CN202383144U - 三聚氰胺快速测试盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型通过对三聚氰胺测试盒外形和结构的改进,结合在点膜的蛋白溶液中加入有颜色染料,例如黄色,使得点膜后形成有色的质控带与检测带,使后续检查工作,组装工作更加简单、快速,同时以不同的颜色来区分不同产品,节约流程和时间,提高了产品使用的普遍性和可操作性。
Description
技术领域
本实用新型属于一种检测样品中三聚氰胺的快速测试盒,这种测试盒采取胶体金免疫层析检测技术,属于食品安全检测领域。
背景技术
三聚氰胺是一种低毒、无味的纯白色单斜棱晶体,形似蛋白粉,属于三嗪类含氮杂环有机化合物,广泛应用于塑料、染料、化肥的生产和纺织行业。由于三聚氰胺分子含氮量很高,只要添加到食品中就可在检测中造成蛋白质含量较高的假象。目前在饲料、牛奶、奶粉、饼干、奶糖等相关产品均发现有三聚氰胺残留现象。动物实验结果表明,三聚氰胺的摄入可能会导致繁殖障碍、膀胱炎、慢性肾炎、肾结石、甚至膀胱癌。
三聚氰胺的检测有各种色谱-质谱及联用、免疫检测方法如酶联免疫与胶体金法等。胶体金法快检卡因为其操作简单,结果立刻可显等优点,尤其在现场检测中有不可替代的作用。
传统的胶体金快检卡的观察窗口为一段外露的硝酸纤维素膜。观察方式一般为由无色出现红色的线条。但硝酸纤维素膜材质较软,在生产及使用中容易受外界压力出现划痕,反应中胶体金可能在划痕中沉积显色,另外一些非特异性的胶体金污点也会造成判读的困难。
发明内容
针对现有快检卡存在的其硝酸纤维素膜在生产及使用中容易受外界压力出现划痕,反应中胶体金可能在划痕中沉积显色,造成判读的困难的问题,本实用新型提供了一种三聚氰胺快速测试盒,包括卡盒和测试条,卡盒分为上下两片,上片依次开有加样孔、观察窗口,上下两片卡接,测试条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫搭接而成,固定于卡盒的下片,其中硝酸纤维素膜上标有黄色的质控带和检测带,金标垫上设置胶体金三聚氰胺单克隆抗体。并在测试条上的检测带设置有三聚氰胺抗原;质控带设置羊抗鼠IgG的第二抗体,吸收垫上有层黄色着色签,上下两片盒体内部由多个不同形状的小凸起,用于固定测试条。
本实用新型的目的是针对硝酸纤维素膜的检测带或质控带进行黄色染料预先标注后,使用者对最终免疫反应显色位点有预期,从而能更方便地分析判读检测结果。同时使三聚氰胺测试盒生产与质检中可以对点膜的效果、卡盒装配的位置方便地进行质量控制。而且黄色的检测带或质控带还可以用于区分三聚氰胺测试与其他不同成分产品的测试。
附图说明
图1测试盒结构图
图2测试条剖面图
图3测试条结构图
其中,(1)加样孔 (2)样品垫 (3)PVC底板 (4)金标垫 (5)硝酸纤维素膜 (6)观察窗口 (7)质控带 (8)固定小凸起 (9)吸收垫 (10)着色签 (11)卡盒下片 (12) 检测带 (13)卡盒上片
具体实施方式
本三聚氰胺快速测试盒目的是这样实现的:如图1、2、3所示,包括卡盒和测试条,卡盒分为上下两片,上片依次开有加样孔、观察窗口、上下两片卡接,测试条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫搭接而成,固定于卡盒的下片,其中上下两片盒体内部由多个不同形状的小凸起来固定测试条,硝酸纤维素膜上标有黄色的质控带和检测带,吸收垫上层有黄色着色签,金标垫上设置三聚氰胺单克隆抗体,测试条上的检测带设置有三聚氰胺抗原,测试条上的质控带设置羊抗鼠IgG的第二抗体。
在生产过程硝酸纤维素膜上划膜时,划膜液中预先加入黄色染料,例如草酚蓝。这样划膜完成后,硝酸膜上就留有一条黄色的条带。干燥后,色带清晰可见。条带是否均一也反映了划膜的质量。生产中可以方便将划膜质量不好的区段弃除。
后期的装配过程可以利用染料色带可以用来控制装配位置,分切小条装配后,硝酸膜上的染料带仍能通过卡盒的观察窗口进行检查。因此染料带可以用来控制卡盒的装配位置。
成品质检时,也可以增设条带位置偏差的项目。使用者在操作测试盒时,可以观察到染料条带由原有的黄色变为无色或红色的过程。使用者可以准确预知检测带与质控带的位置,从而不会被其它区域的异常色斑、线条等干扰。
本三聚氰胺快速测试盒的吸收垫上层还可以加有黄色不干胶的着色签,如图2所示,主要是用于区分三聚氰胺快速测试盒与不同成分的产品检测,使得测试盒在装配时不会和其他产品相混淆。
实施例一:本实用新型的三聚氰胺快速测试盒包括一塑料卡盒。长度是6~10cm,宽度是1~3cm,厚度为0.3~0.6cm。卡盒正面有二个窗孔,一个为加样孔,一个为观察窗。加样孔长度为0.5~1cm,观察窗为1~3cm。观察窗口可以看见硝酸纤维素膜上质控区的黄色条带。条带宽度为0.3~1mm。
使用本实用新型时,在加样孔滴加样品2滴,展开液1滴。液体向观察窗方向流动。质控区黄色褪去变为红色,代表实验有效。如果检测区也出现红色条带,代表样品为阴性结果。如果检测区没有出现红色条带,代表样品为阳性结果。
实施例二:
本三聚氰胺快速测试盒外壳用硬质塑料制成;样品垫用玻璃纤维棉制成;因为玻璃纤维棉粉尘较大,所以金标垫采用聚脂膜替代;与硝酸纤维素膜和吸收垫依次粘贴固定在PVC底板上,彼此之间交界处纤维互相搭接,构成所述的测试条,硝酸纤维素膜测试条上用黄色水溶性颜料划膜形成质控带和检测带,检测带上预先固化的活性成份是三聚氰胺抗原,质控带上预先固化的活性成份是羊抗鼠IgG的第二抗体,金标垫上的活性成份是可溶解的胶体金标记三聚氰胺单克隆抗体,在样本垫上加入液体样品后,样品与金标垫上溶解下来的单克隆抗体可以向上层析依次经过金标垫、硝酸纤维素膜、吸收垫,如图3所示。
如果样品中不含有三聚氰胺或三聚氰胺的含量低于临界值,则金标垫上的三聚氰胺单克隆抗体不能被完全中和,它将被检测带上的三聚氰胺抗原捕获,形成红色条带,多余的单克隆抗体再向上流至质控带,被质控带上的羊抗鼠捕获,形成红色条带。如果样品中的三聚氰胺或含量高于临界值,则金标垫上的三聚氰胺单克隆抗体被样品完全中和,它将不能被检测带上的三聚氰胺抗原捕获,不能形成红色条带,但仍能被质控带上的羊抗鼠捕获,形成红色条带。
因此,检测带由黄色变为红色时,判定为阴性结果,即样品中不含三聚氰胺或含量低于临界值。检测带由黄色变为无色时,判定为阳性结果,即样品中的三聚氰胺含量高于临界值。不论样品的阴阳性结果,质控带均会由黄色变为红色。
实施例三:
检测带制备:用0.01M PBS缓冲液,PH6.0-8.0,将三聚氰胺抗原(MEL-BSA)稀释至1-4mg/ml,按0.5~ml /cm的量点在硝酸纤维素膜预定的位置上。
质控带制备:用0.01M PBS缓冲液,PH6.0-8.0,将羊抗鼠IgG稀释至2-6mg/ml,黄色水溶性颜料1:5000~1:20000。按0.5~1ml /cm的量点在硝酸纤维素膜预定的位置上。
金标垫制备:将胶体金标记的抗三聚氰胺单克隆抗体浓缩至OD值3.0-6.0,喷涂在聚脂膜上,将聚脂膜按4-8mm切为窄条,将硝酸膜粘贴于30cm长度的底板中部,质控带在上,检测带在下。上方粘贴一条2~4cm宽度的吸收垫条,并搭接在硝酸膜上1~3mm,吸收垫条上粘贴一条1~3cm宽度的黄色签。硝酸膜下方粘贴金垫条,搭接硝酸膜1~3mm,金垫条下再粘接2~4mm宽度的样品垫,样品垫搭接金垫2~6mm。制成物可称为大板,将大板按3~4mm切为小条,小条装入塑料合下片,盖上上片压紧,形成完整的检测卡。
使用时,将液体牛奶或其它样品滴入一滴(约30ml)于样品孔,再滴入展开液(0.02M PBS)一滴(约50ml)于样品孔,液体逐渐向上流动。于5~15分钟内判定结果。如检测带由黄色变为红色,则为阴性。如检测带颜色无变化,则为阳性结果。表示三聚氰胺含量在1ppm以上。质控线应由桔黄色变为红色,表示测试有效。质控线由黄色变为无色,表示测试无效。
反应流程如下:样品滴入加样区,在样品中没有三聚氰胺或含量低于临界点时,胶体金抗体在层析过程中会被固定在膜上的三聚氰胺捕获,在检测带出现一条红色条带。如果三聚氰胺在样品中浓度高于临界点时,胶体金标记的单克隆抗体与被样品中的三聚氰胺全部结合,因此检测带内不会出现红色条带。另外硝酸纤维素膜上还有一个质控带,预先固定的是第二抗体等捕获IgG的物质,不论样品中是否有三聚氰胺,均能捕获单抗,从而出现红色条带。
上述快检卡为单卡铝箔袋包装,每袋中还包括干燥剂一个,塑料滴管一个。
Claims (3)
1.一种三聚氰胺快速测试盒,包括卡盒和测试条,卡盒分为上下两片,上片依次开有加样孔、观察窗口、上下两片卡接,测试条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫搭接而成,固定于卡盒的下片,其特征在于:硝酸纤维素膜上标有黄色的质控带和检测带,金标垫上设置胶体金三聚氰胺单克隆抗体,测试条上的检测带设置有三聚氰胺抗原,测试条上的质控带设置抗鼠IgG的第二抗体。
2.根据权利要求1所述的三聚氰胺检测试剂盒,其特征在于:上下两片盒体内部由多个不同形状的小凸起。
3. 根据权利要求1所述的三聚氰胺检测试剂盒,其特征在于:吸收垫上有层黄色的着色签。
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CN104950107A (zh) * | 2014-03-25 | 2015-09-30 | 兰州红虫生物工程有限责任公司 | 一种可同时检测尿素和三聚氰胺的试纸条 |
CN107748252A (zh) * | 2017-11-29 | 2018-03-02 | 洛阳莱普生信息科技有限公司 | 基于荧光微球的检测山羊传染性胸膜肺炎抗体的免疫试纸卡、制备及检测方法 |
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