CN1710066A - 一株可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，该菌名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32，已于2005年4月14日保藏在“中国典型培养物保藏中心”，保藏号为CCTCC NO.M205028。该菌株幼时培养物呈现短杆状，单个或成对存在，有“V”字形排列，不形成菌丝体，革兰氏染色阳性，但容易褪色，不运动，不生孢，不抗酸，兼性厌氧，需要营养丰富的培养基，其上的菌落呈凸起，半透明，毛玻璃状表面；该菌的16S rDNA序列具有如SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列。该菌发酵液中积累的谷氨酰氨量达75－80g/L，并且该菌可耐受高达8％～10％硫酸铵的盐浓度。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体的说涉及一株可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌。
背景技术
谷氨酰胺是一种特殊的营养物质，已引起人们普遍关注，成为近年来的研究热点。
谷氨酰胺的生产主要有三种方法：化学合成法，酶法，发酵法。
化学合成法是以谷氨酸为起始物质，经过酸化、氨解、酸解三步反应生成谷氨酰胺。化学合成法收率可达70％78％，但由于所需原料和试剂价格比较高，因此成本也高，并且原料产品有轻微的特殊的怪味不宜被食品和医药界接受，所以化学法生产谷氨酰胺距离大规模工业化生产还有一定的难度。
酶法合成谷氨酰胺在消耗ATP的情况下，由谷氨酰胺合成酶催化谷氨酸和NH4 +向谷氨酰胺的转化。酶法合成谷氨酰胺具有许多优点，如反应步骤简单、副反应少、易于分离、容易实现自动化等，但上述过程中必需的ATP价格昂贵，难以在工业上应用。
同酶法、化学合成法相比，发酵法生产谷氨酰胺易于工业化，且其工业化水平越来越高。发酵法生产谷氨酰胺在日本的开发与应用尤为迅速。1977年日本利用发酵法生产谷氨酰胺的年产量达100吨，1979年上升到500吨，1990年则上升到1200吨，呈逐年递增的趋势。筛选到高产的谷氨酰胺生产菌是发酵法生产谷氨酰胺最为关键的一步。近几年来国内诸多科研机构通过现代菌种选育技术，对谷氨酰胺生产菌做了大量定向选育和菌株构建的工作。上海科技大学王福源等人用黄色短杆菌ATCC14067发酵生产谷氨酰胺，产量为25g/l；徐建华等人用钝齿状杆菌HU7251诱变得一高产菌株，其生产水平为33～35g/l；张克旭等人利用天津短杆菌经诱变处理得一高产菌株，平均产量可达31.4g/l；上海工业微生物研究所的李爽等以黄色短杆菌SGR和DONR抗性菌株作为出发株，谷氨酰胺产量为52.2g/l；汪世华等人用谷氨酸棒杆菌诱变得一高产菌株，其生产水平为56.2g/l。然而，目前，经检索能够达到80g/l能力的高产谷氨酰胺谷氨酸棒杆菌还未见报道。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一株新分离的可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，该菌最高产谷氨酰胺为80g/l并且可耐受高达8％～10％硫酸铵的盐浓度。
本发明涉及的可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32，已于2005年4月14日保藏在“中国典型培养物保藏中心”，保藏号为CCTCC NO.M205028。
上述可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，具有如下生物学特征：形态学特征是：幼时培养物呈现短杆状，单个或成对存在，有“V”字形排列，不形成菌丝体，见图1。革兰氏染色阳性，但容易褪色，不运动，不生孢，不抗酸，兼性厌氧，需要营养丰富的培养基，其上的菌落呈凸起，半透明，毛玻璃状表面；生理生化特征是：化能异养菌，发酵代谢，从葡萄糖、果糖、甘露糖、麦芽糖、蔗糖、海藻糖产酸，接触酶阳性，还原硝酸盐；详见表1。
表1 谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028的生理生化鉴定
| 特性 | 谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028 |
| 糖产酸 | |
| 葡萄糖 | + |
| ***糖 | - |
| 木塘 | - |
| 鼠李糖 | - |
| 果糖 | + |
| 半乳糖 | - |
| 甘露糖 | + |
| 乳糖 | - |
| 麦芽糖 | + |
| 蔗糖 | + |
| 海藻糖 | + |
| 棉子糖 | - |
| 水杨苷 | - |
| 糊精 | - |
| 淀粉 | - |
| 水解 | |
| 七叶灵 | - |
| 马尿酸 | + |
| 尿素 | + |
| 酪氨酸 | - |
| 其他 | |
| 吡嗪胺酶 | ND* |
| 甲基红 | + |
| 硝酸盐还原反应 | + |
| 过氧化物酶 | + |
ND*不确定
上述谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028培养温度为28-37℃；在LB培养基中生长良好；在液体种子培养基上培养生长良好，并经培养8-10小时后接入到发酵培养基中，溶解氧水平控制在10％～50％的饱和度，pH为6.0～6.6，发酵时间为35～60小时，进行通风搅拌培养，发酵生产高浓度谷氨酰胺，发酵过程中利用生物膜分析仪和生化分析仪不间断检测发酵液中葡萄糖、谷氨酸及谷氨酰胺的浓度，并通过流加葡萄糖使发酵液中的葡萄糖浓度维持在20+5g/L(优选20±2g/L)，当检测知发酵液中谷氨酰胺浓度不再上升时，结束发酵；
上述LB培养基配方如下，1升蒸馏水中含：10克蛋白胨，5克酵母粉，10克氯化钠，pH 7.0，固体LB培养基在上述配方的基础上加入质量体积比为1.6％的琼脂粉，121℃条件下灭菌15分钟；
上述液体种子培养基配方如下，1升蒸馏水中含：27克葡萄糖，10克硫酸氨，5克蛋白胨，3.5克玉米浆，0.4克硫酸镁，1.0克磷酸二氢钾，1.0克氯化钠，10mL质量百分比为0.2％的硫酸铁，pH 7.0，115℃条件下灭菌20分钟；
上述发酵培养基配方如下，1升蒸馏水中含：140克葡萄糖，98克硫酸氨，5克尿素，16克玉米浆，5克糖蜜，4.5克磷酸二氢钾，2.25克硫酸镁，50克碳酸钙，10mL质量百分比为0.1％的硫酸锰，1mL质量百分比为0.1％的硫酸锌，pH 7.0，115℃条件下灭菌20分钟。
上述培养温度优选为30℃。
上述在液体种子培养基上培养时间优选为9小时。
上述在发酵过程中溶解氧水平优选控制在20％～40％的饱和度。
上述在发酵培养基中培养时间优选为45～60小时。
上在发酵培养基中培养时间进一步优选为48～57小时。
上述在发酵培养基中培养时间最优选为54小时。
本发明的菌株谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32 CCTCCNO.M205028的16S rDNA基因序列长度为1439bp，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
通过在美国生物工程信息中心(National Center for Biotechnology Information，NCBI)查阅国际相关的基因库，将本发明的菌株谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)G32的16S rDNA基因序列与其相关菌株的16S rDNA基因序列进行比对(如表2所示)，虽有相似性，但却不完全相同，说明本发明的菌株是首次分离鉴定。
表2 谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028的
16S rDNA与GenBank提交菌株基因序列相似性比较
| 名称 | 同源性(％) |
| Corynebacterium glutamicum ATCC13032 | 98％ |
| Corynebacterium glutamicum strain CICC10226 | 98％ |
| Rhodococcus globerulus strain DSM43953 | 97％ |
| Corynebacterium glutamicum strain DSM20300T | 97％ |
进一步通过软件在美国生物工程信息中心使用BLASTN程序比对，对给出的序列使用Vector NTI软件构建进化树，菌株G32和古地分枝杆菌位于同一个分支上，鉴定菌株G32为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)，如附图2所示。
本发明涉及的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32 CCTCCNO.M205028在谷氨酰胺发酵生产中的应用。
本发明的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028与菌株Corynebacterium glutamicum ATCC 13032相比，具有很高的发酵产谷氨酰胺能力，并且能耐受比菌株Corynebacterium glutamicumATCC13032高数倍浓度的硫酸铵。
本发明的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028发酵培养45-60小时可积累谷氨酰胺75-80g/L，而菌株Corynebacterium glutamicumATCC13032发酵超过60小时只能积累20-30g/L的谷氨酰胺。本发明的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028可以耐受很高的盐浓度，最高可耐受10％浓度的硫酸铵，并且生长良好，而菌株Corynebacterium glutamicumATCC13032在含超过4％浓度的硫酸铵的培养基上，生长受到明显的抑制。
附图说明
本发明涉及的一株可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32，已于2005年4月14日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏地址：湖北省武汉市武汉大学，邮政编码：430072，其保藏号为CCTCCNO.M205028。
图1.谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028的电镜照片
其中：A放大10000倍，B放大8000倍
图2.谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028在进化树上的位置
图3.谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028发酵过程曲线
A为离线数据，B为在线数据；A中符号表示意思为△：葡萄糖(g/l)，口：菌浊(OD610nm)，○：谷氨酸(g/l)，▲：谷氨酰胺(g/l)；B中各曲线分别表示搅拌转速、pH、温度、溶解氧的变化。
具体实施方式
实施例1：谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028菌株的筛选
在培养到对数生长期中期的种子培养基中(预先加入玻璃珠)加入终浓度为300ug/ml的亚硝基胍(NTG)溶液，30℃恒温振荡处理30分钟，然后取5ml加入到一无菌试管内，立即加入0.5ml 25％的硫代硫酸钠终止作用。取适当的稀释度(优选105个菌体/ml)涂布筛选平板，筛选平板为LB培养基加上0.6g/l的磺胺胍(SG)和0.5％的LiCl，用纸包上避光，30℃倒置培养2～3天后，挑单菌落做摇管培养，摇管培养在30℃、转速100r/min，冲程8cm的往复式摇床上进行，培养72小时后，利用YSI2700生化分析仪检测谷氨酰胺产量，初选高产菌株。
再通过摇瓶初筛和复筛，得到20株产谷氨酰胺能力较高的菌株，最后经纯化和摇瓶复筛验证，得到一株产谷氨酰胺能力最高的菌株，即谷氨酸棒杆菌(Corynebacteriumglutamicum)G32 CCTCC NO.M205028，经过稳定性实验表明该菌株具有非常高的稳定性，数代后产酸能力没有降低。
该菌株幼时培养物呈现短杆状，单个或成对存在。不运动，不生孢，不抗酸。严格好氧菌。菌落淡黄色，化能异养，呼吸代谢。在普通营养琼脂培养基中生长良好。其最适生长温度在30℃。
上述LB培养基配方如下，1升蒸馏水中含：10克蛋白胨，5克酵母粉，10克氯化钠，16克琼脂粉，pH 7.0。筛选培养基为在上述配方的基础上加入0.6g/l的磺胺胍(SG)和0.5％的LiCl，121℃条件下灭菌15分钟。
实施例2：上述谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32 CCTCCNO.M205028菌株16S rDNA基因的提取
培养5ml的细菌培养物至饱和状态，取1.5ml培养物，6000g离心2分钟；沉淀物加入565μl的TE缓冲液，TE缓冲液配方如下：10mmol/L的三羟甲基氨基甲烷(Tris)、1mmol/L的乙二胺四乙酸(EDTA)、用盐酸调整pH为8.0，用吸管反复吹打使之重悬，加入30μl质量体积比为10％的十二烷基磺酸钠(SDS)和5μl 20mg/mL的蛋白酶K，混匀，于37℃温育1小时；加入100μl，5mol/L NaCl，充分混匀，再加入80μl的CTAB/NaCl溶液，CTAB/NaCl溶液配方如下：质量体积比为10％的十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)溶解于0.7mol/L的NaCl中，混匀，于65℃温育10分钟；加入等体积的氯仿/异戊醇，混匀，12000g离心5分钟，将上清液转入一个新管中，如果难以移出上清，先用牙签除去界面物质；加入等体积的酚/氯仿/异戊醇，混匀，12000g离心5分钟，将上清转入一支新管中；加入0.6倍体积异丙醇，轻轻混匀直到DNA沉淀下来，用一个封口的离心管将沉淀转移至1ml的70％乙醇中洗涤；12000g离心5分钟，弃上清，用冻干机稍加干燥，重溶于100μl的TE缓冲液。以提取的基因组DNA为模板，利用购自上海博亚生物技术有限公司的真细菌引物27f和1492r，进行PCR扩增，在50μl反应体系依次混匀下列试剂：35μl H2O，5μl10倍浓度的PCR反应缓冲液，10倍浓度的PCR反应缓冲液配方如下：500mmol/L的KCl、30mmol/L的二硫苏糖醇(DTT)、100mmol/L的用盐酸调整pH为8.8的Tris缓冲液、1mg/ml的牛血清白蛋白、15mmol/L的MgCl2，4μl 25mmol/L MgCl2，1μl4种dNTP的混合物，0.5μl上游引物，0.5μl下游引物，0.5μl模板DNA即上述谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32 CCTCCNO.M205028的基因组DNA，0.5μl Taq DNA聚合酶，混匀后离心5秒钟。加入50μl矿物油再离心5秒钟；将混合物在94℃加热5分钟。94℃变性1分钟，50℃退火1分钟，72℃延伸2分钟，总共25个循环。最后一个循环后，于72℃下保温10分钟，使反应混合物扩增充分，得到谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCCNO.M205028的16S rDNA的PCR扩增产物，将产物测序。
测序结果：谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028菌株16S rDNA基因序列长度为1439bp，核苷酸序列如下：
CTCCCACTTCGACAGCTCCCCCCTAAAAAGGTTGGGCCACTGGCTTCGGGTG
TTACCAACTTTCATGACGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCAC
CGCAGCGTTGCTGATCTGCGATTACTAGCGACTCCGACTTCATGGGGTCGAGTTGC
AGACCCCAATCCGAACTGAGGCCGGCTTTAAGAGATTAGCTCCACCTCACGGTGT
GGCAACTCGCTGTACCGACCATTGTAGCATGTGTGAAGCCCTGGACATAAGGGGCA
TGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGAGTTAACCCCGGCAGTCTCTCATGA
GTACCCACCATAATGTGCTGGCAACATAAGACAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACT
TAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTGAACCG
ACCACAAGGGAAAACGTATCTCTACGCCGATCCGGTCCATGTCAAGCCCAGGTAA
GGTTCTTCGCGTTGCATCGAATTAATCCACATGCTCCGCCGCTTGTGCGGGCCCCC
GTCAATTCCTTTGAGTTTTAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGGGCGCTTAAT
GCGTTAGCTGCGGCACAGAAGTCGTGGAAGACCCCTACACCTAGCGCCCACCGTT
TACGGCATGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTACCCATGCTTTCGCTCCTC
AGCGTCAGTTACTGCCCAGAGACCTGCCTTCGCCATTGGTGTTCCTCCTGATATCTG
CGCATTTCACCGCTACACCAGGAATTCCAGTCTCCCCTACAGCACTCAAGTTATGC
CCGTATCGCCTGCACGCCCGAAGTTAAGCCCCGGGATTTCACAGACGACGCGACA
AACCACCTACGAGCTCTTTACGCCCAGTAATTCCGGACAACGCTCGCACCCTACGT
ATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGGTGCTTCTTCTCCAGGTACCGTCAC
CTAAAAGGTTTCGTCCCTACCGAAAGGAGTTTACAACCCGAAGGCCGTCATCCCC
CACGCGGCGTCGCTGCATCAGGCTTGCGCCCATTGTGCAATATTCCCCACTGCTGC
CTCCCGTATGTGTATGGNCCGTGTGTCAGTCCCAATGTGGCCGTACACCCTCTCAG
GCCGGCTACCCGTAGACGCCTTGGTAGGCCATTACCCCACCAACAAGTTGATAGGC
CGCAGGCTCATCCCACACCGCATAAAGCTTTCCACACCACCCGTACGGTGGTGTGA
ATATTCGGTATTAGACCCAGTTTCCCAGGCTTATCCCATAGTGTAGGGCAGATCACC
CACGTGTTACTCACCCGTTCGCCACTCATCCACCAAATGCAAGCATTTGGTGTCTG
CGTTCGACTTGCATGTGTTAAGCACGCCGAGGGCGTTGTCAAGGG
实施例3：上述谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32 CCTCCN0.M205028菌株发酵生产谷氨酰胺
将谷氨酸棒杆菌(Cornyebacterium glutamicum)G32 CCTCC NO.M205028在LB斜面培养12小时后，接1～2环菌苔到装有20ml液体培养基三角瓶中，在30℃、转速100r/min，冲程8cm的往复式摇床条件下培养9小时后得液体种子。
将上述液体种子按体积百分比为5％的量接入到发酵培养基中进行通风搅拌培养，发酵生产高浓度谷氨酰胺，培养温度为30℃，溶解氧水平通过改变搅拌转速及通风比率使之控制在20％～40％的饱和度，发酵时间为35-60小时。发酵初期控制pH为6.6，当菌体生长到指数中后期时(17～18小时)，通过流加1.2N的稀盐酸将pH降为6.0并一直维持到发酵结束。发酵过程中利用SBA生物膜分析仪和YSI2700生化分析仪不间断检测发酵液中葡萄糖、谷氨酸及谷氨酰胺的浓度，并通过流加葡萄糖使发酵液中的葡萄糖浓度维持在20±2g/L，当检测知发酵液中谷氨酰胺浓度不再上升时，结束发酵。
本实验中，当液体种子在发酵培养基中培养54小时时，检测得发酵液中的谷氨酰胺浓度最高，为80g/L。发酵过程的曲线见附图3。
上述LB培养基配方如下，1升蒸馏水中含：10克蛋白胨，5克酵母粉，10克氯化钠，pH7.0，固体LB培养基在上述配方的基础上加入质量体积比为1.6％的琼脂粉，121℃条件下灭菌15分钟；
上述液体种子培养基配方如下，1升蒸馏水中含：27克葡萄糖，10克硫酸氨，5克蛋白胨，3.5克玉米浆，0.4克硫酸镁，1.0克磷酸二氢钾，1.0克氯化钠，10mL质量百分比为0.2％的硫酸铁，pH7.0，115℃条件下灭菌20分钟；
上述发酵培养基配方如下，1升蒸馏水中含：140克葡萄糖，98克硫酸氨，5克尿素，16克玉米浆，5克糖蜜，4.5克磷酸二氢钾，2.25克硫酸镁，50克碳酸钙，10mL质量百分比为0.1％的硫酸锰，1mL质量百分比为0.1％的硫酸锌，pH7.0，115℃条件下灭菌20分钟。
序列表
SEQ ID NO.1
<110>山东大学
<120>一株可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌
<141>2005-3-24
<211>1439
<212>DNA
<213>谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)
<221>谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32 CCTCC NO.M205028 16SrDNA
<222>(1)…(1439)
<400>
ctcccacttc gacagctccc ccctaaaaag gttgggccac tggcttcggg tgttaccaac 60
tttcatgacg tgacgggcgg tgtgtacaag gcccgggaac gtattcaccg cagcgttgct 120
gatctgcgat tactagcgac tccgacttca tggggtcgag ttgcagaccc caatccgaac 180
tgaggccggc tttaagagat tagctccacc tcacggtgtg gcaactcgct gtaccgacca 240
ttgtagcatg tgtgaagccc tggacataag gggcatgatg atttgacgtc atccccacct 300
tcctccgagt taaccccggc agtctctcat gagtacccac cataatgtgc tggcaacata 360
agacaagggt tgcgctcgtt gcgggactta acccaacatc tcacgacacg agctgacgac 420
aaccatgcac cacctgtgaa ccgaccacaa gggaaaacgt atctctacgc cgatccggtc 480
catgtcaagc ccaggtaagg ttcttcgcgt tgcatcgaat taatccacat gctccgccgc 540
ttgtgcgggc ccccgtcaat tcctttgagt tttagccttg cggccgtact ccccaggcgg 600
ggcgcttaat gcgttagctg cggcacagaa gtcgtggaag acccctacac ctagcgccca 660
ccgtttacgg catggactac cagggtatct aatcctgttc gctacccatg ctttcgctcc 720
tcagcgtcag ttactgccca gagacctgcc ttcgccattg gtgttcctcc tgatatctgc 780
gcatttcacc gctacaccag gaattccagt ctcccctaca gcactcaagt tatgcccgta 840
tcgcctgcac gcccgaagtt aagccccggg atttcacaga cgacgcgaca aaccacctac 900
gagctcttta cgcccagtaa ttccggacaa cgctcgcacc ctacgtatta ccgcggctgc 960
tggcacgtag ttagccggtg cttcttctcc aggtaccgtc acctaaaagg tttcgtccct 1020
accgaaagga gtttacaacc cgaaggccgt catcccccac gcggcgtcgc tgcatcaggc 1080
ttgcgcccat tgtgcaatat tccccactgc tgcctcccgt atgtgtatgg nccgtgtgtc 1140
agtcccaatg tggccgtaca ccctctcagg ccggctaccc gtagacgcct tggtaggcca 1200
ttaccccacc aacaagttga taggccgcag gctcatccca caccgcataa agctttccac 1260
accacccgta cggtggtgtg aatattcggt attagaccca gtttcccagg cttatcccat 1320
agtgtagggc agatcaccca cgtgttactc acccgttcgc cactcatcca ccaaatgcaa 1380
gcatttggtg tctgcgttcg acttgcatgt gttaagcacg ccgagggcgt tgtcaaggg 1439
Claims (9)
1.一株可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，其特征在于：该菌名为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32，已于2005年4月14日保藏在“中国典型培养物保藏中心”，保藏号为CCTCC NO.M205028。
2.如权利要求1所述可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，具有如下生物学特征：形态学特征是：幼时培养物呈现短杆状，单个或成对存在，有“V”字形排列，不形成菌丝体，革兰氏染色阳性，但容易褪色，不运动，不生孢，不抗酸，兼性厌氧，需要营养丰富的培养基，其上的菌落呈凸起，半透明，毛玻璃状表面；生理生化特征是：化能异养菌，发酵代谢，从葡萄糖、果糖、甘露糖、麦芽糖、蔗糖、海藻糖产酸，接触酶阳性，还原硝酸盐；该菌的16S rDNA序列具有如SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列。
3.如权利要求1或2所述可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，其特征是，所述谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G32CCTCC NO.M205028培养温度为28～37℃；在LB培养基中生长良好；在液体种子培养基上培养生长良好，并经培养8～10小时后接入到发酵培养基中，溶解氧水平控制在10％～50％的饱和度，pH为6.0～6.6，发酵时间为35～60小时，进行通风搅拌培养，发酵生产高浓度谷氨酰胺，发酵过程中利用生物膜分析仪和生化分析仪不间断检测发酵液中葡萄糖、谷氨酸及谷氨酰胺的浓度，并通过流加葡萄糖使发酵液中的葡萄糖浓度维持在20±5g/L，当检测知发酵液中谷氨酰胺浓度不再上升时，结束发酵；
上述LB培养基配方如下，1升蒸馏水中含：10克蛋白胨，5克酵母粉，10克氯化钠，pH 7.0，固体LB培养基在上述配方的基础上加入质量体积比为1.6％的琼脂粉，121℃条件下灭菌15分钟；
上述液体种子培养基配方如下，1升蒸馏水中含：27克葡萄糖，10克硫酸氨，5克蛋白胨，3.5克玉米浆，0.4克硫酸镁，1.0克磷酸二氢钾，1.0克氯化钠，10mL质量百分比为0.2％的硫酸铁，pH7.0，115℃条件下灭菌20分钟；
上述发酵培养基配方如下，1升蒸馏水中含：140克葡萄糖，98克硫酸氨，5克尿素，16克玉米浆，5克糖蜜，4.5克磷酸二氢钾，2.25克硫酸镁，50克碳酸钙，10mL质量百分比为0.1％的硫酸锰，1mL质量百分比为0.1％的硫酸锌，pH7.0，115℃条件下灭菌20分钟。
4.如权利要求3所述的可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，其特征是，所述培养温度为30℃。
5.如权利要求3所述的可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，其特征是，所述在液体种子培养基中培养时间为9小时。
6.如权利要求3所述的可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，其特征是，所述在发酵过程中溶解氧水平控制在20％～40％的饱和度。
7.如权利要求3所述的可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，其特征是，所述在发酵培养基中培养时间为45～60小时。
8.如权利要求7所述的可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，其特征是，所述在发酵培养基中培养时间为48～57小时。
9.如权利要求8所述的可高产谷氨酰胺的谷氨酸棒杆菌，其特征是，所述在发酵培养基中培养时间为54小时。
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