CZ287034B6 - Pharmaceutical composition for inhibiting biosynthesis of leukotrienes and use of urea derivative for preparing such pharmaceutical composition - Google Patents

Description

Farmaceutická kompozice pro inhibici biosyntézy leukotrienů a použití močovinového derivátu pro výrobu této farmaceutické kompozice

Oblast techniky

Vynález se týká způsobu inhibice biosyntézy leukotrienů. Vynález se rovněž týká farmaceutické kompozice pro inhibici biosyntézy leukotrienů.

Dosavadní stav techniky

Kyselina arachidonová, složka fosfolipidů nalézající se v buněčných membránách, je metabolizována pomocí struktury enzymatických drah a poskytuje biologicky účinné produkty látkové přeměny zahrnující leukotrieny. Tyto leukotrieny jsou velmi silné substance vyvolávající celou řadu biologických účinků, pokud jsou přítomny v nanomolámích nebo pikomolámích množstvích. Byly prokázány u celé řady chorobných stavů. Leukotrien C₄ a Leukotrien D₄ jsou například silnými kontriktory hladkého svalstva horních cest dýchacích u lidí. Podání těchto látek ve formě aerosolu dobrovolníkům netrpícím astmatem vyvolá plicní konstrikci. Leukotrien B₄ je silným chemotaktickým faktorem pro zánětlivé buňky, jakými jsou například polymorfonukleámí leukocyty. Leukotrien B₄ byl nalezen v synoviálních tekutinách u pacientů trpících revmatickou artritidou a psoriatickými lézemi. Leukotrieny byly rovněž odhaleny jako důležité mediátory v případě rýmy, syndromu akutní respirační tísně, zánětlivých chorob střev, ischemické příhody srdeční, reperfúzní příhody, dny, astmatu, lupenky, mrtvice, příhody míšní a traumatické příhody mozkové.

Podstata vynálezu

Jak již bylo uvedeno, vynález poskjtuje farmaceutickou kompozici pro léčení stavu kladně reagujícího na inhibici biosyntézy leukotrionů, která obsahuje (i) farmaceuticky přijatelné vehikulum; a (ii) močovinový derivát obecného vzorce I:

O

ve kterém n znamená 0, 1, 2 nebo 3,

R se zvolí ze skupiny zahrnující vodík; cyklickou alkylovou skupinu obsahující pět až deset atomů uhlíku; alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až čtrnáct atomů uhlíku a substituovanou alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až dvanáct atomů uhlíku, ve které je substituentem alkoxykarbonylová skupina, jejíž alkoxylová skupina obsahuje jeden až čtyři atomy uhlíku; alkoxyalkylovou skupinu, ve které alkoxylový zbytek obsahuje jeden až šest atomů uhlíku a alkylový zbytek obsahuje rovněž jeden až šest atomů uhlíku;

každé R' se nezávisle zvolí z množiny zahrnující halogen; nitroskupinu; alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až pět atomů uhlíku; alkoxyskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkoxyfenylovou skupinu, ve které alkoxyskupina obsahuje jeden až osm atomů uhlíku; alkylthioskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfonyloxyskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfinylovou skupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku, alkylsulfonylovou skupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; benzoylovou skupinu; benzylovou skupinu; cyklohexylmethoxyskupinu, cyklopentyloxyskupinu, fenoxyskupinu, fenylo

- 1 CZ 287034 B6 vou skupinu; fenylalkyloxyskupinu, ve které alkylová skupina obsahuje jeden až čtyři atomy uhlíku; trifluoromethylovou skupinu; trifluoromethylthioskupinu; a trifluoromethylsulfonyloxyskupinu;

R se zvolí z množiny zahrnující vodík a alkylovou skupinu s přímým řetězcem obsahující jeden až dvanáct atomů uhlíku; a

M se zvolí z množiny zahrnující vodík, farmaceuticky přijatelný kationt a farmaceuticky přijatelnou metabolicky odštěpitelnou skupinu pod podmínkou, že R, R' a R neznamenají všechny současně vodík;

zvířatům v množství účinném pro inhibování biosyntézy leukotrienů.

Vynález poskytuje farmaceutickou kompozici pro léčení zvířat, jejichž stav vyžaduje toto léčení, spočívající v inhibici leukotrienové biosyntézy, přičemž tato kompozice obsahuje (i) farmaceuticky přijatelné vehikulum a (ii) sloučeninu obecného vzorce I, ve které mají R, R', R a M výše definované významy, v množství účinném pro inhibování biosyntézy leukotrienů.

Vynález rovněž poskytuje způsob použití sloučeniny obecného vzorce I při výrobě farmaceutické kompozice určené pro použití při inhibici biosyntézy leukotrienů.

Jak již bylo uvedeno, způsob podle vynálezu zahrnuje podání sloučeniny obecného vzorce I:

R substituent má výše definovaný význam, Výhodné R substituenty zahrnují alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až šest atomů uhlíku a cykloalkylovou skupinu obsahující pět až osm atomů uhlíku a cykloalkylovou skupinu obsahující pět až osm atomů uhlíku. Pokud R znamená výše definovanou alkylovou skupinu, potom jsou výhodnými R substituenty methylová skupina, 1-methylethylová skupina a 1-methylpropylová skupina.

Výhodné R' substituenty zahrnují halogen, nitroskupinu, alkylovou skupinu s přímým řetězcem obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku, alkylthioskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku a fenoxyskupinu. Pokud R' znamená výše definovanou alkylthioskupinu, potom je výhodným R' substituentem thiomethylová skupina.

Výhodné R substituenty zahrnují halogen a methylovou skupinu.

V obecném vzorci I n znamená 0, 1, 2 nebo 3, výhodně 0 nebo 1. Pokud n znamená 1, potom může být R' substituent substituován v poloze ortho, meta nebo para, výhodně v poloze para, na fenolovém kruhu.

M substituent se zvolí z množiny zahrnující vodík, farmaceuticky přijatelný kationt a farmaceuticky přijatelnou metabolicky odštěpitelnou skupinu.

Výraz „farmaceuticky přijatelný kationt“ označuje netoxické kationty, které jsou odborníkům v daném oboru dobře známy a zahrnují neomezujícím, způsobem kationty na bázi alkalických kovů a kovů alkalických zemin, jako například sodík, lithium, draslík, hořčík, hliník a pod., stejně jako netoxické amonné, kvartemí ammoniové a amonné kationty, odvozené dusíkatých

-2CZ 287034 B6 zásad, které mají dostatečnou bazicitu pro vytvoření soli s N-hydroxyskupinou sloučenin obecného vzorce I (kde M znamená vodík).

Výraz „metabolicky odštěpitelná skupina“ označuje zbytek, který se snadno in vivo odštěpí ze sloučeniny nesoucí tento odtěpitelný zbytek. Sloučenina zůstane po odštěpení farmaceuticky aktivní, nebo se teprve stane farmaceuticky aktivní. Metabolicky odštěpitelné skupiny jsou odvozeny od sloučenin (dobře známých odborníkům v oboru) reagujících s N-hydroxyskupinou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém M znamená vodík. Mezi takové skupiny patří například alkanoylová skupina (například acetylová, nebo propionylová skupina), alkoxykarbonylová skupina (například ethoxykarbonylová skupina) monoesteiy připravené pomocí dikarboxylových kyselin (například sukcinilová skupina) a pod.. Sloučeniny nesoucí metabolicky odštěpitelné skupiny působí jako prekurzory léčiv a mohou vykazovat zvýšenou biologickou dostupnost oproti výchozí sloučenině.

M znamená výhodně vodík.

Mezi výhodné sloučeniny určené pro použití v rámci způsobu podle vynálezu lze zařadit:

-hydroxy-1 -methy l-3-[3-trifluoro(methylsulfonoxy)fenyl] močovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-[3-(methylthiol)fenyl]močovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-[3-trifluoro(methylthio)fenyl]močovinu, l-hydroxy-3-[3-methoxyfenyl)-l-methylmočovinu, 3-(3-bromofeny 1)-1 -hydroxy-1 -methy Imočovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-(3-methylfenyl)močovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-(3-nitrofenyl)močovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-fenylmočovinu,

3-(4-fluorfeny 1)-1 -hydroxy-1 -methy Imočovinu,

-(4-buty lfeny 1)-1 -hydroxy-1 -methy Imočovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-(4-nitrofenyl)moČovinu, 1 -hydroxy-1 -methy l-3-(4-fenoxyfenyl)močovinu,

-hydroxy-l-( l-methylethyl)-3-[3-(methylthio)fenyl]močovinu,

-hydroxy-l-( l-methylethyl)-3-fenylmočovinu, 3-(4-fluorfenyl)-l-hydroxy-l-(l-methylethyl)močovinu, 3-(4-bromofenyl)~ 1 -hydroxy-1 -(1 -met hy lethy l)močovinu, 3-(2-fluorofenyl)-l -hydroxy-1 -(1 -methylethyl )močovinu, 1 -hydroxy-1 -(1 -methylethy l)-3-(3-methy lfeny l)močovinu, l-hydroxy-3-(3-methoxyfenyl)-l-(l-methylethyl)močovinu, 1 -hydroxy-3-(4-methoxyfeny 1)-1 -(1 -methylethy l)močovinu, 3-(2-chlorofenyl)-l-hydroxy-l-(l-methylethyl)močovinu, l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-(2-methylfenyl)močovinu, 3-(2,6-dimethylfenyl)-l-hydroxy-l-(l-methylethyl)močovinu, 3-(4-buty lfeny 1)-1 -hydroxy-1 -(1 -methy lethyl)močovinu, 3-(2,5-dimethoxyfenyl)- l-hydroxy-l-( 1-methy lethy l)močovinu, l-hydroxy-3-(2-methoxyfenyl)-l-(l-methylethyl)močovinu, l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-(4-methylthio)fenyl]močovinu, l-cyklohexyl-l-hydroxy-3-[4-(methylthio)fenyl]močovinu, l-cyklohexyl-l-hydroxy-3-[3-(methylthio)fenyl]močovinu, l-hydroxy-3-(3-methoxyfenyl)močovinu, l-hydroxy-3-[3-(methylthio)fenyl]močovinu,

-cyklookty 1-1 -hydroxy-3-feny Imočovinu, l-cyklooktyl-l-hydroxy-3-(4-methoxyfenyl)močovinu,

-(1 -ethy lpropyl)-1 -hydroxy-3-[4-(methy lthio)feny 1] močovinu, l-(l-ethylpropyl)-l-hydroxy-3-(4-nitrofenyl)močovinu,

-3CZ 287034 B6

3-(4-bromofenyl)-l-(l-ethylpropyl)-l-hydroxymočovinu,

-ethyl- l-hydroxy-3-fenylmočovinu,

-hydroxy-1 -(3-methy lbutyl)-3-feny Imočovinu,

1-(2-ethoxyethyl)-1-hydroxy-3-feny lmočovinu, l-cyklofenyl-l-hydroxy-3-fenylmočovinu, l-(2-ethylhexyl)-l-hydroxy-3-fenylmočovinu, —(3,3—d imethylbutyl)-1 -hydroxy-3-fenylmočovinu,

-hydroxy-3-fenyl-1 -(3,5,5-trimethy Ihexy l)močovinu, ethylester kyseliny 6-(l-hydroxy-3-fenylureido)-l-hexanové,

1-cykloheptyl-1-hydroxy-3-feny lmočovinu,

-hydroxy-1 -oktyl-3-feny lmočovinu, l-dodecyl-l-hydroxy-3-fenylmočovinu, l-hydroxy-l-(2-methylpropyl)-3-fenylmočovinu, l-hydroxy-3-fenyl-l-propylmočovinu,

-hydroxy-1 -penty 1-3-fenylmočo v inu,

3-(4-buty lfeny 1)-1 -hydroxy-1 -penty lmočovinu,

1-hydroxy-1-(2- methylpropyl)-3-[3-(methylthio)fenyl]močovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-[3-(methylsulfonyl)fenyl]močovinu, l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-[3-(methylsulfonyl)fenyl]močovinu, 1-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-[3-(methylsulfinyl)fenyl]močovinu,

-hydroxy-1 -methy l-3-[4-(methylsulfinyl)feny 1] močovinu,

-hydroxy-1 -methy l-3-[4-(methy lsu lfonyl)fenyl] močovinu, l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-(3,4,5-trimethoxyfenyl)močovinu,

-hydroxy-1 -(1 -methy lethy 1)-3-(3,4,5-tr imethylfeny l)močovinu,

1-hydroxy-l -(l-methylbutyl)-3-fenylmočovinu,

1-hydroxy-l -(l-methylpropyl)-3-fenylmočovinu,

1-hydroxy-l -(l-propylbutyl)-3-fenylmočovinu,

-hydroxy-1 -(1 -ethy 1 buty 1)—3 -feny lmočovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(4-fenoxyfenyl)močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(3,5-bis(trifluoromethyl)fenyl)močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-methyl-3-enylmočovinu,

1-hydroxy-l, 3-dimethyl-3-fenylmočovinu,

-hydroxy-1 -(1 -ethy lpropy l)-3 -(2-fenoxyfeny l)močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(3-fenoxyfenyl)močovinu, 1 -hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-(4-benzylfenyl)močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl}-3-(4-benzoylfenyl)močovinu,

-hydroxy-1 -(1 -ethy lpropy l)-3-(4-benzy loxyfeny l)močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-[4-cyklohexylmethoxy)fenyl]-močovinu,

-hydroxy-1 -(1 -ethy lpropy l)-3-[4-(3-feny lpropy loxy )feny l]-močovi nu,

-hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-(bifenyl-4-yl)-močovinu

-hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxyfenyl)-močovinu, a l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(4'-oktyloxybifenyl-4-yl)močovinu.

Nejvýhodnější jsou l-hydroxy-l-methyl-3-[4-(methylthio)fenyl)]močovina, 1-hydroxy-1-(1methylethyl)-3-[4-(methylthio)fenyl]močovina, 1-(1 -ethy lpropy 1)-1 -hydroxy-3-(4-methy Ithio)fenylmočovina, l-(l-ethylpropyl)-l-hydroxy-3-fenylmočovina, l-hydroxy-l-methyl-3(4-fenoxyfenyl)močovina, l-hydroxy-l-( l-ethylpropyl)-3-(4-fenoxyfenyl)močovina, 1 hydroxy-l-( l-ethylpropyl)-3-(4-fenoxyfenyl)močovina, l-hydroxy-l-( 1-ethy lpropy 1)-3-(2fenoxyfenyl)močovina, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(2-fenoxyfenyl)močovina, 1-hydroxyl-(l-methylethyl)-3-(4-butylfenyl)močovina, l-hydroxy-l-l(-methylpropyl)-3-fenylmočovina a l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl}-3-(3-fenoxyfenyl)močovina.

-4CZ 287034 B6

Sloučeniny, které se používají při provádění způsobu podle vynálezu v praxi, lze připravit podle dále uvedených reakčních schémat nebo pomocí jejich modifikací, které budou odborníkům v daném oboru zřejmé. Při volně vhodného způsobu je nutné vzít v úvahu příslušné R,R' nebo R substituenty, komerční dostupnost jednotlivých výchozích materiálů a pod.

Určité sloučeniny použitelné v praxi v rámci vynálezu lze připravit podle reakčního schématu I, ve kterém mají n, R a R' výše definované významy.

Reakční schéma I

(Π), (III), (IV),

Reakční schéma I zahrnuje uvedení hydroxylaminu obecného vzorce II do reakce s arylisokyanátem obecného vzorce III, které vede ke vzniku hydroxymočoviny obecného vzorce IV. (Obecný vzorec IV představuje podskupinu obecného vzorce I). Hydroxylaminů obecného vzorce 11 je komerčně dostupná celá řada. Další lze snadno připravit použitím běžných metod, například konverze vhodného ketonu na odpovídající oxim a následnou redukcí na požadovaný hydroxylamin. Isokyanátů obecného vzorce III je rovněž komerčně dostupná celá řada. Další lze snadno připravit použitím běžných metod, například pomocí Curtiova přesmyku, Hofmannova přesmyku, Schmidtovi reakce nebo uvedením anilinu do reakce s fosgenem. Reakci v reakčním schématu I lze provádět za pokojové teploty přidáním isokyanátů po kapkách do roztoku hydroxylaminu ve vhodném rozpouštědle (např. aprotickém rozpouštědle, jakým je například diethylether nebo tetrahydrofuran). Pokud se použije sůl (např. hydrochlorid) hydroxylaminu, převede se před uvedením do reakce s isokyanátem za použití běžných prostředků na volnou bázi (např. zreagováním s jedním ekvivalentem báze ve vhodném prostředí).

Určité sloučeniny obecného vzorce I lze rovněž připravit podle reakčního schématu II, ve kterém mají substituenty n, R a R' výše definovaný význam. Nicméně reakční schéma II není zpravidla vhodné pro sloučeniny, ve kterých substituent R' znamená silnou elektrony odvádějící skupinu (např. nitroskupinu).

-5CZ 287034 B6

Reakční schéma II

V kroku (1) reakčního schématu Π, se uvede O-benzylhydroxyaminhydrochlorid do reakce, vedené podle reakčního schématu I, s isokyanátem obecného vzorce III, která vede ke vzniku 1benzyloxy-3-fenylmočoviny obecného vzorce V. V kroku (2) je sloučenina obecného vzorce

V alkylována za běžných podmínek, např. uvedením sloučeniny do reakce se sloučeninou 10 obecného vzorce RBr v přítomnosti báze, jakou je například hydrid sodný, a ve vhodném

-6CZ 287034 B6 polárním aprotickém rozpouštědle (např. Ν,Ν-imethylformamid), za vzniku benzyloxymočoviny obecného vzorce VI. Pokud je to nezbytné nebo žádoucí lze reakci ohřívat. V kroku (3) reakčního schématu Π, se benzyloxymočovina obecného vzorce VI debenzyluje za použití konvenčních prostředků (např. hydrogenolýzy), čímž se získá hydroxymočovina obecného 5 vzorce IV.

Určité sloučeniny obecného vzorce I lze připravit podle reakčního schématu III, ve kterém mají substituenty n, R a R' výše definované významy.

Reakční schéma III

V kroku (I) reakčního schématu ID, se uvede O-benzylhydroxylaminhydrochlorid do reakce sdi-terc.-butyldikarbonátem za vzniku terc.-butyl N-benzyloxykarbamátu. V kroku (2) tercbutylbenzyloxykarbamátem se alkyluje za konvenčních podmínek, např. uvedením do reakce se sloučeninou obecného vzorce RBr v přítomnosti báze, jakou je například hydrid sodný, a v přítomnosti vhodného polárního aprotického rozpouštědla (např. N,N-dimethylformamidu). Tato alkylace vede ke vzniku karbamátu obecného vzorce VII. Pokud je to nezbytné nebo žádoucí, může se reakční směs ohřívat.

V kroku (3) reakčního schématu ID se karbamát obecného vzorce VII odblokuje zpracováním s kyselinou trifluoroctovou ve vhodném rozpouštědle (např. methylenchloridu), které vede ke vzniku O-benzylhydroxylaminu obecného vzorce VIII. V kroku (4) se O-benzylhydroxyamin obecného vzorce VID uvede do reakce, probíhající způsobem podle reakčního schématu I, s isokyanátem obecného vzorce Π, čímž se získá benzyloxymočovina obecného vzorce VI.

V kroku (5) se benzylmočovina debenzyluje za použití konvenčních způsobů (např. hydrogenolýzy), čímž se získá hydroxymočovina obecného vzorce IV.

Určité sloučeniny obecného vzorce I lze rovněž připravit podle reakčního schématu IV, ve kterém mají substituenty n, R, R' a R výše definované významy (nicméně za předpokladu, že R není vodík).

V kroku (1) reakčního schématu IV se O-benzylhydroxyamin obecného vzorce VIII uvede do reakce s karbamoylchloridem obecného vzorce IX vedoucí ke vzniku benzyloxymočoviny obecného vzorce X. O-benzylhydroxylaminy obecného vzorce VIII lze připravit podle reakčního schématu ΠΙ. Mnoho karbamoylchloridů obecného vzorce IX je komerčně dostupných. Další lze snadno připravit použitím konvenčních způsobů, například uvedením N-alkylanilinu do reakce sfosgenem. Reakce v kroku (1) se může provádět v uzavřené zkumavce při zvýšené teplotě v přítomnosti báze (např. triethylaminu) ve vhodném rozpouštědle (např. aprotickém rozpouštědle, jakým je například tetrahydrofuran). V kroku (2) reakčního schématu IV se benzylmočovina obecného vzorce X debenzyluje za použití konvenčních prostředků (např. hydrogenolýzy), čímž se získá hydroxymočovina obecného vzorce XI.

-8CZ 287034 B6

Určité sloučeniny obecného vzorce I lze rovněž připravit podle reakčního schématu V, ve kterém mají substituenty n, R, R' a R výše definované významy za předpokladu, že substituent R neznamená vodík.

V kroku (1) reakčního schématu V se O-benzylhydroxylaminhydrochlorid uvede do reakce s karbamoylchloridem obecného vzorce IX za vzniku benzyloxymočoviny obecného vzorce XII. Reakci lze provádět při pokojové teplotě smísením reakčních složek ve vhodném rozpouštědle (například v diethyletheru). O-benzylhydroxylaminhydrochlorid se převede na volnou bázi za použití vhodných konvenčních prostředků (např. reakcí s jedním ekvivalentem báze ve vhodném rozpouštědle) před uvedením do reakce s karbamoylchloridem. V kroku (2) reakčního schématu

V se sloučenina obecného vzorce XII alkyluje za konvenčních podmínek, např. reakcí s alkylhalogenidem v přítomnosti báze, jakou je například hydrid sodný, a vhodného polárního aprotického rozpouštědla (např. Ν,Ν-dimethylformamidu), za vzniku benzyloxymočoviny obecného vzorce X. V kroku (3) reakčního schématu V se benzyloxymočovina obecného vzorce X debenzyluje za použití konvenčních prostředků (např. hydrogenolýzy), čímž se získá hydroxymočovina obecného vzorce XI.

Reakční schéma V

XJ

Určité sloučeniny obecného vzorce I lze připravit vypracováním R' skupiny konvenčními prostředky (například oxidací alkylthioskupiny na alkylsulfonylovou skupinu) ve vhodném stupni syntézy.

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém M znamená farmaceuticky přijatelný kationt, lze připravit smísením sloučeniny obecného vzorce I, ve které M znamená vodík, s ekvimolámím

-9CZ 287034 B6 množstvím relativně silné báze, například báze obecného vzorce M(OH(_X, ve které M znamená farmaceuticky přijatelný kationt a x znamená valenci tohoto kationtu, v polárním rozpouštědle. Izolaci soli lze usnadnit přidáním rozpouštědla, jakým je například diethylether, v němž je získaná sůl nerozpustná.

Sloučenina obecného vzorce I může být formulována pro různé způsoby podání (např. orální podání pomocí tablet, kapslí, orálních suspenzí apod.) ve vhodném farmaceuticky přijatelném vehikulu a adjuvantech vhodných pro zvolenou dávkovou formu. Způsoby výroby těchto farmaceutických kompozic jsou odborníkům v oboru dobře známé a rovněž jsou popsány například v publikaci Remington's Pharmaceutical Sciences 18. Edice, 1990 Měrek Publishing Company, A.R. Gennaro, Editor. Z toho vyplývá, že odborník v oboru může jednotlivé formulace vhodné pro zvolený způsob podání snadno připravit. Například pevná dávková forma obsahuje sloučeninu obecného vzorce I a jednu nebo několik složek zvolených ze skupiny zahrnující: ředidla (například fosforečnan vápenatý, síran vápenatý, laktóza, mannitol, celulóza, kaolin, chlorid sodný, škrob, sacharóza, inosilol, sorbitol), pojivá (například škrob, želatina, sacharóza, glukóza, dextróza, melasa, laktóza a přírodní a syntetická guma), lubrikanty (například mastek, stearát hořečnatý, stearát vápenatý, kyselina stearová, hydrogenované rostlinné oleje, polyethylenglykoly), dezintegrační složky (například kukuřičný škrob, bramborový škrob, jíly, celulóza, algináty), barvicí činidla a ochucující činidla.

Sloučenina obecného vzorce I se podává v množství účinném pro inhibování biosyntézy leukotrienů. Množství, které představuje množství účinné pro inhibici biosyntézy leukotrienů bude záviset na příslušné sloučenině, příslušné formulaci, způsobu podání a požadovaném terapeutickém účinku. Odborníci v oboru mohou po zvážení výše jmenovaných faktorů toto účinné množství sloučeniny určit.

Níže uvedené příklady ukazují celou řadu sloučenin obecného vzorce I, které lze použít pro inhibování biosyntézy leukotrienů. Z těchto příkladů vyplývají doporučené způsoby použití těchto sloučenin při léčení stavů mediovaných leukotrieny, přičemž těmito stavy jsou artritida, revmatická artritida, osteoartritida, alergické rýmy, syndrom akutní respirační tísně, zánětlivé choroby střev, ischemická příhoda srdeční, reperfúzní příhoda, dna, astma, mrtvice, lupenka, příhoda míšní a traumatická příhoda mozková.

U následujících syntéz se struktury konečných sloučenin (tj. sloučenin obecného vzorce I) a meziproduktů ověřovaly pomocí nukleové magnetickorezonanční spektroskopie.

Sloučenina 1 l-hydroxy-l-methyl-3-[4-(methylthio)fenyl]močovina

N-methylhydroxylaminhydrochlorid (1,1 g, 13 mmol) se rozpustil ve vodě (2 ml) a následně sloučenou s diethyletherem (15 ml). Směs se ochladila v ledové lázni a následně smísila s roztokem hydroxidu sodného (0,53 g, 13 mmol) ve vodě (2 ml). Reakční směs se míchala po dobu několika minut a následně se do této směsi přidal po kapkách pomocí pasterovy pipety 4(methylthio)fenylisokyanát (2,1 g, 13 mmol). Bezprostředně potom se vytvořila hustá bílá sraženina. Do směsi se následně přidal diethylether (20 ml) a reakční směs se nechala odstát přes noc při pokojové teplotě a za stálého míchání. Pevná látka, která se z reakční směsi izolovala filtrací, se následně rekrystalizovala z 1,2-dichloroethanu, čímž se získalo 1,65 g požadovaného produktu ve formě bílé krystalické látky, jejíž teplota tání byla 146 až 148 °C.

Elementární analýza:	%C	%H
Vypočteno pro C9H12N2O2S:	50,93	5,70
Nalezeno:	50,82	5,63

%N

13,20

13,11

-10CZ 287034 B6

Sloučenina 2 až 14

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 1 a N-methylhydroxyaminhydrochloridu, který se uvedl do reakce s isokyanátem obecného vzorce III se připravily sloučeniny obecného vzorce I uvedené v tabulce I. Teploty tání těchto sloučenin a jejich elementární analýza jsou shrnuty v tabulce 2.

Tabulka 1

Sloučenina číslo	Sloučenina obecného vzorce IΜ = H; R - CH3; R = H; R' =
2	3-trifluoromethylsulfonoxy
3	3-methylthio
4	3-trifluoromethylthio
5	3-methoxy
6	3-bromo
7	3-methyl
8	3-fluoro
9	3-nitro
10	hydrogen
11	4-fIuoro
12	4-butyl
13	4-nitro
14	4-phenoxy

Tabulka 2

Slouč. č.	t.t. (°C)	Elementární analýza
Vzorec	Vypočteno	Nalezeno
%C	%H	%N	%C	%H	%N
2	132-133	C9H9F3N2O5S	34,4	2,9	8,9	34,5	2,9	9.1
3	127-131	c9h12n2o2s	50,93	5,7	13,2	51,06	5,76	13.29
4	129- 130,5	c9h9f3n2o2s	40.6	3,4		40,7	3,5
5	115-117	C9Hi2N2O2	55.1	6,16	14,28	55,17	6,21	14.13
6	135-136	C8H9BrN2O2	39,21	3,7	11,43	39,3	3,52	11.19
7	107 - 109	C9HI2N,O2	59,99	6,71	15,54	59,76	6,58	15.38
8	110-112	c8h9fn2o.	52,17	4,93	15,21	51,99	4,86	15.06
9	124-126	C8H9N3O4	45,5	4,3	19,9	45,31	4,16	19.87
10	98-100	C8Hl0N2O2	57,82	6.07	16.86	57,65	6,07	16.78
11	123-125	c8h9fn2o2	52,17	4,93	15,21	51,78	4,84	14.99
12	94,9 - 95,3	Ci2H18N20j	64,84	8,16	12,6	65,15	8,08	12.58
13	179-180	c8h9n3o4	45,5	4,3	19,9	45,97	4,05	19.89
14	130-131	C14H14N2O3	65,11	5,46	10,85	64,91	5,35	10.72

Sloučenina 15 l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-[4-methylthio)fenyl]močovina

N-isopropylhydroxylaminhydrochlorid (1,35 g, 12,1 mmolu) se rozpustí ve vodě (2 ml) a 20 následně smísil s diethyletherem (25 ml). Potom se do směsi přidal roztok hydroxidu sodného (0,48 g, 12,1 mmol) ve vodě (2 ml). Reakční směs se několik minut míchala a následně se do ní přidal pomocí pipety 4-(methylthio)-fenylisokyanát (2,0 g, 12,1 mmol). Vytvořila se bílá sraženina. Reakční směs se nechala přes noc míchat při pokojové teplotě. Pevná látka, která se izolovala filtrací, se následně rozpustila v horkém ethylacetátu. Ethylacetátový roztok se vysušil 25 na síranu hořečnatém a následně zahustil za vakua. Sraženina se shromáždila a vysušila, čímž se

-11CZ 287034 B6 získalo 1,60 g požadovaného produktu ve formě pevné krystalické látky, jejíž teplota tání byla 150,0 až 150,3 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro CnH₁₆N₂O₂S:

Nalezeno:

%c	%H	%N
54,98	6,71	11,66
54,96	6,53	11,61

Sloučeniny 16 až 30

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 15 a N-isopropylhydroxyaminhydrochloridu, který se uvedl do reakce s isokyanátem obecného vzorce III se připravily sloučeniny obecného vzorce I uvedené v tabulce 3. Teploty tání těchto sloučenin a jejich elementární analýza jsou shrnuty v tabulce 4.

Tabulka 3

Sloučenina číslo	Sloučenina obecného vzorce IΜ = H; R = 1- methylethyl; R H; R' =
16	3-methylthio
17	vodík
18	4-fluoro
19	4-bromo
20	2-fluoro
21	3-methyl
22	3-methoxy
23	4-methoxy
24	2-chloro
25	2-methyl
26	2,6-dimethyl
27	4-butyl
28	2,5-dimethoxy
29	2-methoxy
30	4-nitro

Tabulka 4

Slouč. č.	t-t. (°C)	Elementární analýza
Vzorec	Vypočteno	Nalezeno
	%C	%H	%N	%C	%H	%N
16	125-127	C,iH16N2O2S	54,98	6,71	11.66	55,13	6,68	11,64
17	124 -126	CI0Hi4N2O2	61,84	7,27	14,42	61,56	7,2	14,09
18	134,5 - 134,9	^1θΗΐ3^^2θ2	56,6	6,17	13,2	56,88	6,13	13,21
19	141,2-141,6	CI0HnBrN2O2	43,98	4,8	10,26	43,93	4,72	10,16
20	109,3-111,1	C10H13FN2O2	56,6	6,17	13,2	56,34	6,06	13,07
21	105,0- 106,1	ChH16N2O2	63,44	7,74	13,45	63,34	7,76	13,44
22	121,8 -124,3	c8h9fn2o2	58,91	7,19	12,49	58,58	7,03	12,33
23	141,1 -141,5	ChH16N2O3	58,91	7,19	12,49	56,86	7,24	12,45
24	116,5-119,5	C ] oH 13 CIN2O2	52,52	5,73	12,25	52,69	5,73	12,21
25	119,8	CuH16N2O2	63,44	7,74	13,45	63,05	7,76	13,42
26	154,1- 155,3	C|2HjgN2O2	64,84	8,16	12,6	64,93	8,15	12,55
27	118,1 -118,6	C14H22N2O2	67,17	8,86	11,19	67,2	8,71	11,13
28	153,1 - 153,3	cI2h18n2o4	56,68	7,13	11,02	56,64	7,23	10,94
29	134,5 - 134,7	c„h16n2o3	58,91	7,19	12,49	58,85	7,2	12,3
30	148,2- 149,7	CiqH18N3O4	50,21	5,48	17,56	50,16	5,29	17,37

-12CZ 287034 B6

Sloučenina 31 l-cyklohexyl-l-hydroxy-3-[4-(methylthio)fenyl]močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 1 a N-cyklohexylhydroxyaminhydrochloridu (1,5 g, 10 mmol), který se uvedl do reakce s 4-(methylthio)fenylisokyanátem (1,6 g, 10 mmol), čímž se získalo 0,60 g požadovaného produktu ve formě pevné bílé látky, jejíž teplota tání byla 151 až 153 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro C14H20N2O2S: 59,97 7,19 9,99

Nalezeno: 60,06 7,14 9,95.

Sloučenina 32 l-cyklohexyl-l-hydroxy-3-[3-(methylthio)fenyl]močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 1 a N-cyklohexylhydroxyaminhydrochloridu (1,5 g, 10 mmol), který se uvedl do reakce s 3-(methylthio)fenylisokyanátem (1,6 g, 10 mmol), čímž se získalo 0,76 g požadovaného produktu ve formě pevné bílé látky, jejíž teplota tání byla 147,2 až 147,7 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C14H20N2O2S	59,97	7,19	9,99
Nalezeno:	60,16	6,95	9,96.

Sloučenina 33 a 34

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 1 a hydroxylaminhydrochloridu, který se uvedl do reakce s isokyanátem obecného vzorce III se připravily sloučeniny obecného vzorce I uvedené v tabulce 5. Teploty tání těchto sloučenin a jejich elementární analýza jsou shrnuty v tabulce 6

Tabulka 5

Sloučenina číslo	Sloučenina obecného vzorce IΜ = H; R = Η; n = 1; R = H; R' =
33	3-methoxy
34	3-methylthio

Tabulka 6

Sloučenina číslo	t.t. (°C)	Elementární analýza
Vzorec	Vypočteno		Nalezeno
	%C	%H	%N	%C	%H	%N
33	140-142	C8H10N2O3	52,74	5,53	15,38	52,57	5,41	15,21
34	147-149	CgHioNiCLS	48,47	5,08	14,13	48,66	5,04	13,85

-13CZ 287034 B6

Sloučenina 36

-cyklooktyl-1 -hydroxy-3-fenylmočovina

Část A

Roztok obsahující cyklooktan (12,6 g, 0,1 mol) a hydroxylaminhydrochlorid (14,0 g, 0,2 mol) ve směsi pyridinu (40 ml, 0,5 mol) a ethanolu (50 ml) se míchalo při pokojové teplotě po dobu 15 hodin. Směs se následně zbavila rozpouštědla rotačním odpařováním. Zbytek se rozpustil v diethyletheru (300 ml) a následně se propláchl kyselinou chlorovodíkovou (2 x 100 ml). Vodná vrstva se extrahovala diethyletherem (2 x 150 ml). Etherové extrakty se sloučily, vysušily nad síranem hořečnatým, a následně zahustily, čímž se získal cyklooktanonoxim ve formě bílé pevné látky.

Část B

Do roztoku obsahujícího cyklooktanoxim (9,0 g, 64 mmol) v bezvodé kyselině octové (90 ml) se pozvolna zaváděl kyanoborohydrid sodný (6,0 g, 95 mmol). Reakční směs se míchala při pokojové teplotě po dobu 18 hodin a následně nastavil na pH hodnotu 9 pomalým přidáváním studeného 2N hydroxidu sodného. Výsledná sraženina se shromáždila a následně vysušila, čímž se získal cyklooktylhydroxylamin ve formě bílé pevné látky.

Část C

Do roztoku obsahující cyklooktylhydroxylamin (3,0 g, 21 mmol) v tetrahydrofuranu (75 ml) se pozvolna zaváděl fenylisokyanát (2,3 ml, 21 mmol). Reakční směs se nechala míchat při pokojové teplotě po dobu 40 hodin. Po odpaření rozpouštědla se získalo 5,5 g surového produktu, který se rekrystalizoval ze směsi hexanů a ethylacetátu (4 : 1), čímž se získalo 3,1 g požadovaného produktu ve formě bílých jehliček, jejichž teplota tání byla 138 až 139 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro C15H22N2O2: 68,67 8,45 10,68

Nalezeno: 68,36 8,28 10,64.

Sloučenina 37 l-cyklooktyl-l-hydroxy-3-(4-methoxyfenyl)močovina

Do roztoku obsahujícího hydroxylamin (sloučenina 36 část B, 2,0 g, 14 mmol) v tetrahydrofuranu (50 ml) se pozvolna zaváděl 4—methoxyfenylisokyanát (2,0 ml, 15 mmol). Reakční směs se nechala míchat při pokojové teplotě po dobu 20 hodin. Bílá sraženina, která se izolovala filtrací, se následně promyla studeným hexanem. Druhý produkt se izoloval z filtrátu. Pevné látky se sloučily a po vysušení poskytly 3,2 g požadovaného produktu ve formě bílé pevné látky, jejíž teplota tání byla 166 až 167 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C16H24N2O3:	65,73	8,27	9,58
Nalezeno:	65,31	7,98	9,47.

-14CZ 287034 B6

Sloučenina 38 l-cyklooktyl-l-hydroxy-3-(4-nitrofenyl)močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 36, část C, a cyklooktylhydroxylaminu (sloučenina 36, část B, 1,0 g, 7,0 mmol), který se uvedl do reakce s 4-nitrofenylisokyanátem (1,2 g, 7,3 mmol), čímž se získalo 1,1 g požadovaného produktu ve formě nažloutlé pevné látky, jejíž teplota tání byla 143 až 144 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C15H21N3O4:	58,62	6,89	13,67
Nalezeno:	58,5	7,56	13,32.

Sloučenina 39

1-(1 -ethy Ipropy 1)-1 -hydroxy-3-[4-(methylthio)feny 1] močovina

Část A

Roztok hydroxidu sodného (40 ml, 1 mol) ve vodě (650 ml) se ochladil na 25 °C a následně se přidával v průběhu 3 minut do roztoku 3-pentanu (43 g, 0,5 mol) a hydroxylaminhydrochloridu (69 g, 1 mol) v ethanolu (250 ml). Teplota se vzrostla na 37 °C a po několika minutách se separovala vrstva hnědého oleje. Reakční směs se ohřívala na parní lázni s případným rozviřováním až do dosažení čirého bezbarvého roztoku. Směs se ohřívala další hodinu, načež se za sníženého tlaku odstranil ethanol a reakční směs se extrahovala pomocí ethylacetátu (2 x 250 ml). Extrakty se sloučily, vysušily nad síranem hořečnatým a zahustily. Získaný zbytek se destiloval a poskytl 7,5 g 3-pentanonoximu s teplotou tání 165 až 168 °C.

ČástB

Do roztoku 3-pentanonoximu (10,0 g, 0,1 mol) vbezvodé kyselině octové se pozvolna zaváděl v průběhu jedné hodiny kyanoborohydrid sodný (9,4 g, 0,15 mol). Reakční směs se udržovala při pokojové teplotě po dobu 18 hodin, prudce ochladila v ledové lázni, pozvolným přidáváním 4N hydroxidu sodného nastala na pH hodnotu 9 a následně extrahoval ethylacetátem (6 x 150 ml). Jednotlivé extrakty se sloučily, vysušily nad síranem hořečnatým a následně zahustily, čímž se získalo 10,1 gN-(l-ethylpropyl)hydroxylaminu ve formě nažloutlého oleje.

Část C

4-(Methylthio)fenylisokyanát (5,6 g, 3,4 mmol) se po kapkách v průběhu 10 minut přidával do roztoku N-(l-ethy Ipropy I)hydroxy laminu (3,5 g, 34 mmol) v diethyletheru (přibližně 50 ml). Reakční směs se míchala při pokojové teplotě po dobu jedné hodiny. Sraženina, která se izolovala filtrací, se vysušila a poskytla tak 2,9 g požadovaného produktu ve formě pevné látky s teplotou tání 140,4 až 141,0 °C.

Elementární analýza: %C %H

Vypočteno pro C13H20N2O2S: 58,18 7,51

Nalezeno. 58,12 7,27 %N

10,44

10,4.

-15CZ 287034 B6

Sloučenina 40 l-(l-ethylpropyl)-l-hydroxy-3-(4-nitrofenyl)močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 39, část C, a N-(l-ethylpropyl)hydroxylaminu (sloučenina 39, část B, 1,15 g, 11,3 mmol), který se uvedl do reakce s 4-nitroenylisokyanátem (1,85 g, 11,3 mmol), se získalo 1,95 g požadovaného produktu ve formě pevné látky, jejíž teplota tání je 169 až 170 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C12H17N3O4:	53,92	6,41	15,72
Nalezeno:	53,85	6,36	15,55

Sloučenina 41

3-(4-bromofeny 1)-1 -(1 -ethy lpropy 1)-1 -hydroxymočovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 39, část C, a N-(l-ethylpropyl)hydroxylaminu (sloučenina 39, část B, 2,6 g, 25 mmol), který se uvedl do reakce s 4-bromofenylisokyanátem (5 g, 25 mmol), se získalo 2,1 g požadovaného produktu ve formě pevné látky, jejíž teplota tání byla 129 až 131 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C^H^NjCh:	47,86	5,69	9,3
Nalezeno:	47,79	5,54	9,25.

Sloučenina 42

-(1 -ethy lpropy 1)-1 -hydroxy-3-feny lmočovina

Část A

Baňka pod dusíkovou atmosférou se postupně naplnila O-benzylhydroxylaminhydrochloridem (37,5 g, 0,23 mol), vodou (40 ml) a diethyletherem (400 ml). Výsledná směs se ochladila na 0 °C a do takto ochlazené směsi se po kapkách přidal roztok hydroxidu sodného (9,4 g, 0,23 mol) ve vodě (40 ml). Po půl hodině se přidal fenylisokyanát (25,5 g, 0,23 mol). Vytvořila se bílá sraženina. Reakce se nechala probíhat dvě hodiny při pokojové teplotě. Sraženina, která se izolovala filtrací, se promyla vodou a vysušila, čímž se získalo 46,2 g l-benzyloxy-3fenylmočoviny ve formě bílé krystalické látky.

Část B

Baňka se pod dusíkovou atmosférou naplnila hydridem sodným (1,15 g, 60% NaH v minerálním oleji, 29 mmolů). Reziduální olej se vymyl zhydridu sodného pomocí několika dílů hexanů. Potom se do baňky přidal N,N-dimethylformamid (50 ml) a následně po kapkách roztok 1benzyloxy-3-fenylmočoviny (7,0 g, 29 mmol) v N,N-dimethylformamidu (20 ml). Bezprostředně po přidání se začal vyvíjet vodík. Reakční směs se míchala po dobu půl hodiny a následně se opět po kapkách přidal 3-bromapentan (4,0 ml, 32 mmol). Reakční směs se ohřála na 60 °C a při této teplotě se udržovala 15 hodin, načež se opět ochladila na pokojovou teplotu. Reakční směs se propláchla vodou a následně extrahovala několika díly diethyletheru. Etherové extrakty se sloučily, promyly vodou a solankou, vysušily nad síranem hořečnatým a následně zahustily, čímž se získalo 8,7 g surového produktu ve formě nažloutlé pevné látky. Takto získaný

-16CZ 287034 B6 surový produkt se čistil mžikovou chromatografií (silikagel; 9 : 1 hexany : ethylacetát), čímž se získala 5,7 g l-benzyloxy-l-(l-ethylpropyl)-3-fenylmočoviny ve formě bílé pevné látky s teplotou tání 45,0° až 45,6 °C.

Část C

Do roztoku l-benzyloxy-l-(l-ethylpropyl)-3-fenylmočoviny (4,9 g, 15,7 mmol) v ethanolu (90 ml) se přidal postupně ammoniumformiát (3,5 g, 55,5 mmol) a 10% paládia na uhlíku (1,7 g). Výsledná černá suspenze se míchala při pokojové teplotě 2 hodiny. Reakční směs se vakuově filtrovala přes vrstvu filtračního činidla Celíte™. Izolováním sraženiny z filtrátu se získalo 3,6 g surového produktu ve formě bílého prášku. Tento materiál se rekrystalizoval ze směsi hexanů a ethylacetátu, čímž se získalo 2,7 g požadovaného produktu ve formě velmi jemných jehliček s teplotou tání 129,5 až 129,8 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C]2H18N2O2:	64,84	8,16	12,6
Nalezeno:	64,79	8,41	12,38.

Sloučeniny 43 až 53

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část B, a l-benzyloxy-3-fenylmočoviny, která se uvedla do reakce se sloučeninami obecného vzorce RBr, se získaly meziprodukty obecného vzorce VI, ve kterém n = 0. Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část C a meziproduktů obecného vzorce VI, které se debenzylovaly, se získaly sloučeniny obecného vzorce I, které jsou uvedeny v tabulce 7. Teploty tání a elementární analýzy těchto sloučenin jsou shrnuty v následující tabulce 8.

Tabulka 7

Sloučenina číslo	Sloučenina obecného vzorce I M = H; n = O; R = H; R =
43	ethyl
44	3-methylbutyl
45	2-ethoxyethyl
46	cyklopentyl
47	2-ethylhexyl
48	3,3-dimethylbutyl
49	3,5,5-trimethy lhexy 1
50	5-karbethoxypentyl
51	cykloheptyl
52	oktal
53	dodecyl

-17CZ 287034 B6

Tabulka 8

Slouč. č.	t.t. (°C)	Elementární analýza
Vzorec	Vypočteno	Nalezeno
	%C	%H	%N	%C	%H	%N
43	95,6 - 96,0	C9HI2N,O5	59,99	6,71	15,54	59,85	6,63	15,68
44	106,2 - 106,5	c12h18n2o2	64,84	8,16	12,6	64,82	8,25	12,6
45	54,9 - 55,4	CmH16N2O3	58,91	7,19	12,49	58,86	7,27	12,47
46	140-141		65,43	7,32	12.72	65,74	7,24	12,63
47	97,2 -98,1	C]5H24N2O2	68,15	9,15	10,6	68,18	9,28	10,55
48	101.6-101,9	C] 3H20N2O2	66,07	8,53	11,85	66,14	8,7	11,87
49	68,4 - 69,2	C16H26N2O2	69,03	9,41	10.06	68,88	9,51	10,05
50	69,6 - 70,5	£^]5Η22^2θ4	61,21	7,53	9,52	61,16	7,43	9,52
51	141 - 142	C14H20N2O2	67,72	8,12	11,28	67,64	7,84	11,22
52	93,4 - 94,3	Ci5H24N-»O2	68,15	9,15	10,6	68,17	8,89	10,6
53	103,7 - 104,8	C19H32N2O2	72,21	10,6	8,74	71,38	9,85	8,78

Sloučenina 54

-hydroxy-1 -(2-methylpropyl)-3-fenylmočovina

Část A

O-benzylhydroxylaminhydrochlorid (25 g, 0,16 mol) a suspenze uhličitanu sodného (18 g, 0,17 mol) ve vodě (150 ml) se přidalo do roztoku di-/erc.-butylkarbonátu (37 g, 0,17 mol) vdioxanu (150 ml). Výsledná bílá suspenze se nechala míchat při pokojové teplotě přes noc, načež se částečně odpařila pod vakuem při teplotě 50 °C, čímž se odstranila většina dioxanu. Zbytek se okyselil na pH 4 přidáním kyseliny citrónové a následně se dvakrát extrahoval diethyletherem. Získané extrakty se sloučily a zahustily pod vakuem, čímž se získalo 36 g tercbutyl N-benzyloxykarbamátu ve formě žlutého oleje.

ČástB

Hydrid sodný (0,97 g, 80% v minerálním oleji, 32 mmol) se přidalo do roztoku terc.-butyl-Nbenzyloxykarbamátu (6,53 g, 29 mmol) v N,N-dimethylformamidu (45 ml). Po dobu 20 minut se směs, ve které se vyvíjel plyn, nechala míchat. Potom se do směsi přidal isobutylbromid (3,5 ml, 32 mmol), a reakční směs se ohřála na 70 °C a při této teplotě se udržovala další 1,5 hodinu. Potom se reakční směs propláchla vodou (přibližně 50 ml) a následně dvakrát extrahovala diethyletherem. Získané extrakty se sloučily, promyly vodou (5 malých dílů). Vysušily nad síranem hořečnatým a následně zahustily pod vakuem, čímž se získalo 7,63 g terc.-butyl-Nbenzyloxy-N-(2-methylpropyl)karbamátu ve formě nahnědlého oleje.

Část C

Do jedné části roztoku fórc.-butyl N-benzyloxy-N-(2-methylpropyl)karbamátu (7,6 g, 27 mmol) v methylenchloridu (21 ml) se přidala kyselina trifluoroctová (21 ml, 270 mmol). Proběhla spontánní refluxe. Reakční směs se míchala bez vnějšího ohřevu po dobu 20 minut a následně se zahustila pod vakuem při teplotě 45 °C. Do zbytku se přidal nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný. Potom se přidalo množství hydrogenuhličitanu sodného, které bylo potřebné pro nastavení pH hodnoty reakční směsi na hodnotu 9. Směs se dvakrát extrahovala methylchloridem. Extrakty se sloučily, vysušily nad síranem hořečnatým a následně zahustily pod vakuem, čímž se získalo 4,9 g N-benzyloxy-N-(2-methylpropyl)aminu ve formě oleje.

-18CZ 287034 B6

Část D

Do roztoku N-benzyloxy-N-(2-methylpropyl)aminu (4,8 g, 27 mmol) v methylchloridu (30 ml) se přidal pipetou fenylisokyanát (3,2 g, 27 mmol). Reakční směs se nechala míchat při pokojové teplotě po dobu 3 dnů. Po odstranění rozpouštědla se zbytek čistil pomocí sloupcové chromatografie (silikagel, 1 : 9 ethylacetát : hexany), čímž se získalo 6,2 g l-benzyloxy-l-(2methylpropyl)-3-fenylmočoviny ve formě bílé krystalické pevné látky s teplotou tání 85 až 87 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C18H22N2O2:	72,46	7,43	9,39
Nalezeno:	72,53	7,51	9,44.

ČástE

Do roztoku l-benzyloxy-l-(2-methylpropyl)-3-fenylmočoviny (6,0 g, 20 mmol) v ethanolu (85 ml) se přidal ammoniumformiát (6,9 g, 110 mmol). Po dvaceti minutách se do reakční směsi přidalo 10% paládium na uhlíku (2 g) a směs se nechala míchat dvě hodiny při pokojové teplotě. Po uplynutí této doby se směs zfíltrovala přes vrstvu filtračního činidla Celite^Tm. Filtrát po odpaření poskytl 5,4 g bílé pevné látky. Tento materiál se rekrystalizoval ze směsi ethylacetátu a hexanů, čímž se získalo 2,35 g požadovaného produktu ve formě voskové bílé pevné látky

s teplotou tání 119,3 až 122,0	°C.
Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro CnHi6N2O2:	63,44	7,74	13,45
Nalezeno:	63,39	7,78	13,43

Sloučeniny 55 až 56

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 54, část B, a řerc.-butyl Nbenzyloxykarbamátu, který se uvedl do reakce se sloučeninami obecného vzorce RBr, se získaly meziprodukty obecného vzorce VII. Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 54, část C, a meziprodukt obecného vzorce VII, které se zpracovaly pomocí kyseliny trifluoroctové, se získaly substituované O-benzylhydroxylaminy obecného vzorce VIII. Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 54, část D, a fenylisokyanátu, který se uvedl do reakce se substituovanými O-benzylhydroxylaminy obecného vzorce VIII, se získají substituované močoviny obecného vzorce VI (n = 0). Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 54, část E, a meziproduktů obecného vzorce VI, které se debenzylovaly, se získaly sloučeniny obecného vzorce I znázorněné v tabulce 9. Teploty tání a elementární analýzy těchto sloučenin jsou uvedeny v tabulce 10.

Tabulka 9

Sloučenina číslo	Sloučenina obecného vzorce IΜ = Η; n = 0; R = H; R =
55	propyl
56	pentyl

-19CZ 287034 B6

Tabulka 10

Slouč. č.	t.t. (°C)	Elementární analýza
Vzorec	Vypočteno	Nalezeno
	%C	%H	%N	%C	%H	%N
55	91,6-94,5	C10H14N2O5	61,84	7,27	14,42	61,74	7,19	14,3
56	98,4 - 98,7	CI2HI8N2O2	64,84	8,16	12,6	64,94	8,06	12,61

Sloučenina 57

3-(4-Butylfenyl)-l-hydroxy-l-pentylmočovina

Část A

Do suspenze O-benzylhydroxyaminhydrochloridu (0,82 g, 5,1 mmolů) ve vodě (1 ml) se přidal diethylether (10 ml). Potom se do směsi přidal roztok hydroxidu sodného (0,23 g, 5,8 mmolů) ve vodě (1 ml) a získaná směs se několik minut míchala. Po odstranění vodné vrstvy pomocí pipety se vodná vrstva extrahovala diethyletherem (3 ml). Etherový extrakt se přidal do reakční baňky, do které se následně pomocí pipety přidal v jediné dávce rovněž 4-butylfenylisokyanát (0,90 g, 5,1 molů). Proběhla mírná refluxe. Reakční směs se potom, co se nechala míchat při pokojové teplotě 15 minut, vyčistila pomocí mžikové chromatografie (silikagel, 1 : 4 ethylacetát: hexany), čímž se získalo 1,25 g l-benzyloxy-3-(4-butylfenyl)močoviny ve formě načechrané bílé pevné látky s teplotou tání 90,6 až 91,4 °C.

ČástB

Do roztoku l-benzyloxy-3-(4-butylfenyl)močoviny (1,25 g, 4,2 mmol) v N,N-dimethylformamidu (5 ml) se přidal hydrid sodný (0,14 g 80% v minerálním oleji, 4,7 mmol). Reakční směs se prudce ohřála na parní lázni pod dusíkovou atmosférou a potom se nechala vychladnout na pokojovou teplotou. Do takto ochlazené reakční směsi se přidal 1-bromopentan (0,63 g, 4,2 mmol). Reakční směs se ohřála na 90 °C a při této teplotě se udržovala přes noc. Potom se opět ochladila na pokojovou teplotu, naředila vodou a extrahovala diethyletherem. Organická vrstva se promyla vodou, vysušila nad síranem hořečnatým a zahustila, čímž se získalo 1,47 g surového produktu ve formě hnědého oleje. Tento materiál se vyčistil mžikovou chromatografií (silikagel, 119 ethylacetáihexany), čímž se získalo 0,96 g l-benzyloxy-3-(4-butylpropyI)-l-pentylmočoviny ve formě oleje.

ČástC

Do roztoku l-benzyloxy-3-(4-butylpropyl)-l-pentylmočoviny (0,89 g, 2,4 mmoly) v ethanolu (10 ml) se přidal ammoniumformiát (1,0 g, 16 mmol). Po dvou minutách se do směsi přidalo 10% paládium na uhlíku (300 mg) a reakční směs se nechala jednu hodinu míchat při pokojové teplotě. Z reakční směsi se přefiltrováním odstranil katalyzátor a filtrát se zahustil pod vakuem při 50 °C. Zbytek se čistil mžikovou chromatografií (silikagel, 1: 9 ethylacetát: hexany), čímž se získalo 0,59 požadovaného produktu ve formě bělavé pevné látky s teplotou tání 69,3 až 70,2 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro Ci6H26N2O2:	69,03	9,41	10,06;
Nalezeno:	69,43	9,10	9,93.

-20CZ 287034 B6

Sloučenina 58 l-hydroxy-l-(2-methylpropyl)-3-[3-(methylthiol)fenyl]močovina

Část A

Do roztoku terc.-butyl-N-benzyloxy-N-(2-methylpropyl)karbamátu (sloučenina 54, část B, 6,27 g, 22,4 mmol) v ethanolu (100 ml) se přidal ammoniuformiát (7,9 g, 125 mmol) a 10% paládium na uhlíku (2 g). Reakční směs se míchala při pokojové teplotě 5 hodin a po uplynutí této doby se zahustila pod vakuem při 50 °C. Zbytek se izoloval v methylenchloridu, promyl vodou, vysušil pomocí síranu hořečnatého a následně zahustil, čímž se získalo 4,2 g terc.-butyl N-hydroxy-N-(2-methylpropyl)karbamátu ve formě žlutého oleje.

Část B

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 54, část C, a terc.-butyl-N-(2methylpropyl)karbamátu, který se uvedl do reakce s kyselinou trifluoroctovou (8,5 ml, 110 mmol), se získaly 2,0 g N-(2-methylpropyl)hydroxylaminu ve formě oleje.

Část C

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 54, část D, a 3-(methylthio)fenylisokyanátu (3,6 g, 22 mmol), který se uvedl do reakce sN-(2-methylpropyl)hydroxylaminem (2,0 g, 22 mmol), se získalo 1,48 g požadovaného produktu ve formě bílé látky s teplotou tání 122,8 až 124,9 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro Ci2Hi₈N₂O₂S: 56,67 7,13 11,01;

Nalezeno: 56,64 6,88 10,77.

Sloučenina 59

-hydroxy-1 -methy 1—3—[3 -(methy lsulfony l)fe ny 1] močovina

Část A

Do roztoku 7erc.-butyl N-benzylkarbamátu (Sloučenina 54, část A, 3 g, 13 mmol) vN,Ndimethylformamidu (25 ml) se přidal hydroxid sodný (0,48 g 80% v minerálním oleji, 16 mmol). Reakční směs se míchala 20 minut a po jejich uplynutí se směs ochladila v ledové lázni a současně se do ní po kapkách přidal jodomethan (1,1 ml, 18 mmol). Výsledná suspenze se míchala přes noc při pokojové teplotě pod dusíkovou atmosférou. Reakční směs se prudce ochladila vodou (50 ml) a následně extrahovala diethyletherem (150 ml). Organická vrstva se promyla vodou (5 x 50 ml), vysušila nad síranem hořečnatým a následně zahustila, čímž se získalo 3,1 g /erc.-butyl-N-benzyloxy-N-methylkarbamátu ve formě žlutého oleje.

ČástB

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 54, část C, a /erc.-butyl N-benzyloxy-Nmethylkarbamátu, který se uvedl do reakce s kyselinou trifluoroctovou (10 ml, 130 mmolů), se získalo 1,58 g N-benzyloxy-N-methylaminu ve formě žlutého oleje.

-21CZ 287034 B6

ČástC

Do roztoku N-benzyloxy-N-methylaminu (1,55 g, 11,3 mmol) v tetrahydrofuranu (25 ml) se po kapkách přidal 3-(methylthio)fenylisokyanát (2,0 g, 12 mmol). Reakční směs se nechala míchat při pokojové teplotě dvě hodiny a následně se zahustila pod vakuem. Zbytek se čistil mžikovou chromatografii (Silikagel, ethylacetát: hexany), čímž se získalo 3,26 g 1-benzyloxy-l-methyl3-[3-(methylthio)fenyl]močoviny ve formě oleje.

Část D

Roztok l-benzyloxy-l-methyl-3-[3-(methylthio)fenyl]močoviny (4,2 g, 14 mmolů) v methylenchloridu (120 ml). Reakční směs se nechala přes noc míchat při pokojové teplotě a následně se do ní přidala v průběhu pěti minut za intenzivního míchání voda (50 ml) a 10% hydroxidu sodného (50 ml). Potom se oddělila organická vrstva, která po vysušení nad síranem hořečnatým a zahuštěním poskytla 4,9 g žlutého oleje. Získaný olej se vyčistil mžikovou chromatografii (silikagel, ethylacetát : hexany) a poskytl 4 g l-benzyoxy-l-methyl-3-[3(methylsulfonyl)fenyljmočoviny ve formě bělavé pevné látky s teplotou tání 110,2 až 110,8 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro Ci₆H_IgN₂O₄S: Nalezeno:

%c	%H	%N
57,47	5,43	8,38;
57,27	5,46	8,3°.

ČástE

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 54, část E, a l-benzyloxy-l-methyl-3-[3(methylsulfonyl)fenyljmočoviny (3,8 g, 11,4 mmol), která se debenzylovala, se získal 1 g požadovaného produktu ve formě bílé krystalické pevné látky s teplotou tání 159,7 a 160,0 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro C9H_í2N₂O₄S: 44,26 4,95 11,47;

Nalezeno: 44,68 5,05 11,48.

Sloučenina 60

-Hydroxy-1 -(methylethyl)-3-[3-(methylsulfonyl)fenyl]močovina

Kyselina peroctové (0,48 g, 32 hm.%, 2 mmol) se pomocí pipety přidala do roztoku 1-Hydroxy(l-methylethyl)-3-[3-(methylthio)fenyl]močoviny (sloučenina 16, 0.48 g, 2 mmol) ve směsi methylenchloridu (5 ml) a methanolu (0,5 ml). Byla pozorována mírná refluxe. Reakční směs se nechala 1,5 hodiny míchat bez vnějšího ohřívání a následně se z ní pod vakuem při teplotě 50 °C odstranily těkavé složky. Chromatografie na tenké vrstvě (silikagel, ethylacetát) zbytku ukázal dvě složky. Zbytkem se naplnil sloupec silikagelu a rychleji se pohybující složka se eluovala za použité eluční soustavy tvořené ethylacetátem a cyklohexanem v poměru 50 : 50, čímž se získalo 60 mg požadovaného produktu ve formě pevné látky s teplotou tání 168,2 až 169,2 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro CnHi6N₂O₄S:

Nalezeno:

%C %H %N

48,52 5,92 10,29;

49,16 5,89 10,1.

-22CZ 287034 B6

Sloučenina 61 l-Hydroxy-(l-methylethyl)-3-[3-(methylsulfinyl)fenyl]močovina

Pomaleji se pohybující složka v sloupci silikagelu při přípravě sloučeniny 60 se eluovala ethylacetátem a poskytla 200 mg požadované sloučeniny ve formě pevné látky s teplotou tání 134,9 až 135,8 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro CnHiéNjChS: Nalezeno:

%c	%H	%N
51,55	6,29	10,93;
51,7	6,32	10,68.

Sloučenina 62 l-Hydroxy-(l-methylethyl)-3-[4-(methylsulfonyl)fenyl]močovina

Kyselina peroctová (4,3 g 30 hm. %, 17 mmol) se pomocí pipety přidala do roztoku 1-Hydroxy(l-methylethyl)-3-[4-(methylthio)fenyl]močoviny (sloučenina 15, 3,5 g, 15 mmol) ve směsi methylenchloridu (50 ml) a methanolu (7 ml). Byla pozorována mírná refluxe. Reakční směs se nechala 30 minut míchat bez vnějšího ohřívání. Chromatografie na tenké vrstvě (silikagel, ethylacetát) ukázal, že výchozí materiál byl zkonzumován a směs obsahuje nové dvě složky. Reakční směs se zahustila pod vakuem při 65 °C a poskytla nažloutlou pevnou látku, kterou se naplnil sloupec silikagelu a rychleji se pohybující složka se eluovala pomocí eluční soustavy tvořené ethylacetátem a cyklohexanem v poměru 50 : 50, čímž se získalo 1,40 g požadovaného produktu ve formě načechrané bílé pevné látky s teplotou tání 163,3 až 163,8 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro Ci 1H16N2O4S: 48,52 5,92 10,29;

Nalezeno: 48,62 5,83 10,22.

Sloučenina 63 l-Hydroxy-(l-methylethyl)-3-[4-(methylsulfonyl)fenyl]močovina

Pomaleji se pohybující složka v sloupci silikagelu při přípravě sloučeniny 62 se eluovala ethylacetátem a poskytla 1,18 g požadované sloučeniny ve formě načechrané bílé pevné látky s teplotou tání 135,6 až 136,0 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro C11H16N2O3S: Nalezeno:

%C	%H	%N
51,55	6,29	10,93;
517	6,17	10,95.

Sloučenina 64 l-hydroxy-l-methyl-3-[4-(methylsulfinyl)fenyl]močovina

Do ochlazeného (vodní lázeň s kousky ledu) roztok l-hydroxy-l-methyl-3-[4~ (methylthio)fenyl]močoviny (sloučeniny 1, 1,4 g, 6,6 mmol) ve směsi methylenchloridu (25 ml) a methanolu (10 ml) se po kapkách přidala kyselina peroctová (1,7 g 30%, 6,6 mmol). Roztok se míchal 15 minut za stálého chlazení. Po odstranění rozpouštědla pod sníženým tlakem při 50 °C

-23CZ 287034 B6 se získala bílá pevná látka, která se rozpustila vhodné směsi ethylacetátu a ethanolu, přefiltrovala, čímž se odstranily částice a následně naředila etherem, čímž poskytla 0,8 g požadovaného produktu ve formě bílé krystalické látky s teplotou tání 197,8 až 198,2 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro C₉Hi₂N₂O₃S: 47,36 5,3 12,27;

Nalezeno: 47,27 4,97 12,26.

Sloučenina 65 l-hydroxy-l-methyl-3-[4-(methylsulfonyl)fenyl]močovina

Do roztoku l-hydroxy-l-methyl-3-[4-(methylthio)fenyl]močoviny (sloučeniny 1, 1,4 g, 6,6 mmol) ve směsi methylenchloridu (25 ml) a methanolu (10 ml) se po kapkách přidá kyselina peroctová (3,4 g 30%, 14 mmol). Roztok se jednu hodinu míchá a následně se z něj za sníženého tlaku odstraní rozpouštědlo. Zbytek se dvakrát rekrystalizuje ze směsi ethylacetátu, ethanolu a etheru, čímž se získalo 0,39 g požadovaného produktu ve formě bílé krystalické látky s teplotou tání 197,6 až 198,2 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C9Hi2N2O4S:	44,26	4,95	H,47;
Nalezeno:	44,92	5,0	11,57.

Sloučenina 66 l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-(3,4,5-trimethoxyfenyl)močovina

Roztok N-isoropylhydroxylaminhydrochloridu (1,2 g, 11 mmolů) ve vodě (5 ml) se smísil s diethyletherem (35 ml) a tato směs se následně ochladila v ledové lázni. V průběhu deseti minut se do tohoto roztoku přidal roztok hydroxidu sodného (0,5 g, 12,5 mmol) ve vodě (7 ml). Reakční směs se 10 minut míchala a následně se do ní přidal 3,4,5-trimethoxyfenylisokyanát (2,1 g, 10 mmol) ve formě pevné látky. Reakční směs se míchala při pokojové teplotě dalších 18 hodin a následně se z ní filtrací odstranila bílá sraženina. Filtrát se zahustil pod vakuem a poskytl tak 2,1 g požadovaného produktu ve formě bílé pevné látky. Analytický vzorek se připravil rekrystalizací ze směsi hexanů a etylacetátu. Výsledný produkt měl teplotu tání 140,0 až 141,0 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro Ci₃H₂oN₂0₅:

Nalezeno:

%C %H %N

54,92 7,09 9,85;

55,12 7,06 9,77.

Sloučenina 67 l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-(2,4,6-trimethoxyfenyl)močovina

Roztok N-isopropylhydroxylaminhydrochloridu (1,85 g, 16,5 mmol) ve vodě (5 ml) se smísil s diethyletherem (50 ml) a tato směs se následně ochladila v ledové lázni. V průběhu deseti minut se do tohoto roztoku přidal roztok hydroxidu sodného (0,72 g, 18 mmol) ve vodě (10 ml). Reakční směs se 10 minut míchala a následně se do ní přidal 2,4,5-trimethoxyfenylisokyanát (2,42 g, 15 mmol) ve formě pevné látky. Reakční směs se míchala při pokojové teplotě dalších

-24CZ 287034 B6 hodin a následně se zní filtrací odstranila bílá sraženina. Filtrát se zahustil po vakuem a poskytl tak 2,4 g požadovaného produktu ve formě bílé pevné látky. Analytický vzorek se připravil rekrystalizací ze směsi hexanů a etylacetátu. Výsledný produkt měl teplotu tání 176,2 až 176,8 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro Ci₃H₂oN₂0₂: Nalezeno:

%C %H %N

66,07 8,53 11,85;

65,85 8,35 11,68;

Sloučenina 68

-hydroxy-1 -(1 -methy lbutyl)-3-feny lmočovina

Část A

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část B, a 2-bromopentanu (2,7 ml, 21,7 mmol), který se uvedl do reakce s l-benzyloxy-3-fenylmočovinou (4,9 g, 20,1 mmol), se získalo 4,26 g l-benzyloxy-l-(l-methylbutyl)-3-fenylmočoviny ve formě žlutého oleje.

Část B

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část C, a l-benzyloxy-l-(l-methylbutyl}3-fenylmočoviny (3,89 g, 43,6 mmol), která se debenzylovala, se získaly 2,3 g požadovaného produktu ve formě bílých nudliček s teplotou tání 51,4 až 52,3 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro Ci2HigN₂O₂: Nalezeno:

%C %H %N

64,84 8,16 12,6;

64,62 8,1 12,61.

Sloučenina 69

-hydroxy-1 -(1 -methy lpropy l)-3-feny lmočov ina

Část A

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část B, a 2-bromobutanu (2,37 ml, 21,7 mmol, který se uvedl do reakce s l-benzyloxy-3-fenylmočovinou (4,87 g, 20,1 mmol), se získaly 2,2 g l-benzyloxy-l-(l-methylpropyl)-3-fenylmočoviny.

ČástB

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část C, a l-benzyloxy-l-(lmethylpropyl)-3-fenylmočoviny (2 g, 6,7 mmol), která se debenzylovala, se získalo přibližně 0,7 g požadovaného produktu ve formě bílé krystalické látky s teplotou tání 111 až 112 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro CnHi6N2O2	63,44	7,74	13,45;
Nalezeno.	62,89	7,71	13,24.

-25CZ 287034 B6

Sloučenina 70 l-hydroxy-l-(l-propyl-3-fenyl)močovina

Část A

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část B, a 4-bromheptanu (5,84 ml, 32,6 mmol), kteiý se uvedl do reakce s l-benzyloxy-3-fenylmočovinou (7,3 g, 30,2 mmol), se získaly přibližně 4 g l-benzyloxy-l-(l-propylbutyl)-3-fenylmočoviny.

Část B

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část C, a l-benzyloxy-l-(l-propylbutyl)3-fenylmočoviny (3,9 g, 11,5 mmol), která se debenzylovala, se získaly 1,8 g požadovaného produktu ve formě bílé krystalické látky s teplotou tání 138,5 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro C14H22N2O2: 67,17 8,86 11,19;

Nalezeno: 67,21 8,86 11,16.

Sloučenina 71

-hydroxy-1 -(1 -ethy lbuty l)-3-feny lmočovina

Část A

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část B, a 3-bromohexanu (4,59 ml, 32,6 mmol), který se uvedl do reakce s l-benzyloxy-3-fenylmočovinou (7,3 g, 30,2 mmol), se získalo 3,4 g l-benzyloxy-l-(l-ethylbutyl}-3-fenylmočoviny.

Část B

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 42, část C, a l-benzyloxy-l-(l-ethylbutyl)-3fenylmočoviny (3,15 g, 9,65 mmol), která se debenzylovala, se získalo přibližně 1,6 g požadovaného produktu ve formě bílého prášku s teplotou tání 117,8 až 118,4 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro C13H20N2O2: 63,65 8,63 11,42;

Nalezeno:

63,34 8,12 11,37.

Sloučenina 72 l-hydroxy-l(l-ethylpropyl)-3-(4-fenoxyfenyl)močovina

Do roztoku N-(l-ethylpropyl)hydroxylaminu (1,13 g, 11 mmol) sloučenina 39, část B) v tetrahydrofuranu (30 ml) se zavedl 4-fenoxyfenylisokyanát (2,1 g, 10 mmol) a tato reakční směs se udržovala přes noc při pokojové teplotě. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu se získaly 3,2 g, surového produktu ve formě bílé látky. Rekrystalizací ze směsi hexanů a ethylacetátu se získalo 1,6 g požadovaného produktu ve formě bílé pevné látky' s teplotou tání 124 až 125 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro C18H22N2O3: 68,77 7,05 8,91;

-26CZ 287034 B6

Nalezeno:

68,44 7,09 8,82.

Sloučenina 73

-hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-(3,5-bis(trifluoromethyl)fenyl)močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 72 a 3,5-bis(trifluoromethyl)fenylisokyanátu (1,3 g, 5,1 mmol), který se uvedl v reakci sN-(l-ethylpropyl)hydroxylaminem (0,58 g,

5,6 mmol), čímž se získalo 160 mg požadovaného produktu ve formě bílé krystalické látky s teplotou tání 115 až 116 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro Ci4Hi6F₆N₂O2 46,93 4,5 7,82;

Nalezeno: 46,8 4,37 7,89.

Sloučenina 74 l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-methyl-3-fenylmočovina

Část A

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 54, část B, a 3-bromopentanu (15,0 ml, 121 mmol), který se uvedl v reakci s řerc.-butyl N-benzyloxykarbamátem (25,1 g, 112 mmol), se získal tezr.-butyl N-benzyloxy-N-(l-ethylpropylkarbamát.

Část B

Do ochlazeného (0 °C) roztoku terč.-butyl N-benzyloxy-N-(l-ethylpropyl)karbamátu (21,6 g,

73,6 mmol) v methylenchloridu (300 ml) se přidala kyselina trifluorooctová (42 ml, 544 mmol). Reakční směs se míchala 18 hodin při pokojové teplotě a následně se pod vakuem zahustila. Do zbytku se přidal nasycený vodný hydrogenuhličitan sodný (100 ml) a následně pevný uhličitan sodný v množství dostatečném pro nastavení pH hodnoty reakční směsi 9. Reakční směs se extrahovala diethyletherem (4 x 50 ml). Extrakty se sloučily, vysušily nad síranem sodným a následně zahustily tak, že poskytly 10,9 g N-benzyloxy-N-( l-ethylpropyl)aminu ve formě oleje.

Část C

Zkumavka se za pomoci míchací tyčinky naplnila N-benzyloxy-N-(l-ethylpropyl)aminem (2,0 g, 10,3 mmol), tetrahydrofuranem (5 ml), triethylaminem (4,31 ml), N-methyl-Nfenylkarbamylchloridem (1,75 g, 10,3 mmol) a 4-dimethylaminopyridinem (1 mg). Zkumavka se propláchla dusíkem, uzavřela a ohřívala na teplotu 130 °C. Po uplynutí 48 hodin se reakční směs ochladila na pokojovou teplotu a zahustila pod vakuem. Zbytek se vyčistil pomocí chromatografie (silikagel, 9:1 hexany.-ethylacetát), čímž se získaly 2,0 g l-benzyloxy-l-(lethylpropyl)-3-methyl-3-fenylmočoviny.

Část D

Směs l-benzyloxy-l-(l-ethylpropyl)-3-methyl-3-fenylmočoviny (2,0 g, 6,1 mmolů), formiátu amonného (1,2 g, 19 mmol), 10% paládia na uhlíku (0,7 g) a bezvodého ethanolu (50 ml) se míchala jednu hodinu při pokojové teplotě. Po uplynutí 1 hodiny se reakční směs přefiltrovala přes vrstvu filtračního činidla Celíte™ a toto činidlo se propláchlo ethylacetátem. Filtrát se zahustil a následně čistil pomocí chromatografie (silikagel 4 : 1 hexany : ethylacetát), čímž se

-27CZ 287034 B6 získalo 1,2 g požadovaného produktu ve formě m béžové pevné látky s teplotou tání 68,4 až 69,1 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C13H20N2O2:	66,07	8,53	11,85;
Nalezeno:	65,78	8,42	11,67.

Sloučenina 75

-hydroxy-1,3-dimethyl-3-feny lmočovina

Část A

O-benzylhydroxylaminhydrochlorid (3,0 g, 18,8 mmol) se rozpustí ve vodě (3,5 ml) a tento roztok se sloučil s diethyletherem (85 ml). Do reakční směsi se dále přidal hydroxid sodný (0,75 g, 18,8 mmol) ve vodě. Po několika minutách se do směsi přidal roztok N-methyl-Nfenylkarbamoylchloridu (3.19 g, 18,8 mmol) v diethyletheru (25 ml). Ve směsi se vytvořila bílá sraženina, která se izolovala filtrací a rozpustila ve vodě. Roztok se naředil nasyceným vodným hydrogenuhličitanem sodným a tuhým uhličitanem sodným v množství, které umožní roztoku dosáhnout pH hodnoty 9. Roztok se extrahoval diethyletherem (5 x 50 ml). Etherové extraktry se sloučily, vysušily a následně zahustily, čímž se získal surový produkt ve formě béžové pevné látky. Tento surový produkt se čistil pomocí silikagelové chromatografie (9 : 1 hexany : ethylacetát), čímž se získalo 3,1 g l-benzyloxy-3-methyl-3-fenylmočoviny.

Část B

Baňka se pod dusíkovou atmosférou naplnila hydridem sodným (0,29 g 60% NaH v minerálním oleji, 7,3 mmolů). Minerální olej se vymyl z hydridu sodného několika díly hexanů. Do roztoku se přidal N,N-dimethylformamid (60 ml) a následně pozvolna roztok l-benzyloxy-3-methyl-3fenylmočoviny (1,69 g, 6,6 mmol) v N,N-dimethylformamidu (40 ml). Bylo možné pozorovat vývoji vodíku. Přibližně po 30 minutách se přidal methyl jodid (480 ml) a potom se reakční směs míchala 1,5 hodiny při pokojové teplotě. Potom se reakční směs ochladila vodou (přibližně 65 ml). Vodná vrstva, kterou byla solná vrstva, se extrahovala diethyletherem (4 x 80 ml). Extrakty se sloučily, vysušily nad síranem hořečnatým a následně zahustily, čímž se získal surový produkt ve formě oleje. Tento surový produkt se čistil silikagelovou chromatografií (5 : l hexany : ethylacetát), čímž se získalo 1,54 g l-benzyloxy-l,3-dimethyl-3-fenylmočoviny.

Část C

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 74, část D, a l-benzyloxy-l,3-dimethyl-3fenylmočoviny (1,5 g, 5,6 mmol), která se debenzylovala, se získalo 0,8 g požadovaného produktu ve formě bělavého prášku s teplotou tání 87,8 až 88,81 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C9H]2N2O2:	59,99	6,71	15,54;
Nalezeno:	60,01	6,5	15,56.

-28CZ 287034 B6

Sloučenina 76

-hydroxy-1 -(1 -ethylpropy l)-3-(2-fenoxyfeny l)močovina

Roztok kyseliny 2-fenoxyenzoové (2,9 ml, 13,5 mmol), triethylaminu (1,8 ml, 13 mmol) a difenylfosforylazidu (2,9 ml, 13,5 mmol) v toluenu (50 ml) se zahřála na teplotu 95 °C a při této teplotě se udržoval po dobu 2 hodin. Po uplynutí této doby se reakční směs ochladila na pokojovou teplotu a do směsi se přidal N-(l-ethylpropyl)hydroxylamin (1,9 g, 18,4 mmol) v pevném stavu. Reakční směs se nechala přes noc odstát a následně se zahustila pod vakuem, čímž se získal surový produkt, kterým byl žlutý olej. Zbytek se rozdělil mezi diethylether (100 ml) a vodu (100 ml). Frakce se oddělily a vodná frakce se extrahovala dalšími díly diethyletheru (3 x 50 ml). Sloučené organické frakce se vysušily nad síranem sodným, přefiltrovaly a zahustily. Zbytek se rekrystalizoval z hexanů a ethylacetátu, čímž se získaly 2,3 g požadovaného produktu ve formě bílé krystalické látky s teplotou tání 141,2 až 141,8 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C18H22N2O3:	68,77	7,05	8,91;
Nalezeno:	68,23	6,8	8,89

Sloučenina 77 l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(3-fenoxyfenyl)močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 76, a kyseliny 3-fenoxybenzoové (3,47 g, 16 mmol), která se převede na odpovídající isokyanát a následně uvede v reakci sN-(lethylpropyl)hydroxylaminem (2,3 g, 24 mmol), se získá 3,2 g požadovaného produktu ve formě bílých destiček s teplotou tání 110,6 až 111,4 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C18H22N2O3	68,77	7,05	8,91;
Nalezeno.	68,4	6,67	8,89.

Sloučenina 78 l-hydroxy-l-( 1 -ethylpropyl)-3-(4-benzylfenyl)močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 76, a kyseliny 4-benzylbenzové (1,93 g, 9 mmol), která se převede na odpovídající isokyanát a následně uvede v reakci sN-(lethylpropyl)hydroxylaminem (1,4 g, 14 mmol), se získá 1,9 g požadovaného produktu ve formě bělavých krystalů s teplotou tání 132,5 až 134,1 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro C19H24N2O2:

Nalezeno:

%C %H %N

73,05 7,74 8,97;

72,82 7,82 8,79.

Sloučenina 79

-hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-(4-benzoy lfenyl)močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 76, a kyseliny 4-benzoylbenzoové (1,47 g, 6,5 mmol), která se převede na odpovídající isokyanát a následně uvede v reakci sN-(l

-29CZ 287034 B6 ethylpropyl)hydroxylaminem (1,0 g, 10 mmol), se získá 0,58 g požadovaného produktu ve formě bílých krystalů s teplotou tání 156 až 157 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro C19H22N2O3: Nalezeno:

%C %H %N

69,92 6,79 8,58;

69,7 6,61 8,64.

Sloučenina 80

-hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-(4-benzoylfeny 1 )močovina

Část A

Směs methyl-4-hydroxybenzoátu (3,0 g, 19,7 mmol), uhličitanu draselného (2,8 g, 20,2 mmol) a N,N-dimethylformamidu (40 ml) se míchala při teplotě 70 °C, dvě hodiny. Po uplynutí této doby se do směsi přidal benzylbromid (2,38 ml, 20 mmol) a reakční směs se udržovala 18 hodin při této teplotě. Potom se ochladila na pokojovou teplotu a rozpustila ve vodě (400 ml). Vodná fáze se extrahovala ethylacetátem (3 x 100 ml). Sloučené organické frakce se vysušily nad síranem hořečnatým, přefiltrovaly a zahustily, čímž se získalo 4,5 g methyl-4-benzyloxybenzoátu ve formě bílého prášku s teploto tání 96 až 97 °C.

Část B

Roztok methyl-4-benzyloxybenzoátu (4,2 g, 17,3 mmol) a hydrid sodný (15 ml 2N) v methanolu (200 ml) se vařil pod zpětném chladiči 24 hodin. Po odstranění methanolu pod vakuem se do rezultujícího zbytku přidalo 200 ml vody. Získaná směs se okyselila na pH 3 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové po kapkách. Výsledná sraženina se izolovala filtrací, promyla studenou vodo a vysušila, čímž se získalo 3,1 g kyseliny 4-benzyloxybenzoové ve formě bílého prášku s teplotou tání 186 až 187 °C.

Část C

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 76, a kyseliny 4-benzyloxybenzoové, která se převede na odpovídající isokyanát a následně uvede v reakci sN-(lethylpropyl)hydroxylaminem (1,4 g, 13,6 mmol), se získá 1,5 g požadovaného produktu ve formě bílého prášku s teplotou tání 156 až 157 °C.

Elementární analýza: %C %H %N

Vypočteno pro C19H24N2O3: 69,49 7,37 8,53;

Nalezeno: 69,52 7,14 8,44.

Sloučenina 81 l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-[4-(cyklohexylmethoxy)fenyl]močovina

Část A

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 80, část A, a methyl 4-hydroxybenzoátu (3,0 g,

19,7 mmol), který se uvedl v reakci s cyklohexylmethylbromidem (2,8 ml, 20,1 mmol), se získalo 3,1 g methyl 4-cyklohexylmethoxybenzoátu ve formě bílých krystalů s teplotou tání 62 až 63 °C.

-30CZ 287034 B6

Část B

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 80, část B, a methyl 4cyklohexylmethoxybenzoátu (2,9 g, 11,7 mmol), který se hydrolyzoval, se získalo 1,5 g kyseliny 4-(cyklohexylmethoxy)benzoové ve formě bílého prášku s teplotou tání 209 až 210 °C.

Část C

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 76, a kyseliny 4-(cyklohexylmethoxy)benzoové (1,0, 4,3 mmol), která se převedla na odpovídající isokyanát a následně se uvedla v reakci sN-(l-ethylpropyl)hydroxylaminem (0,66 g, 6,4 mmol), se získalo 0,7 g požadovaného produktu ve formě bílé kiystalické látky s teplotou tání 132 až 133 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C19H30N2O3:	68,23	9,04	8,38;
Nalezeno:	67,89	9,03	8,44.

Sloučenina 82

-hydroxy-1 -(1 -ethy Ipropy l)-3-[4-(3-feny Ipropy loxy)feny 1] močovina

Část A

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 80, část A, a methyl 4-hydroxybenzoátu (3,0 g,

19,7 mmol), který se uvedl v reakci s l-bromo-3-fenylpropanem (3,1 ml, 20,4 mmol), se získalo 4,8 g methyl 4-(3-fenylpropyloxy)benzoátu ve formě bílých krystalů s teplotou tání 61,0 až 61,5 °C.

ČástB

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 80, část B, a methyl 4-(3fenylpropyloxy)benzoátu (4,5 g, 16,7 mmol), který se hydrolyzoval, se získalo 4,1 g kyseliny 4(3-fenylpropyloxy)benzoové ve formě bílého prášku s teplotou tání 165 až 166 °C.

Část C

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 76, a kyseliny 4-(3-fenylpropyloxy)benzoové (2,0, 7,8 mmol), která se převedla na odpovídající isokyanát a následně se uvedla v reakci sN(1-ethyIpropyl)hydroxylaminem (1,2 g, 11,6 mmol), se získalo 0,8 g požadovaného produktu ve formě bílé krystalické látky s teplotou tání 135 až 136 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C21H28N2O3:	70,76	7,92	7,86;
Nalezeno:	70,76	7,96	7,84.

Sloučenina 83 l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(bifenyl-4-yl)močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 76, a kyseliny 4—bifenylkarboxylové (1,3 g, 6,5 mmol), která se převedla na isokyanát a následně uvedla v reakci sN-(l

-31CZ 287034 B6 ethylpropyl)hydroxylamin (1,0 g, 10 mmol), se získalo 0,54 g požadovaného produktu ve formě bílé krystalické látky s teplotou tání 183 až 184 °C.

Elementární analýza:

Vypočteno pro C18H22N2O2: Nalezeno:

%C %H %N

72,46 7,43 9,39;

72,38 7,15 9,26.

Sloučenina 84 l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(4'-oktyloxybifenyl-4-yl)močovina

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 76, a kyseliny 4'-oktyloxy-4bifenylkarboxylové (3,26 g, 10 mmol), která se převedla na isokyanát a následně uvedla v reakci sN-(l-ethylpropyl)hydroxylamin (1,4 g, 13,5 mmol), se získalo 2,0 g požadovaného produktu ve formě světle žlutohnědé krystalické látky s teplotou tání 151 až 152,5 °C.

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C26H38N2O3:	73,20	8,98	6,57;
Nalezeno:	73,19	9,01	6,50.

Sloučenina 85

-hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-(3-cyklopentoxy-4-methoxyfenyl)močovina

Část A

Do roztoku cyklopentylbromidu (26,4 g, 0,18 mol) a isovanilinu (25,8 g, 0,17 mol) vN,Ndimthylformamidu (80 ml) se přidal uhličitan draselný (27,6 g, 0,20 mol). Získaná suspenze se míchala jeden týden při pokojové teplotě, potom naředila vodou (500 ml) a extrahovala diethyletherem (2 x 300 ml). Sloučení etherové extrakty se promyly vodou (5 x 150 ml), 10% hydridem sodným (3 x 50 ml) a vodou (2 x 100 ml), potom se vysušily nad síranem hořečnatým a zahustily pod vakuem, čímž se získalo 27,5 g 3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzaldehydu ve formě žlutého viskózního oleje.

Část B

Za stálého míchání se do suspenze 3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzaldehydu (19,8 g, 0,09 mol) a kyseliny amidosulfonové (11,4 g, 0,12 molu) v 80% kyselině octové (155 ml) přidal 80% roztok chloridu sodného ve vodě (43 ml). Reakční teplota se pomocí ledové lázně udržovala přibližně na 20 °C. Výsledná žlutá směs se míchala při 20 °C 1,5 hodiny, potom s naředila vodou (160 ml) a míchal ještě 10 minut. Z výsledné směsi se filtrací izolovala bílá pevná látka, která po promytí vodou a vysušení ve vakuové peci při 60 °C poskytla 19,3 g kyseliny 3-cyklopentyloxy4-methoxybenzoo vé.

ČástC

Použitím obecné metody pro přípravu sloučeniny 76, a 3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzoové (2,36 g, 10 mmol), která se převedla na odpovídající isokyanát a následně uvedla v reakci sN(l-ethylpropyl)hydroxylaminem (1,4 g, 13,5 mmol), se získalo 1,4 g požadovaného produktu ve formě bílých jehliček s teplotou tání 127,0 až 128,0 °C.

-32CZ 287034 B6

Elementární analýza:	%C	%H	%N
Vypočteno pro C]8H28N2O4:	64,26	8,39	8,33;
Nalezeno:	64,21	8,2	8,23

Příklad 1

Inhibice 5-lipoxygenázy v lidských leukocytech

Níže popsaná testovací metoda měří schopnost sloučenin inhibovat aktivitu 5-lipoxygenázy v lidských leukocytech.

Příprava krvinek

Venepunkcí se shromáždí celá lidská krev v EDTA (14 ml 0,25M na 60 ml celé krve). Červené krvinky se sedimentují roztokem 6% dextranu a 0,9% chloridu sodného při poměru 25 ml celé krve na 15 ml dextranového roztoku. Kombinace krve a dextranu se smísí převrácením a červené krvinky se nechají sedimentovat 45 minut při pokojové teplotě. Plasmo-dextranový supematant se následně odstraní odstřeďováním při pokojové teplotě a 3000 ot./m. po dobu 10 minut. Po odstranění plasmo-dextranového supematantu se buňky resuspendují v 10 ml plasmodextranového roztoku. Buněčná suspenze se sloučí s 20 ml vody, míchá 1,5 minut, bezprostředně potom se smísí s 10 ml 3,6% roztoku chloridu sodného, opět míchá a odstřeďuje 10 minut při pokojové teplotě a 3000 ot./minutu. Pelety se promyjí 40 ml pufru Tris (5,55 mM dextrosa, 15,36 mM Tris báze, 136,9 mM chloridu sodného spH 7,3 až 7,4) a následně se 10 minut odstřeďují při 3000 ot./min. Potom se pelety resuspendují do pufru Tris obsahujícího 1 mM chloridu vápenatého, čímž se získá přibližně 1,0 x 10⁷ buněk/ml.

Příprava sloučeniny

Sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu. Sloučeniny se testují při koncentracích 100, 33, 11, 3,7, 1,2 a 0,4 μΜ. Každá koncentrace se testuje dvakrát.

Inkubace

Do každé jamky 96 jamkové mikrotitrové plotny se zavede 15 μΐ pufru Tris obsahujícího 1 mM chlorid vápenatý. Do každé jamky se dále zavede 1 μΐ roztoku léčiva nebo vehikula (dimethylsulfoxidu) a následně se ještě přidá 75 μΐ buněčné suspenze. Plotny se lehce promíchají a potom se nechá 10 minut odstát při pokojové teplotě. Po uplynutí této doby se do každé jamky, s výjimkou kontrolních jamek (Kontrolní jamky měřily míru LTC₄ produkce v nepřítomnosti A23187) přidá vápníkový ionofor (připravený rozpuštěním jonoforu a DMSO a následným naředěním 1:80 do pudru Tris). Plotny se lehce promíchají a následně nechají 10 minut inkubovat při teplotě 37 °C.

Separování

Po inkubaci se plotny odstřeďují 1,5 minuty při 2000 ot./min. a po uplynutí této doby se co nejrychleji zjamek odstraní supematant, čímž se zastaví reakce. Supematanty se zmrazí a skladují při -20 °C až do svého testování.

Analýza a výpočet

U supematantů se zjišťovala přítomnost leukotrienu C₄ radioimunotestem, který se prováděl v souladu s instrukcemi výrobce (Advanced Magnetics; Cambridge, MA). Inhibice aktivity 5

-33CZ 287034 B6 lipoxygenázy se vypočte jako poměr množství LTC₄ vzniklého v přítomnosti (LTC₄ + cpd) a v nepřítomnosti (LTC₄ bez cpd) sloučeniny podle následující rovnice (kde cpd znamená sloučeninu).

%inhibice = (LTC₄ bez cpd) - (LTC₄ + cpd) x 100 (LTC₄ bez cpd)

IC₅₀ hodnoty (koncentrace sloučeniny produkující 50% inhibici enzymu) se vypočtou lineární regresivní analýzou závislosti procentické inhibice na logaritmu koncentrace sloučeniny.

Testovala se celá řada sloučenin, které lze použít v praxi v rámci způsobu podle vynálezu. Výsledky jsou shrnuty v níže uvedené tabulce 11.

Tabulka 11

Inhibice 5-lipoxygenázy v lidských leukocytech
Sloučenina	IC50	Sloučenina	IC50(pM)
1	0,83	21	0,23
2	0,040	22	0,74
3	0,082	23	0,15
4	0,027	24	0,2
5	0,42	25	0,13
6	0,07	26	>10
7	0,28	31	0,006
8	0,68	33	9,1
9	0,08	34	0,46
10	0,025	43	0,03
11	0,049	44	0,01
16	0,008	54	0,094
17	0,043	55	0,052
18	0,21	58	0,002
19	0,10	59	11
20	0,70

Příklad 2

In vitro inhibice leukotrienu B₄ v lidské celé krvi

Níže popsaná testovací metoda měří schopnost sloučenin inhibovat produkci Leukotrienu B₄ v celé lidské krvi.

Příprava krvinek

Do 60 cm³ injekční stříkačky obsahující 100 jednotek heparinu se odebere celá lidská krev.

Příprava sloučeniny

Sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu. Sloučeniny se testují při koncentracích 100, 33, 11, 3,7,1,2 a 0,4 μΜ. Každá koncentrace se testovala dvakrát.

-34CZ 287034 B6

Inkubace

Alikvoty (1 μΐ) roztoku sloučeniny se zavede do 1 ml polyethylenových zkumavek, do kterých se následně přidá 500 μΐ díly heparizinované krve. Zkumavky se důkladně promyjí a nechají se 15 5 minut předinkubovat při pokojové teplotě. Potom se do zkumavek přidá 25 μΐ 1 mM vápníku ionoforu A23187 v dimethylsulfidu a pufru Tris. Zkumavky se důkladně promyjí a inkubují 30 minut při teplotě 37 °C.

Separace

Zkumavky se odstřeďují 10 minut při 2000 ot./min. Do 1 ml polyethylenových zkumavek obsahujících 400 μΐ díly methanolu se převedou 100 μΐ části plazmy. Zkumavky se zvíří a následně zmrazí a přes noc skladují při teplotě -20 °C.

Analýza a výpočet

Zkumavky se odstřeďovaly 10 minut a potom se 100 μΐ části methanolového supematantu převedly do 96 jamkové mikrotitrové plotny. 10 μΐ části se převedly z této ploty do 96 jamkové testovací plotny. Do testovací plotny se přidají methanolové roztoky LTB₄ rozředěné podle 20 standardní křivky. Do každé standardně zakřivené jamky se přidá 10 μΐ testovacích methanoloplasmového supematantu. Testovací plotna se vakuově vysuší při pokojové teplotě. Následně se přidá radioimunotestovací pufr, deska se umístí na 5 minut do ultrazvukové lázně a následně testuje, přičemž testy se provádějí podle instrukcí výrobce (Advanced Magnetics; Cambridge, MA). Inhibice LTB₄ produkce se vypočte jako poměr množství LTB₄ vzniklého v přítomnosti 25 (LTB₄ + cpt) a v nepřítomnosti (LTB₄ bez cpd) sloučeniny podle následující rovnice (kde cpd znamená sloučeninu).

%inhibice = (LTB₄ bez cpd) - (LTBji + cpd) x 100 (LTB₄ bez cpd)

IC₅o hodnoty (koncentrace sloučeniny produkující 50% inhibici (LTB4 produkce) se vypočte lineární regresivní analýzou závislosti procentické inhibice na logaritmu koncentrace sloučeniny.

Testovala se celá řada sloučenin, které lze použití v praxi v rámci způsobu podle vynálezu. Výsledky jsou shrnuty v níže uvedené tabulce 12, ve které označení IA znamená, že sloučenina byla v tomto určitém testu inaktivována.

Tabulka 12

In vitro inhibice leukotrienů B4 v lidské krvi
Sloučenina	IC50	Sloučenina	IC50(pM)
1	0,38	43	0-3
2	0,010	44	0,38
3	0,07	45	0,32
4	0,008	46	0,6
5	0,2	47	0,9
6	0,079	48	1,5
7	0,092	49	1.3·
8	0,17	50	0,2
9	0,4	51	0,6
10	0,51	52	0.7
11	0,37	53	0.6

-35CZ 287034 B6

Tabulka 12 - pokračování

In vitro inhibice leukotrienů B4 v lidské krvi
Sloučenina	IC50	Sloučenina	IC5o(pM)
12	0,19	54	0,1
13	0,3	55	0,6
14	0,2	56	0,11
15	0,27	57	0,067
16	0,4	58	2,1
17	0,4	59	0,3
18	0,9	60	0,7
19	0,8	61	2,1
20	0,9	62	0,5
21	1,1	63	0.7
22	1,2	64	3,8
23	0,1	65	1,4
24	0,09	66	16,1
25	0,2	67	0,9
26	2,3	68	0,6
27	0,08	69	0,6
28	2,5	70	2,8
29	0,56	71	1,9
30	0,2	72	0,3
31	1,1	73	33,1
32	1,4	74	7,7
33	IA	75	1,4
34	>10	76	7,3
36	0,3	77	1,1
37	0,2	78	2,9
38	5,7	79	6,4
39	1,1	80	3,9
40	1,4	81	8,5
41	2,7	82	2,8
42	0,93	83	1,8

Příklad 3

In vitro inhibice leukotrienů C₄ myšího peritoneálního makrofágu

Níže popsaná testovací metoda měří schopnost sloučenin inhibovat produkci Leukotrienů C₄ v myším peritoneálním makrofágu.

Příprava buněk

Myši (samičky, CD-1, vážící 25 g) se utratí tak, že se nechají vystavil působení oxidu uhličitého. Peritoneální dutina se odkryje odloupnutím kůže na břiše. 5 ml části média (M199 obsahující 1% fetálního bovinního séra, 100 jednotek/ml penicilínu, 100 pg/ml streptomycinu, 20 jednotek/ml heparinu a žádný glutamin) se vstříkla do exponované peritoneální dutiny každé myši. Průplachová tekutina se odstraní a shromáždí, čímž se získá přibližně 1 x 10⁶ makrofágů/ml. Do každé jamky 24 jamkové sterilní plotny se přidají 1 ml průplachové tekutiny a makrofágy se

-36CZ 287034 B6 nechají 2 hodiny přilnout ktéto plotně při teplotě 37 °C v atmosféře 5% oxidu uhličitého. Po odstranění média se každá jamka promyla 2 ml solného roztoku pufrovaného fosfátovým pufrem (PBS). Do každé jamky se přidal 1 ml díl média bez heparinu, ale obsahující 5 pCi/ml 3Hmyoinositolu, a plotny se nechají přes noc inkubovat při teplotě 37 °C v atmosféře 5% oxidu 5 uhličitého. Po odstranění média se jamky promyjí dvakrát 2 ml díly PBS. Do každé jamky se přidá 1 ml díl Puckovy fyziologické formulace A obsahující 1 mM chlorid vápenatý, 1 mM chlorid hořečnatý a 10 mM chlorid lithná. (Puckova formulace se připraví nejprve jako lOnásobný roztok, kteiý obsahuje 4 g chloridu draselného, 80 g chloridu sodného a 10 g glukózy na litr. Puckova fyziologická formulace A se připraví za použití 10 ml lOnásobné Puckovy io formulace, 0,47 ml 7,5% hydrogenuhličitanu sodného a 2 ml 1M kyseliny N-2hydroxyethylpiperazin-N-2-ethansulfonové na 100 ml.)

Příprava sloučeniny

Sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu. Sloučeniny se testují při koncentracích 10, 1 a 0,1 μΜ. Každá koncentrace se testuje dvakrát.

Inkubace

Do každé jamky se zavede 1 μΐ díl roztoku sloučeniny nebo vehikula (DMSO) a plotny se inkubují 15 minut při 37 °C v atmosféře 5% obj. oxidu uhličitého. Následně se přidá Zymosan a dosáhne se tak konečné koncentrace 50 pg/ml v každé jamce, načež se plotna 1 až 2 hodiny inkubuje při 37 °C v atmosféře 5% obj. oxidu uhličitého.

Separace

Po ukončení inkubace se 200 μΐ díly média přenesou do dvanácti 75mm zkumavek. Tyto zkumavky se analyzují buď bezprostředně potom, nebo se uloží při -20 °C a skladují při této teplotě až do okamžiku, kdy se budou testovat.

Analýza a výpočet

U médií se přítomnost Leukotrienu C₄ zjišťuje pomocí radioimunotestu, který se provádí podle instrukcí výrobce (Advanced Magnetics, Cambridge, MA), Inhibice LTC₄ produkce se vypočte 35 jako poměr množství LTC₄ vzniklého v přítomnosti (LTC₄ + cpd) a v nepřítomnosti (LTC₄ bez cpd) sloučeniny podle následující rovnice, (kde cpd znamená sloučeninu).

%inhibice = (LTC₄ bez cpd) - ( LTC₄ + cpď) x 100 (LTC₄ bez cpd)

IC₅o hodnoty (koncentrace sloučeniny produkující 50% inhibici enzymu) se vypočtou lineární regresivní analýzou závislosti procentické inhibice na logaritmu koncentrace sloučeniny.

Testovala se celá řada sloučenin, které lze použít v praxi v rámci způsobu podle vynálezu. 45 Výsledky jsou shrnuty v níže uvedené tabulce 13.

-37CZ 287034 B6

Tabulka 13

In vitro inhibice leukotrienů C4 myšího peritoneálního makrofágu
Sloučenina	IC50	Sloučenina	IC50(pM)
1	<1	43	0,9
5	0,2	44	<1
6	<0,1	49	<1
7	<1	50	<1
8	0,4	51	0,6
9	0,7	52	<0,1
10	<1	53	<1
13	1	54	1,3
14	<1	56	0,1
15	<0,1	58	0,1
16	<1	59	0,3
17	0,6	62	6,4
18	0,8	63	4
19	1	67	<1
20	0,2	68	<1
21	0,1	69	<1
22	0,3	70	<1
23	0,2	71	<1
24	0,2	72	<1
25	0,6	73	<1
26	<1	74	<10
30	0,3	75	<10
31	0,2	76	<0,1
32	0,4	77	<0,1
34	>10	78	<1
36	0,2	79	<1
37	<1	80	<1
38	<1	81	<1
39	<1	82	<1
40	1	83	<1

Příklad 4

Ex vivo inhibice leukotrienů B₄ u krys

Níže popsaná testovací metoda měří schopnost sloučeniny, pokud je podána orálně krysám, 10 inhibovat produkci Leukotrienů B₄ v jejich krvi, která se odebírána a exponuje.

Krysy (CD, sameček, nemající režim hladovění, 250 g) se lehce znecitliví oxidem uhličitým a pomocí kardiální punkce se jim odebere vzorek krve. Tento vzorek se disperguje do dvanácti 75 mm polypropylenových zkumavek obsahujících 8 až 10 μΐ 10 000 jednotek/ml heparinu, 15 míchá a následně udržuje na ledu. Krysy se nechají přibližně jednu hodinu, aby nabyla vědomí a potom se jim orálně podá dávka sloučeniny rozpuštěné v PEG 400 při 5 ml/kg objemu. V jedné skupině je pět kiys. Dvě hodiny po podání dávky se krysy opět znecitliví oxidem uhličitým a opět se jim kardiální punkcí odebere krev.

-38CZ 287034 B6

Do 1,0 ml polypropylenových zkumavek se přidá dvakrát 200 μΐ krve. Do každé zkumavky se přidá 10 μΐ 1 mM A23187 vápníkového ionoforu v dimethylsulfoxidu a pufru Tris. Zkumavky se lehce protřepou a následně inkubují 30 minut ve vodní lázni, jejíž teplota je 37 °C. Zkumavky se 10 minut odstřeďují při 4000 ot./min. 50 μΐ díly plasmy se převedou do 1,0 ml zkumavek obsahujících 200 μΐ methanolu. Zkumavky se protřepou a následně umístí přes noc do mrazáku.

Zkumavky se vyjmou z mrazáku a následně odstřeďují 10 minut při 400 ot./min. 20μ1 díly methanolo-plasmového supematantu a 10μ1 methanolové roztoky LTB₄, ve kterých je koncentrace LTB₄ postupně zvyšována podle standardní křivky, se přenesou do 96 jamkových mikrotitrových ploten s v-dnem. Plotny se vakuově vysuší při 40 °C. Do každé jamky se přidá 40μ1 díl LTB₄ radioimunotestovacího pufru a plotna se umístí na 5 minut do ultrazvukové lázně a následně testuje. Testy se provedou podle instrukcí výrobce (Advanced Magnetics; Cambridge, MA). Procentické inhibiční hodnoty se získají porovnáním hladiny LTB₄ ve vzorcích odebraném po aplikaci sloučeniny s hladinami LTB₄ ve vzorcích odebraných před aplikováním dávky sloučeniny podle níže uvedené rovnice.

%inhibice = (LTB₄ před dávkou) - (LTB₄ po dávce) x 100 (LTB₄ před dávkou)

Testovala se celá řada sloučenin, které lze použít v praxi v rámci způsobu podle vynálezu. Výsledky jsou shrnuty v níže uvedené tabulce 14.

Tabulka 14

Ex vivo inhibice leukotrienů B4 u krys
Sloučenina	%I	Dávka (mg/kg)	Sloučenina	%I	Dávka (mg/kg)
1	18	5	40	0	50
1	87	50	41	14	50
3	39	5	42	4	50
5	82	50	43	12	20
6	39	5	43	16	50
6	47	50	44	18	50
7	32	5	45	6	50
8	29	5	46	17	50
9	34	25	47	16	50
10	23	25	48	2	50
10	41	50	49	13	50
11	26	20	50	6	50
11	20	50	51	22	50
12	42	50	52	9	50
13	23	50	53	1	50
14	22	50	54	42	50
14	50	50	55	8	50
15	24	50	56	6	50
15	73	50	56	13	50
16	74	25	57	35	50
17	26	50	59	9	5
18	3	50	59	23	10
19	3	50	59	20	20
20	19	50	59	49	25
23	45	50	59	65	50

-39CZ 287034 B6

Tabulka 14 - pokračování

Ex vivo inhibice leukotrienů B4 u krys
Sloučenina	%I	Dávka (mg/kg)	Sloučenina	%I	Dávka (mg/kg)
24	29	50	59	87	50
25	13	10	62	18	50
25	44	25	63	92	50
25	45	50	64	88	50
25	79	50	65	93	50
27	23	10	66	61	50
27	5	25	67	23	50
27	53	50	68	48	50
27	75	50	68	21	50
28	29	50	69	71	50
29	61	50	70	0	50
30	13	50	71	5	50
31	40	25	72	19	50
32	28	50	72	47	50
33	26	25	74	7	50
34	-2,9	25	75	0	50
36	7	50	76	13	50
37	7	50	77	7	50
38	2	50	78	0	50
39	59	50

Příklad 5

Ex vivo inhibice leukotrienu B₄ psů

Níže popsaná testovací metoda měří schopnost sloučeniny, pokud je podána orálně psům, inhibovat produkty Leukitrienu B4 (LTB₄) v jejich krvi, která se odebere a exponuje ve zvolených časových okamžicích.

Pro test se použije malí stavěči psi (samec a samička, přibližně 10 kg). Před zahájením testů se psovi vyholí oblast krku, aby se tak usnadnil přístup k jugulámí cévě. 3 až 4 ml vzorek krve se odebral z jugulámí cévy do heparinizovaného odsávací sběrné zásobní nádoby. Psovi se následně aplikuje dávka použitím trubice tak dlouhé, aby dosáhla do jeho žaludku. Sloučenina se rozpustí v PEG 400 v množství, potřebné pro dosažení příslušné 5 ml dávky. Bezprostředně po podání sloučeniny se aplikuje průplach používající 5 ml vehikula pro propláchnutí dávkovači trubice. Ve zvolených časových okamžicích po aplikování dávky se odeberou 3 až 4 ml vzorky krve.

Odebrané vzorky jsou exponovány jak jen to je možné. 0,5 ml díl krve se rovnoměrně rozdělí do 3 zkumavek (1 ml mikrotitrační zkumavky). Do dvou zkumavek se přidá 1 μΐ díl díly 25 mM vápníkového ionoforu v dimethylsulfoxidu. Do třetí zkumavky se přidá 1 μΐ díl dimethylsulfoxidu. Zkumavky se lehce promíchaly a následně umístily na dobu 30 sekund do vodní lázně jejíž teplota je 37 °C. Zkumavky se odstřeďují při 11000 ot/min. 3 minuty a plazmový supematant se přenese do čistých zkumavek. 50 μΐ díl tohoto plazmatu se přidá do 1 ml mikrotitrové zkumavky obsahující 200 μΐ methanolu. Zkumavky se umístí do mrazáku a zde se

-40CZ 287034 B6 skladují alespoň 1 hodinu při teplotě -20 °C a potom se odstřeďují 10 minut při 2000 ot./min.

μΐ díl methanolového supematantu se vysuší pod vakuem při pokojové teplotě a následně se rozředí v LTB₄ pufru. Množství LTB₄ pufru ve vzorku se stanoví radioimunotestem prováděným podle instrukcí výrobce (Advanced Magnetics; Cambridge, MA). Procentické inhibiční hodnoty 5 se získají porovnáním hladiny LTB₄ ve vzorcích odebraném po aplikaci sloučeniny s hladinami LTB₄ ve vzorcích odebraných před aplikováním dávky sloučeniny podle níže uvedené rovnice.

%inhibice = (LTB₄ před dávkou) - (LTB₄ po dávce) x 100 (LTB₄ před dávkou) o

Testovala se celá řada sloučenin, které lze použití v praxi v rámci způsobu podle vynálezu. Výsledky jsou shrnuty v níže uvedené tabulce 15, ve které každý vstup představuje výsledky pro jednoho psa. Negativní číslo označuje stimulaci LTB₄ produkce. Všechny sloučeniny se testovaly při dávce 5 mg/Kg.

U procent v popise, pokud není uvedeno jinak se jedná o procenta hmotnostní.

Tabulka 15

Ex vivo Inhibice leukotrienů B4 u psů
Sloučenina	% inhibice
	1. hodina	2. hodina	4. hodina	6. hodina
1	100	100	100	93
1	100	100	100	95
3	100	100	83	51
3	100	99	95	84
5	100	100	99	20
5	100	75	44	50
6	100	62	27	19
6	86	11	-36	-52
7	100	100	70	-21
7	100	99	56	48
8	100	92	27	9
8	100	100	11	-32
9	100	34	33	56
9	100	83	18	54
10	100	100	49	52
10	100	100	34	42
11	100	100	ΊΊ	-17
11	100	100	41	30
15	100	99	98	100
15	99	100	99	100
15	95	100	96	84
15	100	98	31	14
16	100	97	-8	-39
16	100	100	-18	-24
16	100	100	-14	-186
16	100	100	-80	-204
17	100	98	98	64
17	100	n 100	70	43
18	100	100	49	46
18	100	100	57	-12

-41CZ 287034 B6

Tabulka 15 - pokračování

Ex vivo Inhibice leukotrienů B4 u psů
Sloučenina	% in	libice
	1. hodina	2. hodina	4. hodina	6. hodina
19	100	84	11	29
19	100	100	74	65
20	100	100	57	17
20	100	100	64	13
21	100	95	0	24
21	100	88	-37	-8
22	100	78	-401	-518
22	100	-140	-381	-421
23	100	99	84	15
23	99	99	82	80
23	100	100	100	98
23	100	100	59	56
24	99	73	7	-21
24	100	84	14	-24
25	100	51	-45	7
25	98	57	-78	9
42	99	99	97	78
42	98	100	100	85
42	100	100	100	91
42	100	100	-91	-150
44	80	11	-19	-19
44	52	5	12	30
46	80	64	11	-23
46	77	58	2	46
54	99	97	33	43
58	1	-21	-43	8
58	-24	-35	-63	-34
59	100	99	83	37
59	100	100	75	55
59	100	100	100	93
59	100	100	78	76
60	100	100	-79	-95
60	97	52	49	76
61	100	100	29	-32
61	100	99	-2	22

-42CZ 287034 B6

Claims (5)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Farmaceutická kompozice pro léčení stavu kladně reagujícího na inhibici biosyntézy leukotrienů, vyznačená tím, že obsahuje (i) farmaceuticky přijatelné vehikulum; a (ii) močovinový derivát obecného vzorce I:

   ve kterém n znamená 0, 1, 2 nebo 3,

   R se zvolí ze skupiny zahrnující atom vodíku; cyklickou alkylovou skupinu obsahující pět až deset atomů uhlíku; alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až čtrnáct atomů uhlíku; a substituovanou alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až dvanáct atomů uhlíku, ve které je substituentem alkoxykarbonylová skupina, jejíž alkoxyskupina obsahuje jeden až čtyři atomy uhlíku; alkoxyalkylovou skupinu, ve které alkoxyzbytek obsahuje rovněž jeden až šest atomů uhlíku;

   každé R'se nezávisle zvolí z množiny zahrnující atom halogenu; nitroskupinu; alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až pět atomů uhlíku; alkoxyfenylovou skupinu, ve které alkoxyskupina obsahuje jeden až osm atomů uhlíku; alkylthioskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfonyloxyskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfmylovou skupinu, obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku, alkylsulfonylovou skupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; benzoylovou skupinu; benzylovou skupinu; cyklohexylmethoxyskupinu, cyklopentyloxyskupinu, fenoxyskupinu, fenylovou skupinu; fenylalkyloxyskupinu, ve které alkylová skupina obsahuje jeden až čtyři atomy uhlíku; trifluoromethylovou skupinu; trifluoromethylthioskupinu; a trifluoromethylsulfonyloxyskupinu;

   R se zvolí z množiny zahrnující atom vodíku a alkylovou skupinu s přímým řetězcem obsahující jeden až dvanáct atomů uhlíku; a

   M se zvolí z množiny zahrnující atom vodíku, farmaceuticky přijatelný kationt a farmaceuticky přijatelnou metabolicky odštěpitelnou skupinu pod podmínkou, že R, R' a R neznamenají všechny současně atom vodíku;

   v množství účinném pro inhibici biosyntézy leukotrienů.
2. 2. Farmaceutická kompozice pro léčení stavu kladně reagujícího na inhibici biosyntézy leukotrienů podle nároku 1, vyznačená tím, že obsahuje

   -43CZ 287034 B6 (i) farmaceuticky přijatelné vehikulum; a (ii) močovinový derivát obecného vzorce I:

   ve kterém n znamená 0, 1,2 nebo 3,

   R se zvolí ze skupiny zahrnující atom vodíku; cyklickou alkylovou skupinu obsahující pět až deset atomů uhlíku; alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až čtrnáct atomů uhlíku; a substituovanou alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až dvanáct atomů uhlíku, ve které 15 je substituentem alkoxykarbonylová skupina, jejíž alkoxyskupina obsahuje jeden až čtyři atomy uhlíku; alkoxyalkylovou skupinu, ve které alkoxyzbytek obsahuje jeden až šest atomů uhlíku a alkylový zbytek obsahuje rovněž jeden až šest atomů uhlíku;

   každé R'se nezávisle zvolí z množiny zahrnující atom halogenu; nitroskupinu; alkylovou 20 skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až pět atomů uhlíku;

   alkoxyskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylthioskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfonyloxyskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfmylovou skupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfonylovou skupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; fenoxyskupinu; 25 trifluoromethylthioskupinu; a trifluoromethylsulfonyloxyskupinu;

   R znamená atom vodíku; a

   M se zvolí z množiny zahrnující atom vodíku, farmaceuticky přijatelný kationt a 30 farmaceuticky přijatelnou metabolicky odštěpitelnou skupinu;

   v množství účinném pro inhibici biosyntézy leukotrienů.

   35 3. Použití močovinového derivátu obecného vzorce I podle nároku 1 pro výrobu farmaceutické kompozice určené pro inhibování biosyntézy leukotrienů, přičemž ve sloučenině obecného vzorce I:

   yW ·' n znamená 0,1, 2 nebo 3,

   R se zvolí ze skupiny zahrnující atom vodíku; cyklickou alkylovou skupinu obsahující pět až deset atomů uhlíku; alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem 45 obsahující jeden až čtrnáct atomů uhlíku, a substituovanou alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až dvanáct atomů uhlíku, ve které je substituentem alkoxykarbonylová skupina, jejíž alkoxyskupina obsahuje jeden až čtyři

   -44CZ Z8/UJ4 B6 atomy uhlíku; alkoxyalkylovou skupinu, ve které alkoxyzbytek obsahuje jeden až šest atomů uhlíku a alkylový zbytek obsahuje rovněž jeden až šest atomů uhlíku;

   každé R'se nezávisle zvolí z množiny zahrnující atom halogenu; nitroskupinu; alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až pět atomů uhlíku; alkoxyskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkoxyfenylovou skupinu, ve které alkoxyskupina obsahuje jeden až osm atomů uhlíku; alkylthioskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfonyloxyskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfínylovou skupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku, alkylsulfonylovou skupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; benzoylovou skupinu; benzylovou skupinu; cyklohexylmethoxyskupinu, cyklopentyloxyskupinu, fenoxyskupinu, fenylovou skupinu; fenylalkyloxyskupinu, ve které alkylová skupina obsahuje jeden až čtyři atomy uhlíku; trifluoromethylovou skupinu; trifluoromethylthioskupinu; a trifluoromethylsulfonyloxyskupinu;

   R se zvolí z množiny zahrnující atom vodíku a alkylovou skupinu s přímým řetězcem obsahující jeden až dvanáct atomů uhlíku; a

   M se zvolí z množiny zahrnující atom vodíku, farmaceuticky přijatelný kationt a farmaceuticky přijatelnou metabolicky odštěpitelnou skupinu pod podmínkou, že R, R' a R neznamenají všechny současně vodík.

   4. Použití močovinového derivátu obecného vzorce I podle nároku 2 pro výrobu farmaceutické kompozice určené pro inhibování biosyntézy leukotrienů, přičemž ve sloučenině obecného vzorce I:

   O ve kterém n znamená 0,1, 2 nebo 3,

   R se zvolí ze skupiny zahrnující atom vodíku; cyklickou alkylovou skupinu obsahující pět až deset atomů uhlíku; alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až čtrnáct atomů uhlíku; a substituovanou alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až dvanáct atomů uhlíku, ve které je substituentem alkoxykarbonylová skupina, jejíž alkoxyskupina obsahuje jeden až čtyři atomy uhlíku; alkoxyalkylovou skupinu, ve které alkoxyzbytek obsahuje jeden až šest atomů uhlíku a alkylový zbytek obsahuje rovněž jeden až šest atomů uhlíku;

   každé R' se nezávisle zvolí z množiny zahrnující atom halogenu; nitroskupinu; alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až pět atomů uhlíku; alkoxyskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylthioskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfonyloxyskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfínylovou skupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; alkylsulfonylovou skupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku; fenoxyskupinu; trifluoromethylthioskupinu; a trifluoromethylsulfonyloxyskupinu;

   R znamená atom vodíku; a

   -45CZ 287034 B6

   M se zvolí z množiny zahrnující atom vodíku, farmaceuticky přijatelný kationt a farmaceuticky přijatelnou metabolicky odštěpitelnou skupinu.

   5. Použití podle nároku 3a 4, vyznačené tím, žeseR zvolí z množiny zahrnující alkylovou skupinu s přímým nebo větveným řetězcem obsahující jeden až šest atomů uhlíku a cykloalkylovouskupinu s pěti až osmi atomy uhlíku; R' se zvolí z množiny zahrnující halogenoskupinu, nitroskupinu, alkylovou skupinu s přímým řetězcem obsahujícím jeden až čtyři atomy uhlíku, alkylthioskupinu obsahující jeden až čtyři atomy uhlíku a fenoxyskupinu; n znamená 0, 1 nebo 2; a R' se nachází v para nebo meta poloze na fenylovém kruhu.

   6. Použití podle nároku 3a 4, vyznačené tím, že M znamená atom vodíku.

   7. Použití podle nároku 3a 4, vyznačené tím, žeR znamená atom vodíku.

   8. Použití podle nároku 3a 4, vyznačené tím, že se močovinový derivát obecného vzorce I zvolí ze skupiny zahrnující:

   1 -hydroxy-1 -methy l-3-[3-trifluoro(methylsulfonoxy)fenyl]močovinu,

   1 -hydroxy-1 -methy l-3-[3-trifluoro(methy lth io)fenyl] močovinu, l-hydroxy-3-(3-methoxyfenyl)-l-methylmočovinu, 3-(3-bromofenyl)-l-hydroxy-l-methylmočovinu,

   1-hydroxy-1-methy l-3-(3-methylfenyl)močovinu, 3-(3-fluorofenyl)-l-hydroxy-l-methylmočovinu,

   1 -hydroxy-1 -methyl-3-(3-nitrofenyl)močovinu,

   1 -hydroxy-1 -methy 1-3-feny lmočovinu,
3. 3-(
4. 4-fluorofenyl)-l-hydroxy-l-methylmočovinu, 3-(4-butylfenyl)-l-hydroxy-l-methylmočovinu,

   1 -hydroxy-1 -methy l-3-(4-n itrofeny ljmočovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-(4-fenoxyfenyl)močovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -methy 1 ethy 1)—3 -[3-(methylthiol)feny 1] močovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -methy lethy l)-3-feny lmočovinu,

   3-(4-fluorofeny 1)-1 -hydroxy-1-( 1 -methy lethyl)močovinu, 3-(4-bromofenyl)-l-hydroxy-l-(l-methylethyI)močovinu, 3-(2-fluorofenyl)-l-hydroxy-l-(l-methylethyl)močovinu, l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-(3-methylfenyl)močovinu,

   1 -hy droxy-3-(3-methoxyfenyl)-1 -(1 -methyl ethyl)močovinu,

   1 -hydroxy-3-(4-methoxyfeny 1)-1 -(1 -methy lethy l)močovinu, 3-(2-chlorofenyl)-l-hydroxy-l-(l-methylethyl)močovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -methy lethy l)-3-(2-methylfenyl)močovinu,

   3-(2,6-dimethylenyl)-1 -hydroxy-1 -(1 -methy lethyl)močovinu, 3-(4-butylfenyl)-l-hydroxy-l-(l-methylethyl)močovinu,

   3-(2,5-dimethoxyfeny 1)-1 -hydroxy-1 -(1 -methylethy l)močovinu,

   1 -hydroxy-3-(2-methoxyfeny 1)-1 -(1 -methylethy l)močovinu,

   1 -hydroxy-1-( 1 -methy lethy l)-3-(4-nitrofenyl)močovinu, l-cyklohexyl-l-hydroxy-3-[4-(methylthio)fenyl]močovinu, l-cyklohexyl-l-hydroxy-3-[3-(methylthio)fenyl]močovinu, l-hydroxy-3-(3-methoxyfenyI)močovinu,

   1 -hydroxy-3-[3-(methylthio)fenyl] močovinu,

   1 -cyklooktyl-1 -hydroxy-3-fenylmočovinu, l-cyklooktyl-l-hydroxy-3-(4-methoxyfenyl)močovinu,

   1 -(1 -ethylpropy 1)-1 -hydroxy-3 -[4-(methy lthio)feny 1] močovinu,

   -46CZ 287034 B6

   1-(1-ethy lpropy 1)-1-hydroxy-3-(4-nitrofeny l)močovinu,

   3-(4-bromofenyl)-l-(l-ethylpropyl)-l-hydroxymočovinu,

   1 -ethyl-1 -hydroxy-3-feny lmočovinu, l-hydroxy-l-(3-methylbutyl)-3-fenylmočovinu, l-(2-ethoxyethyl)-l-hydroxy-3-fenylmočovinu,

   I -cyklofenyl-1 -hydroxy-3-feny lmočovinu,

   1 -(2-ethy lhexyl)-l -hydroxy-3-feny lmočo v inu,

   1 -(3,3-dimethylbuty 1)-1 -hydroxy-3 -feny lmočovinu,

   1 -hydroxy-3-feny 1-1 -(3,5,5-trimethy lhexy l)močovinu, ethylester kyseliny 6-(l-hydroxy-3-enyluriedo)-l-hexanové,

   1 -cyklohepty 1-1 -hydroxy-3-fenylmočovinu, l-hydroxy-l-oktyl-3-fenylmočovinu, l-dodecyl-l-hydroxy-3-fenylmočovinu, I-hydroxy-l-(methylpropyl)-3-fenylmočovinu, l-hydroxy-3-fenyl-l-propylmočovinu,

   1 -hydroxy-1 -penty 1-3-feny lmočovinu,

   3-(4-buty lfenyl)-1 -hydroxy-1 -pentylmočovinu, l-hydroxy-l-(2-methylpropyl)-3-[3-(methylthio)fenyl]močovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-[3-methylsulfonyl)fenyl]močovinu, l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-[3-(methylsulfonyl)fenyl]močovinu l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-[3-(methylsulfínyl)fenyl]močovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-[4-(methylsulfinyl)fenyl]močovinu, l-hydroxy-l-methyl-3-[4-(methylsulfonyl)fenyl]močovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -methy lethy 1)-3-(3,4,5-trimethoxyfenyl)močovinu a l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-(2,4,5-trimethylfenyl)močovinu.

   9. Použití podle nároku 3, vyznačené tím, že se močovinový derivát obecného vzorce I zvolí ze skupiny zahrnující:

   1 -hydroxy-1 -(1 -methy lbutyl }-3-fenylmočovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -methyl propy 1 )-3-fenylmočovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -propy lbuty l)-3-feny lmočovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -ethy lbuty 1)—3 -feny 1 močovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-(4-fenoxyfeny l)močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(3,5-bis(trifluoromethyl)fenyl)močovinu, 1-hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-methy 1-3-fenylmoČovinu,

   1 -hydroxy-1,3-dimethy 1-3-feny lmočovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -ethy lpropy l)-3-(2-fenoxy feny l)močovinu,

   1 -hydroxy-l-( l-ethylpropyl)-3-(3-fenoxyfenyl)močovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -ethy lpropyl)-3-(4-benzy lfeny l)močovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -ethylpropyl)-3-(4-benzoylfenyl)močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(4-benzyloxyfenyl)močovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -ethylpropy l)-3-[4-cyklohexy l(methoxy)feny 1] močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-[4-(3-fenylpropyloxy)fenyl]močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl}-3-(bifenyl-4yl)-močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxyfenyl)močovinu, a l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(4'-oktyloxybifenyi-4-yl)močovinu.

   10. Použití podle nároku 3 a 4, vyznačené tím, že se močovinový derivát obecného vzorce I zvolí ze skupiny zahrnující:

   -47CZ 287034 B6 l-hydroxy-l-(l-methylbutyl)-3-fenylmočovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -methy lpropy lý-3-feny lmočovinu, l-hydroxy-l-(l-propylbutyl)-3-fenylmočovinu, 1 -hydroxy-1 -(1 -ethylbutyl)-3-fenylmočovinu,
5. 5 l-hydroxy-l-( l-ethylpropyl)-3-(4-fenyloxyfenyl)močovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-methyl-3-fenylmočovinu, l-hydroxy-l,3-dimethyl-3-fenylmočovinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(2-fenoxyfenyl)močovinu a l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(3-fenoxyfenyl)močovinu.

   11. Použití podle nároku 3a 4, vyznačené tím, že se močovinový derivát obecného vzorce I zvolí ze skupiny zahrnující:

   15 1 -hydroxy-1 -methy l-3-[4-(methylthio)feny ljmočovinu, l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-[4-(methylthio)fenyl]močovinu, 1—( l-ethylpropyl)-l -hydroxy-3-(4-methylthio)fenylmočovinu, l-(l-ethylpropyl)-l-hydroxy-3-fenylmočovinu,

   1 -hydroxy-1 -methy l-3-(4-fenoxyfenyl)močovinu,

   20 1 -hydroxy-1 -(1 -ethy lpropy l)-3-(4-fenoxyfeny l)močo vinu, l-hydroxy-l-(l-ethylpropyl)-3-(4-fenoxyfenyl)močovinu,

   1 -hydroxy-1 -(1 -ethy lpropy l)-3-(2-fenoxyfeny l)močov inu, l-hydroxy-l-(l-methylethyl)-3-(4-butylfenyl)močovinu, l-hydroxy-l-{l-methylpropyl)-3-fenylmočovinu a

   25 l-hydroxy-l-( l-ethylpropyI)-3-(3-fenoxyfenyl)močovinu.

   12. Použití močovinového derivátu obecného vzorce I, jehož substituenty mají význam definovaný v nároku 1, pro výrobu farmaceutické kompozice pro léčení stavu reagujícího na

   30 inhibici biosyntézy leukotrienů, přičemž tímto stavem jsou alergické rýmy, dermatitida, syndrom akutní respirační tísně, ateroskleróza, zánětlivé choroby střev, ischemická příhoda srdeční, reperfúzní příhoda, dna, astma, lupenka, mrtvice, příhoda míšní a traumatická příhoda mozková.

   13. Použití močovinového derivátu obecného vzorce I, jehož substituenty mají význam 35 definovaný v nároku 2, pro výrobu farmaceutické kompozice pro léčení stavu reagujícího na inhibici biosyntézy leukotrienů, přičemž tímto stavem jsou alergické rýmy, dermatitida, syndrom akutní respirační tísně, ateroskleróza, zánětlivé choroby střev, ischemická příhoda srdeční, reperfúzní příhoda, dna, astma, lupenka, mrtvice, příhoda míšní a traumatická příhoda mozková.

   40 14. Použití močovinového derivátu obecného vzorce I, jehož substituenty mají význam definovaný v nároku 1, pro výrobu farmaceutické kompozice pro léčení stavu reagujícího na inhibici biosyntézy leukotrienů, přičemž tímto stavem je zánětlivá nemoc.

   15. Použití močovinového derivátu obecného vzorce I, jehož substituenty mají význam 45 definovaný v nároku 2, pro výrobu farmaceutické kompozice pro léčení stavu reagujícího na inhibici biosyntézy leukotrienů, přičemž tímto stavem je zánětlivá nemoc.