CN117982710A - 一种重组双蛋白医用敷料的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医用敷料技术领域,尤其涉及一种重组双蛋白医用敷料的制备方法。步骤如下:S1:将基础原料放入反应容器中,进行真空搅拌至完全混合,形成配料液;S2:将S1步骤得到的配料液放入反应器的内部,然后加入纯化水50‑80份,真空搅拌至完全混合,形成精华原液;S3:将精华原液和敷贴均通过灌装机灌装进入铝箔袋或装载瓶内;S4:对S3步骤灌装完成的铝箔袋进行热合封口或对装载瓶进行封装。本发明提供的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,通过对制备方法的改进,使得生产后的重组双蛋白医用敷料在轻中度痤疮的愈的皮肤修护、对敏感皮肤与激光光子治疗后早期色素沉着和减轻瘢痕形成进行辅助治疗、非慢性创面与周围皮肤的护理均有较好的效果。
Description
技术领域
本发明涉及医用敷料技术领域,尤其涉及一种重组双蛋白医用敷料的制备方法。
背景技术
伤口的愈合过程是一个连续的动态过程,是细胞与细胞、细胞与细胞基质以及与可溶性介质间相互作用的过程。
胶原蛋白是生物高分子,动物***中的主要成分,也是哺乳动物体内含量最多、分布最广的功能性蛋白,占蛋白质总量的25%~30%,某些生物体甚至高达80%以上。胶原蛋白种类较多,常见类型为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅴ型和Ⅺ型。胶原蛋白因具有良好的生物相容性、可生物降解性以及生物活性,因此在食品、医药、组织工程、化妆品等领域获得广泛的应用。
皮炎、湿疹、敏感皮肤及大部分微创美容术后患者的皮肤屏障功能会出现不同程度的受损,因此需要建立新的皮肤屏障、以达到阻止外界细菌等微生物继续感染受损部分的目的。由于胶原蛋白是一种生物性高分子物质,可以补充皮肤各层所需的营养,使皮肤中胶原活性增强,有滋润皮肤、延缓衰老、美容、消皱等功效,因此常用于作为敷料。
贻贝粘蛋白(Mussel adhesive protein,MAP)在贻贝足的腺体内生成和储存,又称为贻贝足丝蛋白,具有高强度、高韧性、防水性和超强的粘附性。
海洋生物贻贝足丝腺分泌的一种多酚蛋白质,因其强功效和稀缺性被誉为“海洋软黄金”;
目前已知的唯一带有高含量多巴基团的蛋白质,多巴基团具有明显的抗炎、抗氧化、抑菌、止痛止痒等活性,性质温和,无任何刺激性,安全性及耐受性良好。在美容护肤;
领域可用于激光整形术后修复、消除敏感肌炎症、增强防晒剂、功效、减少暗沉、美白祛斑等。
目前从贻贝中鉴定得到11种粘蛋白亚类,包括Mefp-1、Mefp-2、Mefp-3、Mefp-4、Mefp-5、Mefp-6、胶原蛋白pre-COL-P、pre-COL-D、pre-COL-NG、足丝基质蛋白PTMP和DTMP。
传统的贻贝粘蛋白主要是从天然贻贝中提取,成本较高,同时存在一些安全性风险,比如提取中污染风险,批次质量不稳定,批间差异较大等问题。
最新研究表明重组贻贝粘蛋白可以用于手术切口、烧烫伤、粘膜组织损伤、持久性溃疡面等,具有促进细胞贴壁爬行,促进创面愈合、抑制瘙痒、广谱粘结,形成抗水保护膜等作用。重组贻贝粘蛋白是一种多酚类单一蛋白生物材料。重组贻贝粘蛋白分子由70~90个重复的多肽片段组成,其中含有20%的赖氨酸和10%的多巴基团(3,4-二羟基苯丙氨酸)。赖氨酸带正电荷,其通过静电作用吸引人体带负电荷的表皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、神经细胞贴壁和爬行替代;多巴基团的自氧化交联体现在多巴基团可以与空气中的氧结合,形成多巴醌,多巴醌和未氧化的多巴可交联形成高聚物,从而促进创面的愈合。因此,重组贻贝粘蛋白是创面修复敷料的优良选择。
重组Ⅲ型人源化胶原蛋白:可以补充皮肤所需要的胶原蛋白大分子,同时也可以使皮肤看起来更加的光滑有弹性,加快皮肤的新陈代谢。对皮肤有非常重要的作用,如果皮肤出现了缺水或者是胶原蛋白缺失的时候,会导致皮肤过度衰老,甚至还会引起皮肤上出现很多的皱纹,及时的补充胶原蛋白,能够保护皮肤更好的状态,同时也可以防止过度衰老。胶原蛋白是细胞外基质的重要成分,重组Ⅲ型人源化胶原蛋白是通过基因工程技术生成的胶原蛋白,与人体胶原蛋白100%同源,无病毒隐患,具有保湿、抗皱、修复、亮肤、紧致等功效。
β-葡聚糖又称“免疫黄金”是一种天然产物,是由葡萄糖分子通过β-1,3-键和β-1,6-键连接而成的多糖。β-葡聚糖在免疫***中发挥着重要的作用。它可以增强免疫细胞的活性,促进免疫细胞的增殖和分化,提高免疫细胞对病原体的识别和清除能力。此外,β-葡聚糖还具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化等多种作用,能够调节免疫***的功能,维持免疫平衡。除了免疫调节作用,β-葡聚糖还具有许多其他的生物学活性。它可以增强抗氧化能力,清除自由基,减少氧化损伤。此外,β-葡聚糖还具有抗菌、抗病毒、抗衰老、降血脂等作用,有助于改善人体健康。由于其高效的功效和广泛的应用领域,β-葡聚糖被广泛应用于医药、保健品和食品等领域;
为此,设计一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,用于对上述技术问题提供另一种技术方案。
发明内容
基于此,有必要针对上述技术问题,提供一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,用于解决上述背景技术中提出的技术问题。
为了解决上述的技术问题,本发明采用了如下技术方案:
一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,步骤如下:
S1:将基础原料放入反应容器中,进行真空搅拌至完全混合,形成配料液;
S2:将S1步骤得到的配料液放入反应器的内部,然后加入纯化水50-80份,真空搅拌至完全混合,形成精华原液;
S3:将精华原液和敷贴均通过灌装机灌装进入铝箔袋内或将精华原液通过灌装机灌装进入装载瓶内;
S4:对S3步骤灌装完成的铝箔袋进行热合封口或对装载瓶进行封装;
S5:对S4步骤得到的封口后的铝箔袋或封装后的装载瓶,进行灭菌。
作为本发明提供的所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法的一种优选实施方式,所述S1步骤中,将基础原料放入反应容器中,在温度为20度-85度,按照10Hz-50Hz的搅拌频率,进行真空搅拌至完全混合,形成配料液。
作为本发明提供的所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法的一种优选实施方式,所述基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白2-5份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1-7份、大分子β-葡聚糖10-20份、小分子β-葡聚糖10-20份、乳化剂10-20份、保湿剂15-30份、增稠剂10-20份、保护剂5-10份、三乙醇胺10-20份、纯化水80-120份。
作为本发明提供的所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法的一种优选实施方式,所述基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白2份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1份、大分子β-葡聚糖10份、小分子β-葡聚糖10份、乳化剂10份、保湿剂15份、增稠剂10份、保护剂5份、三乙醇胺10份、纯化水80份。
作为本发明提供的所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法的一种优选实施方式,所述乳化剂为甘油聚醚-26、聚氧乙烯醚、聚氧丙烯醚中一种或多种。
作为本发明提供的所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法的一种优选实施方式,所述保湿剂为甘油、丙二醇、小麦蛋白、氨基酸、丝蛋白中的一种或多种。
作为本发明提供的所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法的一种优选实施方式,所述增稠剂为卡波姆、黄原胶、可溶性淀粉、羟丙基甲基纤维素中的一种或多种。
作为本发明提供的所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法的一种优选实施方式,所述保护剂为尼泊金甲酯、苯氧乙醇、苯甲酸钠、山梨酸钾中的一种或多种。
作为本发明提供的所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法的一种优选实施方式,所述S3步骤中,敷贴的材质为无纺布,敷贴形状为长方形或圆形或椭圆形,装载瓶为PET塑料瓶或铝塑瓶或玻璃瓶。
可以毫无疑义地看出,通过本申请的上述的技术方案,必然可以解决本申请要解决的技术问题。
同时,通过以上技术方案,本发明至少具备以下有益效果:
本发明提供的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,通过对制备方法的改进,使得生产后的重组双蛋白医用敷料在轻中度痤疮的愈的皮肤修护、对敏感皮肤与激光光子治疗后早期色素沉着和减轻瘢痕形成进行辅助治疗、非慢性创面与周围皮肤的护理均有较好的效果,进而具有抗炎、抗敏修复创面愈合的作用,对皮肤无刺激避免新的过敏发生并且修复皮肤过敏症状,无刺激性气味,使用舒适,提高医用敷贴使用的效率和治疗效果;
通过在敷料内添加重组贻贝粘蛋白和重组Ⅲ型人源化胶原蛋白通过组合能快速的对创伤皮肤的修复、胶原蛋白可诱导血小板黏附形成止血栓;胶原蛋白以特定排列形成网状结构,作为上皮细胞生长的依附和支撑物,诱导上皮细胞增殖、分化和移行,以促进创面愈合。重组Ⅲ型人源化胶原蛋白中氨基酸组成与天然胶原蛋白氨基酸序列相应部分100%相同,可以在人体中行使天然胶原蛋白的功能,应用于人体皮肤创面无不适感,无排异,属该领域中重要研究成果。应用于皮肤创面,可有效发挥其抑菌性,降低炎性物质的分泌,有抑菌、止痛功效,达到创面修复、止血效果;
通过在敷料内添加重组贻贝粘蛋白和β-葡聚糖,提高医用敷贴的治疗效果,贻贝粘蛋白具有促进伤口愈合的作用,β-葡聚糖提高免疫细胞对病原体的识别和清除能力,通过组合能抗过敏、抗炎、伤口修复等多种作用,对皮肤无刺激避免新的过敏发生并且能够修复皮肤过敏症状;
通过在敷料内添加贻贝粘蛋白和β-葡聚糖,避免中药药膏气味刺激引起周围人群感官不适,使用舒适,提高医用敷贴使用的效率;
使用重组贻贝粘蛋白,与传统贻贝粘蛋白相比,生产原料来源清楚,无任何动物源成份,无病毒污染风险,生产过程可控,可实现大规模生产,生产质量稳定,批间差异小,获得的蛋白纯度高,成份单一,内毒素含量低,重组贻贝粘蛋白兼具了天然贻贝足丝蛋白的弹性和粘性,更利于产品性能的发掘。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单的介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明的制备流程图;
图2为本发明验证例抗敏试验效果图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明方案,下面将结合附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述。
需要说明的是,在不冲突的情况下,本发明中的实施例及实施例中的特征和技术方案可以相互组合。
应注意到:相似的标号和字母在下面的附图中表示类似项,因此,一旦某一项在一个附图中被定义,则在随后的附图中不需要对其进行进一步定义和解释。
实施例一
参照图1,一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,步骤如下:
S1:将基础原料放入反应容器中,同时位于生产环境洁净级别为10万的生产车间或非洁净车间反应容器内按配方量添加所有配料,将基础原料放入反应容器中,在温度为20度-85度,按照10Hz-50Hz的搅拌频率,进行真空搅拌至完全混合,形成配料液,并在搅拌时无可见杂质及异物;
基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白2-5份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1-7份、大分子β-葡聚糖10-20份(分子量为2×106)、小分子β-葡聚糖10-20份、乳化剂甘油聚醚-2610-20份、保湿剂甘油和丙二醇15-30份、增稠剂卡波姆10-20份、保护剂尼泊金甲酯5-10份、三乙醇胺10-20份、纯化水80-120份;
优选的,乳化剂为甘油聚醚-26、聚氧乙烯醚、聚氧丙烯醚中一种或多种。
优选的,保湿剂为甘油、丙二醇、小麦蛋白、氨基酸、丝蛋白中的一种或多种。
优选的,增稠剂为卡波姆、黄原胶、可溶性淀粉、羟丙基甲基纤维素中的一种或多种。
优选的,保护剂为尼泊金甲酯、苯氧乙醇、苯甲酸钠、山梨酸钾中的一种或多种。
优选的,基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白2份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1份、大分子β-葡聚糖10份(分子量为2×106)、小分子β-葡聚糖10份、乳化剂10份、保湿剂甘油和丙二醇15份、增稠剂卡波姆10份、保护剂尼泊金甲酯5份、三乙醇胺10份、纯化水80份。
S2:将S1步骤得到的配料液放入反应器的内部,然后加入纯化水50-80份,在温度为20度-85度,按照10Hz-50Hz的搅拌频率,进行真空搅拌至完全混合,形成精华原液,从而让精华原液中纯化水的占比为95%以上,进而能够让精华原液在使用时不易产生凝结;
S3:将精华原液和敷贴均通过灌装机灌装进入铝箔袋内部,其中,敷贴的材质为无纺布,敷贴形状为长方形、圆形、椭圆形等其中的一种,或者将精华原液通过灌装机灌装进入装载瓶内,装载瓶为PET塑料瓶或铝塑瓶或玻璃瓶;
S4:对S3步骤灌装完成的铝箔袋进行热合封口或对装载瓶进行封装;
S5:对S4步骤得到的封口后的铝箔袋或封装后的装载瓶,在辐照剂量为5kGy-25kGy下采用辐照灭菌工艺,进行灭菌。
实施例二
在上述实施例一的基础上进行公开,与实施例一不同之处在于,大分子β-葡聚糖为15份,其余操作与实施例一相同。
实施例三
在上述实施例一的基础上进行公开,与实施例一不同之处在于,大分子β-葡聚糖为20份,其余操作与实施例一相同。
实施例四
在上述实施例一的基础上进行公开,基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白4份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1份、大分子β-葡聚糖15份(分子量为3×105)、乳化剂甘油聚醚-2615份、保湿剂甘油和丙二醇20份、增稠剂卡波姆15份、保护剂尼泊金甲酯7份、三乙醇胺15份、纯化水100份
实施例五
在上述实施例一的基础上进行公开,基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白6份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1份、大分子β-葡聚糖20份、乳化剂甘油聚醚-26和聚氧乙烯醚20份、保湿剂丙二醇和小麦蛋白30份、增稠剂黄原胶和可溶性淀粉20份、保护剂苯氧乙醇3份、三乙醇胺20份、纯化水120份。
实施例六
在上述实施例一的基础上进行公开,基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白20份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1-7份、小分子β-葡聚糖15份、乳化剂甘油聚醚-26 30份、保湿剂甘油和丙二醇40份、增稠剂卡波姆30份、保护剂尼泊金甲酯17份、三乙醇胺35份、纯化水70份。
对比例
在上述实施例一的基础上进行公开,基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白2份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1份、乳化剂甘油聚醚-2610份、保湿剂甘油和丙二醇15份、增稠剂卡波姆10份、保护剂尼泊金甲酯5份、三乙醇胺10份、纯化水80份。
验证例
选取4组实验组:实施例一组、实施例二组、实施例三组、对照例组,对按照实施例一至三和对照例配方配置生产的敷料进行性能测试。
伤口修复实验
试验动物:随机选取受精后2天的转基因血管绿色荧光斑马鱼Fli-1品系,注射冰醋酸建立斑马鱼伤口愈合模型。
试验方法:断尾鳍斑马鱼分别放置实施例一组、实施例二组和实施例三组和对照例组制备的敷料中,28℃培养箱孵育2天。试验结果如表1所示。
表1伤口修复实验对照表
由表1可知,实施例一-3组均添加β-葡聚糖,与对照例组不添加β-葡聚糖相比对伤口愈合有明显的促进作用,实施例一-3组中β-葡聚糖的含量逐渐增加,对伤口愈合的促进作用随β-葡聚糖含量的增加而增强。说明β-葡聚糖具有明显促进伤口愈合的作用。
(2)组织再生试验
试验动物:随机选取受精后3天的野生型AB品系斑马鱼,采用手术切断尾鳍的方法建立斑马鱼促组织再生模型。
试验方法:断尾鳍斑马鱼分别放置实施例一组、实施例二组和实施例三组和对照例组制备的敷料中,28℃培养箱孵育3天。试验结果如表2所示。
表2组织再生试验结果对照表
由表2可知,实施例一至三组均添加β-葡聚糖,与对照例组不添加β-葡聚糖相比对组织再生有明显的促进作用,实施例一-3组中β-葡聚糖的含量逐渐增加,对组织再生的促进作用随β-葡聚糖含量的增加而增强。说明β-葡聚糖具有明显促进组织再生的作用。
(3)抗敏试验
试验人群:山药汁过敏受试者30人,年龄为20-50岁,每位受试者使用相同的产品。
试验方法:将山药汁液直接涂抹在被测皮肤部位,引起皮肤痒、红肿、疼痛,再涂抹实施例一组和对照例组配方制备的敷料,试验部位:手臂内侧,取适量产品均匀涂抹在过敏部位,每隔十分钟涂抹一次。试验结果如图2所示,其中,A为涂抹对照组敷料皮肤状态,B为涂抹实施例1敷料皮肤状态,山药汁引起皮肤过敏后皮肤出现大片红肿现象,涂抹对照例配方制备的不含β-葡聚糖的敷料皮肤依然红肿,通过涂抹实施例一配方制备的敷料皮肤红肿消失,起到修复过敏皮肤的作用。
抗炎试验
试验人群:随机选取受精后3天的转基因血管绿色荧光斑马鱼,硫酸铜诱发斑马鱼炎症模型。
试验方法:炎症鳍斑马鱼分别放置于实施例一组、实施例二组和实施例三组和对照例组制备的敷料中,阳性对照例为吲哚美辛重量百分数为8.6%,28℃培养箱孵育2h。试验结果如表3所示。
表3抗炎试验对照表
由表3可知,实施例一至三组均添加β-葡聚糖,与对照例组不添加β-葡聚糖相比抗炎效果有明显提升,实施例一至三组中β-葡聚糖的含量逐渐增加,对抗炎效果的促进作用随β-葡聚糖含量的增加而增强。说明β-葡聚糖具有显著抗炎作用。
因此,本发明采用上述一种多功能重组双蛋白医用敷贴,具有抗炎、抗敏修复创面愈合的作用,对皮肤无刺激避免新的过敏发生并且能够修复皮肤过敏症状,无刺激性气味,使用舒适,提高医用敷贴使用的效率和治疗效果。
以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节,也不限制该本发明仅为所述的具体实施方式。显然,根据本说明书的内容,可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例,是为了更好地解释本发明的原理和实际应用,从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。
Claims (9)
1.一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,其特征在于,步骤如下:
S1:将基础原料放入反应容器中,进行真空搅拌至完全混合,形成配料液;
S2:将S1步骤得到的配料液放入反应器的内部,然后加入纯化水50-80份,真空搅拌至完全混合,形成精华原液;
S3:将精华原液和敷贴均通过灌装机灌装进入铝箔袋内或将精华原液通过灌装机灌装进入装载瓶内;
S4:对S3步骤灌装完成的铝箔袋进行热合封口或对装载瓶进行封装;
S5:对S4步骤得到的封口后的铝箔袋或封装后的装载瓶,进行灭菌。
2.根据权利要求1所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,其特征在于,所述S1步骤中,将基础原料放入反应容器中,在温度为20度-85度,按照10Hz-50Hz的搅拌频率,进行真空搅拌至完全混合,形成配料液。
3.根据权利要求1所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,其特征在于,所述基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白2-5份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1-7份、大分子β-葡聚糖10-20份、小分子β-葡聚糖10-20份、乳化剂10-20份、保湿剂15-30份、增稠剂10-20份、保护剂5-10份、三乙醇胺10-20份、纯化水80-120份。
4.根据权利要求3所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,其特征在于,所述基础原料的配比包括重组贻贝粘蛋白2份、重组Ⅲ型人源化胶原蛋白1份、大分子β-葡聚糖10份、小分子β-葡聚糖10份、乳化剂10份、保湿剂15份、增稠剂10份、保护剂5份、三乙醇胺10份、纯化水80份。
5.根据权利要求3所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,其特征在于,所述乳化剂为甘油聚醚-26、聚氧乙烯醚、聚氧丙烯醚中一种或多种。
6.根据权利要求3所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,其特征在于,所述保湿剂为甘油、丙二醇、小麦蛋白、氨基酸、丝蛋白中的一种或多种。
7.根据权利要求3所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,其特征在于,所述增稠剂为卡波姆、黄原胶、可溶性淀粉、羟丙基甲基纤维素中的一种或多种。
8.根据权利要求3所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,其特征在于,所述保护剂为尼泊金甲酯、苯氧乙醇、苯甲酸钠、山梨酸钾中的一种或多种。
9.根据权利要求1所述的一种重组双蛋白医用敷料的制备方法,其特征在于,所述S3步骤中,敷贴的材质为无纺布,敷贴形状为长方形或圆形或椭圆形,装载瓶为PET塑料瓶或铝塑瓶或玻璃瓶。
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