CZ2003390A3

CZ2003390A3 - Therapeutic combination of a cetp inhibitor and atorvastatin

Info

Publication number: CZ2003390A3
Application number: CZ2003390A
Authority: CZ
Inventors: Charles Lester Shear
Original assignee: Pfizer Products Inc.
Priority date: 2000-08-15
Filing date: 2001-07-23
Publication date: 2004-03-17
Also published as: TNSN01125A1; AP2003002743A0; BG107515A; PE20020340A1; SV2003000600A; WO2002013797A2; NO20030725D0; EP1309329A2; EA200300155A1; IL154348A0; HUP0303083A2; WO2002013797A3; DZ3409A1; IS6700A; BR0113200A; UY26883A1; SK1742003A3; HRP20030104A2; HUP0303083A3; AU2001270937A1

Description

Oblast techniky

Vynález se týká farmaceutických kombinací inhibitorů přenašečového proteinu cholesterylesterů (CETP), zejména ethylesteru [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny, a atorvastatinu a jeho metabolitů a farmaceuticky vhodných solí těchto sloučenin.

Dosavadní stav techniky

Ethylester [2R,4S]-4-[ (3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonyl amino] -2-ethyl- 6 -trifluormethyl- 3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny je popsán v přihlášce PCT/IB99/01532, zveřejněné 30. března 2000 jako WO 00/17164, jako inhibitor CETP pro zvyšování hladiny určitých lipidů v plasmě a snižování hladiny určitých jiných lipidů v plasmě, který tedy umožňuje prevenci a léčení chorob, jako lipidových abnormalit, atherosklerosy a kardiovaskulárních chorob. V této zveřejněné přihlášce je také popsána kombinace třídy 4-karboxyamino-2-substituovaných 1,2,3,4-tetrahydrochinolinů s přednostní skupinou inhibitorů 3-hydroxy-3-methylglutaryl-koenzym A (HMG-CoA) reduktasy, kterými jsou lovastatin, simvastatin, pravastatin, fluvastatin, atorvastatin a rivastatin.

V US předběžné přihlášce č. 60/168 051 stejného přihlašovatele, podané 30. listopadu 1999, jsou popsány krystalické formy ethylesteru [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny, zejména bezvodé a monoethanolátové krystalické formy.

V US předběžné přihlášce č. 60/167 967 stejného přihlašovatele, podané 30. listopadu 1999, jsou popsány způsoby výroby ethylesteru [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino] -2 -ethyl-6-tri fluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny.

Přeměna 3-hydroxy-3-methylglutaryl-koenzymu A (HMG-CoA) na mevalonát je časným a rychlost určujícím stupněm biosyntetické dráhy cholesterolu. Tento stupeň je katalyzován enzymem HMG-CoA reduktasou. Statiny inhibují HMG-CoA reduktasu při katalyzování této konverze. Jako takové jsou statiny hypolipidemickými činidly.

Vápenatá sůl atorvastatinu (atorvastatin-kalcium), popsaná v US patentu č. 5 273 995, který je zde citován náhradou za přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu, je v současné době distribuována jako Lipitor® a odpovídá následujícímu vzorci

Atorvastatin-kalcium je selektivním kompetitivním inhibitorem HMG-CoA. Jako takový je účinným hypolipidemickým činidlem. Atorvastatin ve formě volné karboxylové kyseliny se vyskytuje převážně jako lakton vzorce

a je popsán v US patentu č. 4 681 893, který je zde citován náhradou za přenesení celého jeho obsahu do tohoto textu.

Hydroxylované deriváty atorvastatinu (hydroxymetabolity) vzorce

kde R¹ představuje hydroxyskupinu, jsou popsány v US patentu č.

385 929, který je citován náhradou za přenesení jeho obsahu do tohoto textu.

• · · · • · ·

« φ · φ φφ ··

Jedním derivátem popsaným v US patentu č. 5 385 929 je (2R-trans)-5-(4-fluorfenyl)-2-(1-methylethyl)-N-(2-hydroxyfenyl)-4fenyl-1-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl]-1Hpyrrol-3-karboxamid.

Jiným derivátem popsaným v US patentu č. 5 385 929 (příkladu 2) je (2R~trans)-5-(4-fluorfenyl)-2-(1-methylethyl)-N-(3-hydroxyfenyl)-4-fenyl-l-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl]-IH-pyrrol-3-karboxamid.

Dalším derivátem popsaným v US patentu č. 5 385 929 (příkladu 1) je (2R-trans)-5-(4-fluorfenyl)-2-(1-methylethyl)-N~(4-hydroxyfenyl)-4-fenyl-l-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl] -IH-pyrrol-3-karboxamid.

Atherosklerosa je stav, pro který jsou charakteristické nepravidelně distribuované lipidové usazeniny v intimě artérií, jako jsou artérie koronární, karotidová a periferní. Atherosklerotické srdeční koronární chorobě (zde označována zkratkou CHD) se přičítá asi 53 % všech úmrtí, které lze přisoudit kardiovaskulárním příhodám. Na CHD připadá téměř polovina (asi 50 až 60 mld. dolarů) celkových výdajů na kardiovaskulární zdravotní péči v USA a asi 6 % celkových ročních výdajů státu na zdravotnictví. Přes snahu ovlivnit sekundární rizikové faktory, jako je mj. kouření, obezita a nedostatek tělesné námahy, a léčení dyslipidemie dietetickými opatřeními a lékovou terapií, CHD ve Spojených státech zůstává nej častější příčinou smrti.

Ukázalo se, že riziko rozvoje takového stavu silně koreluje s určitými hladinami lipidů v plasmě. Ačkoliv zvýšený LDL cholesterol je možno považovat za nejlépe poznanou formu dyslipidemie, v žádném případě se nejedná o jediný významný lipid, který se podílí na CHD. Jako faktor zvyšující riziko CHD je také známa nízká hladina HDL cholesterolu (Gordon, D. J. et al., High• « · « · 4 φφ Φ ΦΦΦΦ Φ

Φ 4 4 * Φ ·

-Density Lipoprotein Cholesterol and Cardiovascular Disease, Circulation, 1989, 79: 8 až 15) .

Vysoká hladina LDL cholesterolu a triglyceridů je přímo úměrná riziku rozvoje kardiovaskulárních chorob, zatímco vysoká hladina HDL cholesterolu je úměrná nepřímo. Dyslipidemie tedy není jednotnou charakteristikou CHD, nýbrž může zahrnovat jednu nebo více lípidových aberací.

Z řady faktorů ovlivňujících hladiny těchto charakteristických látek závisejících na nemoci přenašečový protein cholesterylesterů (CETP) ovlivňuje všechny tři. Zjistilo se, že u řady druhů savců, včetně člověka, je úlohou tohoto 70kDa plasmového glykoproteinu přenášet cholesterylester a triglycerid mezi částicemi lipoproteinů, jako jsou lipoproteiny s vysokou hustotou (HDL), lipoproteiny s nízkou hustotou (LDL), lipoproteiny s velmi nízkou hustotou (VLDL) a chylomikrony. Čistým výsledkem aktivity CETP je snížení HDL cholesterolu a zvýšení LDL cholesterolu. Tento účinek na lipoproteinový profil je považován za proatherogenní, zejména u subjektů, jejichž lipidový profil vytváří zvýšené riziko onemocnění CHD.

Zcela uspokojivé terapie zvyšující HDL neexistují. Niacin může významně zvýšit HDL, ale dochází ke značným problémům s jeho snášenlivostí, což snižuje komplianci. Fibráty a inhibitory HMG CoA reduktasy HDL cholesterol zvyšují pouze mírně (asi 10 až 12 %). Existuje tedy silná potřeba vyvinout dobře snášené léčivo, které by významně zvyšovalo hladinu HDL v plasmě, čímž by revertovalo nebo zpomalovalo rozvoj atherosklerosy.

Vysoké hladiny cholesterolu a lipidů v krvi jsou stavy, které se podílejí na nástupu atherosklerosy. Je dobře známo, že inhibitory 3-hydroxy-3-methylglutaryl-koenzym A reduktasy (HMGCoA reduktasy) jsou u člověka účinné při snižování hladiny cho• · · · ····

lesterolu, zejména lipoproteinů o nízké hustotě - cholesterolu (LDL-C) , v krevní plasmě (Brown a Goldstein, New England Journal of Medicine, 1981, 305, č. 9, 515 až 517). Nyní se zjistilo, že snižování hladiny LDL-C umožňuje ochranu před CHD (viz například The Scandinavian Simvastatin Survival Study Group: Randomised trial of cholesterol lowering in 4444 patients with coronary heart disease: the Scandinavian Simvastatin Survival Study (4S), Lancet, 1994, 344, 1383 až 1389; a Shepherd, J. et al., Prevention of coronary heart disease with pravastatin in men with hypercholesterolemia, New England Journal of Medicine, 1995,

333, 1301 až 1307) .

Angína pectoris je ostrou svíravou bolestí v hrudi, která často vyzařuje z prekordia do levého ramene a dolů do levé paže. Je často vyvolána ischemií srdce a její příčinou je obvykle koronární choroba.

V současně době se léčení symptomatické angíny pectoris v jednotlivých zemích liší. V USA jsou pacienti se symptomatickou stabilní angínou pectoris často léčeni chirurgicky nebo PTCA. U pacientů, kteří prodělali PTCA nebo jiný chirurgický zákrok za účelem léčení angíny pectoris, často dochází ke komplikacím, jako je restenosa. Tato'restenosa se může manifestovat buď jako krátkodobá proliferační odpověď na trauma při angioplastice nebo jako dlouhodobě progredující atherosklerotický proces jak u transplantovaných cév, tak i segmentů podrobených angioplastice.

V rámci symptomatického léčení angíny pectoris se používá řady léčiv, často jako kombinace dvou či více léčiv z následujících tříd: beta blokátorů, nitrátů a blokátorů vápníkového kanálu. Většinu těchto pacientů, pokud ne všechny, je také třeba léčit činidlem snižujícím lipidy. The National Cholesterol Education Program (NCEP) řadí pacienty s existující chorobou

koronárních artérií do zvláštní třídy vyžadující agresivní léčení zvýšeného LDL-C.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je farmaceutická kompozice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství kompozice zahrnující

a) ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny;

b) atorvastatin nebo odpovídající cyklizovanou laktonovou formu atorvastatinu, 2-hydroxy-, 3-hydroxy- nebo 4-hydroxyderivát atorvastatinu nebo cyklizované laktonové formy atorvastatinu nebo farmaceuticky vhodnou sůl kterékoliv z těchto sloučenin; a

c) farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo.

Deriváty (hydroxymetabolity) cyklizované laktonové formy atorvastatinu nebo atorvastatinu (tj. necyklizované formy) uváděné jako 2-hydroxy-, 3-hydroxy- nebo 4-deriváty odpovídají obecnému vzorci I nebo IA

kde R¹ představuje hydroxyskupinu.

Kompozice přednostně obsahuje atorvastatin, zvláště přednostně hemivápenatou sůl atorvastatinu.

R¹ přednostně představuje 2-hydroxyskupinu.

Předmětem vynálezu je také způsob léčení savce (například člověka mužského nebo ženského pohlaví), který takové léčeni potřebuje, jehož podstata spočívá v tom, že se takovému savci podává terapeuticky účinné množství

a) první sloučeniny, kterou je ethylester [2R, 4S]-4-[ (3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2 -ethyl-6-tri fluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny; a

b) druhé sloučeniny, kterou je atorvastatin nebo cyklizovaná laktonová forma atorvastatinu, 2-hydroxy-, 3-hydroxy- nebo 4-hydroxyderivát kterékoliv z těchto sloučenin nebo farmaceutic ky vhodná sůl kterékoliv z výše uvedených sloučenin;

přičemž první sloučenina a druhá sloučenina se popřípadě podávají spolu s farmaceuticky vhodným nosičem, vehikulem nebo ředidlem.

Kompozice přednostně obsahuje atorvastatin, zvláště přednostně hernívápenatou sůl atorvastatinu.

R¹ přednostně představuje 2-hydroxyskupinu.

V přednostním provedení se první sloučenina a druhá slouče nina podávají současně.

V přednostním provedení se první sloučenina a druhá slouče nina podávají následně v jakémkoliv pořadí.

Léčení přednostně zahrnuje antiatherosklerotické léčení.

Léčení přednostně zahrnuje zpomalování a/nebo zastavení progrese atherosklerotických plátů.

Progrese atherosklerotických plátů je přednostně zpomalována v koronárních artériích.

Progrese atherosklerotických plátů je přednostně zpomalována v karotidové artérii.

Progrese atherosklerotických plátů je přednostně zpomalována v periferním arteriálním systému.

Léčení atherosklerosy přednostně vyvolává regresi atherosklerotických plátů.

K regresi atherosklerotických plátů přednostně dochází v koronárních artériích.

* 9

K regresi atherosklerotických plátů přednostně dochází v karotidové artérii.

K regresi atherosklerotických plátů přednostně dochází v periferním arteriálním systému.

Léčení přednostně zahrnuje zvyšování HDL a antihyperlipidemické léčení (včetně snižování LDL).

Léčení přednostně zahrnuje antianginosní léčení.

Léčení přednostně zahrnuje zvládání kardiálního rizika.

Předmětem vynálezu je také kit pro dosahování terapeutického účinku u savců, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje

a) v první jednotkové dávkovači formě ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylaminol-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo; a

b) ve druhé jednotkové dávkovači formě atorvastatin nebo cyklizovanou laktonovou formu atorvastatinu, 2-hydroxy-, 3-hydroxy- nebo 4-hydroxyderivát kterékoliv z těchto sloučenin nebo farmaceuticky vhodnou sůl kterékoliv z výše uvedených sloučenin a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo; a

c) obalový prostředek pro první a druhou dávkovači formu.

Kompozice přednostně obsahuje atorvastatin, zejména hemivápenatou sůl atorvastatinu.

R¹ přednostně představuje 2-hydroxyskupinu.

V konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu je terapeutickým účinkem prevence a/nebo léčení atherosklerosy.

V ještě konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu léčení atherosklerosy zpomaluje progresi atherosklerotických plátů.

V ještě konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu ke zpomalení progrese atherosklerotických plátů dochází v koronárních artériích.

V ještě konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu ke zpomalování progrese atherosklerotických plátů dochází v karotidové artérii.

V ještě konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu ke zpomalování progrese atherosklerotických plátů dochází v periferním arteriálním systému.

V dalším konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu léčení atherosklerosy vyvolává regresi atherosklerotických plátů.

V ještě konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu k regresi atherosklerotických plátů dochází v koronárních artériích.

V ještě konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu k regresi atherosklerotických plátů dochází v karotidové artérii.

V ještě konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu k regresi atherosklerotických plátů dochází v periferním arteriálním systému.

V dalším konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu je terapeutickým účinkem léčení nízkých hladin HDL a hyperlipidemie.

V dalším konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu je terapeutickým účinkem prevence a/nebo léčení angíny pectoris.

V dalším konkrétnějším provedení tohoto kitu podle vynálezu je terapeutickým účinkem zvládání kardiálního rizika.

Předmětem vynálezu je také první farmaceutická kompozice pro použití s druhou farmaceutickou kompozicí pro dosahování terapeutického účinku u savců, přičemž tento účinek je větší než účinek, jakého se dosáhne podáváním první nebo druhé kompozice odděleně a přičemž druhá kompozice obsahuje atorvastatin nebo cyklizovanou laktonovou formu atorvastatinu, 2-hydroxy-, 3-hydroxy- nebo 4-hydroxyderivát kterékoliv z těchto sloučenin nebo farmaceuticky vhodnou sůl kterékoliv z výše uvedených sloučenin a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo a první farmaceutická kompozice obsahuje ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo.

Předmětem vynálezu je také první farmaceutická kompozice pro použití s druhou farmaceutickou kompozicí pro dosahování terapeutického účinku u savců, přičemž tento účinek je větší než účinek, jakého se dosáhne podáváním první nebo druhé kompozice odděleně a přičemž druhá kompozice obsahuje ethylester [2R,4S]4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2 --ethylβ-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo a první farmaceutická kompozice obsahuje atorvastatin nebo cyklizovanou laktonovou formu atorvastatinu, 2-hydroxy-, 3-hydroxy- nebo 4A A AAAA

-hydroxyderivát kterékoliv z těchto sloučenin nebo farmaceuticky vhodnou sůl kterékoliv z výše uvedených sloučenin a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo.

Přednost se dává provedením těchto dvou kompozic, která jsou popsána dále.

Terapeutickým účinkem je přednostně prevence a/nebo léčení atherosklerosy.

Terapeutickým účinkem je přednostně snižování LDL-C a zvyšování HDL-C u savců, kteří trpí hyperlipidemií a nízkými hladinami HDL.

Terapeutickým účinkem je přednostně prevence angíny u savců, kteří jí jsou vysoce ohroženi.

Terapeutickým účinkem je přednostně zvládání kardiálního rizika u savců ohrožených srdeční příhodou.

R¹ přednostně představuje 2-hydroxyskupinu.

Antiatherosklerotický účinek se přednostně manifestuje zpomalením progrese atherosklerotických plátů.

ti ti • ti

Antiatherosklerotický účinek se přednostně manifestuje regresí atherosklerotických plátů.

Pod pojmem farmaceuticky vhodná sůl se rozumí soli s netoxickými anionty, jejichž neomezujícími příklady jsou chloridy, bromidy, jodidy, sulfáty, hydrogensulfáty, fosfáty, acetáty, maleáty, fumaráty, oxaláty, laktáty, tartráty, citráty, glukonáty, methansulfonáty a 4-toluensulfonáty. Do rozsahu tohoto pojmu také spadají soli s netoxickými kationty, jejichž neomezujícími příklady jsou soli sodíku, draslíku, vápníku, hořčíku, amonné soli nebo soli protonovaného benzathinu (Ν,Ν¹-díbenzylethylendiaminu), cholinu, ethanolaminu, diethanolaminu, ethylendiaminu, meglaminu (N-methylglukaminu), benethaminu (N-benzylfenethylaminu), piperazinu nebo tromethaminu (2-amino-2-hydroxymethyl-1,3-propandiolu).

Pod pojmem kardiální riziko, jak se ho používá v tomto textu, se rozumí pravděpodobnost, že u subjektu v budoucnu dojde k srdeční příhodě, jako například infarktu myokardu, srdeční zástavě, srdečnímu selhání a/nebo srdeční ischémii. Kardiální riziko se vypočítá za použití Framinghamské rovnice pro výpočet rizika. Pod pojmem zvládání kardiálního rizika nebo zvládnutí • · ·· · · kardiálního rizika se rozumí podstatné snížení rizika budoucí srdeční příhody.

Pod pojmem rozpouštědlo inertní vůči reakci nebo inertní rozpouštědlo se v tomto textu rozumí rozpouštědlo nebo směs rozpouštědel neinteragující s výchozími látkami, reakčními činidly, meziprodukty nebo produkty způsobem, který by měl nepříznivé účinky na výtěžek požadovaného produktu.

Odborníkům v tomto oboru bude zřejmé, že určité sloučeniny podle vynálezu obsahují jeden nebo více atomů, které mohou být v v konkrétní stereochemické nebo geometrické konfiguraci za vzniku stereoísomerů a konfiguračních isomerů. Všechny takové isomery a jejich směsi spadají do rozsahu tohoto vynálezu. Do rozsahu vynálezu rovněž spadají hydráty a solváty sloučenin podle vynálezu.

Do rozsahu pojmu savec spadají všichni savci, jejichž plasma obsahuje CETP, tedy například králíci a primáti, jako opice a lidé (například muži nebo ženy). V plasmě některých jiných, savců, například psů, koček, skotu, koz, ovcí a koní,

CETP obsažen není, takže tito savci do rozsahu tohoto pojmu nespadaj í.

Pod pojmem léčení se rozumí také preventivní (například profylaktické) a paliativní léčení.

Přívlastkem farmaceuticky vhodné se označují vehikula, nosiče, ředidla, excipienty a/nebo soli, které jsou kompatibilní s ostatními složkami formulace a nepoškozují recipienta.

Následuje podrobný popis vynálezu.

•9 9999

• 9

Ethylester [2R,4S]-4- [ (3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2Hchinolin-1-karboxylové kyseliny je popsán v mezinárodní patentové přihlášce PCT/IB99/01532, zveřejněné 30. března 2000 jako WO 00/17164 a je možno ho snadno připravovat způsoby popsanými v uvedené přihlášce (viz příklad 7 (racemát) a příklad 120). Způsoby výroby této sloučeniny (a jejích polymorfů) jsou také popsány v US předběžných přihláškách stejného přihlašovatele č. 60/168 051 a 60/168 051 a v dalším textu.

Příklad 1

Ethylester cis-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino] -2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny

Roztok ethylesteru cis-4-(3,5-bistrifluromethylbenzylamino)-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny (2,0 g, 3,7 mmol) a pyridinu (0,58 g, 7,4 mmol) ve 100 ml dichlormethanu se ochladí v lázni z ledu a vody, přičemž se k němu pomalu přidá methylchlorformiát (0,87 g, 9,2 mmol). Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, promyje dvakrát 2M roztokem kyseliny chlorovodíkové, vysuší síranem hořečnatým a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Získaný surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 5 až 10% ethylacetátu v hexanech jako elučního činidla. Získá se 1,8 g sloučeniny uvedené v nadpisu. MS m/z 601 (M⁺ + l) . ^-Η NMR (koaleskuj ící směs konformerů,

CDC1	3) : δ	0,6 -	0, 8	(bm,	3H), 1,2 -	1,3	(bm,	3H	) , 1,3 -	1,5	(bm,
2H) ,	1,6 -	- 1,7	(bm,	1H) ,	2,1 - 2,3	(bm,	1H) ,	3,	7 - 3,9	(bs,	3H) ,
4,0	- 4,4	(bm,	4H) ,	5,0	- 5,6 (bm,	2H) ,	7,1	(s,	1H), 7,	4 -	7,6
(bm,	2H) ,	7,6 -	7,8	(bm,	3H) .

·« 99 44

449 9 49

4 4 ·· · · 9 4 9 • · · < » 4 4 • ··· 4 9 9 4 9

4 4 4 4 4 4 4

Ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny se v opticky obohacené formě připraví optickým štěpením odpovídajícího racemátů nebo meziproduktu při jeho syntéze za použití standardních způsobů.

Příklad 2 (1-Benzotriazol-l-ylpropyl)-(4-trifluormethylfenyl)amin

Do dvoulitrové čtyhrdlé nádoby se pod atmosférou dusíku předloží benzotriazol (36,96 g, 310 mmol, 1,0 ekv.) a suchý toluen (400 ml). Ke vzniklé směsi se poté během 1 minuty přidá roztok 4-(trifluormethyl)anilinu (39,1 ml, 310 mmol, 1,0 ekv.) a 50 ml toluenu o teplotě místnosti. Potom se k výsledné směsi během 20 minut přidá roztok propionaldehydu (24,6 ml, 341 mmol, 1,1 ekv.) a 50 ml toluenu o teplotě místnosti. Během přídavku dojde k exotermickému zvýšeni teploty z 23°C na 30°C. Vzniklá směs se 24 hodin míchá, načež se k ní přidá n-heptan (500 ml). n-Heptanová suspenze se 1 hodinu míchá a přefiltruje. Pevná látka se promyje n-heptanem (1 x 100 ml a poté 1 x 200 ml) a vysuší. Izoluje se (1-benzotriazol-l-ylpropyl)-(4-trifluormethylfenyl )amin ve formě zářivě bílých jehlic (81,3 g, 82 %).

Po 24 hodinách se z filtrátu izoluje druhá frakce (8,7 g, 9 %). Teplota tání 130 až 132°C. ^-H NMR (DMSO-dg, 400 MHz): δ 0,82 (t,

3H, J = 7,5 Hz), 2,25 (m, 2H), 6,49 (m, 1H), 6,80 (d, 2H, J 8,7 Hz), 7,35 (m, 3H), 7,50 (m, 1H), 7,88 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,99 (m, 1H), 8,09 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,35 (m, 3H), 7,50 (m,

1H), 7,88 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,99 (m, 1H), 8,09 (d, 1H, J =

8,5 Hz). ¹³C NMR (DMSO-d₆, 100 MHz): δ 149,32, 146,19, 131,46,

127,73, 126,8, 125,33 (q, J = 270 Hz), 124,44, 119,88, 118,27 (q, J= 31,7 Hz), 112,91, 11,56, 71,03, 28,08, 10,29. DEPT spektrum: kvartérní uhlíky δ 149,32, 146,19, 131,46, 125,33, ·· ····

•		• ·♦
	• ·	··	• ·
•	•	•	•
•	• ·	•	•
•	•	•	•

• a · • · · • · · • · · · ·· ··

118,27, CH Uhlíky δ 127,73, 126,8, 124,44, 119,88, 112,91,

111,56, 71,03, CH₂ uhlík δ 10,29. IR (drifty) 3292 (s) , 3038 (m), 29,75 (m), 1621 (s), 1331 (s), 1320 (s), 1114 (vs). Analýza pro ^16^15^4^3^: vypočteno: C 59,99, H 4,72, N 17,49, nalezeno (první frakce): C 60,16, H 4,74, N 17,86, nalezeno (druhá frakce): C 59,97, H 4,66, N 17,63

Příklad 3

Benzylester cis-(2-ethyl-6-trifluormethyl-l,2,3,4-tetrahydrochinolin-4-yl)karbamové kyseliny

Do jednotlitrové čtyřhrdlé nádoby se pod atmosférou dusíku předloží benzylester N-vinylkarbamové kyseliny (27,66 g, 156 mmol, 1,0 ekv.) a suchý toluen (500 ml). Ke vzniklé směsi se přidá (1-benzotriazol-l-ylpropyl)-(4-trifluormethylfenyl)amin (50,0 g, 156 mmol, 1,0 ekv.) a monohydrát p-toluensulfonové kyseliny (297 mg, 1,56 mmol, 0,01 ekv.). Reakční směs se zahřívá na 70°C, po 2 hodinách ochladí na teplotu místnosti, přemístí do dělicí nálevky a přidá se k ní ethylacetát (500 ml). Ethylacetátová směs se promyje 1 x 200 ml IM hydroxidu sodného, 1 x 200 ml vody a 1 x 200 ml vodného chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a přefiltruje. Pevná látka se promyje 1 x 50 ml ethylacetátu. Filtrát se zkoncentruje na objem asi 250 ml a přidá se k němu 500 ml toluenu. Toluenová směs se zkoncentruje na objem asi 500 ml a přidá se k ní 500 ml n-heptanu. Výsledná suspenze se 1 hodinu míchá a přefiltruje přes Buchnerovu nálevku. Po vysušení se získá benzylester cis-(2-ethyl-6-trifluormethyl-1,2,3,4-tetrahydrochinolin-4-yl)karbamové kyseliny ve formě bílého prášku (45,04 g, 76 %) o teplotě tání 155 až 157°C. ³H

NMR (DMSO-dg, 400	MHz)	: δ 0,92	(t, 3H, J =	7,5	Hz) ,	1,5	(m,	3H) ,
2,00 (m, IH), 3,35	(m,	IH), 4,77 (m, IH),	5,07	(d,	IH,	J =	12,5
Hzu), 5,15 (d, IH,	J =	12,5 Hz)	, 6,35 (S,	IH) ,	6,61	(d,	IH,	J =

8,5 Hz), 7,12 (s, IH), 7,18 (dd, IH, J = 1,9, 8,5 Hz), 7,4 (m,

5H), 7,70 (d, IH, J = 9,1 Hz). 13c NMR (DMSO-dg, 100 MHz): δ

157,03, 149,02, 137,79, 128,82, 128,23, 128,03, 125,9 (g, J =

270 Hz), 125,06, 123,50, 121,73, 115,2 (q, J = 31,7 Hz), 113,33, 65,85, 52,09, 47,83, 34,02, 28,68, 9,93. DEPT spektrum:

kvartérní uhlíky δ 157,03, 149,02, 137,79, 125,9, 121,73, 115,2, CH uhlíky δ 128,82, 128,23, 128,03, 15,06, 123,50, 113,33, 52,09, 47,83, CH₂ uhlíky δ 65,85, 34,02, 28,68, CH₃ uhlík δ 9,93. IR (drifty): 3430 (m) , 33,03 (s) , 29,51 (m) , 1686 (vs) , 1542 (vs) , 1088 (vs). MS (APCI+) m/z (rel. intenzita) 379 (M+H⁺, 53), 228 (100). Analýza pro C20H21N2O2F3: vypočteno: C 63,48, H 5,59, N 7,40, nalezeno: C 63,69, H 6,06, N 7,36

Příklad 4

Ethylester cis-4-benzyloxykarbonylamino-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chínolin-l-karboxylové kyseliny

Do třílitrové čtyřhrdlé nádoby se pod atmosférou dusíku předloží benzylester cis-(2-ethyl-6-trifluormethyl-l,2,3,4-tetrahydrochinolin-4-yl)karbamové kyseliny (96,0 g, 254 mmol, 1,0 ekv.), suchý dichlormethan (720 ml) a suchý pyridin (103 ml, 1,27 mol, 5,0 ekv.). Ke vzniklé směsi se během 4 hodin pomalu přidá roztok ethylchlorformiátu (121 ml, 1,27 mol, 5,0 ekv.) v suchém dichlormethanu (240 ml). Přídavek vyvolá exotermickou reakci a je nutno použít zpětného chladiče. Po dokončení přídavku chlorformiátu se reakční směs ochladí v ledové lázni a přidá se k ní 1350 ml 1M hydroxidu sodného. Vzniklá směs se 15 minut míchá a přemístí do dělicí nálevky. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje lxl litrem dichlormethanu. Spojené dichlormethanové vrstvy se promyjí 1 x 1350 ml ÍM kyseliny chlorovodíkové, lxl litrem nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného a 1 χ 1 litrem vodného chloridu sodného, vysuší síranem

sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje na oranžový olej.

K tomuto zbytku se přidá 570 ml absolutního ethanolu. Ethanolický roztok se zkoncentruje. Pevná látka se rozpustí ve 1370 ml absolutního ethanolu a k výslednému roztoku se během 45 minut přikape 570 ml vody. Vzniklá hustá suspenze se 18 hodin míchá a poté přefiltruje. Oddělená pevná látka se promyje chladnou směsí absolutního ethanolu a vody v poměru 7 : 3 (1x250 ml a poté 1 x 100 ml) a vysuší (ve vakuové sušárně při 45 C). Získá se ethylester cis-4-benzyloxykarbonylamino-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny ve formě krystalické bílé pevné látky (94,54 g, 83 %) o teplotě tání 92 až 96°C. lH NMR (CDC1₃, 400 MHz): δ 0,84 (t, 3H, J = 7,4 Hz),

1,28 (t, 3H, J = 7,0 Hz), 1,4 (m, 2H), 1,62 (m, ÍH), 2,53 (m,

ÍH), 4,23 (m, 2H), 4,47 (m, ÍH), 4,79 (m, ÍH), 5,01 (d, ÍH, J =

9,2 Hz), ř,18 (m, 2H), 7,4 (m, 5H), 7,5 (m, 2H), 7,57 (m, ÍH). ¹³C NMR (CDCI3, 100 MHz): δ 155,97, 154,43, 139,44, 136,21,

134,33, 128,61, 128,33, 128,22, 126,32 (q, J = 31,17 Hz),

126,18, 124,22, 124,19, 124,12 (q, J = 273 Hz), 120,74, 120,70, 67,22, 62,24, 53,47, 46,79, 37,75, 28,25, 14,38, 9,78. DEPT spektrum: kvarterní uhlíky δ 155,97, 154,43, 139,44, 136,21, 134,33, 126,32, 124,12, CH uhlíky δ 128,61, 128,33, 128,22, 126,18, 124,22, 124,19, 120,74, 120,70, 53,47, 46,79, CH₂ uhlíky δ 67,22, 62,24, 37,75, 28,25, CH₃ uhlíky δ 14,38, 9,78. IR (drifty) 3304 (s), 30,67 1723 (s), 1693 (s), 1545

451 (M+H+, 2), 300 (100) (m), 3033 (m), 29,82 (m), 2932 (m), (s). MS (APCI+) m/z (rel. intenzita) Analýza pro C23H25N2O4F3: vypočteno: C

61,33, H 5,60,

N 6,22, nalezeno

C 61,07, H 5,69, N 6,22

Příklad 5

Ethylester cis-4-amino-2-ethyl-6-trifluromethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny • · · · · · » · · · · 9 9 · • · · · ·»

Do jednotlitrové čtyřhrdlé nádoby se pod atmosférou dusíku předloží ethylester cis-4-benzyloxykarbonylamino-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny (40,1 g, 89 mmol, 1,0 ekv.), methanol (400 ml) a mravenčan amonný (14,0 g, 223 mmol, 2,5 ekv.). Ke vzniklé směsi se přidá 10% palladium na uhlíku (50% vodná vlhkost) (4,0 g). Vzniklá suspenze se 1 hodinu zahřívá na 40°C. Po 1,5 hodiny se reakční směs ochladí na teplotu místnosti a přefiltruje přes celit. Filtrační koláč se promyje 2 x 100 ml methanolu. Filtrát se zkoncentruje na objem asi 75 ml, přemístí do dělicí nálevky a zředí 400 ml ethylacetátu. Ethylacetátová směs se promyje 1 x 125 ml nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného, 1 x 100 ml vodného chloridu sodného, vysuší síranem sodným a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje na čirý olej. Tento olej se nechá vykrystalovat ze 100 ml n-heptanu. Získá se ethylester cis-4-amino-2-ethyl-6-trifluromethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny ve formě bílé krystalické pevné látky (26,05 g, 93 %) o teplotě tání 61,5 až 63,5°C. NMR (CDC1₃, 400 MHz): δ 0,79 (t,

3H, J = 7,5 Hz), 1,24 (m, 4H), 1,42 (m, IH), 1,51 (brs, 2H),

1,62 (m, IH), 2,46 (m,IH), 3,73 (m, IH), 4,17 (m, 2H), 4,36 (m, IH), 7,44 (m, 2H), 7,66 (m, IH). ¹³C NMR (CDCI3, 100 MHz): δ 154,6, 139,3 138,9, 126,3 (q, J = 32 Hz), 125,7, 124,3 (q, J = 271 Hz), 123,5, 119,8, 61,96, 54,16, 46,91, 41,50, 28,85, 14,38, 9,60. DEPT spektrum: kvarterní uhlíky δ 154,6, 139,3, 138,9, 126,3, 124,3, CH uhlíky δ 125,7, 123,5, 119,8, 54,16, 46,91, CH₂uhlíky δ 61,96, 41,50, 28,85, CH₃ uhlíky δ 14,38, 9,60. IR (drifty) 3350 (s), 3293 (m), 2972 (s), 1697 (vs). MS (ES + ) m/z (rel. intenzita) 358 (m+H+CH₃+CN+, 55), 317 (M+H+, 7), 300 (100). Analýza pro C15H2.9N2O2F3: vypočteno: C 56,96, H 6,06, N 8,86, nalezeno: C 56,86, H 6,28, N 8,82.

Příklad 6

Hemi-(-)-dibenzoyl-L-tartrátová sůl ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-amino-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny

Do jednolitrové nádoby se pod atmosférou dusíku předloží ethylester cis-4-benzyloxykarbonylamino-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny (24,0 g, 75,9 mmol, 1,0 ekv.) a (-)-dibenzoyl-L-vinná kyselina (bezvodá) (27,19 g, 75,9 mmol, 1,0 ekv.). Ke vzniklé směsi se přidá 300 ml přibližně 97% ethanolu (který se připraví tak, že 10,5 ml vody přidá do 500 ml absolutního ethanolu, směs se promíchá a odměří se 300 ml). Vzniklá směs 18 hodin míchá při teplotě místnosti a poté přefiltruje. Pevná látka se promyje 1 x 48 ml přibližně 97% ethanolu a vysuší. Získá se hemi-(-)-dibenzoyl-L-tartrátová sůl ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-amino-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny ve formě krystalické bílé pevné látky (14,77 g, 39 %) o teplotě tání 189,5 až 191,5°C (za rozkladu) . ^-H NMR (DMSO-dg, 400 MHz) : δ 0,62 (t, 3H, J = 7,3

Hz), 1,16 (t, 3H, J = 7,1 Hz), 1,3 m, 3H, 2,5 (m, ÍH), 4,1 (m, 4H), 5,63 (s, ÍH, methinový proton v DBTA), 7,47 (m, 2H, aromatické vodíky DBTA), 7,6 (m, 3H, aromatické vodíky DBTA), 7,68 (s, ÍH), 7,95 (m, 2H), 8,2 (brs, NH₃ ⁺ , neintegroval). ¹³C NMR (DMSO-dg, 100 MHz): δ 169,85, 156,53, 154,10, 140,14, 134,59,

133,51, 130,74, 129,69, 128,98, 126,74, 124,82 (q, J = 31,7 Hz), 124,69 (q, J = 271 Hz), 124,50, 120,90, 74,79, 61,14, 53,51, 45,94, 18,81, 28,23, 14,63, 9,58. DEPT spektrum: kvarterní uhlíky δ 169,85, 165,53, 154,10, 140,14, 134,59, 130,74, 124,82, 124,69, CH uhlíky δ 133,51, 129,69, 128,98, 126,74, 124,50, 120,90, 74,49, 53,51, 45,94, CH₂ uhlíky δ 61,14, 38,81, 28,23, CH₃ uhlíky δ 14,63, 9,58. IR (drifty) 3278 (m), 2400-3100 • · · · φ φ • φ * φ · φ · φ • φ φ φφφφ φφφ φφφφφφφ φφ φφ (široký), 1703 (vs). MS (ES+) m/z (rel. intenzita) 358 (M+H+CH₂CN+, 55), 317 (M+H+, 7), 300 (100). Analýza pro

C15H19N2O2F3.C9H7O4: vypočteno: C 58,18, H 5,29, N 5,65, nalezeno: C 57,99, H 5,15, N 5,64. Chirální HPLC: mobilní fáze směs n-hexanu, 2-propanolu a kyseliny octové v poměru 950 : 50 : 2, rychlost průtoku 1,50 ml/min, teplota sloupce 40 °C, sloupec Chiralpak AD 4,6 x 250 mm, koncentrace vzorku asi 0,5 mg/ml směsi n-hexanu a 2-propanolu v poměru přibližně 1:1. Autentický racemát vykazuje retenční dobu 7,5 min a 10,0 min. Herní-(-)-dibenzoyl-L-tartrátová sůl ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-amino-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny: 10,0 min, 88,9%, 7,5 min <<1%, 2,0 min (rozpouštědlová přední frakce) 11,1 %. [a]_D = -153 (c = 1,07, CH3OH).

Příklad 7 p-Toluensulfonátová sůl ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-(3,5-bis-trifluormethylbenzylamino)-2~ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny

Hemi-(-)-dibenzoyl-L-tartrátová sůl ethylesteru (-)(2R,4S)-4 -amino-2 -ethyl- 6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny (13,0 g, 26,2 mmol, 1,0 ekv.) se v 500ml dělicí nálevce suspenduje v 1,2-dichlorethanu (260 ml). Vzniklá směs se promyje 1 x 65 ml IM hydroxidu sodného a 1 x 65 ml chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje na objem asi 80 ml, přemístí do 250ml tříhrdlé nádoby a přidá se k němu 3,5-bis(trifluormethyl)benzaldehyd (4,53 ml, 27,5 mmol, 1,05 ekv.). Reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti pod atmosférou dusíku, načeš se k ní v jedné dávce přidá triacetoxyborhydrid sodný (11,1 g, 52,4 mmol, 2,0 ekv.). Bílá suspenze se 18 hodin míchá, přidá se k ní 50 ml 1,2-dichlorethanu a 50 ml 2M hydroxidu sodného. Vodná vrstva se extrahuje 2 x 50 ml 1,2-dichlorethanu. Spojené orga24

nické extrakty se promyjí 1 x 31 ml 1M kyseliny chlorovodíkové, x 50 ml nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného a 1 x 50 ml vodného chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje na čirý olej. Tento olej se rozpustí v methanolu (71 ml). K methanolickému roztoku se přidá monohydrát p-toluensulfonové kyseliny (5,23 g, 27,5 mmol, 1,05 ekv.) a po 5 minutách 284 ml isopropyletheru. Výsledný roztok se zkoncentruje na objem asi 35 ml, přemístí do 500ml tříhrdlé nádoby (vybavené mechanickým míchadlem) a zředí 284 ml isopropyletheru. Během 10 minut vznikne hustá bílá suspenze, která se po 3hodinovém míchání přefiltruje a filtrační koláč se promyje 2 x 70 ml isopropyletheru. Po vysušení se získá p-toluensulfonátová sůl ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-(3,5-bistrifluormethylbenzylamino)-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny ve formě bílého prášku (16,18 g, celkový výtěžek:' 86 %) o teplotě tání 191 až 192°C. J-H NMR (DMSO-dg, 400

MHz): δ 0,78 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 1,21 (t, 3H, J = 7,0 Hz), 1,5 (m, 3H), 2,24 (s, 3H), 3,08 (m, 1H), 4,17 (m, 2H), 4,41 (m, 1H),

4,50 (m, 2H), 4,79 (m, 1H), 7,04 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 7,42 (d,

2H, J= 7,9 Hz), 7,7 (m, 2H) , 7,81 (s, 1H) , .8,21 (s, 1H), 8,35 (s, 2H), 9,58 (brs, 1H), 9,83 (brs, 1H). ¹³C NMR (DMSO-dg, 100

MHz): δ 154,00, 145,46, 140,21, 138,39, 135,33 132,51, 131,62, 130,79 (q, J = 33,2 Hz), 128,49, 127,40, 125,82, 125,36, 124,99 (q, J = 31,7 Hz), 124,59 (q, J = 271 Hz), 123,69 (q, J = 273 Hz), 123,44, 120,433, 62,32, 53,99, 53,79, 47,98, 33,30, 28,61, 21,13, 14,63, 9,58. DEPT spektrum: kvarterní uhlíky δ 154,00, 145,46, 140,21, 138,39, 135,33, 130,79, 124,99, 124,59, 123,69, CH uhlíky δ 132,51, 131,62, 128,49, 127,40, 125,82, 125,36, 123,44, 120,33, 53,99, 53,79, CH₂ uhlíky δ 62,32, 47,98, 33,30, 28,61, CH₃ uhlíky δ 21,13, 14,63, 9,58. IR (drifty) 2300-3100 (široký) , 2974 (m), 2731 (m) , 2620 (m) , 2455 (m) , 1714 (s) , 1621 (m) , 1283 (bs), 1169 (vs), 1126 (vs) . MS (ES+) m/z (rel. inten«· · · A • · · · · ·

AAA A «

Zita) 584 (M+H+CH₃CN+, 100), 543 (M+H+, 80). Analýza pro ^C24^H23^N2°2^F9·^C7^H8°3^S: vypočteno: C 52,11, H 4,37, N 3,92, nalezeno: C 52,15, H 4,22, N 3,69. [a]_D = -77,9 (c = 1,05,

CH₃OH)

Příklad 8

Monoethanolát ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl )methoxykarbonylamino]-2 -ethyl- 6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny

Uhličitan sodný (pevný) (6,75 g, 63,7 mmol, 3,5 ekv.) se přidá k roztoku p-toluensulfonátové soli ethylesteru (-)(2R,4S)-4- (3,5-bistrif luormethylbenzy.lami.no) -2-ethyl-6-trif luormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny (13,0 g, 18,2 mmol, 1 ekv.) v suchém tetrahydrofuranu (130 ml) o teplotě místnosti. Ke vzniklé směsi se během 2 minut přikape methylchlorformiát (3,51 ml, 45,5 mmol, 2,5 ekv.) in substancia. Po 24 hodinách se reakční směs zkoncentruje na objem 65 ml, zředí 260 ml ethylacetátu, přemístí do dělicí nálevky, promyje 1 x 90 ml IM kyseliny chlorovodíkové (vývoj CO2), 1 x 90 ml nasyceného vodného hydrogenuhličitanu sodného a 1 x 90 ml vodného chloridu sodného, vysuší síranem hořečnatým a přefiltruje. Filtrát se zkoncentruje na čirý olej, který se odežene 3 x s 33 ml ethanolu 2B a rozpustí ve 33 ml ethanolu 2B. Vzniklý roztok se zaočkuje několika miligramy monoethanolátu ethylesteru (-) - (2R, 4S)-4- [ (3,5-bistrífluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny. Po 18hodinovém míchání při teplotě místnosti se vzniklá suspenze přefiltruje a produkt se vysuší. Získá se monoethanolát ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino] -2 -ethyl-6-trifluormethyl- 3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny ve formě bílého krystalického prášku * ♦ φ · (8,66 g, 74 %) ο teplotě tání 54 až 58°C. ¹H NMR (CDC1₃, 400

MHz, 55°C): δ 0,74 (s, 3H, J = 7,0 Hz), 1,20 (t, EtOH), 1,27 (t, 3H, J = 7,1 Hz), 1,42 (m, 2H), 1,66 (m, 1H), 2,25 (brs, 1H),

3,67 (q, EtOH), 3,79 (s, 3H), 4,2 (m, 3H), 4,33 (m, 1H), 5,2 (brs, 2H), 7,12 (s, 1H), 7,49 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,57 (d, 1H,

J = 8,5 Hz), 7,73 (S, 2H), 7,78 (s, 1H). ¹³C NMR (CDCI3, 400

MHz): δ 157,74, 154,37, 141,73, 140,05, 133,83, 132,14 (q, J = 33 Hz), 126,94, 124,49, 123,96 (q, J= 273 Hz), 123,13 (q, J = 273 Hz), 121,31, 119,17, 62,29, 58,28, 54,42, 53,71, 53,08, 46,67, 37,01, 29,02, 18,29, 14,32, 9,22 (zdá se, že pikem δ 124,94 je zakryt čtvrtý kvartet s J asi 32 Hz). DEPT spektrum: kvarterní uhlíky δ 157,74, 154,37, 141,73, 140,05, 133,83, 132,14, 123,96, 123,13, CH uhlíky δ 126,94, 124,49, 121,31, 119,17, 54,42, 53,08, CH₂ uhlíky δ 62,29, 58,28, 46,67, 37,01, 29,02, CH₃ uhlíky δ

53,71, 18,29, 14,32, 9,22. IR (drifty) 3489 (s), 2974 (s), 2884 (m), 1701 (vs), 1280 (vs), 1131 (vs). MS (ES+) m/z (rel. intenzita) 601 (M+H⁺, 100). Analýza pro C26H25N2O4F9.Η₂ΗθΟ:

vypočteno: C 52,01, H 4,83, N 4,33, nalezeno: C 51,84, H 4,54, N 4,33. Chirální HPLC: mobilní fáze směs n-hexanu, 2-propanolu a kyseliny octové v poměru 950 : 50 : 2, rychlost průtoku 1,0 ml/min, 254 nm, sloupec Chiralpak AD 4,6 x 250 mm, teplota sloupce 40°C, koncentrace vzorku asi 0,5 mg/ml směsi n-hexanu a 2-propanolu v poměru přibližně 1:1. Autentický racemát vykazuje retenční dobu 3,6 min a 4,6 min, monoethanolát ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chino!in-1-karboxylové kyseliny vykazuje 4,6 minuty, 99,1 %, a 3,6 minuty, nedetekován. [cy] = -93,3 (c = 1,08, CH3OH) .

Příklad 9 • 4 4 · 4 4 4 4

0*4 4 4 4 • · · 0 0 • 4 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 •44 4444 44 ··

Bezvodý ethylester (-)-(2R,4S)-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl) methoxykarbonylamino]-2~ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny

Dávka 2,6 g ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl) methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny (směs převážně amorfní látky se stopami ethanolátové krystalické formy; titulní sloučenina se také připraví podobným způsobem za použití čisté amorfní sloučeniny nebo čistého ethanolátu) se přidá ke 13 ml hexanů. Aby se docílilo jejího rozpuštění, vzniklá směs se zahřívá asi na 60°C. Tepelný zdroj se odstaví a reakční směs se během 1 hodiny nechá zchladnout na teplotu okolí, poté zaočkuje bezvodým ethylesterem (-)-(2R,4S)-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl) methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro- 2H-chinolin-l -karboxylové kyseliny a nechá granulovat 18 hodin za podmínek okolí. Alternativně je bezvodou krystalickou látku možno připravit z hexanů bez zaočkování. Produkt se shromáždí filtrací a usuší na vzduchu. Rentgenový obrazec izolovaného produktu odpovídá vypočtenému práškovému obrazci.

Densita: 1,406

Krystalová soustava: trigonální

Mikroskopie: Dobře vyvinuté tyčinkovité krystaly a isometrické krystaly (zlomky tyčinek) vykazují vysoký dvoj lom při příčném pohledu vzhledem k ose C. Vzhledem k tomu, že se jedná o krystaly z trigonální soustavy, nevykazuji dvoj lom při podélném pohledu vzhledem k ose C. Krystaly vykazují štěpnou rovinu kolmou k ose C.

Fusní mikroskopie: v oleji typu A ------ rozpuštěni při 50°C suchá---------------ostrá teplota tání 86°C

NMR: žádná stopa ethanolátu

Stupeň krystaličnosti: vysoká krystaličnost • · · · · I

Hygroskopíčnost: nehygroskopická při relativní vlhkosti 100 % po dobu. 4 8 hodin

Vzhled: sypký bílý prášek

Příklad 10

Monoethanolát ethylesteru (-)-(2R,4S)-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl )methoxykarbonylamino]-2 -ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny

4,0 g ethylesteru {-)-(2R,4S)-4-[(3,5-bistrífluormethylbenzyl )methoxykarbonylamino]-2 -ethyl- 6-trifluormethyl- 3,4 -dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny se rozpustí ve 3,5 ml ethanolu. Aby se dosáhlo úplného rozpuštění, vzniklý roztok se 2 minuty sonikuje. Ke vzniklé bílé pevné látce se přidá 10 ml ethanolu a ethanolická směs se míchá přes noc při teplotě okolí. Filtrací přes LS filtrační papír (0,22 gm) se shromáždí bílý prášek, který se promyje asi 15 ml ethanolu.

Densita: 1,402

Krystalová soustava: kosočtverečná

Mikroskopie: krystalické jehličky s mírným dvoj lomem

Fúzní mikroskopie: v oleji typu A---- tání a rozpouštění při

43°C se ztrátou vody suchá-------------ostrá teplota tání 43°C

NMR: ukazuje solvatační ethanol Stupeň krystaličnosti: vysoká krystaličnost Hygroskopíčnost: nehygroskopická látka Vzhled: sypký bílý prášek

Příklad 11

Bezvodý ethylester (-)-(2R,4S)-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl) methoxykarbonylamino] -2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro -2H- chinol in-1 -karboxylové kyseliny

Surový roztok přibližně 42 g ethylesteru (-)-(2R,4S)-4- [(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny v 500 ml ethylacetátu (získaný podle příkladu 8) se za sníženého tlaku zkoncentruje na objem 100 až 135 ml. Zbývající ethylacetát se vytěsní 3 x 220 ml ethanolu 2B, přičemž konečný objem je 100 až 135 ml. Tento roztok se zaočkuje krystalem bezvodého ethylesteru (-)-(2R,4S)- -4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino] -2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny. Po 18hodinovém míchání při teplotě místnosti se vzniklá suspenze přefiltruje a produkt se vysuší za vakua. Získá se 19,81 g bezvodého ethylesteru (-)-(2R,4S)-4- [ (3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny. Tento produkt se při teplotě tání chová stejně jako sloučenina vyrobená podle příkladu 9, což svědčí o jeho bezvodém charakteru .

Atorvastatin nebo jeho cyklizovanou laktonovou formu je možno snadno připravovat podle US patentu č. 4 681 892, který je citován náhradou za přenesení jeho obsahu do tohoto textu. Hemivápenatou sůl atorvastatinu, která je v současné době distribuována jako Lipitor®, je možno snadno připravovat způsobem popsaným v US patentu č. 5 273 995, který je také citován náhradou za přenesení jeho obsahu do tohoto textu.

Hydroxylované deriváty (metabolity) atorvastatinu (nebo jejich cyklizovanou laktonovou formu nebo jejích farmaceuticky vhodné soli) je možno připravovat způsobem popsaným v US patentu 5 385 929. Jako ortho-, meta- a para-hydroxyderiváty je možno uvést (2R-trans)-5-(4-fluorfenyl)-2-(1-methylethyl)-N-(2-hydroxyfenyl)-4-fenyl-l-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl]-lH-pyrrol-3-karboxamid;

(2R-trans)-5-(4-fluorfenyl)-2-(1-methylethyl)-N-(3-hydroxyfenyl)-4-fenyl-l-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl-]lH-pyrrol- 3-karboxamid a (2R-trans)-5-(4-fluorfenyl)-2-(1-methylethyl)-N-(4-hydroxyfenyl) -4-fenyl-l-[2-(tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl]-lH-pyrrol-3-karboxamid.

Pod pojmem farmaceuticky vhodné soli se rozumí adiční soli s farmaceuticky vhodnými kyselinami a soli s farmaceuticky vhodnými kationty. Jako neomezující příklady solí s farmaceuticky vhodnými kationty lze uvést soli s alkalickými kovy (například sodíkem a draslíkem), soli s kovy alkalických zemin (například vápníkem a hořčíkem), soli s hliníkem, amonné soli a soli s organickými aminy, jako je benzathin (N,N-dibenzylethylendiamin), cholin, diethanolamin, ethylendiamin, meglumin (N-methylglukamin), benethamin (N-benzylfenylethylamin), diethylamin, piperazin, tromethamín (2-amino-2-hydroxymethyl1,3-propandiol) a prokain. Jako neomezující příklady adičních solí s farmaceuticky vhodnými kyselinami je možno uvést hydrochloridové, hydrobromidové, sulfátové, hydrogensulfátové, fosfátové, hydrogenfosfátové, dihydrogenfosfátové, acetátové, sukcinátové, citrátové, methansulfonátové (mesylátové) a p-toluensulfonátové (tosylátové) soli.

• 4 9 · ·

9999

Jiné soli atorvastatinu s farmaceuticky vhodnými kationty je možno snadno připravovat tak, že se atorvastatin ve formě volné kyseliny nechá reagovat s vhodnou bázi, obvykle v množství jednoho ekvivalentu) v korozpouštědle. Jako typické báze lze uvést hydroxid sodný, methoxid sodný, ethoxid sodný, hydrid sodný, methoxid draselný, hydroxid hořečnatý, hydroxid vápenatý, benzathin, cholin, diethanolamin, piperazin a tromethamin. Požadovanou sůl je možno izolovat tak, že se reakční směs zkoncentruje do sucha nebo se k ní přidá nerozpouštědlo. V řadě případů se soli přednostně připravují tak, že se roztok kyseliny smísí s roztokem jiné soli takového kationtu (například ethylhexanoátem draselným, oleát hořečnatý) a používá se rozpouštědla (například ethylacetátu), z něhož se vysráží požadovaná sůl s kationtem. Soli také lze izolovat tak, že se reakční roztok zkoncentruje a/nebo se k němu přidá nerozpouštědlo.

Adiční soli atorvastatinu s kyselinami je možno snadno připravovat tak, že se atorvastatin ve formě volné báze nechá reagovat s vhodnou kyselinou. V případě přípravy soli jednosytné kyseliny (například hydrochloridu, hydrobromidu, p-toluensulfonátu, acetátu), hydrogensoli dvojsytné kyseliny (například hydrogensulfátu, sukcinátu) nebo dihydrogensoli trojsytné kyseliny (například dihydrogenfosfátu, citrátu) se používá alespoň jednoho molárního ekvivalentu, obvykle molárního nadbytku, kyseliny. Pokud se však připravují takové soli, jako hemisukcinát, hydrogenfosfát nebo fosfát, obvykle se používá vhodných a přesných chemických ekvivalentů kyseliny. Volná báze a kyselina se obvykle smísí v korozpouštědle, z něhož se vysráží požadovaná sůl, kterou však lze také izolovat tak, že se reakční směs zkoncentruje a/nebo se k ní přidá nerozpouštědlo.

Ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny se kromě toho může vyskytovat jako • ti titititi

monoethanolát a v bezvodé formě, jak jsou popsány v předběžné US přihlášce č. 60/167 967. Takové formy rovněž spadají do rozsahu tohoto vynálezu.

Atorvastatin, jeho cyklizovaná laktonová forma a ortho-, meta- a parahydroxyderiváty těchto sloučenin a farmaceuticky vhodné soli těchto sloučenin a derivátů se mohou vyskytovat jako hydráty nebo solváty. Tyto hydráty a solváty rovněž spadají do rozsahu tohoto vynálezu.

Všechny farmaceutické kombinace a způsoby podle tohoto vynálezu jsou přizpůsobeny pro terapeutické použití jako činidla pro léčení atherosklerosy, angíny pectoris a stavů charakterizovaných nízkou hladinou HDL a zároveň hyperlipidemií u savců, zejména lidí. Jelikož tyto choroby a stavy úzce souvisí s rozvojem srdečních chorob a stavů, tyto kombinace a způsoby jsou na základě svého antiatherosklerotického, antianginosního a antihyperlipidemického účinku užitečné při zvládání kardiálního rizika, jakož i smíšené lipidové poruchy, jaké lze například pozorovat u diabetes a jiných metabolických syndromů.

Užitečnost sloučenin podle vynálezu jako terapeutických činidel při léčení atherosklerosy u savců (například lidí) je možno prokázat jako aktivitu sloučenin podle vynálezu při obvyklých zkouškách a klinických protokolech, které jsou popsány dále.

V následujících protokolech se pod označením inhibitor CETP X rozumí ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny.

Protokol hodnocení antiatherosklerotické účinnosti ·· ····

Tato zkouška je prospektivním randomizovaným hodnocením účinku kombinace inhibitoru CETP X a atorvastatinu (nebo jeho metabolitů) na progresi/regresi atherosklerotické choroby. Této zkoušky se používá, aby se prokázalo, že kombinace inhibitoru CETP X a atorvastatinu (nebo jeho metabolitů) je účinná při zpomalování nebo zastavení progrese nebo při vyvolání regrese existující atherosklerotické choroby , což dokládají změny v parametrech plátu a/nebo lumen zjištěné za použití různých zobrazovacích metod, koronární angiografie nebo ultrazvuku karotidy, u subjektů s rozvinutou chorobou nebo bez ni.

Tato zkouška zahrnuje zobrazovací dokumentaci atherosklerotické choroby a je prováděna jako dvojitě slepá zkouška na minimálně asi 500 subjektech, přednostně 780 až asi 1200 subjektech. Zvláštně přednostně se tato zkouška provádí na asi 1200 subjektech. Subjekty jsou do zkoušky připuštěny po splnění určitých vstupních kritérií, která jsou uvedena dále.

Vstupní kritéria:

Subjekty přijaté do této zkoušky musí splňovat určitá kritéria. Subjektem musí být dospělá osoba mužského nebo ženského pohlaví ve věku 18 až 80 let, u níž bylo klinicky indikováno kardiovaskulární zobrazování. U subjektů bude prokázána atheroskleotická choroba, u níž je nepravděpodobné, že bude v průběhu následujících tří let vyžadovat intervenci. Je třeba, aby segmenty podrobené analýze byly neovlivněné zákrokem. Jelikož perkutánni transluminální srdeční antioplastika (PTCA) zasahuje do segmentů tím, že dochází k průniku balónkového katétru, je třeba, aby v segmentech, které mají být podrobeny analýze, nebyla v minulosti provedena PTCA (tedy non-PTCA segmenty). Dále je třeba, aby cévy, které mají být podrobeny ♦ * φφφφ • «φ * ·· ··♦♦ · Φ · Φ · φ «

Φ Φ · Φ Φ · Φ • ΦΦΦ ΦΦΦΦ φ analýze nebyly postiženy thrombotickou příhodou, jako je infarkt myokardu. To je tedy požadavek na cévy bez infarktu (non-MI). Jako potenciální segmenty pro analýzu je možno uvést: levou hlavní, proximální, střední a distální levou ventrální sestupnou, první a druhou diagonální větev, proximální a distální levou ohnutou, první nebo největší tupou marginální, proximální, střední a distální pravou koronární artérii.

Vzhledem k počtu pacientů a fyzickým omezením jakéhokoliv přístroje se zkouška provádí na více místech. Při vstupu do této zkoušky jsou subjekty v určených zkušebních centrech podrobeny zobrazovacímu vyšetření koronárních artérií a karotidové artérie a/nebo periferních cév. Na základě těchto výsledků se stanoví výchozí hodnoty každého subjektu. Po přijetí do zkoušky jsou subjekty randomizovány: podá se jim inhibitor CETP X (10 až 100 mg) s atorvastatin-kalciem (10 až 80 mg) nebo jeho metabolity (0,02 mg/kg až 200 mg/kg), každá z těchto látek zvlášf a/nebo žádná z těchto látek. Všechny dávky uváděné v tomto protokolu jsou dávkami denními. Množství inhibitoru CETP X, atorvastatin-kalcia (nebo jeho metabolitů) mohou kolísat podle potřeby.

Subjekty jsou sledovány po dobu jednoho roku až tří let, přičemž tříletému období se dává přednost. V pravidelných intervalech během zkoušky se provádí zobrazovací hodnocení cév, které nevyžadují invazivní postup.

Obvykle jsou vhodné šestiměsíční intervaly. Hodnocení se typicky provádí za použití ultrazvuku (B-obraz) a/nebo ekvivalentního zařízení. Odborník v tomto oboru však může použít i jiných metod. Na závěr ročního až tříletého období se provede invazivní zobrazování. Výchozí hodnoty a zobrazení po ošetření se hodnotí z hlediska nových lézí nebo progrese existujících atherosklerotických lézí.

44 ·· 4444

4 4 4 4 4 4

4 4 4 4

4 4 4 4 4

4 4 4 4 4 • 4

Primárním cílem této zkoušky je ukázat, že kombinace inhibitoru CETP X a atorvastatinu (nebo jeho metabolitů) nebo jejich farmaceuticky vhodných solí snižuje progresi atherosklerotických lézí, měřeno kvantitativní koronární angiografií (QCA) nebo CBCT nebo IWS u subjektů s klinickou chorobou koronárních artérii. Těmito technikami se měří atherosklerosa v cévách.

Primární proměnnou při této zkoušce je změna atherosklerotické zátěže postižené cévy. Například za použití QCA se měří průměr arteriálního segmentu v různých částech podél celého segmentu. Poté se stanoví průměrná hodnota tohoto průměru. Po stanovení průměrných průměrů řady segmentů se vypočítá průměrná hodnota průměrů všech segmentů, čímž se získá průměrný střední průměr segmentu. Střední hodnota průměru segmentu u subjektů, kterým je podáván atorvastatin (nebo jeho metabolity) nebo jejich farmaceuticky vhodné soli a inhibitor CETP X se bude snižovat pomaleji, úplně se zastaví nebo dojde k jejímu zvýšení. Tyto výsledky v uvedeném pořadí představují zpomalení progrese atherosklerosy, zastavení progrese a regresi atherosklerosy.

Sekundárním cílem této zkoušky je ukázat, že kombinace inhibitoru CETP X a atorvastatinu (nebo jeho metabolitů) nebo jejich farmaceuticky vhodných solí snižuje rychlost progrese atherosklerosy v jiných artériích, více než v případě podávání samotného inhibitoru CETP X nebo atorvastatinu (nebo jeho metabolitů) nebo jejich farmaceuticky vhodných solí. Například u karotidové artérie se toto snížení měří jako sklon maxima hodnot tloušťky intima-media zprůměrovaných ze 12 oddělených segmentů stěny (Mean Max) jako funkce času. Tloušťka intima-media u subjektů, kterým je podáván atorvastatin (nebo jeho metabolity) nebo jejich farmaceuticky vhodné soli a inhibitor CETP X bude narůstat pomaleji, tento nárůst se zastaví nebo dojde k poklesu. Tyto výsledky v uvedeném pořadí představují zpomalení progrese atherosklerosy, zastavení její progrese nebo její regresi.

* • · • fc ··t · fc fc

Užitečnost sloučenin podle vynálezu jako terapeutických činidel při léčení anginy pectoris u savci (například lidí) je doložena aktivitou sloučenin podle vynálezu při obvyklých zkouškách a dále popsaném klinickém protokolu.

Protokol hodnocení antianginosní účinnosti

Tato zkouška se provádí jako dvojité slepá, v paralelních větvích a randomizovaná. Jejím účelem je prokázat účinnost inhibitoru CETP X a atorvastatinu (nebo jeho metabolitů) nebo jejich farmaceuticky vhodných solí v kombinaci při léčení symptomatické anginy.

Vstupní kritéria:

Subjekty jsou muži nebo ženy ve věku 18 až 80 let, kteří v anamnéze mají typickou bolest na hrudi spojenou s jedním z následujících objektivních symptomů srdeční ischemie: (1) elevace úseku při zátěžovém EKG o asi 1 mm nebo více; (2) pozitivní zátěžový test na běhátku; (3) nová abnormalita pohybu stěny na ultrazvuku; nebo (4) koronární angiogram se signifikantní kvalifikující stenosou. Obecně se za signifikantní považuje asi 30 až 50% stenosa.

Každý subjekt je sledován po dobu 10 až 32 týdnů. Pro dokončení zkoušky je potřebné alespoň desetitýdenní sledování. Při výběru je třeba pracovat s dostatečným počtem subjektů, aby bylo zajištěno, že zkoušku dokončí asi 200 až 800, přednostně asi 400, subjektů. Subjekty se vyberou na základě splnění vstupních kritérií uvedených výše během čtyřtýdenní fáze. Po splnění kritérií výběru je u subjektů eliminována jejich současná antianginosní medikace a subjekty se stabilizují na nitrátech s dlouhodobým účinkem, jako je například nitroglycerin, isosorbid-5-mononitrát nebo isosorbid dinitrát. Pod pojmem

eliminace se v souvislosti s touto zkouškou rozumí odejmutí současné antianginosní medikace tak, že je z organismu subjektu v podstatě vyloučena. Pro fázi eliminace a pro převedení subjektu na stabilní dávky nitrátu se vyhradí období přednostně 8 týdnů. Subjekty s jedním nebo dvěma záchvaty angíny pectoris týdně, kteří jsou na stabilních dávkách nitrátů s dlouhodobým účinkem, obvykle mohou fázi eliminace přeskočit. Poté, co jsou subjekty stabilizovány na nitrátech, vstupují do randomizační fáze, přičemž nadále mají týdně jeden nebo dva anginosní záchvaty. V randomizační fázi se subjekty náhodně umístí do jedné ze čtyř větví zkoušky uvedených dále. Po dokončení eliminační fáze se subjekty v souladu se vstupními kritérii podrobí 24hodinovému ambulantnímu EKG, jako je Holterův monitoring, zátěžovému testu, jako je zkouška na běhátku, zkoušce perfuse myokardu za použití PET (fotonová emisní tomografie), čímž se získají výchozí hodnoty pro každý subjekt. Při provádění zátěžového testu mohou být rychlost a stoupání běhátka řízeny technikem. Rychlost běhátka a úhel stoupání se během testu obvykle zvyšují. Časové intervaly mezi každým zvýšením rychlosti a stoupání se obvykle stanovují za použití modifikovaného Bruceho protokolu.

Po stanovení výchozích hodnot se subjekty přidělí do jedné ze čtyř následujících větví: (1) placebo; (2) atorvastatin-kalcium (asi 2,5 mg až asi 160 mg) nebo jeho metabolity; (3) inhibitor CETP X (asi 10 až asi 120 mg); nebo (4) kombinace inhibitoru CETP X a atorvastatin-kalcia (nebo jeho metabolitů) ve výše uvedených dávkách. Subjekty jsou monitorovány po dobu 2 až 24 týdnů.

Po dokončení monitorovacího období se subjekty podrobí následujícím vyšetřením: (1) 24hodinovému ambulantnímu EKG, jako je Holterův monitoring; (2) zátěžová zkouška (například na běhátku za použití uvedeného modifikovaného Bruceho protokolu);

• 9 9999 • 99 9 99

9 9 ·· 9 9 99 9

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9999 9

99 ·99· • 99 9999 99· 999· ·· 99 a (3) hodnocení perfuse myokardu za použití PET. Pacienti nadále vedou denní záznamy bolestivých ischemických příhod a aplikace nitroglycerinu. Obecně je žádoucí, aby údaje o počtu anginosních záchvatů, ke kterým u pacienta během zkoušky došlo, byly přesné. Jelikož pacient pro zmírnění bolesti při anginosním záchvatu obvykle bere nitroglycerin, četnost podání nitroglycerinu celkem přesně zachycuje počet anginosních záchvatů.

Za účelem prokázání účinnosti kombinace sloučenin podle vynálezu a za účelem stanovení velikosti jejích dávek bude subjekt podrobený výše popsaným testům hodnotit osoba, která test provádí. Úspěšné léčení povede k menšímu počtu ischemických příhod detekovaných EKG, subjekt bude zátěž na běhátku zvládat déle a její intenzita bude vyšší, nebo ji bude zvládat bez bolesti, nebo se u subjektu podle fotoemisní tomografie (PET) dosáhne lepší perfuse nebo u něj dojde k menšímu počtu perfusních defektů.

Užitečnost sloučenin podle vynálezu jako terapeutických činidel při léčení lipidových abnormalit u savců (například lidí), kteří trpí kombinací nízké hladiny HDL-C a vysoké hladiny LDL-C je demonstrována jako aktivita sloučenin podle vynálezu při obvyklých zkouškách a klinickém protokolu popsaném dále.

Hodnocení účinku na dyslipidemii

Tato zkouška se provádí jako dvojitě slepá, v paralelních větvích a randomizovaná. Jejím účelem je prokázat účinnost kombinace inhibitoru CETP X a atorvastatin-kalcia (nebo jeho metabolitů) nebo jejich farmaceuticky vhodných solí při regulaci nízké hladiny HDL-C a vysoké hladiny LDL-C u subjektů s mírnou, střední nebo těžkou abnormalitou těchto lipidů.

fcfc fcfcfc«

• · · fcfcfc • · fc • fcfc · • fc fcfc

Každý subjekt je sledován po dobu 10 až 20 týdnů, přednostně po dobu 14 týdnů. Při výběru se pracuje s dostatečným počtem subjektů, aby se zajistilo, že zkoušku dokončí 400 až 800 subjektů.

Vstupní kritéria:

Subjekty jsou dospělí muži nebo dospělé ženy ve věku mezi 18 a 80 lety, kteří trpí nízkou hladinou HDL-C a vysokou hladinou LDL-C. Průkazem těchto abnormalit je vyhodnocení hladiny nízkohustotního lipoproteinu (LDL) vzhledem k určitým pozitivním rizikovým faktorům a vyhodnocení hladiny HDL-C. Pokud subjekt nemá žádnou koronární srdeční chorobu (CHD) a vykazuje méně než dva pozitivní rizikové faktory, potom je považován za subjekt s vysokou hladinou LDL, pokud je jeho LDL vyšší nebo roven 190 mg/dl. Pokud subjekt nemá žádnou CHD a vykazuje dva či více pozitivních rizikových faktorů, je považován subjekt s vysokou hladinou LDL, je-li jeho LDL vyšší nebo roven 160 mg/ml. Pokud trpí CHD, je za subjekt trpící vysokou hladinou LDL považován v případě, že jeho LDL je vyšší nebo roven 130 mg/ml.

Mezi pozitivní rizikové faktory náleží (1) věk nad 45 let u mužů, (2) věk nad 55 let u žen, u nichž neprobíhá hormonální substituční terapie (HRT), (3) předčasná kardiovaskulární choroba v rodinné anamnéze, (4) subjekt je v době zkoušky kuřákem, (5) diabetes, (6) HDL méně než 35 a (7) hypertenze. HDL vyšší než 60 je považován za negativní rizikový faktor a kompenzuje jeden z výše uvedených pozitivních rizikových faktorů.

Za průkaz nízké hladiny HDL se považuje hladina méně než 35 mg/dl.

Subjekty se vyberou na základě splnění vstupních kritérií uvedených výše. Po splnění všech vstupních kritérií je u subjek40 « φφ φφ φ·«·

9 9 * · · • 9 9 · · • · Φ · · · φ Φ ΦΦΦ·

ΦΦΦΦΦΦΦ ·· tů eliminována jejich současná antihypertensivní a hypolipidemická medikace, a subjekty se převedou na stupeň 1 diety NCEP ΑΤΡ II (panel léčení dospělých, 2. revize). Tento stupeň 1 vymezuje množství nasycených a nenasycených tuků, které může být zkonzumováno, jako podíl na celkovém příjmu kalorií. Pod pojmem eliminace se v souvislosti s tímto protokolem rozumí odnětí probíhající antihypertensivní a hypolipidemické medikace, takže dojde v podstatě k jejímu vyloučení z organismu subjektu. Subjekty s novou diagnosou až do započetí zkoušky zůstanou neléčeny a rovněž se převedou na stupeň 1 diety NCEP. Po čtyř týdnech eliminace a stabilizace diety se u subjektů stanoví tyto výchozí hodnoty: (1) zdravotní anamnéza a (2) lipidy na lačno. Stanovením lipidů na lačno se určí výchozí hodnoty hladiny lipidů. Subjekt obvykle nepřijímá stravu po dobu 12 hodin a poté se provede měření hladiny lipidů.

Po stanovení výchozích hodnot se subjektům začnou podávat sloučeniny podle jednoho z následujících schémat: (1) pevná dávka inhibitoru CETP X, obvykle asi 10 až 120 mg; (2) pevná dávka atorvastatin-kalcia (nebo jeho metabolitů), obvykle asi 10 až 80 mg nebo (3) kombinace inhibitoru CETP X a atorvastatinkalcia (nebo jeho metabolitů) ve výše uvedených dávkách. Tyto dávky se udržují po dobu minimálně 6 týdnu a obvykle ne déle než 8 týdnů. Na konci 6. až 8. týdne se subjekty vrátí do zkušebního centra, takže je mošno zopakovat hodnocení výchozích hodnot. Při stanovení lipidů se měří celkový cholesterol, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, triglyceridy, apoB, VLDL (lipoprotein o velmi nízké hustotě) a jiné složky tvořící lipidový profil subjektu. Zlepšení hodnot naměřených po léčení ve srovnání s hodnotami získanými před léčením dokládá užitečnost léčiva.

Užitečnost sloučenin podle vynálezu jako terapeutických činidel při zvládání kardiálního rizika u savců (například lidí), kteří jsou ohroženi srdeční příhodou, je demonstrována

0000 • «0 · 00 40·« «0 00 00 « • 0 0 0 « 0 0 • 00 0 0000 · AI 00 «0 »♦«·

000 0000 000 000« 00 00 jako aktivita sloučenin podle vynálezu při obvyklých zkouškách a klinickém protokolu popsaném dále.

Hodnocení účinku na riziko budoucích kardiovaskulárních příhod

Tato zkouška se provádí jako dvojitě slepá, v paralelních větvích a randomizovaná. Jejím účelem je prokázat účinnost inhibitoru CETP X a atorvastatinu (a jeho metabolitů) nebo jejich farmaceuticky vhodných solí podávaných v kombinaci při snižování celkového vypočteného rizika kardiovaskulární příhody u subjektů, kterým v budoucnu taková příhoda hrozí. Toto riziko se vypočítá pomocí Framinghamské rovnice pro výpočet rizika. Za subjekt, kterému v budoucnu hrozí kardiovaskulární příhoda je považován subjekt, pokud je více než jedna standardní odchylka nad střední hodnotou, vypočteno podle Framinghamské rovnice pro výpočet rizika. Této zkoušky se používá pro hodnocení účinnosti pevné kombinace inhibitoru CETP X a atorvastatinu (nebo jeho metabolitů) při zvládání kardiovaskulárního rizika prostřednictvím regulace nízké hladiny HDL a vysoké hladiny LDL u pacientů, kteří současně trpí abnormalitami těchto lipidů.

Každý subjekt se hodnotí po dobu 10 až 20 týdnů, přičemž přednost se dává 14 týdnům. Je třeba získat dostatečný počet subjektů, aby se zajistilo, že zkoušku dokončí 400 až 800 subjektů.

Vstupní kritéria:

Subjekty, které se účastní zkoušky, jsou dospělí mužského nebo ženského pohlaví o stáří 18 až 80 let se výchozími hodnotami pětiletého rizika, které je vyšší než medián pro věk a pohlaví subjektu definovaný Framinghamskou srdeční studií, což je stále pokračující prospektivni studie, které se účastní dospělí muži a ženy vykazující určité rizikové faktory, které je

•	·· ·	·· 99	9999
99	• ·	··	9 9 9 9	9
•	•	•	9 9 9	9
•	• ·	•	9 9 9 9	9
9	•	•	9 9 9	9 9
				99

možno použít pro předpověď vývoje koronární srdeční choroby. Při stanovení, zda je pacient ohrožen srdeční příhodou se hodnotí věk, pohlaví, systolický a diastolický tlak krve, kuřáctví, přítomnost nebo absence intolerance glycidů, přítomnost nebo absence hypertrofie levé komory, sérový cholesterol a vysokohustotní lipoprotein (HDL) o více než 1 standardní odchylku nad normál pro Framinghamskou populaci. Hodnoty pro rizikové faktory se dosadí do Framinghamské rovnice pro výpočet rizika a provede se výpočet, kterým se stanoví, zda je subjekt v budoucnu ohrožen kardiovaskulární příhodou.

Subjekty se vytřídí z hlediska splnění vstupních kritérií uvedených výše. Po splnění všech kritérií se u subjektů eliminuje probíhající hypolipidemická i jiná medikace, která by mohla ovlivnit výsledky zkoušky. Pacienti se převedou na stupeň 1 diety NCEP ATP popsaný výše. Po čtyřech týdnech eliminace a stabilizace diety se u subjektů stanoví tyto výchozí hodnoty:

(1) krevní tlak; (2) půst; (3) lipidy; (4) tolerance glukosy;

(5) EKG a (6) ultrazvuk srdce. Tyto zkoušky se provádějí za použití standardních postupů, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy. EKG a ultrazvuk srdce jsou obvykle prováděny za účelem diagnosy hypertrofie levé komory.

Po stanovení výchozích hodnot se subjektům začnou podávat sloučeniny podle jednoho z následujících schémat: (1) neměnná dávka inhibitoru CETP X (asi 10 až 120 mg) ; (2) neměnná dávka atorvastatinu (asi 10 až 80 mg) nebo jeho metabolitů (0,02 mg/kg až 200 mg/kg) nebo (3) kombinace inhibitoru CETP X a atorvastatinu (nebo jeho metabolitů) ve výše uvedených dávkách. Tyto dávky se udržují a pacienti jsou požádáni, aby se po 6 až 8 týdnech vrátili. Tak je možno zopakovat stanovení výchozích hodnot. Nové hodnoty se poté dosadí do Framinghamské rovnice pro výpočet rizika, a určí se, zda se riziko, že u subjektu v budoucnu dojde ke kardiovaskulární příhodě, snížilo, zvýšilo nebo zůstalo nezměněné.

Výše uvedené zkoušky prokazují účinnost ethylesteru [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny a atorvastatinu nebo jeho hydroxyderivátů nebo farmaceuticky vhodných solí těchto sloučenin při prevenci a/nebo léčení angíny pectoris, atherosklerosy, nízké hladiny HDL spolu s vysokou hladinou LDL a při zvládání kardiálního rizika a také poskytují prostředek, jímž lze porovnávat aktivitu sloučenin vzájemně a s aktivitou jiných známých sloučenin. Výsledky těchto srovnání jsou užitečné při stanovování výše dávek u savců, včetně lidí, při léčení výše uvedených chorob.

Ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino] -2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny se obvykle podává v denní dávce v rozmezí od asi 0,1 do asi 10 mg/kg, přednostně od asi 0,5 do asi 5 mg/kg.

Atorvastatin nebo jeho cyklizovaná laktonová forma nebo jejich farmaceuticky vhodné soli se obvykle podávají v denní dávce 2,5 až asi 160 mg. Atorvastatin-kalcium se přednostně podává v denní dávce asi 10 až asi 80 mg. Hydroxymetabolity těchto sloučenin se typicky podávají v denní dávce asi 0,02 mg/kg do asi 200 mg/kg. Tyto dávky jsou uváděny pro průměrný subjekt o hmotnosti asi 65 až asi 70 kg.

Sloučeniny podle vynálezu se obvykle podávají ve formě farmaceutické kompozice, která obsahuje alespoň jednu sloučeninu podle vynálezu spolu s farmaceuticky vhodným nosičem, vehikulem nebo ředidlem. Sloučeniny podle vynálezu je tedy možno podávat buď individuálně nebo společně v jakékoliv aplikační formě pro perorální, parenterální nebo transdermální podávání.

Farmaceutické kompozice pro perorální podávání mohou mít formu roztoků, suspenzí, tablet, pilulí, tobolek, prášků apod.

Je možno použít tablet obsahujících různé excipienty, jako je citran sodný, uhličitan vápenatý a fosforečnan vápenatý spolu s různými rozvolňovadly, jako je škrob, přednostně bramborový nebo tapiokový škrob, a určité komplexní silikáty a pojivý, jako je polyvinylpyrrolidon, sacharosa, želatina a klovatina. Pro tabletovací účely mohou být přídavně přítomna lubrikační činidla, jako je stearan hořečnatý, natriumlaurylsulfát a mastek. Pevné kompozice podobného typu mohou být také přítomny jako náplně v měkkých a tvrdých želatinových tobolkách. V tomto případě obsahují použité prostředky přednostně také laktosu a vysokomolekulární polyethylenglykoly. Při výrobě vodných suspenzí a/nebo elixírů, které se hodí pro perorální podávání, se může sloučenina podle vynálezu mísit s různými sladidly nebo aromatizačnímí látkami, barvicími přísadami či barvivý, emulgátory a/nebo suspenzními činidly a dále také takovými ředidly, jako je voda, ethanol, propylenglykol, glycerol a jejich různé kombinace.

Kombinace podle vynálezu také může být podávána ve formě kompozice s řízeným uvolňováním, jako jsou formulace s pomalým nebo rychlým uvolňováním. Takové formulace vzájemných solí podle tohto vynálezu je možno připravovat za použití o sobě známých způsobů. Způsob přednostního podávání stanoví ošetřující lékař nebo jiný odborník po zhodnocení stavu a potřeb subjektu. Přednostní formulací atorvastatinu je obvykle Lipitor⁸. V případě ethylesteru [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2 -ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chino1in-1-karboxylové kyseliny se obvykle dává přednost jednotkové dávkovači formě v tobolce, například gelové tobolce, která kromě nebo namísto látek výše uvedeného typu může obsahovat kapalné

nosiče, jako glycerid mastných kyselin nebo směsi glyceridů mastných kyselin, jako olivový olej nebo glyceridy Miglyol™ nebo Capmul™. Jako aplikační formy lze také uvést perorální suspenze.

Pro parenterální podávání se může použít roztoků v sezamovém nebo podzemnicovém oleji, nebo ve vodném propylenglykolu. Odpovídající vodorozpustné soli také lze podávat ve formě sterilních vodných roztoků. Takové vodné roztoky by v případě potřeby měly být účelně pufrovány a kapalné ředidlo by mělo být nejprve isotonizováno za použití dostatečného množství solného roztoku nebo glukosy. Takové vodné roztoky se zvláště hodí pro intravenosní, intramuskulární, subkutánní a intraperitoneální injekční podávání. Sterilní vodná média lze snadno získat za použití standardních postupů známých odborníkům v tomto oboru.

Způsoby výroby farmaceutických kompozic s určitým množství účinné přísady jsou známé nebo odborníku v tomto oboru budou zřejmé ve světle tohoto popisu. Například viz Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA,

USA, 15. vydání (1975).

Farmaceutické kompozice podle vynálezu mohou obsahovat 0,1 až 95 % sloučeniny (sloučenin) podle vynálezu, přednostně 1 až 70 %. Kompozice nebo formulace, která má být podávána, v každém případě bude obsahovat sloučeninu (sloučeniny) podle vynálezu v množství, které je účinné při léčení stavu nebo choroby léčeného subj ektu.

Jelikož se vynález týká také léčení chorob a stavů za použití kombinace účinných přísad, které mohou být podávány odděleně, předmětem vynálezu je také kombinace oddělených farmaceutických kompozic ve formě kitu. Takový kit obsahuje oddělené farmaceutické kompozice: ethylester [2R, 4S]-4-[ (3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-646

-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny a atorvastatin (nebo jeho metabolity) nebo jejich farmaceuticky vhodné soli. Kit dále obsahuje obalový prostředek pro oddělené kompozice, jako je rozdělená lahvička nebo rozdělené foliové baleni, ale oddělené kompozice také mohou být obsaženy v jediném, neděleném obalu. Kit také typicky obsahuje pokyny pro podávání oddělených složek. Forma kitu je zvláště výhodná v případě, že se oddělené složky podávají v různých aplikačních formách (například perorální a parenterální formě), v různých intervalech nebo když předepisující lékař musí titrovat jednotlivé složky kombinace.

Tento vynález se neomezuje na konkrétní provedení popsaná v tomto textu a lze ho různě měnit a modifikovat, aniž by to vedlo k odklonu od ducha a úniku z rozsahu tohoto nového konceptu, jak je definován v připojených patentových nárocích.

zW v#?

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství kompozice zahrnující

a) ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-1-karboxylové kyseliny;

b) sloučeninu obecného vzorce I nebo necyklizovanou formu obecného vzorce IA kde R¹ představuje vodík nebo hydroxyskupinu; nebo farmaceuticky vhodnou sůl některé z těchto sloučenin; a

c) farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo.
2. Farmaceutická kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu, kde R¹ představuje vodík, nebo její farmaceuticky vhodnou sůl.
3. Farmaceutická kompozice podle nároku 2, vyznačující se tím, že obsahuje hemivápenatou sůl atorvastatinu.
4. Farmaceutická kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu, kde R¹ představuje 2-hydroxyskupinu nebo její farmaceuticky vhodnou sůl.
5. Způsob léčení savce, který takové léčení potřebuje, vyznačující se tím, že se takovému savci podává terapeuticky účinné množství • · · · · ·

a) první sloučeniny, kterou je ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino] -2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny; a

b) druhé sloučeniny, kterou je sloučenina obecného vzorce I

..OH .oh₂

Ν' \Z\₀(I) nebo necyklizovaná forma obecného vzorce IA

OH (IA) kde R¹ představuje vodík nebo hydroxyskupinu; nebo farmaceuticky vhodné soli některé z těchto sloučenin;

přičemž první sloučenina a druhá sloučenina se popřípadě a nezávisle podávají spolu s farmaceuticky vhodným nosičem, vehikulem nebo ředidlem.
6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se podává sloučenina, kde R¹ představuje vodík, nebo její farmaceuticky vhodná sůl.
7. Způsob podle nároku 6, vyznačující se tím, že se podává hemivápenatá sůl atorvastatinu.
8. Způsob podlenároku 5, vyznačující se tím, že se podává sloučenina, kde R¹ představuje hydroxyskupinu, nebo její farmaceuticky vhodná sůl.
9. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že zahrnuje léčení nebo prevenci atherosklerosy.
10. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se zpomaluje progrese atherosklerotických plátů.
11. Způsob podle nároku 10, vyznačující se tím, že léčení atherosklerosy vyvolává regresi atherosklerotických plátů.
12. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že léčení zahrnuje zvýšení HDL a antihyperlipidemické léčení,
13. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se zabraňuje angíně.

• · : .· * ϊ

..................
14. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že zahrnuje zvládání kardiálního rizika.
15. Kit pro dosahování terapeutického účinku u savců, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství kompozice obsahující

a) ethylester [2R,4S]-4-[(3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo v první dávkovači formě; a

b) sloučeninu obecného vzorce I nebo necyklizovanou formu obecného vzorce IA kde R¹ představuje vodík nebo hydroxyskupinu; nebo farmaceuticky vhodnou sůl některé z těchto sloučenin; a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo ve druhé jednotkové dávkovači formě; a

c) obalový prostředek pro první a druhou dávkovači formu.
16. Kit podle nároku 15, vyznačující se tím, že kompozice obsahuje sloučeninu, kde R¹ představuje vodík, nebo její farmaceuticky vhodnou sůl.
17. Kit podle nároku 16, vyznačující se tím, že kompozice obsahuje hemivápenatou sůl atorvastatinu.
18. Kit podle nároku 15, vyznačující se tím, že kompozice obsahuje sloučeninu, kde R¹ představuje 2-hydroxyskupinu, nebo její farmaceuticky vhodnou sůl.

·· ····

10. První farmaceutická kompozice pro použití s druhou farmaceutickou kompozicí pro dosahování terapeutického účinku u savců, přičemž tento účinek je větší než účinek, jakého se dosáhne podáváním první nebo druhé kompozice odděleně a přičemž druhá kompozice obsahuje množství sloučeniny obecného vzorce I nebo necyklizované formy obecného vzorce IA • fc fc • · · • · · • fc fcfcfcfc kde R¹ představuje vodík nebo hydroxyskupinu, nebo její farmaceuticky vhodné soli, a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo, a první farmaceutická kompozice obsahuje ethylester [2R, 4S]-4-[ (3,5-bistrifluormethylbenzyl)methoxy-karbonylamino]2-ethyl-6-trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin--1-karboxylové kyseliny a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo.
20. První farmaceutická kompozice pro použití s druhou farmaceutickou kompozicí pro dosahování terapeutického účinku u savců, přičemž tento účinek je větší než účinek, jakého se dosáhne podáváním první nebo druhé kompozice odděleně a přičemž druhá kompozice obsahuje množství ethylesteru [2R,4S]-4-[ (3,5-bi stri fluormethylbenzyl)methoxykarbonylamino]-2 -ethyl-6 -trifluormethyl-3,4-dihydro-2H-chinolin-l-karboxylové kyseliny a farmaceuticky vhodný nosič, vehikulum nebo ředidlo, a první farmaceutická kompozice obsahuje množství sloučeniny obecného vzorce I ♦

nebo necyklizované formy obecného vzorce IA kde R¹ představuje vodík nebo hydroxyskupinu, nebo její farmaceu ticky vhodné soli, a farmaceuticky vhodný nosič, vehikuium nebo ředidlo.

►