CN1996007A - 苹果汁或脱色苹果汁中掺入梨汁的鉴别和测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种梨中特有而苹果中没有的多酚类物质—熊果苷的鉴别和测定方法。用高效液相色谱法测定熊果苷,作为苹果汁或脱色苹果汁(苹果果糖)中掺入梨汁的鉴定方法。此法可确定苹果汁或脱色苹果汁(苹果果糖)是纯正单一品种,还是苹果与梨加工的混合果汁或果糖。用高效液相色谱法测定熊果苷具有很好的专一性和较高的灵敏度,用其判定苹果汁或脱色苹果汁(苹果果糖)中是否混有梨汁准确、简单、可操作性强。
Description
技术领域
本发明涉及一种梨中特有而苹果中没有的多酚类有机物质—熊果苷的鉴别和测定方法,用于鉴定果汁是纯正苹果汁还是混有梨汁的混合苹果汁。
背景技术
苹果汁含有丰富的钾、有机酸和果糖,受到普遍欢迎。中国是世界上最大的苹果种植和果汁加工的国家,苹果汁贸易量占世界贸易的60%以上,2005年出口浓缩苹果汁64.8万吨,中国的苹果汁对世界苹果汁贸易价格和质量有着重要的影响,其加工能力世界第一,并且不断有新的苹果汁生产厂家和加工生产线出现,榨汁用苹果原料有出现短缺的迹象,随着自然灾害的影响和苹果收获周期性的大小年出现,苹果原料制约着苹果汁的生产。梨与苹果一样,是我国北方主要水果之一,梨汁与苹果汁的酸度、糖度等差别不大,在缺乏苹果原料的时候,有将梨与苹果一同加工生产果汁的可能,所以鉴定果汁是纯正苹果汁还是混有梨汁的混合苹果汁非常重要,涉及整个产业的安全和国际贸易的顺利进行。有用酸度、糖度、色泽(透光率)等指标来综合判定苹果汁与梨汁方法,该法存在着无特征指标、影响因素多、判定困难等缺点。苹果汁中是否混有梨汁没有一种有效的鉴定方法。
研究表明,苹果和梨都富含多酚类物质,熊果苷是梨中含有而苹果中没有的特征多酚类有机物。熊果苷(Arbutin)化学名:4-羟基苯--D-吡喃葡萄糖苷;分子式:C12H16O7,分子量:272.25,白色略带淡黄色粉末,易溶于水和乙醇,溶解后无沉淀。
在梨的叶、花、幼果、成品果中均含有熊果苷,在幼果中熊果苷最高可达1%,随着梨的成熟,熊果苷含量快速降低,达到0.02%,梨中不同部分其熊果苷含量不同,梨皮中含量最高,是梨核的4倍左右,是梨果肉的10~50倍。熊果苷含量随梨的种植区域及品种的变化而不同,但都含有熊果苷。测试表明,梨经筛选、清洗、破碎、榨汁、酶解、超滤、吸附等工序后所生产的果汁或脱色果汁(果糖),不能完全除去多酚类物质熊果苷,用高效液相色谱法测定熊果苷判定苹果汁或脱色苹果汁(果糖)中是否混有梨汁非常有效。
发明内容
本发明的目的是提供一种用高效液相色谱法测定熊果苷来判断苹果汁或脱色苹果汁(苹果果糖)中是否掺入梨汁,用高效液相色谱法测定熊果苷具有很好的专一性和较高的灵敏度,用其判定苹果汁或脱色苹果汁(苹果果糖)中是否混有梨汁准确、简单、可操作性强。
苹果汁或脱色苹果汁(苹果果糖)中掺入梨汁的鉴定方法,它是高效液相色谱法,其特征是高效液相色谱的条件为:
1)用紫外检测器或二极管阵列检测器,波长:270~290nm
2)色谱柱:采用C18柱,5μm,(4.6×250mm)
3)柱温:20~40℃
4)用0.01mol/L的甲醇和体积浓度为95%的乙酸钠溶液作为流动相,其中甲醇的含量不超过20%
5)流动相流速:0.8~1.0mL/min
6)用冰乙酸调节流动相PH值为:4~5.5
7)进样量:20μL~100μL
附图说明
图1是熊果苷标准液相色谱图。
图2是熊果苷标准物质紫外吸收光谱。
图3是苹果汁溶液液相色谱图。
图4是梨汁溶液液相色谱图。
图5是梨汁加苹果汁液相色谱图。
具体实施例
仪器和试剂
Agilent 1200高效液相色谱仪,配备G1315 B型DAD检测器,在线真空脱气机,四元梯度泵,自动进样器。
熊果苷标准品(Sigma公司);甲醇(色谱纯,Fisher公司);乙酸钠(分析纯,西安化学试剂厂);冰乙酸(分析纯,西安化学试剂厂);超纯水(自制,电阻18.2MΩ)。
高效液相色谱条件
色谱柱:ACE-5-C18(5μm,4.6×250mm);
柱温:30℃;
流动相:甲醇-0.01mol/L乙酸钠溶液(5+95),冰乙酸调pH5.0;
流速:1.0mL/min;
检测波长:282nm,检测时收集200~400nm范围内的紫外扫描图谱;
进样量:10~100μL。
实施例1
熊果苷标准溶液的测定
待高效液相色谱***达到基线平衡后,用自动进样器将100.0μg/mL的熊果苷标准溶液20μL注入色谱***,在保留时间9.5min.处有一个峰1,为熊果苷标准物质的色谱峰,如图1所示。检测时进行紫外全扫描,在200~400nm范围内峰1的最大紫外吸收在225nm处,在282nm处也有较大紫外吸收,如图2所示,考虑到225nm时样品干扰太大,无法测定,选择282nm为检测波长。
该色谱条件下熊果苷标准物质的最低检出量为2ng。
实施例2
苹果汁样品的测定
称取苹果汁5.00g(精确至0.01g)于50mL容量瓶中,先用少量高纯水稀释,再用高纯水定容至50.00mL,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,进高效液相色谱仪测定,进样量20μL,在保留时间9.5min.处无熊果苷的峰,且9.5min左右基本无干扰,如图3所示。
测试10种苹果汁及6种脱色苹果汁(苹果果糖),色谱图基本相似,均无熊果苷检出。进样量20μL时最低检出限为1.0mg/kg。
实施例3
梨汁样品的测定
称取梨汁5.00g(精确至0.01g)于50mL容量瓶中,先用少量高纯水稀释,再用高纯水定容至50.00mL,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,进高效液相色谱仪测定,进样量20μL,在保留时间9.5min.处有一非常明显的熊果苷的特征峰,如图4所示。
测试8种梨汁及5种脱色梨汁(梨果糖),色谱图基本相似,均有较大的熊果苷色谱峰检出。检测的梨汁及脱色梨汁(梨果糖)中熊果苷含量最高的可达0.1%,最低的为0.03%,在均高效液相色谱图中均具有较高的响应值。
实施例4
苹果汁与梨汁混合样品的测定
称取梨汁与苹果汁按1∶1混合的样品5.00g(精确至0.01g)于50mL容量瓶中,先用少量高纯水稀释,再用高纯水定容至50.00mL,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,进高效液相色谱仪测定,进样量20μL,在保留时间9.5min.处有一明显的熊果苷的特征峰,如图5所示,可判定该样品含梨汁成分。
该色谱条件下熊果苷的最低检出量为2ng,以称样5.00g定容50.00mL计,进样20μL时,熊果苷最低检出限1.0mg/kg;进样量100μL,熊果苷最低检出限0.2mg/kg。
在该方法下,以所检测的几种梨汁及脱色梨汁(梨果糖)中熊果苷最低含量0.03%计,进样量20μL时梨汁∶苹果汁为1∶50时可检出其中所含的熊果苷,进样量100μL时,梨汁∶苹果汁为1∶250时可检出其中所含的熊果苷。
Claims (1)
1、苹果汁或脱色苹果汁中掺入梨汁的鉴别和测定方法,它是利用高效液相色谱法测定熊果苷,其高效液相色谱的条件为:
1)用紫外检测器或二极管阵列检测器,检测波长:270~290nm;
2)色谱柱:采用C18柱,5μm,(4.6×250mm);
3)柱温:20~40℃;
4)用0.01mol/L的甲醇和体积浓度为95%的乙酸钠溶液作为流动相,其中甲醇含量不超过20%;
5)流动相流速:0.8~1.0mL/min;
6)用冰乙酸调节流动相PH值为:4~5.5;
7)进样量:20μL~100μL。
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CN 200610104982 CN1996007A (zh) | 2006-11-28 | 2006-11-28 | 苹果汁或脱色苹果汁中掺入梨汁的鉴别和测定方法 |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN105717227A (zh) * | 2016-02-02 | 2016-06-29 | 天津科技大学 | 一种浓缩苹果汁风味品质判别方法及其应用 |
CN107941934A (zh) * | 2017-11-14 | 2018-04-20 | 中国农业科学院郑州果树研究所 | 一种利用指纹图谱技术的果汁鉴伪方法 |
CN109507125A (zh) * | 2018-12-07 | 2019-03-22 | 中华全国供销合作总社济南果品研究院 | 梨汁含量的计算方法 |
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2006
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