CZ20033291A3 - Peptidy a příbuzné molekuly, které se vážou k TALL-1 - Google Patents
Peptidy a příbuzné molekuly, které se vážou k TALL-1 Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20033291A3 CZ20033291A3 CZ20033291A CZ20033291A CZ20033291A3 CZ 20033291 A3 CZ20033291 A3 CZ 20033291A3 CZ 20033291 A CZ20033291 A CZ 20033291A CZ 20033291 A CZ20033291 A CZ 20033291A CZ 20033291 A3 CZ20033291 A3 CZ 20033291A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- amino acid
- residue
- seq
- independently
- acid residues
- Prior art date
Links
- 102000016605 B-Cell Activating Factor Human genes 0.000 title claims abstract description 72
- 108010028006 B-Cell Activating Factor Proteins 0.000 title claims abstract description 72
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title description 150
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title description 84
- 230000027455 binding Effects 0.000 title description 49
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 97
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 44
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 143
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 67
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 claims description 52
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 40
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 40
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 35
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 30
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 22
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 16
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 12
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 12
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 10
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 claims description 9
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 claims description 8
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 claims description 8
- 101000795167 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Proteins 0.000 claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 102100029675 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Human genes 0.000 claims description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 101000795169 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Proteins 0.000 claims description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 6
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 5
- 102100029690 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Human genes 0.000 claims description 5
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 5
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 4
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 4
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 claims description 3
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims 28
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 17
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 abstract description 8
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 79
- 101150052424 AGP3 gene Proteins 0.000 description 74
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 69
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 62
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 59
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 53
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 41
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 32
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 32
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 32
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 30
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 27
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 27
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 26
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 25
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 24
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 22
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 20
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 17
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 17
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 15
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 14
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 14
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 13
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 12
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 12
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 12
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 12
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 12
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 10
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 10
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 9
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 9
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 9
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 9
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 8
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 8
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 8
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 8
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 8
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 8
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 8
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 8
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 8
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 7
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 7
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 7
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 7
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 7
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 7
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 6
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 6
- 108010067902 Peptide Library Proteins 0.000 description 6
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 6
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 6
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 6
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 6
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 6
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 6
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 6
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 6
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 5
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 5
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 5
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 5
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 5
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 5
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 5
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 5
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 5
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 5
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 4
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 4
- 108090000385 Fibroblast growth factor 7 Proteins 0.000 description 4
- 102000003972 Fibroblast growth factor 7 Human genes 0.000 description 4
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 4
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 4
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 4
- 230000003367 anti-collagen effect Effects 0.000 description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 4
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 4
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 4
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 4
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 4
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 4
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 4
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 4
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 4
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 4
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 4
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 4
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 235000008521 threonine Nutrition 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 3
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 3
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 3
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- HSHXDCVZWHOWCS-UHFFFAOYSA-N N'-hexadecylthiophene-2-carbohydrazide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCNNC(=O)c1cccs1 HSHXDCVZWHOWCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 3
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 3
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 3
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 3
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 3
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 3
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 3
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 3
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 3
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 3
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 3
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 3
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 3
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 3
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 3
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 3
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 3
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 3
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 3
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical group O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 3
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 3
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 3
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 3
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 3
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100023995 Beta-nerve growth factor Human genes 0.000 description 2
- 102000007499 CD27 Ligand Human genes 0.000 description 2
- 108010046080 CD27 Ligand Proteins 0.000 description 2
- 102000004634 CD30 Ligand Human genes 0.000 description 2
- 108010017987 CD30 Ligand Proteins 0.000 description 2
- 108090000426 Caspase-1 Proteins 0.000 description 2
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 2
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 2
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N Diacetyl Chemical compound CC(=O)C(C)=O QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 2
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 2
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000608935 Homo sapiens Leukosialin Proteins 0.000 description 2
- 101000831616 Homo sapiens Protachykinin-1 Proteins 0.000 description 2
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 2
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 102100039564 Leukosialin Human genes 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 2
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 101000678193 Mus musculus Alpha-1-acid glycoprotein 3 Proteins 0.000 description 2
- 101000974353 Mus musculus Nuclear receptor coactivator 5 Proteins 0.000 description 2
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000007399 Nuclear hormone receptor Human genes 0.000 description 2
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 description 2
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 101710178358 Peptidoglycan-associated lipoprotein Proteins 0.000 description 2
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 102100024304 Protachykinin-1 Human genes 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 2
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N Pyridoxal Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 102000046283 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Human genes 0.000 description 2
- NYTOUQBROMCLBJ-UHFFFAOYSA-N Tetranitromethane Chemical compound [O-][N+](=O)C([N+]([O-])=O)([N+]([O-])=O)[N+]([O-])=O NYTOUQBROMCLBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013081 Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily Member 13 Human genes 0.000 description 2
- 108010065323 Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily Member 13 Proteins 0.000 description 2
- 108010080432 Tumor Necrosis Factor Receptor-Associated Peptides and Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000000160 Tumor Necrosis Factor Receptor-Associated Peptides and Proteins Human genes 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N acetylacetone Chemical compound CC(=O)CC(C)=O YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- ULDWTSQHEYEWRZ-CBEYZXOKSA-N ansamitocinoside p-3 Chemical compound C(/[C@H]([C@@]1(O)C[C@H](OC(=O)N1)[C@@H](C)[C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)C(C)C)CC1=O)OC)=C\C=C(C)\CC(C=2)=CC(OC)=C(Cl)C=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O ULDWTSQHEYEWRZ-CBEYZXOKSA-N 0.000 description 2
- 239000003435 antirheumatic agent Substances 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 2
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 101150023807 copB gene Proteins 0.000 description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000002988 disease modifying antirheumatic drug Substances 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 2
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L glutamate group Chemical group N[C@@H](CCC(=O)[O-])C(=O)[O-] WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L 0.000 description 2
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 2
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 101150109249 lacI gene Proteins 0.000 description 2
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 101150016512 luxR gene Proteins 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940071648 metered dose inhaler Drugs 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OJUGVDODNPJEEC-UHFFFAOYSA-N phenylglyoxal Chemical compound O=CC(=O)C1=CC=CC=C1 OJUGVDODNPJEEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 2
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 2
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 2
- 229920001343 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 description 2
- 239000004810 polytetrafluoroethylene Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 2
- NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N pyridoxal 5'-phosphate Chemical compound CC1=NC=C(COP(O)(O)=O)C(C=O)=C1O NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 101150055347 repA2 gene Proteins 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000002702 ribosome display Methods 0.000 description 2
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- VLYWMPOKSSWJAL-UHFFFAOYSA-N sulfamethoxypyridazine Chemical compound N1=NC(OC)=CC=C1NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 VLYWMPOKSSWJAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 2
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 2
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AASBXERNXVFUEJ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) propanoate Chemical compound CCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O AASBXERNXVFUEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IZUAHLHTQJCCLJ-UHFFFAOYSA-N (2-chloro-1,1,2,2-tetrafluoroethyl) hypochlorite Chemical compound FC(F)(Cl)C(F)(F)OCl IZUAHLHTQJCCLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N (7r)-7-[[(2z)-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-(2,2-dimethylpropanoyloxymethoxyimino)acetyl]amino]-3-ethenyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound N([C@@H]1C(N2C(=C(C=C)CSC21)C(O)=O)=O)C(=O)\C(=N/OCOC(=O)C(C)(C)C)C1=CSC(N)=N1 HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N 0.000 description 1
- LVGUZGTVOIAKKC-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,2-tetrafluoroethane Chemical compound FCC(F)(F)F LVGUZGTVOIAKKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 1
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 description 1
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 description 1
- WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 1,3-dioxolane Chemical compound C1COCO1 WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003287 1H-imidazol-4-ylmethyl group Chemical group [H]N1C([H])=NC(C([H])([H])[*])=C1[H] 0.000 description 1
- OHMHBGPWCHTMQE-UHFFFAOYSA-N 2,2-dichloro-1,1,1-trifluoroethane Chemical compound FC(F)(F)C(Cl)Cl OHMHBGPWCHTMQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHJVRSWLHSJWIN-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O NHJVRSWLHSJWIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 description 1
- JEPVUMTVFPQKQE-AAKCMJRZSA-N 2-[(1s,2s,3r,4s)-1,2,3,4,5-pentahydroxypentyl]-1,3-thiazolidine-4-carboxylic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C1NC(C(O)=O)CS1 JEPVUMTVFPQKQE-AAKCMJRZSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JQPFYXFVUKHERX-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-2-cyclohexen-1-one Natural products OC1=CCCCC1=O JQPFYXFVUKHERX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VJINKBZUJYGZGP-UHFFFAOYSA-N 3-(1-aminopropylideneamino)propyl-trimethylazanium Chemical compound CCC(N)=NCCC[N+](C)(C)C VJINKBZUJYGZGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BIGBDMFRWJRLGJ-UHFFFAOYSA-N 3-benzyl-1,5-didiazoniopenta-1,4-diene-2,4-diolate Chemical compound [N-]=[N+]=CC(=O)C(C(=O)C=[N+]=[N-])CC1=CC=CC=C1 BIGBDMFRWJRLGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWSRLHPWDZOHCR-UHFFFAOYSA-N 4,4-diaminobutanoic acid Chemical compound NC(N)CCC(O)=O OWSRLHPWDZOHCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002627 4-1BB Ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010082808 4-1BB Ligand Proteins 0.000 description 1
- NLPWSMKACWGINL-UHFFFAOYSA-N 4-azido-2-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1O NLPWSMKACWGINL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- WQVFQXXBNHHPLX-ZKWXMUAHSA-N Ala-Ala-His Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O WQVFQXXBNHHPLX-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- NBTGEURICRTMGL-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NBTGEURICRTMGL-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N Ala-Ser Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 102100022463 Alpha-1-acid glycoprotein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710186701 Alpha-1-acid glycoprotein 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 241000024188 Andala Species 0.000 description 1
- 241001156002 Anthonomus pomorum Species 0.000 description 1
- 241001244729 Apalis Species 0.000 description 1
- PTNFNTOBUDWHNZ-GUBZILKMSA-N Asn-Arg-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O PTNFNTOBUDWHNZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LJUOLNXOWSWGKF-ACZMJKKPSA-N Asn-Asn-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LJUOLNXOWSWGKF-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- FTCGGKNCJZOPNB-WHFBIAKZSA-N Asn-Gly-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FTCGGKNCJZOPNB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KHCNTVRVAYCPQE-CIUDSAMLSA-N Asn-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KHCNTVRVAYCPQE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FANQWNCPNFEPGZ-WHFBIAKZSA-N Asp-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O FANQWNCPNFEPGZ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 1
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001260012 Bursa Species 0.000 description 1
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 1
- 101100111802 Caenorhabditis elegans best-26 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010007710 Cartilage injury Diseases 0.000 description 1
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008874 Chronic Fatigue Syndrome Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 1
- PJWWRFATQTVXHA-UHFFFAOYSA-N Cyclohexylaminopropanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCNC1CCCCC1 PJWWRFATQTVXHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NAPULYCVEVVFRB-HEIBUPTGSA-N Cys-Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](N)CS NAPULYCVEVVFRB-HEIBUPTGSA-N 0.000 description 1
- 102100031051 Cysteine and glycine-rich protein 1 Human genes 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 102000010170 Death domains Human genes 0.000 description 1
- 108050001718 Death domains Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 239000004338 Dichlorodifluoromethane Substances 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102400000686 Endothelin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101800004490 Endothelin-1 Proteins 0.000 description 1
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 1
- 101100160513 Escherichia coli repA4 gene Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026693 FAS-associated death domain protein Human genes 0.000 description 1
- 102000015212 Fas Ligand Protein Human genes 0.000 description 1
- 108010039471 Fas Ligand Protein Proteins 0.000 description 1
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000003971 Fibroblast Growth Factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 108090001047 Fibroblast growth factor 10 Proteins 0.000 description 1
- 102100028412 Fibroblast growth factor 10 Human genes 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- NUSWUSKZRCGFEX-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Cys Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NUSWUSKZRCGFEX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 229940117965 Glucocorticoid receptor modulator Drugs 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000018899 Glutamate Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010027915 Glutamate Receptors Proteins 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M Glycolate Chemical compound OCC([O-])=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N Glycyl-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 1
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229920000569 Gum karaya Polymers 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101000911074 Homo sapiens FAS-associated death domain protein Proteins 0.000 description 1
- 101000740205 Homo sapiens Sal-like protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000851434 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Proteins 0.000 description 1
- 101000648503 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A Proteins 0.000 description 1
- 101000850748 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor type 1-associated DEATH domain protein Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920001479 Hydroxyethyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 208000004454 Hyperalgesia Diseases 0.000 description 1
- 208000035154 Hyperesthesia Diseases 0.000 description 1
- 229940124790 IL-6 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 208000010159 IgA glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 101000668058 Infectious salmon anemia virus (isolate Atlantic salmon/Norway/810/9/99) RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit Proteins 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 1
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 1
- 102000048143 Insulin-Like Growth Factor II Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000051628 Interleukin-1 receptor antagonist Human genes 0.000 description 1
- 108700021006 Interleukin-1 receptor antagonist Proteins 0.000 description 1
- 102100026018 Interleukin-1 receptor antagonist protein Human genes 0.000 description 1
- 101710144554 Interleukin-1 receptor antagonist protein Proteins 0.000 description 1
- 102000004557 Interleukin-18 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017537 Interleukin-18 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 208000030653 Jaw disease Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 1
- 108010054278 Lac Repressors Proteins 0.000 description 1
- 239000012741 Laemmli sample buffer Substances 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 1
- 206010024453 Ligament sprain Diseases 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102100026238 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102000055008 Matrilin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010072582 Matrilin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 102000008934 Muscle Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010074084 Muscle Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000021642 Muscular disease Diseases 0.000 description 1
- 201000009623 Myopathy Diseases 0.000 description 1
- YRYOXRMDHALAFL-UHFFFAOYSA-N N-(3-oxohexanoyl)homoserine lactone Chemical compound CCCC(=O)CC(=O)NC1CCOC1=O YRYOXRMDHALAFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical class ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 208000009567 Neonatal Alloimmune Thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 101710115512 Nuclear receptor coactivator 5 Proteins 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 108010035042 Osteoprotegerin Proteins 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010033647 Pancreatitis acute Diseases 0.000 description 1
- 241001111421 Pannus Species 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- WEMYTDDMDBLPMI-DKIMLUQUSA-N Phe-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N WEMYTDDMDBLPMI-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- KIQUCMUULDXTAZ-HJOGWXRNSA-N Phe-Tyr-Tyr Chemical compound N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(O)=O KIQUCMUULDXTAZ-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- 241001495084 Phylo Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920001363 Polidocanol Polymers 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 229920002701 Polyoxyl 40 Stearate Polymers 0.000 description 1
- 229920000037 Polyproline Polymers 0.000 description 1
- 229920001219 Polysorbate 40 Polymers 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 229920002642 Polysorbate 65 Polymers 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 206010036595 Premature delivery Diseases 0.000 description 1
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 102000014128 RANK Ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 102100022419 RPA-interacting protein Human genes 0.000 description 1
- 230000010799 Receptor Interactions Effects 0.000 description 1
- 208000033464 Reiter syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- 241000219061 Rheum Species 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000829 Ribosome Inactivating Proteins Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000235088 Saccharomyces sp. Species 0.000 description 1
- 102100037204 Sal-like protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- QMCDMHWAKMUGJE-IHRRRGAJSA-N Ser-Phe-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O QMCDMHWAKMUGJE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N Ser-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- 206010049771 Shock haemorrhagic Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000004147 Sorbitan trioleate Substances 0.000 description 1
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 1
- 208000010040 Sprains and Strains Diseases 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241000934878 Sterculia Species 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102100036049 T-complex protein 1 subunit gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000043168 TGF-beta family Human genes 0.000 description 1
- 108091085018 TGF-beta family Proteins 0.000 description 1
- 102000004393 TNF receptor-associated factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000925 TNF receptor-associated factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000004399 TNF receptor-associated factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 108090000922 TNF receptor-associated factor 3 Proteins 0.000 description 1
- 102000003718 TNF receptor-associated factor 5 Human genes 0.000 description 1
- 108090000001 TNF receptor-associated factor 5 Proteins 0.000 description 1
- 102000003714 TNF receptor-associated factor 6 Human genes 0.000 description 1
- 108090000009 TNF receptor-associated factor 6 Proteins 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 102000003929 Transaminases Human genes 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 101710097160 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 10 Proteins 0.000 description 1
- 102100036922 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Human genes 0.000 description 1
- 102100032236 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11B Human genes 0.000 description 1
- 101710187743 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Proteins 0.000 description 1
- 102100033732 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Human genes 0.000 description 1
- 102100033081 Tumor necrosis factor receptor type 1-associated DEATH domain protein Human genes 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 108091005956 Type II transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- ARJASMXQBRNAGI-YESZJQIVSA-N Tyr-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N ARJASMXQBRNAGI-YESZJQIVSA-N 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- PAAZCQANMCYGAW-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound CC(O)=O.OC(=O)C(F)(F)F PAAZCQANMCYGAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N acridine orange free base Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3C=C21 DPKHZNPWBDQZCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 201000003229 acute pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 238000012387 aerosolization Methods 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 229940023476 agar Drugs 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 108010024078 alanyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 1
- NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N albuterol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(CO)=C1 NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 102000015395 alpha 1-Antitrypsin Human genes 0.000 description 1
- 108010050122 alpha 1-Antitrypsin Proteins 0.000 description 1
- 229940024142 alpha 1-antitrypsin Drugs 0.000 description 1
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 1
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 229940124325 anabolic agent Drugs 0.000 description 1
- 229960004238 anakinra Drugs 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 229960004977 anhydrous lactose Drugs 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003831 antifriction material Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940006138 antiglaucoma drug and miotics prostaglandin analogues Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-L aspartate group Chemical group N[C@@H](CC(=O)[O-])C(=O)[O-] CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-L 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N benzoquinolinylidene Natural products C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 238000013357 binding ELISA Methods 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011095 buffer preparation Methods 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910000394 calcium triphosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 101150062912 cct3 gene Proteins 0.000 description 1
- 229940047495 celebrex Drugs 0.000 description 1
- RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N celecoxib Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=CC(C(F)(F)F)=NN1C1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- KYKAJFCTULSVSH-UHFFFAOYSA-N chloro(fluoro)methane Chemical compound F[C]Cl KYKAJFCTULSVSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol group Chemical group [C@@H]1(CC[C@H]2[C@@H]3CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)[C@H](C)CCCC(C)C HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 1
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 239000012468 concentrated sample Substances 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 229940111134 coxibs Drugs 0.000 description 1
- 230000000515 cyanogenic effect Effects 0.000 description 1
- OILAIQUEIWYQPH-UHFFFAOYSA-N cyclohexane-1,2-dione Chemical compound O=C1CCCCC1=O OILAIQUEIWYQPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003255 cyclooxygenase 2 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000005786 degenerative changes Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- PXBRQCKWGAHEHS-UHFFFAOYSA-N dichlorodifluoromethane Chemical compound FC(F)(Cl)Cl PXBRQCKWGAHEHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019404 dichlorodifluoromethane Nutrition 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 235000019329 dioctyl sodium sulphosuccinate Nutrition 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- YHAIUSTWZPMYGG-UHFFFAOYSA-L disodium;2,2-dioctyl-3-sulfobutanedioate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCCCCC(C([O-])=O)(C(C([O-])=O)S(O)(=O)=O)CCCCCCCC YHAIUSTWZPMYGG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000012137 double-staining Methods 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 229940073621 enbrel Drugs 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 1
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol monododecyl ether Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCO SFNALCNOMXIBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007941 film coated tablet Substances 0.000 description 1
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 1
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 229910021485 fumed silica Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycine anhydride Natural products [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 1
- HHLFWLYXYJOTON-UHFFFAOYSA-N glyoxylic acid Chemical compound OC(=O)C=O HHLFWLYXYJOTON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N guanidine group Chemical group NC(=N)N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 102000053530 human TNFRSF11A Human genes 0.000 description 1
- 102000056239 human TNFRSF13B Human genes 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 230000008102 immune modulation Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000034435 immune system development Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 229940060367 inert ingredients Drugs 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 108010070145 interleukin-18 binding protein Proteins 0.000 description 1
- 102000044166 interleukin-18 binding protein Human genes 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 208000037906 ischaemic injury Diseases 0.000 description 1
- 235000010494 karaya gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000231 karaya gum Substances 0.000 description 1
- 229940039371 karaya gum Drugs 0.000 description 1
- 238000004989 laser desorption mass spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229950006462 lauromacrogol 400 Drugs 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 201000003723 learning disability Diseases 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N leuprolide Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N 0.000 description 1
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N linolenic acid Natural products CC=CCCC=CCC=CCCCCCCCC(O)=O KQQKGWQCNNTQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 101150026549 luxP gene Proteins 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940037627 magnesium lauryl sulfate Drugs 0.000 description 1
- HBNDBUATLJAUQM-UHFFFAOYSA-L magnesium;dodecyl sulfate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O.CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O HBNDBUATLJAUQM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229940127554 medical product Drugs 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N methamphetamine hydrochloride Chemical compound Cl.CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- RMAHPRNLQIRHIJ-UHFFFAOYSA-N methyl carbamimidate Chemical compound COC(N)=N RMAHPRNLQIRHIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- NEGQCMNHXHSFGU-UHFFFAOYSA-N methyl pyridine-2-carboximidate Chemical compound COC(=N)C1=CC=CC=N1 NEGQCMNHXHSFGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 208000029766 myalgic encephalomeyelitis/chronic fatigue syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000023837 negative regulation of proteolysis Effects 0.000 description 1
- 208000030372 neonatal thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013631 noncovalent dimer Substances 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XXUPLYBCNPLTIW-UHFFFAOYSA-N octadec-7-ynoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCC#CCCCCCC(O)=O XXUPLYBCNPLTIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M octanoate Chemical compound CCCCCCCC([O-])=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000021313 oleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229950010444 onercept Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229940126701 oral medication Drugs 0.000 description 1
- 239000008184 oral solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 1
- 230000000577 osteoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- RFWLACFDYFIVMC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;[oxido(phosphonatooxy)phosphoryl] phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O RFWLACFDYFIVMC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M phosphonate Chemical compound [O-]P(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L phosphoramidate Chemical compound NP([O-])([O-])=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000206 photolithography Methods 0.000 description 1
- 150000003022 phthalic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000232 polyglycine polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 1
- 235000010483 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000249 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 1
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 235000010988 polyoxyethylene sorbitan tristearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001816 polyoxyethylene sorbitan tristearate Substances 0.000 description 1
- 229940099429 polyoxyl 40 stearate Drugs 0.000 description 1
- 108010026466 polyproline Proteins 0.000 description 1
- 229940101027 polysorbate 40 Drugs 0.000 description 1
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 1
- 229940099511 polysorbate 65 Drugs 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000022558 protein metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229960003581 pyridoxal Drugs 0.000 description 1
- 235000008164 pyridoxal Nutrition 0.000 description 1
- 239000011674 pyridoxal Substances 0.000 description 1
- 235000007682 pyridoxal 5'-phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011589 pyridoxal 5'-phosphate Substances 0.000 description 1
- 229960001327 pyridoxal phosphate Drugs 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 208000002574 reactive arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 108010003189 recombinant human tumor necrosis factor-binding protein-1 Proteins 0.000 description 1
- 238000005932 reductive alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940116176 remicade Drugs 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N rofecoxib Chemical compound C1=CC(S(=O)(=O)C)=CC=C1C1=C(C=2C=CC=CC=2)C(=O)OC1 RZJQGNCSTQAWON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMVJITFPVVRMHC-UHFFFAOYSA-N roxarsone Chemical group OC1=CC=C([As](O)(O)=O)C=C1[N+]([O-])=O XMVJITFPVVRMHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000007781 signaling event Effects 0.000 description 1
- 235000021309 simple sugar Nutrition 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 208000019116 sleep disease Diseases 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000008109 sodium starch glycolate Substances 0.000 description 1
- 229940079832 sodium starch glycolate Drugs 0.000 description 1
- 229920003109 sodium starch glycolate Polymers 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 235000019337 sorbitan trioleate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000391 sorbitan trioleate Drugs 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- RINCXYDBBGOEEQ-UHFFFAOYSA-N succinic anhydride Chemical class O=C1CCC(=O)O1 RINCXYDBBGOEEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001258 synovial membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N teriparatide Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CNC=N1 OGBMKVWORPGQRR-UMXFMPSGSA-N 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 230000026727 thymocyte apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N trichlorofluoromethane Chemical compound FC(Cl)(Cl)Cl CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940029284 trichlorofluoromethane Drugs 0.000 description 1
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 208000035408 type 1 diabetes mellitus 1 Diseases 0.000 description 1
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000012178 vegetable wax Substances 0.000 description 1
- 229940070384 ventolin Drugs 0.000 description 1
- 229940087652 vioxx Drugs 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 229930195727 α-lactose Natural products 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/04—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers
- C07K1/047—Simultaneous synthesis of different peptide species; Peptide libraries
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/001—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof by chemical synthesis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
- C07K14/7151—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for tumor necrosis factor [TNF], for lymphotoxin [LT]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/1034—Isolating an individual clone by screening libraries
- C12N15/1037—Screening libraries presented on the surface of microorganisms, e.g. phage display, E. coli display
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
- C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
- C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures
- C40B40/02—Libraries contained in or displayed by microorganisms, e.g. bacteria or animal cells; Libraries contained in or displayed by vectors, e.g. plasmids; Libraries containing only microorganisms or vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/70—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
- C07K2319/74—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing a fusion for binding to a cell surface receptor
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Zoology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Virology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Transplantation (AREA)
Description
Tato přihláška souvisí s U.S. předběžnou přihláškou č. 60/290 196, podanou 11. května 2001, jež je zde zahrnuta formou odkazu.
DOSAVADNÍ STAV TECHNIKY
Po letech studií nekrózy nádorů byly konečně v roce 1984 klonovány faktory nekrózy nádorů (tumor necrosis factors, TNFs) a a β. V následujících letech byla například objevena superrodina cytokinů TNF, zahrnující ligand fas (FasL), ligand.CD27 (CD27L), ligand CD30 (CD30L), ligand CD40 (CD40L), ligand příbuzný TNF indukující apoptózu (TNFrelated apoptosis-inducing ligand, TRAIL, rovně,ž označovaný jako AGP-1), vazebný protein pro osteoprotegrin (osteoprotegerin binding protein, OPG-BP, nebo též OPG ligand), ligand 4-1BB ligand, LIGHT, APRÍL a TALL-1. Smith et al. (1994), Cell 76: 959-962; Lacey eťs^l. (1998), Cell
93: 165-176; Chichepotiche et al. (1997), J. Biol. Chem.
272: 32401-32410 ; Mauři et al. (1998), Immunity 8: 21-30;
Hahne et al. (1998), J. Exp. Med. 188: 1185-90; Shu et al.
(1999), J. Leukocyte Biology 65: 680-3. Tato rodina je jednotná ve své struktuře, zejména v C-konci. Kromě toho, většina dosud známých členů této rodiny je exprimována v částech imunitního systému, i když někteří z nich jsou rovněž exprimováni v jiných tkáních a orgánech. Smith et al. .(1994), Cell 76: 959-62. Všechny ligandy, s výjimkou LT-α, jsou transmembránovými proteiny typu II, charakterizované konzervovanou oblastí o 150 aminokyselinách uvnitř C-koncové extracelulární domény. I při omezení shodnosti na 20-25 %, sbaluje se konzervovaná doména o 150 aminokyselinách na charakteristickou strukturu • · · ···· ··· • ···· · · · · * ··· • ·· · » · ·· ··· ····· ···· · · · · ·· · • · · · ·· ·· ·· · β-skládaného listu a trimerizuje. Uvedená konzervovaná oblast může být proteolyticky uvolněna, a tak může poskytovat rozpustnou funkční formu. Banner et al. (1993),
Cell 73: 431-445.
Mnozí členové v rámci této rodiny ligandů jsou exprimováni v tkáních obohacených lymfoidy a hrají významné úlohy ve vývoji imunitního systému a jeho modulaci. Smith et al. (1994). Tak například, TNFa je převážně syntetizován makrofágy a je významným mediátorem pro zánětlivé odpovědi a imunitní obranu. Tracey & Cerami (1994), Ann. Rev. Med. 45: 491-503. Fas-L, převážně exprimovaný v aktivovaných T-buňkách, moduluje apoptózu thymocytů zprostředkovávanou s TCR. Nagata, S. & Suda, T. (1995) Immunology Today 16: 39-43; Castrim et al. (1996),
Immunity 5: 617-27. CD40L, rovněž exprimovaný aktivovanými T-buňkami, poskytuje základní signál pro přežívání B buněk, proliferaci a přepnutí (switching) imunoglobulinových isotypů. Noelle (1996), Immunity 4: 415-9.
Pro většinu členů rodiny ligandů TNF byly identifikovány receptory. Uvedené receptory mají charakteristické četné opakující se sekvence bohaté na cystein uvnitř svých extracelulárních domén a nemají katalytické motivy uvnitř cytoplasmatických oblastí. Smith et al. (1994). Receptory signalizují prostřednictvím přímé interakce se smrtící doménou proteinů (death domain proteins) (např. TRADD, FADD a RIP) nebo s proteiny TRAF (např. TRAF2, TRAF3, TRAF5 a TRAF6), spouštějícími odlišné a vzájemně se překrývající signální dráhy, např. apoptózu, aktivaci NF-κΒ, nebo aktivaci JNK. Wallach et al.(1999), Annual Review of Immunology 17: 331-67. Uvedené signální jevy vedou k buněčné smrti, proliferaci, aktivaci, nebo diferenciaci. Profil exprese pro každý z receptorových členů je různý. Tak například, TNFR1 je exprimován v širokém spektru tkání a buněk, zatímco buněčný povrchový receptor buněk OPGL je převážně omezen na osteoklasty. Hsu et al. (1999) Proč. Nati. Acad. Sci. USA 96: 3540-5.
Řada výzkumných týmů nedávno identifikovala rodinu ligandů TNF se shodnou nebo s v podstatně podobnou sekvencí. Ligand byl různě pojmenován jako neutrokin a (přihláška WO 98/18921, publikovaná 7. května 1998), 63954 (přihláška WO 98/27114, publikovaná 25. června 1998), TL5 (přihláška EP 869 180, publikovaná 7. října 1998), NTN-2 (přihláška WO 98/55620 a přihláška WO 98/55621, publikované
10. prosince 1998), TNRLl-alfa (přihláška WO 9911791, publikovaná 11. března 1999), „kay ligand (přihláška WO 99/12964, publikovaná 18. března 1999) a AGP-3 (U.S. prozatímní přihláška č. 60/119 906, podaná 12. února 1999, a U.S. prozatímní přihláška č. 60/166 271, podaná 18. listopadu 1999, v uvedeném pořadí); a TALL-1 (přihláška WO 00/68378, publikovaná 16. listopadu 2000). Každá z těchto přihlášek je zde zahrnuta formou odkazu. Zde uvedené ligandy jsou souhrnně nazývány jako TALL-1.
TALL-1 je členem superrodiny ligandu TNF, který se funkčně účastní v přežívání a proliferaci B buněk. Transgenní myš nadměrně exprimující TALL-1 měly těžkou hyperplasii B buněk a autoimunitní onemocnění podobné lupus (lupus-like autoimmune disease). Khare et al. (2000) PNAS (7): 3370-3375). Jak TACÍ, tak BCMA slouží jako buněčné povrchové receptory pro TALL-1. Gross et al. (2000), Nátuře
404: 995-999; Ware (2000), J. Exp. Med. 192 (11): F35-F37; Ware (2000), Nátuře 404: 949-950; Xia et al. (2000), J.
Med. 192(1): 137-143; Yu et al (2000), Nátuře Immunology 1 • · · ·
(3): 252-256; Marsters et al.(2000), Current Biology 10: 785-788 ; Hatzoglou et al. (2000), J. of Immunology 165:
1322-1330; Shu et al. (2000) PNAS 97 (16): 9156-9161; Thompson et al. (2000) J. Exp. Med. 192 (1): 129-135;
Mukhopadhyay et al. (1999) J. Biol. Chem. 274 (23): 1597881; Shu et al. (1999) J. Leukocyte Biol. 65: 680-683; Gruss et al. (1995) Blood 85 (12): 3378-3404; Smith et al.
(1994), Cell 76: 959-962; U.S. Patent č. 5 969 102, vydaný 19. října 1999; přihláška WO 00/67034, publikovaná 9. listopadu 2000; přihláška WO 00/40716, publikovaná 13. července 2000; přihláška WO 99/35170, publikovaná 15. července 1999. Oba receptory jsou exprimovány na B buňkách a signalizují prostřednictvím interakce s proteiny TRAF. Kromě toho, jak TACÍ, tak BCMA se rovněž váže k jinému členu rodiny ligandu TNF, a to k ligandu APRÍL. Yu et al. (2000), Nátuře Immunology 1 (3) : 252-256. Bylo prokázáno, že APRÍL indukuje proliferaci B buněk.
Až dosud nebyly popsány žádné rekombinantní nebo modifikované proteiny využívající modulátory TALL-1. Rekombinantní a modifikované proteiny jsou nově vznikající třídou terapeutických látek. Vhodné modifikace proteinových terapeutických činidel zahrnují kombinace s doménou „Fc z protilátky a navázání na takové polymery, jako je například polyethylenglykol (PEG) a dextran. Uvedené modifikace jsou detailně diskutovány v patentové přihlášce o názvu Modified Peptides as Therapeutic Agents, publikované jako WO 00/24782, která je zde zahrnuta formou odkazu v celém svém rozsahu.
Zcela odlišným přístupem ve vývoji terapeutických látek je screening peptidových knihoven. Interakce proteinového ligandu s receptorem často probíhá na relativně rozsáhlém rozhraní. Nicméně, tak, jak bylo prokázáno pro lidský růstový hormon a jeho receptor, pouze několik klíčových zbytků na rozhraní přispívá k většině vazebné energie. Clackson et al. (1995), Science 267: 3836. Podstatná část proteinových ligandů prostě představuje vazebné epitopy ve správné topologii, nebo má funkce nezávislé na vazbě. Z tohoto důvodu molekuly pouze o „peptidové délce (2 až 40 aminokyselin) se mohou vázat na receptorový protein uvedeného rozměrného proteinového ligandu. Takové peptidy mohou napodobovat bioaktivitu objemných ligandů („peptidové agonisty), nebo prostřednictvím kompetitivní vazby inhibují bioaktivitu objemných proteinových ligandů („peptidové antagonisty).
Pro identifikaci takových peptidových agonistů a antagonistů byla vyvinuta účinná metoda knihoven fágového displeje peptidů (phage display peptide libraries). Viz, například Scott et al. (1990), Science 249: 386 ; Devlin et al. (1990), Science 249: 404; U.S. Pat. č. 5 223 409, vydaný 29.6.1993; U.S. Pat. č. 5 733 731, vydaný 31.3.1998; U.S. Pat. č. 5 498 530, vydaný 12.3.1996; U.S. Pat. č.
432 018, vydaný 11.7.1995; U.S. Pat. č. 5 338 665, vydaný 16.8.1994; U.S. Pat. č. 5 922 545, vydaný 13.7.1999; přihláška WO 96/40987, zveřejněná 19.12.1996; a přihláška WO 98/15833, zveřejněná 16.4.1998 (každý z těchto dokumentů je zde zahrnut formou odkazu v celém svém rozsahu).
V takových knihovnách jsou náhodné peptidové sekvence exponovány (displejovány) ve fúzi s obalovými proteiny vláknitého fága. Typicky jsou peptidy exprimované fágy afinitně eluovány proti imobilizovanému cílovému proteinu. Zadržené fágy mohou být obohaceny následující sérií afinitní purifikace a repropagace. Peptidy, které se • · · ···· ··· • · · · · · · · · « «·· • · · · · · ·· · * · ····· « · · · ···· ·· · ·· ·· ·· · · ·· · nejlépe vážou, mohou být sekvenovány tak, aby byly identifikovány klíčové zbytky uvnitř jedné nebo více strukturně příbuzných rodin peptidů. Viz, například Cwirla et al. (1997), Science 276: 1696-9, kteří identifikovali dvě odlišné rodiny peptidů. Z peptidových sekvencí lze rovněž usoudit, které zbytky mohou být bezpečně nahrazeny alaninovým skenováním nebo mutagenezí na úrovni DNA. Mutagenezí mohou být vytvářeny knihovny, které jsou testovány pro další optimalizaci sekvence nejlepších vazebných členů Lowman (1997), Ann. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 26: 401-24.
Strukturní analýza interakce protein-protein může být rovněž použita pro navrhování peptidů, které napodobují vazebnou aktivitu objemných proteinových ligandů. Takovou analýzou je možné z krystalické struktury stanovit identitu a vzájemnou orientaci kritických zbytků v objemném proteinovém ligandu a navrhnout strukturu peptidů .Viz, například Takasaki et al. (1997), Nátuře Biotech. 15: 126670. Uvedené analytické metody mohou být rovněž použity pro zkoumání interakcí mezi receptorovým proteinem a peptidy, které jsou fágovým displejem vybírány, což může vést k dalším modifikacím peptidů za účelem zvýšení jejich vazebné afinity.
Ve výzkumu peptidů konkurují metodě fágového displeje i jiné metody. Peptidová knihovna může být fúzována ke karboxylovému konci lac represoru a exprimována v E. coli. Jiná metoda, založená na E. coli umožňuje exponování na vnější membráně buněk prostřednictvím fúze s lipoproteinem asociovaným s peptidoglykanem (peptidoglycan-associated lipoprotein, PAL). Tyto metody a metody níže uvedené jsou souhrnně nazývány jako „E. coli displej. V jiném postupu • · · · · · · • ··· · ··· • · · · · · • · · · · t · je zastavena translace nahodilé RNA před uvolněním z ribozómů, což vede ke knihovně polypeptidů s jejich asociovanou RNA, která je dosud připojena. Tyto metody a metody níže uvedené jsou souhrnně nazývány jako „ribozómový displej. Jiné metody využívají peptidy vázané k RNA; například „PROfusion technology, Phylos, lne. Viz, například Roberts & Szostak (1997), Proč. Nati Acad. Sci. USA, 94: 12297-303. Tyto metody a metody níže uvedené jsou souhrnně nazývány jako „screening RNA-peptidů. Rovněž byly připraveny peptidové knihovny chemickými postupy, ve kterých jsou peptidy imobilizovány na stabilních, nebiologických materiálech, jakými jsou polyethylenové nosiče nebo rozpustné permeabilní pryskyřice. V jiné, chemicky připravené peptidové knihovně, je používáno fotolithografie pro zobrazení peptidů imobilizovaných na skleněných sklíčkách. Tyto metody a metody níže uvedené jsou souhrnně nazývány jako chemický screening peptidů (chemical-peptide screening). Chemický screening peptidů může být výhodný proto, že umožňuje použití D-aminokyselin a jiných nepřirozených analogů, stejně jako nepeptidových prvků. Jak biologické, tak chemické metody jsou souhrnně uvedeny ve Wells & Lowman (1992), Curr. Opin. Biotechnol.
3: 355-62. S využitím fágového displeje, RNA-screeningu peptidů, a jiných výše zmíněných metod je možné nalézt peptidové mimetika jakéhokoliv proteinu .
PODSTATA VYNÁLEZU
Předkládaný vynález se týká terapeutických látek, které modulují aktivitu TALL-1. Podle předkládaného vynálezu mohou modulátory TALL-1 obsahovat aminokyselinovou sekvenci Dz2Lz4 (SEQ ID NO: 108), ve které z2 je aminokyselinový zbytek a z4 je threonyl nebo isoleucyl.
• ·
Takové modulátory TALL-1 zahrnují molekuly následujícího vzorce :
I (a) a1a2a3CDa6La8a9a10Ca12a13a14 (SEQ ID NO: 100) , ve kterém:
každý z a1, a2, a3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;
a6 je aminokyselinový zbytek;
a9 je bazický nebo hydrofobní zbytek;
a8 je threonyl nebo isoleucyl;
a10 je aminokyselinový zbytek;
a12 je neutrální hydrofobní zbytek; a každý z a13 a a14 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.
I (b) b1b2b3Cb5b6Db8Lb10b11b12b13b14Cb16b17b18 (SEQ ID NO: 104), ve kterém:
každý z b1 a b2 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;
b3 je kyselý nebo amidový zbytek;
b5 aminokyselinový zbytek;
b6 je aromatický zbytek;
b8 je aminokyselinový zbytek;
b10 je T nebo I;
b11 je bazický zbytek;
každý z b12 a b13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; b14 je neutrální hydrofobní zbytek; a každý z b16, b17 a b18 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.
• · ·· ·· · · ·· ·· · c1c2c3Cc5Dc7Lc9c10c11c12c13c14Cc16c17c18 (SEQ ID NO: 105), ve kterém:
každý z c1, . c2 a c3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky; o5 je aminokyselinový zbytek; c7 je aminokyselinový zbytek; c9 je T nebo I;
c10 je bazický zbytek;
každý z c11 a c12 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky;
c13 je neutrální hydrofobní zbytek;
c14 je aminokyselinový zbytek;
c16 je aminokyselinový zbytek;
c17 je neutrální hydrofobní zbytek; a c18 je aminokyselinový zbytek nebo není přítomen.
I (d) d1d2d3Cd5d6d7WDd10Ld12d13d14Cd15d16d17 (SEQ ID NO: 106) , ve kterém:
každý z d1, d2 a d3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;
každý z d5, d6 a d7 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky d10 je aminokyselinový zbytek; d12 je T nebo I;
d13 je aminokyselinový zbytek;
d14 je aminokyselinový zbytek; a každý z d16, d17 a d18 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.
I (e) ele2e3Ce5e6e7De9LellKel3ce15el6e17e18 • · · · • · · •· ·· ·· ·· ·· · (SEQ ID NO: 107), ve kterém:
každý z e1, e2 a e3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;
každý z e5, e6, e7, e9 a e13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky;
e11 je T nebo I; a každý z e15, e16 a e17 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.
I (f) f1f2f3Kf5Df7Lf9f10Qf12f13f14 (SEQ ID NO: 109) , ve kterém:
f1, f2 a f3 jsou nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky (s tím, že výhodně jeden z f1, f2 a f3 je C, jestliže jeden z f12, f13 a f14 je C);
f5 je W, Y, nebo F (výhodně W);
f7 je aminokyselinový zbytek (výhodně L);
f9 je T nebo I (výhodně T);
f10 je K, R nebo H (výhodně K) ;
f12 je C, neutrální hydrofobní zbytek nebo bazický zbytek (výhodně W, C nebo R);
f13 je C, neutrální hydrofobní zbytek nebo není přítomen (výhodně V) ; a f14 je jakýkoliv aminokyselinový zbytek nebo není přítomen; za předpokladu, že pouze jeden z f1, f2 a f3 může být C a pouze jeden z f12, f13 a f14 může být C.
Výše uvedené sloučeniny vzorců I(a) až I(f) obsahují Dz2Lz4, stejně jako SEQ ID NO: 63, uvedenou níže. Sekvence I(f) byla odvozena jako konsensus sekvence tak, jak je • · · ···· · · • · · · · 9 · · · · ··· • · · «·· · · ··· ···*· ···· «··· ·· « ·· · · · · · · · · · popsáno v Příkladu 1, uvedeném níže. Ze sloučenin vzorce I(f), jsou preferovány sloučeniny vzorce I(f') f1f2f3 *KWDf7Lf9KQf12f13f14 (SEQ ID NO: 125) .
Sloučeniny, spadající do vzorce I(f'), zahrnují sekvence SEQ ID NO: 32, 58, 60, 62, 63, 66, 67, 69, 70, 114, 115, 122, 123, 124, 147-150, 152-177, 179, 180, 187.
V souladu s předkládaným vynálezem jsou rovněž sloučeniny mající konsensus motiv:
PFPWE (SEQ ID NO: 110), které rovněž vážou TALL-1.
Dalšími sloučeninami podle předkládaného vynálezu jsou sloučeniny vzorce:
I (g) g1g2g3Cg5PFg8Wg10Cg11g12g13 (SEQ ID NO: 101), ve kterém:
každý z g1, g2 a g3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;
g5 je neutrální hydrofobní zbytek;
g8 je neutrální hydrofobní zbytek;
g10 je kyselý zbytek;
každý z g12 a g13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; a g14 je nepřítomen nebo je aminokyselinový zbytek.
I (h) h1h2h3CWh6h7WGh10Ch12h13h14 (SEQ ID NO: 102) , ve kterém:
každý z h1, h2 a h3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;
h6 je hydrofobní zbytek;
• · · · • # ·
h7 je hydrofobní zbytek;
h10 je kyselý nebo polární hydrofobní zbytek; a každý z h12, h13 a h14 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.
I (i) i1i2i3Ci5i6i7i8i9i10Ci12i13i14 (SEQ ID NO: 103) , ve kterém:
11 je nepřítomen nebo je aminokyselinový zbytek;
12 je neutrální hydrofobní zbytek;
13 je aminokyselinový zbytek;
každý z i5, i6, i7 a i8 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky;
i9 je kyselý zbytek;
i10 je aminokyselinový zbytek;
každý z i12 a i13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; a i14 je neutrální hydrofobní zbytek.
Sloučeniny definované vzorci I(g) až Z(i) rovněž vážou TALL-1.
Dále podle předkládaného vynálezu zahrnují modulátory TALL
1:
a) TALL-1 modulující doménu (např. aminokyselinovou sekvenci vzorce I(a) až I(i), výhodně aminokyselinovou sekvenci Dz2Lz4, nebo sekvence z ní odvozené pomocí fágového displeje, screeningu RNApeptid, nebo jinými technikami uvedenými výše; a
b) vehikulum, jako například polymer (např. PEG nebo dextran) nebo Fc doménu, která je preferována;
přičemž vehikulum je kovalentně připojeno k doméně modulující TALL-1. Vehikulum a doména modulující TALL-1 mohou být spojeny prostřednictvím N- nebo C-konce domény • · · · modulující TALL-1 tak, jak je popsáno níže dále. Preferovaným vehikulem je doména Fc, a preferovanou doménou Fc je doména IgG Fc. Takto Fc-spojené peptidy jsou zde nazývány „peptibodies. Preferované domény modulující TALL1 zahrnují aminokyselinové sekvence zde popsané v Tabulkách 1 a 2. Další domény modulující TALL-1 mohou být generovány fágovým displejem, screeningem RNA-peptid a dalšími zde zmíněnými technikami.
Dalším předmětem podle předkládaného vynálezu je způsob přípravy modulátorů TALL-1, který zahrnuje:
a. selekci alespoň jednoho peptidu, který se váže s TALL-1; a
b. kovalentní připojení uvedeného peptidu k vehikulu.
Výhodným vehikulem je doména Fc. Krok (a) je výhodně prováděn selekcí z peptidových sekvencí zde uvedených v Tabulce 2, nebo fágovým displejem, screeningem RNApeptid, nebo jinými zde zmíněnými technikami.
Sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny standardními metodami syntézy, technikami rekombinantní DNA, nebo s jakýmikoliv jinými metodami přípravy peptidů a fúzních proteinů. Sloučeniny podle vynálezu, které obsahují nepeptidové podíly, mohou být vedle standardních reakcí peptidové chemie syntetizovány reakcemi standardní organické chemie, pokud je to vhodné.
Primárním zamýšleným použitím sloučenin podle vynálezu je jejich použití jako terapeutických a profylakčních agens. Peptid spojený s vehikulem může mít aktivitu srovnatelnou, nebo dokonce větší, než má přirozený ligand napodobovaný peptidem.
• · · ·
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být použity pro terapeutické nebo profylaktické účely tak, že jsou upraveny s vhodnými farmaceutickými nosičovými materiály a podávány v účinném množství potřebnému pacientovi, jakým je například člověk (nebo jiný savec). Další související aspekty jsou rovněž zahrnuty v předmětném vynálezu.
Četné další aspekty a přednosti předkládaného vynálezu se stanou zřejmými z podrobného popisu vynálezu s přihlédnutím k obrázkům.
Stručný popis obrázků
Obrázek 1 znázorňuje příkladné dimery Fc, které mohou být odvozeny z protilátky IgGl. „Fc na obrázku představuje jakoukoliv z variant Fc ve zde použitém významu „doména Fc. „XI a „X2 představují peptidy nebo linker-peptidové kombinace tak, jak jsou definovány níže. Specifické dimery jsou následující:
A, D: Dimery s jednoduchou disulfidovou vazbou. Protilátky IgGl mají běžně dva disulfidové můstky v pantové oblasti protilátky. Doména Fc na Obrázcích 1A a ID může být vytvořena zkrácením mezi místy dvou disulfidových můstků, nebo substitucí zbytku cysteinylu za nereagující zbytek, který nevytváří disulfidový můstek (například alanyl). Na Obrázku 1A, je doména Fc vázána na aminokonec peptidů; na Obrázku ID pak na karboxykonec.
B, E: Dimery s dvojitou disulfidovou vazbou. Tato doména Fc může být vytvořena zkrácením rodičovské protilátky se zachováním obou zbytků cysteinylu v řetězcích • · domény Fc, nebo expresí z konstruktu obsahujícího sekvenci kódující takovou doménu Fc. Na Obrázku 1B je doména Fc vázána na aminokonec peptidů; na Obrázku IE pak na karboxykonec.
C, F: Nekovalentní dimery. Tato doména Fc může být vytvořena eliminací zbytků cysteinylu buďto zkrácením, nebo substitucí. Může být požadována eliminace zbytků cysteinylu tak, aby byly vyloučeny nečistoty, které se vytvářejí reakcí zbytků cysteinylu se zbytky cysteinylu jiných proteinů, jež jsou přítomny v hostitelské buňce.
Nekovalentní vazba domén Fc je pro soudržnost dimeru postačuj ící.
Další dimery mohou být vytvářeny s použitím domén Fc získaných z odlišných typů protilátek (například IgG2,
IgM) .
Obázek 2 znázorňuje strukturu výhodných sloučenin podle vynálezu, které jsou charakterizovány tandemovým opakováním farmakologicky aktivního peptidů. Obrázek 2A znázorňuje jednořetězcovou molekulu a může rovněž představovat konstrukt DNA pro molekulu. Obrázek 2B znázorňuje dimer, ve kterém linker-peptidový podíl je přítomen pouze v jednom řetězci dimeru. Obrázek 2C znázorňuje dimer, který má peptidový podíl v obou řetězcích. Dimer podle Obrázku 2C se spontánně vytváří v určitých hostitelských buňkách po expresi konstruktu DNA kódujícího jednotlivý řetězec znázorněný na Obrázku 3A.
V případě jiných hostitelských buněk mohou být buňky pěstovány za podmínek, které favorizují tvorbu dimeru, nebo dimery mohou být vytvářeny in vitro.
• ·
Obrázek 3 znázorňuje příkladnou sekvenci nukleové kyseliny a sekvenci aminokyselin (SEQ ID NO: 1 a 2, v uvedeném pořadí) lidského IgGl Fc, které mohou být použity podle tohoto vynálezu.
Obrázky 4A až 4F znázorňují nukleotidové a aminokyselinové sekvence (SEQ ID NO: 3-27) fragmentů Ndel až Sáli, kódujících peptid a linker.
Obrázky 5A až 5M znázorňují nukleotidovou sekvenci (SEQ ID NO: 28) vektoru pAMG21-RANK-Fc, který byl použit ke konstruování Fc-spojených molekul podle předkládaného vynálezu. Tyto obrázky identifikují řadu znaků nukleové kyseliny, včetně:
• oblastí promotoru PcopB, PrepA, RNAI, APHII, luxPR a luxPL;
• mRNA pro APHII, luxR;
• kódující sekvence a proteinové aminokyselinové sekvence pro protein copB, copT, repAI, repA4, APHII, luxR, RANK, a Fc;
• vazebná místa proteinů copB, CRP;
• vlásenkové struktury TI, T2, T7 a „toop;
• místo operátoru pro protein protein lux;
• místa pro restrikční enzymy Pf111081, BglII, Seal,BmnI, DrdlI, DralII, BstBI, AcelII, AflII, PflMI, BglI, Sfil, BstEII, BspLullI, NspV, BplI, Eagl, Bcgl, Nsil, Bsal, Pspl406I, AatlI, BsmI, Nrul, Ndel, ApaLI, Acc65I, KpnI,
Sáli, AccI, BspEI, Ahdl, BspHI, EconI, BsrGI, Bmal, Smál, SexAI, BamHI a BlpI.
Obrázky 6A a 6B znázorňují sekvence DNA (SEQ ID NO:
97) inzerované do pCFM1656 mezi jedinečné restrikční místo
AatlI (pozice číslo 4364 v pCFM1656) a restrikční místo • * ·
SacII (pozice číslo 4585 v pCFMl656) k vytvoření expresivního plasmidu pAMG21 (přírůstkové číslo ATCC 98113) .
Obrázek 7 znázorňuje, že „TALL-1 peptibody (SEQ ID NO: 70) inhibuje proliferaci B buněk zprostředkovanou TALL-1. Purifikované B buňky (105) z myší B6 byly triplicitně kultivovány na plotnách o 96 jamkách s určitým množstvím TALL-1 konsensus peptibody v přítomnosti 10 ng/ml TALL-1 plus 2 gg/ml protilátky anti-IgM. Proliferace byla měřena příjmem radioaktivního [3H]thymidinu v posledních 18 hodinách značení. Uvedené výsledky reprezentují průměr ± SD ze tří jamek.
Obrázek 8 uvádí, že TALL-1 N-terminální tandemové dimerní peptidy (peptibodies) (SEQ ID NO: 123, 124 v níže uvedené Tabulce 5B) jsou výhodné pro inhibici proliferace B buněk zprostředkované TALL-1. Purifikované B buňky (105) z myší B6 byly triplicitně kultivovány v 96-jamkových plotnách s určitým množstvím TALL-1 12-3 peptibody a TALL-1 konsensus peptibody (SEQ ID NO: 115 a 122 z Tabulky 5B) nebo s příbuznými dímerovými peptidy (peptibodies) (SEQ ID NO: 123, 124) v přítomnosti 10 ng/ml TALL-1 plus 2 μς/ιηΐ anti-IgM protilátky. Proliferace byla měřena příjmem radioaktivního [3H]thymidinu v posledních 18 hodinách značení. Uvedené výsledky reprezentují průměr ± SD ze tří j ame k.
Obrázek 9. Peptibody AGP3 se váže k AGP3 s vysokou afinitou. Disociační rovnovážná konstanta (KD) byla získána z nelineární regrese kompetičních křivek s použitím „dualcurve one-site homogeneous binding model (KinEx™ • · • · software). KD je přibližně 4 pM pro vazbu peptibody AGP3 s lidským AGP3 (SEQ ID NO: 123).
Obrázky 10A a 10B. Peptibody AGP3 blokuje lidský a myší AGP3 v kompetiční zkoušce Biacore (Biacore competition assay). Rozpustný lidský protein TACÍ byl imobilizován k čipu Bl. 1 nM rekombinantního lidského proteinu AGP3 (horní panel) nebo 5 nM rekombinantního myšího proteinu AGP3 (dolní panel) bylo inkubováno s určitým množstvím peptibody AGP3 před nastříknutím na povrch receptoru. Byla stanovena relativní vazebná odpověď lidského AGP3 a myšího AGP3 (SEQ ID NO: 123).
Obrázky 11A a 11B. Peptibody AGP3 blokoval vazbu AGP3 ke všem třem receptorům TACÍ, BCMA a BAFFR v kompetiční zkoušce Biacore. Rekombinantní rozpustné receptorové proteiny TACÍ, BCMA a BAFFR byly, imobilizovány k čipu CM5.
nM rekombinantního lidského AGP3 (horní panel) byl inkubován s určitým množstvím peptibody AGP3 před nastříknutím na každý z povrchů receptoru. Byla stanovena relativní vazebná odpověď AGP3. Podobně, 1 nM rekombinantního proteinu APRÍL byl inkubován s určitým množstvím peptibody AGP3 před nastříknutím na každý z povrchů receptoru. Peptibody AGP3 neinhiboval vazbu APRÍL ke všem třem receptorům (SEQ ID NO: 123).
Obrázky 12A a 12B. Peptibody AGP3 inhibuje zvýšení hladiny imunoglobulinu v séru myší, indukované imunizací s lidským AGP3. Myši Balb/c dostávaly denně po dobu 7 dnů intraperitoneální injekce 1 mg/kg lidského proteinu AGP3 zároveň s fyziologickým roztokem, lidským Fc, nebo peptibody AGP3 v uvedených dávkách a byly v 8. dnu * · usmrceny. Celkové hladiny IgM a IgA v séru byly měřeny metodou ELISA (SEQ ID NO: 123).
Obrázek 13. Ošetření s peptibody AGP3 snižovalo intenzitu artritidy v myším modelu CIA. Samečkové myší DBA/1, staří osm až dvanáct týdnů, byli intradermálně imunizováni u kořene ocasu s hovězím kolagenem typu II (bCII), emulzifikovaném v kompletním Freundově adjuvans, a 3 týdny po primární imunizaci byli opakovaně imunizováni (boosted) s bCII, emulzifikovaném v nekompletním Freundově adjuvans. Ošetření se stanovenými dávkami peptibody AGP3 bylo zahájeno v den opakované imunizace po dobu 4 týdnů. Způsobem dříve popsaným (Khare et al., J. Immunol. 155: 3653-9, 1995), byly všechny čtyři packy z hlediska postižení artritidou jednotlivě skórovány body 0-3 (SEQ ID NO: 123).
Obrázek 14. Ošetření s peptibody AGP3 inhibovalo v myším modelu CIA tvorbu anti-kolagenové protilátky. Vzorky séra byly odebrány jeden týden po konečném ošetření (den 35) tak, jak bylo popsáno výše. Hladina protilátky proti kolagenu II byla v séru stanovena metodou ELISA (SEQ ID NO: 123).
Obrázky 15A a 15B. Ošetření s peptibody AGP3 oddálilo počátek proteinurie a zlepšilo přežívání myší „NZB/NZW lupus. Pět měsíců staré myši NZBx NZBWFl náchylné k lupus byly ošetřeny i.p. 3x/týden po 8 týdnů s PBS, nebo se stanovenými dávkami peptibody AGP3 (SEQ ID NO: 123), nebo s lidskými proteiny Fc. Po dobu pokusu byl protein v moči byla stanovován každý měsíc po dobu trvání pokusu, a to s proužky „Albustix reagent strips (Bayer AG).
· · · · · * ·, • ···· · · ·· 9 9 9 · 9 999 99 9 9 9 9 «··· • * · · · 9 * · «· · • · ·· ·· 9 9 9 9 9
Obrázky 16A a 16B uvádějí nukleokyselinové a aminokyselinové sekvence výhodného TALL-l-vazebného peptibody (SEQ ID NO: 189 a 123).
PODROBNÝ POPIS VYNÁLEZU
Definice pojmů
Termíny, použité v tomto popise, mají následující význam, pokud nejsou ve specifických případech jiným způsobem omezeny.
Obecné definice
Výraz „zahrnující znamená, že sloučenina může obsahovat další aminokyseliny na jak jednom, tak na obou N a C- koncích dané sekvence. Je zřejmé, že tyto další (dodatečné) aminokyseliny by neměly signifikantně interferovat s aktivitou sloučeniny.
Kromě toho, jsou zde zahrnuty fyziologicky přijatelné soli sloučenin podle vynálezu. Výraz „fyziologicky přijatelná sůl se týká jakýchkoliv solí, které jsou známé nebo budou později objeveny, které jsou farmaceuticky přijatelné. Některými ze specifických příkladů jsou: octan trifluoroctan; hydrohalogenid, jako je například hydrochlorid a hydrobromid; síran; citrát; tartarát; glykolát; a oxalát.
Aminokyseliny • · · ···· ··· • · · · · · ··· · ··· ···· ···· ·· · ·· »· ·· ·· ·· ·
Výraz „kyselý zbytek se týká zbytku aminokyselin v Dnebo L- formě, které mají boční řetězce obsahující kyselé skupiny. Příkladné kyselé zbytky zahrnují D a E.
Výraz amidový zbytek se týká aminokyselin v D- a Lformě, které mají boční řetězce obsahující amidové deriváty kyselých skupin. Příkladné zbytky zahrnují N a Q.
Výraz „aromatický zbytek se týká aminokyselinových zbytků v D- nebo L- formě, které mají boční řetězce obsahující aromatické skupiny. Příkladné aromatické zbytky zahrnují F, Y a W.
Výraz „bazický zbytek se týká aminokyselinových zbytků v D- nebo L-formě, které mají boční řetězce obsahující bazické skupiny. Příkladné bazické zbytky zahrnují Η, K a R.
Výraz „hydrofilní zbytek se týká aminokyselinových zbytků v D- nebo L- formě, které mají boční řetězce obsahující polární skupiny. Příkladné hydrofilní zbytky zahrnují C, S, T, N a Q.
Výraz „nefunkční zbytek se týká aminokyselinových zbytků v D- nebo L- formě, které mají boční řetězce, jež postrádají kyselé, bazické, nebo aromatické skupiny. Příkladné nefunkční aminokyselinové zbytky zahrnují M, G,
A, V, I, L a norleucin (Nle).
Výraz „neutrální hydrofobní zbytek se týká aminokyselinových zbytků v D- nebo L- formě , které mají boční řetězce, jež postrádají bazické, kyselé, nebo polární skupiny. Příkladné neutrální hydrofobní aminokyselinové zbytky zahrnují A, V, L, I, P, W, M a F.
Výraz „polární hydrofobní zbytek se týká aminokyselinových zbytků v D- nebo L- formě, které mají boční řetězce obsahující polární skupiny. Příkladnými polárními hydrofobními aminokyselinovými zbytky jsou T, G, S, Y, C, Q a N.
Výraz „hydrofobní zbytek se týká aminokyselinových zbytků v D- nebo L- formě, které mají boční řetězce jež postrádají bazické nebo kyselé skupiny. Příkladné hydrofobní aminokyselinové zbytky zahrnují A, V, L, I, P,
W, M, F, T, G, S, Y, C, Q a N.
Peptidy
Výraz „peptid se týká molekul z 1 až 40 aminokyselin, výhodně molekul z 5 až 20 aminokyselin. Příkladné peptidy mohou zahrnovat doménu modulující TALL-1 z přirozeně se vyskytující molekuly, nebo zahrnují náhodné sekvence.
Výraz „náhodné tak, jak je zde použit ve vztahu k peptidovým sekvencím, se týká zcela náhodných sekvencí (například selektovaných pomocí metod fágového displeje nebo RNA-peptidového screeningu) a sekvencí, ve kterých jeden nebo více zbytků v přirozeně se vyskytující molekule je zaměněno aminokyselinovým zbytkem, který se v dané pozici v přirozené molekule nevyskytuje. Příkladné způsoby pro identifikaci peptidových sekvencí zahrnují fágový displej, E. coli displej, ribozómový displej, RNA-peptidový screening, chemický screening a podobně.
Výraz „doména modulující TALL-1 se týká jakékoliv aminokyselinové sekvence, která se váže k TALL-1 a obsahuje přirozeně se vyskytující sekvence nebo náhodné sekvence. Příkladné domény modulující TALL-1 mohou být identifikovány nebo odvozeny fágovým displejem nebo jinými zde zmíněnými metodami.
Výraz „antagonista TALL-1 se týká molekuly, která se váže k TALL-1 a zvyšuje nebo snižuje jeden nebo více zkouškových parametrů, na rozdíl od účinku přirozeného TALL-1 o úplné délce na tyto parametry. Takováto aktivita může být stanovena metodami, které jsou popsány v subsekci nazvané „Biological activity of AGP-3 v části Materials & Methods přihlášky vynálezu o názvu „TNF-RELATED PROTEINS, WO 00/47740, publikované 17. srpna 2000.
Vehikula a peptibodies
Výraz „vehikulum se týká molekuly, která brání degradaci a/nebo zvyšuje biologický poločas, snižuje toxicitu, snižuje imunogenicitu, nebo zvyšuje biologickou aktivitu terapeutického proteinu. Příkladná vehikula zahrnují doménu Fc (která je preferována), stejně jako lineární polymer (například polyethylenglykol (PEG), polylysin, dextran, atd.); polymer s rozvětveným řetězcem (viz, například U.S. Patenty č. 4 289 872, původců Denkenwalter et al., vydaný 15. září 1981; 5 229 490, původce Tam, vydaný 20. července 1993; přihlášku WO 93/21259, původců Frechet et al., publikovanou 28. října 1993); lipid; cholesterolová skupina (jako je steroid); uhlovodan nebo oligosacharid (například dextran); jakýkoliv přirozený nebo syntetický protein, polypeptid nebo peptid, který se váže k ochrannému (salvage) receptoru; albumin, • · · · • 4 zahrnující lidský sérový albumin (human sérum albumin,
HSA), leucinovou zipovou (zipper) doménu, a další takové proteiny a proteinové fragmenty. Vehikula jsou zde popsána dále.
Výraz „nativní Fc se týká molekuly nebo sekvence obsahující sekvenci neantigenního vazebného fragmentu, který vzniká štěpením úplné protilátky, ať už v monomerní, nebo multimerní formě. Původní imunoglobulinový zdroj nativního Fc je výhodně lidského původu a může jím být jakýkoliv z imunoglobulinů, ačkoliv IgGl a IgG2 jsou preferovány. Nativní fragmenty Fc jsou připravovány z monomerních peptidů, které mohou být spojeny do dimerních nebo multimerních forem kovalentní (například disulfidovými můstky) a nekovalentní vazbou. Počet intermolekulárních disulfidových můstků mezi monomerními podjednotkami nativních molekul Fc se pohybuje od 1 do 4 v závislosti na třídě (například IgG, IgA, IgE) nebo podtřídě (například IgGl, IgG2, IgG3, IgAl, IgGA2). Jedním příkladem nativního Fc je dimer s disulfidovým můstkem, který vzniká štěpením IgG s papainem (viz Ellison et al. (1982), Nucleic Acids Res. 10: 4071-9). Výraz „nativní Fc tak, jak je zde používán, je generický pro monomerní, dimerní a multimerní formy.
Výraz „varianta Fc se týká molekuly nebo sekvence, která je modifikovanou formou nativního Fc, avšak stále obsahuje vazebné místo pro chráněný (salvage) receptor,
FcRn. Mezinárodní přihláška WO 97/34631 (zveřejněná 25. září 1997) a přihláška WO 96/32478 popisují příkladné varianty Fc, stejně jako interakce s ochranným receptorem, a jsou zde v celém svém rozsahu zahrnuty formou odkazu.
Proto výraz „varianta Fc zahrnuje molekulu nebo sekvenci, která je humanizována z nativního Fc, jenž není lidského původu. Kromě toho, nativní Fc obsahuje místa, která mohou být odstraněna, protože poskytují strukturní charakteristiky nebo biologickou aktivitu, jež nejsou pro fúzi molekul podle předkládaného vynálezu nezbytné.
Z tohoto důvodu výraz „varianta Fc” zahrnuje i molekulu nebo sekvenci, která postrádá jedno nebo více nativních Fc míst nebo zbytků, které působí nebo jsou zúčastněny v (1) tvorbě disulfidového můstku, (2) inkompatibilitě s vybranou hostitelskou buňkou, (3) N-terminální heterogenitě po expresi ve vybrané hostitelské buňce, (4) glykosylaci, (5) interakci s komplementem, (6) vazbě k receptorů Fc odlišnému od ochranného (salvage) receptorů, nebo (7) protilátkově dependentní buněčné cytotoxicitě (antibodydependent cellular cytotoxicity, ADCC). Varinaty Fc jsou detailně popsány níže.
Výraz „doména Fc” zahrnuje molekuly a sekvence nativního Fc a varianty Fc definované výše. Podobně jako v případě variant Fc a nativních fragmentů Fc, zahrnuje výraz „doména Fc” molekuly v monomerní nebo multimerní formě, které jsou připravovány štěpením úplné protilátky, nebo jinými způsoby.
Výraz „multimer” tak, jak je použit pro domény Fc nebo molekuly obsahujících domény, se týká molekul majících dva nebo více polypeptidových řetězců spojených kovalentně, nekovalentně, nebo jak kovalentními, tak nekovalentními interakcemi. Molekuly IgG typicky vytvářejí dimery; IgM, pentamery; IgD, dimery; a IgA, monomery, dimery, trimery, nebo tetramery. Multimery se mohou vytvářet s využitím sekvence a rezultující aktivity nativního zdroje Ig či Fc, • · · nebo derivatizace (tak, jak je definována níže) takových nativních Fc.
Výraz „dimer tak, jak je použit pro domény Fc nebo molekuly obsahujících domény, se týká molekul majících dva nebo více polypeptidových řetězců spojených kovalentně, nebo nekovalentně. Příkladnými dimery v rozsahu tohoto vynálezu jsou ty, které jsou zobrazeny na Obrázku 1.
Výrazy „derivatizující a „derivát a „odvozený zahrnují procesy a z nich rezultující sloučeniny, kde (1) sloučenina má cyklickou část; například příčné vazby mezi cysteinylovými zbytky uvnitř sloučeniny; (2) sloučenina je příčně spojena nebo má místo pro příčnou vazbu; například sloučenina má cysteinylový zbytek a tvoří tak dimery s příčnými vazbami v kultuře nebo in vivo; (3) jedna nebo více peptidových vazeb je nahrazena nepeptidovou vazbou;
(4) N-konec je nahrazen s -NRR1, ΝΡΟ(Ο)ΗΧ, -NRCÍOJOR1, -NRS(O)2RXř -NHC(O)NHR, sukcinimidovou skupinou, nebo je substituován nebo nesubstituován s benzyloxykarbonyl-NH-, kde R a R1 a substituenty kruhů jsou takové, jak je definováno níže; (5) C-konec je nahrazen -C(O)R2 nebo -NR3R4, kde R2 , R3 a R4 jsou takové, jak je definováno níže; a (6) sloučeniny, ve kterých jednotlivé aminokyselinové části jsou modifikovány působením agens, jež jsou schopna reagovat s vybraným bočním řetězcem nebo koncovými zbytky. Deriváty jsou zde popsány níže.
Výraz „peptibody a „peptibodies se týká molekul obsahujících doménu Fc a alespoň jeden peptid. Takovými peptibodies mohou být multimery nebo dimery nebo jejich fragmenty, které mohou být derivatizovány. Podle ···· · · · · · · · • · · · ·· ·· ·· · předkládaného vynálezu se jedná o molekuly peptibodies vzorců II až VI, uvedené níže, v nichž V1 * * * V * * * * X je doména Fc.
Struktura sloučenin
Obecně. Původci vynálezu identifikovali sekvence schopné vázat se a modulovat biologickou aktivitu TALL-1. Tyto sekvence mohou být modifikovány výše zmíněnými technikami, se kterými jedna nebo více aminokyselin může být pozměněna při zachování nebo dokonce zlepšení vazebné afinity peptidu.
V kompozicích připravených podle tohoto vynálezu mohou být peptid (peptidy) připojeny k vehikulu prostřednictvím peptidového N-konce nebo C-konce. Jakýkoliv z těchto peptidů může být spojen v tandem (například následně) s použitím nebo bez linkerů. Proto mohou být molekuly vehikulum-peptid popsány následujícím vzorcem:
II (X1)a-V1-(X2)b , ve kterém:
V1 je vehikulum (výhodně doména Fc) ;
X1 a X2 jsou nezávisle vybrány z -(L1)c-P1, - (L1) c-P1-(L2) d-P2, - (L1) c-P1- (L2) d-P2- (L3) e-P3 a - (L1) c-P1- (L2) d-P2- (L3) e-P3~ (L4) f-P4;
P1, P2, P3 a P4 jsou každý nezávisle sekvencemi domén modulujících TALL-1, jako jsou například domény vzorce I(a) až 1(1);
L1, L2, L3 a L4 jsou každý nezávisle linkery; a a, b, c, d, e a f jsou každý nezávisle 0 nebo 1, za podmínky, že alespoň jeden z a a b je 1.
• » · ·
Proto sloučenina vzorce II zahrnuje výhodné sloučeniny vzorce:
(III) X^V1 a jejich multimery, kde V1 je doména Fc a je připojena na C-konci A1;
(IV) Vx-X2 a jejich multimery, kde V1 je doména Fc a je připojena na N-konci A2;
(V) V^ÍL^c-P1 a jejich multimery, kde V1 je doména Fc a je připojena na N-konci -(L1)c-P1; a (VI) V1-(L1) c-P1-(L2) d-P2 a jejich multimery, kde V1 je doména Fc a je připojena na N-konci -L1-P1-L2-P2.
Peptidy. Peptidy podle vynálezu jsou vhodné jako peptidy modulující TALL-1 nebo jako domény modulující TALL-1 v molekulách vzorců II až VI. Molekuly podle vynálezu, zahrnující tyto sekvence, mohou být připraveny v oboru známými metodami
Výhodnými peptidovými sekvencemi jsou sekvence následujícího vzorce I (a), které mají substituenty identifikované níže.
Tabulka 1 — Výhodné peptidové substituenty
Vzorec I (a) | a8 je T; a9 je bazický zbytek (nejvýhodněji K; a |
• ·
a12 je neutrální hydrofobní zbytek (nejvýhodněji F) . | |
Vzorec | b3 je D, A nebo E; |
I(b) | b6 je W nebo Y; b10 T; b11 je K nebo R; a b14 je V nebo L. |
Vzorec | c9 je T; |
I (c) | c10 je K nebo R; c13 je I, L nebo V; a C17 je A nebo L. |
Vzorec | d12 je T. |
I (d) | |
Vzorec | e11 je T. |
Ke) | |
Vzorec | f9 je T; |
Kf) | f10 je K; a f13 je V. |
Vzorec | g5 je W; |
I (g) | g8 je P; g10 je E; a g13je bazický zbytek. |
Vzorec | h1 je G; |
I (h) | h6 je A; h7 je neutrální hydrofobní zbytek; a h10 je kyselý zbytek. |
Vzorec | i2 je W; a |
I(i) | i14 je W. 1 |
Výhodné peptidové sekvence jsou uvedeny v Tabulce 2 níže.
• · • · • ·
Tabulka 2 - Výhodné TALL-1 modulující domény
Sekvence | SEQ ID NO: |
PGTCFPFPWECTHA | 29 |
WGACWPFPWECFKE | 30 |
VPFCDLLTKHCFEA | 31 |
GSRCKYKWDVLTKQCFHH | 32 |
LPGCKWDLLIKQWVCDPL | 33 |
SADCYFDILTKSDVCTSS | 34 |
SDDCMYDQLTRMFICSNL | 35 |
DLNCKYDELTYKEWCQFN | 36 |
FHDCKYDLLTRQMVCHGL | 37 |
RNHCFWDHLLKQDICPSP | 38 |
ANQCWWDSLTKKNVCEFF | 39 |
YKGRQMWDILTRSWWSL | 126 |
QDVGLWWDILTRAWMPNI | 127 |
QNAQRVWDLLIRTWVYPQ | 128 |
GWNEAWWDELTKIWVLEQ | 129 |
RITCDTWDSLIKKCVPQS | 130 |
GAIMQFWDSLTKTWLRQS | 131 |
WLHSGWWDPLTKHWLQKV | 132 |
SEWFFWFDPLTRAQLKFR | 133 |
GVWPWWFDPLTKQWTQAG | 134 |
MOCKGYYDILTKWCVTNG | 135 |
LWSKEVWDILTKSWVSQA | 136 |
KAAGWWFDWLTKVWVPAP | 137 |
AYQTWFWDSLTRLWLSTT | 138 |
SGQHFWWDLLTRSWTPST | 139 |
LGVGQKWDPLTKQWVSRG | 140 |
VGKMCQWDPLIKRTVCVG | 141 |
CRQGAKFDLLTKQCIj1.gr | 142 |
GQAIRHWDVLTKQWDSQ | 143 |
RGPCGSWDLLTKHCLDSQ | 144 |
WQWKQQWDLLTKQMVWVG | 145 |
PITICRKDLLTKQWCLD | 146 |
KTCNGKWDLLTKQCLQQA | 147 |
KCLKGKWDLLTKQCVTEV | 148 |
RCWNGKWDLLTKQCIHPW | 149 |
NRDMRKWDPLIKQWIVRP | 150 |
QAAAATWDLLTKQWLVPP | 151 |
PEGGPKWDPLTKQFLPPV | 152 |
QTPQKKWDLLTKQWFTRN | 153 |
IGSPCKWDLLTKQMIGQT | 154 |
CTAAGKWDLLTKQCIQEK | 155 |
VSQCMKWDLLTKQCLQGW | 156 |
VWGTWKWDLLTKQYLPPQ | 157 |
GWWEMKWDLLTKQWYRPQ | 158 |
TAQVSKWDLLTKQWLPLA | 159 |
QLWGTKWDLLTKQYIQIM | 160 |
WATSQKWDLLTKQWVQNM | 161 |
QRQCAKWDLLTKQCVLFY | 162 |
• · • · · · · ·
KTTDCKWDLLTKQRICQV | 163 |
LLCQGKWDLLTKQCLKLR | 164 |
LMWFWKWDLLTKQLVPTF | 165 |
QTWAWKWDLLTKQWIGPM | 166 |
NKELLKWDLLTKQCRGRS | 167 |
GQKDLKWDLLTKQYVRQS | 168 |
PKPCQKWDLLTKQCLGSV | 169 |
GQIGWKWDLLTKQWIQTR | 170 |
VWLDWKWDLLTKQWIHPQ | 171 |
QEWEYKWDLLTKQWGWLR | 172 |
HWDSWKWDLLTKQWWQA | 173 |
TRPLQKWDLLTKQWLRVG | 174 |
SDQWQKWDLLTKQWFWDV | 175 |
QQTFMKWDLLTKQWIRRH | 176 |
QGECRKWDLLTKQCFPGQ | 177 |
GQMGWRWDPLIKMCLGPS | 178 |
QLDGCKWDLLTKQKVCIP | 179 |
HGYWQKWDLLTKQWVSSE | 180 |
HQGQCGWDLLTRIYLPCH | 181 |
LHKACKWDLLTKQCWPMQ | 182 |
GPPGSVWDLLTKIWIQTG | 183 |
ITQDWRFDTLTRLWLPLR | 184 |
QGGFAAWDVLTKMWITVP | 185 |
GHGTPWWDALTRIWILGV | 186 |
VWPWQKWDLLTKQFVFQD | 187 |
WQWSWKWDLLTRQYISSS | 188 |
NQTLWKWDLLTKQFITYM | 60 |
PVYQGWWDTLTKLYIWDG | 61 |
WLDGGWRDPLIKRSVQLG | 62 |
GHQQFKWDLLTKQWVQSN | 63 |
QRVGQFWDVLTKMFITGS | 64 |
QAQGWSYDALIKTWIRWP | 65 |
GWMHWKWDPLTKQALPWM | 66 |
GHPTYKWDLLTKQWILQM | 67 |
WNNWSLWDPLTKLWLQQN | 68 |
WQWGWKWDLLTKQWVQQQ | 69 |
GQMGWRWDPLTKMWLGTS | 70 |
Je třeba uvést, že známé receptory pro TALL-1 nesou určitou sekvenční homologii s výhodnými peptidy:
12-3
BAFFR
TACÍ
BCMA (SEQ ID NO
LPGCKWDLLIKQWVCDPL
MRRGPRSLRGRDAPVPTPCVPTECYDLLVRKCVDCRLL TICNHQSQRTCAAFCRSLSCRKEQGKFYDHLLRDCISCASI FVS PSQE IRGRFRRMLQMAGQCSQNEYFDSLLHACIPCQLRC
33, 195, 196 a 197, v uvedeném pořadí).
• · 9 9 9 9
Jakýkoliv peptid obsahující cysteinylový zbytek se může příčně vázat s jiným Cys-obsahujícím peptidem, přičemž buďto jeden nebo oba mohou být vázány na vehikulum. Rovněž jakýkoliv peptid, který má více než jeden zbytek Cys, může vytvářet intrapeptidový disulfidový můstek. Jakýkoliv z těchto peptidů může být derivatizován tak, jak je dále popsáno.
Další užitečné peptidové sekvence mohou vznikat na základě konzervativních a nekonzervativních modifikací aminokyselinových sekvencí ze sekvencí uvedených v Tabulce
2.
Konzervativní modifikace poskytují peptidy, které mají funkční a chemické charakteristiky podobné těm, jež má peptid, ze kterého takové modifikace jsou připraveny.
Naopak významné modifikace funkčních a/nebo chemických charakteristik peptidů mohou být provedeny selekcí substitucí v aminokyselinové sekvenci, které se signifikantně odlišují ve svém účinku na zachování (a) struktury molekulární páteře v oblasti substituce, například listové nebo šroubovicové konformace, (b) náboje nebo hydrofobnosti molekuly v cílovém místě, nebo (c) velikosti molekuly.
Tak například, „konzervativní aminokyselinová substituce může zahrnovat substituce přirozeného aminokyselinového zbytku nepřirozeným zbytkem tak, že je v této pozici malý nebo žádný účinek na polaritu nebo na náboj aminokyselinového zbytku. Kromě toho, jakýkoliv přirozený zbytek v polypeptidů může být rovněž substituován za alanin tak, jak bylo dříve popsáno pro „alanine scanning mutagenesis (viz, například MacLennan et al., 1998, Acta Physiol. Scand. Suppl. 643: 55-67; Sasaki et al., 1998, Adv. Biophys. 35: 1-24, kde je mutageneze alaninovým skenování diskutována.
Požadované aminokyselinové substituce (ať již konzervativní nebo nekonzervativní) mohou být odborníkem v oboru stanoveny v čase, kdy jsou takové substituce požadovány. Tak například, aminokyselinové substituce mohou být použity pro identifikaci významných zbytků v polypeptidové sekvenci, nebo ke zvýšení či snížení afinity zde popsaných peptidových nebo vehikulum-peptidových molekul (viz výše uvedené vzorce). Příkladné aminokyselinové substituce jsou uvedeny v Tabulce 3.
Tabulka 3 - Aminokyselinové substituce
Původní zbytky | Příkladné substituce | Výhodné substituce |
Ala (A) | Val, Leu, Ile | Val |
Arg (R). | Lys, Gin, Asn | Lys |
Asn (N) | Gin | Gin |
Asp (D) | Glu | Glu |
Cys (C) | Ser, Ala | Ser |
Gin (Q) | Asn | Asn |
Glu (E) | Asp | Asp |
Gly (G) | Pro, Ala | Ala |
His (H) | Asn, Gin, Lys, Arg | Arg |
Ile (I) | Leu, Val, Met, Ala, Phe, Norleucin | Leu |
Leu (L) | Norleucin, Ile, Val, Met, Ala, Phe | Ile |
Lys (K) | Arg, kyselina 1,4 diaminomáselná, Gin, Asn | Arg |
Met (M) | Leu, Phe, Ile | Leu |
Phe (F) | Leu, Val, lle, Ala, Tyr | Leu |
Pro (P) | Ala | Gly |
Ser (S) | Thr, Ala, Cys | Thr |
Thr (T) | Ser | Ser |
Trp (W) | Tyr, Phe | Tyr |
Tyr (Y) | Trp, Phe, Thr, Ser | Phe |
Val (V) | lle, Met, Leu, Phe,Ala, Norleucin | Leu |
V určitých provedeních zahrnují konzervativní aminokyselinové substituce rovněž nepřirozeně se vyskytující aminokyselinové zbytky, které jsou typicky začleňovány při chemické syntéze peptidů spíše než při syntéze v biologických systémech.
Jak bylo uvedeno výše v části „Definice pojmů, přirozeně se vyskytující zbytky mohou být rozděleny do tříd na základě obecných vlastností bočního řetězce, které mohou být vhodné pro modifikace sekvence. Tak například, nekonzervativní substituce mohou zahrnovat záměnu člena jedné z těchto tříd za člena z jiné třídy. Takto zaměněné zbytky mohou být zavedeny do oblastí peptidu, které jsou homologní s ne-lidskými ortology, nebo do nehomologních oblastí molekuly. Kromě toho, lze též připravit modifikace s použitím P nebo G za účelem ovlivnění orientace řetězce.
Při přípravě takových modifikací je třeba vzít v úvahu hydropatický index aminokyselin. Každé z aminokyselin byl přidělen hydropatický index na základě jejích hydrofobních a nábojových charakteristik, který je pro: isoleucin (+4,5); valin (+4,2); leucin (+3,8); fenylalanin (+2,8); cystein/cystin (+2,5); methionin (+1,9); alanin (+1,8); glycin (-0,4); threonin (-0,7); serin (-0,8); tryptofan • · • · (-0,9); tyrosin (-1,3); prolin (-1,6); histidin (-3,2); glutamát (-3,5); glutamin 3,5); aspartát (-3,5); asparagin (-3,5); lysin (-3,9) a arginin (-4,5).
Význam hydropatického aminokyselinového indexu pro řečené interaktivní biologické funkce proteinu jev oboru znám. Kyte et al.,J. Mol. Biol., 157: 105-131 (1982). Je známo, že určité aminokyseliny mohou být zaměněny za jiné aminokyseliny, které mají podobný hydropatický index nebo skóre a stále si uchovávají podobnou biologickou aktivitu. Při provádění záměn na základě hydropatického indexu jsou výhodné ty substituce aminokyselin, jejichž hydropatické indexy jsou mezi ± 2, výhodněji ty, jejichž hydropatické indexy jsou mezi ± 1, a nejvýhodněji ty, jejichž hydropatické indexy jsou mezi ± 0,5.
Rovněž je v oboru známo, že substituce podobných aminokyselin může být účinně prováděna na základě hydrofobnosti. Nejvyšší místní průměrná hydrofobnost proteinu tak, jak je určována hydrofilitou sousedících aminokyselin, koreluje s jeho imunogenitou a antigenitou, tj. s biologickou vlastností proteinu.
Aminokyselinovým zbytkům byly přiděleny následující hodnoty hydrofility: arginin (+3,0); lysin (+3,0); aspartát (+3,0 ± 1); glutát (+3,0 ± 1); serin (+0,3); asparagin (+0,2); glutamin (+0,2); glycin (0); threonin (-0,4); prolin (-0,5 ± 1); alanin (-0,5); histidin (-0,5); cystein (1,0); methionin (-1,3); valin (-1,5); leucin (-1,8); isoleucin (-1,8); tyrosin (-2,3); fenylalanin (-2,5); tryptofan (-3,4). Při provádění záměn na základě podobných hodnot hydrofility jsou výhodné substituce aminokyselin, jejichž hodnoty hydrofility jsou v rámci ± 2, výhodněji ty, • · • · • φ jejichž hodnoty hydrofility jsou v rámci ± 1, a nejvýhodněji ty, jejichž hodnoty hydrofility jsou v rámci ± 0,5. Na základě hydrofility lze rovněž identifikovat epitopy z primárních aminokyselinových sekvencí. Tyto oblasti jsou rovněž nazývány jako „jaderné oblasti epitopu.
Odborník v oboru je schopen s použitím dobře známých technik stanovit vhodné varianty polypeptidu tak, jak jsou uvedeny v následujících sekvencích. Pro identifikaci vhodných oblastí molekuly, které mohou být měněny bez narušení aktivity, může odborník v oboru vytipovat oblasti, o kterých se předpokládá, že nejsou významné pro aktivitu proteinu. Tak například, jestliže jsou známy polypeptidy s podobnými aktivitami ze stejných druhů nebo z jiných druhů, může odborník v oboru porovnat aminokyselinovou sekvenci peptidu s podobnými peptidy. Na základě takového porovnání mohou být identifikovány zbytky nebo části molekul, které jsou u podobných polypeptidů konzervovány.
Je třeba zdůraznit, že změny v oblastech peptidu, které nejsou konzervovány vzhledem k takovým podobným peptidům, by méně pravděpodobněji měly nepříznivý účinek na biologickou aktivitu a/nebo strukturu peptidu. Odborník v oboru by měl rovněž vědět, že dokonce i v relativně konzervovaných oblastech je možné substituovat chemicky podobné aminokyseliny za přirozeně se vyskytující zbytky při zachování aktivity (konzervativní aminokyselinové substituce). Proto dokonce i oblasti, které mohou být významné pro biologickou aktivitu nebo pro strukturu, mohou být podrobeny konzervativním aminokyselinovým substitucím bez narušení biologické aktivity nebo bez nepříznivého působení na strukturu peptidu.
• · • · • · ·· ·♦ ·· ·· · · · · ·
Kromě toho, odborník v oboru může vyhodnotit studie o struktuře-funkci, které identifikují zbytky v podobných peptidech, jež jsou významné pro aktivitu nebo strukturu.
S ohledem na takové porovnání je možné předpovědět význam aminokyselinových zbytků v peptidu, které korespondují s aminokyselinovými zbytky, jež jsou významné pro aktivitu nebo strukturu u podobných peptidů. Odborník v oboru může vybrat chemicky podobné aminokyselinové substituce pro takto předpovězené významné aminokyselinové zbytky v peptidech.
Odborník v oboru může rovněž u podobných peptidů analyzovat trojrozměrnou strukturu a aminokyselinovou sekvenci ve vztahu k této struktuře. Na základě této informace může odborník v oboru předpovědět seřazení sekvencí (alignment) aminokyselinových zbytků peptidu s ohledem na trojrozměrnou strukturu. Odborník v oboru může zvolit postup, při kterém nejsou prováděny radikální změny v aminokyselinových zbytcích, o kterých se předpokládá, že jsou na povrchu proteinu, neboť tyto zbytky mohou být zúčastněny ve významných interakcích s jinými molekulami. Navíc, odborník v oboru může vytvoří testovací varianty obsahující jednoduché aminokyselinové substituce v každém z požadovaných aminokyselinových zbytků. Varianty mohou být screenovány s použitím zkoušek aktivity, jež jsou v oboru známy'. Uvedené výsledky mohou být použity pro shromáždění informací o vhodných variantách. Tak například, jestliže je zjištěno, že změna v konkrétním aminokyselinovém zbytku vedla k destruované, nežádoucně snížené, nebo nevhodné aktivitě, jsou varianty s takovou změnou vyloučeny. Jinak řečeno, na základě informací shromážděných z takovýchto rutinních pokusů může odborník v oboru snadno stanovit • · aminokyseliny, kde další substituce by neměly být prováděny buďto samostatně nebo v kombinaci s jinými mutacemi.
Řada odborných publikací byla věnována predikci sekundární struktury. Viz Moult J., Curr. Op. in Biotech., (4): 422-427 (1996), Chou et al., Biochemistry, 13 (2): 222-245 (1974); Chou et al., Biochemistry, 113 (2): 211-222 (1974); Chou et al., Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol., 47: 45-148 (1978); Chou et al., Ann. Rev. Biochem., 47: 251-276 a Chou et al., Biophys. J., 26: 367-384 (1979). Kromě toho jsou v současné době dostupné počítačové programy, které napomáhají s predikcí sekundární struktury. Jedna z metod predikce sekundární struktury je založena na homologním modelování. Tak například, dva polypeptidy nebo proteiny, které mají sekvenční identitu vyšší než 30 %, nebo podobnost vyšší než 40 %, mají často podobné strukturální topologie. Současný nárůst databází údajů o proteinové struktuře (protein structural data base, PDB) poskytuje zvýšenou předpověditelnost sekundární struktury, včetně potenciálního počtu sbalení uvnitř polypeptidové nebo proteinové struktury. Viz Holm et al., Nucl. Acid.
Res., 27(1): 244-247 (1999). Bylo naznačeno (Brenner et al. Curr. Op. Struc. Biol., 7 (3): 369-376 (1997)), že v daném polypeptidu nebo proteinu existuje omezený počet sbalení, a jestliže byl jednou stanoven kritický počet struktur, dosáhne strukturální předpověď významné přesnosti.
Další metody predikce sekundární struktury zahrnují „threading (Jones, D., Curr. Opin. Struct. Biol., 7 (3):
377-87 (1997); Sippl et al., Structure, 4(1): 15-9 (1996)), „profile analysis (Bowie et al., Science, 253: 164-170 (1991); Gribskov et al., Meth. Enzym., 183: 146-159 (1990);
V ·
Gribskov et al., Proč. Nat. Acad. Sci., 84 (13): 4355-8 (1987)), a „evolutionary linkage (Viz Home, výše, a Brenner, výše).
Vehikula. Tento vynález vyžaduje přítomnost alespoň jednoho vehikula (V1) připojeného k peptidu prostřednictvím N-konce, C-konce nebo bočního řetězce jednoho z aminokyselinových zbytků. Mnohonásobná vehikula mohou být rovněž použita, například fragmenty Fc na každém konci, nebo Fc na konci a skupina PEG na jiném konci nebo bočním řetězci. Příkladná vehikula zahrnují:
• doménu Fc;
• jiné proteiny, polypeptidy, nebo peptidy schopné vazby na ochranný (salvage) receptor;
• lidský sérový albumin (human sérum albumin, HSA);
• doménu kukuřičného leucinové zipperu (LZ) ;
• polyethylenglykol (PEG), zahrnující 5kD, 20kD a 30kD PEG, stejně jako jiné polymery;
• dextran a jiné molekuly známé v oboru jako látky poskytující prodloužení biologického poločasu a/nebo ochranu před proteolytickou degradací nebo odstraněním (clearancí).
Proferovaným vehikulem je doména Fc. Doména Fc může být fúzována s N- nebo C- konci peptidů, nebo na obou N- a C- koncích. Fúze k N-konci je preferována.
Jak bylo zmíněno výše, jsou varianty Fc vhodnými vehikuly spadajícími do rozsahu tohoto vynálezu. Přirozený Fc může být extenzivně modifikován za tvory varianty Fc v souladu s tímto vynálezem, za předpokladu že vazba k ochrannému (salvage) receptoru je zachována; viz, například WO97/34631 a WO 96/32478. U takovýchto variant Fc • » • · r · · · » · * « ► * · 4 ·· ·· je možné odstranit jedno nebo více míst nativního Fc, které poskytují strukturální znaky nebo funkční aktivitu, jež nejsou požadovány pro fúzi molekul podle vynálezu. Místa lze odstranit například substitucí nebo delecí zbytků, inzercí zbytků do místa, nebo zkrácením částí, které místo obsahují. Inzerovanými nebo substituovanými zbytky mohou rovněž být pozměněné aminokyseliny, jako jsou peptidomimetika nebo D-aminokyseliny. Varianty Fc mohou být žádoucí z řady důvodů, z nichž některé jsou popsány níže. Příkladné varianty Fc zahrnují molekuly a sekvence ve kterých:
1. Místa zúčastněná v tvorbě disulfidových můstků jsou odstraněna. Takové odstranění může zabránit reakci s jinými proteiny obsahujícími cystein, které jsou přítomny v hostitelské buňce použité pro produkci molekul podle vynálezu. Pro tento účel může být segment obsahující cystein na N-konci zkrácen, nebo mohou být cysteinové zbytky deletovány nebo substituovány jinými aminokyselinami (například alanylem, serylem). Konkrétně, je možné odstranit N-koncový 20aminokyselinový segment ze sekvence SEQ ID NO: 2, nebo odstranit nebo substituovat cysteinové zbytky v pozicích 7 a 10 v sekvenci SEQ ID NO: 2.
Přes to, že jsou cysteinové zbytky odstraněny, mohou jednořetězcové domény Fc stále vytvářet dimerní domény Fc, které jsou vzájemně spojeny nekovalentními vazbami.
2. Nativní Fc je modifikován tak, aby byl více kompatibilní s vybranou hostitelskou buňkou. Tak například, je možné odstranit sekvence PA poblíž N-konce v typickém nativním Fc, které mohou být rozpoznány štěpícím enzymem v E.coli, jakým je prolin • · · ··»· · • » ·»· · « · * · • · · ··« · « · 4 · • · · · ···· « • · · · · · · · iminopeptidáza. Rovněž je možné na N-konec přidat methioninový zbytek, zejména tehdy, jestliže je molekula rekombinantně exprimována v bakteriální buňce, jakou je E.coli. Doména Fc ze sekvence SEQ ID NO: 2 je jednou z takových variant Fc.
3. Část N-konce nativního Fc je odstraněna k zabránění N-koncové heterogenity, jestliže je exprimován ve vybrané hostitelské buňce. K tomuto účelu je možné deletovat jakýkoliv z prvních 20 aminokyselinových zbytků na N-konci, zejména těch, které jsou v pozicích 1, 2, 3, 4 a 5.
4. Jedno nebo více glykosylačních míst je odstraněno. Zbytky, které jsou typicky glykosylovány (například asparagin), mohou udílet cytolytickou odpověď. Takové zbytky mohou být deletovány nebo substituovány s neglykosylovanými zbytky (například alaninem).
5. Místa zúčastněná v reakci s komplementem, jako je vazebné místo Clq, jsou odstraněna. Tak například, je možné deletovat nebo substituovat sekvenci EKK lidského IgGl. Zapojení komplementu nemusí být pro molekuly podle tohoto vynálezu výhodné a s takovouto variantou Fc je lze vyloučit.
6. Jsou odstraněna místa, která ovlivňují vazbu k receptorům Fc jiným, než je ochranný (salvage) receptor. Nativní Fc může mít místa pro interakci s určitými bílými krevními buňkami, která není požadována pro fúzi molekul podle předkládaného vynálezu, a proto mohou být odstraněna.
7. Je odstraněno místo ADCC. Místa ADCC jsou v oboru známá; viz, například Molec. Immunol. 29 (5): 633-9 (1992) týkající se míst ADCC v IgGl. Tato místa nejsou rovněž požadována pro fúzi molekul podle předkládaného vynálezu, a proto mohou být odstraněna.
*« ·* ·« «« • * · · · · · «4 * * *·* · · ·· « · • · · · · * · · ··· · • · * * ···· ·· · ·· ·· ·· 99 99 9
8. Jestliže je nativní Fc odvozen z protilátky nikoliv lidské, může být nativní Fc humanizován. Typicky se pro humanizaci nativního Fc substituují vybrané zbytky v nikoliv lidském nativním Fc za zbytky, které normálně nejsou v lidském nativním Fc nalézány. Techniky humanizace protilátek jsou v oboru velmi dobře známy.
Výhodné varianty Fc zahrnují následující. V SEQ ID NO: 2 (Obrázek 3) může být leucin v pozici 15 substituován glutamátem; glutamát v pozici 99 alaninem; a lysiny v pozicích 101 a 103 alaniny. Kromě toho, jeden nebo více tyrosinových zbytků může být zaměněno zbytky fenylalaninu.
Alternativním vehikulem může být protein, polypeptid, peptid,· protilátka, fragment protilátky, nebo malá molekula (například peptidomimetická sloučenina), které jsou schopné vazby k ochrannému (salvage) receptoru. Tak například, jako vehikulum je možné použít polypeptid tak, jak je popsán v U.S. Pat. č. 5 739 277, vydaném 14. dubna 1998 původcům Presta et al. Peptidy mohou být také selektovány metodou fágového displeje nebo RNA-peptidovým screeningem na vazbu k FcRn ochrannému (salvage) receptoru. Takové sloučeniny, které se vážou k ochrannému (salvage) receptoru, jsou rovněž zahrnuty do významu pojmu „vehikulum a spadají do rozsahu tohoto vynálezu. Vehikula tohoto typu by měla být vybrána ke zvýšení poločasu (například vyloučením sekvencí, které jsou rozpoznávané proteázami) a ke snížení imunogenity (například upřednostněním neimunogenních sekvencí, jak bylo objeveno humanizací protilátek).
Jak bylo uvedeno výše, jako V1 mohou být použita i polymerní vehikula. V současnosti jsou dostupné různé
·· φφ φφ φφφ φ φ ·· · • · φφφ ·· φ φ φφφ φφφ φ • Φ φφ prostředky pro připojení chemických sloučenin vhodných jako vehikula, viz, například zveřejněná mezinárodní přihlášky PCT WO 96/11953, s názvem „N-Terminally Chemically Modified Protein Compositions and Methods, která je zde zahrnuta formou odkazu v celém svém rozsahu. Tato PCT publikace, mimo jiné, vyjevuje selektivní připojení ve vodě rozpustných polymerů k N-konci proteinů.
Preferovaným polymerním vehikulem je polyethylenglykol (PEG). Skupina PEG může být o jakékoliv vhodné molekulové hmotnosti a může být lineární nebo větvená. Průměrná molekulová hmotnost PEG se bude výhodně pohybovat v rozsahu od přibližně 2 kiloDaltonů („kD) do přibližně 100 kD, výhodněji od přibližně 5 kD do přibližně 50 kD, nejvýhodněji od přibližně 5 kD do přibližně 10 kD. Skupiny PEG budou obecně připojeny ke sloučeninám podle vynálezu prostřednictvím acylace nebo redukční alkylace na reaktivní skupině části PEG (například na aldehydové, aminoskupině, thiolové, nebo esterové skupině) k reaktivní skupině sloučeniny podle vynálezu (například aldehydové, aminoskupině, nebo esterové skupině).
Vhodná strategie pro pegylaci syntetických peptidů spočívá v kombinaci, prostřednictvím vytváření konjugačních vazeb v roztoku, peptidové části a podílu PEG, z nichž každý nese specielní funkční skupinu, které jsou vůči sobě vzájemně reaktivní. Peptidy mohou být snadno připraveny běžnou syntézou na pevné fázi. Peptidy jsou „předem aktivovány s vhodnými funkčními skupinami na specifickém místě. Prekursory jsou purifikovány a plně charakterizovány před reakcí s podílem PEG.
• ·
• · · · · · • · · · · · · ·· ··· ····· • · · · · · • · · · · · ·
Vazba peptidu s PEG se obvykle provádí ve vodné fázi a může být snadno monitorována analýzou HPLC s reverzní fází. Pegylované peptidy mohou být snadno purifikovány preparativní HPLC a charakterizovány analytickou HPLC, aminokyselinovou analýzou a laserovou desorpční hmotovou spektrometrií.
Polysacharidové polymery jsou dalším typem ve vodě rozpustného polymeru, který může být použit pro modifikaci proteinu. Dextrany jsou polysacharidové polymery sestávající z jednotlivých podjednotek glukózy, přednostně spojených vazbami 1-6. Dextran sám o sobě je dostupný v mnoha rozmezích molekulové hmotnosti a je snadno dostupný v molekulových hmotnostech od přibližně 1 kD do přibližně 70 kD. Dextran je vhodným ve vodě rozpustným polymerem pro použití podle předkládaného vynálezu jako vehikulum sám o sobě nebo v kombinaci s jiným vehikulem (například s Fc). Viz, například WO 96/11953 a WO 96/05309. Použití dextranu konjugovaného s terapeutickými nebo diagnostickými imunoglobuliny bylo publikováno; viz, například zveřejněnou evropskou patentovou přihlášku EP-A-0315456, která je zde zahrnuta formou odkazu v celém svém rozsahu. Jestliže je dextran použit jako vehikulum v souladu s předkládaným vynálezem, je preferován dextran o molekulové hmotnosti přibližně 1 kD až přibližně 20 kD.
Linkery. Případně lze použít jakoukoliv skupinu „linkeru. Jestliže je linker přítomen, jeho chemická struktura není kritická, neboť slouží primárně jako spacer. Linker je přednostně připraven z aminokyselin vzájemně spojených peptidovými vazbami. A tak je ve výhodných provedeních linker tvořen z 1 až 30 aminokyselin spojených peptidovými vazbami, přičemž aminokyseliny jsou vybrány z 20 přirozeně • · se vyskytujících aminokyselin. Některé z těchto aminokyselin mohou být glykosylovány tak, jak je odborníkovi v oboru dobře známo. Ve výhodnějším provedení je 1 až 20 aminokyselin vybráno z glycinu, alaninu, prolinu, asparaginu, glutaminu a lysinu. Ještě výhodněji je linker tvořen z převažujícího množství aminokyselin, které nejsou stéricky bráněny, tj. takovými, jako je glycin a alanin. Z tohoto důvodu jsou preferovanými linkery polyglyciny (konkrétně (Gly)4, (Gly) 5), póly(Gly-Ala) a polyalaniny.
Dalšími specifickými příklady linkerů jsou:
(Gly)3Lys(Gly) (SEQ ID NO: 40);
(Gly) 3AsnGlySer(Gly)2 (SEQ ID NO: 41);
(Gly)3Cys(Gly)4 (SEQ ID NO: 42); a GlyProAsnGlyGly (SEQ ID NO: 43) .
Pro objasnění výše použité nomenklatury například (Gly)3Lys(Gly)4 znamená Gly-Gly-Gly-Lys-Gly-Gly-Gly-Gly (SEQ ID NO: 40). Kombinace Gly a Ala jsou rovněž preferovány. Zde uvedené linkery jsou příkladné; linkery, spadající do rozsahu tohoto vynálezu, mohou být mnohem delší a mohou obsahovat i jiné zbytky.
Výhodnými linkery jsou aminokyselinové linkery obsahující více než 5 aminokyselin, s vhodnými linkery majícími až přibližně 500 aminokyselin vybraných z glycinu, alaninu, prolinu, asparaginu, glutaminu, lysinu, threoninu, šeřinu nebo aspartátu. Linkery z přibližně 20 až 50 aminokyselin jsou nejvýhodnější. Jednou skupinou linkerů jsou linkery vzorce
GSGSATGGSGSTASSGSGSATxK2 (SEQ ID NO: 193) a .
• · · ·
GSGSATGGSGSTASSGSGSATxVGSGSATGGSGSTASSGSGSATxV (SEQ ID NO: 194), kde x1 a x3 jsou každý nezávisle bazické nebo hydrofobní zbytky a x2 a x4 jsou každý nezávisle hydrofobní zbytky. Specifickými výhodnými linkery jsou:
GSGSATGGSGSTASSGSGSATHM (SEQ ID NO: 59)
GSGSATGGSGSTASSGSGSATGM (SEQ ID NO: 190)
GSGSATGGSGSTASSGSGSATGS (SEQ ID NO: 191), a
GSGSATGGSGSTASSGSGSATHMGSGSATGGSGSTASSGSGSATHM (SEQ ID NO: 192).
Nepeptidové linkery jsou rovněž možné. Tak například, mohou být použity alkylové linkery, jako je -NH-(CH2) S-C(O)-, kde s = 2-20. Tyto alkylové linkery mohou být dále substituovány jakoukoliv sféricky nebránící skupinou, jakou je nižší alkyl (například Ci-Cg) , nižší acyl, halogen (například Cl, Br), CN, NH2, fenyl a podobně. Příkladným nepeptidovým linkerem je PEG linker vzorce VII
O kde n je takové, že linker má molekulovou hmotnost od 100 do 5000 kD, výhodně 100 až 500 kD. Peptidové linkery mohou být pozměněny tak, že tvoří deriváty stejným způsobem, jak bylo popsáno výše.
Deriváty. Původci rovněž zamýšlejí derivatizaci peptidového podílu a/nebo podílu vehikula sloučenin podle vynálezu.
Takovéto deriváty mohou u sloučenin zlepšovat rozpustnost, absorpci, biologický poločas apod. Části derivátů mohou alterantivně eliminovat nebo zmírňovat nežádoucí vedlejší účinky sloučenin apod. Příkladné deriváty zahrnují sloučeniny, ve kterých:
1. Sloučenina nebo její část je cyklická. Tak například, peptidový podíl může být modifikován tak, že obsahuje dva nebo více zbytků Cys (například v linkeru), které mohou cyklizovat tvorbou disulfidového můstku.
2. Sloučenina je příčně vázaná nebo je upravena tak, že je schopna příčné vazby mezi molekulami. Tak například, peptidový podíl může být modifikován tak, že obsahuje zbytek Cys, a je proto schopen vytvářet intermolekulární disulfidové vazby s podobnou molekulou. Sloučenina může být též příčně propojena prostřednictvím C-konce, tak jak je znázorněno v molekule zobrazené níže.
Vzorec VIII
O
NH
O
Ve vzorci VIII každý z V1 může typicky znamenat jeden řetězec domény Fc.
3. Jedna z peptidových [-C(O)NR-] vazeb (můstků) je nahrazena nepeptidovou vazbou. Příkladnými nepeptidovými vazbami jsou -CH2-karbamát [-CH2-OC (O) NR-] , fosfonát, -CH2-sulfonamid [-CH2-S (0) 2NR-] , močovina [-NHC(O)NH-], -CH2-sekundární amin a alkylovaný peptid [-C(O)NR6-, kde R6 je nižší alkyl].
4. N-konec je derivatizován. Typicky může být N-konec acylován nebo modifikován na substituovaný amin.
• ·
Příkladné N-koncové skupiny derivátů zahrnují -NRR1 (jiné než -NH2) , -NRC(O)R\ -NRC(O)ORx, -NRS(O)2R1, -NHCÍOJNHR1, sukcinimid, nebo benzyloxykarbonyl-NH-(CBZ-NH-), kde R a R1 jsou každý nezávisle vodík nebo nižší alkyl a kde kruh fenylu může být substituován s 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny sestávající z C1-C4 alkylu, C1-C4 alkoxyskupiny, chloru a bromu.
5. Volný C-konec je derivatizován. Typicky je C-konec esterifikován nebo amidován. Příkladné C-koncové skupiny derivátů zahrnují například -C(O)R2, kde R2 j nižší alkyloxy, nebo -NR3R4, kde R3 a R4 jsou nezávisí vodík nebo Ci-Ce alkyl (výhodně C1-C4 alkyl) .
6. Disulfidový můstek je nahrazen jinou, výhodně stabilnější příčně vazebnou skupinou (například alkylenem). Viz, například Bhatnagar et al.(1996), Med. Chem. 39: 3814-9; Alberts et al. (1993)
Thirteenth Am. Pep. Symp., 357-9.
7. Jeden nebo více aminokyselinových zbytků je modifikováno. Jsou známy různé derivatizující agens, které specificky reagují s vybranými bočními řetězci terminálních zbytků tak, jak je detailně popsáno níže.
Lysinylové zbytky a aminoterminální zbytky mohou reagovat s anhydridy kyseliny jantarové nebo jiné karboxylové kyseliny, které mění náboj lysinylových zbytků Jiné vhodné reagencie pro derivatizaci zbytků obsahujících alfa-amino-skupiny zahrnují imidoestery, jako je methylpikolinimidát; pyridoxal fosfát; pyridoxal; chlorborhydrid; trinitrobenzensulfonová kyselina; O-methylisomočovina; 2,4-pentandion; a transaminázou katalyzovaná reakce s glyoxylátem.
• · ··· .......
• * * * * · ··· · ··« ; ; · ......... .···
·..··..· ·..··..· ·..· ;
Arginylové zbytky mohou být modifikovány reakcí s jakoukoliv nebo s kombinací z řady konvenčních reagencií zahrnujících fenylglyoxal, 2,3-butandion,
1,2-cyklohexandion a ninhydrin. Derivatizace arginylových zbytků vyžaduje, aby reakce byla prováděna za alkalických podmínek vzhledem k vysoké hodnotě pKa guanidinové funkční skupiny. Kromě toho mohu tyto reagencie reagovat se skupinami lysinu, stejně jako s argininovými epsilonaminoskupinami.
Specifické modifikace tyrosylových zbytků byly intenzivně studovány s obzvláštním zájmem na zavedení spektrálních značek do tyrosylových zbytků reakcí s aromatickými diazoniovými sloučeninami nebo s tetranitromethanem. Nejběžněji jsou používány N-acetylimidizol a tetranitromethan pro tvorbu O-acetyl tyrosylových typů derivátů a 3-nitro derivátů, v uvedeném pořadí.
Karboxylové skupiny bočních řetězců (aspartylu nebo glutamylu) mohou být selektivně modifikovány reakcí s karbodiimidy (R'-N=C=N-R'), jako je l-cyklohexyl-3-(2-morfolinyl-(4-ethyl) karbodiimid, nebo l-ethyl-3-(4-azonia-4,4-dimethylpentyl) karbodiimid. Kromě toho mohou být aspartylové a glutamylové zbytky konvertovány na asparaginylové a glutaminylové zbytky reakcí s amoniovými ionty.
Glutaminylové a asparaginylové zbytky mohou být deamidovány na odpovídající glytamylové a aspartylové zbytky. Jinak řečeno, tyto zbytky jsou deamidovány za mírně • · • ·
kyselých podmínek. Každá z forem těchto zbytků spadá do rozsahu tohoto vynálezu.
Cysteinylové zbytky mohou být nahrazeny aminokyselinovými zbytky nebo jinými sloučeninami buďto pro eliminaci disulfidové vazby, nebo naopak, pro stabilizaci příčné vazby. Viz, například Bhatnagar et al. (1996), J.
Med. Chem. 39: 3814-9.
Derivatizace s bifunkčními činidly je vhodná pro příčné připojení peptidů nebo jejich funkčních derivátů k ve vodě nerozpustným nosičům, nebo jiným makromolekulárním vehikulum. Obecně používaná agens vytvářející příčné vazby zahrnují například 1,1-bis(diazoacetyl)-2-fenylethan, glutaraldehyd, N-hydroxysukcinimidové estery, například estery se 4-azidosalicylovou kyselinou, homobifunkční imidoestery, zahrnující disukcinimidylové estery, jako je 3,3'dithiocis(sukcinimidylpropionát) , a bifunkční maleimidy, jako je bis-N-maleimido-1,8-oktan. Derívatizační agens, jako je methyl-3-[(p-azidofenyl)dithio] propioimidát, poskytují fotoaktivovatelné meziprodukty, které jsou schopny tvořit příčné vazby v přítomnosti světla. Jinak řečeno, reaktivní ve vodě nerozpustné materiály, jako jsou kyanogenní bromidem-aktivované uhlovodany a reaktivní substráty popsané v U.S. Patentech, č. 3 969 287; 3 691 016; 4 195 128; 4 247642; 4 229 537 a 4 330 440, jsou zavedeny pro imobilizaci proteinů.
Uhlovodanové (oligosacharidové) skupiny mohou být vhodně připojeny k místům, o nichž je známo, že jsou v proteinech glykosylačními místy.
• ·
Obecně, O-vázané oligosacharidy jsou připojeny k serinovým (Ser) nebo threoninovým (Thr) zbytkům, zatímco N-vázané oligosacharidy jsou připojeny k asparaginovým (Asn) zbytkům, jestliže jsou součástí sekvence
Asn-X-Ser/Thr, kde X může být jakákoliv aminokyselina s výjimkou prolinu. X je výhodně jedna z 19 přirozeně se vyskytujících aminokyselin odlišných od prolinu. Struktury N-vázaných a O-vázaných oligosacharidů a zbytků cukrů, které jsou nalézány v každém typu, jsou odlišné. Jedním typem cukru, který je běžně nalézán u obou, je Nacetylneuraminová kyselina (uváděná jako kyselina sialová). Kyselina sialová je obvykle terminálním zbytkem N-vázaných a O-vázaných oligosacharidů a díky svému negativnímu náboji může přinášet glykosylované sloučenině kyselé vlastnosti. Takové místo (místa) může (mohou) být inkorporována do linkeru sloučenin podle tohoto vynálezu a jsou výhodně glykosyiována buňkou během rekombinantní produkce polypeptidových sloučenin (například v savčích buňkách, jako jsou buňky CHO, BHK, COS). Nicméně, takováto místa mohou být dále glykosyiována syntetickými nebo semisyntetickými postupy, známými v oboru.
Další možné modifikace zahrnují hydroxylaci prolinu a lysinu, fosforylaci hydroxylových skupin serylových nebo threonylových zbytků, oxidaci atomu síry v Cys, methylaci alfa-aminoskupin lysinových, argininových a histidinových bočních řetězců. Creighton, Proteins: Structure and Moiecule Properties (W.H. Freeman & Co., San Francisco), pp. 79-86 (1983).
Stejně tak mohou být sloučeniny podle vynálezu změněny na úrovni DNA. Sekvence DNA pro jakoukoliv část sloučeniny mohou být změněny na kodóny, které jsou s vybranou • » * ··· • ® · · hostitelskou buňkou kompatibilnější. Pro E. coli, která je preferovanou hostitelskou buňkou, jsou optimalizované kodóny v oboru známé.
Kodóny mohou být substituovány pro eliminaci restrikčních míst nebo pro zavedení tichých restrikčních míst, což může pozitivně působit v úpravě (processing) DNA ve vybrané hostitelské buňce. Vehikulum, linker a DNA sekvence pro peptidy mohou být modifikovány tak, aby zahrnovaly jakoukoliv z výše uvedených sekvenčních změn.
Způsoby přípravy
Sloučeniny podle vynálezu mohou být ve velkém připraveny v transformovaných hostitelských buňkách s použitím technik rekombinantních DNA. Za tímto účelem je připravena rekombinantní DNA molekula kódující peptid, jenž je připravován. Způsoby přípravy takových molekul DNA jsou v oboru dobře známé. Tak například, sekvence kódující peptidy mohou být vyříznuty z DNA s použitím vhodných restrikčních enzymů. V jiném provedení může být molekula DNA syntetizována s použitím technik chemické syntézy, jako je například fosforamidátová metoda. Rovněž může být použito kombinace obou těchto technik.
Vynález rovněž zahrnuje vektor schopný exprese peptidů ve vhodném hostiteli. Vektor obsahuje molekulu DNA , která kóduje peptidy operabilně připojené ke vhodným řídícím sekvencím pro expresi. Způsoby působení tohoto operabilního spojení, buďto před, anebo za molekulu DNA inzerovanou do vektoru, jsou dobře známy. Řídicí sekvence pro expresi zahrnují promotory, aktivátory, zesilovače (enhancery), operátory, ribozómální vazebná místa, start signály, stop • · • · · · • · · signály, čepičkové signály (cap signals), polyadenylační signály a jiné signály zúčastněné v řízení transkripce nebo translace.
Výsledný vektor nesoucí molekulu DNA je použit pro transformaci vhodného hostitele. Tato transformace může být prováděna s použitím metod v oboru dobře známých.
K provádění tohoto vynálezu mohou být použity jakékoliv z velkého počtu dostupných a dobře známých hostitelských buněk. Výběr konkrétního hostitele je závislý na řadě v oboru zjištěných faktorů. Tyto faktory zahrnují například kompatibilitu s vybraným expresivním vektorem, toxicitu peptidů kódovaných molekulou DNA, rychlost transformace, snadnost získání peptidů, charakteristiky exprese, biologickou bezpečnost a nákladnost. Je třeba dosáhnout rovnováhy mezi těmito faktory s tím, že je třeba chápat, že ne všichni hostitelé mohou být shodně účinní pro expresi konkrétní sekvence DNA. V rámci těchto obecných pravidel zahrnují vhodní mikrobiální hostitelé bakterie (jako například E. coli sp.), kvasinky (například Saccharomyces sp.) a jiné houby, hmyzí, rostlinné, savčí buňky (včetně lidských) v kultuře, nebo jiné hostitele známé v oboru.
Dále, transformovaný hostitel je kultivován a purifikován. Hostitelské buňky mohou být kultivovány za konvenčních fermentačních podmínek tak, že požadované sloučeniny jsou exprimovány. Takové fermentační podmínky jsou v oboru dobře známé. Konečně, peptidy jsou purifikány z kultury s postupy dobře v oboru známými.
• · • · · · • · ·
Sloučeniny mohou být rovněž připravovány syntetickými postupy. Tak například, mohou být použity techniky syntézy na pevné fázi. Vhodné techniky jsou v oboru dobře známé a zahrnují ty, které jsou popsány v Merrifield (1973), Chem. Polypeptides, pp. 335-61 (Katsoyannis and Panayotis eds.); Merrifield (1963), J. Am. Chem. Soc. 85: 2149; Davis et. al. (1985), Biochem. Intl. 10: 394-414; Stewart and Young (1969), Solid Phase Peptide Synthesis ; U.S. Pat. č.
941 763; Finn et al. (1976), The Proteins (3rd ed.) 2:
105-253; a Erickson et al. (1976), The Proteins (3rd ed.)
2: 257-527. Syntéza na pevné fázi je preferovanou technikou při přípravě jednotlivých peptidů, neboť se jedná o nejúčinnější metodu z hlediska nákladovosti při přípravě malých peptidů.
Sloučeniny, které obsahují derivatizované peptidy, nebo které obsahují nepeptidové skupiny, mohou být syntetizovány dobře známými technikami organické chemie.
Použití sloučenin
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být konkrétně užitečné v léčbě autoimunitních onemocnění zprostředkovaných B-buňkami. Konkrétně, sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být užitečné v léčbě, prevenci, zlepšení, diagnostice nebo prognózy lupus, včetně lupus erythematosus (SLE) a onemocnění a stavů spojených s lupus. Další výhodné indikace zahrnují nádory zprostředkované Bbuňkami, včetně B-buněčného lymfomu.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou rovněž být použity k léčbě zánětlivých stavů kloubů. Zánětlivé stavy kloubů jsou chronická kloubní onemocnění, která postihují a • · • · • · oslabují v různém stupni miliony lidí na celém světě.
Rheumatoidní artritida je onemocnění kloubních spojení, ve kterých chrupavka a kost jsou pomalu narušovány proliferativní, invazivní pojivovou tkání nazývanou pannus, která je odvozena ze synoviální membrány. Onemocnění může zahrnovat periartikulární struktury, jako jsou'burzy, šlachová pouzdra, pozdra, stejně jako extraartikulární tkáně, jako je subkutis, kardiovaskulární systém, plíce, slezina, lymfatické uzliny, kosterní svaly, nervový systém, (centrální a periferní) a oči (Silberberg (1985),
Anderson's Pathology, Kissane (ed.), 11 :1828). Osteoartritida je běžné kloubní onemocnění charakteristické degenerativními změnami v artikulární chrupavce a reaktivní proliferaci kosti a chrupavky kolem kloubu. Osteoartritida je buňkami zprostředkovaný aktivní proces, který může být výsledkem nevhodné odpovědi chondrocytů na katabolické a anabolické stimuly. Změny v některých molekulách matrix artikulární chrupavky se údajně objevují u časné osteoartritidy (Thonar et al. (1993), Rheumatic disease clinics of North America, Moskowitz (ed.), 19: 635-657 a Shinmei et al. (1992), Arthritis Rheum., 35: 1304-1308).
Předpokládá se, že TALL-1, TALL-1R a jejich modulátory jsou vhodné pro léčbu těchto a souvisejících stavů.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být rovněž užitečné v léčbě řady dalších onemocnění a poruch, zahrnujících:
• akutní pankreatitidu;
• ALS;
• Alzheimerovu chorobu;
• astma;
• aterosklerosu;
• autoimunitní hemolytickou anemii;
• rakovinu, zejména rakovinu týkající se B buněk;
• kachexii/anorexii;
• chronický únavový syndrom;
• cirhózu (například primární biliární cirhózu);
• diabetes (například inzulínová diabetes);
• horečku;
• glomerulonefritidu, včetně IgA glomerulonefritidy a primární glomerulonefritidy;
• Goodpasturův syndrom;
• Guillainův-Barrého syndrom;
• transplantát versus onemocnění příjemce;
• Hashimotovu tyreoiditidu;
• hemorhagický šok;
• hyperalgezii;
• zánětlivé onemocnění střev;
• zánětlivé stavy kloubu, včetně osteoartritidy, psoriasové artritidy a rheumatoidní artritidy;
• zánětlivé stavy rezultující z námahy, vymknutí, poškození chrupavky, traumatu, ortopedické operace, infekce a průběhu jiných nemocí;
• inzulin-dependentní diabetes melitus;
• ischemické poškození včetně cerebrální ischemie (například poškození mozku jako výsledek traumatu, epilepsie, hemoragie, mrtvice, z nichž každý může vést k neurodegeneraci);
• poruchy učení;
• plicní choroby(například ARDS);
• mnohočetný myelom;
• roztroušenou sklerózu;
• myastenii gravis;
• myelogenní (například AML a CML) a jiné leukemie;
• myopatie (například svalový proteinový metabolismus zejména při sepsi);
fr ♦ ♦ • neurotoxicitu (například takovou, jako indukuje HIV);
• osteoporózu;
• bolest • Parkinsonovu chorobu • Pemphigus;
• polymyozitidu/dermatomyozitidu;
• zápal plic, včetně autoimunitního zápalu plic;
• předčasný porod;
• psoriázu;
• Reiterovu chorobu;
• reperfuzní poškození;
• septický šok;
• vedlejší účinky radiační terapie;
• Sjogrenův syndrom;
• poruchy spánku;
• onemocnění čelistního kloubu;
• trombocytopenii, včetně idiopatické trombocytopenie a autoimunitní neonatální trombocytopenie;
• nádorové metastáze;
• uveitidu; a • vaskulitidu.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být podávány samotné, nebo v kombinaci s terapeuticky účinným množstvím jiných léčiv, zahrnujících analgetika, antirevmatická léčiva modifikující onemocnění(disease-modifying antirheumatic drugs, DMARDs), nesteroidní protizánětlivá léčiva (non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs) a jakékoliv modulátory imunity a zánětů. Proto mohou sloučeniny podle tohoto vynálezu být podávány s:
• Modulátory jiných členů z rodiny TNF/TNF receptorů, včetně antagonistů TNF, jako je etanercept (Enbrel™) , • · · sTNF-RI (rozpustný TNF-alfa receptor I), onercept (TNF vazebný protein-1), D2E7 a Remicade™.
• modulátory faktoru nervového růstu (NGF modulators);
• IL-1 inhibitory, zahrnující IL-lra molekuly (antagonista receptoru pro IL-1) jako je anakinra, a nedávno objevené „IL-lra-like molekuly, jako jsou IL-lHyl a IL-lHy2; IL-1 trap molekuly, jak jsou popsány v U.S. Pat. č.5 844 099, vydaném 1. prosince 1998; IL-1 protilátky; rozpustný receptor IL-1 a podobně.
• IL-6 inhibitory (například protilátky proti IL-6).
• IL-8 inhibitory (například protilátky proti IL-8).
• IL-18 inhibitory (například IL-18 vazebný protein, solubilizovaný IL-18 receptor, nebo IL-18 protilátky).
• Modulátory interleukin-l-konvertujícího enzymu (ICE).
• Insulinu-podobnými růstovými faktory (insulin-like growth factors IGF-1 a IGF-2) a jejich modulátory.
• Transformujícím růstovým faktorem-β (TGF-β) , členy rodiny TGF-β a modulátory TGF-β.
• Fibroblastovými růstovými faktory FGF-1 až FGF-10 a modulátory FGF.
• Osteoprotegrinem (OPG), analogy OPG, osteoprotektivními látkami a protilátkami proti OPG-ligandu (OPG-L).
• kostními anaboliky, jako je parathyroidní hormon (PTH), fragmenty PTH a molekulami inkorporujícími fragmenty PTH (například PTH (1-34)Fc).
• antagonisty PAF.
• Keratinocytovým růstovým faktorem (KGF), molekulami příbuznými s KGF (například KGF-2) a modulátory KGF.
• inhibitory COX-2, jako je Celebrex™ a Vioxx™.
• Analogy prostaglandinu(například E řady prostaglandinů).
• Modulátory matrixových metaloproteináz (MMP).
• Modulátory syntázy oxidů dusíku (nitric oxide synthase, NOS), včetně modulátorů indukovatelné NOS.
• · · · • · · • Modulátory glukokortikoidního receptoru.
• Modulátory glutamátového receptoru.
• Modulátory hladin lipopolysacharidů (LPS).
• Protirakovinnými látkami, zahrnujícími inhibitory onkogenů (například fos, jun) a interferony.
• Noradrenalinem a jeho modulátory a mimetiky.
Farmaceutické kompozice
Obecně. Předkládaný vynález rovněž poskytuje způsoby použití farmaceutických kompozic sloučenin podle vynálezu. Takové farmaceutické kompozice mohou být ve formě pro injekční, orální, pulmonální, nasální, transdermální nebo jinou formu podání. Obecně, vynález zahrnuje farmaceutické kompozice obsahující účinné množství sloučeniny podle vynálezu společně s farmaceuticky přijatelnými ředidly, konzervačními látkami, rozpouštědly, emulzifikátory, adjuvans/nebo nosiči. Takové kompozice obsahují ředidla s různým obsahem pufru (např. Tris-HCl, acetát, fosfát), pH a iontovou silou; aditiva, jako jsou detergenty a rozpouštědla (například Tween 80, Polysorbate 80), antioxidanty (například kyselinu askorbovou, metabisulfit sodný), konzervační látky (například Thimersol, benzylalkohol) a plnidla (například laktózu, mannitol); zapracování materiálu do zvláštních přípravků z polymerních sloučenin, jako je kyselina polymléčná, kyselina polyglykolová, atd., nebo do liposomů. Rovněž může být použita kyselina hyaluronová, což může mít účinek na podporu udržovaného přetrvávání v cirkulaci. Takové kompozice mohou ovlivňovat fyzikální stav, stabilitu, rychlost uvolňování in vivo a rychlost in vivo clearance proteinů a derivátů podle vynálezu. Viz, například Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. (1990, Mack • ·
Publishing Co., Easton, PA18042) pages 1435-1712, tj. publikace zde zahrnuté formou odkazu v celém svém rozsahu. Kompozice mohou být připraveny v kapalné formě, nebo mohou být jako suchý prášek, jako je lyofilizovaná forma. Rovněž jsou míněny implantovatelné přípravky s postupným uvolňováním, jako jsou transdermální přípravky.
Orální dávkovači formy. Pro použití podle vynálezu jsou zamýšleny orální pevné dávkovači formy, které jsou popsány v Kapitole 89 v publikaci Remington's
Pharmaceutical Sciences (1990), 18th Ed., Mack Publishing Co. Easton PA18042, která je zde zahrnuta formou odkazu v celém svém rozsahu. Pevné dávkovači formy zahrnují tablety, kapsle, pilulky, pastilky, tabletky, zdravotní bonbony nebo pelety. Pro přípravu kompozic podle vynálezu může rovněž být použita liposomální nebo protenoidní enkapsulace (jako například protenoidní mikrokuličky popsané v U.S. Patentu č. 4 925 673). Může být použita liposomální enkapsulace a liposomy mohou být derivatizovány s různými polymery (například U.S. Patent č. 5 013 556). Popis možných pevných dávkovačích forem pro terapeutika je uveden v Kapitole 10 publikace Marshall, K., Modern Pharmaceutics (1979), edited by G.S. Bankéř and C.T. Rhodes, která je zde zahrnuta formou odkazu v celém svém rozsahu. Obecně, prostředek bude zahrnovat sloučeninu podle vynálezu, inertní ingredience, které umožňují ochranu před prostředím žaludku a uvolnění biologicky aktivního materiálu ve střevě.
Rovněž jsou specificky zamýšleny orální dávkovači formy výše uvedených sloučenin podle vynálezu. Jestliže je to nezbytné, sloučeniny mohou být chemicky modifikovány tak, aby orální podání bylo účinné. Obecně, uvažovanou chemickou modifikací je připojení alespoň jedné sloučeniny k vlastní molekule sloučeniny podle vynálezu, přičemž tato sloučenina dovoluje (a) inhibici proteolýzy; a (b) vstřebávání do krevního řečiště ze žaludku a střeva. Rovněž je žádoucí zvýšení celkové stability sloučeniny a zvýšení doby cirkulace v těle. Sloučeniny, vhodné jako kovalentně připojená vehikula podle tohoto vynálezu, mohou rovněž být použity k tomuto účelu. Příklady takových sloučenin zahrnují: PEG, kopolymery ethylenglykolu a propylenglykolu, karboxymethylcelulózu, dextran, polyvinylalkohol, polyvinylpyrrolidon a polyprolin. Viz, například Abuchowski and Davis, Soluble Polymer-Enzyme Adducts, Enzymes as Drugs (1981), Hocenberg and Roberts, eds., Wiley-Interscience,
New York, NY,, pp. 367-83; Newmark, et al. (1982), J. APPl·
Biochem. 4: 185-9. Dalšími polymery, které mohou být použity, jsou poly-1,3-dioxolan a poly-1,3,6-tioxocan. Jak bylo uvedeno, jsou pro farmaceutické použití výhodné sloučeniny PEG.
Pro dávkovači formy k orálnímu podání je rovněž možné použít sůl modifikované alifatické aminokyseliny, jako například N-(8-[2-hydroxybenzoyl]amino) kaprylát sodný (SNAC), jako nosič ke zvýšení absorpce terapeutických sloučenin podle tohoto vynálezu. Klinická účinnost heparinových přípravků používajících SNAC byla prokázána Emisphere Technologies v pokusech označených „Phase II.
Viz U.S. Patent č. 5 792 451, Oral drug delivery composition and methods.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být zapracovány do přípravků jako jemné multičástice ve formě granulí nebo pelet o velikosti částic přibližně 1 mm. Úprava materiálu pro podání v kapslích může být také na formu prášku, mírně • · stlačených válečků nebo dokonce i tablet. Léková forma může být připravena lisováním.
Rovněž mohou být zahrnuty baviva a ochucovadla. Tak například, protein (nebo derivát) může být upraven (jako zapouzdření mikrokuliček v liposomu) a dále může být uveden do kontaktu s poživatelným produktem, jako je chlazený nápoj obsahující barviva a ochucovadla.
Je možné provádět ředění nebo zvětšení objemu sloučeniny podle vynálezu pomocí inertního materiálu. Tato ředidla mohou zahrnovat uhlovodany, konkrétně mannitol, α-laktózu, bezvodou laktózu, celulózu, sacharózu, modifikované dextrany a škrob. Rovněž mohou být jako plnidla použity určité anorganické soli, které zahrnují kalcium trifosfát, uhličitan hořečnatý a chlorid sodný. Některými z komerčně dostupných ředidel jsou Fast-Flo, STARx 1500, Emcompress a Avicell.
Do terapeutických přípravků v pevné dávkovači formě, mohou být začleněny dezintegranty. Materiály použité jako dezintegranty zahrnují, bez omezení, škrob obsahující komerční dezintegrant na bázi škrobu, Explotab. Glykolát sodný škrobu, Amberlit, karboxymethylcelulóza sodná, ultramylopektin, alginát sodný, želatina, pomerančová kůra, kyselá karboxymethylcelulóza, přírodní houba a bentonit mohou být všechny použity. Jinou formou dezintegrantů jsou nerozpustné kationto-výměnné pryskyřice. Práškové gumy mohou být použity jako dezintegranty a pojivá a zahrnují práškové gumy, jako je agar, guma karaya nebo tragant. Kyselina alginová a její sodná sůl jsou rovněž vhodné jako dezintegranty.
Pojivá mohou být použita pro spojení terapeutické látky na formu pevné tablety a zahrnují materiály z přírodních produktů, jako je arabská guma, tragant, škrob a želatina. Jiná pojivá zahrnují methylcelulózu (MC), ethylcelulózu (EC) a karboxymethylcelulózu (CMC). Ke granulaci terapeutik je možné použít jak polyvinylpyrrolidon (PVP), tak hydroxypropylmethylcelulózu (HPMC) v alkoholových roztocích
Antifrikční agens může být zahrnuto do přípravku k zabránění lepení během postupu přípravy. Lubrikanty mohou být použity jako vrstva mezi terapeutiky a stěnou lisu, a tyto mohou zahrnovat, bez omezení, kyselinu stearovou včetně jejích hořečnatých a vápenatých solí, polytetrafluorethylen (PTFE), tekutý parafin, rostlinné oleje a vosky. Mohou být použity rozpustné lubrikanty, jako je laurylsulfát sodný, laurylsulfát hořečnatý, polyethylenglykol o různých molekulových hmotnostech, Carbowa 4000 a 6000.
Též mohou být přidány kluzné látky (glidanty), které mohou zlepšovat tekutost během přípravy léku k podpoře přeskupení během lisování. Kluzné látky mohu zahrnovat škrob, mastek, pyrogenní oxid křemičitý (silica) a hydratovaný silikoaluminát.
Pro podporu rozpouštění sloučeniny podle vynálezu ve vodném prostředí může být přidána povrchově aktivní látka jako smáčedlo. Povrchově aktivní látky mohou zahrnovat aniontové detergenty, jako je laurylsulfát sodný, dioktylsulfosukcinát sodný a dioktylsulfonát sodný. Mohou být použity kationtové detergenty, které mohou zahrnovat • · benzalkonium chlorid nebo benzethonium chlorid. Seznam potenciálních neionogenních detergentů, které mohou být použity v přípravcích jako povrchově aktivní látky, zahrnuje „lauromacrogol 400”, „polyoxyl 40 stearate”, „polyoxyethylene hydrogenated castor oil 10, 50 a 60”, glycerol monostearát, polysorbát 40, 60, 65 a 80, sacharózové estery mastných kyselin, methylcelulózu a karboxymethylcelulózu. Tyto surfaktanty mohou být přítomny v přípravku s proteinem buďto samostatně, nebo jako směs v různém poměru složek.
Do přípravku mohou být rovněž přidána aditiva ke zvýšení příjmu sloučeniny. Aditivy, které mají tuto vlastnost, jsou například mastné kyseliny, kyselina olejová, kyselina linolová a kyselina linolenová. Mohou být žádoucí přípravky s řízeným uvolňováním. Sloučenina podle tohoto vynálezu může být zapracována do inertní matrix, která dovoluje uvolňování buďto difúzí nebo mechanismem vyluhování; například do gumy. Pomalu se degradující materiály mohou rovněž být zahrnuty v přípravku, například algináty, polysacharidy. Jinou formu řízeného uvolňování podle tohoto vynálezu je způsob založený na Orosově terapeutickém systému (Alza Corp.), kdy je například léčivo uzavřeno v semipermeabilní membráně, která dovoluje vodě vstupovat a vytlačovat léčivo ven skrz malý otvor působením osmotických účinků. Některé z enterických potahovacích látek mají rovněž účinek odloženého uvolňování.
Pro přípravu mohou být použity další potahovací látky. Tyto zahrnují řadu cukrů, které mohou být aplikovány v potahovacím stroji. Terapeutická látka může být také dána do tablet potažených filmem a materiály použité v tomto případě jsou rozděleny do 2 skupin. První skupinu tvoří • · • · • · neenterické materiály a tato skupina zahrnuje methylcelulózu, ethylcelulózu, hydroxyethylcelulózu, methylhydroxyethylcelulózu, hydroxypropylcelulózu, hydroxypropylmethylcelulózu, sodium karboxymethylcelulózu, providon a polyethylenglykoly. Druhá skupina sestává z enterických materiálů, kterými jsou obvykle estery kyseliny ftalové.
Může být použita směs materiálů pro poskytnutí optimálního filmu k potažení. Potažení filmem může být prováděno v potahovacím zařízení nebo ve fluidizačním zařízení nebo kompresním potahováním.
Formy pro pulmonální podání. Rovněž je míněno pulmonální podání proteinu podle vynálezu (nebo jeho derivátů). Protein (nebo jeho derivát) je podáván pulmonálně do plic savce při inhalaci a prostupuje přes plicní epitelovou linii do krevního oběhu. (K tomu další zprávy zahrnují Adjei et al., Pharma. Res. (1990) 7: 565-9;
Adjei et al. (1990), Internatl. J. Pharmaceutics 63: 135-44 (leuprolid acetát); Braquet et al. (1989), J, Cardiovasc.
Pharmacol. 13 (suppl. 5): s.143-146 (endothelin-1); Hubbard et al.(1989), Annals Int. Med. 3: 206-12 (al-antitrypsin); Smith et al.(1989), J. Clin. Invest. 84: 1145-6 (al-proteináza); Oswein et al. (March 1990), Aerosolization of Proteins, Proč. Symp. Resp. Drug Delivery II, Keystone, Colorado (rekombinantní lidský růstový hormon); Debs et al. (1988), J. Immunol. 140: 3482-8 (interferon-γ a faktor nekrózy nádorů) a Platz et al., U.S. Patent č. 5 284 656 (faktor stimulující kolonie granulocytů).
Pro praktické použití tohoto vynálezu je uvažováno o velkém množství mechanických zařízení navržených pro
4?· ···· · • · · · · · ··· · * * « ·· ··« »· »·· ···«· ···« ···· ·· · ·· ·· ·· · · ·· * pulmonální podání terapeutických produktů, které zahrnují, bez omezení, rozprašovače, odměrné dávkovači inhalátory a práškové inhalátory, které jsou odborníkům v oboru důvěrně známé. Některými z konkrétních příkladů komerčně dostupných zařízení vhodných k provádění tohoto vynálezu jsou rozprašovač Ultravent, vyráběný Mallinckrodt, lne., St. Louis, Missouri; rozprašovač Acorn II, vyráběný Marquest Medical Products, Englewood, Colorado; odměrný dávkovači inhalátor Ventolin, vyráběný Glaxo lne., Research Triangle Park, North Carolina; a práškový inhalátor Spinhaler, vyráběný Fisons Corp., Bedford, Massachusetts.
Všechna tato zařízení vyžadují použití přípravků vhodných pro rozprašování sloučeniny podle vynálezu.
Typicky každý přípravek je specifický pro typ používaného zařízení a může obsahovat použití vhodného hnacího materiálu, kromě ředidel, adjuvans a/nebo nosičů vhodných pro léčbu.
Sloučenina podle vynálezu by měla být nejvýhodněji připravována ve formě částic s průměrnou velikostí částic menší než 10 μιη (nebo mikronů), nejvýhodněji 0,5 až 5 μπι pro nejúčinnější podávání distálně do plic.
Farmaceuticky přijatelné nosiče zahrnují uhlovodany, jako je trehalóza, mannitol, xylitol, sacharóza, laktóza a sorbitol. Další ingredience pro použití v přípravcích mohou zahrnovat DPPC, DOPE, DSPC a DOPC. Mohou být použity přírodní nebo syntetické povrchově aktivní látky. Může být použit PEG (bez ohledu na jeho použití při derivatizaci proteinu nebo analogu). Mohou být použity dextrany, jako je cyklodextran. Mohou být použity žlučové soli a jiné podobné zesilovače. Též mohou být použity celulóza a deriváty
9 9 • · ·> »· 9
9 9 9 · · • 9 «. · 9
9 9
9 9 999 9
9 9
9 celulózy. Mohou být použity aminokyseliny takové, jako při přípravě pufru.
Rovněž je uvažováno použití liposomů, mikrokapsulí nebo mikrokuliček, inkluzních komplexů a jiných typů nosičů .·
Přípravky vhodné pro použití v rozprašovači, buď tryskovém, nebo ultrazvukovém, bude typicky obsahovat sloučeninu podle vynálezu rozpuštěnou ve vodě v koncentraci od přibližně 0,1 do 25 mg biologicky aktivního proteinu na ml roztoku. Přípravek může rovněž obsahovat pufr a jednoduchý cukr (například ke stabilizaci proteinu a k regulaci osmotického tlaku). Přípravek pro použití v rozprašovači může rovněž obsahovat povrchově aktivní látku ke snížení nebo k zabránění povrchově indukovaného shlukování proteinu, způsobeného atomizací roztoku při vytváření aerosolu.
Přípravky pro použití v odměřovacím dávkovacím inhalačním zařízení budou obecně obsahovat jemný prášek obsahující sloučeninu podle vynálezu suspendovanou v hnací látce s pomocí povrchově aktivní sloučeniny. Hnací látkou může být běžný materiál používaný k tomuto účelu, jako je chlorfluorovaný uhlovodík, hydrochlorfluorovaný uhlovodík, hydrofluorovaný uhlovodík, nebo uhlovodík, zahrnující trichlorfluormethan, dichlordifluormethan, dichlortetrafluorethanol a 1,1,1,2-tetrafluorethan, nebo jejich kombinace. Vhodné povrchově aktivní látky zahrnují sorbitan trioleát a sojový lecitin. Kyselina olejová může být rovněž vhodná jako povrchově aktivní látka.
• · · · • · · • · · · · • · · · • · · · • · · ·
Přípravky pro dávkování z práškového inhalačního zařízení budou obsahovat jemný suchý prášek obsahující sloučeninu podle vynálezu a mohou rovněž obsahovat plnidlo, jako je laktóza, sorbitol, sacharóza, mannitol, trehalóza, nebo xylitol v množstvích, která umožňují rozptýlení prášku ze zařízení, například v 50 až 90 % hmotnosti přípravku.
Formy pro nasální podání. Rovněž je uvažováno nasální podání sloučeniny podle vynálezu. Nasální podání umožňuje průnik proteinu do krevního řečiště přímo po podání terapeutického produktu do nosu, aniž je nezbytné ukládání produktu v plicích. Přípravky pro nasální podání zahrnují přípravky s dextranem nebo cyklodextranem. Rovněž je zamýšleno podání, při kterém dochází k přenosu i přes jiné mukózní membrány.
Dávkování.Dávkovači režim použitý ve způsobu léčby výše popsaných stavů bude stanoven ošetřujícím lékařem, jenž zváží různé faktory, které modifikují působení léčiv, například věk, stav, hmotnost těla, pohlaví a dietu pacienta, závažnost jakékoliv infekce, dobu podání a další klinické faktory. Obecně, denní režim by měl být v rozsahu od 0,1 do 1000 mikrogramů sloučeniny podle vynálezu na kilogram hmotnosti těla, výhodně 0,1 až 150 mikrogramů na kilogram.
Specifická výhodná provedení
Původci určili výhodné struktury preferovaných peptidů, které jsou uvedeny v Tabulce 4 níže. Symbol „A může znamenat kterýkoliv z linkerů zde popsaných, nebo může prostě znamenat normální peptidovou vazbu (tj., že není • · • · · · linker přítomen). Z důvodu jasnosti jsou tandemová opakování a linkery znázorněny odděleně pomocí pomlček
Tabulka 4 - Výhodná provedení
Sekvence/struktura | SEQ ID NO: |
LPGCKWDLLIKQWVCDPL-A-V1 | 44 |
V1-A-LPGCKWDLLIKQWVCDPL | 45 |
LPGCKWDLLIKQWVCDPL-A- LPGCKWDLLIKQWVCDPL-A-V1 | 46 |
V1-A-LPGCKWDLLIKQWVCDPL-A- LPGCKWDLLIKQWVCDPL | 47 |
SADCYFDILTKSDVCTSS-A-V1 | 48 |
V1-A-SADCYFDILTKSDVCTSS | 49 |
sadcyfdiltksdvtss-A-sadcyfdiltksdvtss -A-V1 | 50 |
V^A-SADCYFDILTKSDVTSS-A- SADCYFDILTKSDVTSS | 51 |
FHDCKWDLLTKQWVCHGL-A-V1 | 52 |
V1-A-FHDCKWDLLTKQWVCHGL | 53 |
FHDCKWDLLTKQWVCHGL-A- FHDCKWDLLTKQWVCHGL-A-V1 | 54 |
V^A-FHDCKWDLLTKQWVCHGL-A- FHDCKWDLLTKQWVCHGL | 55 |
„V1 je doména Fc, jak byla zde dříve definována. Kromě struktur uvedených v Tabulce 4, původci dále zamýšlejí heterodimery, ve kterých každý z řetězců dimeru Fc je připojen k odlišné peptidové sekvenci; tak například se jedná o ty, v nichž je Fc připojen k odlišné sekvenci vybrané z Tabulky 2.
• · • · · ·
Všechny sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny postupy popsanými v PCT přihlášce zveřejněné pod číslem WO 99/25044.
Vynález bude dále popsán příklady provedení, které jsou spíše ilustrativní než limitující.
PŘÍKLADY PROVEDENÍ
PŘÍKLAD 1 Peptidy
Fágový displej peptidů
1. Příprava magnetických kuliček
A. Imobilizace Fc-TALL-1 na magnetických kuličkách Rekombinantní protein Fc-TALL-1 byl imobilizován na kuličkách Protein A Dynabeads (Dynal) v koncentraci 8 μg Fc-TALL-1 na 100 μΐ zásobních kuliček od výrobce. Kuličky byly přitaženy k jedné straně zkumavky s použitím magnetu a odpipetováním kapaliny, pak byly promyty dvakrát s fosfátem pufrovaným fyziologickým roztokem (phosphate buffer šalině, PBS) a resuspendovány v PBS. Protein Fc-TALL-1 byl přidán k promytým kuličkám ve výše uvedených koncentracích a inkubován za rotace po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Kuličky potažené s Fc-TALL-1 byly poté blokovány přidáním hovězího sérového albuminu (bovine sérum albumin, BSA) na konečnou 1% koncentraci a inkubovány přes noc při 4° C za rotace. Výsledné kuličky potažené Fc-TALL-1 byly poté dvakrát promyty s PBST (PBS s 0,05 % Tween-20) před tím, než byly podrobeny selekčním postupům.
• ·
B. Příprava kuliček pro negativní selekci
Další kuličky byly rovněž připraveny pro negativní selekce. Pro každou z podmínek panningu (třídění) bylo 250 μΐ zásobních kuliček od výrobce podrobeno výše uvedeným postupům (podle části Al) s tou výjimkou, že inkubační krok s Fc-TALL-1 byl vynechán. V posledním stupni promývání byly kuličky rozděleny do pěti 50μ1 alikvotů.
2. Selekce fágů vázajících se k TALL-1
A. Celková strategie
Knihovny vláknitých fágů TN8-IX (5xl09 nezávislých transformant) a TN12-I (l,4x 109 nezávislých transformant) (Dyax Corp.) bylo použito k selekci fágů vázajících se k TALL-1. Každá z knihoven byla podrobena buďto eluci při pH 2, nebo „kuličkové eluci” (část 2E). V pokusech s TALL-1 bylo takto provedeno uspořádání čtyř odlišných podmínek panningu (TN8-IX s použitím eluční metody s pH 2, TN8-IX s použitím metody eluce kuliček, TN12-I s použitím eluční metody s pH 2 a TN12-I s použitím metody eluce kuliček).
V každém z provedení byly provedeny tři cykly selekce.
B. Negativní selekce
Pro každé z provedení podmínek panningu bylo připraveno přibližně 100 ekvivalentů náhodné knihovny (δχΙΟ11 pfu pro TN8-IX a 1,4x1ο11 pfu pro TN12-I) ze zásobního kmene knihovny, které byly zředěny na 300 μΐ s PBST. Po posledním promytí byla odstraněna kapalina z prvního 50μ1 aiikvotu kuliček, připravených pro negativní selekci (podle části 1B) a ke kuličkám bylo přidáno 300 μΐ zředěného zásobního kmene knihovny. Výsledná směs byla inkubována po dobu 10 minut při teplotě místnosti za rotace. Fágový supernatant byl odstraněn s použitím magnetu a byl přidán ke druhému 50μ1 aiikvotu pro další krok • · • ·· ··· ·· ··· ·
·..··..· ·· :
negativní selekce. Tímto způsobem bylo provedeno pět stupňů negativní selekce.
C. Selekce s použitím kuliček potažených proteinem FcTALL-1
Fágový supernatant po posledním kroku negativní selekce (podle části 1B) byl přidán ke kuličkám potaženým s Fc-TALL-1 po posledním promývacím kroku (podle části 1A). Tato směs byla inkubována za rotace po dobu dvou hodin při teplotě místnosti, což umožňovalo specifické navázání fágů k cílovému proteinu. Po odstranění supernatantu byly kuličky sedmkrát promyty s PBST.
D. Eluce navázaných fágů elucí při pH 2.
Po posledním kroku promytí (podle části 2C) byly navázané fágy eluovány z magnetických kuliček přidáním 200 μΐ CBST (50 mM citrát sodný, 150 mM chlorid sodný, 0,05 % Tween-20, pH 2). Po inkubaci po dobu 5 minut při teplotě místnosti byla kapalina obsahující eluované fágy odstraněna a přenesena do jiné zkumavky. Eluční krok byl znovu zopakován přidáním 200 μΐ CBST a inkubací po dobu 5 minut. Kapaliny ze dvou elučních kroků byly spojeny a bylo přidáno 100 μΐ 2M roztoku Tris (pH 8) pro neutralizaci pH. Dále bylo přidáno 500 μΐ roztoku „Min A Salts (60 mM K2HPO4, 33 mM KH2PO4, 7,6 mM (NH4)SO4 a 1,7 mM citrát sodný) na konečný objem 1 ml.
E. „Kuličková eluce
Po konečném promytí byla kapalina odstraněna (podle části 2C) a poté byl ke kuličkám přidán 1 ml roztoku „Min A salts. Tato směs kuliček byla přidána přímo ke koncentrovanému vzorku bakterií pro infekci (podle částí 3A a 3B) .
• ·
3. Amplifikace
A. Příprava buněk k výsevu
Čerstvá kultura buněk E. coli (XL-1 Blue MRF') byla pěstována k ODgoo = 0,5 v médiu LB obsahujícím 12,5 pg/ml tetracyklinu. Pro každou z podmínek panningu bylo 20 ml této kultury zchlazeno na ledu a centrifugováno.
Bakteriální pelet byl respuspendován v 1 ml roztoku „Min A Salts.
B. Transdukce
Každá ze směsí z různých elučních postupů (podle části 2D a 2E) byla přidána ke koncentrovanému bakteriálnímu vzorku (podle části 3A) a inkubována při 37° C po dobu 15 minut. 2 ml média NZCYM media (2XNZCYM, 50 gg/ml ampicilin) byly přidány do každé směsi a následovala inkubace při teplotě místnosti po dobu 15 minut. Výsledný 4ml roztok byl vyset na velké plotny s agarem NZCYM, obsahujícím 50 gg/ml ampicilinu, a plotny byly inkubovány přes noc při 37° C.
C. Sklizení fágů
Každá ze směsí bakterie/fág, která byla pěstována přes noc na velkých plotnách s agarem NZCYM (podle části 3B) byla seškrábnuta do 35 ml média LB a agarová plotna byla dále promyta s dalšími 35 ml média LB. Výsledná směs bakterie/fág v médiu LB byla centrifugována pro odstranění bakterií v peletu. 50 ml fágového supernatnatu bylo přeneseno do další zkumavky, bylo přidáno 12,5 ml roztoku PEG (20% PEG 8000,3,5 M acetát amonný) a následovala inkubace na ledu po dobu 2 hodin k precipitaci fágů. Precipitované fágy byly odstředěny centrifugací a respuspendovány v 6 ml fágového resuspenzního pufru (250 mM NaCl, 100 mM Tris pH 8, 1 mM EDTA). Tento fágový roztok byl • · dále purifikován odstřeďováním centrifugací k odstranění zbývajících bakterií a druhou precipitací fága přidáním 1,5 ml roztoku PEG. Po kroku centrifugace byl fágový pelet resuspendován ve 400 μΐ PBS. Tento roztok byl podroben konečné centrifugaci k odstranění zbytkového bakteriálního debris. Výsledný fágový preparát byl titrován standarní zkouškou tvorby plaků (Molecular Cloning, Maniatis et al,
3rd Edition) .
4. Další dva cykly selekce a amplifikace.
Ve druhém cyklu byl amplifikovaný fág (1010pfu) z prvého cyklu (podle části 3C) použit jako vstupní fág k provedení selekčních a amplifikačních kroků (podle částí 2 a 3). Amplifikovaný fág (1O10pfu) z druhého cyklu byl střídavě použit jako vstupní fág k provedení třetího cyklu selekce a amplifikace (podle částí 2 a 3). Po elučních krocích (podle částí 2D a 2E) třetího cyklu byla malá frakce eluovaných fágů vyseta tak, jako ve zkoušce tvorby plaků (podle části 3C). Jednotlivé plaky byly odpíchnuty a naneseny do 96jamkových mikrotitračních destiček obsahujících v každé jamce 100 μΐ pufru TE. Tyto základní plotny byly inkubovány při 37° C v inkubátoru po dobu 1 hodiny tak, aby byla umožněna eluce fágů do pufru TE.
5. Analýza klonů (ELISA fágů a sekvenování)
Klony fágů byly analyzovány zkouškou ELISA fágů a sekvenovacími postupy. Sekvence byly klasifikovány na základě kombinovaných výsledků z těchto dvou zkoušek.
ELISA fágů
Kultura XL-1 Blue MRF' byla pěstována k dosažení OD60o 0,5. Alikvot 30 μΐ této kultury bylo přenesen do každé jamky 96jamkové mikrotitrační destičky. 10 μΐ eluovaných • · fágů (podle části 4) bylo přidáno do každé jamky a ponecháno k infekci bakterií po dobu 15 minut při teplotě místnosti. 130 μΐ média LB obsahujícího 12,5 μ9/πι1 tetracyklinu a 50 μg/ml ampicilinu bylo přidáno do každé jamky. Mikrotitrační destička byla poté inkubována přes noc při 37°C. Rekombinantní protein TALL-1 (1 μg/ml v PBS) byl ponechán k potažení 96jamkových destiček Maxisorp (NUNC) přes noc při 4° C. Jako kontrola byl k potažení použit rekombinantní protein Fc-Trail na oddělené destičce Maxisorp ve stejné molární koncentraci, jako protein TALL1.
Následující den byly z destiček Maxisorp potažených proteinem odstraněny kapaliny a každá z jamek byla blokována se 300 μΐ 2% roztoku BSA při 37° po dobu 1 hodiny. Roztok BSA byl odstraněn a jamky byly třikrát promyty s roztokem PBST. Po posledním promývacím kroku bylo 50 μΐ PBST přidáno do každé jamky destičky Maxisorp potažené proteinem. Každá z 50μ1 kultur pěstovaných přes noc v 96jamkové mikrotitrační destičce byla přenesena do odpovídajících jamek destiček potažených TALL-1 stejně jako do kontrolních destiček potažených Fc-Trail. 100 μΐ směsí ve dvou typech destiček bylo inkubováno po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Kapalina byla z destiček Maxisorp odstraněna a jamky byly pětkrát promyty s PBST. Protilátka anti-M13 konjugovaná s HRP (HRP-conjugated anti-M13 antibody, Pharmacia) byla ředěna 1:7500 a 100 μΐ zředěného roztoku bylo přidáno do každé jamky destiček Maxisorp pro lhodinovou inkubaci při teplotě místnosti. Kapalina byla odstraněna a jamky byly promyty sedmkrát s PBST. Do každé jamky bylo přidáno 100 μΐ tetramethylbenzidinového (TMB) substrátu (Sigma) pro vyvinutí barevné reakce a reakce byla • · • · zastavena s 50 μΐ 5N roztoku NH2SO4. OD450 byla odečtena na čtečce ploten (Molecular Devices).
B. Sekvenování fágových klonů.
Pro každý fágový klon byl připraven sekvenační templát metodou PCR. Následující oligonukleotidový pár byl použit k amplifikaci přibližně 500nukleotidového fragmentu: primer #1(5'-CGGCGCAACTATCGGTATCAAGCTG-3') (SEQ ID NO: 56) a
primer #2(5'-CATGTACCGTAACACTGAGTTTCGTC-3') (SEQ ID NO: 57) Pro každý klon byla připravena následující směs.
Reagencie | objem (μΐ)/zkumavka |
dH2O | 26,25 |
50% glycerol | 10 |
10B PCR pufr (w/o MgCl2) | 5 |
25 mM MgCl2 | 4 |
10 mM směs dNTP | 1 |
100 μΜ primer 1 | 0,25 |
100 μΜ primer 2 | 0,25 |
Taq polymeráza | 0, 25 |
Fág v TE (podle části 4) | 3 |
Celkový reakční objem | 50 |
Byl použit termocykler (GeneAmp PCR System 9700, Applied Biosystems) k provádění následujícího progragu: 94° C po dobu 5 min; [94° C po dobu 30 s, 55° C po dobu 30 s,
72° C po dobu 45 s] x 30 cyklů; 72° C po dobu 7 min; ochlazení na 4° C. Produkt PCR byl kontrolován nanesením 5 μΐ každé PCR reakce na 1% agarózový gel. Produkt PCR ve zbývajících 45 μΐ z každé reakce byl přečištěn s použitím soupravy QIAquick Multiwell PCR Purification kit (Qiagen),
podle doporučení výrobce. Výsledný produkt byl poté sekvenován s použitím ABI 377 sekvenátoru (Perkin-Elmer) podle výrobcem doporučeného protokolu.
6. Klasifikace sekvencí a stanovení konsensus sekvence
A. Klasifikace sekvencí (Sequence ranking)
Peptidové sekvence, které byly translatovány z různých nukleotidových sekvencí (podle části 5B), byly korelovány s údaji ELISA. Klony, které vykazovaly vysoké OD450 na jamkách potažených TALL-1 a nízké OD450 na jamkách potažených Fc-Trail, byly považovány za významnější. Sekvence, které se objevují mnohonásobně, byly rovněž považovány za důležité. Kandidátské sekvence byly vybrány na základě těchto kriterií pro další analýzu peptidů nebo peptibodies. Pět a devět kandidátských peptidových sekvencí byly vybráno z knihoven TN8-IX a TN12-I, v uvedeném pořadí.
B. Stanovení konsensus sekvence
Většina sekvencí selektovaných z knihovny TN12-I obsahovala zcela konzervativní motiv DBL. Stejně tak byl tento motiv rovněž pozorován v sekvencích selektovaných z knihovny TN8-IB. Jiný motiv, PFPWE (SEQ ID NO: 110) byl rovněž pozorován v sekvencích získaných z knihovny TN8-IB library.
Konsensus peptid, FHDCKWDLLTKQWVCHGL (SEQ ID NO: 58), byl navržen na základě motivu DBL. Vzhledem k tomu, že peptidy odvozené z knihovny TN12-I byly nejaktivnější, byly sekvence nej lepších 26 peptidových sekvencí seřazeny (alignment) na základě výše uvedených klasifikačních kriterií (podle části 5A) s motivem DBL 26. Podtržená „jaderná aminokyselinová sekvence byla získána stanovením aminokyselin, které se nejčastěji vyskytují v každé pozici.
• · • ·
Dva cysteiny přiléhající k jaderným sekvencím byly v knihovně TN12-I fixovanými aminokyselinami. Zbytek aminokyselinové sekvence v konsensus peptidu je odvozen z jednoho z kandidátských peptidů, TALL-1-12-10 (Tabulka 2, SEQ ID NO: 37). Peptid a peptibody , které byly odvozeny z této konsensus sekvence, byly nejúčinnější ve zkoušce proliferace B buněk.
PŘÍKLAD 2 Peptibodies
Byla zkonstruována sada dvanácti TALL-1 inhibitorních peptibodies (Tabulka 5), ve kterých monomer každého z peptidů byl fúzován ve čtecím rámci s Fc oblastí lidského IgGl. Každý TALL-1 inhibitorní peptibody byl zkonstruován teplotní hybridizací (annealing) párů oligonukleotidů zobrazených v Tabulce 6 pro generování duplexu kódujícího peptid a linker složený z 5 glycinových zbytků a jednoho valinového zbytku, jako fragment Ndel až Sáli. Tyto duplexní molekuly byly ligovány do vektoru (pAMG21-RANK-Fc, zde popsaného) obsahujícího lidský gen Fc, rovněž rozštěpeného s Ndel a Sáli. Výsledné ligační směsi byly transformovány elektroporací do buněk kmene E. coli 2596 (GM221, zde popsaný). Klony byly screenovány na schopnost produkovat rekombinantní proteinový produkt a na to, zda mají genovou fúzi se správnou nukleotidovou sekvencí. Pro každý z peptibodies byl vyselektován jeden takový klon. Nukleotidové a aminokyselinové sekvence fúzních proteinů jsou uvedeny na Obrázcích 4A až 4F.
• ·
Tabulka 5. Peptidové sekvence a oligonukleotidy použité pro generování TALL-1 inhibitorních peptibodies.
Peptibody | Peptibody SEQ ID NO | Sekvence peptidu | Sense oligo- nukleotid | Antisense oligo- nukleotid |
TALL-l-8-l-a | 29 | PGTCFPFPWECTHA | 2517-24 | 2517-25 |
TALL-l-8-2-a | 30 | WGACWPFPWECFKE | 2517-26 | 2517-27 |
TALL-l-8-4-a | 31 | VPFCDLLTKHCFEA | 2517-28 | 2517-29 |
TALL-l-12-4-a | 32 | GSRCKYKWDVLTKQCFHH | 2517-30 | 2517-31 |
TALL-l-12-3-a | 33 | LPGCKWDLLIKQWVCDPL | 2517-32 | 2517-33 |
TALL-l-12-5-a | 34 | SADCYFDILTKSDVCTSS | 2517-34 | 2517-35 |
TALL-l-12-8-a | 35 | SDDCMYDQLTRMFICSNL | 2517-36 | 2517-37 |
TALL-l-12-9-a | 36 | DLNCKYDELTYKEWCQFN | 2521-92 | 2521-93 |
TALL-l-12-10-a | 37 | FHDCKYDLLTRQMVCHGL | 2521-94 | 2521-95 |
TALL-l-12-ll-a | 38 | RNHCFWDHLLKQDICPSP | 2521-96 | 2521-97 |
TALL-l-12-14-a | 39 | ANQCWWDSLTKKNVCEFF | 2521-98 | 2521-99 |
TALL-1- konsensus | 58 | FHDCKWDLLTKQWVCHGL | 2551-48 | 2551-49 |
• · · • · · · · · • ·· · ♦ * · φ · ··· ·-···· φ · · · · · • · · · · · ·
Tabulka 5Β - TALL-1 inhibitorní peptibodies.
Peptibody | Peptibody SEQ ID NO | Peptidová sekvence |
TALL-1-81-a | 111 | MPGTCFPFPW ECTHAGGGGG VDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVWDVSHE DPEVKFNWYV DQVEVHNAKT KPREEQYNST YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV kgfypsdiav ewesngqpen nykttppvld SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK |
TALL-1-82-a | 112 | MWGACWPFPW ECFKEGGGGG VDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVWDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK |
TALL-1-84-a | 113 | MVPFCDLLTK HCFEAGGGGG VDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVWDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK |
TALL-1-124-a | 114 | MGSRCKYKWD VLTKQCFHHG GGGGVDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCWVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK |
TALL-1-12- 3-a | 115 | MLPGCKWDLL IKQWVCDPLG GGGGVDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCWVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK |
TALL-1-125-a | 116 | MSADCYFDIL TKSDVCTSSG GGGG VDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCWVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK |
TALL-1-12- 8-a | 117 | MSDDCMYDQL TRMFICSNLG GGGGVDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCWVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP |
• · • « · • F · * · « · · · • · » ·
PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK | ||
TALL-1-129-a | 118 | MDLNCKYDEL TYKEWCQFNG GGGGVDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVWD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK |
TALL-1-1210-a | 119 | MFHDCKYDLL TRQMVCHGLG GGGGVDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVWD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK |
TALL-1-1211-a | 120 | MRNHCFWDHL LKQDICPSPG GGGGVDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVWD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK |
TALL-1-1214-a | 121 | MANQCWWDSL TKKNVCEFFG GGGGVDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVWD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK |
TALL-1 - konsensus | 122 | MFHDCKWDLL TKQWVCHGLG GGGGVDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVWD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK |
TALL-1 12- 3 tandemový dimer | 123 | MLPGCKWDLL IKQWVCDPLG SGSATGGSGS TASSGSGSAT HMLPGCKWDL LIKQWVCDPL GGGGGVDKTH TCPPCPAPEL LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVW DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE QYNSTYRWS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS RDELTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK |
TALL-1 konsensus tandemová dimer | 124 | MFHDCKWDLL TKQWVCHGLG SGSATGGSGS TASSGSGSAT HMFHDCKWDL LTKQWVCHGL GGGGGVDKTH TCPPCPAPEL LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVW DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE QYNSTYRWS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS RDELTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK |
···· · · ·· • » · · · «< ·· ·· * • ♦ β · ·” τ^ΗπΙVa 6 - Sekvence oligonukleotidů použité při konstrukci peptibody.
Oligo- nukleotid ID číslo | SEQ ID NO | Sekvence | |
2517-24 | 71 | TAT GCC GGG TAC TTG TTT CCC GTT CCC GTG GGA ATG CAC TCA CGC TGG TGG AGG CGG TGG GG | |
2517-25 | 72 | TCG ACC CCA CCG CCT CCT GGA GCG TGA GTG CAT TCC CAC GGG AAG CCG AAA CAA GTA CCC GGC A | |
2517-26 | 73 | TAT GTG GGG TGC TTG TTG GCC GTT CCC GTG GGA ATG TTT CAA AGA AGG TGG AGG CGG TGG GG | |
2517-27 | 74 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCT TCT TTG AAA CAT TCC CACGGG AAC GGC CAA CAAGCA CCC CAC A | |
2517-28 | 75 | TAT GGT TCC GTT CTG TGA CCT GCT GAC TAA ACA CTG TTT CGA AGC TGG TGG AGG CGG TGG GG | |
2517-29 | 76 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCA GCT TCG AAA CAG TGT TTA GTC AGC AGG TCA CAGAAC GGA ACC A | |
2517-30 | 77 | TAT GGG TTC TCG TTG TAA ATA CAA ATG GGA CGT TCT GAC TAA ACA GTG TTT CCA CCA CGG TGG AGG CGG TGG GG | |
2517-31 | 78 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCG TGG TGG AAA CAC TGT TTA GTC AGA ACG TCC CAT TTG TAT TTA CAA CGA GAA CCC A | |
2517-32 | 79 | TAT GCT GCC GGG TTG TAA ATG GGA CCT GCT GAT CAA ACA GTG GGT TTG TGA CCC GCT GGG TGG AGG CGG TGG GG | |
2517-33 | 80 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCC AGC GGG TCA CAA ACC CAC TGT TTG ATC AGC AGG TCC CAT TTA CAA CCC GGC AGC A | |
2517-34 | 81 | TAT GTC TGC TGA CTG TTA CTT CGA CAT CCT GAC TAA ATC TGA CGT TTG TAC TTC TTC TGG TGG AGG CGG TGG GG | |
2517-35 | 82 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCA GAA GAA GTA CAA ACG TCA GAT TTA GTC AGG ATG TCG AAG TAA CAG TCA GCA GAC A | |
2517-36 | 83 | TAT GTC TGA CGA CTG TAT GTA CGA CCA GCT GAC TCG TAT GTT CAT CTG TTC TAA CCT GGG TGG AGG CGG TGG GG | |
2517-37 | 84 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCC AGG TTA GAA CAG ATG AAC ATA CGA GTC AGC TGG TCG TAC ATA CAG TCG TCA GAC A | |
2521-92 | 85 | TAT GGA CCT GAA CTG TAA ATA CGA CGA ACT GAC TTA CAA AGA ATG GTG TCA GTT CAA CGG TGG AGG CGG TGG GG | |
25221-93 | 86 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCG TTG AAC TGA CAC CAT TCT TTG TAA GTC AGTTCG TCG TAT TTA CAG TTC AGG TCC A | |
2521-94 | 87 | TAT GTT CCA CGA CTG TAA ATA CGA CCT GCT GAC TCG TCA GAT GGT TTG TCA CGG TCT GGG TGG AGG CGG TGG GG | |
2521-95 | 88 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCC AGA CCG TGA CAA ACC ATC TGA CGA GTC AGC AGG TCG TAT TTA CAG TCG TGG AAC A | |
2521-96 | 89 | TAT GCG TAA CCA CTG TTT CTG GGA CCA CCT GCT GAA ACA |
• ·
GGA CAT CTG TCC GTC TCC GGG TGG AGG CGG TGG GG | ||
2521-97 | 90 | TCG ACC CCA CCG CČT CCA CCC GGA GAC GGA CAG ATG TCC TGT TTC AGC AGG TGG TCC CAG AAA CAG TGG TTA CGC A |
2521-98 | 91 | TAT GGC TAA CCA GTG TTG GTG GGA CTC TCT GCT GAA AAA AAA CGT TTG TGA ATT CTT CGG TGG AGG CGG TGG GG |
2521-99 | 92 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCG AAG AAT TCA CAA ACG TTT TTT TTC AGC AGA GAG TCC CAC CAA CAC TGG TTA GCC A |
2551-48 | 93 | TAT GTT CCA CGA CTG CAA ATG GGA CCT GCT GAC CAA ACA GTG GGT TTG CCA CGG TCT GGG TGG AGG CGG TGG GG |
2551-49 | 94 | TCG ACC CCA CCG CCT CCA CCC AGA CCG TGG CAA ACC CAC TGT TTG GTC AGC AGG TCC CAT TTG CAG TCG TGG AAC A |
Vektor pAMG21-RANK-Fc.
pAMG21. Expresivní plasmid pAMG21 (ATCC přístupové číslo 98113) může být odvozen z expresivního vektoru (firmy Amgen) pCFM1656 (ATCC přístupové číslo 69576) , který byl postupně odvozen z expresivního vektorového systému (firmy Amgen), popsaném v U.S. Patentu č. 4 710 473. Plasmid pCFM1656 může být odvozen z plasmidu pCFM836 (popsaném v U.S. Patentu č. 4 710 473) takto:
• destrukcí dvou endogenních restrikčních míst Ndel koncovým zaplněním s enzymem T4 polymerázou a následnou ligací zarovnaných konců;
• záměnou sekvence DNA mezi jedinečnými restrikčními místy AatlI a Clal obsahující syntetický promotor PL podobným fragmentem získaným z pCFM636 (U.S.Patent č.
710 473) obsahujícím promotor PL (viz SEQ ID NO: 95 níže); a • substituováním malé sekvence DNA mezi jedinečnými restrikčními místy Clal a KpnI za oligonukleotid, který má sekvenci SEQ ID NO: 96.
SEQ ID NO: 95:
AatlI
5’ CTAATTCCGCTCTCACCTACCAAACAATGCCCCCCTGCAAAAAATAAATTCATAT3’ TGCAGATTAAGGCGAGAGTGGATGGTTTGTTACGGGGGGACGTTTTTTATTTAAGTATA-AAAAAACATACAGATAACCATCTGCGGTGATAAATTATCTCTGGCGGTGTTGACATAAA-TTTTTTGTATGTCTATTGGTAGACGCCACTATTTAATAGAGACCGCCACAACTGTATTT-TACCACTGOCGGTGATACTGAGCACAT 3’
-ATGGTGACCGCCACTATGACTCGTGTAGC 5’
Clal • · · • « • « • ·
SEQ ID NO: 96:
5'CGATTTGATTCTAGAAGGAGGAATAACATATGGTTAACGCGTTGGAATTCGGTAC
3'
3'TAAACTAAGATCTTCCTCCTTATTGTATACCAATTGCGCAACCTTAAGC 5'
Clal KpnI
Expresivní plasmid pAMG21 může pak být odvozen z pCFM1656 provedením řady místně řízených záměn baží s PCR mutagenezí překrývajících se oligonukleotidů („PCR overlapping oligonucleotide mutagenesis) a se sekvenčními substitucemi DNA. Počínaje od místa BglII (plasmid bp #
180) hned vedle 5' k plasmidovému replikačnímu promotoru PcopB a pokračujíc k plasmidovým replikačním genům, jsou záměny párů baží takové, jak jsou uvedeny v Tabulce 7 níže.
Tabulka 7 - Záměny párů bázi vedoucí k pAMG21
pAMG21 bp # | bp v pCFM1656 | bp zaměněný na v pAMG21 |
# 204 | T/A | C/G |
#428 | A/T | G/C |
#509 | G/C | A/T |
#617 | -- | inzert dvou G/C bp |
#679 | G/C | T/A |
#980 | T/A | C/G |
#994 | G/C | A/T |
#1004 | A/T | C/G |
#1007 | C/G | T/A |
#1028 | A/T | T/A |
#1047 | C/G | T/A |
#1178 | G/C | T/A |
#1466 | G/C | T/A |
#2028 | G/C | delece bp |
• · · • · · #2187 #2480 #2499-2502 #2642 #3435 #3446 #3643
C/G | T/A |
A/T | T/A |
AGTG | GTCA |
TCAC | CAGT |
TCCGAGC | delece |
AGGCTCG | |
G/C | A/T |
G/C | A/T |
A/T | T/A |
Sekvence DNA mezi jedinečnými restrikčními místy AatlI (pozice # 4364 v pCFM1656) a SacII (pozice #4585 v pCFM1656) je substituována sekvencí DNA uvedenou níže (SEQ ID NO: 97):
[AatlI kohezní konec] 5- GCGTAACGTATGCATGGTCTCC[pozice tt 4358 v pAMG21] 3' TGCACGCATTGCATACGTACCAGAGG-CCATGCGAGAGTAGGGAACTGCCAGGCATCAAATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACT-GGTACGCTCTCATCČCTTGACGGTCCGTAGTTTATTTTGCTTTCCGAGTCAGCTTTCTGA- GGGCCTTTCGTTTTATCTGTTGTTTGTCGGTGAACGCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGC -CCCGGAAAGCAAAATAGACAACAAACAGCCACTTGCGAGAGGACTCATCCTGTTTAGGCG-CGGGAGCGGATTTGAACGTTGCGAAGCAACGGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGC-GCCCTCGCCTAAACTTGCAACGCTTCGTTGCCGGGCCTCCCACCGCCCGTCCTGCGGGCGCATAAACTGCCAGGCATCAAATTAAGCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTÍTTGCGT-GTATTTGACGGTCCGTAGTTTAATTCGTCTTCCGGTAGGACTGCCTACCGGAAAAACGCAAatu
-TTCTACAAACTCTTTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGGACGTCGTACTTAAC-AAGATGTTTGAGAAAACAAATAAAAAGATTTATGTAAGTTTATACCTGCAGCATGAATTG-TTTTAAAGTATGGGCAATCAATTGČTCCTGTTAAAATTGCTTTAGAAATACTTTGGCAGC-AAAATTTCATACCCGTTAGTTAACGAGGACAATTTTAACGAAATCTTTATGAAACCGTCG-GGTTTGTTGTATTGAGTTTCATTTGCGCATTGGTTAAATGGAAAGTGACCGTGCGCTTAC-CCAAACAACATAACTCAAAGTAAACGCGTAACCAATTTACCTTTCACTGGCACGCGAATG-TACAGCCTAATATTTTTGAAATATCCCAAGAGCTTTTTCCTTCGCATGCCCACGCTAAAC-ATGTCGGATTATAAAAACTTTATAGGGTTCTCGAAAAAGGAAGCGTACGGGTGCGATTTGATTCTTTTTCTCTTTTGGTTAAATCGTTGTTTGATTTATTATTTGCTATATTTATTTTTC-TAAGAAAAAGAGAAAACCAATTTAGCAACAAACTAAATAATAAACGATATAAATAAAAAGGATAATTATCAACTAGAGAAGGAACAATTAATGGTATGTTCATACACGCATGTAAAAATACTATTAATAGTTGATCTCTTCCTTGTTAATTACCATACAAGTATGTGCGTACATTTTTATAACTATCTATATAGTTGTCTTTCTCTGAATGTGCAAAACTAAGCATTCCGAAGCCATTATTTGATAGATATATCAACAGAAAGAGACTTACACGTTTTGATTCGTAAGGCTTCGGTAATATAGCAGTATGAATAGGGAAACTAAACCCAGTGATAAGACCTGATGATTTCGCTTCTTTAAATCGTCATACTTAŤCCCTTTGATTTGGGTCACTATTCTGGACTACTAAAGCGAAGAAATT86
- TTAC ATTTGGAGATTTTTTATTTAC AGC ATTGTTTTC AAATATATTCC AATTAATCGGTG -AATGTAAACCTCTAAAAAATAAATGTCGTAACAAAAGTTTATATAAGGTTAATTAGCCAC-aatgattggagttagaataatctactataggatcatattttattaaattagcgtCatcat-TTACTAACCTCAATCTTATTAGATGATATCCTAGTATAAAATAATTTAATCGCAGTAGTA-AATATTGCCTCCATTTTTTAGGGTAATTATCCAGAATTGAAATATCAGATTTAACCATAG-TTATAACGGAGGTAAAAAATCCCATTAATAGGTCTTAACTTTATAGTCTAAATTGGTATC-AATGAGGATAAATGATCGCGAGTAAATAATATTCACAATGTACCATTTTAGTCATATCAG-TTACTCCTATTTACTAGCGCTCATTTATTATAAGTGTTACATGGTAAAATCAGTATAGTC-ATAAGCATTGATTAATATCATTATTGCTTCTACAGGCTTTAATTTTATTAATTATTCTGT-TATTCGTAACTAATTATAGTAATAACGAAGATGTCCGAAATTAAAATAATTAATAAGACA-AAGTGTCGTCGGCATTTATGTCTTTCATACCCATCTCTTTATCCTTACCTATTGTTTGTC-TTCACAGCAGCCGTAAATACAGAAAGTATGGGTAGAGAAATAGGAATGGATAACAAACAG-GCAAGTTTTGCGTGTTATATATCÁTTAAAACGGTAATAGATTGACATTTGATTCTAATAA-CGTTCAAAACGCACAATATATAGTAATTTTGCCATTATCTAACTGTAAACTAAGATTATT-ATTGGATTTTTGTCACACTATTATATCGCTTGAAATACAATTGTTTAACATAAGTACCTG-TAACCTAAAAACAGTGTGATAATATAGCGAACTTTATGTTAACAAATTGTATTCATGGAC-TAGGATCGTACAGGTTTACGCAAGAAAATGGTTTGTTATAGTCGATTAATCGATTTGATT-ATCCTAGCATGTCCAAATGCGTTCTTTTACCAAACAATATCAGCTAATTAGCTAAACTAA-CTAGATTTGTTTTAACTAATTAAAGGAGGAATAACATATGGTTAACGCGTTGGAATTCGA-GATCTAAACAAAATTGATTAATTTCCTCCTTATTGTATACCAATTGCGCAACCTTAAGCTSacII
-GCTCACTAGTGTCGACCTGCAGGGTACCATGGAAGCTTACTCGAGGATCCGCGGAAAGAA-CGAGTGATCACAGCTGGACGTCCCATGGTACCTTCGAATGAGCTCCTAGGCGCCTTTCTT-GAAGAAGAAGAAGAAAGCCCGAAAGGAAGCTGAGTTGGCTGCTGCCACCGCTGAGCAATA-CTTCTTCTTCTTCTTTCGGGCTTTCCTTCGACTCAACCGACGACGGTGGCGACTCGTTAT-ACTAGCATAACCCCTTGGGGCCTCTAAACGGGTCTTGAGGGGTTTTTTGCTGAAAGGAGG-TGATCGTATTGGGGAACCCCGGAGATTTGCCCAGAACTCCCCAAAAAACGACTTTCCTCC-AACCGCTCTTCACGCTCTTCACGC 3' [SacII kohezní konec]
-TTGGCGAGAAGTGCGAGAAGTG 5' [pozice tf 5904 v pAMG21]
Během ligace kohezních konců této substituce sekvence DNA jsou vnější místa AatlI a SacII destruována.
V substituované DNA existují jedinečná místa AatlI a SacII.
Gen, kódující lidský RANK fúzovaný k N-konci Fc, byl ligován do pAMG21 jako fragment Ndel až BamHI pro vytvoření kmene (firmy Amgen) #4125. Uvedený konstrukt byl modifikován inzercí kodónu pro valin ve spojení RANK a Fc. Sousedící kodóny pro valin a aspartát vytvářejí jedinečné místo Sáli. Toto umožňuje fúzi peptidů na N-konci Fc3 mezi jedinečnými místy Ndel a Sáli. RANK sekvence je deletovana po inzerci nového fragmentu Ndel-Sail. Sekvence vektoru je uvedena na Obrázku 5A až 5M.
• · (firmy (f i rmy • · · · · · · • · · · · · « • · · · · · • · · · · ·
GM221 (Amgen #2596). Hostitelským kmenem #2596 Amgen) je kmen E. coli K-12 odvozený od kmene #393
Amgen), který je derivátem z E. coli W1485, získaným od E. coli Genetic Stock Center, Yale University, New Haven, Connecticut (CGSC kmen 6159). Kmen byl modifikován tak, že obsahuje oba teplotně senzitivní lambda represory cI857s7 v rané oblasti ebg a represor lacIQ v pozdní oblasti ebg (68 minut). Přítomnost těchto dvou represorových genů umožňuje použití tohoto hostitele v řadě systémů exprese, nicméně oba z těchto represorů jsou irelevantní vzhledem k expresi luxPR. Netransformovaný hostitel nemá rezistenci na antibiotika.
Ribozómové vazebné místo genu cI857s7 bylo modifikováno tak, aby obsahovalo zesílený RBS. Bylo inzerováno do peronu ebg mezi nukleotidovou pozici 1170 a 1411 tak, jak je číslováno v Genbank accession number M64441Gb_Ba s delecí intervenující sekvence ebg. Sekvence inzertu je znázorněna níže s tím, že malá písmena reprezentují sekvence ebg lemující inzert uvedený níže (SEQ ID NO: 98):
ttaitttcgtGCGGCCGCACCATTATCACCGCCAGAGGTAAACTAGTCAACACGCACGGTGTTAGATAT
TTATCCCTTGCGGTGATAGATTGAGCACATCGATTTGATTCTAGAAGGAGGGATAATATATGAG
CACAAAAAAGAAACCATTAACACAAGAGCAGCTTGAGGACGCACGTCGCCTTAAAGCAATTTA
TGAAAAAAAGAAAAATGAACTTGGCTTATCCCAGGAATCTGTCGCAGACAAGATGGGGATGGG
GCAGTCAGGCGTTGGTGCTTTATTTAATGGCATCAATGCATTAAATGCTTATAACGCCGCATTGC
TTACAAAAATTCTCAAAGTTAGCGTTGAAGAATTTAGCCCTTCAATCGCCAGAGAATCTACGAG
ATGTATGAAGCGGTTAGTATGCAGCCGTCACTTAGAAGTGAGTATGAGTACCCTGTTTTTTCTCA
TGTTCAGGCAGGGATGTTCTCACCTAAGCTTAGAACCTTTACCAAAGGTGATGCGGAGAGATGG
GTAAGCACAACCAAAAAAGCCAGTGATTCTGCATTCTGGCTTGAGGTTGAAGGTAATTCCATGA
CCGCACCAACAGGCTCCAAGCCAAGCTTTCCTGACGGAATGTTAATTCTCGTTGACCCTGAGCA
GGCTGTTGAGCCAGGTGATTTCTGCATAGCCAGACTTGGGGGTGATGAGTTTACCTTCAAGAAA
CTGATCAGGGATAGCGGTCAGGTGTTTTTACAACCACTAAACCCACAGTACCCAATGATCCCAT
GCAATGAGAGTTGTTCCGTTGTGGGGAAAGTTATCGCTAGTCAGTGGCCTGAAGAGACGTTTGG
CTGATAGACTAGTCGATCCACTAGTgtttctgccc • ·
Konstrukt byl vnesen do chromozómu s použitím rekombinantního fága nazvaného „MMebg-cI857s7enhancedRBS #4 do F'tet/393. Po rekombinaci a štěpení zůstává v buňce pouze chromozomální inzert popsaný výše. Byl pojmenován F'tet/GM101. F'tet/GM101 byl pak modifikován vnesením lacIQ konstruktu do operonu ebg mezi nukleotidovou pozici 2493 a 2937 tak, jak je číslováno v Genbank accession number M64441Gb Ba s delecí intervenující sekvence ebg. Sekvence inzertu je znázorněna níže s tím, že malá písmena reprezentují sekvence ebg lemující inzert uvedený níže (SEQ ID NO: 99):
ggcggaaaccGACGTCCATCGAATGGTGCAAAACCTTTCGCGGTATGGCATGATAGCGCCCGGAAGA
GAGTCAATTCAGGGTGGTGAATGTGAAACCAGTAACGTTATACGATGTCGCAGAGTATGCCGGT
GTCTCTTATCAGACCGTTTCCCGCGTGGTGAACCAGGCCAGCCACGTTTCTGCGAAAACGCGGG
AAAAAGTCGAAGCGGCGATGGCGGAGCTGAATTACATTCCCAACCGCGTGGCACÁACAACTGG
CGGGCAAACAGTCGCTCCTGATTGGCGTTGCCACCTCCAGTCTGGCCCTGCACGCGCCGTCGCA
AATTGTCGCGGGGATTAAATCTCGCGCCGATCAACTGGGTGCCAGCGTGGTGGTGTCGATGGTA
GAACGAAGCGGCGTCGAAGCCTGTAAAGCGGGGGTGCACAATCrrCTCGCGCAACGCCTCAGIG
GGCTGATCATTAACTATCCGCTGGATCACCAOGATGCCATTGCTGTGGAAGCTGCCTGCACTAA
TGTItX?GGCOTTATTTCTTGATGTCrCTGACCAGACACCCATCAACAGTATTATTTTCTCCCATGA
AGACCGTACGCGACTGGGCGTGGAGCATCTGGTCGCATrGGGTCACCAGCAAATCGCGCTGTTA
GCGGGCCCATTAAGTTCTGTCTCGGCGCGTCTGCGTCTGGCTGGCTGGCATAAATATCTCACTCG
CAATCAAATrCAGCCGATAGCGGAACCGGAAGGCGACTGGAGTGCGATGTGCGGTTrrCAACAA
ACCATOCAAATGCTGAATGAGGGCATCGTTCCCACTGCGATGCTGGTTGCCAACGATCAGATGG
CGCTGGGCGCAATGCGCGCCATTACCGAGTCCGGOCTGCGCGTTGGTGCGGATATCTCGGTAGT
GGGATACGACGATACCGAAGACAGCTCATGTTATATCCCGCCGTTAACCACCATCAAACAGGAT
TITCOGCrXXtIOGCGCAAACCACCGTGGACCGCrTOCTGCAACTCTCTCAGGGCCAGGCGGTGA
AGGGCAATCAGCTGTTGCCCGTCTCACTGGTGAAAAGAAAAACCACCCTGGCGCCCAATACGCA
AACCGCCTCTCCCCGCGCGTTGGCCGATTCATTAATGCAGCTGGCACGACAGGTTTCCCGACTGG
AAAGCGGACAGTAAGGTACCATAGGATCCaggcacagga
Konstrukt byl vnesen do chromozómu s použitím rekombinantního fága nazvaného „AGebg-LacIQ#5 do F'tet/GM101. Po rekombinaci a štěpení zůstává v buňce pouze chromozomální inzert popsaný výše. Byl pojmenován F'tet/GM101. Konstrukt byl pojmenován F'tet/GM221. Epizóm F'tet byl z kmene odstraněn použitím akridinové oranže v koncentraci 25 pg/ml v LB. Získaný kmen byl identifikován jako citlivý na tetracyklin a byl uložen jako GM221.
• ·
Exprese v E. coli. Kultury každého z pAMG21-Fc-fúzních konstruktů v E. coli GM221 byly pěstovány při 37° C v médiu Luria Broth. Indukce exprese genového produktu z promotoru luxPR bylo dosaženo po přidání syntetického autoinduktoru N-(3-oxohexanoyl)-DL-homoserin laktonu ke kultivačnímu médiu na konečnou koncentraci 20 ng/ml. Kultury byly inkubovány při 37° C po další 3 hodiny. Po 3 hodinách byly bakteriální kultury mikroskopicky vyšetřeny na přítomnost inkluzních tělísek a byly shromážděny centrifugací. Refrakční inkluzní tělíska byla pozorována v indukovaných kulturách, což naznačuje, že Fc-fúze byly nejpravděpodobněji produkovány v nerozpustné frakci v E. coli. Buněčné pelety byly přímo lyžovány resuspendováním ve vzorkovém pufru podle Laemmliho, obsahujícím 10% βmerkaptoethanol, a byly analyzovány s SDS-PAGE. V každém případě byl na gelu SDS- PAGE pozorován Coomassie-barvený pruh o odpovídající molekulové hmotnosti.
PŘÍKLAD 3
TALL-1 peptibody inhibuje proliferaci B buněk zprostředkovanou TALL-1
Myší B lymfocyty byly izolovány ze slezin myší C57BL/6 negativní selekcí (MACS CD43 (Ly-48) Microbeads, Miltenyi Biotech, Auburn, CA). Purifikované (105) B buňky byly kultivovány v MEM, 10% tepelně inaktivovaný FCS, 5xl0”5 M 2-merkaptoethanol, 100 U/ml penicilín, 100 pg/ml streptomycin) triplicitně v 96jamkových tkáňových kultivačních plotnách s plochým dnem s 10 ng/ml proteinu TALL-1 a 2 mg/ml kozích F(ab')2 z anti-myšího IgM (Jackson ImmunoResearch Laboratory, West Grove, Pennsylvania) se stanoveným množstím TALL-1 peptibody po dobu 4 dnů při • ·
37° C, 5%CC>2. Proliferace byla měřena příjmem radioaktivního 3[H]thymidinu po 18hodinové inkubační době.
PŘÍKLAD 4
TALL-1 peptibody blokuje vazbu TALL-1 k jeho receptorům.
Reacti-Gel 6x (Pierce) byl předem potažen s lidským AGP3 (rovněž známým jako TALL-1, Khare et al., Proč. Nati. Acad. Sci. 97: 3370-3375, 2000) a blokován s BSA. 100 pM a 40 pM vzorků AGP3 peptibody bylo inkubováno se stanovenými různými koncentracemi lidského AGP3 při teplotě místnosti po dobu 8 hodin před nanesením na kuličky potažené lidským AGP3. Množství peptibody navázaného na kuličky bylo kvantifikováno fluorescenčně (Cy5) značenou kozí antilidskou-Fc protilátkou (goat anti-human-Fc antibody, Jackon Immuno Research). Vazebný signál je úměrný koncentraci volného peptibody při vazebné rovnováze. Disociační rovnovážná konstanta (KD ) byla získána z nelineární regrese kompetitivních křivek s použitím „dual-curve oneside homogeneous binding model (KinEx™ software). KD je přibližně 4 pM pro peptibody AGP3 (SEQ ID NO 123) , vázajícím se s lidským AGP3 (Obrázek 9).
Ke stanovení, zda tento AGP3 peptibody může neutralizovat vazbu myšího AGP3, stejně jako lidského AGP3, byla použita neutralizační zkouška BIAcore. Všechny pokusy byly prováděny na BIAcore 3000 při teplotě místnosti.
Lidský protein TACI-Fc (Xia et al., J. Exp. Med. 192, 137-144, 2000) byl imobilizován k čipu Bl s použitím 10 mM acetátu pH 4,0 na úroveň 2900 RU. Jako kontrola pozadí byl použit slepý vzorek proudu buněk. S použitím pracovního pufru PBS (bez vápníku nebo hořčíku) obsahujícího 0,005% • ·
P20 byl 1 nM rekombinantního lidského AGP3 (v pracovním pufru plus, 0,1 mg/ml BSA) inkubován bez a s určeným množstvím peptibody AGP3 (osa x) před jeho nanesením na povrch receptorů. Regenerace byla prováděna s použitím 8 mM glycinu pH 1,5 po dobu 1 minuty, 25 mM 3-[cyklohexylamino]-1-propansulfonová kyselina (CAPS) pH 10,5, 1 M NaCl po dobu 1 minuty. Ke stanovení vazby myšího AGP3 byl lidský TACÍ značený his (human his-tagged TACÍ) imobilizován na 1000 RU ve výše uvedeném pufru. 5 nM rekombinantního myšího AGP3 (v pracovním pufru plus, 0,1 mg/ml BSA) bylo inkubováno bez a s různými množstvími peptibody AGP3, jak je uvedeno na Obrázku 11 (osa x) před nanesením na povrch receptorů. Regenerace byla provedena s 10 mM HC1 pH 2, dvakrát po dobu 30 sekund. Byla stanovena relativní vazba jak lidského, tak myšího AGP3 v přítomnosti oproti (vs) nepřítomnosti peptibody AGP3 (SEQ ID NO: 123) (osa y). Relativní vazebná odpověď byla stanovena jako (RU-RU slepého vzorku/RUo -RU slepého vzorku). Peptibody AGP3 (SEQ ID NO: 123) inhiboval vazbu jak lidského, tak myšího AGP3 k jeho receptorů TACÍ (Obrázky 10A a 10B).
Ke zjištění, zda tento peptibody AGP3 blokuje vazbu ke všem třem receptorům (TACÍ, BCMA a BAFFR) byly proteiny TACÍ, BCMA a BAFFR imobilizovány k čipu CM5. S použitím 10 mM acetátu, pH 4 byl lidský TACI-Fc imobilizován na 6300 RU, lidský BMCA-Fc na 5000 RU a BAFFR-Fc na 6000 RU. 1 nM rekombinantního AGP3 (v pracovním pufru obsahujícím 0,1 mg/ml BSA a 0,1 mg/ml Heparinu) nebo 1 nM rekombinantního proteinu APRÍL (Yu et al., Nat. Immunol., 1: 252-256, 2000) byl inkubován s určeným množstvím peptibody AGP3 před nanesením na každý z receptorových povrchů. Regenerace v pokuse s AGP3 byla provedena s 8 mM glycinu, pH 1,5 po dobu 1 minuty a následně s 25 mM CAPS, pH 10,5, 1M NaCl po « · • · dobu 1 minuty. Regenerace v pokuse s APRÍL byla provedena s 8 mM glycinu, pH 2 po dobu 1 minuty a následně s 25 mM CAPS, pH 10,5, 1 M NaCl po dobu 1 minuty. Byla měřena relativní vazba AGP3 a APRILu. Peptibody AGP3 (SEQ ID NO: 123) blokoval vazbu AGP3 ke všem třem receptorům (Obrázek 11A). Peptibody AGP3 neměl účinek na vazbu APRILu k receptorům (Obrázek 11B).
PŘÍKLAD 5
Peptibody AGP3 blokuje proliferaci B buněk zprostředkovanou AGP3
Myší B lymfocyty byly izolovány negativní selekcí ze slezin myší C57BL/6. (MACS CD43 (Ly-48) Microbeads, Miltenyi Biotech, Auburn, CA). Purifikované (105 ) B buňky byly kultivovány v minimálním základním médiu (minimal essential medium, MEM) 10% tepelně inaktivované fetální hovězím sérum (fetal calf sérum, FCS), 5xl0-5 M 2-merkaptoethanol, 100 U/ml penicilín, 100 gg/ml streptomycin) triplicitně v 96jamkových tkáňových kultivačních plotnách s plochým dnem s 10 ng/ml proteinu AGP3 (TALL-1) a 2 mg/ml kozích F(ab')2 z anti-myšího IgM (Jackson ImmunoResearch Laboratory, West Grove, Pennsylvania) se stanoveným množstvím rekombinantního AGP3 peptibody (SEQ ID NO: 123) po dobu 4 dnů při 37° C, 5%CO2. Proliferace byla měřena příjmem radioaktivního 3[H] thymidinu po 18hodinové inkubační době.
PŘÍKLAD 6
Peptibody AGP3 a produkce Ig u myši stimulované s AGP3
Myši (Balb/c samičky staré 9-14 týdnů o hmotnosti 19-21 g) byly získány od Charles River Laboratories, • «
Wilmington, MA. Myši (n = 10) byly intraperitoneálně ošetřeny s 1 mg/kg lidského AGP3 jednou denně po pět následujících dnů a následně s 5 mg/kg nebo 0,5 mg/kg peptibody AGP3 (SEQ ID NO: 123), nebo s fyziologickým roztokem, nebo s 5 mg/kg lidského Fc. Další myši byly ponechány bez ošetření. Myši byly usmrceny v šestém dnu a byly měřeny sérový IgM a IgA, které byly měřeny metodou ELISA. Stručně řečeno, plotny byly potaženy zachycujícími protilátkami specifickými pro IgM nebo IgA (Southern Biotechnology Associates, Birmingham, AL) , blokovány a byly přidány roztoky standarních (IgM od Calbiochem, San Diego, CA a IgA od Southern Biotechnology Associates), nebo testovaných vzorků. Zachycené Ig byly zjišťovány s použitím biotinylovaných protilátek specifických proti IgM nebo IgA (Southern Biotechnology Associates), peroxidázou konjugovanou s neutravidinem (neutravidin-conjugated peroxidase, Pierce, Rockford, IL) a tetramethylbenzidinovým (TMB) peroxidázovým substrátem (KPL, Gaithersburg, MD) určeným pro mikrodestičky. Hodnoty optické hustoty byly kvantifikovány na čtečce ELISA (Thermomax ELISA reader, Molecular Devices, Menlo Park, CA).
Zvýšení sérových hladin IgM a IgA stimulované lidským AGP3 bylo blokováno s 5 mg/kg anti-AGP3 peptibody (SEQ ID NO: 123) a nikoliv s 0,5 mg/kg (Obrázky 12A a 12B).
PŘÍKLAD 7
Peptibody AGP3 snižoval počet slezinných buněk u myši
Myši (shodné, jak je uvedeno výše, n = 7) byly ošetřeny po dobu sedmi následujících dnů s 5 mg/kg, nebo
1,5 mg/kg, nebo 0,5 mg/kg peptibody AGP3 (SEQ ID NO: 123), nebo s fyziologickým roztokem, nebo s 5 mg/kg lidského Fc.
Myši byly usmrceny v osmém dnu ke stanovení počtu slezinných B buněk. Sleziny byly odebrány do fyziologického roztoku a jemně rozrušeny manuální homogenizací za poskytnutí buněčné suspenze. Cekový počet buněk byl stanoven na H1E čítači (H1E counter, Technicon, Tarrytown, NY). Procento B buněk bylo odvozeno z imunofluorescenčního dvojího barvení a z průtokové cytometrie s použitím fluorescein isothiokyanát(FITC)-konjugované a fykoerytrin(PE)-konjugované protilátky (Ab) proti CD3 a B220, v uvedeném pořadí (PharMingen, San Diego, CA) a FACScan analyzátoru (FACScan analyser Becton and Dickinson, Mountain View, CA). B buňky byly identifikovány jako CD3B220+. Ve všech dávkách snižoval AGP3 peptibody (SEQ ID NO: 123) počet slezinných B buněk způsobem závislým na dávce (Obrázky 12A a 12B) (SEQ ID NO: 123) .
Tabulka 8
AGP3 peptibody snižuje u normálních myší počet B buněk
n = 7 | dávka (1/den x7) | slezinné B buňky (1 x 10e6) | SD | t test |
fyziologický roztok | 51,3 | 9,6 | ||
Fc | 5 mg/kg | 45,5 | 7,1 | |
Peptibody | 5 mg/kg | 20,1 | 3, 8 | l,37856E-05 |
1,5 mg/kg | 22, 6 | 6,9 | 5,10194E-05 | |
0,5 mg/kg | 25, 8 | 3, 6 | 0,000111409 |
PŘÍKLAD 8
Peptibody AGP3 snižoval intenzitu artritidy na myším modelu CIA • · ·
Osm 12 týdnů starých myší DBA/1 (získaných od Jackon Laboratories, Bar Harbor, ME) bylo imunizováno s hovězím kolagenem typu II (bCII)(poskytnutým z University of Utah), emulzifikovaném v kompletním Freundově adjuvans (Difco) intradermálně ke kořeni ocasu. Každá injekce byla 100 μΐ a obsahovala 100 μg bCII. Myši byly opakovaně imunizovány (boosted) 3 týdny po primární imunizaci s bCII emulzifikovaném v nekompletním Freundově adjuvans. Léčba byla započata ode dne opakované imunizace po dobu 4 týdnů. Myši byly vyšetřeny na vznik artritidy. Jak bylo dříve popsáno (Khare et al., J. Immunol. 155: 3653-9, 1995), všechny čtyři tlapky byly jednotlivě skórovány hodnotou 1 až 3. Proto intenzita artritidy se může pohybovat od 0 do 12 pro každé zvíře. Léčba s AGP3 (SEQ ID NO: 123) signifikantně snížila intenzitu skóre artritidy. (Obrázek 13) .
Byly odebrány vzorky séra jeden týden po poslední léčbě (den 35) pro analýzu hladiny anti-kolagenových protilátek. High binding ELISA plotny (Immulon, Nunc) byly potaženy s 50 μΐ roztoku 4 μς/ιηΐ hovězího Cli v uhličitanovém pufru a byly udržovány v chladu přes noc v ledničce. Plotny byly třikrát promyty s ledovou vodou. 75 μΐ blokujícího roztoku připraveného z PBS/.05% tween 20/1% BSA bylo použito k blokování nespecifické vazby po dobu jedné hodiny. Vzorky byly zředěny (do blokujícího pufru) v ředicích destičkách 1:25, 1:100, 1:400 a 1:1600 a 25 μΐ těchto vzorků bylo přidáno do každé jamky destičky ELISA na konečné ředění 100, 400, 1600 a 6400 s konečným objemem 100 μΐ/jamka. Po inkubaci při teplotě místnosti po dobu 3 hodin byly destičky opět třikrát promyty. 100 μΐ druhotné protilátky naředěné v blokujícím pufru (krysí anti-myší IgM, IgG2a, IgH2b, IgGl, IgG3-HRP) bylo přidáno do každé • · · jamky a destičky byly inkubovány po alespoň 2 hodiny. Destičky byly promyty čtyřikrát. 100 μΐ roztoku TMB (Sigma) bylo přidáno do každé jamky a reakce byla zastavena s použitím 50 μΐ 25% kyseliny sírové. Destičky byly odečítány s použitím ELISA čtečky při 450 nm. OD byla porovnána se standardním vzorkem (poolem) představujícím jednotky/ml. Léčba s peptibody AGP3 (SEQ ID NO: 123) snižovala hladiny sérových anti-kolagen II IgGl, IgG3,
IgG2a a IgG2b ve srovnání s PBS nebo Fc kontrolní léčebnými skupinami (Obrázek 14).
PŘÍKLAD 9
Léčba lupus myši NZB/NZW s peptibody AGP3
Pět měsíců staré myši NZBx NZBWF1 náchylné k lupus byly ošetřeny intraperitoneálně 3x/týden po dobu 8 týdnů s PBS, nebo s určenými dávkami peptibody AGP3 nebo lidských proteinů Fc. Před léčbou byla zvířata předen screenována na protein v moči s proužky Albustix reagents strips (Bayer AG). Myši, které měly více než 100 mg/dl proteinu v moči, nebyly do studie zahrnuty. Protein v moči byl hodnocen měsíčně po celou dobu pokusu. Léčba s AGP3 peptibody (SEQ ID NO: 123) vedla k oddálení vypuknutí proteinurie a zlepšila přežívání(Obrázky 15A a 15B) .
Léčba s AGP3 peptibody snižovala počet B buněk u myší. Myši Balb/c dostaly 7 denních intraperitoneálních injekcí stanoveného množství AGP3 peptibody (SEQ ID NO: 123), nebo lidského proteinu Fc. V osmém dnu byly odebrány sleziny a tyto byly podrobeny analýze FACS na B buňky B220+, jak je uvedeno v Tabulce 8.
• · · · · · · • · · · · · • · · · · · ·· • · · ··· ·· • · · · · · · ·· ·· ·· ·'
Vynález byl zde zcela popsán a je zřejmé, v oboru může provést mnohé změny a modifikace, došlo k odklonu od podstaty a rozsahu vynálezu, zde uveden.
že odborník aniž by tak jak je
Claims (13)
- « ·PATENTOVÉ NÁROKY1. Látková kompozice vázající TALL-1 zahrnující aminokyselinovou sekvenci Dz2Lz4, kde z2 je aminokyselinový zbytek a z4 je T nebo I, a kde látková kompozice nezahrnuje fragment TACÍ, BCMA, nebo BAFFR (SEQ ID NO: 195, 196 a 197) .
- 2. Látková kompozice podle nároku 1, kde z4 je T.
- 3. Látková kompozice vázající TALL-1 zahrnující aminokyselinovou sekvenci Dz2LI, kde z2 je aminokyselinový zbytek'
- 4. Látková kompozice podle nároku 1 zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce a1a2a3CDa5 6La8a9a10Ca12a13a14 (SEQ ID NO: 100), ve kterém:každý z a1, a2, a3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky; a6 je aminokyselinový zbytek; a8 je T nebo I;a9 je bazický nebo hydrofobní zbytek;a10 je aminokyselinový zbytek;a12 je neutrální hydrofobní zbytek; a každý z a13 a a14 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.
- 5. Látková kompozice podle nároku 4, kde a8 je T a a9 je bazický zbytek.• ·
- 6. Látková kompozice podle nároku 4, kde a9 je K a a12 je F
- 7. Látková kompozice podle nároku 1 zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce b1b2b3Cb5b6Db8Lb10b11b12b13b14Cb16b17b18 (SEQ ID NO: 104) , ve kterém:každý z b1 a b2 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;b3 je kyselý nebo amidový zbytek;b5 aminokyselinový zbytek;b6 je aromatický zbytek;b8 je aminokyselinový zbytek;b10 je T nebo I;b11 je bazický zbytek;každý z b12 a b13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; b14 je neutrální hydrofobní zbytek; a každý z b16, b17 a b18 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.
- 8. Látková kompozice podle nároku 7, kde:b3 je D, Q, nebo E;b6 je W nebo Y;
b10 je T; b11 je K nebo R; a b14 je V nebo L. - 9. Látková kompozice podle nároku 1 zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce100 • · c1c2c3Cc5Dc7Lc9c10c11c12c13c14Cc16c17c18 (SEQ ID NO: 105), ve kterém:každý z c1, c2 a c3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky; c5 je aminokyselinový zbytek; c7 je aminokyselinový zbytek; c9 je T nebo I;c10 je bazický zbytek;každý z c11 a c12 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky;c13 je neutrální hydrofobní zbytek;c14 je aminokyselinový zbytek;c16 je aminokyselinový zbytek;o17 je neutrální hydrofobní zbytek; a c18 je aminokyselinový zbytek nebo není přítomen.
- 10. Látková kompozice podle nároku 9, kde:
c9 je T; c10 je K nebo R; c13 je I, L nebo V; a c17 je A nebo L. - 11. Látková kompozice podle nároku 1 zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce d1d2d3Cd5d6d7WDd10Ld12d13d14Cd15d16d17 (SEQ ID NO: 106), ve kterém:každý z d1, d2 a d3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;každý z d5, d6 a d7 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky101 d10 je aminokyselinový zbytek;d12 je T nebo I;d13 je aminokyselinový zbytek;d14 je aminokyselinový zbytek; a každý z d16, d17 a d18 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.
- 12. Látková kompozice podle nároku 1 zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce ele2e3Ce5e6e7De9LellKe13Ce15el6e17el8 (SEQ ID NO: 107), ve kterém:každý z e1, e2 a e3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;každý z e5, e6, e7, e9 a e13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky;e11 je T nebo I; a každý z e15, e16 a e17 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.
- 13. Látková kompozice podle nároku 1 zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce f 1f 2f 3Kf 5Df 7Lf 9f 10Qf 12f 13f14 (SEQ ID NO: 109), ve kterém:f1, f2 a f3 jsou nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;f5 je W, Y nebo F;f7 je aminokyselinový zbytek;102 f9 je T nebo I;f10 je K, R nebo H;f12 je C, neutrální hydrofobní zbytek nebo bazický zbytek (výhodně W, C nebo R);f13 je C, neutrální hydrofobní zbytek nebo není přítomen; a f14 je jakýkoliv aminokyselinový zbytek nebo není přítomen; za předpokladu, že pouze jeden z f1, f2 a f3 může být C a pouze jeden z f12, f13 a f14 může být C.
14 . Látková kompozice podle nároku 13, kde f5 je W. 15. Látková kompozice podle nároku 13, kde f7 je L. 16. Látková kompozice podle nároku 13, kde f9 je T. 17 . Látková kompozice podle nároku 13, kde f10 je K. 18. Látková kompozice podle nároku 13, kde f12 je C a jeden z f1, f2 a f3 je C.19. Látková kompozice podle nároku 13, kde f13 je V 20. Látková kompozice podle nároku 13 zahrnuj ící aminokyselinovou sekvenci vzorce f1f2f3KWDf7Lf9KQf12f13f14 (SEQ ID NO: 125).21. Látková kompozice podle nároku 20 zahrnující aminokyselinovou sekvenci vybranou ze skupiny sestávající ze SEQ ID NO: 32, 33, 58, 60, 63, 66, 67, 69, 114, 115, 122, 123, 124, 147-150, 152-177, 179, 180 a 187.• ·10322. Látková kompozice podle nároku 20 zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorceLPGCKWDLLIKQWVCDPL (SEQ ID NO: 33).23. Látková kompozice zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce g g g Cg PFg Wg Cg g g (SEQ ID NO: 101) , ve kterém:každý z g1, g2 a g3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;g5 je neutrální hydrofobní zbytek;g8 je neutrální hydrofobní zbytek;g10 je kyselý zbytek;každý z g12 a g13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; a g14 je nepřítomen nebo je aminokyselinový zbytek.24. Látková kompozice podle nároku 23, kde:g2 je G;g5 je W;g8 je P;g10 je E; a g13 je bazický zbytek.25. Látková kompozice zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce h1h2h3CWh6h7WGh10Ch12h13h14 (SEQ ID NO: 102), ve kterém104 každý z h1, h2 a h3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky; h6 je hydrofobní zbytek; h7 je hydrofobní zbytek;h10 je kyselý nebo polární hydrofobní zbytek; a každý z h12, h13 a h14 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky.26. Látková kompozice podle nároku 25, kde: h1 je G;h6 je A;h7 je neutrální hydrofobní zbytek; a h10 je kyselý zbytek.27. Látková kompozice zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce i1!2!3^5!6!7!8!9!10^12!13!14 (SEQ ID NO: 103), ve kterém:11 je nepřítomen nebo je aminokyselinový zbytek;12 je neutrální hydrofobní zbytek;13 je aminokyselinový zbytek;každý z i5, i6, i7 a i8 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky;i9 3e kyselý zbytek;i10 je aminokyselinový zbytek;každý z i12 a i13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; a i14 je neutrální hydrofobní zbytek.28. Látková kompozice podle nároku 27, kde: i2 je W; a i14 je W.* · · · · • · · • · · » · · ·10529. Látková kompozice vázající TALL-1 zahrnující aminokyselinovou sekvenci vzorce PFPWE (SEQ ID NO:110).30. Látková kompozice podle nároku 1, která má vzorec (X1)a-V1-(X2)b a jeho multimery, ve kterém:V1 je vehikulum;X1 a X2 jsou nezávisle vybrány z -(L1)c-P1,- (L1) C-Px-(L2) d-P2, - (L1) c-P1- (L2) d-P2- (L3) e-P3 a- (L1) e-P1- (L2) d-P2- (L3) e-P3- (L4) f-P4;jeden nebo více z P1, P2, P3 a P4 každý nezávisle zahrnuje Dz2Lz4;L1, L2, L3 a L4 jsou každý nezávisle linkery; a a, b, c, d, e a f jsou každý nezávisle 0 nebo 1, za podmínky, že alespoň jeden z a a b je 1.31. Látková kompozice podle nároku 30 vzorceP1- (L1) C-P2- (L2) d-V1.32. Látková kompozice podle nároku 30 vzorceV1-(L1)c-P1-(L2)d-P2.33. Látková kompozice podle nároku 30, kde V1 je doména Fc.34. Látková kompozice podle nároku 30, kde V1 je doména IgG Fc.35. Látková kompozice podle nároku 30, kde V1 je doménaIgGl Fc.106 • » • · • · • · · • · · • · « • · · » · « , ·· ·«36. Látková kompozice podle nároku 30, kde V1 zahrnuje sekvenci SEQ ID NO: 2.37. Látková kompozice podle nároku 30, kde jeden nebo více z P1, P2, P3 a P4 každý nezávisle zahrnuje sekvenci vybranou z:a1a2a3CDa6La8a9a10Ca12a13a14 (SEQ ID NO: 100), b1b2b3Cb5b6Db8Lb10b11b12b13b14Cb16b17b18 (SEQ ID NO: 104), c1c2c3Cc5Dc7Lc9c10c11c12c13c14Cc16c17c18 (SEQ ID NO: 105), d1d2d3Cd5d6d7WDd10Ld13d14d15Cd16d17d18 (SEQ ID NO: 106), e1e2e3Ce5e6e7De9Le11Ke13Ce15e16e17e18 (SEQ ID NO: 107), f 1f 2f 3Kf 5Df 7Lf 9f 10Qf 12f 13f14 (SEQ ID NO: 109), g1g2g3Cg5PFg8Wg10Cg11g12g13 (SEQ ID NO: 101), h1h2h3CWh6h7WGh10Ch12h13h14 (SEQ ID NO: 102), a i1 i 2 i 3C i 3 i 8i 7 i8 i 9 i 19C i12 i13 i14 (SEQ ID NO: 103) ve které:každý z a1, a2, a3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;a5 je aminokyselinový zbytek;a9 je bazický nebo hydrofobní zbytek;a8 je threonyl nebo isoleucyl;a10 je aminokyselinový zbytek;a12 je neutrální hydrofobní zbytek; a každý z a13 a a14 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;každý z b1 a b2 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;b3 je kyselý nebo amidový zbytek;b5 aminokyselinový zbytek;b6 je aromatický zbytek;• ·107 b8 je aminokyselinový zbytek;b10 je T nebo I;b11 je bazický zbytek;každý z b12 a b13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; b14 je neutrální hydrofobní zbytek; a každý z b16, b17 a b18 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;každý z c1, c2 a c3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky; c5 je aminokyselinový zbytek; c7 je aminokyselinový zbytek; c9 je T nebo I;c10 je bazický zbytek;každý z c11 a c12 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky;c13 je neutrální hydrofobní zbytek;c14 je aminokyselinový zbytek;c16 je aminokyselinový zbytek;o17 je neutrální hydrofobní zbytek; a c18 je aminokyselinový zbytek nebo není přítomen;každý z d1, d2 a d3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;každý z d5, d6 a d7 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; d10 je aminokyselinový zbytek; d13 je T nebo I;d14 je aminokyselinový zbytek; a každý z d15, d16 a d17 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;.každý z e1, e2 a e3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;každý z e5, e6, e7, e9 a e13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky;e11 je T nebo I; a108 • 99 •9 · • · · každý z e15, e16 a e17 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;f1, f2 a f3 jsou nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;f5 je W, Y nebo F;f7 je aminokyselinový zbytek;f9 je T nebo I;f10 je K, R nebo H;f12 je C, neutrální hydrofobní zbytek nebo bazický zbytek; f13 je C, neutrální hydrofobní zbytek nebo není přítomen; a f14 je jakýkoliv aminokyselinový zbytek nebo není přítomen; za předpokladu, že pouze jeden z f1, f2 a f3 může být C a pouze jeden z f12, f13 a f14 může být C;každý z g1, g2 a g3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;g5 je neutrální hydrofobní zbytek;g8 je neutrální hydrofobní zbytek;g10 je kyselý zbytek;každý z g12 a g13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; a g14 je nepřítomen nebo je aminokyselinový zbytek; každý z h1, h2 a h3 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;h6 je hydrofobní zbytek;h7 je hydrofobní zbytek;h10 je kyselý nebo polární hydrofobní zbytek; a každý z h12, h13 a h14 jsou nezávisle nepřítomny nebo jsou aminokyselinové zbytky;11 je nepřítomen nebo je aminokyselinový zbytek;12 je neutrální hydrofobní zbytek;13 je aminokyselinový zbytek;každý z i5, i6, i7 a i8 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky;i9 je kyselý zbytek;109 i10 je aminokyselinový zbytek;každý z i12 a i13 jsou nezávisle aminokyselinové zbytky; a i14 je neutrální hydrofobní zbytek.38. Látková kompozice podle nároku 37, kde:a9 j e ba zický zbytek, b3 je D, Q ne bo E; b6 je W nebo Y; b11 je K nebo R; b14 je V nebo L; c10 je K nebo R; o13 je a I, L nebo V; o17 je A nebo L; f5 je W; f7 je L; fXO j e K; a f13 j e V. 39. Látková kompozice podle nároku 37, kde jeden nebo více z P1, P2, P3 a P4 každý nezávisle zahrnuje f 1f2f3KWDf7Lf 9KQf 12f 13f14 (SEQ ID NO: 125).40. Látková kompozice podle nároku 39 vzorceP1- (L1) c-P2- (L2) d-Vx.41. Látková kompozice podle nároku 39 vzorceV^aÚc-P^LÚd-P2.42. Látková kompozice podle nároku 39 , která má aminokyselinovou sekvenci vybranou ze SEQ ID NO: 122, 123 a 124 .• · * ·11043. Látková kompozice podle nároku 40, než 5 aminokyselin.ve které L2 je větší44. Látková kompozice podle nároku 43, kde L2 je vybráno z GSGSATGGSGSTASSGSGSATx1x2 (SEQ ID NO: 193) aGSGSATGGSGSTASSGSGSATx1x2GSGSATGGSGSTASSGSGSATx3x4 (SEQ ID NO: 194), kde x1 a x3 jsou každý nezávisle bazické nebo hydrofobní zbytky a x2 a x4 jsou každý nezávisle hydrofobní zbytky.45. Látková kompozice podle nároku 41, kde L2 je vybráno z GSGSATGGSGSTASSGSGSATH (SEQ ID NO: 59), GSGSATGGSGSTASSGSGSATGM (SEQ ID NO: 190), lGSGSATGGSGSTASSGSGSATGS (SEQ ID NO :191), aGSGSATGGSGSTASSGSGSATHMGSGSATGGSGSTASSGSGSATHM (SEQ ID NO: 192).46. Látková kompozice podle nároku 28 zahrnující sekvence vybrané z Tabulky 1 (SEQ ID NO: 29-39, 60-70 a 126-188).47. Látková kompozice podle nároku 30 zahrnující sekvence vybrané z Tabulky 4 (SEQ ID NO: 44-55).48. Látková kompozice podle nároku 46, kde V1 je doména Fc.49. Látková kompozice podle nároku 46, kde V1 je doména IgG Fc.• ·11150. Látková kompozice podle nároku 46, kde V1 je doména IgGl Fc.51. DNA kódující látkovou kompozici podle nároku 34.52. Expresívní vektor zahrnující DNA podle nároku 51.53. Hostitelská buňka zahrnující expresivní vektor podle nároku 52.54. Buňka podle nároku 53, kde buňkou je buňka E.coli.55. Způsob léčby autoimunitních onemocnění zprostředkovaných B buňkami, který zahrnuje podávání látkové kompozice podle nároku 1.56. Způsob léčby autoimunitních onemocnění zprostředkovaných B buňkami, který zahrnuje podávání látkové kompozice podle nároku 13.57. Způsob léčby lupus, který zahrnuje podávání látkové kompozice podle nároku 1.58. Způsob léčby lupus, který zahrnuje podávání látkové kompozice podle nároku 13.59. Způsob léčby nádorů zprostředkovaných B buňkami, který zahrnuje podávání látkové kompozice podle nároku 1.60. Způsob léčby nádorů zprostředkovaných B buňkami, který zahrnuje podávání látkové kompozice podle nároku 13.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US29019601P | 2001-05-11 | 2001-05-11 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ20033291A3 true CZ20033291A3 (cs) | 2004-11-10 |
CZ304592B6 CZ304592B6 (cs) | 2014-07-23 |
Family
ID=23114926
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ2003-3291A CZ304592B6 (cs) | 2001-05-11 | 2002-05-13 | Molekula s aminokyselinovou sekvencí vázající TALL-1, DNA, expresní vektor a hostitelská buňka, léčení autoimunitních onemocnění zprostředkovaných B buňkami |
Country Status (30)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US7259137B2 (cs) |
EP (4) | EP1921088B1 (cs) |
JP (1) | JP4516719B2 (cs) |
KR (1) | KR100902687B1 (cs) |
CN (3) | CN100448891C (cs) |
AT (2) | ATE375361T1 (cs) |
AU (1) | AU2002342669C1 (cs) |
BG (1) | BG66270B1 (cs) |
BR (1) | BR0209546A (cs) |
CA (1) | CA2446189C (cs) |
CY (1) | CY1107131T1 (cs) |
CZ (1) | CZ304592B6 (cs) |
DE (1) | DE60222882T2 (cs) |
DK (1) | DK1385882T3 (cs) |
EA (1) | EA010435B1 (cs) |
EE (1) | EE05294B1 (cs) |
ES (3) | ES2295404T3 (cs) |
HK (3) | HK1059269A1 (cs) |
HU (1) | HU229910B1 (cs) |
IL (2) | IL158719A0 (cs) |
MX (1) | MXPA03010210A (cs) |
NO (1) | NO331785B1 (cs) |
NZ (2) | NZ542878A (cs) |
PL (2) | PL210546B1 (cs) |
PT (1) | PT1385882E (cs) |
RS (1) | RS51708B (cs) |
SI (1) | SI1385882T1 (cs) |
SK (1) | SK288175B6 (cs) |
WO (1) | WO2002092620A2 (cs) |
ZA (1) | ZA200308513B (cs) |
Families Citing this family (142)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6812327B1 (en) * | 1996-10-25 | 2004-11-02 | Human Genome Sciences, Inc. | Neutrokine-alpha polypeptides |
US8212004B2 (en) * | 1999-03-02 | 2012-07-03 | Human Genome Sciences, Inc. | Neutrokine-alpha fusion proteins |
EP2281843B1 (en) * | 2000-06-16 | 2016-10-12 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to BLyS |
US7879328B2 (en) * | 2000-06-16 | 2011-02-01 | Human Genome Sciences, Inc. | Antibodies that immunospecifically bind to B lymphocyte stimulator |
AU2001288301A1 (en) * | 2000-08-18 | 2002-03-04 | Human Genome Sciences, Inc. | Binding polypeptides and methods based thereon |
EP1339746A2 (en) | 2000-08-18 | 2003-09-03 | Dyax Corp. | Binding polypeptides for b lymphocyte stimulator protein (blys) |
UA83458C2 (uk) | 2000-09-18 | 2008-07-25 | Байоджен Айдек Ма Інк. | Виділений поліпептид baff-r (рецептор фактора активації в-клітин сімейства tnf) |
MXPA03010210A (es) * | 2001-05-11 | 2004-03-10 | Amgen Inc | Peptidos y moleculas relacionadas que se enlazan a tall-1. |
US7112410B1 (en) | 2001-08-29 | 2006-09-26 | Human Genome Sciences, Inc. | Human tumor necrosis factor TR21 and methods based thereon |
EP1578782A4 (en) | 2002-12-30 | 2007-09-12 | Amgen Inc | COSTIMULATING FACTORIAL THERAPY |
JP5524441B2 (ja) | 2003-03-28 | 2014-06-18 | バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド | 短縮されたbaffレセプター |
EP1629001A2 (en) | 2003-06-05 | 2006-03-01 | Genentech, Inc. | Blys antagonists and uses thereof |
US7605120B2 (en) * | 2003-10-22 | 2009-10-20 | Amgen Inc. | Antagonists of the brandykinin B1 receptor |
WO2005075511A1 (en) * | 2004-01-29 | 2005-08-18 | Genentech, Inc. | Variants of the extracellular domain of bcma and uses thereof |
EP2386856B1 (en) * | 2004-06-21 | 2013-07-24 | Galapagos N.V. | Methods and means for treatment of osteoarthritis |
CA2580796C (en) * | 2004-09-24 | 2013-03-26 | Amgen Inc. | Modified fc molecules having peptides inserted in internal loop regions |
CN100378122C (zh) * | 2004-12-03 | 2008-04-02 | 中国人民解放军第三军医大学 | B淋巴细胞刺激因子抑制肽及其制备方法 |
SG162788A1 (en) | 2005-06-14 | 2010-07-29 | Amgen Inc | Self-buffering protein formulations |
US8008453B2 (en) | 2005-08-12 | 2011-08-30 | Amgen Inc. | Modified Fc molecules |
CA2626082C (en) * | 2005-10-13 | 2017-04-11 | Human Genome Sciences, Inc. | Methods and compositions for use in treatment of patients with autoantibody positive disease |
US9168286B2 (en) | 2005-10-13 | 2015-10-27 | Human Genome Sciences, Inc. | Methods and compositions for use in treatment of patients with autoantibody positive disease |
MY149159A (en) | 2005-11-15 | 2013-07-31 | Hoffmann La Roche | Method for treating joint damage |
US9726673B2 (en) | 2005-11-23 | 2017-08-08 | Genentech, Inc. | Methods and compositions related to B cell assays |
US8211649B2 (en) | 2006-03-31 | 2012-07-03 | Human Genome Sciences, Inc. | Methods of diagnosing and prognosing hodgkin's lymphoma |
US9283260B2 (en) | 2006-04-21 | 2016-03-15 | Amgen Inc. | Lyophilized therapeutic peptibody formulations |
US7981425B2 (en) | 2006-06-19 | 2011-07-19 | Amgen Inc. | Thrombopoietic compounds |
US20090252703A1 (en) * | 2006-10-19 | 2009-10-08 | Gegg Jr Colin V | Use of alcohol co-solvents to improve pegylation reaction yields |
CA2687141C (en) | 2007-05-22 | 2014-04-01 | Amgen Inc. | Compositions and methods for producing bioactive fusion proteins |
CA2698103A1 (en) * | 2007-08-31 | 2009-03-05 | Amgen Inc. | Solid-state protein formulation |
ES2750254T3 (es) | 2007-09-27 | 2020-03-25 | Amgen Inc | Formulaciones farmacéuticas |
EP2219602A1 (en) | 2007-11-15 | 2010-08-25 | Amgen, Inc | Aqueous formulation of erythropoiesis stimulating protein stablised by antioxidants for parenteral administration |
WO2010075249A2 (en) | 2008-12-22 | 2010-07-01 | Genentech, Inc. | A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists |
US20110014190A1 (en) * | 2009-02-12 | 2011-01-20 | Human Genome Sciences, Inc. | Use of b lymphocyte stimulator protein antagonists to promote transplantation tolerance |
EP3385279B1 (en) | 2009-03-20 | 2020-02-26 | Amgen Inc. | Carrier immunoglobulins and uses thereof |
MX2011010159A (es) | 2009-04-02 | 2011-10-17 | Roche Glycart Ag | Anticuerpos multiespecificos que comprenden anticuerpos de longitud completa y fragmentos fab de cadena sencilla. |
EP3211094A3 (en) | 2009-09-03 | 2017-11-01 | F. Hoffmann-La Roche AG | Methods for treating, diagnosing, and monitoring rheumatoid arthritis |
WO2011034605A2 (en) | 2009-09-16 | 2011-03-24 | Genentech, Inc. | Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof |
WO2011050333A1 (en) | 2009-10-23 | 2011-04-28 | Amgen Inc. | Vial adapter and system |
AR080793A1 (es) | 2010-03-26 | 2012-05-09 | Roche Glycart Ag | Anticuerpos biespecificos |
WO2011133886A2 (en) | 2010-04-23 | 2011-10-27 | Genentech, Inc. | Production of heteromultimeric proteins |
FI2575935T4 (fi) | 2010-06-07 | 2023-11-23 | Amgen Inc | Lääkeaineen vapautuslaite |
CA2808185A1 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Genentech, Inc. | Antibodies to il-1.beta. and il-18, for treatment of disease |
CN103068846B9 (zh) | 2010-08-24 | 2016-09-28 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 包含二硫键稳定性Fv片段的双特异性抗体 |
JP6159660B2 (ja) | 2010-09-22 | 2017-07-05 | アムジエン・インコーポレーテツド | 担体としての免疫グロブリンおよびその使用 |
WO2012085111A1 (en) | 2010-12-23 | 2012-06-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Polypeptide-polynucleotide-complex and its use in targeted effector moiety delivery |
US10689447B2 (en) | 2011-02-04 | 2020-06-23 | Genentech, Inc. | Fc variants and methods for their production |
BR112013019499B1 (pt) | 2011-02-04 | 2023-01-10 | Genentech, Inc. | Proteína heteromultimérica variante ou anticorpo igg modificado, método para produzir uma proteína heteromultimérica variante ou anticorpo igg modificado, composição, método para preparar uma proteína heteromultimérica e proteína heteromultimérica variante |
BR112013021725A2 (pt) | 2011-02-28 | 2016-11-01 | Genentech Inc | marcadores biológicos e métodos para prever resposta aos antagonistas de células b |
EP2691065B1 (en) | 2011-03-31 | 2017-03-01 | Amgen Inc. | Vial adapter and system |
CA2833748C (en) | 2011-04-20 | 2019-07-16 | Amgen Inc. | Autoinjector apparatus |
DE102012016127A1 (de) | 2011-08-31 | 2013-02-28 | Daniel Elias | Bioaktive, regenerative Mischung zur Herstellung eines Ergänzungsnahrungsmittels |
KR102106002B1 (ko) | 2011-10-11 | 2020-05-07 | 제넨테크, 인크. | 이중특이적 항체의 개선된 어셈블리 |
BR112014008993B1 (pt) | 2011-10-14 | 2021-06-08 | Amgen Inc | injetor e método de montagem |
AU2013215332A1 (en) | 2012-01-31 | 2014-09-04 | Genentech, Inc. | Anti-Ig-E M1' antibodies and methods using same |
RU2644341C2 (ru) | 2012-02-10 | 2018-02-08 | Дженентек, Инк. | Одноцепочечные антитела и другие гетеромультимеры |
WO2013148117A1 (en) | 2012-03-27 | 2013-10-03 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods of use for treating metabolic disorders |
EP2867253B1 (en) | 2012-06-27 | 2016-09-14 | F. Hoffmann-La Roche AG | Method for selection and production of tailor-made highly selective and multi-specific targeting entities containing at least two different binding entities and uses thereof |
CA2871882A1 (en) | 2012-06-27 | 2014-01-03 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for making antibody fc-region conjugates comprising at least one binding entity that specifically binds to a target and uses thereof |
CA2884887C (en) | 2012-11-21 | 2023-09-12 | Amgen Inc. | Drug delivery device including insertion member and reservoir |
RU2704285C2 (ru) | 2013-01-30 | 2019-10-25 | Нгм Байофармасьютикалз, Инк. | Композиции и способы применения для лечения метаболических расстройств |
US9161966B2 (en) | 2013-01-30 | 2015-10-20 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | GDF15 mutein polypeptides |
JOP20140087B1 (ar) | 2013-03-13 | 2021-08-17 | Amgen Inc | بروتينات مخصصة ل baff و b7rp1 وإستخداماتها |
US9458246B2 (en) | 2013-03-13 | 2016-10-04 | Amgen Inc. | Proteins specific for BAFF and B7RP1 |
JP6336564B2 (ja) | 2013-03-15 | 2018-06-06 | アムゲン・インコーポレーテッド | 薬物カセット、自動注入器、および自動注入器システム |
TWI580452B (zh) | 2013-03-15 | 2017-05-01 | 安美基公司 | 用於注射器之匣盒、注射器及使用包括自動注射器及匣盒之設備之方法 |
SG11201507878SA (en) | 2013-03-22 | 2015-10-29 | Amgen Inc | Injector and method of assembly |
WO2015056356A1 (en) | 2013-10-17 | 2015-04-23 | The Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd. | Crosslinkable polymer |
WO2015061386A1 (en) | 2013-10-24 | 2015-04-30 | Amgen Inc. | Injector and method of assembly |
EP3060281B1 (en) | 2013-10-24 | 2019-01-30 | Amgen Inc. | Drug delivery system with temperature-sensitive control |
US10994112B2 (en) | 2014-02-05 | 2021-05-04 | Amgen Inc. | Drug delivery system with electromagnetic field generator |
ES2955736T3 (es) | 2014-05-06 | 2023-12-05 | Hoffmann La Roche | Producción de proteínas heteromultiméricas usando células de mamífero |
EP3785749A1 (en) | 2014-05-07 | 2021-03-03 | Amgen Inc. | Autoinjector with shock reducing elements |
WO2015187797A1 (en) | 2014-06-03 | 2015-12-10 | Amgen Inc. | Controllable drug delivery system and method of use |
CR20170027A (es) | 2014-07-30 | 2017-05-09 | Ngm Biopharmaceuticals Inc | Composiciones y métodos de uso para tratar trastornos metabólicos |
US10695506B2 (en) | 2014-10-14 | 2020-06-30 | Amgen Inc. | Drug injection device with visual and audio indicators |
TWI703161B (zh) | 2014-10-31 | 2020-09-01 | 美商Ngm生物製藥公司 | 用於治療代謝病症之組合物及方法 |
CN107001482B (zh) | 2014-12-03 | 2021-06-15 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 多特异性抗体 |
ES2898469T3 (es) | 2014-12-19 | 2022-03-07 | Amgen Inc | Dispositivo de administración de medicamentos con sensor de proximidad |
EP3689394A1 (en) | 2014-12-19 | 2020-08-05 | Amgen Inc. | Drug delivery device with live button or user interface field |
WO2016133947A1 (en) | 2015-02-17 | 2016-08-25 | Amgen Inc. | Drug delivery device with vacuum assisted securement and/or feedback |
WO2016138434A1 (en) | 2015-02-27 | 2016-09-01 | Amgen Inc. | Drug delivery device having a needle guard mechanism with a tunable threshold of resistance to needle guard movement |
FI3334747T3 (fi) | 2015-08-13 | 2023-11-30 | Amgen Inc | Antigeenia sitovien proteiinien varattu syväsuodatus |
WO2017039786A1 (en) | 2015-09-02 | 2017-03-09 | Amgen Inc. | Syringe assembly adapter for a syringe |
JP7082568B2 (ja) | 2015-12-09 | 2022-06-08 | アムジエン・インコーポレーテツド | 信号伝達キャップ付き自動注射器 |
US11154661B2 (en) | 2016-01-06 | 2021-10-26 | Amgen Inc. | Auto-injector with signaling electronics |
ES2814287T3 (es) | 2016-03-15 | 2021-03-26 | Amgen Inc | Reducir la probabilidad de rotura de cristal en dispositivos de administración de fármaco |
KR102370762B1 (ko) | 2016-03-31 | 2022-03-04 | 엔지엠 바이오파마슈티컬스, 아이엔씨. | 결합 단백질 및 이의 사용 방법 |
US11541168B2 (en) | 2016-04-29 | 2023-01-03 | Amgen Inc. | Drug delivery device with messaging label |
US11389588B2 (en) | 2016-05-02 | 2022-07-19 | Amgen Inc. | Syringe adapter and guide for filling an on-body injector |
EP3455142B1 (en) | 2016-05-13 | 2023-08-09 | Amgen Inc. | Vial sleeve assembly |
EP3458988B1 (en) | 2016-05-16 | 2023-10-18 | Amgen Inc. | Data encryption in medical devices with limited computational capability |
US11541176B2 (en) | 2016-06-03 | 2023-01-03 | Amgen Inc. | Impact testing apparatuses and methods for drug delivery devices |
EP3478342A1 (en) | 2016-07-01 | 2019-05-08 | Amgen Inc. | Drug delivery device having minimized risk of component fracture upon impact events |
US20190328965A1 (en) | 2016-08-17 | 2019-10-31 | Amgen Inc. | Drug delivery device with placement detection |
WO2018081234A1 (en) | 2016-10-25 | 2018-05-03 | Amgen Inc. | On-body injector |
AU2018210301A1 (en) | 2017-01-17 | 2019-08-01 | Amgen Inc. | Injection devices and related methods of use and assembly |
JP7280189B2 (ja) | 2017-02-17 | 2023-05-23 | アムジエン・インコーポレーテツド | 薬物送達装置用の挿入機構 |
MX2019009625A (es) | 2017-02-17 | 2019-10-09 | Amgen Inc | Dispositivo de administracion de farmacos con trayectoria de flujo de fluido esteril y metodo relacionado de ensamblaje. |
MX2019010544A (es) | 2017-03-06 | 2019-10-21 | Amgen Inc | Dispositivo de administracion de farmacos con caracteristica de prevencion de la activacion. |
SG11201908058UA (en) | 2017-03-07 | 2019-09-27 | Amgen Inc | Needle insertion by overpressure |
MX2019010671A (es) | 2017-03-09 | 2019-10-21 | Amgen Inc | Mecanismo de insercion para dispositivo de administracion de farmacos. |
EP3600491B1 (en) | 2017-03-28 | 2023-08-09 | Amgen Inc. | Plunger rod and syringe assembly system and method |
KR102198998B1 (ko) | 2017-06-01 | 2021-01-07 | 서울대학교 산학협력단 | 신규한 항-cd40 항체 및 이의 용도 |
MX2019014615A (es) | 2017-06-08 | 2020-02-07 | Amgen Inc | Dispositivo de administracion de farmacos accionado por par de torsion. |
AU2018280054B2 (en) | 2017-06-08 | 2023-07-13 | Amgen Inc. | Syringe assembly for a drug delivery device and method of assembly |
JP7195276B2 (ja) | 2017-06-22 | 2022-12-23 | アムジエン・インコーポレーテツド | デバイス起動による衝突/衝撃の低減 |
WO2018237225A1 (en) | 2017-06-23 | 2018-12-27 | Amgen Inc. | ELECTRONIC DRUG DELIVERY DEVICE COMPRISING A CAP ACTIVATED BY A SWITCH ASSEMBLY |
ES2972207T3 (es) | 2017-07-14 | 2024-06-11 | Amgen Inc | Sistema de inserción-retracción de agujas con sistema de resorte de torsión doble |
IL271173B2 (en) | 2017-07-21 | 2024-04-01 | Amgen Inc | Gas permeable sealing element for drug container and methods of assembly |
MA49677A (fr) | 2017-07-25 | 2021-04-21 | Amgen Inc | Dispositif d'administration de médicament avec module d'engrenage et procédé d'assemblage associé |
JP7242562B2 (ja) | 2017-07-25 | 2023-03-20 | アムジエン・インコーポレーテツド | 容器アクセスシステムを有する薬物送達デバイス及び関連する組立方法 |
EP3664863A2 (en) | 2017-08-09 | 2020-06-17 | Amgen Inc. | Hydraulic-pneumatic pressurized chamber drug delivery system |
EP3668567A1 (en) | 2017-08-18 | 2020-06-24 | Amgen Inc. | Wearable injector with sterile adhesive patch |
US11103636B2 (en) | 2017-08-22 | 2021-08-31 | Amgen Inc. | Needle insertion mechanism for drug delivery device |
US11759565B2 (en) | 2017-10-04 | 2023-09-19 | Amgen Inc. | Flow adapter for drug delivery device |
EP3691716B1 (en) | 2017-10-06 | 2023-11-29 | Amgen Inc. | Drug delivery device with interlock assembly and related method of assembly |
WO2019074579A1 (en) | 2017-10-09 | 2019-04-18 | Amgen Inc. | DRUG DELIVERY DEVICE COMPRISING A DRIVE ASSEMBLY AND ASSEMBLY METHOD THEREOF |
EP3703779A1 (en) | 2017-11-03 | 2020-09-09 | Amgen Inc. | Systems and approaches for sterilizing a drug delivery device |
WO2019090303A1 (en) | 2017-11-06 | 2019-05-09 | Amgen Inc. | Fill-finish assemblies and related methods |
JP2021501616A (ja) | 2017-11-06 | 2021-01-21 | アムジエン・インコーポレーテツド | 配置及び流量検出を備える薬物送達デバイス |
CN116832271A (zh) | 2017-11-10 | 2023-10-03 | 安进公司 | 用于药物递送装置的柱塞 |
EP3710089A1 (en) | 2017-11-16 | 2020-09-23 | Amgen Inc. | Autoinjector with stall and end point detection |
AU2018368340B2 (en) | 2017-11-16 | 2024-03-07 | Amgen Inc. | Door latch mechanism for drug delivery device |
US10835685B2 (en) | 2018-05-30 | 2020-11-17 | Amgen Inc. | Thermal spring release mechanism for a drug delivery device |
US11083840B2 (en) | 2018-06-01 | 2021-08-10 | Amgen Inc. | Modular fluid path assemblies for drug delivery devices |
WO2020023336A1 (en) | 2018-07-24 | 2020-01-30 | Amgen Inc. | Hybrid drug delivery devices with grip portion |
US20210260279A1 (en) | 2018-07-24 | 2021-08-26 | Amgen Inc. | Hybrid drug delivery devices with optional grip portion and related method of preparation |
MX2021000748A (es) | 2018-07-24 | 2021-03-26 | Amgen Inc | Dispositivos de suministro para administrar farmacos. |
EP3826699A1 (en) | 2018-07-24 | 2021-06-02 | Amgen Inc. | Delivery devices for administering drugs |
CA3103105A1 (en) | 2018-07-31 | 2020-02-06 | Amgen Inc. | Fluid path assembly for a drug delivery device |
CA3106452A1 (en) | 2018-09-24 | 2020-04-02 | Amgen Inc. | Interventional dosing systems and methods |
IL281469B1 (en) | 2018-09-28 | 2024-04-01 | Amgen Inc | Assembling a memory alloy ejector activation assembly for a drug delivery device |
TW202027806A (zh) | 2018-10-02 | 2020-08-01 | 美商安進公司 | 具有內部力傳遞的用於藥物遞送之注射系統 |
AR116607A1 (es) | 2018-10-05 | 2021-05-26 | Amgen Inc | Dispositivo de administración de fármacos con indicador de dosis |
CN112789073B (zh) | 2018-10-15 | 2023-09-15 | 安进公司 | 具有阻尼机构的药物递送装置 |
MA53913A (fr) | 2018-10-15 | 2022-01-19 | Amgen Inc | Procédé d'assemblage de plate-forme pour dispositif d'administration de médicament |
TWI831847B (zh) | 2018-11-01 | 2024-02-11 | 美商安進公司 | 部分針頭縮回之藥物遞送裝置及其操作方法 |
US20220031939A1 (en) | 2018-11-01 | 2022-02-03 | Amgen Inc. | Drug delivery devices with partial drug delivery member retraction |
WO2020091956A1 (en) | 2018-11-01 | 2020-05-07 | Amgen Inc. | Drug delivery devices with partial drug delivery member retraction |
JP7510952B2 (ja) | 2019-04-24 | 2024-07-04 | アムジエン・インコーポレーテツド | シリンジ滅菌確認アセンブリ及び方法 |
JP2022545227A (ja) | 2019-08-23 | 2022-10-26 | アムジエン・インコーポレーテツド | 構成可能な針シールド係合構成要素を備えた薬物送達デバイス及び関連方法 |
KR20240011135A (ko) | 2021-05-21 | 2024-01-25 | 암젠 인크 | 약물 용기를 위한 충전 레시피를 최적화하는 방법 |
Family Cites Families (67)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3691016A (en) | 1970-04-17 | 1972-09-12 | Monsanto Co | Process for the preparation of insoluble enzymes |
CA1023287A (en) | 1972-12-08 | 1977-12-27 | Boehringer Mannheim G.M.B.H. | Process for the preparation of carrier-bound proteins |
US3941763A (en) | 1975-03-28 | 1976-03-02 | American Home Products Corporation | PGlu-D-Met-Trp-Ser-Tyr-D-Ala-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 and intermediates |
US4195128A (en) | 1976-05-03 | 1980-03-25 | Bayer Aktiengesellschaft | Polymeric carrier bound ligands |
US4330440A (en) | 1977-02-08 | 1982-05-18 | Development Finance Corporation Of New Zealand | Activated matrix and method of activation |
CA1093991A (en) | 1977-02-17 | 1981-01-20 | Hideo Hirohara | Enzyme immobilization with pullulan gel |
US4229537A (en) | 1978-02-09 | 1980-10-21 | New York University | Preparation of trichloro-s-triazine activated supports for coupling ligands |
US4289872A (en) | 1979-04-06 | 1981-09-15 | Allied Corporation | Macromolecular highly branched homogeneous compound based on lysine units |
US4816567A (en) * | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4710473A (en) | 1983-08-10 | 1987-12-01 | Amgen, Inc. | DNA plasmids |
US4496689A (en) * | 1983-12-27 | 1985-01-29 | Miles Laboratories, Inc. | Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer |
AU610083B2 (en) | 1986-08-18 | 1991-05-16 | Clinical Technologies Associates, Inc. | Delivery systems for pharmacological agents |
US5229490A (en) | 1987-05-06 | 1993-07-20 | The Rockefeller University | Multiple antigen peptide system |
DE3889853D1 (de) | 1987-11-05 | 1994-07-07 | Hybritech Inc | Polysaccharidmodifizierte Immunglobuline mit reduziertem immunogenem Potential oder verbesserter Pharmakokinetik. |
US6018026A (en) * | 1988-01-22 | 2000-01-25 | Zymogenetics, Inc. | Biologically active dimerized and multimerized polypeptide fusions |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
US5116964A (en) | 1989-02-23 | 1992-05-26 | Genentech, Inc. | Hybrid immunoglobulins |
US5225538A (en) * | 1989-02-23 | 1993-07-06 | Genentech, Inc. | Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins |
US5013556A (en) | 1989-10-20 | 1991-05-07 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US5723286A (en) * | 1990-06-20 | 1998-03-03 | Affymax Technologies N.V. | Peptide library and screening systems |
CA2082951C (en) | 1991-03-15 | 1999-12-21 | Robert M. Platz | Pulmonary administration of granulocyte colony stimulating factor |
US5733731A (en) | 1991-10-16 | 1998-03-31 | Affymax Technologies N.V. | Peptide library and screening method |
US5270170A (en) | 1991-10-16 | 1993-12-14 | Affymax Technologies N.V. | Peptide library and screening method |
WO1993021259A1 (en) | 1992-04-14 | 1993-10-28 | Cornell Research Foundation Inc. | Dendritic based macromolecules and method of production |
US5792451A (en) | 1994-03-02 | 1998-08-11 | Emisphere Technologies, Inc. | Oral drug delivery compositions and methods |
US5417972A (en) * | 1993-08-02 | 1995-05-23 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Method of killing B-cells in a complement independent and an ADCC independent manner using antibodies which specifically bind CDIM |
US5470952A (en) | 1993-10-20 | 1995-11-28 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | CNTF and IL-6 antagonists |
US5922545A (en) | 1993-10-29 | 1999-07-13 | Affymax Technologies N.V. | In vitro peptide and antibody display libraries |
US6309853B1 (en) | 1994-08-17 | 2001-10-30 | The Rockfeller University | Modulators of body weight, corresponding nucleic acids and proteins, and diagnostic and therapeutic uses thereof |
DE4435919C1 (de) | 1994-10-07 | 1995-12-07 | Deutsches Krebsforsch | Zinkfinger-DNA, -Protein und ihre Verwendung |
US5824784A (en) | 1994-10-12 | 1998-10-20 | Amgen Inc. | N-terminally chemically modified protein compositions and methods |
US5739277A (en) | 1995-04-14 | 1998-04-14 | Genentech Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
US6096871A (en) | 1995-04-14 | 2000-08-01 | Genentech, Inc. | Polypeptides altered to contain an epitope from the Fc region of an IgG molecule for increased half-life |
US6127977A (en) | 1996-11-08 | 2000-10-03 | Cohen; Nathan | Microstrip patch antenna with fractal structure |
CA2249195A1 (en) | 1996-03-18 | 1997-09-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobin-like domains with increased half lives |
AU4474497A (en) | 1996-10-08 | 1998-05-05 | U-Bisys B.V. | Methods and means for selecting peptides and proteins having specific affinity for a target |
US6812327B1 (en) * | 1996-10-25 | 2004-11-02 | Human Genome Sciences, Inc. | Neutrokine-alpha polypeptides |
KR20050004269A (ko) | 1996-10-25 | 2005-01-12 | 휴먼 게놈 사이언시즈, 인코포레이티드 | 뉴트로킨 알파 |
AU5705898A (en) | 1996-12-17 | 1998-07-15 | Schering Corporation | Mammalian cell surface antigens; related reagents |
US5969102A (en) | 1997-03-03 | 1999-10-19 | St. Jude Children's Research Hospital | Lymphocyte surface receptor that binds CAML, nucleic acids encoding the same and methods of use thereof |
CA2232743A1 (en) | 1997-04-02 | 1998-10-02 | Smithkline Beecham Corporation | A tnf homologue, tl5 |
CA2292899A1 (en) | 1997-06-06 | 1998-12-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Ntn-2 member of tnf ligand family |
IL133315A0 (en) | 1997-06-06 | 2001-04-30 | Regeneron Pharma | Ntn-2 member of tnf ligand family |
AU9376498A (en) | 1997-09-05 | 1999-03-22 | University Of Washington | Tumor necrosis factor family receptors and ligands, encoding nucleic acids and related binding agents |
PL339740A1 (en) | 1997-09-12 | 2001-01-02 | Biogen | Kay - a novel immune system protein |
AU2212299A (en) | 1998-01-05 | 1999-07-26 | Genentech Inc. | Compositions and methods for the treatment of tumor |
WO1999062951A1 (en) * | 1998-06-04 | 1999-12-09 | Shanghai Second Medical University | A human zinc finger protein gene (bmzf3) |
US6660843B1 (en) * | 1998-10-23 | 2003-12-09 | Amgen Inc. | Modified peptides as therapeutic agents |
WO2000040716A2 (en) | 1999-01-07 | 2000-07-13 | Zymogenetics, Inc. | Soluble receptor br43x2 and methods of using them for therapy |
US20030095967A1 (en) * | 1999-01-25 | 2003-05-22 | Mackay Fabienne | BAFF, inhibitors thereof and their use in the modulation of B-cell response and treatment of autoimmune disorders |
EP2974736A1 (en) * | 1999-01-25 | 2016-01-20 | Biogen MA Inc. | Baff, inhibitors thereof and their use in the modulation of the b-cell response |
AU2880400A (en) | 1999-02-12 | 2000-08-29 | Amgen, Inc. | Tnf-related proteins |
US20030022233A1 (en) | 1999-04-30 | 2003-01-30 | Raymond G. Goodwin | Methods of use of the taci/taci-l interaction |
WO2000068378A1 (en) | 1999-05-06 | 2000-11-16 | National Jewish Medical And Research Center | Tall-1 nucleic acid molecules, proteins, receptors and methods of use thereof |
CA2377731A1 (en) | 1999-07-02 | 2001-01-11 | Genentech, Inc. | Fusion peptides comprising a peptide ligand domain and a multimerization domain |
EP1254227A2 (en) | 2000-02-11 | 2002-11-06 | Amgen Inc. | Fusion receptor from tnf family |
EP1339746A2 (en) * | 2000-08-18 | 2003-09-03 | Dyax Corp. | Binding polypeptides for b lymphocyte stimulator protein (blys) |
AU2001288301A1 (en) * | 2000-08-18 | 2002-03-04 | Human Genome Sciences, Inc. | Binding polypeptides and methods based thereon |
MXPA03010210A (es) * | 2001-05-11 | 2004-03-10 | Amgen Inc | Peptidos y moleculas relacionadas que se enlazan a tall-1. |
AR035119A1 (es) * | 2001-08-16 | 2004-04-14 | Lilly Co Eli | Anticuerpos humanos antagonistas anti-htnfsf13b |
EP1578782A4 (en) * | 2002-12-30 | 2007-09-12 | Amgen Inc | COSTIMULATING FACTORIAL THERAPY |
EP1773400A2 (en) * | 2004-07-08 | 2007-04-18 | Amgen Inc. | Therapeutic peptides |
US8008453B2 (en) * | 2005-08-12 | 2011-08-30 | Amgen Inc. | Modified Fc molecules |
KR101104556B1 (ko) | 2006-12-05 | 2012-01-11 | 가부시키가이샤 고베 세이코쇼 | 인쇄판용 고강도 알루미늄 합금판 |
US9458246B2 (en) * | 2013-03-13 | 2016-10-04 | Amgen Inc. | Proteins specific for BAFF and B7RP1 |
JOP20140087B1 (ar) * | 2013-03-13 | 2021-08-17 | Amgen Inc | بروتينات مخصصة ل baff و b7rp1 وإستخداماتها |
WO2020175345A1 (ja) | 2019-02-27 | 2020-09-03 | 株式会社村田製作所 | コネクタ、コネクタセット |
-
2002
- 2002-05-13 MX MXPA03010210A patent/MXPA03010210A/es active IP Right Grant
- 2002-05-13 AT AT02769739T patent/ATE375361T1/de active
- 2002-05-13 ES ES02769739T patent/ES2295404T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-05-13 PT PT02769739T patent/PT1385882E/pt unknown
- 2002-05-13 CN CNB028140095A patent/CN100448891C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-05-13 EP EP20070019762 patent/EP1921088B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-05-13 AU AU2002342669A patent/AU2002342669C1/en not_active Ceased
- 2002-05-13 IL IL15871902A patent/IL158719A0/xx unknown
- 2002-05-13 PL PL369570A patent/PL210546B1/pl unknown
- 2002-05-13 NZ NZ542878A patent/NZ542878A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-05-13 CA CA2446189A patent/CA2446189C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-05-13 DE DE60222882T patent/DE60222882T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-05-13 EA EA200301241A patent/EA010435B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-05-13 JP JP2002589503A patent/JP4516719B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2002-05-13 US US10/145,206 patent/US7259137B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-05-13 HU HU0700125A patent/HU229910B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2002-05-13 CN CNA2006101537137A patent/CN1970078A/zh active Pending
- 2002-05-13 ES ES10178373T patent/ES2387546T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-05-13 KR KR1020037014672A patent/KR100902687B1/ko active IP Right Grant
- 2002-05-13 ES ES07019762.9T patent/ES2527471T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-05-13 EP EP14180109.2A patent/EP2845864A3/en not_active Withdrawn
- 2002-05-13 SK SK1489-2003A patent/SK288175B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2002-05-13 NZ NZ529267A patent/NZ529267A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-05-13 DK DK02769739T patent/DK1385882T3/da active
- 2002-05-13 AT AT10178373T patent/ATE549354T1/de active
- 2002-05-13 WO PCT/US2002/015273 patent/WO2002092620A2/en active IP Right Grant
- 2002-05-13 CN CNA2006101537090A patent/CN1970077A/zh active Pending
- 2002-05-13 EP EP02769739A patent/EP1385882B9/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-05-13 PL PL39331702A patent/PL393317A1/pl unknown
- 2002-05-13 BR BR0209546-7A patent/BR0209546A/pt not_active Application Discontinuation
- 2002-05-13 RS YU95203A patent/RS51708B/sr unknown
- 2002-05-13 EP EP20100178373 patent/EP2292655B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-05-13 SI SI200230645T patent/SI1385882T1/sl unknown
- 2002-05-13 CZ CZ2003-3291A patent/CZ304592B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2002-05-13 EE EEP200300552A patent/EE05294B1/xx not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-10-31 ZA ZA200308513A patent/ZA200308513B/en unknown
- 2003-11-02 IL IL158719A patent/IL158719A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-11-10 NO NO20034980A patent/NO331785B1/no not_active IP Right Cessation
- 2003-11-12 BG BG108349A patent/BG66270B1/bg unknown
-
2004
- 2004-02-25 HK HK04101344A patent/HK1059269A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-11-10 US US11/272,521 patent/US7737111B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-01-09 CY CY081100030T patent/CY1107131T1/el unknown
-
2010
- 2010-05-26 US US12/788,137 patent/US8507426B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-06-04 HK HK11105624A patent/HK1151545A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-07-09 US US13/938,141 patent/US9139645B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2015
- 2015-08-21 HK HK15108146.9A patent/HK1207390A1/xx unknown
- 2015-09-21 US US14/860,381 patent/US20160176926A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9139645B2 (en) | Peptides and related molecules that bind to TALL-1 | |
JP2004533249A5 (cs) | ||
AU2002342669A1 (en) | Peptides and related molecules that bind to TALL-1 | |
KR101028626B1 (ko) | 혈소판신생 활성을 갖는 펩티드 및 관련 화합물 | |
US20030032588A1 (en) | Glucagon antagonists | |
JP2003530870A (ja) | Apo−AI/AIIペプチド誘導体 | |
US20020090646A1 (en) | Calcitonin-related molecules |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20200513 |