CS111292A3 - Dna compound encoding factor releasing growth-hormone of cattle and apharmaceutical composition containing said compound - Google Patents
Dna compound encoding factor releasing growth-hormone of cattle and apharmaceutical composition containing said compound Download PDFInfo
- Publication number
- CS111292A3 CS111292A3 CS921112A CS111292A CS111292A3 CS 111292 A3 CS111292 A3 CS 111292A3 CS 921112 A CS921112 A CS 921112A CS 111292 A CS111292 A CS 111292A CS 111292 A3 CS111292 A3 CS 111292A3
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- compound
- bgrf
- seq
- dna
- leu
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims description 51
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 title claims description 10
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 title claims description 9
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 title claims description 9
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 title description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 30
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 25
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 25
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 22
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 15
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 2
- 101000825768 Bos taurus Somatoliberin Proteins 0.000 description 44
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 11
- 102000038461 Growth Hormone-Releasing Hormone Human genes 0.000 description 9
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 9
- 239000000095 Growth Hormone-Releasing Hormone Substances 0.000 description 8
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N Glu-Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 5
- CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- LDLZOAJRXXBVGF-GMOBBJLQSA-N Asp-Ile-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N LDLZOAJRXXBVGF-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- IRMLZWSRWSGTOP-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ala Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IRMLZWSRWSGTOP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- WFAJBYGUONQMCI-UHFFFAOYSA-N acetic acid urea Chemical compound NC(=O)N.NC(=O)N.NC(=O)N.NC(=O)N.NC(=O)N.NC(=O)N.C(C)(=O)O WFAJBYGUONQMCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N Glu-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N Glu-Arg-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BURPTJBFWIOHEY-UWJYBYFXSA-N Tyr-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 BURPTJBFWIOHEY-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 3
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- QCTFKEJEIMPOLW-JURCDPSOSA-N Ala-Ile-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QCTFKEJEIMPOLW-JURCDPSOSA-N 0.000 description 2
- UVTGNSWSRSCPLP-UHFFFAOYSA-N Arg-Tyr Natural products NC(CCNC(=N)N)C(=O)NC(Cc1ccc(O)cc1)C(=O)O UVTGNSWSRSCPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBQSLMACWDXWLJ-GHCJXIJMSA-N Asp-Ala-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O XBQSLMACWDXWLJ-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 2
- AIGROOHQXCACHL-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O AIGROOHQXCACHL-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- JWNZHMSRZXXGTM-XKBZYTNZSA-N Glu-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JWNZHMSRZXXGTM-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 2
- JBRBACJPBZNFMF-YUMQZZPRSA-N Gly-Ala-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JBRBACJPBZNFMF-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SVZFKLBRCYCIIY-CYDGBPFRSA-N Ile-Pro-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SVZFKLBRCYCIIY-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 2
- OHXUUQDOBQKSNB-AVGNSLFASA-N Lys-Val-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O OHXUUQDOBQKSNB-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- DRRXXZBXDMLGFC-IHRRRGAJSA-N Lys-Val-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN DRRXXZBXDMLGFC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- SODXFJOPSCXOHE-IHRRRGAJSA-N Met-Leu-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SODXFJOPSCXOHE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JHSRGEODDALISP-XVSYOHENSA-N Phe-Thr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JHSRGEODDALISP-XVSYOHENSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- FGBLCMLXHRPVOF-IHRRRGAJSA-N Ser-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O FGBLCMLXHRPVOF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- OJRNZRROAIAHDL-LKXGYXEUSA-N Thr-Asn-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OJRNZRROAIAHDL-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 2
- IEESWNWYUOETOT-BVSLBCMMSA-N Trp-Val-Phe Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(O)=O IEESWNWYUOETOT-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 2
- GFZQWWDXJVGEMW-ULQDDVLXSA-N Tyr-Arg-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O GFZQWWDXJVGEMW-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UMPVMAYCLYMYGA-ONGXEEELSA-N Val-Leu-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O UMPVMAYCLYMYGA-ONGXEEELSA-N 0.000 description 2
- VHIZXDZMTDVFGX-DCAQKATOSA-N Val-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C(C)C)N VHIZXDZMTDVFGX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 108010043240 arginyl-leucyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- GGZZISOUXJHYOY-UHFFFAOYSA-N 8-amino-4-hydroxynaphthalene-2-sulfonic acid Chemical compound C1=C(S(O)(=O)=O)C=C2C(N)=CC=CC2=C1O GGZZISOUXJHYOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- LWUWMHIOBPTZBA-DCAQKATOSA-N Ala-Arg-Lys Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LWUWMHIOBPTZBA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- YBZMTKUDWXZLIX-UWVGGRQHSA-N Arg-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O YBZMTKUDWXZLIX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- JWQWPRCDYWNVNM-ACZMJKKPSA-N Asn-Ser-Gln Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N JWQWPRCDYWNVNM-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N Asp-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011537 Coomassie blue staining Methods 0.000 description 1
- 241001123946 Gaga Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- NSTUFLGQJCOCDL-UWVGGRQHSA-N Gly-Leu-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NSTUFLGQJCOCDL-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- LZDNBBYBDGBADK-UHFFFAOYSA-N L-valyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 LZDNBBYBDGBADK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- BABSVXFGKFLIGW-UWVGGRQHSA-N Leu-Gly-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N BABSVXFGKFLIGW-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N Leu-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- VKVDRTGWLVZJOM-DCAQKATOSA-N Leu-Val-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VKVDRTGWLVZJOM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N Leu-Val-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEVRUYFHWJJUHZ-DCAQKATOSA-N Met-Ala-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QEVRUYFHWJJUHZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 108010066427 N-valyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- INHMISZWLJZQGH-ULQDDVLXSA-N Phe-Leu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 INHMISZWLJZQGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YXHYJEPDKSYPSQ-AVGNSLFASA-N Pro-Leu-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 YXHYJEPDKSYPSQ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- KCGIREHVWRXNDH-GARJFASQSA-N Ser-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N KCGIREHVWRXNDH-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N Ser-Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N Thr-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- DDHFMBDACJYSKW-AQZXSJQPSA-N Trp-Thr-Asp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O DDHFMBDACJYSKW-AQZXSJQPSA-N 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- PRVDWBWUNABJKS-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;2-aminoacetic acid Chemical compound CC#N.NCC(O)=O PRVDWBWUNABJKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- -1 alkaline earth metal salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001734 carboxylic acid salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 108010091798 leucylleucine Proteins 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 108010064486 phenylalanyl-leucyl-valine Proteins 0.000 description 1
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 108010025826 prolyl-leucyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/61—Growth hormone [GH], i.e. somatotropin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
DNA sloučenina ^kódující fsktor uvolňující růstový hormonskotu a farmaceutický prostředek, který ji obsahuje
Oblast techniky
Vynález se týká DNA sloučeniny ^«škodující faktor uvolňují-cí růstový hormon skotu a farmaceutického prostředku, kterýji obsahuje.
Dosavadní stav techniky faktor, uvolňující růstový hormon /GRF/ je užitečný kestimulaci produkce růstového hormonu u lidí a u zvířat. Fak-tor ,uvolňující růstový hormon skotu /bGRF/ je obzvláště vý-znamný pro veterinářské účely. Aminokyselinová sekvence zra-lého bGRF již byla objasněna; Esch a kol., BBRC 117, str, 772 až 779 /1983/. Avšak sekvence DNA pgkodující bGRF ve sku-tečnosti byla až dosud neznáma. Dosud tedy nebyly známy poly-peptidové sloučeniny, které zahrnují dvě formy prekursorubGRF a bGRF peptid. Vynález se tedy týká DNA sloučenin, kte-ré zakodovávají polypeptidové sloučeniny podle vynálezu azralý bGRF.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je DNA sloučenina, která zahrnujeisolovanou DNA sekvenci zakodující SEQ ID č. 4. Vynález setedy týká DNA sloučenin, které zahrnují DNA sekvence zako-dující faktor uvolňující růstový hormon skotu, bGRF prekur-soru a vedoucího peptidu. Vynález se také týká polypepti-dových sloučenin včetně prekursoru bGRF přídavně k bGRF ve-doucímu peptidu pro bGRF prekursor.
Polypeptidové sloučeniny podle vynálezu jeou SEQ ID č. 4 nebo 6 a jejich farmaceuticky vhodné adiční soli s kyse-linami nebo s karboxylovými kyselinami.
Sloučeniny DNA podle vynálezu zahrnují DNA sekvence zakodující zralý bGRF, bGRF prekursor a bGRF vedoucí peptid.Výhodnou DNA sekvencí, zakodující zralý bGRF,je sekvenceSEQ ID č. 1. Výhodnou DNA sekvencí, zakodující bGRF prekur-sor, je sekvence SEQ IBS, 3» Výhodné DNA sekvence, zakodují-cí bGRF prekursor, předešlý svou vedoucí peptidovou sekvencí,je sekvence SEQ ID č. 5.
Vynález se také týká farmaceutických prostředků, kteréjako účinnou složku obsahují polypeptidovou sloučeninu zahr-nující bGRF prekursor. Konečně se vynález také týká způsobu v navození uvolňování růstového hormonu, při kterém se podávápolypeptidová sloučenina obsahující bGRF prekursor. Slouče-niny podle vynálezu a způsoby podle vynálezu jsou vhodnék navození uvolňováni růstového hormonu u různých zvířat,včetně lidí, vepřů, hovězího dobytka, ovcí, kuřat a ryb.
Jako výhodné se uvádí použití prostředků i způsobů v přípa-dě hovězího dobytka. V následujícím podrobném popise, který vynález objasňujeavšak nijak neomezuje, se používá následujících zkratek: GRF polypeptiď působící jakožto faktor uvolňu-jící růstovýhormon; GRF/I-29/NH2 - minimální množství GRF, které je potřebné proplný účinek; vysoká úroveň exprese v případě E. coli - produkce GRF ana-logu? zakódovaná klonovaným genem v takové koncentraci, žeprodukt genu je zjistitelný zabarvením modří Coomassie Blue; izolovaná DNA sekvence - jakákoliv DNA sekvence avšak konstru-ovaná nebo syntetizovaná, která je místně odlišná od svéhopřirozeného místa v genomové DNA. Definice zahrnuje izolova-nou; DNA sekvenci ve všech jejích formách jiných, než je při-rozený stav. Například DNA sekvence může být vložena do plas-midového nebo fágového vektoru nebo může být vložena do genomuorganismu, ze kterého pochází nebo do jiného organismu kezvýšění genove-. '.· dávky.
Zralý bGRF - bGRF /1-44/; SEQ ID č. 2 bGRF prekursor - bGRF /1-76/,* SEQ ID č. 4 Připojený obr. k bližnímu vysvětlení není přesně v měřít-ku. Na obr. 1 je restrikční poloh© a funkční mapa plasmidupHS50T.
Vynález se tedy týká izolovaných DNA sloučenin, kterézahrnují DNA sekvence zakodující zralý faktor uvolňování růs-tového hormonů, prekursor bGRF a vedoucí peptiď bGRF, vázanýna bGRF prekursor. Vynález se tedy týká polypeptidových slou-čenina.
Jakkoliv aminokyselinová struktura formy zralého bGRFje již objasněna /Esch a kol., Biochem. Biophys. Res. Commun.117, str. 772, 1983/, týká se vynález až dosud neznámého pre-kursoru bGRF. Tato prekursorová sloučenina je representovánasekvencí SEQ ID č. 4 a její farmaceuticky vhodnou adiční solís kyselinou nebo s karboxylovou kyselinou. Prekursor bGRFje obzvláště vhodný, jelikož v oboru doplňuje potřebu slouče-niny: s účinností bGRF, které se může produkovat ve velkémmnožství v E. coli. Sloučeniny mají dostatečný rozměr, aby by-lo možné vyhnout se problému vážného odbourání při expresi zra'lého GRF v E. coli, Kirschner a kol., J. Biotech. 12, str. 247, 248, 1989.
Další peptidovou sloučeninou podle vynálezu je bGRF pre-kursor s bGRF vedoucím peptidem, vázaným na prekursorový ami-no terminus. Sloučenina odpovídá SEQ ID č. 6 a jejím farma-ceuticky vhodným adičním solím s kyselinou nebo s karboxylo-vou kyselinou.
Sekvence SEQ ID č. 6 sloučeniny je obzvláště vhodná proprodukci, v buňkách savců. Vedoucí peptid způsobuje sekreci po-lypeptidového produktu. K odštěpení vedoucího peptidu dochá-zí, když je produkt vyloučen. Všechny peptidové sloučeniny podle vynálezu se mohoupřipravovat chemickými postupy o sobě známými způsoby, včet-ně přípravy peptidu v pevné fázi nebo rekombinantním způsobemOba tyto způsoby jsou popsány v americkém patentovém spisečíslo 4 617149. Rekombinantní způsoby jsou výhodné pokud ježádoucí vysoký výtěžek. Obecný způsob konstrukce jakékolivžádoucí DNA sekvence popsal Brown a kol., Methods of
Enzymology 68, str. 109 /1979/. DNA sekvence se mohou syntetizovat za použití automati-zovaného DNA syntetizeru, například jednotky ABS /AppliedBiosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Poster City, CA94404/ 380B DNA syntetizer. DNA sekvence se také mohou gene-rovet polymerazovou řetězovou reakci, popsanou například v a-merické . patentové přihlášce, zveřejněné 2. 3. 1987·, číslo0258017.
Aminokyselinové sekvence polypeptidových sloučenin podlevynálezu se mohou zakodovávat prostřednictvím četných odliš-ných DNA sekvencí, jelikož většina aminokyselin se zakodová-vá více než jedním DNA tripletem. Jelikož tyto alternativníDNA sekvence zakodovávají tytéž sekvence aminokyselin, zahr-nuje vynález také tyto alternativní sekvende.
Pracovníkům v oboru je zřejmé, že k iniciaci translacepolypeptidů v E. coli je přes methioninový zbytek. Polypepti-dy podle vynálezu nezačínají methioninem. Proto se sloučeninymohou připravovat různými způsoby. Po expresi polypeptidovésloučeniny se vedoucí sekvence methioninu nebo methionin apřídavné aminokyseliny odstraní jakýmkoliv o sobě známým způ-sobem. Příkladně se uvádí: americký patentový spis číslo4 745069 a 4 782139; Villa a kol,, Eur. J. Biochem. 171, str.137 /1988/; Geli a kol., Gene 80, str. 129 /1989/ a evropskázveřejněná přihlášky vynálezu číslo 0199018.
Další způsoby přípravy jsou pracovníkům v oboru dobře známy·. Například se sloučeniny mohou produkovat v eukariotickýchbuňkách za použiti vektorů odvozených od SV40. Exprese v eu-karyotických buňkách se dosahuje prostřednictvím bGRP prekursoru cDNA sekvence. Takový způsob je popsán v americkém paten-tovém spise číslo 4 775624. Delší obdobné způsoby exprese jsoupopsány v publikaci J. Sambróok, E.F. Fritsch, T. Maniatis,Molecular Cloning: A Laboratory Menual 16.3 - 17.44 /1989/.Genová exprese v Saccharomyces cerevisiae je podrobně popsa-ná v publikaci 1 Current Frotocols in Molecular Biology /F.M.Ausubel, R. Brent, R,E, Kingston, D.D. Moore, J.G. Seidman,J.A. Smith, K. Struhl, 1989/.
Sekvence DNA podle vynálezu zakodovávají polypeptidovésloučeniny podle vynálezu s zralý bGRP. Aminokyselinová sek-vence zralého bGRP' je známa avšak DNA sekvence, zakodující,až dosud známa nebyla.
Vynález zahrnuje vedle polypeptidových sloučenin také je-jich farmaceuticky vhodné netoxické ediční soli s kyselinamia farmaceuticky vhodné netoxické soli s karboxylovými kyseli-nami. Výrazem "farmaceuticky vhodné netoxické adiční solis kyselinami" se zde vždy míní ediční soli jak s anorganický-mi tak s organickými kyselinami. Jakožto vhodné kyseliny sepro tento účel uvádějí například kyselina chlorovodíková,bromovodíková a fluorovodíková, sírová, sulfonová, vinná, fu-marová, glykolová, citrónová, maleinová, fosforečná, jantaro-vá, octová, dusičná, benzoová, askorbová, p-toluensulfonová,benzensulfonová, naftalensulfonová a propionová. Výhodné adič-ní soli s kyselinami se připravují za použití kyseliny chlo-rovodíkové, octové a jantarové. Shora uvedené soli se připra-vují o sobě známými způsoby. Výrazem "soli karboxylových kyselin. se míní příklad-ně aminy, soli amoniové, kvarterní amoniové, soli s alkalický-mi kovy nebo s kovy alkalických zemin, jako jsou soli vápena-té, horečnaté, sodné, draselné a lithné. vynález se také týká farmaceutických prostředků, které obsáhují jakožto účinnou látku polypeptidovou sloučeninu nebojejí farmaceuticky vhodnou netoxickou sůl karboxylové kyseli-ny nebo adiční sůl s kyselinou, přičemž polypeptidovou slou-čeninou je SEQ ID č. 4a farmaceuticky vhodný kapalný nebopevný nosič.
Vynález se také týká způsobu navozování uvolňování růsto-vého hormonu, při kterém se podává účinné množství polypepti-dové sloučeniny representované SEQ ID č. 4 nebo její farma-ceuticky vhodné soli s karbcxylovou kyselinou nebo adiční so-li s kyselinou. Dávky prekursorových sloučenin podle vynálezu se podávají příjemcům po dobu žádoucí pro stimulaci uvolňování růstového hormonu* Hmotnost ošetřovaného jedince a způsob podání majívliv na velikost potřebné dávky k navození žádoucí odezvy, V případě hovězího dobytka je výhodnou dávkou 3 mg/den.
Pro podávání polypeptidových sloučenin podle vynálezuparenterálně jsou vhodnou farmaceutickou formou vstřikovatel-né sterilní vodné roztoky nebo disperze a sterilní práškypro přípravu sterilních vstřikovatelných roztoků nebo disperzíNosičem může být rozpouštědlové nebo dispergační prostředí,například voda, ethanol, polyol /například glycerol, propy-lenglykol, kapalný pólyethylenglykol/, jejich vhodné směsinebo rostlinné oleje. Vhodná tekutost se může udržovat napřík-lad v případě lecitinu, udržováním určité velikosti Částicv případě disperzí a použitím povrchově aktivních činidel.Předcházení působení mikroorganismů je mošno dosáhnout urči-tými antibakteriálními a protihoubovými činidly, jako jsounapříklad parabeny, chlorbutanol, fenol, kyselina sorbová. V četných případech je žádoucí zahrnutí isotonických činidel,například cukrů, chloridu sodného. Mohou se také připravovatfarmaceutické formy /vstřikovatelné/ s prodlouženou absorpcípoužitím činidel zpomalujících absorpci, jako je napříkladmonostearát hlinitý a želatina.
Sterilní vstřikovatelné roztoky se mohou připravovatvnášením sloučenin podle vynálezu do požadovaného množstvívhodného rozpouštědla, obsahujícího popřípadě další přísady.Popřípadě a pro účinnější distribuci se mohou sloučeniny pod-le vynálezu vnášet do systémů se zpomaleným uvolňováním,jako jsou polymerni matrice, liposomy a mikrokuličky. Slouče-niny se mohou vnášet mechanickými prostředky, osmotickýmičerpadly nabo jakýmkoliv zařízením nebo systémem, který za-jištuje kontinuální nebo přetržité dávkování. Jelikož jezpůsob podávání farmaceutických peptidových sloučenin v po-čátcích, očekává se značný pokrok v této oblasti. Sloučeninypodle vynálezu budou vhodné pro takového nové způsoby podá-vání .
Je obzvláště výhodné formulovat sloučeniny podle vyná- lezu na jednotkové dávkovači formy pro snadnost podávání a pro zajištění rovnoměrného dávkování. Jednotkovou dávkovači formou se zde vždy míní fyzikálně oddělené jednotky vhodnépro podání ošetřovanému jedinci, ^aždá taková jednotka obsa-huje předem stanovené množství sloučeniny podle vynálezu, po-třebné pro dosažení žádoucího terapeutického výsledku a far-maceuticky vhodný nosič. Specifická dávkovači forma je dánav závislosti /a/ na charakteristikách daného složení a/b/na příslušném žádoucím terapeutickém působení. Následující příklady praktického provedení vynález objas-ňují, nejsou však míněny jako jakékoliv omezení. Příklady provedeni vynálezu Příklad..!
Exprese prekursoru bGRF v Ξ. coli rlasmid pHS5Q7 je dostupný z NRRL v kmeni E, coli HD5 /pHS507 pod číslem B-18766 /datum uložení: 9, února1991/. Prekursor bGRF se může získatt způsobem podle americ-kého patentového spisu číslo 4 828988. Příklad 2
Čištění prekursoru bGRF Připraví se kationtový sloupec za použití S Sepharose/obchodní produkt společnosti Pharmacia, 800 Centennial Ave.,Piscataway, NJ 08854/ pryskyřice. Sloupec obsahuje jeden litrpryskyřice na 50 g materiálu. Materiál, obsahující prekursorbGRF se vnese na sloupec průtokovou rychlostí 0,1 1/nťL/h ..a promývá se· dvěma objemy sloupce O,1M roztokem chloridu sod-ného -v systému 0,05· N kyselina octová - 7M močovina. Polypep-tid se eluuje lineárním gradientem 0,25 M až 1,6 ffi roztokuchloridu sodného v systému kyselina octová - močovina za po-užití tří objemů sloupce, přičemž se vždy shromáždí 0,1 obje-mu sloupce. Frakce, obsahující polypeptid se identifikujívodivostí, 0.D.276-, chromatografií v tenké vrstvě a polyak-rylamidovou gelovou elektroforesou. Frakce se pak spojí.
Stejný objem roztoku kyselina octová - močovina se při- dá do shromážděných frakcí. Tento materiál se pak vnese na sloupec obsahující pryskyřici S Sepharose v systému kyselina octová - močovina, přizpůsobeného pro 50 g bílkoviny na jedenlitr pryskyřice. Průtoková rychlost je 0,02 1/ml/h. Frakceprekursoru bGRF se eluují lineárním gradientem 0,25 M rozto-ku chloridu sodného v systému kyselina octová - močovina.Frakce 0,1 objemu sloupce se shromáždí. Frakce se analyzuji,jak shora uvedeno a shromáždí se frakce obsahující prekursorbGRF. Připraví se sloupec Sephadex G-15 /Pharmacia/ v 0,02 Mglycinu, hodnota pH 2,5, s objemem sloupce pětinásobným sezřetelem na objem shora shromážděných frakcí. Izolují se frak-ce s pikem O.D.gyg.
Sloupec, obsahující pryskyřici SP20SS /Sephabeads, spo-lečnost Mitsubishi Chemical, Tokyo/ v systému 10 % acetonit-rilu) - 0,02 M glycin, hodnota pH 2^5, se pak připraví. Při-praví se roztok shromážděného bGRF' prekursoru v 10% aceto-nitrilu a vnese se na sloupec rychlostí 1,5 až 2 sloupce zahodinu. Sloupec se promyje dvěma objemy sloupce pufru aceto-nitril - glycin. Prekursor bGRF se eluuje gradientem vytvo-řeným třemi objemy sloupce systému 10 % acetonitrilu - 0,02M glycin ve směsi se třemi objemy sloupce 50 % acetonitrilu -0,02 glycin. Shromáždí se frakce 0,1 objemu sloupce a iden-tifikují se se zřetelem na bGRF prekursor.
Materiál, obsahující bGRF prekursor se pak chromatogra-fuje: na Sephadex. G15 sloupci vyváženém v 0,25 M kyseliněoctové. Pak se izoluje pík O.D.^g a lyofilizuje se až dodalšího použití.
Průmyslová využitelnost
Polypeptidové sloučeniny, které jsou dvěma formami pre-kursoru faktoru uvolňujícího růstový hormon skotu /bGRF/ avedoucího peptidu a nov^form^f zralého bGRF. DNA sloučeninyzakódovávají tyto polypeptidové sloučeniny a zral^ bGRF apoužívají se, popřípadě ve formě farmaceutických prostřed-ků k navozování uvolňování růstového hormonu.
Soupis sekvencí (1) Obecná informace (i) Autor: ' Bierman, Kristin L.
Chán, GingHeiman, Mark L.
Hsiung, Hansen M. (ii) fTázev vynálezu: PrekursorováV forma hověz.íhorůstového hormonw
Faktor uvolňování a příbuzné dna sloučeniny (iii) Počet sekvencí ... 6 (iv) Korespondenční adresa:
(A) Adresa: Patent Division/AEH (B Ulice: Lilly Corporate Center (C) Eesto:Indianapolis (D) Stát ·· Indiana
(E) Země; USA (F) ZIP: 46285 (v) údaje pro počítač (A) MEDIUM TYP : Floppy disk (B) COMPUTER: Macintosh (C) Pracovní systém: Macintosh (D) SOFTWARE: Microsoft Word (vi) Data ^přihlášky vynálezu : (A) Číslo přihlášky " (B) Den podaní: (C) Klesifikece: (viii)Zástupee:/AGENT Information:
(A) Jméno Hamilton, Amy E (B) Registrační číslok: 33,894 (C) REFERENCE/DOCKET NUMBER: X-8377 (ix) Telekomunikační spojení (A) TELEPHON : 317-276-3169 (B) TELEFAX: 317-276-1294 10 (2) . . Informace pro ID č»:l: (i) Gh^ra.kteri štika sekvencí Ij f / (A) Délka: 132 bazické -péry r~U 1QZ t (B) Typ: nukleová kyselina (C) STRANDEDNESS: dvoči/ď (D) Topologie: lineární /
(ii) Typ molekuly: cDNA (ix) Charakteristika
(A) Tméno/klíč.' CDS (B) :Lokec e : 1. . 132 (xi) Popis sekven ce : SEQ ID Č : 1: TAC GCA GAT GCC ATC TTC ACT AAC AGC TAC CGG AAG GTT CTG GGC CAG Tyr Ala Asp Ala Ile Phe Thr Asn Ser Tyr Arg Lys Val Leu Gly Gin 1 5 10 15 CTG TCT GCC CGC AAG CTA CTC CAG GAT ATC ATG AAC AGG CAG CAG Leu Ser Ala Arg Lys Leu Leu Gin Asp Ile Met Asn Arg Gin Gin Gly 20 25 30 GAG AGA AAC CAG GAG CAA GGA GCA AAG GTA CGG CTT Glu Arg Asn Gin Glu Gin Gly Ala Lys Val Arg Leu 35 40 132 48 96 (2) . Informace pro SEQ ID č :2: (i) 'Charakteristika sekvence (A) Délka: 44 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina(D)Topologie: lineární (ii) Tyn mol plnily : bílkovina 11 (xi) Fopi_s_ sekvence·; seqid-č:2:
Tyr Ala Asp Ala1 Ile 5 Phe Thr Asn Ser Tyr Arg Lys Val10 Leu Gly 15 Gin Leu Ser Ala Arg Lys Leu Leu Gin Asp Ile Met Asn Arg Gin Gin Gly 20 25 30 Glu Arg Asn Gin Glu Gin Gly Ala Lys Val Arg Leu 35 40 (2) ) Informace pro SEQ ID .č :3: (i) Charakteristiky sekvencí f o , (A) Délka: 228 hagréckýc-h dvoýřc 7><iru· / (B) Typ: nukleovó kyselině (C) STRANDEDNESS: dvojil' (D) Topologie: lineární/
(ii)Typ molekuly: cDNA (ix) Charakterisoiks
(A) Jméno/klíč CDS (B) :Loksce.: 1..228 (xi) Popis sekvence : SEQ ID č .· 3 : TAC GCA GAT GCC ATC TTC ACT AAC AGC TAC CGG AAG GTT CTG GGC CAG 48 Tyr Ala Asp Ala Ile Phe Thr Asn Ser Tyr Arg Lys Val Leu Gly Gin 1 5 10 15 CTG TCT GCC CGC AAG CTA CTC CAG GAT ATC ATG AAC AGG CAG CAG GGA 96 Leu Ser Ala Arg Lys Leu Leu Gin Asp Ile Met Asn Arg Gin Gin Gly 20 25 30 GAG AGA AAC CAG GAG CAA GGA GCA AAG GTA CGG CTT GGC CGT CAG GTG 144 Glu Arg Asn Gin Glu Gin Gly Ala Lys Val Arg Leu Gly Arg Gin Val 35 40 45 GAC GGC GTG TGG ACA GAC CAA CAG CAG ATG GCA CTG GAG AGC ACC TTG 192 Asp Gly Val Trp Thr Asp Gin Gin Gin Met Ala Leu Glu Ser Thr Leu 50 55 60 GTG AGC CTG CTG CAG GAG CGC AGG AAT TCC CAA GGA 228 Val Ser Leu Leu Gin Glu Arg Arg Asn Ser Gin Gly 65 70 75 12 (2) Informace pro seq id č .4: (i) Charakteristika sekvencí . (A) Délke: 7¾ aminokyselin (B Typ: aminokyselina (D) Topologie: lineární(ii) Typ molekuly: bílkovina(xi) .. Popis sekvence.. SEQ ID N0:4:
Tyr Ala1 Asp Ala Ile 5 Phe Thr Asn Ser Tyr 10 Arg Lys Val Leu Gly 15 Gin Leu Ser Ala Arg Lys Leu Leu Gin Asp Ile Met Asn Arg Gin Gin Gly 20 25 30 Glu Arg Asn Gin Glu Gin Gly Ala Lys Val Arg Leu Gly Arg Gin Val 35 40 45 Asp Gly Val Trp Thr Asp Gin Gin Gin Met Ala Leu Glu Ser Thr Leu 50 55 50 Val Ser Leu Leu Gin Glu Arg Arg Asn Ser Gin Gly 65 70 75 (2) Informace pro seq id č :5: (i)' Charakteristiky sekvence . , /
(A) Délka: 318 cágjg-kých párů fez-L (B) Typ: nukleová kyselina · / (C) STRANDEDNESS: /?></ (D) Topologie: lineární ' /
(ii) T.yp molekuly: cDNA (ix) Charakteristika: (Aí Jméno/klíč :ZDS(B) 'Lokece: 1..318 (xi) Popis sekvence: SEQ ID Č : 5: ATG CTG CTC TGG GTG TTC TTC CTC GTG ACC CTC ACC CTC AGC AGC GGC 48 Met Leu Leu Trp Val Phe Phe Leu Val Thr Leu Thr Leu Ser Ser Gly 1 5 10 15 TCC CAC GGT TCC CTG CCT TCC CAG CCT CTC AGG ATT CCA CGG TAC GCA 96 Ser His Gly Ser Leu Pro Ser Gin Pro Leu Arg Ile Pro Arg Tyr Ala 20 25 30 - 13 - GAT GCC ATC TTC Phe ACT AAC AGC TAC CGG AAG GTT CTGArg Lys Val Leu GGC CAG CTG TCT Ser Asp Ala Ile 35 Thr Asn Ser Tyr 40 Gly 45 Gin Leu GCC CGC AAG CTA CTC CAG GAT ATC ATG AAC AGG CAG CAG GGA GAG AGA Ala Arg Lys Leu Leu Gin Asp Ile Met Asn Arg Gin Gin Gly Glu Arg 50 55 60 AAC CAG GAG CAA GGA GCA AAG GTA CGG CTT GGC CGT CAG GTG GAC GGC Asn Gin Glu Gin Gly Ala Lys Val Arg Leu Gly Arg Gin Val Asp Gly 65 70 75 80 GTG TGG ACA GAC CAA CAG CAG ATG GCA CTG GAG AGC ACC TTG GTG AGC Val Trp Thr Asp Gin Gin Gin Met Ala Leu Glu Ser Thr Leu Val Ser 85 90 95 CTG CTG CAG GAG CGC AGG AAT TCC CAA GGA Leu Leu Gin Glu Arg Arg Asn Ser Gin Gly 100 105 (2) Info: rms < 2 e OTO SEQ ID Č 6: (i) Cherekter ist: i ke sekvencí: (A) Délks: 1 06 eminokyselin (B) Typ : ει ainokyselins (D) Topologie: lineární (ii) Tv v . p molskuly : bílkovině (xi) Popis se.kvence : seq ID NO: 6 Met Leu Leu Trp Val Phe Phe Leu Val Thr Leu Thr Leu Ser Ser Gly 1 5 10 15 Ser His Gly Ser Leu Pro Ser Gin Pro Leu Arg Ile Pro Arg Tyr Ala 20 25 30 Asp Ala Ile Phe Thr Asn Ser Tyr Arg Lys Val Leu Gly Gin Leu Ser 35 40 45 Ala Arg Lys Leu Leu Gin Asp Ile Met Asn Arg Gin Gin Gly Glu Arg 50 55 60 Asn Gin Glu Gin Gly Ala Lys Val Arg Leu Gly Arg Gin Val Asp Gly 65 70 75 80 Val Trp Thr Asp Gin Gin Gin Met Ala Leu Glu Ser Thr Leu Val Ser 85 90 95 Leu Leu Gin Glu Arg Arg Asn Ser Gin Gly 100 105
Claims (6)
14 PATENTOVÉ NÁROKY
1 . DNA sloučenina zakodující faktor uvolňující růstovýhormon zahrnující izolovanou DNA sekvenci zakodující SEQID č. 4.
2. Izolovaná DNA sekvence podle nároku 1, kterou jeSEQ ID č. 3.
3. DNA sloučenina zahrnující izolovanou DNA sekvenci,kterou je SEQ ID č. 1.
4. Polypeptidová sloučenina vzorce SEQ ID č. 4.
5. Polypeptidová sloučenina vzorce SSQ ID č. 6.
6. Farmaceutický prostředek, vyznačující setím, že obsahuje jako účinnou látku polypeptidovou slou-čeninu vzorce SEQ ID č. 4 podle nároku 4 nebo její farmaceu-ticky vhodnou sůl s karboxylovou kyselinou nebo adiční sůl s kyselinou a farmaceuticky vhodný pevný nebo kapalný nosič. γϊγττ -< m N JUDr. Otalad
" <c
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US68835491A | 1991-04-19 | 1991-04-19 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS111292A3 true CS111292A3 (en) | 1992-11-18 |
Family
ID=24764090
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS921112A CS111292A3 (en) | 1991-04-19 | 1992-04-13 | Dna compound encoding factor releasing growth-hormone of cattle and apharmaceutical composition containing said compound |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0509831A1 (cs) |
| JP (1) | JPH05227969A (cs) |
| KR (1) | KR920019933A (cs) |
| CN (1) | CN1066193A (cs) |
| AU (1) | AU660665B2 (cs) |
| BR (1) | BR9201408A (cs) |
| CA (1) | CA2066335A1 (cs) |
| CS (1) | CS111292A3 (cs) |
| FI (1) | FI921724A (cs) |
| HU (1) | HUT64594A (cs) |
| IE (1) | IE921248A1 (cs) |
| IL (1) | IL101580A0 (cs) |
| MX (1) | MX9201776A (cs) |
| NO (1) | NO921489L (cs) |
| NZ (1) | NZ242344A (cs) |
| YU (1) | YU40492A (cs) |
| ZA (1) | ZA922695B (cs) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2297375A1 (en) * | 1997-07-24 | 1999-02-04 | Valentis, Inc. | Ghrh expression system and methods of use |
| CN107253991B (zh) * | 2017-05-25 | 2020-07-28 | 中山大学 | 一种基于时间分辨荧光免疫分析技术的斜带石斑鱼生长激素特异性定量检测试剂盒 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ZA844380B (en) * | 1983-07-05 | 1985-01-30 | Salk Inst For Biological Studi | Dna encoding a grf precursor |
| EP0213472A1 (en) * | 1985-08-12 | 1987-03-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Method for producing fusion proteins |
| ZA866026B (en) * | 1985-08-12 | 1988-04-27 | Syntex Inc | Bovine growth hormone releasing factor derivative |
| FR2622455B1 (fr) * | 1987-11-04 | 1991-07-12 | Agronomique Inst Nat Rech | Application du facteur de stimulation de la secretion de l'hormone de croissance humaine, de ses fragments actifs et des analogues correspondants, pour augmenter la production laitiere et le poids des nouveau-nes chez les mammiferes |
| NZ238233A (en) * | 1990-05-29 | 1992-12-23 | Lilly Co Eli | Dna coding for precursor forms of porcine growth hormone releasing factor (pghrf) and related polypeptides |
-
1992
- 1992-04-13 IL IL101580A patent/IL101580A0/xx unknown
- 1992-04-13 NZ NZ242344A patent/NZ242344A/en unknown
- 1992-04-13 CS CS921112A patent/CS111292A3/cs unknown
- 1992-04-13 ZA ZA922695A patent/ZA922695B/xx unknown
- 1992-04-14 JP JP4094119A patent/JPH05227969A/ja not_active Withdrawn
- 1992-04-14 NO NO92921489A patent/NO921489L/no unknown
- 1992-04-15 MX MX9201776A patent/MX9201776A/es unknown
- 1992-04-15 BR BR929201408A patent/BR9201408A/pt not_active Application Discontinuation
- 1992-04-16 FI FI921724A patent/FI921724A/fi not_active Application Discontinuation
- 1992-04-16 EP EP19920303465 patent/EP0509831A1/en not_active Withdrawn
- 1992-04-16 KR KR1019920006371A patent/KR920019933A/ko not_active Application Discontinuation
- 1992-04-16 CN CN92102684A patent/CN1066193A/zh active Pending
- 1992-04-16 CA CA002066335A patent/CA2066335A1/en not_active Abandoned
- 1992-04-16 AU AU14977/92A patent/AU660665B2/en not_active Ceased
- 1992-04-16 IE IE124892A patent/IE921248A1/en not_active Application Discontinuation
- 1992-04-17 HU HU9201321A patent/HUT64594A/hu unknown
- 1992-04-17 YU YU40492A patent/YU40492A/sh unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| YU40492A (sh) | 1994-06-10 |
| CN1066193A (zh) | 1992-11-18 |
| AU1497792A (en) | 1992-10-22 |
| NO921489L (no) | 1992-10-20 |
| FI921724A (fi) | 1992-10-20 |
| HU9201321D0 (en) | 1992-07-28 |
| AU660665B2 (en) | 1995-07-06 |
| FI921724A0 (fi) | 1992-04-16 |
| NO921489D0 (no) | 1992-04-14 |
| HUT64594A (en) | 1994-01-28 |
| ZA922695B (en) | 1993-10-13 |
| JPH05227969A (ja) | 1993-09-07 |
| MX9201776A (es) | 1992-10-01 |
| KR920019933A (ko) | 1992-11-20 |
| NZ242344A (en) | 1993-11-25 |
| BR9201408A (pt) | 1992-12-01 |
| IL101580A0 (en) | 1992-12-30 |
| CA2066335A1 (en) | 1992-10-20 |
| IE921248A1 (en) | 1992-10-21 |
| EP0509831A1 (en) | 1992-10-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU762047B2 (en) | Insulin-like growth factor (IGF) I mutant variants | |
| Lauffer et al. | Topology of signal recognition particle receptor in endoplasmic reticulum membrane | |
| Yasuda et al. | Rat parathyroid hormone-like peptide: comparison with the human homologue and expression in malignant and normal tissue | |
| US6025467A (en) | Parathyroid hormone derivatives and their use | |
| US5382658A (en) | Stability-enhanced variants of parathyroid hormone | |
| EP0309050A1 (en) | Human insulin-like growth factor analogs with reduced binding to serum carrier proteins and their production in yeast | |
| Martı́nez-Barberá et al. | Cloning, expression, and characterization of a recombinant gilthead seabream growth hormone | |
| US8143374B2 (en) | Polypeptide derivatives of parathyroid hormone (PTH) | |
| PT750626E (pt) | Proteina dos corpusculos de stannius, a stanniocalcina | |
| EP2030986A1 (en) | Polypeptide derivative of parathyroid hormone (PTH) | |
| CS111292A3 (en) | Dna compound encoding factor releasing growth-hormone of cattle and apharmaceutical composition containing said compound | |
| JPH0568559A (ja) | ブタ成長ホルモン放出因子前駆体および関連ｄｎａ化合物 | |
| KR970009159B1 (ko) | 돼지 성장호르몬 동족체를 암호화하는 디엔에이 | |
| CA2057895A1 (en) | Stabilized, potent grf analogs | |
| JPH09157294A (ja) | 副甲状腺ホルモン誘導体 | |
| CA2702760C (en) | Insulin-like growth factor (igf) i mutant variants | |
| NZ223842A (en) | Porcine growth hormone analogues, production using genetic engineering and compositions for promoting growth in mammals | |
| JP2001512481A (ja) | 視床下部ソマトスタチン放出の調節方法 |