CN1317282C

CN1317282C - 从夏天无中提取原阿片碱的方法

Info

Publication number: CN1317282C
Application number: CNB2005100243343A
Authority: CN
Inventors: 杨义芳; 杜立春
Original assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Current assignee: Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry
Priority date: 2005-03-11
Filing date: 2005-03-11
Publication date: 2007-05-23
Anticipated expiration: 2025-03-11
Also published as: CN1683372A

Abstract

本发明公开了从中药夏天无中提取生物碱原阿片碱的方法，其包括以下步骤：(1)将夏天无药材在85～100%乙醇中热提，浓缩提取液；(2)回收该经浓缩的提取液中的乙醇，在残留液体中加入浓度为0.5～15%的盐酸，放置；(3)将步骤(2)中的盐酸不溶物滤去，滤液用浓度为1～30%的强碱溶液中和，得生物碱沉淀a；(4)在该生物碱沉淀a中加入0.5～15%的盐酸与85～100%乙醇，滤去不溶物，滤液用1～30%强碱溶液中和，再一次得生物碱沉淀b，洗涤并干燥得到固体物；(5)将该固体物进行结晶。通过该方法，提取得到的原阿片碱产率为夏天无生药材的0.24%以上，纯度在99.5%以上。与现有的技术相比，具有污染少、用时短、成本低、得率高、纯度高、耗能低的优势。

Description

从夏天无中提取原阿片碱的方法

技术领域

本发明涉及从夏天无中提取生物碱原阿片碱(Protopine)的方法。

背景技术

夏天无系罂粟科、紫堇属、无柄紫堇[Corydalis decumbens(Thunb)Pers.(Corydalis amabilis Migo)]的干燥块茎，用于治疗风湿性关节炎，腰肌劳损，脑血管意外引起的偏瘫，具有镇痉止痛，活血化瘀和降压行气之功效。研究人员发现夏天无中含有夏天无碱、紫堇米定碱、毕枯枯灵碱、四氢巴马亭及原阿片碱等三十多种的生物碱。其中，原阿片碱(Protopine)具有胆碱酯酶抑制作用，并具有非选择性离子通道阻滞作用，可用于治疗早老性痴呆病，是早老性痴呆的一种潜在侯选药。若从天然产物中提取该化合物，则不失为一种简单、经济而有效的方式。原阿片碱(Protopine)化学名为：7-methyl-2，3：9，10-bis(methlenedioxy)-7，13a-secoberbin-13a-one，其化学结构如下：

从夏天无中分离生物总碱的文献较多，但分离原阿片碱的文献较少，且所得的原阿片碱产率一般不超过0.1％。如专利CN1445227A(夏天无总生物碱的提取方法及其新的用途，申请号02111103.0)：夏天无药材在稀盐酸中煎煮液过大孔吸附树脂，水洗后用乙醇洗脱；乙醇洗脱液过氧化铝凝胶柱，然后，在碱性条件下，析出生物总碱。由于夏天无中的生物碱四氢巴马亭的盐酸盐，在水中溶解度很小，从而不利于原阿片碱的分离；另外，由于盐酸的煎煮产生大量杂质，结果原阿片碱不能有效地从药材中抽提出来。

发明内容

本发明人对原阿片碱的提取进行了潜心研究，筛选出较佳地从夏天无中提取原阿片碱的方法，由此完成了本发明。

故本发明要解决的技术问题即是克服上述现有技术的缺陷，提供了一种从夏天无中提取原阿片碱的方法。

本发明的上述技术问题是通过下列技术方案实现的：

一种从夏天无中提取原阿片碱的方法，其包括以下步骤：

(1)将夏天无药材在85～100％乙醇中热提，浓缩提取液；

(2)回收步骤(1)中经浓缩的提取液中的乙醇，在残留液体中加入浓度为0.5～15％的盐酸，放置使盐酸不溶物充分析出；

(3)将步骤(2)中的盐酸不溶物滤去，滤液用浓度为1～30％的强碱溶液中和，得生物碱沉淀a；

(4)在步骤(3)中得到的生物碱沉淀a中加入0.5～15％的盐酸与85～100％乙醇，滤去不溶物，滤液用1～30％强碱溶液中和，再一次得生物碱沉淀b，洗涤并干燥得到固体物；

(5)将步骤(4)中得到的固体物进行结晶，即得原阿片碱晶体；

其中，步骤(1)中夏天无与乙醇的比例通常为1kg药材：5～50L乙醇，所说的热提一般是指回流提取，相应的温度为78～85℃；其提取次数可以是1～5次，每次提取时间可为1.5～5小时，多次提取时，显然也可在上述温度下直接加热提取，并将各次提取液合并再浓缩。

至于步骤(2)中在残留液体中加入盐酸，较佳地是，至pH为0.5～2，放置10～24小时使盐酸不溶物充分析出；其中，pH太低，如接近于0，虽盐酸不溶物析出快，但需加盐酸量大，且操作风险大(强酸环境)，而pH高于2则盐酸不溶物析出慢且不够充分；至于时间太短则盐酸不溶物不能充分析出，反之，时间越长，虽然析出充分，但延长了生产周期。

而步骤(3)中滤液用强碱溶液中和，较佳地是，至pH为10～12；其中，pH太高，如接近于14，则需加强碱量大，且操作风险大(强碱环境)，而pH低于10，则沉淀不够完全。

同理，步骤(4)中在生物碱沉淀a中加入盐酸和乙醇，较佳地是，至pH为0.5～3，而滤液用强碱溶液中和，较佳地是，至pH为8～12，从而制得生物碱沉淀b。该生物碱沉淀b进行常规洗涤以除去杂质和过量的强碱溶液后，再进行干燥得到白色固体物。

而步骤(5)中可采用氯仿、甲醇、乙醇、***和丙酮等有机溶剂中的一种或几种来进行结晶，如可按常规方法，于60℃将白色固体溶于上述溶剂中，冷却至室温；还可进一步重结晶，得无色原阿片碱晶体，熔点203～204℃，与对照品作混合熔点测定亦不下降。

较佳地是，该有机溶剂为体积比1∶1～2的氯仿和甲醇。

根据本发明，上述盐酸浓度较佳地是3～12％；更佳地是8～10％。

而上述强碱溶液可以是氢氧化钠或氢氧化钾等溶液，其浓度较佳地是5～20％；更佳地是9～15％。

而乙醇溶液浓度较佳地是88～98％；更佳地是90～95％。

本发明从夏天无中提取原阿片碱的方法中，步骤(2)～4)，即将生物碱溶于盐酸或强碱中和时的温度条件较佳地是0℃～50℃，通常是不需额外加热与冷却的室温下，可减少原阿片碱的损失。

与现有技术相比，本发明具有明显的优点：(1)污染少：如王兆全于中草药通讯1977年第8期第13页所报道的提取方法，采用毒性强的苯作为溶剂，本发明所采用的溶剂，均能有效地回收而重复使用，因此降低污染的同时也降低成本；(2)用时短：本发明不需过柱，而且溶剂总量低，步骤少；(3)成本低：本发明所采用的设备，均为常规设备，溶剂可套用，耗能低；(4)得率高：采用本发明的方法，提取安全；从人工栽培的夏天无中提取，残留于药材与其他生物碱中原阿片碱的含量极低，晶体原阿片碱的得率明显提高，占生药量可大于0.24％(W/W)；(5)纯度高：经高效液相色谱分析，其纯度也显著提高，大多在99.5％以上；(6)耗能低：使用的溶剂总量低，涉及的水溶液，不需加热与冷却。

具体实施方式

下面通过实施例进一步说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。另外，在本发明中，乙醇的浓度百分比为体积百分比；其余试剂浓度百分比为重量百分比。

其中，各实施例中制得的晶体经高效液相色谱分析法鉴定和测定含量，具体如下：

1、TLC鉴定：经氯仿加乙二胺；丙酮加乙二胺；石油醚，***，甲醇及氨水；多种展开剂鉴定，分离得到的原阿片碱晶体与原阿片碱对照品，其Rf值相同。

2、HPLC含量测定(顾孝红，唐平，靳祖英.反相高效液相色谱法测定夏天无中原阿片碱的含量.时珍国医国药，2002，13(10)：608-609)：

色谱仪：岛津SHIMADZU：SPD-10A，LC-10AD，C-R8A

波长282nm；流动相：乙腈∶甲醇∶0.2％磷酸＝150∶100∶750，二乙胺调pH＝3

色谱柱：Shim Pack-CLC-ODS

流速：1ml/分钟

样品浓度：3.35mg/ml

温度：20℃

上述对照品原阿片碱：购于中国药品生物制品检定所。

实施例1

称取干净的夏天无8千克，置于100L的提取釜中，加入40L 85％乙醇，加热至80℃，2小时，将提取液经纱布滤出，滤渣留于提取釜中，再加40L85％乙醇，继续热提2小时，两次滤液合并；回收(即浓缩)其中的乙醇，得残留液体10L。于上述残留液体中，加入10L 5％盐酸至pH为2，放置10小时；滤去盐酸不溶物，滤液用15％的氢氧化钠水溶液中和pH＝12得生物碱沉淀a；将生物碱沉淀a溶于5L 5％盐酸，同时加入85％乙醇500ml，使溶液pH为3，滤去新产生的沉淀；滤液用15％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝12，得生物碱沉淀b，用蒸馏水洗涤该沉淀b至pH＝8，干燥得白色固体物；该固体经氯仿与甲醇(体积比为1∶1)结晶与重结晶，得含量99.65％的无色透明原阿片碱晶体19.27g。

实施例2

称取干净的夏天无10千克，置于100L的提取釜中，加入50L 95％乙醇，加热至80℃，2小时，经纱布滤出，滤渣留于提取釜中，加50L 95％乙醇，继续热提，两次滤液合并；回收乙醇，得残留液体11L，于上述残留液体中加入10L 10％盐酸至pH为1.5，放置12小时；滤去盐酸不溶物，滤液用10％的氢氧化钠水溶液中和pH＝11得生物碱沉淀a；将生物碱沉淀a溶于5L 10％盐酸，同时加入95％乙醇500ml，使溶液pH为1，滤去新产生的沉淀；滤液用10％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝10，得生物碱沉淀b，用蒸馏水洗涤该沉淀b至pH＝8，干燥得白色固体；该固体经氯仿与甲醇(体积比为1∶1)结晶与重结晶，得含量99.73％的原阿片碱24.11g。

实施例3

称取干净的夏天无1千克置于10L的圆底烧瓶中，加入6L 90％乙醇，加热至85℃，回流2h，倾出上清液，药渣留于圆底烧瓶中，重新加入6L 90％乙醇，继续热提2h，合并两次上述溶液并浓缩；回收乙醇，得残留液体1L，于上述残留液体中加入3％盐酸至pH＝1，放置20小时；滤去不溶物，滤液用30％的氢氧化钠水溶液中和pH＝11得生物碱沉淀a；将生物碱沉淀a用0.5L 10％盐酸溶解，同时加入95％乙醇80ml，使溶液pH为1，滤去新产生的沉淀；滤液用20％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝9，得生物碱沉淀b，用蒸馏水洗涤该沉淀b至pH＝8，干燥得白色固体；该固体经氯仿与甲醇(体积比为1∶2)结晶与重结晶，得含量99.54％的原阿片碱1.89g。

实施例4

称取干净的夏天无1.2千克置于10L的圆底烧瓶中，加入6L 98％乙醇，加热至85℃，回流1.5h，倾出上清液，药渣留于圆底烧瓶中，重新加入6L 98％(V/V)乙醇，继续热提1.5h，合并两次上述溶液并浓缩；回收乙醇，得残留液体1.2L，于上述残留液体中加入8％盐酸至pH＝1.5，放置24小时，滤去不溶物；滤液用5％的氢氧化钠水溶液中和pH＝10得生物碱沉淀a；将生物碱沉淀a用0.4L 15％盐酸溶解，同时加入90％乙醇80ml使溶液pH为0.5，滤去新产生的沉淀；滤液用15％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝8.5，得生物碱沉淀b，用蒸馏水洗涤该沉淀b至pH＝8，干燥得白色固体；该固体经氯仿与甲醇(体积比为1∶2)结晶与重结晶，得含量99.67％的原阿片碱2.86g。

实施例5

称取干净的夏天无5千克置于50L的提取釜中，加入25L 90％乙醇，加热至85℃，回流1.5h，倾出上清液，药渣留于提取釜中，重新加入25L 90％乙醇，继续热提1.5h，合并2次上述溶液并浓缩；回收乙醇，得残留液体6L，于上述残留液体中加入15％盐酸至pH＝1，放置14小时，滤去不溶物；滤液用20％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝12得生物碱沉淀a；将生物碱沉淀a用2.5L 10％盐酸溶解，同时加入95％乙醇300ml使溶液pH为2，滤去新产生的沉淀；滤液用20％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝9，得生物碱沉淀b，用蒸馏水洗涤该沉淀b至pH＝8，干燥得白色固体；该固体经氯仿与甲醇(体积比为1∶2)结晶与重结晶，得含量99.76％的原阿片碱12.10g。

实施例6

称取干净的夏天无1千克置于100L的提取釜中，加入50L无水乙醇，加热至78℃，5小时，经纱布滤出，收集滤液；回收乙醇，得残留液体1L，于上述残留液体中加入0.5％盐酸至pH＝2，放置15小时，滤去不溶物；滤液用1％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝10得生物碱沉淀a；将生物碱沉淀a用0.5L 3％盐酸溶解，同时加入98％乙醇300ml使溶液pH为3，滤去新产生的沉淀；滤液用5％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝8，得生物碱沉淀b，用蒸馏水洗涤以除去杂质，干燥得白色固体；该固体经氯仿与乙醇(体积比为1∶1)结晶与重结晶，得含量99.5％的原阿片碱2.27g。

实施例7

称取干净的夏天无6千克置于50L的提取釜中，加入30L 85％乙醇，加热至80℃左右，3小时，经纱布滤出，滤渣留于提取釜中，再加30L 85％乙醇，继续热提1.5小时，如此反复提取共5次，合并所有滤液；回收乙醇，得残留液体6L，于上述残留液体中加入12％盐酸至pH＝0.8，放置12小时，滤去不溶物；滤液用9％的氢氧化钾水溶液中和，pH＝10.5得生物碱沉淀a；将生物碱沉淀a用3L 15％盐酸溶解，同时加入88％乙醇300ml使溶液pH为1.5，滤去新产生的沉淀；滤液用30％的氢氧化钾水溶液中和，pH＝10，得生物碱沉淀b，用蒸馏水洗涤该沉淀b至pH＝8，干燥得白色固体；该固体经***结晶与重结晶，得含量99.6％的原阿片碱14.48g。

实施例8

称取干净的夏天无5千克置于50L的提取釜中，加入25L 88％乙醇，加热至85℃，回流1.5h，倾出上清液，药渣留于提取釜中，重新加入25L 88％乙醇，继续热提1.5h，倾出上清液再重复提取1次，合并3次上述溶液；回收乙醇，得残留液体5L，于上述残留液体中加入15％盐酸至pH＝0.5，放置14小时，滤去不溶物；滤液用20％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝12得生物碱沉淀a；将生物碱沉淀a用2.5L 8％盐酸溶解，同时加入95％乙醇300ml使溶液pH为2，滤去新产生的沉淀；滤液用20％的氢氧化钠水溶液中和，pH＝9，得生物碱沉淀b，用蒸馏水洗涤该沉淀b至pH＝8，干燥得白色固体；该固体经氯仿与丙酮(体积比为1∶1.5)结晶，得含量99.7％的原阿片碱12.14g。

Claims

1、一种从夏天无中提取原阿片碱的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

(1)将夏天无药材在体积百分比为85～100％的乙醇中热提，浓缩提取液；

(2)回收步骤(1)中经浓缩的提取液中的乙醇，在残留液体中加入重量百分比浓度为0.5～15％的盐酸，放置使盐酸不溶物充分析出；

(3)将步骤(2)中的盐酸不溶物滤去，滤液用重量百分比浓度为1～30％的强碱溶液中和，得生物碱沉淀a；

(4)在步骤(3)中得到的生物碱沉淀a中加入重量百分比为0.5～15％的盐酸与体积百分比为85～100％的乙醇至pH为0.5～3，滤去不溶物，滤液用重量百分比为1～30％强碱溶液中和至pH为8～12，再一次得生物碱沉淀b，洗涤并干燥得到固体物；

(5)将步骤(4)中得到的固体物进行结晶，即得原阿片碱晶体。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中夏天无与乙醇的比例为1kg药材：5～50L乙醇，所说的热提是指在78～85℃温度下进行提取或回流提取，其提取次数为1～5次，每次提取时间为1.5～5小时。

3、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)中在残留液体中加入盐酸至pH为0.5～2，放置10～24小时。

4、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(3)中滤液用强碱溶液中和至pH为10～12。

5、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(5)采用有机溶剂：氯仿、甲醇、乙醇、***和丙酮中的一种或几种来进行结晶。

6、根据权利要求5所述的方法，其特征在于该有机溶剂为体积比1∶1～2的氯仿和甲醇。

7、根据权利要求1所述的方法，其特征在于该乙醇溶液体积百分比浓度为90～95％。

8、根据权利要求1所述的方法，其特征在于该盐酸重量百分比浓度为3～12％。

9、根据权利要求1～8任一权利要求所述的方法，其特征在于该强碱溶液是氢氧化钠或氢氧化钾，其重量百分比浓度为5～20％。