CN117426996B - 一种抗皱肽组合物及其制备方法 - Google Patents
一种抗皱肽组合物及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117426996B CN117426996B CN202311575883.4A CN202311575883A CN117426996B CN 117426996 B CN117426996 B CN 117426996B CN 202311575883 A CN202311575883 A CN 202311575883A CN 117426996 B CN117426996 B CN 117426996B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- weight
- parts
- peptide
- collagen
- acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 134
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 87
- 230000001153 anti-wrinkle effect Effects 0.000 title claims abstract description 52
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 48
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 155
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 155
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 153
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 claims abstract description 75
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 claims abstract description 75
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims abstract description 66
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims abstract description 51
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims abstract description 51
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims abstract description 51
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims abstract description 51
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 40
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 33
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 33
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims abstract description 32
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims abstract description 32
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims abstract description 30
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims abstract description 29
- 229910007565 Zn—Cu Inorganic materials 0.000 claims abstract description 28
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims abstract description 22
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 claims abstract description 12
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 claims abstract description 12
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 8
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims abstract 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 69
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 69
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 69
- 241000276707 Tilapia Species 0.000 claims description 68
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 60
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 50
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 50
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 50
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 50
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 42
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 42
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 32
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 22
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 claims description 21
- 108010055615 Zein Proteins 0.000 claims description 20
- 229920002494 Zein Polymers 0.000 claims description 20
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 20
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 20
- 239000005019 zein Substances 0.000 claims description 20
- 229940093612 zein Drugs 0.000 claims description 20
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 19
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 16
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 16
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 16
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 claims description 15
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 claims description 15
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 14
- QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N Carnosic acid Natural products CC([C@@H]1CC2)(C)CCC[C@]1(C(O)=O)C1=C2C=C(C(C)C)C(O)=C1O QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N 0.000 claims description 14
- 108010087806 Carnosine Proteins 0.000 claims description 14
- CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N N-beta-alanyl-L-histidine Natural products NCCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N carnosine Chemical compound [NH3+]CCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CNC=N1 CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims description 14
- 229940044199 carnosine Drugs 0.000 claims description 14
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 claims description 14
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 claims description 14
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 claims description 14
- ONDPHDOFVYQSGI-UHFFFAOYSA-N zinc nitrate Chemical compound [Zn+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O ONDPHDOFVYQSGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- KQEQPUBSXXOUGC-MLCQCVOFSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-1-acetylpyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H]1CCCN1C(C)=O)C(O)=O KQEQPUBSXXOUGC-MLCQCVOFSA-N 0.000 claims description 13
- LODWEXDBRZBADB-XEVVZDEMSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-6-amino-2-(hexadecanoylamino)hexanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LODWEXDBRZBADB-XEVVZDEMSA-N 0.000 claims description 13
- 229940094912 palmitoyl tripeptide-5 Drugs 0.000 claims description 13
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 12
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 claims description 11
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 claims description 11
- 230000035485 pulse pressure Effects 0.000 claims description 11
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000009920 chelation Effects 0.000 claims description 10
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims description 10
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 10
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims description 7
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims description 7
- XTVVROIMIGLXTD-UHFFFAOYSA-N copper(II) nitrate Chemical compound [Cu+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O XTVVROIMIGLXTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims description 7
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims description 4
- ITIMHIATVYROGF-XWUOBKMESA-N (3S)-3-[[(2S)-2-acetamido-6-aminohexanoyl]amino]-4-[[(2S)-1-[[(1S)-1-carboxy-2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical group CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(O)=O ITIMHIATVYROGF-XWUOBKMESA-N 0.000 claims description 3
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L copper(II) chloride Chemical compound Cl[Cu]Cl ORTQZVOHEJQUHG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 claims description 3
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 claims description 3
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 claims description 3
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 claims description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 abstract description 8
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 abstract description 7
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 3
- 241000276701 Oreochromis mossambicus Species 0.000 abstract description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 abstract description 2
- 230000002508 compound effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 95
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 46
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 28
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 25
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 18
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 16
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 15
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 15
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 15
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 14
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 13
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 13
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 12
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 11
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 10
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 10
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 10
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 10
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 9
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 9
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 9
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 9
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 9
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 8
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 7
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 7
- -1 arginine) Chemical class 0.000 description 7
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 6
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 6
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 6
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 description 5
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 description 5
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 5
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 4
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 4
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 4
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 4
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 4
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 3
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 3
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 108010044493 collagen type XVII Proteins 0.000 description 3
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 3
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000004177 elastic tissue Anatomy 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GYCKQBWUSACYIF-UHFFFAOYSA-N Ethyl salicylate Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=CC=C1O GYCKQBWUSACYIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 2
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 101000627872 Homo sapiens 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 2
- 101001013150 Homo sapiens Interstitial collagenase Proteins 0.000 description 2
- 101000669513 Homo sapiens Metalloproteinase inhibitor 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000645296 Homo sapiens Metalloproteinase inhibitor 2 Proteins 0.000 description 2
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 2
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 2
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 2
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 2
- 101710170181 Metalloproteinase inhibitor Proteins 0.000 description 2
- 102100039364 Metalloproteinase inhibitor 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100026262 Metalloproteinase inhibitor 2 Human genes 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 2
- 230000032677 cell aging Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 2
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 2
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 229940126170 metalloproteinase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 239000003475 metalloproteinase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008832 photodamage Effects 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000012846 protein folding Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 230000036560 skin regeneration Effects 0.000 description 2
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001238 wet grinding Methods 0.000 description 2
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 2
- RRJOMESUBQAYOA-BZSNNMDCSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-acetamido-6-aminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-6-aminohexanamide Chemical group NCCCC[C@H](NC(=O)C)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)CC1=CN=CN1 RRJOMESUBQAYOA-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 1,1-diphenyl-2-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazine;ethanol Chemical compound CCO.[O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1NN(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YKBGVTZYEHREMT-KVQBGUIXSA-N 2'-deoxyguanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 YKBGVTZYEHREMT-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 1
- 108090000270 Ficain Proteins 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 description 1
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 description 1
- 230000010718 Oxidation Activity Effects 0.000 description 1
- 229940123973 Oxygen scavenger Drugs 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000019836 ficin Nutrition 0.000 description 1
- POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N ficin Chemical compound FI=CI=N POTUGHMKJGOKRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 108010007119 flavourzyme Proteins 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 229940078752 magnesium ascorbyl phosphate Drugs 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004118 muscle contraction Effects 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- HTJNEBVCZXHBNJ-XCTPRCOBSA-H trimagnesium;(2r)-2-[(1s)-1,2-dihydroxyethyl]-3,4-dihydroxy-2h-furan-5-one;diphosphate Chemical compound [Mg+2].[Mg+2].[Mg+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O HTJNEBVCZXHBNJ-XCTPRCOBSA-H 0.000 description 1
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
- A61K8/65—Collagen; Gelatin; Keratin; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
- A61K8/20—Halogens; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
- A61K8/27—Zinc; Compounds thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/40—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing nitrogen
- A61K8/44—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/494—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom
- A61K8/4946—Imidazoles or their condensed derivatives, e.g. benzimidazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
- A61K8/645—Proteins of vegetable origin; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
- A61K8/733—Alginic acid; Salts thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
- A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/59—Mixtures
- A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions
- A61K2800/5922—At least two compounds being classified in the same subclass of A61K8/18
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/805—Corresponding aspects not provided for by any of codes A61K2800/81 - A61K2800/95
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/81—Preparation or application process involves irradiation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/82—Preparation or application process involves sonication or ultrasonication
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/84—Products or compounds obtained by lyophilisation, freeze-drying
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
本发明提出了一种抗皱肽组合物及其制备方法，属于化妆品技术领域。将罗非鱼依次经过碱液、酸液浸泡，蛋白酶酶解，低热高压脉冲预处理，超声波辅助酶解处理，制得胶原蛋白肽，与可溶性锌盐和可溶性铜盐反应，制得胶原蛋白肽‑Zn‑Cu复合物，将玉米黄粉蛋白与玻尿酸和泛酸混合反应，酶解，制得玉米蛋白肽‑玻尿酸‑泛酸复合物，与胶原蛋白肽‑Zn‑Cu复合物、肽组合物混合包埋于微球中，制得抗皱肽组合物。在多种组合物的复配作用下，起到抗老化、抗氧化、抗衰老、保湿等作用，采用包埋技术，延长其保质时间，提高其流动性，具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，具体涉及一种抗皱肽组合物及其制备方法。
背景技术
皱纹是皮肤老化的标志之一，是由于人体受到内源性或外源性因素的影响后，导致皮肤支撑组织及皮肤结构的变化，造成皮肤保水能力的丧失，弹力纤维和胶原排列顺序的变化，导致皮肤的机械力和弹性下降，形成凹陷，最终形成皱纹。造成皱纹的因素较多，如活性氧、紫外照射、自由基、炎症等，随着年龄的增长，各因素造成的损伤逐渐累积，最终造成皮肤皱纹、松弛、衰老。
胶原蛋白I是真皮层中最主要的功能性蛋白，通常与胶原蛋白III相伴而行，它们排列在真皮的胶原纤维上，为真皮提供足够的营养和强度，也与皮肤再生密切相关。真皮纤维结构中，还有一类重要的蛋白--弹性蛋白，是真皮弹性纤维的主要成分。弹性纤维与胶原纤维共同组成真皮的纤维网络结构，赋予肌肤的弹性、强度和柔韧性。随着年龄的增长，真皮中I型和III型胶原蛋白、弹性蛋白的合成减少，导致真皮中胶原纤维和弹性纤维的功能大幅度减退，真皮层失去了足够的强度和弹性，导致皮肤深度皱纹的产生。
胶原蛋白IV将表皮固定到真表皮连接层，形成网状结构，使真表皮连接层结构稳定；胶原蛋白XVII，是连接表皮层和真皮层重要的跨膜蛋白质，也作为皮肤再生信号释放，它们共同组成了真表皮连接层(基底膜)的张力结构，发挥粘附作用。胶原蛋白IV和胶原蛋白XVII的合成减少，降低了表皮和真皮之间的营养渗透，会使真表皮连接层(基底膜)扁平化甚至凹陷坍塌，导致皮肤松弛失去韧性，加速皱纹的产生。
以前有很多的化妆品采用的是假性的填充等技术，无法长期真正的改善皮肤皱纹松弛等情况。目前，紧致、抗皱类的化妆品有很大一部分是使用肽类及肽类组合物来实现目的的。单一的肽类，需要很大量才能实现一定的紧致、抗皱效果。而多种肽类复配就成为了目前紧致、抗皱类化妆品的一个方向。但是，目前的技术方案多是各种肽类的简单复配，并没有实现作用机理的协同效果。且各种肽类原料的使用量特别大，导致产品成本很高，但效果却很一般。
发明内容
本发明的目的在于提出一种抗皱肽组合物及其制备方法，在多种肽及复合物的复配作用下，起到很好的抗老化、抗氧化、抗衰老、保湿等作用，从而对于皮肤有很好的修复和护理效果，同时，本发明采用包埋技术，保证活性肽及复合物不易于氧气接触而失活，延长其保质时间，提高其流动性，便于保藏和使用，具有广阔的应用前景。
本发明的技术方案是这样实现的：
本发明提供一种抗皱肽组合物的制备方法，将罗非鱼依次经过碱液、酸液浸泡，蛋白酶酶解，低热高压脉冲预处理，超声波辅助酶解处理，制得胶原蛋白肽，与可溶性锌盐和可溶性铜盐反应，制得胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物，将玉米黄粉蛋白与玻尿酸和泛酸混合反应，酶解，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物，与胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、肽组合物混合包埋于微球中，制得抗皱肽组合物。
作为本发明的进一步改进，包括以下步骤：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在碱液中去除杂蛋白的色素，取出，洗净，浸泡于酸液中溶胀，洗净，加入水中，加入蛋白酶，酶解，灭酶，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S2.低热高压脉冲预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液加热，在一定脉冲压力条件下预处理，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S3.超声波辅助酶解：向步骤S2制得的预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液中加入复合酶，超声波辅助条件下，酶解，灭酶，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽；
S4.金属离子螯合：将步骤S3制得的胶原蛋白肽加入水中，加入可溶性锌盐和可溶性铜盐，搅拌反应，透析，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物；
S5.玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将玻尿酸和泛酸溶于水中，加入玉米黄粉蛋白，微波加热搅拌反应，加入酶加热酶解，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物；
S6.肽组合物的制备：将肌肽、乙酰基四肽-11、棕榈酰三肽-5混合均匀，制得肽组合物；
S7.抗皱肽组合物的制备：将步骤S4制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、步骤S5制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、步骤S6制得的肽组合物混合加入水中，加入海藻酸钠，搅拌混合均匀，快速膜乳化，滴加氯化钙溶液，常温固化，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
作为本发明的进一步改进，步骤S1中所述碱液为2-3g/L的NaOH或KOH溶液，所述酸液为1-3g/L的盐酸或硫酸溶液，所述罗非鱼皮、水、蛋白酶的质量比为15-20:100-150:1-2，所述蛋白酶为碱性蛋白酶或胰蛋白酶，所述酶解的温度为40-50℃，pH值为8-10，时间为1-2h。
作为本发明的进一步改进，步骤S2中所述加热的温度为35-40℃，所述脉冲压力的压力为100-150MPa，频率为每1min加压处理20-30s，预处理时间为20-30min；步骤S3中所述预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液和复合酶的质量比为100:2-3，所述复合酶选自中性蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味蛋白酶中的至少两种，优选地，为菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，质量比为5-7:4，所述超声波的功率为500-700W，所述酶解的温度为35-38℃，pH值为3-5，时间为2-3h。
作为本发明的进一步改进，步骤S4中所述胶原蛋白肽、可溶性锌盐和可溶性铜盐的质量比为15-20:3-5:2-4，所述可溶性锌盐选自氯化锌、硫酸锌、硝酸锌中的至少一种；所述可溶性铜盐选自氯化铜、硫酸铜、硝酸铜中的至少一种；所述搅拌反应的温度为40-45℃，时间为20-40min，所述透析的透析袋孔径为300-500D，时间为5-7h。
作为本发明的进一步改进，步骤S5中所述玻尿酸、泛酸、玉米黄粉蛋白的质量比为0.2-0.5:0.3-0.5:10-12，所述微波加热搅拌反应的微波功率为700-1000W，加热的温度为35-40℃，时间为0.5-1h，所述酶为碱性蛋白酶或胰蛋白酶，添加量为体系总质量的1-2wt％，所述加热酶解的温度为40-50℃，pH值为8-10，时间为1-2h。
作为本发明的进一步改进，步骤S6中所述肌肽、乙酰基四肽-11、棕榈酰三肽-5的质量比为5-7:3-5:2-3。
作为本发明的进一步改进，步骤S7中所述胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、肽组合物、海藻酸钠的质量比为7-10:5-7:3-5:20-25，所述快速膜乳化用的膜的孔径为5-10μm，所述氯化钙溶液的浓度为3-5wt％，所述常温固化的时间为30-40min。
作为本发明的进一步改进，具体包括以下步骤：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将15-20重量份罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在100重量份2-3g/L的NaOH或KOH溶液中20-30min，取出，洗净，浸泡于100重量份1-3g/L的盐酸或硫酸溶液中20-30min，洗净，加入100-150重量份水中，加入1-2重量份蛋白酶，40-50℃，pH值为8-10，酶解1-2h，灭酶，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S2.低热高压脉冲预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液加热至35-40℃，在脉冲压力条件下，压力为100-150MPa，频率为每1min加压处理20-30s，预处理20-30min，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S3.超声波辅助酶解：向100重量份步骤S2制得的预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液中加入2-3重量份复合酶，500-700W超声波辅助条件下，35-38℃，pH值为3-5，酶解2-3h，灭酶，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽；
所述复合酶为菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，质量比为5-7:4；
S4.金属离子螯合：将15-20重量份步骤S3制得的胶原蛋白肽加入100重量份水中，加入3-5重量份可溶性锌盐和2-4重量份可溶性铜盐，40-45℃搅拌反应20-40min，透析5-7h，透析袋孔径为300-500D，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物；
S5.玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将0.2-0.5重量份玻尿酸和0.3-0.5重量份泛酸溶于100重量份水中，加入10-12重量份玉米黄粉蛋白，700-1000W微波加热至35-40℃，搅拌反应0.5-1h，加入酶，添加量为体系总质量的1-2wt％，加热至40-50℃，pH值为8-10，酶解1-2h，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物；
S6.肽组合物的制备：将5-7重量份肌肽、3-5重量份乙酰基四肽-11、2-3重量份棕榈酰三肽-5混合均匀，制得肽组合物；
S7.抗皱肽组合物的制备：将7-10重量份步骤S4制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、5-7重量份步骤S5制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、3-5重量份步骤S6制得的肽组合物混合加入200重量份水中，加入20-25重量份海藻酸钠，搅拌混合均匀，快速膜乳化，所用的膜的孔径为5-10μm，滴加20重量份3-5wt％氯化钙溶液，常温固化30-40min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
本发明进一步保护一种上述的制备方法制得的抗皱肽组合物。
本发明具有如下有益效果：
罗非鱼是一种广泛养殖的淡水鱼，加工过程中会产生大量的副产物，包括鱼皮和鱼鳞，其中鱼皮含有丰富的胶原蛋白，可作为提取胶原蛋白肽的理想原料。本发明首先将罗非鱼皮经过碱液浸泡，去除杂蛋白和色素，然后再酸液中溶胀，使得大部分胶原蛋白便于溶出，进一步加入蛋白酶酶解，促进鱼皮中胶原蛋白的溶出，以及酶解成小分子活性胶原蛋白。在相同的压力会立即且均等地施加给食品物料，与传统的热处理工艺相比，超高压技术能保证食品的质地、形状、色泽，还能保证食品的风味和营养特性；在超高压处理过程中，食品物料会随着压力的方向发生移动，其体积减小，食品体系的平衡和体积变化速率、分子构象都发生一定程度的改变。
本发明中，采用低热处理，可以适当的改变蛋白质的构象，暴露酶解的位点，并采用超高压脉冲处理，通过采用超高压脉冲处理，可以解离胶原蛋白中的非共价键、离子键、疏水键和氢键，压力的变化引起蛋白质的局部或整体变化，改变稳定天然蛋白质折叠构象。还可以使蛋白质体系分散，提高后续的酶解效率和产品活性。
随后采用超声波辅助酶解处理，超声波的辅助处理促进酶的扩散，增加酶解的接触频率，添加的复合酶包括菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，能够快速水解碱性氨基酸(例如精氨酸)、酸性氨基酸、或芳香族氨基酸(例如苯丙氨酸、酪氨酸)的羧基侧上的肽链，从而获得肽链较短的活性胶原蛋白肽产物，该制得的胶原蛋白肽的氨基酸序列呈现(G-X-Y)n周期性排列，G为甘氨酸，X多为脯氨酸，由于其含有丰富的甘氨酸和脯氨酸，因此具备良好的锌离子和铜离子的螯合能力。
锌在结构、催化和调节等方面发挥重要作用，锌能使加速细胞的修复、再生，维持皮肤的弹性与活力。铜元素刺激真皮胶原纤维,有助于抗自由基的活动。丰富铜元素,能够活化肌肤中天然的抗氧化酶,从而加强肌细胞的锁水能力。因此，通过将胶原蛋白肽与铜盐、锌盐进行螯合作用形成复合物后，制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物有很好的抗氧化、抗衰老、美白等活性，能够作为重塑皮肤组织的激活剂，促进成纤维细胞内金属蛋白酶MMP1、金属蛋白酶MMP2和金属蛋白酶抑制剂TIMP1和TIMP2的表达，从而促进胶原蛋白和弹性蛋白的生成，有效促进抚平皮肤皱纹，调控表皮层细胞增殖，促进胶原蛋白、弹性蛋白及纤连蛋白的合成及分泌，从而加速皮肤的修复，其胶原蛋白肽部分还可以增强胶原蛋白的产生并抑制降解胶原蛋白的酶，预防和修复皮肤衰老，同时还具有一定的有改善光损伤、皮肤老化的作用。
玉米黄粉蛋白是玉米籽粒通过湿磨法加工制备玉米淀粉后分离出的蛋白质水，经过浓缩后脱水得到的粉末，其游离氨基酸可以与泛酸、玻尿酸中的羰基结合形成功能性化合物，从而提高了热稳定性和溶解性，以及生理活性。玻尿酸具有高亲水性和高黏弹性，对皮肤有保湿、营养、修复等多种作用，是重要的化妆品原料。但其渗透性差，稳定性不高，应用范围受到限制。另外，泛酸不仅具有良好的保湿作用，同时还具有一定的抗炎和修复肌肤的功效，外用能缓解一些肌肤敏感状况，促进愈合，但是，简单的补充泛酸容易造成泛酸的流失从而对于皮肤的改善效果不佳。本发明通过将玉米黄粉蛋白与玻尿酸和泛酸进行混合反应，不仅提高了玻尿酸的稳定性和渗透性，改善了皮肤对泛酸的吸收率，同时，经过酶解后得到的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物还能起到很好的抗氧化和抑制糖基化和氧化应激来改善衰老，此外还能促进I型胶原蛋白的增加和金属蛋白酶MMPs的减少的作用，从而起到一定的抗衰老作用。
人体生理代谢的过程会不断产生各种自由基，适量的自由基有益于人体生理进程，可以帮助传递维持能量。过量的活性氧和活性氮会导致氧化应激，使蛋白质和酶等失去活性，进而加速细胞衰亡。本发明肽组合物具有清除自由基，提高机体抗氧化能力，促进胶原纤维及胶原蛋白生成的作用。活性肽因其分子量小，结构简单，具有活性官能团，能够有效捕捉人体内的游离自由基，从而延缓自由基对人体的侵害，延缓细胞衰老，包括肌肽、乙酰基四肽-11和棕榈酰三肽-5，其中：
肌肽是一种天然抗氧化剂，能够捕获人体内的活性氧以及α-β不饱和醛，保护皮肤免受氧化损伤，同时，也是单线态氧清除剂，能够有效猝灭单线态氧，抑制抗坏血酸和铜离子诱导的脱氧鸟苷氧化羟基化，在人体内起到内源性抗氧化剂的作用，肌肽中的咪唑环能够直接螯合铜离子，并与脂质过氧化物反应，从而抑制铜催化脂肪氧化活性，促进细胞新陈代谢。
乙酰基四肽-11能够通过促进角质形成细胞中多配体聚糖-1的合成，增强整体皮肤的凝聚力，促进胶原蛋白XVII的生成，从而提高表皮凝聚力，有效抚平皱纹，重建真皮和成纤维细胞中基膜聚糖和Ⅰ型胶原蛋白的合成，从而提高皮肤中细胞外胶原纤维的密度和结构。
棕榈酰三肽-5能够促进细胞外基质中多型胶原蛋白和弹性蛋白等的生成，从而有效减少皮肤皱纹，改善肤质，刺激细胞外基质尤其是胶原蛋白、弹力蛋白和透明质酸的生成，同时抑制弹性蛋白酶、胶原蛋白酶等活性，从而提高皮肤弹性，减少细纹的生成，阻断神经传递肌肉收缩信号，达到抚平动态纹、静态纹和细纹的效果。
因此，本发明抗皱肽组合物在多种肽及复合物的复配作用下，起到很好的抗老化、抗氧化、抗衰老、保湿等作用，从而对于皮肤有很好的修复和护理效果，同时，本发明采用包埋技术，保证活性肽及复合物不易于氧气接触而失活，延长其保质时间，提高其流动性，便于保藏和使用，具有广阔的应用前景。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
玉米黄粉蛋白，蛋白质含量>60％，河南巨龙生物工程有限公司；罗非鱼皮，广东百维生物科技有限公司；碱性蛋白酶，10万U/g，菠萝蛋白酶，10万U/g，胃蛋白酶，5000NF，南宁东恒华道生物科技有限责任公司；胰蛋白酶，5000U/g，上海源叶生物科技有限公司；玻尿酸，纯度>98％,西安贝吉诺生物科技有限公司；泛酸，纯度>99％，山东爱采生物科技有限公司。
实施例1
本实施例提供一种抗皱肽组合物的制备方法，具体包括以下步骤：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将15重量份罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在100重量份2g/L的NaOH溶液中20min，取出，洗净，浸泡于100重量份1g/L的盐酸溶液中30min，洗净，加入100重量份水中，加入1重量份碱性蛋白酶，40℃，pH值为10，酶解1h，灭酶，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S2.低热高压脉冲预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液加热至35℃，在脉冲压力条件下，压力为100MPa，频率为每1min加压处理30s，预处理20min，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S3.超声波辅助酶解：向100重量份步骤S2制得的预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液中加入2重量份复合酶，500W超声波辅助条件下，35℃，pH值为3，酶解2h，灭酶，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽；
所述复合酶为菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，质量比为5:4；
S4.金属离子螯合：将15重量份步骤S3制得的胶原蛋白肽加入100重量份水中，加入3重量份硫酸锌和2重量份硫酸铜，40℃搅拌反应20min，透析5h，透析袋孔径为300D，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物；
S5.玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将0.2重量份玻尿酸和0.3重量份泛酸溶于100重量份水中，加入10重量份玉米黄粉蛋白，700W微波加热至35℃，搅拌反应0.5h，加入碱性蛋白酶，添加量为体系总质量的1wt％，加热至40℃，pH值为10，酶解1h，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物；
S6.肽组合物的制备：将5重量份肌肽、3重量份乙酰基四肽-11、2重量份棕榈酰三肽-5，搅拌混合20min，制得肽组合物；
S7.抗皱肽组合物的制备：将7重量份步骤S4制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、5重量份步骤S5制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、3重量份步骤S6制得的肽组合物混合加入200重量份水中，加入20重量份海藻酸钠，搅拌混合20min，快速膜乳化，所用的膜的孔径为5μm，滴加20重量份3wt％氯化钙溶液，常温固化30min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
实施例2
本实施例提供一种抗皱肽组合物的制备方法，具体包括以下步骤：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将20重量份罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在100重量份3g/L的KOH溶液中30min，取出，洗净，浸泡于100重量份3g/L的硫酸溶液中30min，洗净，加入150重量份水中，加入2重量份胰蛋白酶，50℃，pH值为8，酶解2h，灭酶，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S2.低热高压脉冲预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液加热至40℃，在脉冲压力条件下，压力为150MPa，频率为每1min加压处理20s，预处理30min，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S3.超声波辅助酶解：向100重量份步骤S2制得的预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液中加入3重量份复合酶，700W超声波辅助条件下，38℃，pH值为5，酶解3h，灭酶，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽；
所述复合酶为菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，质量比为7:4；
S4.金属离子螯合：将20重量份步骤S3制得的胶原蛋白肽加入100重量份水中，加入5重量份氯化锌和4重量份氯化铜，45℃搅拌反应40min，透析7h，透析袋孔径为500D，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物；
S5.玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将0.5重量份玻尿酸和0.5重量份泛酸溶于100重量份水中，加入12重量份玉米黄粉蛋白，1000W微波加热至40℃，搅拌反应1h，加入胃蛋白酶，添加量为体系总质量的2wt％，加热至50℃，pH值为8，酶解2h，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物；
S6.肽组合物的制备：将7重量份肌肽、5重量份乙酰基四肽-11、3重量份棕榈酰三肽-5，搅拌混合20min，制得肽组合物；
S7.抗皱肽组合物的制备：将10重量份步骤S4制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、7重量份步骤S5制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、5重量份步骤S6制得的肽组合物混合加入200重量份水中，加入25重量份海藻酸钠，搅拌混合20min，快速膜乳化，所用的膜的孔径为10μm，滴加20重量份5wt％氯化钙溶液，常温固化40min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
实施例3
本实施例提供一种抗皱肽组合物的制备方法，具体包括以下步骤：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将17重量份罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在100重量份2.5g/L的NaOH溶液中25min，取出，洗净，浸泡于100重量份2g/L的盐酸溶液中25min，洗净，加入125重量份水中，加入1.5重量份碱性蛋白酶，45℃，pH值为9，酶解1.5h，灭酶，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S2.低热高压脉冲预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液加热至37℃，在脉冲压力条件下，压力为125MPa，频率为每1min加压处理25s，预处理25min，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S3.超声波辅助酶解：向100重量份步骤S2制得的预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液中加入2.5重量份复合酶，600W超声波辅助条件下，37℃，pH值为4，酶解2.5h，灭酶，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽；
所述复合酶为菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，质量比为6:4；
S4.金属离子螯合：将17重量份步骤S3制得的胶原蛋白肽加入100重量份水中，加入4重量份硝酸锌和3重量份硝酸铜，42℃搅拌反应30min，透析6h，透析袋孔径为400D，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物；
S5.玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将0.35重量份玻尿酸和0.4重量份泛酸溶于100重量份水中，加入11重量份玉米黄粉蛋白，850W微波加热至37℃，搅拌反应1h，加入碱性蛋白酶，添加量为体系总质量的1.5wt％，加热至45℃，pH值为9，酶解1.5h，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物；
S6.肽组合物的制备：将6重量份肌肽、4重量份乙酰基四肽-11、2.5重量份棕榈酰三肽-5，搅拌混合20min，制得肽组合物；
S7.抗皱肽组合物的制备：将8.5重量份步骤S4制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、6重量份步骤S5制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、4重量份步骤S6制得的肽组合物混合加入200重量份水中，加入22重量份海藻酸钠，搅拌混合20min，快速膜乳化，所用的膜的孔径为7μm，滴加20重量份4wt％氯化钙溶液，常温固化35min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
实施例4
与实施例3相比，不同之处在于，复合酶为单一的菠萝蛋白酶。
实施例5
与实施例3相比，不同之处在于，复合酶为单一的胃蛋白酶。
对比例1
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S1中未添加碱性蛋白酶。
具体如下：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将17重量份罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在100重量份2.5g/L的NaOH溶液中25min，取出，洗净，浸泡于100重量份2g/L的盐酸溶液中25min，洗净，加入125重量份水中，45℃加热处理1.5h，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液。
对比例2
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S2中未进行脉冲高压处理。
具体如下：
S2.低热预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液加热至37℃，预处理25min，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液。
对比例3
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S2中未进行加热处理。
具体如下：
S2.高压脉冲预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液在脉冲压力条件下，压力为125MPa，频率为每1min加压处理25s，预处理25min，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液。
对比例4
与实施例3相比，不同之处在于，未进行步骤S2。
具体如下：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将17重量份罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在100重量份2.5g/L的NaOH溶液中25min，取出，洗净，浸泡于100重量份2g/L的盐酸溶液中25min，洗净，加入125重量份水中，加入1.5重量份碱性蛋白酶，45℃，pH值为9，酶解1.5h，灭酶，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S2.超声波辅助酶解：向100重量份步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液中加入2.5重量份复合酶，600W超声波辅助条件下，37℃，pH值为4，酶解2.5h，灭酶，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽；
所述复合酶为菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，质量比为6:4；
S3.金属离子螯合：将17重量份步骤S2制得的胶原蛋白肽加入100重量份水中，加入4重量份硝酸锌和3重量份硝酸铜，42℃搅拌反应30min，透析6h，透析袋孔径为400D，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物；
S4.玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将0.35重量份玻尿酸和0.4重量份泛酸溶于100重量份水中，加入11重量份玉米黄粉蛋白，850W微波加热至37℃，搅拌反应1h，加入碱性蛋白酶，添加量为体系总质量的1.5wt％，加热至45℃，pH值为9，酶解1.5h，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物；
S5.肽组合物的制备：将6重量份肌肽、4重量份乙酰基四肽-11、2.5重量份棕榈酰三肽-5，搅拌混合20min，制得肽组合物；
S6.抗皱肽组合物的制备：将8.5重量份步骤S3制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、6重量份步骤S4制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、4重量份步骤S5制得的肽组合物混合加入200重量份水中，加入22重量份海藻酸钠，搅拌混合20min，快速膜乳化，所用的膜的孔径为7μm，滴加20重量份4wt％氯化钙溶液，常温固化35min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
对比例5
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S3中未添加复合酶。
具体如下：
S3.超声波辅助处理：向100重量份步骤S2制得的预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液在600W超声波辅助条件下，37℃，处理2.5h，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽。
对比例6
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S4中未加入硝酸锌。
具体如下：
S4.金属离子螯合：将17重量份步骤S3制得的胶原蛋白肽加入100重量份水中，加入7重量份硝酸铜，42℃搅拌反应30min，透析6h，透析袋孔径为400D，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Cu复合物。
对比例7
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S4中未加入硝酸铜。
具体如下：
S4.金属离子螯合：将17重量份步骤S3制得的胶原蛋白肽加入100重量份水中，加入7重量份硝酸锌，42℃搅拌反应30min，透析6h，透析袋孔径为400D，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Zn复合物。
对比例8
与实施例3相比，不同之处在于，未进行步骤S4。
具体如下：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将17重量份罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在100重量份2.5g/L的NaOH溶液中25min，取出，洗净，浸泡于100重量份2g/L的盐酸溶液中25min，洗净，加入125重量份水中，加入1.5重量份碱性蛋白酶，45℃，pH值为9，酶解1.5h，灭酶，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S2.低热高压脉冲预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液加热至37℃，在脉冲压力条件下，压力为125MPa，频率为每1min加压处理25s，预处理25min，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S3.超声波辅助酶解：向100重量份步骤S2制得的预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液中加入2.5重量份复合酶，600W超声波辅助条件下，37℃，pH值为4，酶解2.5h，灭酶，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽；
所述复合酶为菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，质量比为6:4；
S4.玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将0.35重量份玻尿酸和0.4重量份泛酸溶于100重量份水中，加入11重量份玉米黄粉蛋白，850W微波加热至37℃，搅拌反应1h，加入碱性蛋白酶，添加量为体系总质量的1.5wt％，加热至45℃，pH值为9，酶解1.5h，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物；
S5.肽组合物的制备：将6重量份肌肽、4重量份乙酰基四肽-11、2.5重量份棕榈酰三肽-5，搅拌混合20min，制得肽组合物；
S6.抗皱肽组合物的制备：将8.5重量份步骤S3制得的胶原蛋白肽、6重量份步骤S4制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、4重量份步骤S5制得的肽组合物混合加入200重量份水中，加入22重量份海藻酸钠，搅拌混合20min，快速膜乳化，所用的膜的孔径为7μm，滴加20重量份4wt％氯化钙溶液，常温固化35min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
对比例9
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S5中未添加玻尿酸。
具体如下：
S5.玉米蛋白肽-泛酸复合物的制备：将0.75重量份泛酸溶于100重量份水中，加入11重量份玉米黄粉蛋白，850W微波加热至37℃，搅拌反应1h，加入碱性蛋白酶，添加量为体系总质量的1.5wt％，加热至45℃，pH值为9，酶解1.5h，灭酶，制得玉米蛋白肽-泛酸复合物。
对比例10
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S5中未添加泛酸。
具体如下：
S5.玉米蛋白肽-玻尿酸复合物的制备：将0.75重量份玻尿酸溶于100重量份水中，加入11重量份玉米黄粉蛋白，850W微波加热至37℃，搅拌反应1h，加入碱性蛋白酶，添加量为体系总质量的1.5wt％，加热至45℃，pH值为9，酶解1.5h，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸复合物，
对比例11
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S5中未添加泛酸和玻尿酸。
具体如下：
S5.玉米蛋白肽的制备：向100重量份水中加入11重量份玉米黄粉蛋白，850W微波加热至37℃，搅拌反应1h，加入碱性蛋白酶，添加量为体系总质量的1.5wt％，加热至45℃，pH值为9，酶解1.5h，灭酶，制得玉米蛋白肽。
对比例12
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S5中未添加碱性蛋白酶。
具体如下：
S5.玉米蛋白-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将0.35重量份玻尿酸和0.4重量份泛酸溶于100重量份水中，加入11重量份玉米黄粉蛋白，850W微波加热至37℃，搅拌反应2.5h，制得玉米蛋白-玻尿酸-泛酸复合物。
对比例13
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S7中未添加胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物。
具体如下：
S7.抗皱肽组合物的制备：将6重量份步骤S5制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、4重量份步骤S6制得的肽组合物混合加入200重量份水中，加入22重量份海藻酸钠，搅拌混合20min，快速膜乳化，所用的膜的孔径为7μm，滴加20重量份4wt％氯化钙溶液，常温固化35min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
对比例14
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S7中未添加玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物。
具体如下：
S7.抗皱肽组合物的制备：将8.5重量份步骤S4制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、4重量份步骤S6制得的肽组合物混合加入200重量份水中，加入22重量份海藻酸钠，搅拌混合20min，快速膜乳化，所用的膜的孔径为7μm，滴加20重量份4wt％氯化钙溶液，常温固化35min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
对比例15
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S7中未添加肽组合物。
具体如下：
S7.抗皱肽组合物的制备：将8.5重量份步骤S4制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、6重量份步骤S5制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物混合加入200重量份水中，加入22重量份海藻酸钠，搅拌混合20min，快速膜乳化，所用的膜的孔径为7μm，滴加20重量份4wt％氯化钙溶液，常温固化35min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
测试例1细胞毒性测试
将本发明实施例1-5和对比例1-15制得的抗皱肽组合物溶于无血清DMEM(dulbecco'smodified eagle medium)培养液中，浓度为100mg/mL的混悬液，以无血清DMEM培养液为阴性对照样组，每个样品设置3个重复。
MTT检测：将生长良好的L929细胞调整浓度为1×105个/mL，按照100μL/孔接种至96孔板，在37℃，5％CO2环境中，无血清DMEM培养液培养24h。贴壁生长后，吸弃有培养液，按照实验分组方案每孔加入100μL样品溶液，阴性对照组继续无血清DMEM培养，常规培养48h。向细胞培养板中每孔加入5mg/mL MTT(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide，3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐)溶液20μL，置培养箱内避光孵育4h。吸弃上清，每孔加入二甲基亚砜100μL。细胞培养板，50r/min，振荡20min，在570nm波长处测定吸光度。
按下式计算各组细胞相对存活率(％)。结果如表1所示。
存活率(％)＝An/A0
式中，An为实验组吸光度，A0为阴性对照组吸光度。
表1
| 组别 | 细胞相对存活率(％) |
| 实施例1 | 99.7 |
| 实施例2 | 99.2 |
| 实施例3 | 99.8 |
| 实施例4 | 99.1 |
| 实施例5 | 99.3 |
| 对比例1 | 98.9 |
| 对比例2 | 99.0 |
| 对比例3 | 97.9 |
| 对比例4 | 98.2 |
| 对比例5 | 97.2 |
| 对比例6 | 98.4 |
| 对比例7 | 96.8 |
| 对比例8 | 97.5 |
| 对比例9 | 97.1 |
| 对比例10 | 95.6 |
| 对比例11 | 96.8 |
| 对比例12 | 97.7 |
| 对比例13 | 95.4 |
| 对比例14 | 96.2 |
| 对比例15 | 97.3 |
根据ISO 10993-5:2009所述的毒性分级评价方法，细胞存活率大于70％，因此，可以认为本发明制得的抗皱肽组合物无毒性。
测试例2抗氧化测试
将本发明实施例1-5和对比例1-15制得的抗皱肽组合物加入水中，配置成1g/L的混悬液，加热至37℃处理20min，制得样品溶液。
1、DPPH自由基清除能力的测定
取2mL样品溶液与2mL 0.1mmol/L DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)乙醇溶液迅速混匀，在25℃下避光静置30min，于517nm处检测吸光度值,记为A1；
取2mL蒸馏水与2mL 0.1mmol/L DPPH乙醇溶液迅速混匀，在25℃下避光静置30min，于517nm处检测吸光度值，记为A2；
取2mL样品溶液与2mL蒸馏水迅速混匀，在25℃下避光静置30min，于517nm处检测吸光度值，记为A0。
以1g/L的抗坏血酸作为对照。
DPPH自由基清除率的计算公式为：
DPPH自由基清除率(％)＝1-(A1-A0)/A2×100％
2、·OH自由基清除能力的测定
取1mL样品溶液，依次加入0.5mL 9mmol/L FeSO4溶液、1mL9mmol/L水杨酸乙醇溶液、1mL 4.4mmol/L H2O2溶液与2mL去离子水，迅速混匀，在37℃下静置60min，于510nm处检测吸光度值,记为A1；
取1mL去离子水，依次加入0.5mL 9mmol/L FeSO4溶液、1mL9mmol/L水杨酸乙醇溶液、1mL 4.4mmol/L H2O2溶液与2mL去离子水，迅速混匀，在37℃下静置60min，于510nm处检测吸光度值，记为A2；
取1mL样品溶液，依次加入0.5mL 9mmol/L FeSO4溶液、1mL 4.4mmol/L H2O2溶液与2mL去离子水，迅速混匀，在37℃下静置60min，于510nm处检测吸光度值，记为A0。
以1g/L的抗坏血酸作为对照。
·OH自由基清除率的计算公式为：
·OH自由基清除率(％)＝1-(A1-A0)/A2×100％
结果见表2。
表2
由上表可知，本发明实施例1-3制得的抗皱组合物具有较好的抗氧化效果。
测试例3Ⅲ型胶原蛋白的合成促进实验
将本发明实施例1-5和对比例1-15制得的抗皱肽组合物加入水中，配置成1g/L的混悬液，加热至37℃处理20min，制得样品溶液。
将在含12％FBS(胎牛血清)的DMEM(dulbecco's modified eagle medium)培养基中培养的人成纤维细胞(购于普诺塞生命科技有限公司)接种于96孔板中，细胞附着后，用含有0.2％FBS和250μM抗坏血酸磷酸镁的DMEM培养基进行培养基交换，分别加入100μL样品溶液(对照组添加100μL去离子水)，混合均匀，培养72h后，收集上清，离心，采用试剂盒测定所得上清中的Ⅲ型胶原蛋白的含量，计算Ⅲ型胶原蛋白的合成促进率，公式如下：
Ⅲ型胶原蛋白的合成促进率(％)＝(W1-W0)/W0*100％
W1:添加样品后的Ⅲ型胶原蛋白生成量
W0:未添加样品的Ⅲ型胶原蛋白生成量
结果见表3。
表3
/>
由上表可知，本发明实施例1-3制得的抗衰老乳液抗皱组合物具有较好的促进Ⅲ型胶原蛋白的效果。
测试例4
将本发明实施例1-5和对比例1-15制得的抗皱肽组合物加入水中，配置成0.5g/mL的混悬液，加热至37℃处理20min，制得样品溶液。
健康女性志愿者100名，年龄32-45岁，志愿者排除条件符合《化妆品接触性皮炎诊断标准及处理原则》纳入、排除标准。受试者每日早晚洁面后，每次使用1mL样品溶液，轻轻按摩至吸收，实验期间停用其他抗皱护肤品，测试部位面部左右脸颊部位。实验测试时，清水清洗受试部位，在温度25℃±1.0℃，相对湿度55％±5％RH的恒温恒湿环境中，静坐30min之后进行数据采集。周期为28天，分别在第0天、第28天进行皮肤测试。
变化率＝(第28天测试值-第0天初始值)/第0天初始值×100％
结果见表4。
表4
/>
由上表可知，本发明实施例1-3制得的抗皱肽组合物具有较好的保湿、淡化细纹、改善皮肤弹性的效果。
实施例4、5与实施例3相比，复合酶为单一的菠萝蛋白酶或胃蛋白酶。对比例5与实施例3相比，步骤S3中未添加复合酶，抗氧化效果下降，Ⅲ型胶原蛋白的合成促进效果下降，淡化细纹、改善皮肤弹性的效果下降。本发明采用超声波辅助酶解处理，超声波的辅助处理促进酶的扩散，增加酶解的接触频率，添加的复合酶包括菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，能够快速水解碱性氨基酸(例如精氨酸)、酸性氨基酸、或芳香族氨基酸(例如苯丙氨酸、酪氨酸)的羧基侧上的肽链，从而获得肽链较短的活性胶原蛋白肽产物，该制得的胶原蛋白肽的氨基酸序列呈现(G-X-Y)n周期性排列，G为甘氨酸，X多为脯氨酸，由于其含有丰富的甘氨酸和脯氨酸，因此具备良好的锌离子和铜离子的螯合能力。
对比例1与实施例3相比，步骤S1中未添加碱性蛋白酶，抗氧化效果下降。本发明首先将罗非鱼皮经过碱液浸泡，去除杂蛋白和色素，然后再酸液中溶胀，使得大部分胶原蛋白便于溶出，进一步加入蛋白酶酶解，促进鱼皮中胶原蛋白的溶出，以及酶解成小分子活性胶原蛋白。
对比例2与实施例3相比，步骤S2中未进行脉冲高压处理。对比例3与实施例3相比，步骤S2中未进行加热处理。对比例4与实施例3相比，未进行步骤S2。抗氧化效果下降，Ⅲ型胶原蛋白的合成促进效果下降，淡化细纹、改善皮肤弹性的效果下降。本发明中，采用低热处理，可以适当的改变蛋白质的构象，暴露酶解的位点，并采用超高压脉冲处理，通过采用超高压脉冲处理，可以解离胶原蛋白中的非共价键、离子键、疏水键和氢键，压力的变化引起蛋白质的局部或整体变化，改变稳定天然蛋白质折叠构象。还可以使蛋白质体系分散，提高后续的酶解效率和产品活性。在相同的压力会立即且均等地施加给食品物料，与传统的热处理工艺相比，超高压技术能保证食品的质地、形状、色泽，还能保证食品的风味和营养特性；在超高压处理过程中，食品物料会随着压力的方向发生移动，其体积减小，食品体系的平衡和体积变化速率、分子构象都发生一定程度的改变。
对比例6、7与实施例3相比，步骤S4中未加入硝酸锌或硝酸铜。对比例8与实施例3相比，未进行步骤S4。抗氧化效果下降，Ⅲ型胶原蛋白的合成促进效果下降，淡化细纹、改善皮肤弹性的效果下降。锌在结构、催化和调节等方面发挥重要作用，锌能使加速细胞的修复、再生，维持皮肤的弹性与活力。铜元素刺激真皮胶原纤维,有助于抗自由基的活动。丰富铜元素,能够活化肌肤中天然的抗氧化酶,从而加强肌细胞的锁水能力。因此，通过将胶原蛋白肽与铜盐、锌盐进行螯合作用形成复合物后，制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物有很好的抗氧化、抗衰老、美白等活性，能够作为重塑皮肤组织的激活剂，促进成纤维细胞内金属蛋白酶MMP1、金属蛋白酶MMP2和金属蛋白酶抑制剂TIMP1和TIMP2的表达，从而促进胶原蛋白和弹性蛋白的生成，有效促进抚平皮肤皱纹，调控表皮层细胞增殖，促进胶原蛋白、弹性蛋白及纤连蛋白的合成及分泌，从而加速皮肤的修复，其胶原蛋白肽部分还可以增强胶原蛋白的产生并抑制降解胶原蛋白的酶，预防和修复皮肤衰老，同时还具有一定的有改善光损伤、皮肤老化的作用。
对比例9、10与实施例3相比，步骤S5中未添加玻尿酸或泛酸。对比例11与实施例3相比，步骤S5中未添加泛酸和玻尿酸。对比例12与实施例3相比，步骤S5中未添加碱性蛋白酶。对比例14与实施例3相比，步骤S7中未添加玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物。抗氧化效果下降，Ⅲ型胶原蛋白的合成促进效果下降，保湿、淡化细纹、改善皮肤弹性的效果下降。玉米黄粉蛋白是玉米籽粒通过湿磨法加工制备玉米淀粉后分离出的蛋白质水，经过浓缩后脱水得到的粉末，其游离氨基酸可以与泛酸、玻尿酸中的羰基结合形成功能性化合物，从而提高了热稳定性和溶解性，以及生理活性。玻尿酸具有高亲水性和高黏弹性，对皮肤有保湿、营养、修复等多种作用，是重要的化妆品原料。但其渗透性差，稳定性不高，应用范围受到限制。另外，泛酸不仅具有良好的保湿作用，同时还具有一定的抗炎和修复肌肤的功效，外用能缓解一些肌肤敏感状况，促进愈合，但是，简单的补充泛酸容易造成泛酸的流失从而对于皮肤的改善效果不佳。本发明通过将玉米黄粉蛋白与玻尿酸和泛酸进行混合反应，不仅提高了玻尿酸的稳定性和渗透性，改善了皮肤对泛酸的吸收率，同时，经过酶解后得到的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物还能起到很好的抗氧化和抑制糖基化和氧化应激来改善衰老，此外还能促进I型胶原蛋白的增加和金属蛋白酶MMPs的减少的作用，从而起到一定的抗衰老作用。泛酸和玻尿酸的加入具有协同增效的作用。
对比例13与实施例3相比，步骤S7中未添加胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物。抗氧化效果下降，Ⅲ型胶原蛋白的合成促进效果下降，淡化细纹、改善皮肤弹性的效果下降。
对比例15与实施例3相比，步骤S7中未添加肽组合物。抗氧化效果下降，Ⅲ型胶原蛋白的合成促进效果下降，淡化细纹、改善皮肤弹性的效果下降。人体生理代谢的过程会不断产生各种自由基，适量的自由基有益于人体生理进程，可以帮助传递维持能量。过量的活性氧和活性氮会导致氧化应激，使蛋白质和酶等失去活性，进而加速细胞衰亡。本发明肽组合物具有清除自由基，提高机体抗氧化能力，促进胶原纤维及胶原蛋白生成的作用。活性肽因其分子量小，结构简单，具有活性官能团，能够有效捕捉人体内的游离自由基，从而延缓自由基对人体的侵害，延缓细胞衰老。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种抗皱肽组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在碱液中去除杂蛋白的色素，取出，洗净，浸泡于酸液中溶胀，洗净，加入水中，加入蛋白酶，酶解，灭酶，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液；所述碱液为2-3g/L的NaOH或KOH溶液，所述酸液为1-3g/L的盐酸或硫酸溶液，所述罗非鱼皮、水、蛋白酶的质量比为15-20:100-150:1-2，所述蛋白酶为碱性蛋白酶或胰蛋白酶，所述酶解的温度为40-50℃，pH值为8-10，时间为1-2h；
S2.低热高压脉冲预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液加热，在一定脉冲压力条件下预处理，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S3.超声波辅助酶解：向步骤S2制得的预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液中加入复合酶，超声波辅助条件下，酶解，灭酶，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽；所述预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液和复合酶的质量比为100:2-3，所述复合酶为菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，质量比为5-7:4，所述超声波的功率为500-700W，所述酶解的温度为35-38℃，pH值为3-5，时间为2-3h；
S4.金属离子螯合：将步骤S3制得的胶原蛋白肽加入水中，加入可溶性锌盐和可溶性铜盐，搅拌反应，透析，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物；
S5.玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将玻尿酸和泛酸溶于水中，加入玉米黄粉蛋白，微波加热搅拌反应，加入酶加热酶解，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物；所述玻尿酸、泛酸、玉米黄粉蛋白的质量比为0.2-0.5:0.3-0.5:10-12，所述微波加热搅拌反应的微波功率为700-1000W，加热的温度为35-40℃，时间为0.5-1h，所述酶为碱性蛋白酶或胰蛋白酶，添加量为体系总质量的1-2wt%，所述加热酶解的温度为40-50℃，pH值为8-10，时间为1-2h；
S6.肽组合物的制备：将肌肽、乙酰基四肽-11、棕榈酰三肽-5混合均匀，制得肽组合物；
S7.抗皱肽组合物的制备：将步骤S4制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、步骤S5制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、步骤S6制得的肽组合物混合加入水中，加入海藻酸钠，搅拌混合均匀，快速膜乳化，滴加氯化钙溶液，常温固化，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述加热的温度为35-40℃，所述脉冲压力的压力为100-150MPa，频率为每1min加压处理20-30s，预处理时间为20-30min。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述胶原蛋白肽、可溶性锌盐和可溶性铜盐的质量比为15-20:3-5:2-4，所述可溶性锌盐选自氯化锌、硫酸锌、硝酸锌中的至少一种；所述可溶性铜盐选自氯化铜、硫酸铜、硝酸铜中的至少一种；所述搅拌反应的温度为40-45℃，时间为20-40min，所述透析的透析袋孔径为300-500D，时间为5-7h。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S6中所述肌肽、乙酰基四肽-11、棕榈酰三肽-5的质量比为5-7:3-5:2-3。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S7中所述胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、肽组合物、海藻酸钠的质量比为7-10:5-7:3-5:20-25，所述快速膜乳化用的膜的孔径为5-10μm，所述氯化钙溶液的浓度为3-5wt%，所述常温固化的时间为30-40min。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1.罗非鱼皮胶原蛋白的提取：将15-20重量份罗非鱼皮洗净，干燥，切块，浸泡在100重量份2-3g/L的NaOH或KOH溶液中20-30min，取出，洗净，浸泡于100重量份1-3g/L的盐酸或硫酸溶液中20-30min，洗净，加入100-150重量份水中，加入1-2重量份蛋白酶，40-50℃，pH值为8-10，酶解1-2h，灭酶，离心，得到罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S2.低热高压脉冲预处理：将步骤S1制得的罗非鱼皮胶原蛋白溶液加热至35-40℃，在脉冲压力条件下，压力为100-150MPa，频率为每1min加压处理20-30s，预处理20-30min，得到预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液；
S3.超声波辅助酶解：向100重量份步骤S2制得的预处理的罗非鱼皮胶原蛋白溶液中加入2-3重量份复合酶，500-700W超声波辅助条件下，35-38℃，pH值为3-5，酶解2-3h，灭酶，离心，冷冻干燥，制得胶原蛋白肽；
所述复合酶为菠萝蛋白酶和胃蛋白酶，质量比为5-7:4；
S4.金属离子螯合：将15-20重量份步骤S3制得的胶原蛋白肽加入100重量份水中，加入3-5重量份可溶性锌盐和2-4重量份可溶性铜盐，40-45℃搅拌反应20-40min，透析5-7h，透析袋孔径为300-500D，透析液冷冻干燥，制得胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物；
S5.玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物的制备：将0.2-0.5重量份玻尿酸和0.3-0.5重量份泛酸溶于100重量份水中，加入10-12重量份玉米黄粉蛋白，700-1000W微波加热至35-40℃，搅拌反应0.5-1h，加入酶，添加量为体系总质量的1-2wt%，加热至40-50℃，pH值为8-10，酶解1-2h，灭酶，制得玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物；
S6.肽组合物的制备：将5-7重量份肌肽、3-5重量份乙酰基四肽-11、2-3重量份棕榈酰三肽-5混合均匀，制得肽组合物；
S7.抗皱肽组合物的制备：将7-10重量份步骤S4制得的胶原蛋白肽-Zn-Cu复合物、5-7重量份步骤S5制得的玉米蛋白肽-玻尿酸-泛酸复合物、3-5重量份步骤S6制得的肽组合物混合加入200重量份水中，加入20-25重量份海藻酸钠，搅拌混合均匀，快速膜乳化，所用的膜的孔径为5-10μm，滴加20重量份3-5wt%氯化钙溶液，常温固化30-40min，过滤，洗涤，干燥，制得抗皱肽组合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311575883.4A CN117426996B (zh) | 2023-11-24 | 2023-11-24 | 一种抗皱肽组合物及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311575883.4A CN117426996B (zh) | 2023-11-24 | 2023-11-24 | 一种抗皱肽组合物及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117426996A CN117426996A (zh) | 2024-01-23 |
| CN117426996B true CN117426996B (zh) | 2024-04-02 |
Family
ID=89558324
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311575883.4A Active CN117426996B (zh) | 2023-11-24 | 2023-11-24 | 一种抗皱肽组合物及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117426996B (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105274171A (zh) * | 2015-11-13 | 2016-01-27 | 潘发全 | 一种利用复合蛋白酶水解罗非鱼鱼皮制备抗氧化活性肽的方法 |
| CN106538844A (zh) * | 2016-11-26 | 2017-03-29 | 青岛中泰和生物科技有限公司 | 一种海洋生物蛋白肽螯合铜的制备方法 |
| CN116254311A (zh) * | 2022-12-13 | 2023-06-13 | 宁波大学 | 一种酶解水产动物蛋白金属螯合肽的制备方法 |
| CN117017855A (zh) * | 2023-08-08 | 2023-11-10 | 四川桦茜勇生物科技有限公司 | 胶原蛋白肽脂质体及保湿抗衰老化妆品 |
| CN117064812A (zh) * | 2023-09-20 | 2023-11-17 | 宁远舜德医药有限公司 | 一种抗衰老组合物及其制备方法、抗衰老护肤品 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MY160866A (en) * | 2008-12-23 | 2017-03-31 | Univ Putra Malaysia | Collagen extraction from aquatic animals |
| KR102259407B1 (ko) * | 2020-05-19 | 2021-06-03 | 주식회사 스타스테크 | 불가사리로부터 콜라겐 펩타이드를 얻는 방법, 불가사리 유래 콜라겐 펩타이드를 포함하는 탄성 리포좀 및 이를 포함하는 화장료 조성물 |
-
2023
- 2023-11-24 CN CN202311575883.4A patent/CN117426996B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105274171A (zh) * | 2015-11-13 | 2016-01-27 | 潘发全 | 一种利用复合蛋白酶水解罗非鱼鱼皮制备抗氧化活性肽的方法 |
| CN106538844A (zh) * | 2016-11-26 | 2017-03-29 | 青岛中泰和生物科技有限公司 | 一种海洋生物蛋白肽螯合铜的制备方法 |
| CN116254311A (zh) * | 2022-12-13 | 2023-06-13 | 宁波大学 | 一种酶解水产动物蛋白金属螯合肽的制备方法 |
| CN117017855A (zh) * | 2023-08-08 | 2023-11-10 | 四川桦茜勇生物科技有限公司 | 胶原蛋白肽脂质体及保湿抗衰老化妆品 |
| CN117064812A (zh) * | 2023-09-20 | 2023-11-17 | 宁远舜德医药有限公司 | 一种抗衰老组合物及其制备方法、抗衰老护肤品 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN117426996A (zh) | 2024-01-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Li et al. | Recent progress in preventive effect of collagen peptides on photoaging skin and action mechanism | |
| CN111297753A (zh) | 一种抗衰老和减肥的紧致精华液 | |
| CN112022751A (zh) | 一种紧致提拉面膜 | |
| CN111419784A (zh) | 一种含nmn的抗皱眼霜及其制备方法和应用 | |
| CN112300249B (zh) | 一种乌发生发肽及其制备方法和应用 | |
| CN113663051A (zh) | 鲣鱼弹性蛋白肽与胶原蛋白低聚肽的组合物及其制备方法 | |
| CN108853000A (zh) | 具有保湿抗皱恢复肌肤弹性功效的组合物、面膜及其制备方法 | |
| CN106399437B (zh) | 石金钱龟多肽的制备方法以及石金钱龟多肽面膜 | |
| CN113975187A (zh) | 一种含有多肽氨基酸组合物祛皱护肤品及其制备方法 | |
| CN110713517A (zh) | 一种乙酰透明质酸寡肽及其制备与应用方法 | |
| CN113943343A (zh) | 具有抗衰修护功效的蓝铜胜肽及其制备方法和应用 | |
| CN117426996B (zh) | 一种抗皱肽组合物及其制备方法 | |
| CN113521258A (zh) | 一种改善衰老的组织注射液 | |
| CN114057830B (zh) | 寡肽-1衍生物及其制备方法和用途 | |
| CN114504545B (zh) | 一种用于淡化皱纹的多肽与植物萃取组合物及应用 | |
| CN110801516A (zh) | 一种眼部营养喷雾液及其制备方法 | |
| CN110585079A (zh) | 一种含食源肽的抗辐射组合物及其抗辐射乳液 | |
| CN114129712A (zh) | 一种美白胶原蛋白肽冻干粉及其制备方法 | |
| KR100844386B1 (ko) | 오징어 콜라겐으로부터 피부주름 억제활성을 갖는펩타이드를 제조하는 방법 및 그 제조물 | |
| CN113520900A (zh) | 一种低致敏、抗衰老的牦牛胶原蛋白组合物及应用 | |
| JP2013034423A (ja) | 健康食品 | |
| KR101165098B1 (ko) | 주름개선 기능성 효모추출물의 제조방법 및 이를 함유하는주름개선 화장료 조성물 | |
| CN113832208B (zh) | 一种水解蛋白组合物的制备工艺及产物和应用 | |
| KR102610467B1 (ko) | 커피 실버스킨 유래 콜라겐 유사 단백질 및 발효물의 추출물을 포함하는 피부탄력 증진용 조성물 및 이의 제조방법 | |
| CN115300443B (zh) | 一种羊胎素提取方法及在化妆品中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Liu Shiru Inventor after: Zhang Chi Inventor after: Hong Yinji Inventor before: Liu Shiru Inventor before: Zhang Chi Inventor before: Hong Yinji |
|
| CB03 | Change of inventor or designer information |