CN1692932A - 益心舒颗粒的制备方法和质量控制技术 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种益心舒颗粒的制备方法和质量控制技术，原料中药由人参、黄芪、丹参、麦冬、五味子、川芎、山楂组成，其特征是取人参粉碎成细粉；五味子、丹参用乙醇回流提取，提取液过滤后浓缩得清膏；麦冬、川芎、山楂、黄芪等加水煎煮提取，提取液过滤、浓缩后加乙醇溶液，充分搅拌后，静置，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩得清膏，将上述二种清膏合并后，加入人参细粉及适量糊精、甜菊苷，混合均匀，制粒，干燥，制成颗粒剂即得。质量控制技术是通过定性鉴别并定量测定其中的人参皂苷Rg₁ (C₄₂H₇₂O₁₄)和人参皂苷Re(C₄₈H₈₂O₁₈)的总量，方法可靠。

Description

益心舒颗粒的制备方法和质量控制技术

技术领域

本发明属于一种中药，具体是中药益心舒胶囊的新剂型——益心舒颗粒的制备方法和质量控制技术。

背景技术

“益心舒胶囊”是国家药品监督管理局局颁标准中药成方制剂第十三册(原***部颁标准中药成方制剂第十三册)收载品种，但胶囊剂存在吸收慢，制备工艺不合理，有效成分不高等缺点。

发明内容

本发明的目的是对现有益心舒胶囊进行改剂型，提出一种益心舒颗粒的制备方法和质量控制技术，更好地将益心舒中药服务于广大人民群众的医疗需要。

本发明的技术方案如下：

益心舒颗粒的制备方法，原料中药由人参、黄芪、丹参、麦冬、五味子、川芎、山楂组成，其特征在于取人参粉碎成细粉；五味子、丹参用乙醇回流提取，提取液过滤后浓缩得清膏；麦冬、川芎、山楂、黄芪等加水煎煮提取，提取液过滤、浓缩后加乙醇溶液，充分搅拌后，静置，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩得清膏，将上述二种清膏合并后，加入人参细粉及适量糊精、甜菊苷，混合均匀，制粒，干燥，制成颗粒剂即得。

所述的益心舒颗粒的制备方法，其特征在于

(1)、各原料组分的重量比为：

人参150     黄芪150    丹参200  麦冬150

五味子100   川芎100    山楂150

(2)、制备步骤：

五味子、丹参用75～85％乙醇回流提取1～2次，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩得醇清膏，麦冬、川芎、山楂、黄芪等加水煎煮1～2次，合并煎液，滤过，滤液浓缩后，加入75～85％乙醇，充分搅拌后，静置8～24小时，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩得水提清膏，将上述二种清膏合并后，加入人参细粉及适量糊精、甜菊苷，混合均匀，制粒，干燥，制成颗粒剂即得。

所述的益心舒颗粒的制备方法，其特征在于制备步骤为：

五味子、丹参用85％乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.15～1.20(20℃)，得醇清膏，其余麦冬等加水煎煮2次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至500ml，加入等量85％乙醇，充分搅拌后，静置8～24小时，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.30～1.36(80℃)，得水提清膏，将上述二种清膏合并后，加入人参细粉及适量糊精、甜菊苷，混合均匀，制粒，干燥，制成颗粒剂即得。

益心舒颗粒的质量控制技术，其特征在于

(1)、定性鉴别

a、取本品中药内容物适量，加醋酸乙酯回流提取，滤过，滤纸、滤渣留存；滤液合并，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取五味子乙素对照品，加甲醇制成五味子乙素对照品溶液；吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为的甲苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

b、取丹参对照药材适量，加醋酸乙酯回流提取，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为对照药材溶液；吸取鉴别a项下供试品溶液、丹参对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为19∶1的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

c、取鉴别a项下的滤纸、滤渣，加乙醇回流提取，滤过，滤液合并，置水浴上蒸干，残渣加水适量加热使溶解，滤过，滤液通过D₁₀₁大孔吸附树脂柱(φ1.8cm×40cm，50ml)，先用水洗至近无色，弃去水洗液；继以30～50％乙醇洗至近无色，弃去乙醇洗脱液；再用50～80％乙醇洗至近无色，收集乙醇洗脱液，置水浴上浓缩至10～25ml，加水饱和正丁醇提取，静置，分取正丁醇液，合并，加正丁醇饱和的氨试液洗涤1～4次，每次5～20ml，静置，分取正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶40∶22∶10的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(10℃以下放置的下层溶液)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在高温加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

d、取本品中药内容物适量，加水适量置水浴上加热，搅拌使充分溶解，离心，取上清液，置水浴上浓缩至5～20ml，加盐酸适量加热煮沸3～10分钟，放冷，移至分液漏斗中，加氯仿适量振摇提取1～3次，静置，分取氯仿层，合并，置水浴上蒸干，残渣加醋酸乙酯适量使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材1g，加水煎煮，滤过，滤液浓缩至5～20ml，制成对照药材溶液；吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6∶1的氯仿-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，于高温加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的主斑点；

e、取本品中药内容物适量，加氢氧化钾甲醇溶液适量回流提取，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水适量使溶解，加体积比为2∶1的氯仿-正丁醇混合溶液提取，静置，分取提取液，合并，再加正丁醇饱和的氨试液洗涤，静置，分取氯仿-正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加水适量加热使溶解，放冷，通过D₁₀₁大孔吸附树脂柱(φ1.8cm×40cm，40ml)，先用水适量洗脱，弃去水洗液；继以30～50％乙醇适量洗脱，弃去乙醇洗脱液；再以50～80％乙醇适量洗脱，收集乙醇洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成黄芪甲苷对照品溶液：吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为13∶7∶2的氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在高温加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

f、取本品中药内容物适量，加体积比为9.5∶0.5的醋酸乙酯-甲酸混合溶液适量回流提取，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加氢氧化钠溶液适量使溶解，加***提取，静置，分取***层，弃去；碱液层加浓盐酸调PH1～2，加***提取，静置，分取***层，合并，置水浴上挥干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材1g，加水适量煎煮，滤过，滤液加氢氧化钠溶液调pH＞9，余下自“加***提取3次”起同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为30∶3∶1的苯-甲醇-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新配制的体积比为1∶1的三氯化铁与铁***混合溶液至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

(2)、定量测定

色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(99∶400)为流动相；检测波长为203nm；理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于2500；对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Rg₁对照品、人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg₁ 0.125mg、人参皂苷Re 0.1mg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取本品中药内容物2.0g，精密称定，置索氏提取器中，加氯仿适量回流提取至提取液近无色，弃去氯仿液，药渣挥去氯仿，连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中，加入水饱和的正丁醇适量，密塞，放置过夜，超声提取，滤过，滤纸、滤渣加水饱和的正丁醇适量超声提取，滤过，滤液合并，置水浴上浓缩，放冷，转移至分液漏斗中，加正丁醇饱和的氨试液洗涤1～5次，每次5～25ml，再加正丁醇饱和的水适量洗涤1～3次，取正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量分次使溶解，并定量移入5ml量瓶中，再加溶剂稀释至刻度，密塞，摇匀，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得本品中药每4g含人参以人参皂苷Rg₁(C₄₂H₇₂O₁₄)和人参皂苷Re(C₄₈H₈₂O₁₈)的总量不得少于1.2mg。

本品每袋含人参以人参皂苷Rg₁(C₄₂H₇₂O₁₄)和人参皂苷Re(C₄₈H₈₂O₁₈)的总量不得少于1.2mg。

功能与主治：益气复脉，活血化瘀，养阴生津。用于气阴两虚，心悸脉结代，胸闷不舒、胸痛及冠心病心绞痛见有上述症状者。

用法与用量：口服，一次1袋，一日3次。

规格：每袋装4g。

贮藏：密封。

本发明益心舒颗粒具有制备工艺科学，有效成分含量高，吸收快、显效迅速、服用方便、提高疗效等特点。

具体实施方式

1、处方

人参150g    黄芪150g    丹参200g    麦冬150g

五味子100g  川芎100g    山楂150g

以上制成1000g颗粒

2、制法

以上七味，取人参粉碎细粉后备用。五味子、丹参用85％乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.15～1.20(20℃)，得醇清膏，其余麦冬等加水煎煮2次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至500ml，加入等量85％乙醇，充分搅拌后，静置过夜，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.30～1.36(80℃)，得水提清膏，将上述二种清膏合并后，加入人参细粉及适量糊精、甜菊苷，混合均匀，制粒，干燥，制成1000g，即得。

3、鉴别

性状、本品为颗粒剂，内容物为黄棕色至棕色的颗粒；气微香，味甜、微苦。

定性鉴别

(1)、取本品10g，研细，加醋酸乙酯回流提取2次，每次50ml、1小时，滤过，滤纸、滤渣留存。滤液合并，置水浴上蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子乙素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(2)、取丹参对照药材1g，加醋酸乙酯20ml回流提取1小时，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取鉴别(1)项下供试品溶液、丹参对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

(3)、取鉴别(1)项下的滤纸、滤渣，加乙醇回流提取2次，每次50ml、1小时，滤过，滤液合并，置水浴上蒸干，残渣加水10ml加热使溶解，滤过，滤液通过D₁₀₁大孔吸附树脂柱(φ1.8cm×40cm，50ml)，先用水洗至近无色，弃去水洗液；继以40％乙醇洗至近无色，弃去40％乙醇洗脱液；再用70％乙醇洗至近无色，收集70％乙醇洗脱液，置水浴上浓缩至20ml，加水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，静置，分取正丁醇液，合并，加正丁醇饱和的氨试液洗涤3次，每次15ml，静置，分取正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

(4)、取本品10g，研细，加水50ml置水浴上加热10分钟，搅拌使充分溶解，离心，取上清液，置水浴上浓缩至10ml，加盐酸0.5ml加热煮沸5分钟，放冷，移至分液漏斗中，加氯仿20ml振摇提取2次，静置，分取氯仿层，合并，置水浴上蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材1g，加水20ml煎煮2小时，滤过，滤液浓缩至10ml，余下自“加盐酸0.5ml”起同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮(6∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的主斑点。

(5)、取本品10g，加2％氢氧化钾甲醇溶液50ml回流提取1小时，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水30ml使溶解，加氯仿-正丁醇(2∶1)混合溶液提取2次，每次20ml，静置，分取氯仿-正丁醇(2∶1)提取液，合并，再加正丁醇饱和的氨试液洗涤3次，每次15ml，静置，分取氯仿-正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加水适量加热使溶解，放冷，通过D₁₀₁大孔吸附树脂柱(φ1.8cm×40cm，40ml)，先用水50ml洗脱，弃去水洗液；继以40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液；再以70％乙醇100ml洗脱，收集70％乙醇洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(6)、取本品10g，加醋酸乙酯-甲酸(9.5∶0.5)的混合溶液50ml回流提取1小时，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加0.1mol/L的氢氧化钠溶液20ml使溶解，加***提取3次，每次15ml，静置，分取***层，弃去。碱液层加浓盐酸调PH1～2，加***提取3次，每次15ml，静置，分取***层，合并，置水浴上挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材1g，加水20ml煎煮2小时，滤过，滤液加10mol/L氢氧化钠溶液调pH＞9，余下自“加***提取3次”起同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-甲醇-冰醋酸(30∶3∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新配制的1％三氯化铁与1％铁***(1∶1)混合溶液至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

检查、应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版一部附录I C)。

含量测定

照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定。

色谱条件与***适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(99∶400)为流动相；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于2500。

对照品溶液的制备  精密称取人参皂苷Rg₁对照品、人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg₁0.125mg、人参皂苷Re0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取装量差异下本品内容物，研细，取约2.0g，精密称定，置索氏提取器中，加氯仿适量回流提取至提取液近无色，弃去氯仿液，药渣挥去氯仿，连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中，加入水饱和的正丁醇50ml，密塞，放置过夜，超声提取30分钟，滤过，滤纸、滤渣加水饱和的正丁醇30ml超声提取2次，每次30分钟，滤过，滤液合并，置水浴上浓缩至60ml，放冷，转移至分液漏斗中，加正丁醇饱和的氨试液洗涤3次，每次20ml，再加正丁醇饱和的水20ml洗涤1次，取正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇5ml分次使溶解，并定量移入5ml量瓶中，再加溶剂稀释至刻度，密塞，摇匀，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

Claims (4)

1、益心舒颗粒的制备方法，原料中药由人参、黄芪、丹参、麦冬、五味子、川芎、山楂组成，其特征在于取人参粉碎成细粉；五味子、丹参用乙醇回流提取，提取液过滤后浓缩得清膏；麦冬、川芎、山楂、黄芪等加水煎煮提取，提取液过滤、浓缩后加乙醇溶液，充分搅拌后，静置，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩得清膏，将上述二种清膏合并后，加入人参细粉及适量糊精、甜菊苷，混合均匀，制粒，干燥，制成颗粒剂即得。

2、根据权利要求1所述的益心舒颗粒的制备方法，其特征在于

(1)、各原料组分的重量比为：

人参150    黄芪150    丹参200    麦冬150

五味子100  川芎100    山楂150

(2)、制备步骤：

五味子、丹参用75～85％乙醇回流提取1～2次，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩得醇清膏，麦冬、川芎、山楂、黄芪等加水煎煮1～2次，合并煎液，滤过，滤液浓缩后，加入75～85％乙醇，充分搅拌后，静置8～24小时，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩得水提清膏，将上述二种清膏合并后，加入人参细粉及适量糊精、甜菊苷，混合均匀，制粒，干燥，制成颗粒剂即得。

3、根据权利要求2所述的益心舒颗粒的制备方法，其特征在于制备步骤为：

五味子、丹参用85％乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.15～1.20(20℃)，得醇清膏，其余麦冬等加水煎煮2次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至500ml，加入等量85％乙醇，充分搅拌后，静置8～24小时，滤去沉淀物，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.30～1.36(80℃)，得水提清膏，将上述二种清膏合并后，加入人参细粉及适量糊精、甜菊苷，混合均匀，制粒，干燥，制成颗粒剂即得。

4、益心舒颗粒的质量控制技术，其特征在于

(1)、定性鉴别

a、取本品中药内容物适量，加醋酸乙酯回流提取，滤过，滤纸、滤渣留存；滤液合并，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取五味子乙素对照品，加甲醇制成五味子乙素对照品溶液；吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为的甲苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

b、取丹参对照药材适量，加醋酸乙酯回流提取，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为对照药材溶液；吸取鉴别a项下供试品溶液、丹参对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为19∶1的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

c、取鉴别a项下的滤纸、滤渣，加乙醇回流提取，滤过，滤液合并，置水浴上蒸干，残渣加水适量加热使溶解，滤过，滤液通过D₁₀₁大孔吸附树脂柱(φ1.8cm×40cm，50ml)，先用水洗至近无色，弃去水洗液；继以30～50％乙醇洗至近无色，弃去乙醇洗脱液；再用50～80％乙醇洗至近无色，收集乙醇洗脱液，置水浴上浓缩至10～25ml，加水饱和正丁醇提取，静置，分取正丁醇液，合并，加正丁醇饱和的氨试液洗涤1～4次，每次5～20ml，静置，分取正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶40∶22∶10的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(10℃以下放置的下层溶液)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在高温加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

d、取本品中药内容物适量，加水适量置水浴上加热，搅拌使充分溶解，离心，取上清液，置水浴上浓缩至5～20ml，加盐酸适量加热煮沸3～10分钟，放冷，移至分液漏斗中，加氯仿适量振摇提取1～3次，静置，分取氯仿层，合并，置水浴上蒸干，残渣加醋酸乙酯适量使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材1g，加水煎煮，滤过，滤液浓缩至5～20ml，制成对照药材溶液；吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6∶1的氯仿-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，于高温加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的主斑点；

e、取本品中药内容物适量，加氢氧化钾甲醇溶液适量回流提取，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水适量使溶解，加体积比为2∶1的氯仿-正丁醇混合溶液提取，静置，分取提取液，合并，再加正丁醇饱和的氨试液洗涤，静置，分取氯仿-正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加水适量加热使溶解，放冷，通过D₁₀₁大孔吸附树脂柱(φ1.8cm×40cm，40ml)，先用水适量洗脱，弃去水洗液；继以30～50％乙醇适量洗脱，弃去乙醇洗脱液；再以50～80％乙醇适量洗脱，收集乙醇洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成黄芪甲苷对照品溶液：吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为13∶7∶2的氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在高温加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

f、取本品中药内容物适量，加体积比为9.5∶0.5的醋酸乙酯-甲酸混合溶液适量回流提取，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加氢氧化钠溶液适量使溶解，加***提取，静置，分取***层，弃去；碱液层加浓盐酸调PH1～2，加***提取，静置，分取***层，合并，置水浴上挥干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材1g，加水适量煎煮，滤过，滤液加氢氧化钠溶液调pH＞9，余下自“加***提取3次”起同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；吸取供试品溶液、对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为30∶3∶1的苯-甲醇-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以新配制的体积比为1∶1的三氯化铁与铁***混合溶液至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

(2)、定量测定

色谱条件与***适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(99∶400)为流动相；检测波长为203nm；理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于2500；对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Rg₁对照品、人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含人参皂苷Rg₁ 0.125mg、人参皂苷Re 0.1mg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取本品中药内容物2.0g，精密称定，置索氏提取器中，加氯仿适量回流提取至提取液近无色，弃去氯仿液，药渣挥去氯仿，连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中，加入水饱和的正丁醇适量，密塞，放置过夜，超声提取，滤过，滤纸、滤渣加水饱和的正丁醇适量超声提取，滤过，滤液合并，置水浴上浓缩，放冷，转移至分液漏斗中，加正丁醇饱和的氨试液洗涤1～5次，每次5～25ml，再加正丁醇饱和的水适量洗涤1～3次，取正丁醇液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量分次使溶解，并定量移入5ml量瓶中，再加溶剂稀释至刻度，密塞，摇匀，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得本品中药每4g含人参以人参皂苷Rg₁(C₄₂H₇₂O₁₄)和人参皂苷Re(C₄₈H₈₂O₁₈)的总量不得少于1.2mg。