CN117018093A - 抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN117018093A
CN117018093A CN202311026145.4A CN202311026145A CN117018093A CN 117018093 A CN117018093 A CN 117018093A CN 202311026145 A CN202311026145 A CN 202311026145A CN 117018093 A CN117018093 A CN 117018093A
Authority
CN
China
Prior art keywords
traditional chinese
chinese medicine
composition
hyperplasia
mammary glands
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202311026145.4A
Other languages
English (en)
Inventor
岳昌武
吕玉红
李泽鑫
孙佳乐
焦佳佳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yanan University
Original Assignee
Yanan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yanan University filed Critical Yanan University
Priority to CN202311026145.4A priority Critical patent/CN117018093A/zh
Publication of CN117018093A publication Critical patent/CN117018093A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/062—Ascomycota
    • A61K36/064—Saccharomycetales, e.g. baker's yeast
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • A61K36/232—Angelica
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • A61K36/233—Bupleurum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • A61K36/288—Taraxacum (dandelion)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/35—Caprifoliaceae (Honeysuckle family)
    • A61K36/355—Lonicera (honeysuckle)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/86—Violaceae (Violet family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
    • C12P1/02—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
    • C12P1/04—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/02—Acetobacter
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • C12R2001/25—Lactobacillus plantarum
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C12R2001/85—Saccharomyces

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明属于中药技术领域，具体涉及抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用。所述中药复方组合物包括中药组合物和益生菌，所述中药组合物与所述益生菌的质量配比为10～12：1；所述益生菌包括植物乳杆菌、红茶菌、酵母菌、醋酸杆菌，植物乳杆菌、红茶菌、酵母菌、醋酸杆菌的质量配比为7～9：7～9：0.5～1.5：0.5～1.5；所述中药组合物按重量份数计由以下原料组成：5～15份甜地丁、5～15份蒲公英、15～25份金银花、5～15份当归、5～15份柴胡。本发明提供的中药复方组合物以及以该中药复方组合物为活性成分制备的抗乳腺增生的中药制剂能抗乳腺增生，调节肠道菌群的作用。并且该抗乳腺增生的中药制剂无添加，在抗乳腺增生的产品中有重要应用。

Description

抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用。
背景技术
乳腺增生病是一种雌孕激素比例失衡而导致乳腺腺体增生过度或复旧不全而发生纤维化引发乳腺痛，组织结构发生紊乱的病理现象。乳腺增生可分为5型，即小叶增生型、导管增生型、纤维腺病型、纤维化结节型、囊肿增生型。在我国乳腺增生发病率占所有乳腺疾病的70％～80％，多发于25～45岁女性，且随着社会现代化其发病人群有年轻化趋势，该疾病是我国人民健康生活的一大劲敌。
乳腺疾病受多种因素影响，乳腺增生同时是乳腺癌的危险因素。根据GLOBOCAN2020全球癌症统计显示乳腺癌已居于榜首，故对乳腺增生的早期干预起到非常重要的作用。并且乳腺增生病会对人体会产生巨大的危害，除常见***肿块、***溢液的临床症状以外，还会出现心烦易怒等情绪问题，严重危害了全球人民的身体健康和幸福指数。因此，乳腺增生已成为影响全球国计民生的重大科学问题，应当引起科研工作普遍关注和重视。
目前，乳腺增生的临床干预手段仍然存在很大的局限性。对乳腺增生的治疗多以手术治疗为主，手术治疗时采用局部切除增生腺体和扩张的乳腺管，易造成部分***代谢物滞留，从而影响***健康。并且腺体切除后可能会导致上肢神经损伤，引起上肢肿胀、上肢静脉血栓等症状。故在对人类健康有更高标准的今天，虽然手术治疗出现了很多新的降低机体损害的方法，但是乳腺手术本质就是以切除作为治理手段的，其损害不言而喻。因此，寻找和开发一些天然的、治疗效果好、不良反应少的抗乳腺增生药物尤其重要。
目前，有相关研究采用中药来治疗乳腺增生，取得了一些进展。相关研究如下：苏炯强等将80例乳腺增生病患者随机分组，对照组口服三苯氧胺，试验组在对照组治疗基础上给予中药逍遥散(柴胡12g、白芍15g、瓜蒌20g、半夏15g、白术15g、枳壳12g、当归15g、茯苓15g、香附15g、贝母15g、甘草6g、郁金15g)治疗，2个月后评价效果发现，试验组患者有97.5％的总有效率，与对照组的80％总有效率相比明显较优。
赵茹萍等对100例确诊为乳腺增生病的女性进行研究，对照组采用常规他莫昔芬片联合维生素A的治疗方法，试验组在其基础上进一步联用夏金乳康丸(柴胡、丹皮、山甲、白术、贝母、橘核、元胡、郁金、莪术、茯苓、半夏、香附、三棱、川芎、白芍、当归)治疗，持续服用2个***治疗，发现对照组82％的有效率劣于试验组96％的总有效率。
仇娟等探索乳宁颗粒(黄芪、柴胡、香附、猫爪草、白芍、全瓜蒌、当归、丹参、青皮、延胡索)对肝郁痰凝型乳腺增生病患者的治疗效果，研究纳入86例患者并随机分组，对照组口服枸橼酸托瑞米芬，试验组口服托瑞米芬及乳宁颗粒，治疗2个月发现，试验组的总有效率为97.67％，不良反应率为6.98％，而对照组总有效率79.07％，不良反应率25.58％，试验组在有效率及不良反应方面优于对照组。
由上述研究可见，采用中药抗乳腺增生具有可行性。但是，现有技术中的中药制剂在抗乳腺增生病方面存在治疗时间过长、副作用严重的问题，导致其疗效仍未取得十分令人满意的效果。
发明内容
为解决现有技术中中药制剂在抗乳腺增生病方面存在治疗时间过长、副作用严重的问题，导致其疗效仍未取得十分令人满意的效果的问题，提供了一种抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明提供了一种抗乳腺增生的中药复方组合物，所述中药复方组合物包括中药组合物和益生菌，所述中药组合物与所述益生菌的质量配比为10～12：1；
所述益生菌包括植物乳杆菌、红茶菌、酵母菌、醋酸杆菌，植物乳杆菌、红茶菌、酵母菌、醋酸杆菌的质量配比为7～9：7～9：0.5～1.5：0.5～1.5；
所述中药组合物按重量份数计由以下原料组成：5～15份甜地丁、5～15份蒲公英、15～25份金银花、5～15份当归、5～15份柴胡。
本发明还提供了所述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法，包括如下步骤：
S1、按配方称取中药组合物的各原料，粉碎，混合，得到中药组合物；或者按配方称取中药组合物的各原料，加水煎煮，煎煮液依次过滤、浓缩至过滤后的煎煮液体积减少三分之一，即得中药组合物；
S2、将S1得到的中药组合物进行灭菌；
S3、灭菌后，取灭菌后的中药组合物与配方中的益生菌混合，进行益生菌发酵，过滤收集发酵液，浓缩即得中药复方组合物。
优选地，S1中，将各原料粉碎处理后过40目筛。
优选地，S2中，重复高温蒸汽灭菌2～3次，每次灭菌时长0.5～1.5小时，灭菌的温度是80-100℃。
优选地，S3中，进行益生菌发酵时，取灭菌后的中药组合物于细菌培养瓶中，混匀，置于36～38℃的恒温培养箱，发酵6～8天。
优选地，S3中，于发酵第7～9天，取发酵液过滤，收集过滤液装瓶浓缩即得中药复方组合物。
本发明还提供了所述中药复方组合物在制备抗乳腺增生药物中的应用。
本发明还提供了一种用于抗乳腺增生的中药制剂，其以权利要求1所述的中药复方组合物为活性成分，并辅以药学上可接受的辅料或载体。
本发明还提供了一种用于抗乳腺增生的中药制剂，其特征在于，其以权利要求1所述的中药组合物为活性成分，并辅以药学上可接受的辅料或载体。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1、本发明提供了一种抗乳腺增生的中药复方组合物，该中药复方组合物在治疗乳腺增生疾病方面具有疗程短、起效快的优点，并且几乎对人体无毒副作用，使用的都是绿色、健康的中药原料，对抗乳腺增生病有很好的治疗效果。本发明针对目前乳腺增生病的严峻形势，采用中药组合物(甜地丁、当归、金银花、蒲公英、柴胡中药配方)，其中方中君药柴胡疏肝解郁，透邪外出；佐药甜地丁清热解毒、凉血消肿；蒲公英化痰散结、清热消肿；佐药与君药一升一降调畅气息；当归有活血化瘀、理气通经，疏肝理气之效。具有较好的抗乳腺增生疗效。同时，本发明基于益生菌发酵，具有调节肠道菌群，绿色、健康、有效的抗乳腺增生病，有很大的社会意义和价值。
2、本发明采用多种益生菌联合发酵，调节肠道菌群的丰度，增强中药组合物抗乳腺增生的效果。其中，用于发酵的菌种均为益生菌，其中的红茶菌、酵母菌、植物乳杆菌、醋酸杆菌均对药材具有较好的发酵作用。
红茶菌：其菌膜酷似海蜇的皮，故被称为“海宝”，红茶菌含有一些多糖、茶多酚、低聚异麦芽糖、茶碱，可以提高人体免疫力，增强自身抵抗力；增加T-淋巴细胞和B-淋巴细胞的数量，提高机体的防御能力。
酵母菌醋菌酵母是一种单细胞真菌，能够帮助消化胃肠道内的内容物，减少胃肠道的负担，保护人类的消化***。同时，酵母菌中还含有大量的葡萄糖，能为人体提供能量，促进人体新陈代谢。
植物乳杆菌为圆端直杆菌，通过产生有机酸、细菌素、过氧化氢等大量有益于机体的抑菌物质，提高机体免疫力，促进机体营养物质吸收和消化。
醋酸杆菌是一种短杆菌，其含有丰富有机酸，能够刺激大脑神经，分泌消化酶，增强患者肠胃消化功能，提高药物的利用率；其含有蛋白质、维生素B等营养物质，具有抗氧化、保护消化***、促进人体新陈代谢的作用。
附图说明
图1为本发明中药复方组合物(中药组合物)对小鼠粪便肠道菌群多样性研究的具体操流程图。
图2为本发明中中药复方组合物(中药组合物)对乳腺组织HE染色影响结果图，其中MA：腺泡；MD：导管；LI：乳腺小叶；a为空白组；b为模型组；c为消癥丸组；d为甜地丁中药组合物水煎剂低剂量组；e为甜地丁中药组合物水煎剂中剂量组；f为甜地丁中药组合物水煎剂高剂组；g为中药复方组合物低剂量组；h为中药复方组合物中剂量组；i为中药复方组合物高剂量组。
图3为本发明中中药复方组合物(中药组合物)对乳腺增生小鼠血清激素的影响结果，其中a：***；b：孕激素；c：促卵泡激素；d：催乳素；Blank空白组；Model：模型组；A为甜地丁中药组合物水煎剂低剂量组；B为甜地丁中药组合物水煎剂中剂量组；C为甜地丁中药组合物水煎剂高剂量组；D为中药复方组合物低剂量组；E为中药复方组合物中剂量组；F为中药复方组合物高剂量组；G为阳性对照(消癥丸)组；*，于模型组相比较，P小于0.05。
图4为本发明中中药复方组合物(中药组合物)对小鼠粪便肠道菌群多样性的影响结果，其中Phylum、Class、Order、Family、Genus、Species分别代表门、纲、目、科、属、种。
图5为本发明中中药复方组合物(中药组合物)对小鼠粪便短链脂肪酸的影响结果，其中a：乙酸；b：丙酸；c：异丁酸；d：丁酸；e：异戊酸；f：戊酸；g：己酸。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明，但不应理解为本发明的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
一种抗乳腺增生的中药复方组合物，包括中药组合物和益生菌，中药组合物与益生菌的比例为10:1(60g中药组合物中添加的益生菌的量分别为：2.4g植物乳杆菌、2.4g红茶菌、0.6g酵母菌、0.6g醋酸杆菌)。
中药组合物由以下原料组成：10g甜地丁、10g蒲公英、20g金银花、10g当归、10g柴胡。
上述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法包括如下步骤：
S1、分别取10g甜地丁、10g蒲公英、20g金银花、10g当归、10g柴胡，将它们分别粉碎处理，粉碎后过40目筛，混合得到中药组合物。
S2、将中药组合物进行置于高温蒸汽杀菌锅中于100℃下进行高温灭菌，反复重复高温蒸汽灭菌3次，每次灭菌时长1小时。
S3、在超净工作台上将高温蒸汽灭菌完成后的60g的中药组合物放置于经灭菌处理的细菌培养瓶中，加入2.4g植物乳杆菌、2.4g红茶菌、0.6g酵母菌、0.6g醋酸杆菌微生物和无菌水120ml，并充分搅拌混匀，最后再使用封口膜密封，保存于37℃的恒温培养箱，发酵7天，于发酵第8天时，将发酵液过滤，滤掉药渣，将过滤液真空冷冻干燥得到中药复方组合物。
实施例2
一种抗乳腺增生的中药复方组合物，包括中药组合物和益生菌，中药组合物与益生菌的比例为11：1(35g中药组合物中添加的益生菌的量分别为：1.4g植物乳杆菌、1.4g红茶菌、0.19g酵母菌、0.19g醋酸杆菌)。
中药组合物由以下原料组成：5g甜地丁、5g蒲公英、15g金银花、5g当归、5g柴胡。
上述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法包括如下步骤：
S1、分别取5g甜地丁、5g蒲公英、15g金银花、5g当归、5g柴胡，将它们分别粉碎处理，粉碎后过40目筛，混合得到中药组合物。
S2、将中药组合物进行置于高温蒸汽杀菌锅中于100℃下进行高温灭菌，反复重复高温蒸汽灭菌3次，每次灭菌时长1小时。
S3、在超净工作台上将高温蒸汽灭菌完成后的35g的中药组合物放置于经灭菌处理的细菌培养瓶中，加入1.4g植物乳杆菌、1.4g红茶菌、0.19g酵母菌、0.19g醋酸杆菌微生物和无菌水120ml，并充分搅拌混匀，最后再使用封口膜密封，保存于37℃的恒温培养箱，发酵7天，于发酵第8天时，将发酵液过滤，滤掉药渣，将过滤液真空冷冻干燥得到中药复方组合物。
实施例3
一种抗乳腺增生的中药复方组合物，包括中药组合物和益生菌，中药组合物与益生菌的比例为12：1(85g中药组合物中添加的益生菌的量分别为：3.4g植物乳杆菌、3.4g红茶菌、0.28g酵母菌、0.28g醋酸杆菌)。
中药组合物由以下原料组成：15g甜地丁、15g蒲公英、25g金银花、15g当归、15g柴胡。
上述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法包括如下步骤：
S1、分别取15g甜地丁、15g蒲公英、25g金银花、15g当归、15g柴胡，将它们分别粉碎处理，粉碎后过40目筛，混合得到中药组合物。
S2、将中药组合物进行置于高温蒸汽杀菌锅中于100℃下进行高温灭菌，反复重复高温蒸汽灭菌3次，每次灭菌时长1小时。
S3、在超净工作台上将高温蒸汽灭菌完成后的85g的中药组合物放置于经灭菌处理的细菌培养瓶中，加入3.4g植物乳杆菌、3.4g红茶菌、0.28g酵母菌、0.28g醋酸杆菌微生物和无菌水120ml，并充分搅拌混匀，最后再使用封口膜密封，保存于37℃的恒温培养箱，发酵7天，于发酵第8天时，将发酵液过滤，滤掉药渣，将过滤液真空冷冻干燥得到中药复方组合物。
实施例4
一种抗乳腺增生的中药复方组合物，包括中药组合物和益生菌，中药组合物与益生菌的比例为11：1(55g中药组合物中添加的益生菌的量分别为：2.33g植物乳杆菌、2.33g红茶菌、0.17g酵母菌、0.17g醋酸杆菌)。
中药组合物由以下原料组成：5g甜地丁、10g蒲公英、20g金银花、10g当归、10g柴胡。
上述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法包括如下步骤：
S1、分别取5g甜地丁、10g蒲公英、20g金银花、10g当归、10g柴胡，将它们分别粉碎处理，粉碎后过40目筛，混合得到中药组合物。
S2、将中药组合物进行置于高温蒸汽杀菌锅中于100℃下进行高温灭菌，反复重复高温蒸汽灭菌3次，每次灭菌时长1小时。
S3、在超净工作台上将高温蒸汽灭菌完成后的55g的中药组合物放置于经灭菌处理的细菌培养瓶中，加入2.33g植物乳杆菌、2.33g红茶菌、0.17g酵母菌、0.17g醋酸杆菌微生物和无菌水120ml，并充分搅拌混匀，最后再使用封口膜密封，保存于37℃的恒温培养箱，发酵7天，于发酵第8天时，将发酵液过滤，滤掉药渣，将过滤液真空冷冻干燥得到中药复方组合物。
实施例5
一种抗乳腺增生的中药复方组合物，包括中药组合物和益生菌，中药组合物与益生菌的比例为10:1(55g中药组合物中添加的益生菌的量分别为：2.36g植物乳杆菌、2.36g红茶菌、0.39g酵母菌、0.39g醋酸杆菌)。
中药组合物由以下原料组成：10g甜地丁、5g蒲公英、20g金银花、10g当归、10g柴胡。
上述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法包括如下步骤：
S1、分别取10g甜地丁、5g蒲公英、20g金银花、10g当归、10g柴胡，将它们分别粉碎处理，粉碎后过40目筛，混合得到中药组合物。
S2、将中药组合物进行置于高温蒸汽杀菌锅中于100℃下进行高温灭菌，反复重复高温蒸汽灭菌3次，每次灭菌时长1小时。
S3、在超净工作台上将高温蒸汽灭菌完成后的55g的中药组合物放置于经灭菌处理的细菌培养瓶中，加入2.36g植物乳杆菌、2.36g红茶菌、0.39g酵母菌、0.39g醋酸杆菌微生物和无菌水120ml，并充分搅拌混匀，最后再使用封口膜密封，保存于37℃的恒温培养箱，发酵7天，于发酵第8天时，将发酵液过滤，滤掉药渣，将过滤液真空冷冻干燥得到中药复方组合物。
实施例6
一种抗乳腺增生的中药复方组合物，包括中药组合物和益生菌，中药组合物与益生菌的比例为12:1(72g中药组合物中添加的益生菌的量分别为：2.57g植物乳杆菌、2.57g红茶菌、0.43g酵母菌、0.43g醋酸杆菌)。
中药组合物由以下原料组成：10g甜地丁、10g蒲公英、15g金银花、10g当归、10g柴胡。
上述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法包括如下步骤：
S1、分别取10g甜地丁、10g蒲公英、15g金银花、10g当归、10g柴胡，将它们分别粉碎处理，粉碎后过40目筛，混合得到中药组合物。
S2、将中药组合物进行置于高温蒸汽杀菌锅中于100℃下进行高温灭菌，反复重复高温蒸汽灭菌3次，每次灭菌时长1小时。
S3、在超净工作台上将高温蒸汽灭菌完成后的100g的中药组合物放置于经灭菌处理的细菌培养瓶中，加入2.57g植物乳杆菌、2.57g红茶菌、0.43g酵母菌、0.43g醋酸杆菌微生物和无菌水120ml，并充分搅拌混匀，最后再使用封口膜密封，保存于37℃的恒温培养箱，发酵7天，于发酵第8天时，将发酵液过滤，滤掉药渣，将过滤液真空冷冻干燥得到中药复方组合物。
实施例7
一种抗乳腺增生的中药复方组合物，包括中药组合物和益生菌，中药组合物与益生菌的比例为10:1(60.2g中药组合物中添加的益生菌的量分别为：2.58g植物乳杆菌、2.58g红茶菌、0.43g酵母菌、0.43g醋酸杆菌)。
中药组合物由以下原料组成：10.1g甜地丁、10.1g蒲公英、20g金银花、5g当归、10g柴胡。
上述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法包括如下步骤：
S1、分别取10.1g甜地丁、10.1g蒲公英、20g金银花、5g当归、10g柴胡，将它们分别粉碎处理，粉碎后过40目筛，混合得到中药组合物。
S2、将中药组合物进行置于高温蒸汽杀菌锅中于100℃下进行高温灭菌，反复重复高温蒸汽灭菌3次，每次灭菌时长1小时。
S3、在超净工作台上将高温蒸汽灭菌完成后的60.2g的中药组合物放置于经灭菌处理的细菌培养瓶中，加入2.58g植物乳杆菌、2.58g红茶菌、0.43g酵母菌、0.43g醋酸杆菌微生物和无菌水120ml，并充分搅拌混匀，最后再使用封口膜密封，保存于37℃的恒温培养箱，发酵7天，于发酵第8天时，将发酵液过滤，滤掉药渣，将过滤液真空冷冻干燥得到中药复方组合物。
实施例8
一种抗乳腺增生的中药复方组合物，包括中药组合物和益生菌，中药组合物与益生菌的比例为10:1(60g中药组合物中添加的益生菌的量分别为：2.8g植物乳杆菌、2.8g红茶菌、0.2g酵母菌、0.2g醋酸杆菌)。
中药组合物由以下原料组成：10g甜地丁、10g蒲公英、20g金银花、10g当归、5g柴胡。
上述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法包括如下步骤：
S1、分别取10g甜地丁、10g蒲公英、20g金银花、10g当归、5g柴胡，将它们分别粉碎处理，粉碎后过40目筛，混合得到中药组合物。
S2、将中药组合物进行置于高温蒸汽杀菌锅中于100℃下进行高温灭菌，反复重复高温蒸汽灭菌3次，每次灭菌时长1小时。
S3、在超净工作台上将高温蒸汽灭菌完成后的60g的中药组合物放置于经灭菌处理的细菌培养瓶中，加入2.8g植物乳杆菌、2.8g红茶菌、0.2g酵母菌、0.2g醋酸杆菌微生物和无菌水120ml，并充分搅拌混匀，最后再使用封口膜密封，保存于37℃的恒温培养箱，发酵7天，于发酵第8天时，将发酵液过滤，滤掉药渣，将过滤液真空冷冻干燥得到中药复方组合物。
实施例9
一种抗乳腺增生的中药复方组合物，包括中药组合物和益生菌，中药组合物与益生菌的比例为12：1(66g中药组合物中添加的益生菌的量分别为：2.4g植物乳杆菌、2.4g红茶菌、0.35g酵母菌、0.35g醋酸杆菌)。
中药组合物由以下原料组成：12g甜地丁、12g蒲公英、18g金银花、12g当归、12g柴胡。
上述抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法包括如下步骤：
S1、分别取12g甜地丁、12g蒲公英、18g金银花、12g当归、12g柴胡，将它们分别粉碎处理，粉碎后过40目筛，混合得到中药组合物。
S2、将中药组合物进行置于高温蒸汽杀菌锅中于100℃下进行高温灭菌，反复重复高温蒸汽灭菌3次，每次灭菌时长1小时。
S3、在超净工作台上将高温蒸汽灭菌完成后的66g的中药组合物放置于经灭菌处理的细菌培养瓶中，加入2.4g植物乳杆菌、2.4g红茶菌、0.35g酵母菌、0.35g醋酸杆菌微生物和无菌水120ml，并充分搅拌混匀，最后再使用封口膜密封，保存于37℃的恒温培养箱，发酵7天，于发酵第8天时，将发酵液过滤，滤掉药渣，将过滤液真空冷冻干燥得到中药复方组合物。
对照例1
一种抗乳腺增生的甜地丁中药组合物水煎剂，该甜地丁中药组合物水煎剂的原料为中药组合物，中药组合物由以下原料组成：10g甜地丁、10g蒲公英、20g金银花、10g当归、10g柴胡。
上述抗乳腺增生的甜地丁中药组合物水煎剂的制备方法包括如下：
分别取10g甜地丁、10g蒲公英、20g金银花、10g当归、10g柴胡，加6倍的水煎煮(温度：80～100℃)，煎煮2次，每次提取1小时，合并煎液滤液后，真空冷冻干燥(温度：－70℃、时间：48h)得甜地丁中药组合物水煎剂。
下面以实施1制备的中药复方组合物和对照例1制备的甜地丁中药组合物水煎剂为例对本发明提供的中药组合物的抗乳腺增生效果进行说明，实施例1和对照例1的原料均为中药组合物，二者是由中药组合物经两种不同的处理方式得到的，其中实施例1的中药复方组合物是由中药组合物经益生菌发酵所得，对照例1是由中药组合物直接经水提取所得。
1、方法
选择54只雌性昆明小鼠，实验室环境适应性饲养7天，饲养温度20±2℃，湿度恒定适宜，并保持12/12h昼夜节律。适应7天后，随机分为9组，即空白对照(Control)组，模型(Model)组，消癥丸(XZW)组；甜地丁中药组合物水煎剂低剂量(TDDD)组；甜地丁中药组合物水煎剂中剂量(TDDZ)组；甜地丁中药组合物水煎剂高剂量(TDDH)组；中药复方组合物低剂量(WSWD)组；中药复方组合物中剂量(WSWZ)组；中药复方组合物高剂量(WSWH)组。
除空白对照组外，其他组均进行乳腺增生造模；造模成功后，除空白对照组，其余各组造模结束后各组分别进行给药：阳性对照组(消癥丸组)、甜地丁中药组合物水煎剂低剂量(TDDD)组、甜地丁中药组合物水煎剂中剂量(TDDZ)组、甜地丁中药组合物水煎剂高剂量(TDDH)组、中药复方组合物低剂量(WSWD)组、中药复方组合物中剂量(WSWZ)组、中药复方组合物高剂量(WSWH)组均采用甜地丁中药组合物药汁灌胃，正常组和模型组灌胃0.2ml/d生理盐水，治疗一个月，各组给药情况如表1所示。
表1小鼠分组及给药情况
乳腺增生小鼠模型的建立：小鼠均腹腔注射苯甲酸***注射液0.5mg/kg/d，连续注射25天，第26天继续肌肉注射***注射液5mg/kg/d，连续注射5天。
2、检测
2.1取材：最后一次给药后，所有小鼠禁食不禁水12小时。第二天上午9：00进行最后一次称重后使用手术器械剪掉小鼠两端胡须，进行眼球取血1.0ml置于含有1mL促凝分离管中，室温静置20分钟，4℃，3000r离心后，取离心血清，-80℃保存备用。取血完成后，处死小鼠，摘取各组小鼠***。
2.2乳腺组织HE染色：
对上述所取的各组小鼠的乳腺组织分别进行HE染色，HE染色的步骤为：固定-脱水-包埋-切片-脱蜡-染色-脱水-透化-封片，详细操作如下：将切好的小鼠的乳腺组织置于4％的多聚甲醛内固定24小时，之后通过梯度脱水：70％乙醇溶液30分钟-80％乙醇溶液30分钟-95％乙醇溶液30分钟-无水乙醇60分钟-二甲苯60分钟-二甲苯60分钟-石蜡60分钟-石蜡60分钟(包括包埋)，之后将包埋好的小鼠的乳腺组织用切片机进行切片，然后进行脱蜡：二甲苯10分钟-二甲苯10分钟-无水乙醇5分钟-无水乙醇5分钟-85％乙醇5分钟-70％乙醇5分钟-纯水5分钟；脱蜡之后进行染色：苏木素4分钟-自来水冲洗10分钟-盐酸乙醇分化3秒-自来水冲洗10分钟-伊红1分钟；染色之后进行普通的脱水透化，之后分片，进行显微镜观察，实验结果见图2。
2.3***(E)、孕激素(P)、***(FSH)检测：
往预先包被激素抗体的包被微孔中，依次加入标本(离心血清)、标准品(上海通蔚有限公司)、HRP标记的检测抗体(上海通蔚有限公司)，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的FSH、E呈正相关，与P成负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度，实验结果见图3。
2.4催乳素(PRL)检测：
(1)分别设定标准孔、空白孔和样本孔：标准孔加入100μL倍比稀释的标准品(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)，空白孔加入100μL标准品&样本稀释液(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)，其余孔加入100μL离心血清。给酶标板覆膜，37℃孵育90分钟。
(2)甩尽孔内液体，每个孔中加入生物素化抗体工作液(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)100μL，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。
(3)甩尽孔内液体，每孔加洗涤液350μL，浸泡1-2分钟，吸去或甩掉酶标板内的液体，在厚的滤纸上拍干。重复此洗板步骤3次。
(4)每孔加酶结合物工作液(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)100μL，酶标板加上覆膜，37℃温育30分钟。
(5)甩尽孔内液体，洗板5次，方法同步骤(3)。
(6)每孔加底物溶液(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)(TMB)90μL，酶标板加上覆膜，37℃避光孵育15分钟左右。
(7)每孔加终止液(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司)50μL，终止反应。
(8)立即用酶标仪在450nm波长，测量各孔的光密度(OD值)，计算样品浓度，实验结果见图3。
2.5中药复方组合物(中药组合物)对小鼠肠道菌群的影响：
小鼠处理：采用拎尾法进行收集用药治疗前、用药半个月、用药结束后的治疗组小鼠粪便。在小鼠自由排便后，以无菌离心管搜集小鼠粪便，样本通常需1g左右，最少不低于0.2g。样本采集后立刻放入-80℃冰箱进行低温保存，干冰运输。
(1)中药复方组合物(中药组合物)对小鼠粪便肠道菌群多样性的影响：
主要操作如下：菌群多样性分析由上海中科新生命生物科技有限公司进行。根据扩增的16S区域特点，基于测序平台利用双末端测序(Paired-End)的方法，构建小片段文库并进行双末端测序。通过对Reads拼接过滤、OTUs(Operational Taxonomic Units)聚类、物种注释及丰度分析可以揭示样品物种构成，进一步也可以挖掘小鼠肠道菌群DNA之间的差异，筛选差异菌群。基本操作过程如图1所示，实验结果见图4。
(2)中药复方组合物(中药组合物)对小鼠粪便短链脂肪酸的影响：
粪便短链脂肪酸测定委托上海鹿鸣生物技术公司测定，采取液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测技术，实验的基本步骤如下：
①代谢物提取：将小鼠粪便冰上解冻，取30mg小鼠粪便于2mL玻璃离心管中。加入900μL 0.5％的磷酸重悬，震荡混匀2min；14000g离心10min，取上清液800μL，加入等量的乙酸乙酯提取，震荡混匀22min，14000g离心10min；取600μL上层有机相，加入终浓度为500μM的4-甲基戊酸作为内标，混匀加入进样瓶，进入GC-MS检测，进样量1μL，分流比10:1，分流进样，色谱条件如下。
②进行色谱-质谱检测：色谱条件为采用Agilent DB-FFAP毛细管柱(30mx250μmx0.25μm)气相色谱***进行分离。程序升温：初始温度90℃；以10℃/min升温至160℃；再以40℃/min升温至240℃并维持5min。载气为氦气，载气流速1.0mL/min。样本队列中每间隔一定数量的实验样本设置一个QC样本，用于检测和评价***的稳定性及重复性；质谱条件：采用5977B MSD质谱仪进行质谱分析。
③采用MSD ChemStation软件提取色谱峰面积及保留时间。绘制标曲曲线，计算样品中短链脂肪酸的含量。实验结果见图5。
检测短链脂肪酸主要有乙酸(Acetic acid)、丙酸(propionic acid)、异丁酸(isobutyric acid)、丁酸(butyric acid)、异戊酸(Isovaleric acid)、戊酸(Pentanoicacid)、正己酸(Hexanoic acid)等7种。
3、结果
3.1中药复方组合物(中药组合物)对乳腺组织HE染色影响结果(图2)：
通过观察图2(图中MA为腺泡；MD为导管；LI为乳腺小叶)中HE染色各组小鼠乳腺增生形态可以发现：
空白组(a)，导管官腔形态正常，乳腺小叶中的腺泡数量较少，无弥漫性增生的改变。
与模型组(b)相比，阳性对照组(c)小鼠乳腺小叶数量有着较大程度的减少，腺泡数量有着一定程度的减少，导管口也有一定程度的缩小；相对于模型组(b)，阳性对照消癥丸组(c)小鼠乳腺增生的程度有一定程度的改善。
与模型组(b)相比，甜地丁中药组合物水煎剂低剂量组(d)、甜地丁中药组合物水煎剂中剂量组(e)、甜地丁中药组合物水煎剂高各剂量组(f)乳腺增生小鼠用药后乳腺小叶数目有着较大程度的减少、腺泡数量有着较大程度的减少、乳腺导管口也有有着一定程度的缩小，随着用药剂量的增加，乳腺组织弥漫性增生情况改善增加；相对于阳性对照组(c)，甜地丁中药组合物水煎剂低剂量组(d)、甜地丁中药组合物水煎剂中剂量组(e)、甜地丁中药组合物水煎剂高各剂量组(f)三个组小鼠乳腺增生的程度有更大程度的改善。
与模型组(b)相比，中药复方组合物低剂量组(g)、中药复方组合物中剂量组(h)、中药复方组合物高剂量剂量组(i)各组给乳腺增生小鼠用药后同样乳腺小叶数目显著减少、腺泡数量显著减少、乳腺导管口显著缩小，随着用药剂量的增加，乳腺组织弥漫性增生情况显著改善；与阳性对照组(c)相比，中药复方组合物低剂量组(g)、中药复方组合物中剂量组(h)、中药复方组合物高剂量剂量组(i)三个组小鼠乳腺增生的程度改善的程度增加；与甜地丁中药组合物水煎剂低剂量组(d)、甜地丁中药组合物水煎剂中剂量组(e)、甜地丁中药组合物水煎剂高各剂量组(f)三个组相比，中药复方组合物低剂量组(g)、中药复方组合物中剂量组(h)、中药复方组合物高剂量剂量组(i)三个组小鼠乳腺增生的程度改善的程度增加。
上述结果表明：
(1)与空白组对比，模型组出现了明显典型的乳腺增生的症状，分别经过甜地丁中药组合物水煎剂处理低、中、高剂量、中药复方组合物低、中、高剂量治疗后，小鼠乳腺增生症状得到明显改善，证明甜地丁中药组合物水煎剂和中药复方组合物(即中药组合物两种不同的处理方式得到的)均可改善小鼠乳腺增生的症状，即本发明提供的中药复方组合物(中药组合物)可改善小鼠乳腺增生的症状。
(2)甜地丁中药组合物水煎剂处理低、中、高剂量组以及中药复方组合物低、中、高剂量组对小鼠乳腺增生症状的治疗效果要优于阳性对照消癥丸组对小鼠乳腺增生症状的治疗效果；中药复方组合物低、中、高剂量组对小鼠乳腺增生症状的治疗效果要优于甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组对小鼠乳腺增生症状的治疗效果。
(3)在相同的治疗时间内，甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组以及中药复方组合物低、中、高剂量组对小鼠乳腺增生症状的治疗效果要优于阳性对照组对小鼠乳腺增生症状的治疗效果；并且中药复方组合物低、中、高剂量组对小鼠乳腺增生症状的治疗效果要优于甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组对小鼠乳腺增生症状的治疗效果。
3.2中药复方组合物(中药组合物)对乳腺增生小鼠血清E(***)、P(孕激素)、FSH(促卵泡激素)、PRL(催乳素)的影响结果(图3)：
(1)由图3(图中a：***；b：孕酮素；c：促卵泡激素；d：催乳素)可知，与空白组相比，模型组小鼠的E(***)水平显著增加。
与模型组比，甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和中药复方组合物低、中、高剂量组以及阳性对照组小鼠的E(***)水平均降低；其中，甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组小鼠的E(***)水平降低程度最大，其次是中药复方组合物低、中、高剂量组(中药复方组合物高剂量组除外，在所有组中，中药复方组合物高剂量组小鼠的E(***)水平降低程度最大)，最后是阳性对照组。
上述结果表明：甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和中药复方组合物低、中、高剂量组对小鼠E(***)水平降低的程度要优于阳性对照组；甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组对小鼠E(***)水平降低的程度要优于中药复方组合物低、中、高剂量组，但是甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组对小鼠E(***)水平降低相对于模型组降低的水平过低，效果不如中药复方组合物低、中、高剂量组。
(2)由图3(图中a：***；b：孕酮素；c：促卵泡激素；d：催乳素)可知，与空白组相比，模型组小鼠的孕酮素水平增加。
与模型组比，甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和中药复方组合物低、中、高剂量组以及阳性对照组小鼠的孕酮素水平均增加；其中，甜地丁中药复方组合物低、中、高剂量组小鼠的孕酮素水平增加程度最大，其次是甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组(甜地丁中药组合物水煎剂中剂量组除外)，最后是阳性对照组(甜地丁中药组合物水煎剂低剂量组和中药复方组合物低高剂量组增加的程度比阳性对照组低，可能与所含有效药物含量过低有关)。
上述结果表明：甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和中药复方组合物低、中、高剂量组对小鼠孕酮素水平增加的程度要优于阳性对照组；中药复方组合物低、中、高剂量组对小鼠孕酮素水平增加的程度要优于甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组。
(3)由图3(图中a：***；b：孕酮素；c：促卵泡激素；d：催乳素)可知，与空白组相比，模型组小鼠的促卵泡激素水平降低。
与模型组比，甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和中药复方组合物低、中、高剂量组以及阳性对照组小鼠的促卵泡激素水平均增加；其中，甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组小鼠的促卵泡激素水平增加程度最大，其次是阳性对照组，最后是中药复方组合物低、中、高剂量组。
上述结果表明：甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和阳性对照组对小鼠促卵泡激素水平增加的程度要优于中药复方组合物低、中、高剂量组；甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组对小鼠促卵泡激素水平增加的程度要优于阳性对照组，但是甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和阳性对照组对小鼠促卵泡激素水平增加相对于模型组增加的水平过高，效果不如中药复方组合物低、中、高剂量组。
(4)由图3(图中a：***；b：孕激素；c：促卵泡激素；d：催乳素)可知，与空白组相比，模型组小鼠的催乳素水平降低。
与模型组比，甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和中药复方组合物低、中、高剂量组以及阳性对照组小鼠的催乳素水平均降低；其中，甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组小鼠的催乳素水平降低程度最大，其次是阳性对照组，最后是中药复方组合物低、中、高剂量组(中药复方组合物中和高剂量组降低的程度比阳性对照组大，可能与所含有效药物含量过高有关)。
上述结果表明：甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和阳性对照组对小鼠催乳素水平降低的程度要优于中药复方组合物低、中、高剂量组，但是甜地丁中药组合物水煎剂低、中、高剂量组和阳性对照组对小鼠催乳素水平降低相对于模型组降低的水平过低，效果不如中药复方组合物低、中、高剂量组。
3.3中药复方组合物(中药组合物)对小鼠粪便肠道菌群多样性的影响结果(图4)：
由图4中的Venn花瓣图可得，与模型组相比甜地丁中药组合物水煎剂中高剂量组、中药复方组合物中高剂量组的肠道菌群含量明显增加。由群落结构组分图详细的展示每个样本或分组的群落结构。根据物种注释结果，选取每个样品或分组在各分类水平(Phylum、Class、Order、Family、Genus、Species)上最大丰度排名前10的物种，生成物种相对丰度柱形累加图，由肠道菌群的群落机构组分图可以知道：各组样品主要构成菌种为类杆菌、梭状芽胞杆菌、乳杆菌等。
3.4中药复方组合物(中药组合物)对小鼠粪便短链脂肪酸的影响结果(图5)：
不同组小鼠的7种SCFAs的代谢物浓度，从柱状图的高度和分度值可知，中药复方组合物中剂量对小鼠肠道SCFAs含量的影响较大，其中7种脂肪酸中，各组小鼠乙酸含量最多，其次为丙酸。
综上，由中药复方组合物(中药组合物)对乳腺组织HE染色影响的结果可以看出，与模型组相比，给药组(包括中药复方组合物和中药组合物)小鼠的乳腺小叶数目减少、腺泡数量减少、乳腺导管口也有缩小，随着用药剂量的增加，乳腺组织弥漫性增生情况改善增加；中药复方组合物和中药组合物对小鼠乳腺增生的改善要优于消癥丸的效果；中药复方组合物对小鼠乳腺增生的改善要优于中药组合物的效果。同时，采用消癥丸进行治疗时，会产生……的副作用，而采用本发明的中药复方组合物治疗时，不会产生上述……的副作用。
中药复方组合物(中药组合物)对乳腺增生小鼠血清E、P、FSH、PRL影响的结果可以看出，与模型组比，中药复方组合物组中E(***)水平降低、孕激素(P)水平增加、***(FSH)水平增加、催乳素(PRL)水平降低的程度最为适宜。
中药复方组合物(中药组合物)对小鼠肠道菌群影响的结果可知，给药后小鼠肠道菌群的有明显的变化，由群落结构组分图可得，各组样品主要构成菌种均为类杆菌、梭状芽胞杆菌、乳杆菌等，乳杆菌为肠道益生菌；通过中药复方组合物(中药组合物)对小鼠粪便短链脂肪酸影响的结果，可以看出，中药复方组合物中剂量对小鼠肠道SCFAs含量的影响较大，其中7种脂肪酸中，各组小鼠乙酸含量最多，其次为丙酸。以上结果均显示本发明的中药复方组合物具有显著的抗乳腺增生疗效。
与现有的手术治疗乳腺增生相比，本发明所提供的采用中药复方组合物可以抗乳腺增生，通过增加免疫力，调理机体的方式来抗乳腺增生。同时，该中药复方组合物在治疗乳腺增生疾病方面具有疗程短、起效快的优点，并且几乎对人体无毒副作用，使用的都是绿色、健康的中药原料，对抗乳腺增生病有很好的治疗效果。
本发明所述中药复方组合物的制备过程中采用了多种益生菌联合发酵，调节肠道菌群的丰度，增强了单纯中药组合物抗乳腺增生的效果。
需要说明的是，本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (9)

1.抗乳腺增生的中药复方组合物，其特征在于，所述中药复方组合物包括中药组合物和益生菌，所述中药组合物与所述益生菌的质量配比为10～12：1；
所述益生菌包括植物乳杆菌、红茶菌、酵母菌、醋酸杆菌，植物乳杆菌、红茶菌、酵母菌、醋酸杆菌的质量配比为7～9：7～9：0.5～1.5：0.5～1.5；
所述中药组合物按重量份数计由以下原料组成：5～15份甜地丁、5～15份蒲公英、15～25份金银花、5～15份当归、5～15份柴胡。
2.根据权利要求1所述的一种抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、按配方称取中药组合物的各原料，粉碎，混合，得到中药组合物；或者按配方称取中药组合物的各原料，加水煎煮，煎煮液依次过滤、浓缩至过滤后的煎煮液体积减少三分之一，即得中药组合物；
S2、将S1得到的中药组合物进行灭菌；
S3、灭菌后，取灭菌后的中药组合物与配方中的益生菌混合，进行益生菌发酵，过滤收集发酵液，浓缩即得中药复方组合物。
3.根据权利要求2所述的一种抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法，其特征在于，S1中，将各原料粉碎处理后过40目筛。
4.根据权利要求2所述的一种抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法，其特征在于，S2中，重复高温蒸汽灭菌2～3次，每次灭菌时长0.5～1.5小时，灭菌的温度是80-100℃。
5.根据权利要求2所述的一种抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法，其特征在于，S3中，进行益生菌发酵时，取灭菌后的中药组合物于细菌培养瓶中，混匀，置于36～38℃的恒温培养箱，发酵6～8天。
6.根据权利要求2所述的一种抗乳腺增生的中药复方组合物的制备方法，其特征在于，S3中，于发酵第7～9天，取发酵液过滤，收集过滤液装瓶浓缩即得中药复方组合物。
7.如权利要求1所述的中药复方组合物在制备抗乳腺增生药物中的应用。
8.用于抗乳腺增生的中药制剂，其特征在于，其以权利要求1所述的中药复方组合物为活性成分，并辅以药学上可接受的辅料或载体。
9.用于抗乳腺增生的中药制剂，其特征在于，其以权利要求1所述的中药组合物为活性成分，并辅以药学上可接受的辅料或载体。
CN202311026145.4A 2023-08-15 2023-08-15 抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用 Pending CN117018093A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202311026145.4A CN117018093A (zh) 2023-08-15 2023-08-15 抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202311026145.4A CN117018093A (zh) 2023-08-15 2023-08-15 抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN117018093A true CN117018093A (zh) 2023-11-10

Family

ID=88635039

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202311026145.4A Pending CN117018093A (zh) 2023-08-15 2023-08-15 抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN117018093A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11986553B2 (en) Multi-component injection
EP2666469B1 (en) Pharmaceutical composition for treating melasma and preparation method therefor
CN112386635A (zh) 荆防制剂在制备治疗新冠后遗症药物中的应用及其制备方法
CN112472729B (zh) 香青藤在制备用于治疗人胶质瘤的药物中的应用
CN106265763A (zh) 具有延缓衰老和美容养颜功能的组合物及其应用
CN109420046A (zh) 一种中草药组方制备防治猪高热病药物的方法
CN114984114A (zh) 一种液态发酵中药微生态制剂及其在抗猪流行性腹泻病毒方面的应用
CN112057546A (zh) 一种蜂胶灵芝孢子粉组合物及其制备方法和应用
CN112386665B (zh) 天然原料的发酵液以及其用于制备抑制过敏反应或提升免疫力的组合物的用途
CN110537705A (zh) 一种温经驱寒的益生菌发酵功能食品及其制备方法
CN113893310A (zh) 一种高山植物发酵组合物及其制备方法和应用
CN107041924A (zh) 一种防治糖尿病肾病的朝药复方提取物及其制备方法
CN117018093A (zh) 抗乳腺增生的中药复方组合物及其制备方法和应用
CN105853406B (zh) 原花青素在制备防治猪繁殖与呼吸综合征药物中的用途
CN108165499A (zh) 一种猴头菌的培养基、山药生物转化菌丝体、山药生物转化菌丝体的提取物及其用途
CN107334793A (zh) 腊梅属植物抗幽门螺旋杆菌的用途
CN111150752A (zh) 鸡骨草提取物在制备抗癌药物中的应用
CN107281235B (zh) 腊梅属植物抗流感病毒的用途
CN1243443A (zh) 用于增殖双歧杆菌的鲜地黄提取物及其提取方法
CN114917266B (zh) 一种白首乌提取物及其应用
CN114767810B (zh) 一种治疗急性肺损伤的中药组合物及制备方法和应用
KR102555674B1 (ko) 갈색거저리 유충 및 흰점박이꽃무지 유충의 효소처리물을 함유하는 여성 갱년기 증상의 예방 또는 치료용 조성물
CN116270924B (zh) 一种用于湿疹药物组合物的发酵提取工艺
CN114224989B (zh) 一种抗幽门螺杆菌的中药组合物
CN117064971A (zh) 一种预防和治疗恶性肿瘤的中药-益生菌组合物及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination