray-dried, high-purity, neutral human milk oligosaccharides (HMOs) from microbial fermentation | |
JP7330171B2 (ja) | シアリル化オリゴ糖を精製する工程 | |
EP3980435A1 (en) | Purification of oligosaccharides from a fermentation broth by using filtration | |
RU2799091C2 (ru) | Способ очистки сиалилированных олигосахаридов |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FG1K | Utility model registered |
Effective date: 20210803 |
|
ND1K | First or second extension of term of utility model |
Effective date: 20210917 |
|
ND1K | First or second extension of term of utility model |
Effective date: 20211216 |