CN1066193A - 牛生长激素释放因子的前体形式及有关的dna化合物 - Google Patents
牛生长激素释放因子的前体形式及有关的dna化合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1066193A CN1066193A CN92102684A CN92102684A CN1066193A CN 1066193 A CN1066193 A CN 1066193A CN 92102684 A CN92102684 A CN 92102684A CN 92102684 A CN92102684 A CN 92102684A CN 1066193 A CN1066193 A CN 1066193A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bgrf
- seq
- precursor
- compound
- acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 46
- 239000002243 precursor Substances 0.000 title abstract description 31
- 101000825768 Bos taurus Somatoliberin Proteins 0.000 title abstract description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 39
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 22
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 21
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 8
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 abstract description 9
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 abstract description 9
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 abstract description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 abstract description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 17
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 13
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 6
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 description 4
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 4
- WFAJBYGUONQMCI-UHFFFAOYSA-N acetic acid urea Chemical compound NC(=O)N.NC(=O)N.NC(=O)N.NC(=O)N.NC(=O)N.NC(=O)N.C(C)(=O)O WFAJBYGUONQMCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001734 carboxylic acid salts Chemical class 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000003182 parenteral nutrition solution Substances 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 229960005137 succinic acid Drugs 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Chemical class 0.000 description 1
- 229910001413 alkali metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001420 alkaline earth metal ion Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005267 amalgamation Methods 0.000 description 1
- -1 amine salt Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- KFGRVLINLVVMJA-MITYVQBRSA-N chembl440262 Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 KFGRVLINLVVMJA-MITYVQBRSA-N 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003631 expected effect Effects 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000011177 media preparation Methods 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical class C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 108010056001 somatotropin releasing hormone (1-29) Proteins 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/61—Growth hormone [GH], i.e. somatotropin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供一些多肽化合物，这些化合物为两种
形式的牛生长激素释放因子(bGRF)前体和bGRF
先导肽，以及一种新形式的成熟bGRF。本发明还
提供编码这些多肽化合物和成熟bGRF的DNA化
合物、诱导生长激素释放的药物组合物及方法。
Description
生长激素释放因子（GRF）可用来刺激人和动物体内生长激素的产生。牛GRF（bGRF）的兽医学应用特别重要。现已阐明了成熟bGRF的氨基酸顺序（Esch等，BBRC 117：772-779，1983）。然而，在本发明之前，一直没有搞清编码bGRF的天然DNA顺序。本发明提供了前所未知的多肽化合物，包括两种形式的bGRF前体和bGRF肽。本发明还包括编码本发明多肽化合物和成熟bGRF的DNA化合物。
本发明提供的DNA化合物包括编码牛生长激素释放因子、bGRF前体及bGRF先导肽的DNA顺序。本发明提供的多肽化合物中除了与bGRF前体相连的bGRF先导肽之外，还包括bGRF前体。
本发明的多肽化合物为SEQ ID No.4或6及其可药用酸加成盐或羧酸加成盐。
本发明的DNA化合物包括编码成熟bGRF、bGRF前体和bGRF先导肽的DNA顺序。编码成熟bGRF的优选DNA顺序为SEQ ID No.1。
编码bGRF前体的优选DNA顺序为SEQ ID No.3。
编码前面接有先导肽顺序的bGRF前体的优选DNA顺序为SEQ ID No.5。
本发明还提供了一些药物组合物，其中的活性成分为包含bGRF前体的多肽化合物。最后，本发明提供诱导生长激素释放的方法，该方法包括给予包含bGRF前体的多肽化合物。这些组合物和方法可用于在包括人、猪、牛、羊、禽类和鱼在内的各种动物体内诱导生长激素的释放。这些组合物和方法优选用于牛。
下列章节对本发明作了更详细的叙述。为清楚和便于理解本发明起见，下列术语和缩写定义如下。
GRF：具有生长激素释放因子活性的多肽。
GRF（1-29）NH2：GRF中达到全部效力所需的最少部分。
大肠杆菌中的高水平表达：以能用考马斯蓝染色法检测出基因产物的水平生产由克隆基因编码的GRF类似物。
孤立DNA顺序：其位置与其在基因组DNA中的天然位置不同的任何DNA顺序，无论是怎样构建或合成的。此定义包括除天然态以外所有形式的孤立DNA顺序。例如，该DNA顺序可以***到质粒或噬菌体载体中，或者***到它原来所在的有机体或任何其他有机体的基因组中，以增加基因剂量。
成熟bGRF：bGRF（1-44）;SEQ ID No.2
bGRF前体：bGRF（1-76）;SEQ ID No.4
这里提供的附图未按确切比例画出。
图1：质粒pHS 507的限制位点和功能图谱。
本发明提供一些孤立DNA化合物，这些化合物包含编码成熟生长激素释放因子、bGRF前体和与bGRF前体相连的bGRF先导肽的DNA顺序。本发明还提供一些多肽化合物。
虽然以前已阐明了一种形式的成熟bGRF的氨基酸结构（Esch等，Biochem.Biophys.Res.Commun.117：772，1983），但本发明提供的是迄今为止尚属未知的bGRF前体。该前体化合物可由SEQ ID No.4及其可药用酸加成盐或羧酸加成盐表示。这种bGRF前体特别有用，因为它满足了本领域对具有bGRF活性且能在大肠杆菌中高水平产生的化合物的需求。这些化合物的大小足以避免在大肠杆菌中成熟GRF表达过程中所遇到的严重降解问题（参见例如Kirschner等，J.Biotech.12：247-248，1989）。
本发明的另一种多肽化合物是在氨基末端连有bGRF先导肽的bGRF前体。该化合物可由SEQ ID.No.6及其可药用酸加成盐或羧酸加成盐表示。
SEQ ID No.6化合物在哺乳动物细胞中产生时特别有用。先导肽引起多肽产物的分泌，随着产物的分泌而切除先导肽。
本发明的所有肽化合物都可由本领域公知的化学方法来制备，包括固相肽合成法或重组法。这两种方法都描述于美国专利4，617，149，该专利在此列为参考。如果希望达到高产率，则优选重组法。构建任何所需DNA顺序的一般方法见Brown等人的报导（Methods in Enzymology，68：109，1979），该文献在此列为参考。
这些DNA顺序可以用DNA自动合成仪来合成，例如用ABS（Applied Biosystems，850 Lincoln Center Drive，Foster City，CA 94404）380B型DNA合成仪。这些DNA顺序也可通过聚合酶链反应来产生。参见例如1987年3月2日公开的美国专利公告0258017。
本发明多肽化合物的氨基酸顺序可由多个不同的DNA顺序来编码，因为大部分氨基酸都由不止一个DNA三联体编码。由于这些可替换DNA顺序编码相同的氨基酸顺序，所以本发明还包括这些可替换顺序。
专业人员公认，多肽在大肠杆菌中的翻译是通过甲硫氨酸残基起始的。本发明的多肽并不以甲硫氨酸起始。所以上述化合物可以以多种方式产生。该多肽化合物表达后，通过多种公知途径中的任一途径切除由甲硫氨酸或甲硫氨酸与另一些氨基酸组成的先导顺序。参见例如：美国专利4，745，069和4，782，139;Villa等，Eur.J.Biochem.171：137，1988;Geli等，Gene 80：129，1989;欧洲专利公开0199018。
其他生产途径是专业人员所公知的。例如，用SV40衍生载体在真核细胞中产生这些化合物。通过bGRF前体cDNA顺序实现在真核细胞中的表达。美国专利4，775，624描述了这样一种方法。一些可替代的表达方法描述于J.Sambrook，E.F.Fritsch & T.Maniatis，Molecular Cloning：A Laboratory Manual 16.3-17.44，1989。在啤酒酵母中进行基因表达的方法详述于《Current Protocols in Molecular Biology》一书（F.M.Ausubel，R.Brent，R.E.Kingston，D.D.Moore，J.G.Seidman，J.A.Smith & K.Struhl，1989）。
本发明的DNA顺序编码本发明的多肽化合物和成熟bGRF。成熟bGRF的氨基酸顺序是已知的，但编码它的DNA顺序在本发明之前一直是未知的。
本发明的多肽化合物包括它们的可药用无毒酸加成盐，以及它们的可药用无毒羧酸盐。
术语“可药用无毒酸加成盐”既包括有机酸加成盐也包括无机酸加成盐，包括例如由下列酸制得的盐：盐酸、氢氟酸、硫酸、磺酸、酒石酸、富马酸、氢溴酸、羟基乙酸、柠檬酸、马来酸、磷酸、琥珀酸、乙酸、硝酸、苯甲酸、抗坏血酸、对甲苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸、丙酸等。酸加成盐最好是由盐酸、乙酸或琥珀酸制得的盐。所有上述盐都可由常规方法制备。
术语“羧酸盐”包括，例如胺盐、铵盐、季铵盐、碱金属和碱土金属盐（例如钙盐、镁盐、钠盐、钾盐和锂盐）等。
本发明还提供一种药物组合物，该组合物包含作为活性成分的多肽化合物或其可药用的酸加成盐或羧酸加成盐，以及可药用的固体或液体载体，其中所述多肽化合物为SEQ ID No.4。
本发明还提供一种诱导生长激素释放的方法，该方法包括：给予有效量的由SEQ ID No.4表示的多肽化合物或其可药用的酸加成盐或羧酸加成盐。
在需要刺激生长激素释放的时间内，给予受药者若干剂量的本发明前体化合物。受药者的体重和给药方式将影响诱导特定反应所需剂量的大小。对牛来说，优选剂量估计为约3毫克/天。
肠胃外给予本发明的多肽化合物时，适于注射用的药物剂型包括无菌水溶液或分散液，以及可供复原为无菌注射液或分散液的无菌粉末。载体可以是含有以下物质的溶剂或分散介质：例如，水、乙醇、多元醇（例如甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等）、上述物质的合适混合物、或植物油。可以用以下手段保持适当的流动性：例如，使用包衣如卵磷脂、在分散液的情况下保持所要求的粒度、以及使用表面活性剂。用各种抗细菌剂和抗真菌剂，如对羟基苯甲酸酯类、氯丁醇、苯酚、山梨酸等，可以确保防止微生物的作用。在许多情况下都希望加入等渗剂，如糖类、氯化钠等。使用延迟吸收剂，例如单硬脂酸铝和明胶，可以使注射用药物剂型达到长期吸收。
将本发明化合物与所需要的各种其它试剂一起加到所需量的适当溶剂中，即可制得无菌注射液。如果需要，或者为了使化合物分布更为有效，可以把化合物掺入缓释体系或定靶释放体系，如聚合物基质、脂质体和微球体。可以通过机械释放装置、渗透压泵、或能连续或脉动释放的任何其他释放装置或体系来释放。由于肽类化合物的给药技术刚刚起步，预计这一技术将会出现重大进展。本发明化合物可用这些新方法给药。
特别有利的是把本发明化合物配制成单位剂型，这样既便于给药也能使剂量均一。这里所用的单位剂型是指对治疗对象来说适于作为单位剂量的物理上独立的单元。每个单元含有经计算能达到预期疗效的预定量的化合物，以及可药用的载体。具体的单位剂型受制于或直接取决于以下两个因素：（a）特定组合物的独特特征;（b）所要达到的特定疗效。
下列实施例说明本发明，但并不打算限制其范围。
实施例1
bGRF前体在大肠杆菌中的表达
质粒pHS 507可从NRRL以大肠杆菌DH5 a/pHS 507株得到，其登记号为B-18766（保藏日：1991年2月9日）。用美国专利4，828，988的方法表达bGRF前体，上述专利在此列为参考。
实施例2
bGRF前体的纯化
用S Sepharose（Pharmacia，800 Centennial Ave.，Piscataway，NJ 08854）树脂制备阳离子交换柱。该柱中每50克材料含有1升树脂。将含有bGRF前体的物料以0.1升/厘米2/小时的流速加到柱中，用2个柱体积的含0.05N乙酸-7M脲的0.1M氯化钠洗涤。用各为3个柱体积的0.25M和1.6M氯化钠在乙酸-脲中的溶液形成0.25M-1.6M线性梯度，对多肽进行洗脱，以0.1个柱体积为一个级分进行收集。利用导电性、O.D.276、HPLC和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定出含多肽的级分，然后合并这些级分。
各级分合并后向其中加入等体积的乙酸-脲溶液。将该物料加到装有S Sepharose树脂并以乙酸-脲为介质的柱上，树脂的粒度为每升树脂能容纳50克蛋白质。流速为0.02升/厘米2/小时。用0.25M氯化钠在乙酸-脲中的线性梯度洗脱bGRF前体级分。以0.1个柱体积为一个级分进行收集。如上所述分析各级分，合并含bGRF前体的级分。
以0.02M甘氨酸（pH 2.5）为介质制备一个Sephadex G-15（Pharmacia）柱，其柱体积相当于前面所合并各级分总体积的5倍。分离出含O.D.276峰的级分。
然后制备一个装有SP20SS树脂（Sephabeads，Mitsubishi Chemical，Tokyo）并以10%乙腈-0.02M甘氨酸（pH 2.5）为介质的柱。将含bGRF前体的合并液调至乙腈浓度为10%，然后加到柱中，流速为每小时1.5-2个柱体积。用2个柱体积的乙腈-甘氨酸缓冲液洗柱。由三个柱体积的10%乙腈-0.02M甘氨酸与三个柱体积的50%乙腈-0.02M甘氨酸混合形成梯度，用该梯度来洗脱bGRF前体。以0.1个柱体积为一个级分进行收集，并分析各级分中是否含有bGRF前体。
然后，将含bGRF前体的物料在用0.25M乙酸平衡过的Sephadex G 15柱上进行层析。然后分离出O.D.276峰，冷冻干燥后备用。
顺序表
（1）概况
（ⅰ）申请人：Bierman，Kristin L.
Chan，Ging
Heiman，Mark L.
Hsiung，Hansen M.
（ⅱ）发明名称：牛生长激素释放因子的前体形式及有关的DNA化合物
（ⅲ）顺序数目：6
（ⅳ）通讯地址：美国印第安纳州印第安纳波利斯利利总部中心专利部/AEH。邮区：46285。
（ⅴ）计算机可读形式：
（A）存储介质类型：软盘
（B）计算机：Macintosh
（C）操作***：Macintosh
（D）软件：Microsoft Word
（ⅵ）本申请资料：
（A）申请号：
（B）申请日：
（C）分类：
（ⅷ）代理机构情况：
（A）名称：中国专利代理（香港）有限公司
（B）代理机构代码：72001
（C）代理案号CPCH 926116W（B032）
（ⅸ）电信通讯：
（A）电话：8284688
（B）传真：8271018、8271172、8271638
（2）SEQ ID No.1情况：
（ⅰ）顺序特性：
（A）长度：132碱基对
（B）类型：核酸
（C）成链性：双链
（D）拓扑结构：线型
（ⅱ）分子类型：cDNA
（ⅸ）特征：
（A）名称/关键字：CDS
（B）存储位置：1..132
（ⅹⅰ）顺序说明：SEQ ID No.1：
（2）SEQ ID No.2情况：
（ⅰ）顺序特性：
（A）长度：44个氨基酸
（B）类型：氨基酸
（D）拓扑结构：线型
（ⅱ）分子类型：蛋白质
（ⅹⅰ）顺序说明：SEQ ID No.2：
（2）SEQ ID No.3情况：
（ⅰ）顺序特性：
（A）长度：228碱基对
（B）类型：核酸
（C）成链性：双链
（D）拓扑结构：线型
（ⅱ）分子类型：cDNA
（ⅸ）特征：
（A）名称/关键字：CDS
（B）存储位置：1..228
（ⅹⅰ）顺序说明：SEQ ID No.3：
（2）SEQ ID No.4情况：
（ⅰ）顺序特性：
（A）长度：76个氨基酸
（B）类型：氨基酸
（D）拓扑结构：线型
（ⅱ）分子类型：蛋白质
（ⅹⅰ）顺序说明：SEQ ID No.4：
（2）SEQ ID No.5情况：
（ⅰ）顺序特性：
（A）长度：318碱基对
（B）类型：核酸
（C）成链性：双链
（D）拓扑结构：线型
（ⅱ）分子类型：cDNA
（ⅸ）特征：
（A）名称/关键字：CDS
（B）存储位置：1..318
（ⅹⅰ）顺序说明：SEQ ID No.5：
（2）SEQ ID No.6情况：
（ⅰ）顺序特性：
（A）长度：106个氨基酸
（B）类型：氨基酸
（D）拓扑结构：线型
（ⅱ）分子类型：蛋白质
（ⅹⅰ）顺序说明：SEQ ID No.6：
Claims (3)
1、一种在动物体内诱导生长激素释放的方法，该方法包括：给予有效量的SEQ LD No.4多肽化合物及其可药用的酸加成盐或羧酸加成盐。
2、一种在重组宿主细胞中产生式SEQ ID No.4多肽化合物的方法，该方法包括：
（1）用一种重组载体转化宿主细胞，该重组载体包括：
（a）一个转录和翻译活化顺序;
（b）SEQ ID No.3的DNA化合物，其定位使它能够由活化顺序得到表达;
（2）在允许基因表达的条件下培养步骤（1）中转化的宿主细胞。
3、一种在重组宿主细胞中产生式SEQ ID No.6多肽化合物的方法，该方法包括：
（1）用一种重组载体转化宿主细胞，该重组载体包括：
（a）一个转录和翻译活化顺序;
（b）SEQ ID No.5的DNA化合物，其定位使它能够由活化顺序得到表达;
（2）在允许基因表达的条件下培养步骤（1）中转化的宿主细胞。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US68835491A | 1991-04-19 | 1991-04-19 | |
| US688,354 | 1991-04-19 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1066193A true CN1066193A (zh) | 1992-11-18 |
Family
ID=24764090
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN92102684A Pending CN1066193A (zh) | 1991-04-19 | 1992-04-16 | 牛生长激素释放因子的前体形式及有关的dna化合物 |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0509831A1 (zh) |
| JP (1) | JPH05227969A (zh) |
| KR (1) | KR920019933A (zh) |
| CN (1) | CN1066193A (zh) |
| AU (1) | AU660665B2 (zh) |
| BR (1) | BR9201408A (zh) |
| CA (1) | CA2066335A1 (zh) |
| CS (1) | CS111292A3 (zh) |
| FI (1) | FI921724A (zh) |
| HU (1) | HUT64594A (zh) |
| IE (1) | IE921248A1 (zh) |
| IL (1) | IL101580A0 (zh) |
| MX (1) | MX9201776A (zh) |
| NO (1) | NO921489L (zh) |
| NZ (1) | NZ242344A (zh) |
| YU (1) | YU40492A (zh) |
| ZA (1) | ZA922695B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2297375A1 (en) * | 1997-07-24 | 1999-02-04 | Valentis, Inc. | Ghrh expression system and methods of use |
| CN107253991B (zh) * | 2017-05-25 | 2020-07-28 | 中山大学 | 一种基于时间分辨荧光免疫分析技术的斜带石斑鱼生长激素特异性定量检测试剂盒 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ZA844380B (en) * | 1983-07-05 | 1985-01-30 | Salk Inst For Biological Studi | Dna encoding a grf precursor |
| EP0213472A1 (en) * | 1985-08-12 | 1987-03-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Method for producing fusion proteins |
| ZA866026B (en) * | 1985-08-12 | 1988-04-27 | Syntex Inc | Bovine growth hormone releasing factor derivative |
| FR2622455B1 (fr) * | 1987-11-04 | 1991-07-12 | Agronomique Inst Nat Rech | Application du facteur de stimulation de la secretion de l'hormone de croissance humaine, de ses fragments actifs et des analogues correspondants, pour augmenter la production laitiere et le poids des nouveau-nes chez les mammiferes |
| NZ238233A (en) * | 1990-05-29 | 1992-12-23 | Lilly Co Eli | Dna coding for precursor forms of porcine growth hormone releasing factor (pghrf) and related polypeptides |
-
1992
- 1992-04-13 IL IL101580A patent/IL101580A0/xx unknown
- 1992-04-13 NZ NZ242344A patent/NZ242344A/en unknown
- 1992-04-13 CS CS921112A patent/CS111292A3/cs unknown
- 1992-04-13 ZA ZA922695A patent/ZA922695B/xx unknown
- 1992-04-14 JP JP4094119A patent/JPH05227969A/ja not_active Withdrawn
- 1992-04-14 NO NO92921489A patent/NO921489L/no unknown
- 1992-04-15 MX MX9201776A patent/MX9201776A/es unknown
- 1992-04-15 BR BR929201408A patent/BR9201408A/pt not_active Application Discontinuation
- 1992-04-16 FI FI921724A patent/FI921724A/fi not_active Application Discontinuation
- 1992-04-16 EP EP19920303465 patent/EP0509831A1/en not_active Withdrawn
- 1992-04-16 KR KR1019920006371A patent/KR920019933A/ko not_active Application Discontinuation
- 1992-04-16 CN CN92102684A patent/CN1066193A/zh active Pending
- 1992-04-16 CA CA002066335A patent/CA2066335A1/en not_active Abandoned
- 1992-04-16 AU AU14977/92A patent/AU660665B2/en not_active Ceased
- 1992-04-16 IE IE124892A patent/IE921248A1/en not_active Application Discontinuation
- 1992-04-17 HU HU9201321A patent/HUT64594A/hu unknown
- 1992-04-17 YU YU40492A patent/YU40492A/sh unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| YU40492A (sh) | 1994-06-10 |
| AU1497792A (en) | 1992-10-22 |
| NO921489L (no) | 1992-10-20 |
| FI921724A (fi) | 1992-10-20 |
| HU9201321D0 (en) | 1992-07-28 |
| AU660665B2 (en) | 1995-07-06 |
| FI921724A0 (fi) | 1992-04-16 |
| NO921489D0 (no) | 1992-04-14 |
| HUT64594A (en) | 1994-01-28 |
| ZA922695B (en) | 1993-10-13 |
| JPH05227969A (ja) | 1993-09-07 |
| MX9201776A (es) | 1992-10-01 |
| KR920019933A (ko) | 1992-11-20 |
| NZ242344A (en) | 1993-11-25 |
| BR9201408A (pt) | 1992-12-01 |
| IL101580A0 (en) | 1992-12-30 |
| CA2066335A1 (en) | 1992-10-20 |
| CS111292A3 (en) | 1992-11-18 |
| IE921248A1 (en) | 1992-10-21 |
| EP0509831A1 (en) | 1992-10-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU635769B2 (en) | Growth hormone-releasing factor analogs | |
| AU634517B2 (en) | Somatotropin analogs | |
| AU725201B2 (en) | Insulin derivatives with increased zinc binding | |
| EP0235205A1 (en) | PEPTIDE ANALOGS OF INSULIN-LIKE GROWTH FACTOR 1 IN MAMMALS. | |
| PL183698B1 (pl) | Pochodna insuliny, kompozycja farmaceutyczna i zastosowanie pochodnej insuliny | |
| JPH01156998A (ja) | 血清担体タンパク質との結合力が減少しているヒトインスリン様成長因子類以体及び酵母におけるそれらの産生 | |
| IE842398L (en) | Growth hormone release factor analogs | |
| JP2002530111A5 (zh) | ||
| JP2009149639A (ja) | 電気輸送流量を増加させる、ポリペプチド系薬物の修飾 | |
| JP2004531242A5 (zh) | ||
| CN1158304C (zh) | 蛙皮抗菌肽衍生物 | |
| CN1066193A (zh) | 牛生长激素释放因子的前体形式及有关的dna化合物 | |
| Mahmoud et al. | Cloning and sequencing of the goldfish growth hormone cDNA | |
| CN1120549A (zh) | 降钙素类似物及其应用 | |
| Sciara et al. | Muscular hypertrophy and growth‐promoting effects in juvenile pejerrey (Odontesthes bonariensis) after oral administration of recombinant homologous growth hormone obtained by a highly efficient refolding process | |
| NZ238233A (en) | Dna coding for precursor forms of porcine growth hormone releasing factor (pghrf) and related polypeptides | |
| JP2004533846A5 (zh) | ||
| RU2004104335A (ru) | Биологически активные пептиды | |
| CN1032014A (zh) | 环形生长激素释放因子(grf)类似物及其制备方法 | |
| CN1288754A (zh) | 提高饲料效率和家畜生长速度的基因处理 | |
| US6323178B1 (en) | Beta-lipotropin methods | |
| KR100233804B1 (ko) | 초활성 grf 유사체 | |
| CN1532289A (zh) | 用重组大肠杆菌制备N-末端乙酰化修饰的胸腺素α的方法 | |
| CN1946845A (zh) | 水解核糖核酸（RNAs）的化合物 | |
| Chang et al. | Molecular Biological Studies on Animal Growth Hormones |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C01 | Deemed withdrawal of patent application (patent law 1993) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |