CN1169954C - 编码具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白的多核苷酸 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一类新的具有抑癌功能的人蛋白,编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病如癌症等的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。

Description

编码具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白的多核苷酸
本发明属于生物技术领域,具体地说,本发明涉及新的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸,以及此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。
人基因组学研究目前是国际上的热点,除人染色体DNA大规模测序,表达序列测序(EST)的方法外,还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。
癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤,目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此,本领域迫切需要开发研究具有抑癌功能的人蛋白及其激动剂/抑制剂。
本发明的目的是提供一类新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。
本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。
本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。
在本发明的第一方面,提供新颖的分离出的具有抑癌功能的蛋白多肽,它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽:SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ IDNO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26;或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
较佳地,该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽;SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ IDNO:23、SEQ ID NO:26。
在本发明的第二方面,提供了一种分离的多核苷酸,它包含一核苷酸序列,该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85%相同性:(a)编码上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸;(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地,该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列:SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ IDNO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26。更佳地,该多核苷酸的序列选自下组:SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27的编码区序列或全长序列。
在本发明的第三方面,提供了含有上述多核苷酸的载体,以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。
在本发明的第四方面,提供了制备具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制备方法,该方法包含:(a)在适合表达具有抑癌功能的蛋白的条件下,培养上述被转化或转导的宿主细胞;(b)从培养物中分离出具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。
在本发明的第五方面,提供了与上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子,它含有上述的多核苷酸中连续的10-800个核苷酸。
在本发明的第六方面,提供了一种药物组合物,它含有安全有效量的本发明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。
本发明的其它方面由于本文的技术的公开,对本领域的技术人员而言是显而易见的。
本发明采用大规模cDNA克隆转染癌细胞,在获得具有抑癌作用的基础上,经测序证明为新的基因,进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明,本发明的具有抑癌功能的蛋白对癌细胞(肝癌细胞)具有抑制克隆形成的作用,其抑制率在50%或50%以上。
如本文所用,“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质,原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的,但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开,则为分离纯化的。
如本文所用,“分离的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有抑癌功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。具有抑癌功能的蛋白多肽的纯度能用氨基酸序列分析。
本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽,优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物,或是化学合成的产物,或使用重组技术从原核或真核宿主(例如,细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主,本发明的多肽可以是糖基化的,或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。
本发明还包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用,术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽,而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的,或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽,或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物,例如聚乙二醇)融合所形成的多肽,或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导,这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。
本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以PP6蛋白(在本申请中,蛋白质的命名采用其克隆编号)(在本申请中,蛋白质的命名采用其克隆编号)为例,编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO:3所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用,“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO:2的蛋白质,但与SEQ ID NO:3所示的编码区序列有差别的核酸序列。以PP208蛋白(在本申请中,蛋白质的命名采用其克隆编号)(在本申请中,蛋白质的命名采用其克隆编号)为例,编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO:6所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用,“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO:5的蛋白质,但与SEQ ID NO:6所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于其他具有抑癌功能的蛋白,可依此类推。对于其他具有抑癌功能的蛋白,可依此类推。
编码成熟多肽的多核苷酸包括:只编码成熟多肽的编码序列;成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列;成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。
术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸,也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。
本发明还涉及上述多核苷酸的变异体,其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和***变异体。如本领域所知的,等位变异体是一个多核苷酸的替换形式,它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或***,但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。
本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50%,较佳地至少70%,更佳地至少80%相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中,“严格条件”是指:(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱,如0.2×SSC,0.1%SDS,60℃;或(2)杂交时加有变性剂,如50%(v/v)甲酰胺,0.1%小牛血清/0.1%Ficoll,42℃等;或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95%以上,更好是97%以上时才发生杂交。并且,可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO:2所示的成熟多肽有相同的生物学功能和活性。
本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用,“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸,较好是至少30个核苷酸,更好是至少50个核苷酸,最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。
本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供,更佳地被纯化至均质。
本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如,用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于:1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列,和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。
编码具有抑癌功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得:1)从基因组DNA分离双链DNA序列;2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。
上述提到的方法中,分离基因组DNA最不常用。当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时,DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时,DNA序列的直接化学合成是不可能的,选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录,形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术,试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook,et al.,Molecular Cloning,A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory.New York,1989)。还可得到商业供应的cDNA文库,如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时,即使极少的表达产物也能克隆。
可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于):(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交;(2)标志基因的功能出现或丧失;(3)测定具有抑癌功能的蛋白的转录本的水平;(4)通过免疫学技术或测定生物学活性,来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用,也可多种方法联合应用。
在第(1)种方法中,杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源,其长度至少15个核苷酸,较好是至少30个核苷酸,更好是至少50个核苷酸,最好是至少100个核苷酸。此外,探针的长度通常在2kb之内,较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素,荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。
在第(4)种方法中,检测具有抑癌功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法,放射免疫沉淀法,酶联免疫吸附法(ELISA)等。
应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki,et al.Science 1985;230:1350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时,可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法),用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择,并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。
如上所述得到的本发明的基因,或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS,1977,74:5463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列,测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列,才能拼接成全长的cDNA序列。
本发明也涉及包含本发明的多核苷酸的载体,以及用本发明的载体或具有抑癌功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞,以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。
通过常规的重组DNA技术,可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有抑癌功能的蛋白多肽(Science,1984;224:1431)。一般来说有以下步骤:
(1).用本发明的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体),或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞;
(2).在合适的培养基中培养的宿主细胞;
(3).从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。
本发明中,具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可***到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于:在细菌中表达的基于T7的表达载体(Rosenberg,et al.Gene,1987,56:125);在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体(Lee and Nathans,J Bio Chem.263:3521,1988)和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之,只要能在宿主体内复制和稳定,任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。
本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有抑癌功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等(Sambroook,et al.Molecular Cloning,a Laboratory Manual,coldSpring Harbor Laboratory.New York,1989)。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上,以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有:大肠杆菌的lac或trp启动子;λ噬菌体PL启动子;真核启动子包括CMV立即早期启动子、HSV胸苷激酶启动子、早期和晚期SV40启动子、反转录病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。
此外,表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因,以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状,如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP),或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。
包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体,可以用于转化适当的宿主细胞,以使其能够表达蛋白质。
宿主细胞可以是原核细胞,如细菌细胞;或是低等真核细胞,如酵母细胞;或是高等真核细胞,如哺乳动物细胞。代表性例子有:大肠杆菌,链霉菌属;鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞;真菌细胞如酵母;植物细胞;果蝇S2或Sf9的昆虫细胞;CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。
本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时,如果在载体中***增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子,通常大约有10到300个碱基对,作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。
本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。
用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时,能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获,用CaCl2法处理,所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl2。如果需要,转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物,可选用如下的DNA转染方法:磷酸钙共沉淀法,常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。
获得的转化子可以用常规方法培养,表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞,培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后,用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子,将细胞再培养一段时间。
在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要,可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于:常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。
重组的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于):直接做为药物治疗具有抑癌功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病,和用于筛选促进或对抗具有抑癌功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如,抗体可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表达的重组具有抑癌功能的人蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。
本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有抑癌功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有抑癌功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能,而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症。例如,能在药物的存在下,将哺乳动物细胞或表达具有抑癌功能的人蛋白的膜制剂与标记的具有抑癌功能的人蛋白一起培养。然后测定药物提高或阻遏此相互作用的能力。
具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有抑癌功能的人蛋白结合并消除其功能,或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的产生,或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。
在筛选作为拮抗剂的化合物时,可以将具有抑癌功能的蛋白加入生物分析测定中,通过测定化合物影响具有抑癌功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法,可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。
本发明的多肽可直接用于疾病治疗,例如,各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。
本发明的多肽,及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术,三瘤技术,人B-细胞杂交瘤技术,EBV-杂交瘤技术等。
可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。
本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒,容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起,可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示,该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外,本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。
药物组合物可以以方便的方式给药,如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有抑癌功能的蛋白以有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素,如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。
具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有抑癌功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有抑癌功能的蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。重组的基因治疗载体(如病毒载体)可设计成表达变异的具有抑癌功能的蛋白,以抑制内源性的具有抑癌功能的蛋白活性。例如,一种变异的具有抑癌功能的蛋白可以是缩短的、缺失了信号传导功能域的具有抑癌功能的蛋白,虽可与下游的底物结合,但缺乏信号传导活性。因此重组的基因治疗载体可用于治疗具有抑癌功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有抑癌功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有抑癌功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook,et al.)。另外重组具有抑癌功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。
抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子,其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得,如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性,可用多种方法对其进行修饰,如增加两侧的序列长度,核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。
多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括:将多聚核苷酸直接注入到体内组织中;或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中,再将细胞移植到体内等。
本发明的多肽还可用作肽谱分析,例如,多肽可用物理的、化学或酶进行特异性切割,并进行一维或二维或三维的凝胶电泳分析。
本发明还提供了针对具有抑癌功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于);多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。
抗具有抑癌功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中,检测活检标本中的具有抑癌功能的人蛋白。
与具有抑癌功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记,注入体内可跟踪其位置和分布。这种放射性标记的抗体可作为一种非创伤性诊断方法用于肿瘤细胞的定位和判断是否有转移。
本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有抑癌功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以刺激或阻断具有抑癌功能的人蛋白的产生或活性。
抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素,蓖麻蛋白,红豆碱等)共价结合。一种通常的方法是用巯基交联剂如SPDP,攻击抗体的氨基,通过二硫键的交换,将毒素结合于抗体上,这种杂交抗体可用于杀灭具有抑癌功能的人蛋白阳性的细胞。
多克隆抗体的生产可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫动物,如家兔,小鼠,大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应,包括但不限于弗氏佐剂等。
具有抑癌功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler and Milstein.Nature,1975,256:495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al,PNAS,1985,81:6851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.PatNo.4946778)也可用于生产抗具有抑癌功能的人蛋白的单链抗体。
能与具有抑癌功能的人蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时,必须对具有抑癌功能的人蛋白分子进行标记。
本发明还涉及定量和定位检测具有抑癌功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的,且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有抑癌功能的人蛋白水平,可以用作解释具有抑癌功能的人蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。
具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面,具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有抑癌功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有抑癌功能的蛋白的异常表达。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有抑癌功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法,Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术,相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上,用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有抑癌功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有抑癌功能的蛋白的转录产物。
检测具有抑癌功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有抑癌功能的蛋白相关的疾病。具有抑癌功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外,突变有可能影响蛋白的表达,因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。
本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。该序列会特异性地针对某条人染色体具***置且并可以与其杂交。目前,需要鉴定染色体上的各基因的具***点。现在,只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色***置。根据本发明,为了将这些序列与疾病相关基因相关联,其重要的第一步就是将这些DNA序列定位于染色体上。
简而言之,根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp),可以将序列定位于染色体上。然后,将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。
体细胞杂合细胞的PCR定位法,是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物,通过类似方法,可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选,从而构建染色体特异的cDNA库。
将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH),可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述,参见Verma等,Human Chromosomes:a Manual of BasicTechniques,Pergamon Press,New York(1988)。
一旦序列被定位到准确的染色***置,此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如,V.Mckusick,Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析,确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。
接着,需要测定患病和未患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变,而该突变在任何正常个体中未观察到,则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体,通常涉及首先寻找染色体中结构的变化,如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。根据目前的物理作图和基因定位技术的分辨能力,被精确定位至与疾病有关的染色体区域的cDNA,可以是50至500个潜在致病基因间之一种(假定1兆碱基作图分辨能力和每20kb对应于一个基因)。
本发明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法,可根据本发明所公开的有关核苷酸序列,尤其是开放阅读框序列来设计引物,并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板,扩增而得有关序列。当序列较长时,常常需要进行两次或多次PCR扩增,然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。
一旦获得了有关的序列,就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体,再转入细胞,然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。
此外,还可用人工合成的方法来合成有关序列,尤其是片段长度较短时。通常,通过先合成多个小片段,然后再进行连接可获得序列很长的片段。
目前,已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段,或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外,还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。
此外,由于本发明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列,因此,与来源于其他物种的同族蛋白相比,预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件如Sambrook等人,分子克隆:实验室手册(New York:Cold Spring Harbor LaboratoryPress,1989)中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1:cDNA基因的获得及对癌细胞克隆形成的抑制作用
PP6,PP208,PP451,PP624,PP722,PP902,PP1628,PP1650,PP2672是通过用常规方法构建人胎盘cDNA文库获得的。取3、6、10月龄的胎盘组织,用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA,用mRNA提纯试剂盒(pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-SuperscriptII(GIBCO BRL),反转录反应在42℃进行。转化XL 10-Gold感受细胞,获得了1×106cfu/μg cDNA滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆,其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针,杂交筛选cDNA文库,挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen 96孔板质粒抽提试剂盒,按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染肝癌细胞系7721。100ng DNA酒精沉淀干燥后,加6μl H2O溶解,待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液,混匀后,室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液,均分加入3孔生长于96孔板的7721细胞中,37℃放置2小时,每孔再加50μl无血清培液,37℃24小时。每孔换100μl全培液,37℃24小时,换含G418的全培液100μl,37℃24~48小时,边观察,边换G418浓度不等的培液。约2~3次后,直到镜检细胞有克隆形成,计数。发现上述克隆有抑制细胞克隆形成作用,结果如下表所示。
           cDNA克隆转染细胞(7721)克隆形成情况
cDNA克隆名称  CDNA克隆数(三个重复)  空载体克隆数(三个重复)
PP6             1    0    1           50   26   31
PP208           37   40   45          27   31   26
PP451           26   39   29          25   23   30
PP624           3    1    1           21   30   42
PP722           18   19   22          21   18   19
PP902           28   26   24          57   54   40
PP1628          26   20   30          22   25   13
PP1650          18   22   24          22   25   13
PP2672          0    0    1           12   23   28
对cDNA克隆采用双脱氧终止法,在ABI377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后,确定为新基因克隆,进行另一端测序,仍未获得全长cDNA序列,设计引物,再次进行测序,直到获得全长序列。
实施例2:从胎盘cDNA中PCR获得基因克隆:
取3、6、10月龄的人胎盘组织,用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA,用mRNA提纯试剂盒(pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)反转录酶在42℃进行反转录反应,获得胎盘cDNA。利用各个基因的转异引物(如下表所示),按90℃3′1个循环。94℃30″60℃30″72℃1′35个循环,72℃10′1个循环进行PCR扩增,获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证,与实施例1测得的序列相符,随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞,以获得重组蛋白。
                      基因特异引物序列
克隆名称    特异引物1(5′→3′)        特异引物2(5′→3′)
PP6       CTTCCCCTCCTGGTGCAGCCATT    CCAAAGCAAACCCAACCCTCGTG
PP208     GAACCTCAATGCCAGCACCGTCC    GTACCCCAAGTTGCCCAGGAGGC
PP451     TCTTTGTCATCAGCCTGGCTCGC    CTGGGCAACATGTCTGCAAGGGT
PP624     GCAAAAGGAGAATGTGCCCCCAG    TGACAAAGGGCAGTGGCTCGCTA
PP722     GCTCCCCATCCCACTGACTGCTT    TGGCTGAGTGTATCTGGGTGGGC
PP902     TCCGCCCCTCTCCTAAAGCCTGA    CACCTGCAGCCGACGGACTAGTTG
PP1628    CGGCACTTGGGGTTTCTGGGAAT    AGGCAAGATGGCAGGGGATCACA
PP1650    TCTGTGACAGGGTCCAACAGGGC    CCGGGGAAAAGCCCTACTGGTGT
PP2672    AGCCGTTGCCCTGTTCTTGGTGA    CACACCAGCAATCAGTGTGGCGA
实施例3:cDNA克隆序列分析
1.PP6
A:核苷酸序列:(SEQ ID NO:1)长度:2104bp
  1  GTGAAACAGG GTGAGTCTGG ACATTCTGCA GTCAGCCACT GTTCTTGGCT
 51  TCCAACCAAA AGCAAAACTA AGGCAAGGCA GAGCACAGAG GGTGCTCAGG
101  CAGAAGCTGC TTCCCCTCCT GGTGCAGCCA TTAGCTGCTG TAGTATCTGT
151  GACCTGTCAG AACCTGCTTC CTTCATTTTG GGAATATTTG ACCAACCTCA
201  GAGCAATTGC TGTTACGAGC TAAGGAGGTC AAAGAGCAAT GTCCAGTCTT
251  CCCATTCTGT CCAAGTCAGA TTTATCGACC ATGTTTCGGA AAAAGGTGAG
301  CCTCAGGGAT AGTTTGTCAA TGGCTGAGCT AATCACAAAG GTGCCTGGGC
351  AGGAATACTG GCACCAGCCA AATTTGCATT ACTTGTTCTG AGCAATTGAG
401  CTTTGTTTGA AGAATGGGAG GGGATAAAGA AGATAACTGA TCATTTTCTC
451  AGGTGACTGA CCTGGTGATT AGGAGCAGCC TTCTTGGATG CAGTTAGGCA
501  AAGTCTGAAT GTCTTCCCTT CTCCCCCCAC CGCTCTCTCC TGCCACCCCA
551  GGAGCAACAT ATAAAAATGT GTAGCTCCAG GCATGAAAGT AGCTTCTGTC
601  TACACAATGC AGGTCAAAGA GAAGGAACTG ACCAGGTGTC CAGGCACCAA
651  AATACCAGGC TGGTCTAGCC CCAACTCTCC TTCTCACATG CCCACGTTCA
701  CGCAACTAAC TCACAGGGTT TTGGGGAAGA CTAAGACGGA GTGAATGTAA
751  AACCCACTCC CTTCTGCCCA CGTTCACATG GTCCATGCTG AGGGAATTCA
801  GAAAAGGAGA CAGACCCGGG GGGGTGCGTC AGTCAAGGCA AGTTTCTCGA
851  AGGAAGGAAG CAGAACTCAG GAGGACATGG ACTGGAACAG TCAGGGCAAT
 901  TTCAGGCTGT GACAAAGCTG GAACGGACGA CTGTAGGAGG AGCAGGAGTC
 951  ACTGACATTC TAGGCCAGGC CAGGGCTAAG CCAGAGAACC TATTAATAGT
1001  AATCCACAAA TAGATATGGG GCACCTCCTA GGAACTCTCC TTGTTCCAAG
1051  CGTCGTACCT CGTGTGATCC TTAGCGGCTC TCTGAAGCAG ACAGAAGAGG
1101  GCCAGCCATC TTTCTTCCAC CTTTGAGGCT TGGGAAGGGT GAGACTTGCT
1151  GGTGACTTAC AACTCCATCA AAGGGGCATG GTGAAATAAG GGCCTGGGCT
1201  CCTGACTTCT GGGCTAGGGC TCTTCCAAAG GCAGAGTCTG GAGAGGCCTG
1251  GCTGTGGCCA GACCATGGGG CAAGTGGCTA GAGGGGCGAG TAGACAGCAG
1301  AGGCAGCTGT GGCCCCCGGG ATTAGCACTG GGGGACCGGA TGGGGGAGGG
1351  AGGCCTCACT TTGTTCTATC TGAGCAGCTT CCTCGGCAGT CATGGGACTG
1401  ATTGAGACCA CGCGAGGGCT CCTCCCGGGG GCAGGAGGGA CTCAGAGGCT
1451  GCCCCGTTGT CTGGGGGTGG CCCTGGCGAA GGAGCTCATC TTCACGGGCC
1501  GACGACTGAG TGGAACTGAG GCCCACGTAC TGGGGCTGGT GAATCACGCT
1551  GTGGCCCAGA ACGAGGAGGG GGACGCCGCC TACCAGCGGG CACGAGCACT
1601  GGCCCAGGAG ATCCTGCCCC AGGCCCCCAT TGCCGTGCGG CTGGGCAAAG
1651  TAGCCATTGA CCGAGGAACG GAGGTGGACA TTGCATCTGG GATGGCCATT
1701  GAAGGGATGT GCTATGCCCA GAATATTCCA ACCCGGGACC GGCTAGAGGG
1751  CATGGCAGCC TTCAGGGAGA AGCGGACTCC CAAATTTGTT GGCAAATGAC
1801  CCCCATTTTA ACCTTCAGCA TGGGAGATGC ATGCCCTGAA GAGCAGGATC
1851  CAGAAGGAAG ATTTGTGGCC AGATTGCCTT CATCATTTCA CCTCTCCAGA
1901  CTTCCATTTC TTCACAAGGA TGATGATGGA AATAAAATGA CTGGCGTGAT
1951  GCCTGGAACC AAGGTGCTGA TCCTACCACC TACTGCTACC TTCCTTAGCT
2001  TCACCCTGGC TAGAAATAAT CACGAGGGTT GGGTTTGCTT TGGAAAATGC
2051  CTGTCTCTCT ACTTGAATGA TAAAGAATTA AATTAGAAAA AAAAAAAAAA
2101  AAAA
B:氨基酸序列:(SEQ ID NO:2)  长度:135个氨基酸
   1  MGLIETTRGL LPGAGGTQRL PRCLGVALAK ELIFTGRRLS GTEAHVLGLV
  51  NHAVAQNEEG DAAYQRARAL AQEILPQAPI AVRLGKVAID RGTEVDIASG
 101  MAIEGMCYAQ NIPTRDRLEG MAAFREKRTP KFVGK
C:核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:3)
克隆号和蛋白质名称:PP6
起始编码子:  1392 ATG    终止编码子:1799 TGA
蛋白质分子量:14435.95
   1   GT GAA ACA GGG TGA GTC TGG ACA TTC TGC AGT CAG CCA CTG TTC TTG     47
  48  GCT TCC AAC CAA AAG CAA AAC TAA GGC AAG GCA GAG CAC AGA GGG TGC     95
  96  TCA GGC AGA AGC TGC TTC CCC TCC TGG TGC AGC CAT TAG CTG CTG TAG    143
 144  TAT CTG TGA CCT GTC AGA ACC TGC TTC CTT CAT TTT GGG AAT ATT TGA    191
 192  CCA ACC TCA GAG CAA TTG CTG TTA CGA GCT AAG GAG GTC AAA GAG CAA    239
 240  TGT CCA GTC TTC CCA TTC TGT CCA AGT CAG ATT TAT CGA CCA TGT TTC    287
 288  GGA AAA AGG TGA GCC TCA GGG ATA GTT TGT CAA TGG CTG AGC TAA TCA    335
 336  CAA AGG TGC CTG GGC AGG AAT ACT GGC ACC AGC CAA ATT TGC ATT ACT    383
 384  TGT TCT GAG CAA TTG AGC TTT GTT TGA AGA ATG GGA GGG GAT AAA GAA    431
 432  GAT AAC TGA TCA TTT TCT CAG GTG ACT GAC CTG GTG ATT AGG AGC AGC    479
 480  CTT CTT GGA TGC AGT TAG GCA AAG TCT GAA TGT CTT CCC TTC TCC CCC    527
 528  CAC CGC TCT CTC CTG CCA CCC CAG GAG CAA CAT ATA AAA ATG TGT AGC    575
 576  TCC AGG CAT GAA AGT AGC TTC TGT CTA CAC AAT GCA GGT CAA AGA GAA    623
 624  GGA ACT GAC CAG GTG TCC AGG CAC CAA AAT ACC AGG CTG GTC TAG CCC    671
 672  CAA CTC TCC TTC TCA CAT GCC CAC GTT CAC GCA ACT AAC TCA CAG GGT    719
 720  TTT GGG GAA GAC TAA GAC GGA GTG AAT GTA AAA CCC ACT CCC TTC TGC     767
 768  CCA CGT TCA CAT GGT CCA TGC TGA GGG AAT TCA GAA AAG GAG ACA GAC     815
 816  CCG GGG GGG TGC GTC AGT CAA GGC AAG TTT CTC GAA GGA AGG AAG CAG     863
 864  AAC TCA GGA GGA CAT GGA CTG GAA CAG TCA GGG CAA TTT CAG GCT GTG     911
 912  ACA AAG CTG GAA CGG ACG ACT GTA GCA GGA GCA GGA GTC ACT GAC ATT     959
 960  CTA GGC CAG GCC AGG GCT AAG CCA GAG AAC CTA TTA ATA GTA ATC CAC    1007
1008  AAA TAG ATA TGG GGC ACC TCC TAG GAA CTC TCC TTG TTC CAA GCG TCG    1055
1056  TAC CTC GTG TGA TCC TTA GCG GCT CTC TGA AGC AGA CAG AAG AGG GCC    1103
1104  AGC CAT CTT TCT TCC ACC TTT GAG GCT TGG GAA GGG TGA GAC TTG CTG    1151
1152  GTG ACT TAC AAC TCC ATC AAA GGG GCA TGG TGA AAT AAG GGC CTG GGC    1199
1200  TCC TGA CTT CTG GGC TAG GGC TCT TCC AAA GGC AGA GTC TGG AGA GGC    1247
1248  CTG GCT GTG GCC AGA CCA TGG GGC AAG TGG CTA GAG GGG CGA GTA GAC    1295
1296  AGC AGA GGC AGC TGT GGC CCC CGG GAT TAG CAC TGG GGG ACC GGA TGG    1343
1344  GGG AGG GAG GCC TCA CTT TGT TCT ATC TGA GCA GCT TCC TCG GCA GTC    1391
1392  ATG GGA CTG ATT GAG ACC ACG CGA GGG CTC CTC CCG GGG GCA GGA GGG    1439
   1  Met Gly Leu Ile Glu Thr Thr Arg Gly Leu Leu Pro Gly Ala Gly Gly      16
1440  ACT CAG AGG CTG CCC CGT TGT CTG CGG GTG GCC CTG GCG AAG GAG CTC    1487
  17  Thr Gln Arg Leu Pro Arg Cys Leu Gly Val Ala Leu Ala Lys Glu Leu      32
1488  ATC TTC ACG GGC CGA CGA CTG AGT GGA ACT GAG GCC CAC GTA CTG GGG    1535
  33  Ile Phe Thr Gly Arg Arg Leu Ser Gly Thr Glu Ala His Val Leu Gly      48
1536  CTG GTG AAT CAC GCT GTG GCC CAG AAC GAG GAG GGG GAC GCC GCC TAC    1583
  49  Leu Val Asn His Ala Val Ala Gln Asn Glu Glu Gly Asp Ala Ala Tyr      64
1584  CAG CGG GCA CGA GCA CTG GCC CAG GAG ATC CTG CCC CAG GCC CCC ATT    1631
  65  Gln Arg Ala Arg Ala Leu Ala Gln Glu Ile Leu Pro Gln Ala Pro Ile      80
1632  GCC GTG CGG CTG GGC AAA GTA GCC ATT GAC CGA GGA ACG GAG GTG GAC    1679
  81  Ala Val Arg Leu Gly Lys Val Ala Ile Asp Arg Gly Thr Glu Val Asp      96
1680  ATT GCA TCT GGG ATG GCC ATT GAA GGG ATG TGC TAT GCC CAG AAT ATT    1727
  97  Ile Ala Ser Gly Met Ala Ile Glu Gly Met Cys Tyr Ala Gln Asn Ile     112
1728  CCA ACC CGG GAC CGG CTA GAG GGC ATG GCA GCC TTC AGG GAG AAG CGG    1775
 113  Pro Thr Arg Asp Arg Leu Glu Gly Met Ala Ala Phe Arg Glu Lys Arg     128
1776  ACT CCC AAA TTT GTT GGC AAA TGA CCC CCA TTT TAA CCT TCA GCA TGG    1823
 129  Thr Pro Lys Phe Val Gly Lys ***                                     136
1824  GAG ATG CAT GCC CTG AAG AGC AGG ATC CAG AAG GAA GAT TTG TGG CCA    1871
1872  GAT TGC CTT CAT CAT TTC ACC TCT CCA GAC TTC CAT TTC TTC ACA AGG    1919
1920  ATG ATG ATG GAA ATA AAA TGA CTG GCG TGA TGC CTG GAA CCA AGG TGC    1967
1968  TGA TCC TAC CAC CTA CTG CTA CCT TCC TTA GCT TCA CCC TGG CTA GAA    2015
2016  ATA ATC ACG AGG GTT GGG TTT GCT TTG GAA AAT GCC TGT CTC TCT ACT    2063
2064  TGA ATG ATA AAG AAT TAA ATT AGA AAA AAA AAA AAA AAA AA             2104
D:Blastp结果
Query=PP6蛋白(135个氨基酸)
>SP_IN:O45106 O45106 caenorhabditis elegans.f56b3.5蛋白(片段).5/1999
长度=281
分值=131bits(326),预期值=3e-30
相同性=66/128(51%),相似性=93/128(72%),缺口=5/128(3%)
Query:1   MGLIETTRGLLPGAGGTQRLPRCLGVALAKELIFTGRRLSGTEAHVLGLVNHAVAQNEEG 60
           MGL+ET   L+PGAGG+QRL R +GVA AKELI+T   L+G +A  LG+VNH V  N
Sbjct:158 MGLVETKWALIPGAGGSQRLYRIVGVAKAKELIYTAEVLNGADAAKLGVVNHVVEANP-- 215
Query:61  DAAYQRARALAQEILPQAPIAVRLGKVAIDRGTEVDIASGMAIEGMCYAQNIPTRDRLEG 120
               +++  +A++I+P+ PIAV+L K+AI+ G++ DI S +++E  CYAQ + ++DRLEG
Sbjct:216 ---IEKSLEIARKIIPRGPIAVKLAKLAINLGSQTDITSALSVEQQCYAQIVHSKDRLEG 272
Query:121 MAAFREKR 128
           MAAF EKR
Sbjct:273 MAAFAEKR 280
2.PP208
A:核苷酸序列:(SEQ ID NO:4)长度:1587bp
   1  TGGCTCAACA ATGCCTTCCA GGATGTGGAG TCAGAGAACG TCAACGTGGT
  51  GAAGCGGCTG TTCAAGATCC AGAACCTCAA TGCCAGCACC GTCCGCACGG
 101  TGATGGTGGC CGACTGCAGC CGCTTCGACA GCCCTGACCT GCTGCTGGAA
 151  GCCGGTGACC CGGCCACGTC CCCCTGCCGC ATCTTTGACC TGGGCAGCGA
 201  CAACGAGGAG GTGGTGGCTG GCCCGGCCCC CGCCCACGCC AAGGAGGGCT
 251  TGCGGCACTT TCTGGACCGC GTGCTGGAGG GGCGGGCGCA GCACAGCTGT
 301  CGGAGCGCAT GCTAGAGACC AAGGTGCCGA GCTGCTGGCC CAGGGCACAC
 351  CAAGCCACCC GAGCGCAGTG CCACAGGCGC CAAGAGCAAG TACCTCATCT
 401  TCACCACTGG CTGCCTCACC TACTCCCCAC ACCAGATCGG CATCAAGCAG
 451  ATCCTGCCAC ACCAGATGAC CACGGCAGGG CCCCGTGCTG GGTGAGGGCC
 501  GGGGCTCCGA TGCCTTCTTC GACGCGCTGG ACCACGTCAT AGACATACAC
 551  GGACACATCA TCGGCATGGG CCTGTCGCCC GACAACAGGT ACCTGTACGT
 601  GAACAGCCGC GCCTGGCCCA ACGGTGCGGT GGTGGCCGAC CCCATGCAGC
 651  CGCCACCAAT CGCGGAGGAG ATTGACCTGC TGGTGTTCGA CCTCAAGACC
 701  ATGCGGGAGG TGAGGCGGGC TCTGCGTGCG CACCGCGCCT ACACGCCCAA
 751  CGACGAGTGC TTCTTCATCT TCCTGGACGT CAGCAGGGAC TTCGTGGCCA
 801  GCGGGGCGGA GGACCGGCAC GGCTACATCT GGGACCGCCA CTACAACATC
 851  TGTCTGGCCA GGCTGCGGCA CGAGGATGTG GTCAACTCAG TGGTCTTCAG
 901  TCCCCAGGAG CAGGAGCTGC TGCTCACGGC CAGCGACGAC GCCACCATCA
 951  AAGCCTGGCG CTCCCCACGC ACCATGCGCG TCCTCCAGGC ACCTCGCCCA
1001  CGGCCTCGCA CCTTCTTCTC CTGGCTTGCC AGCCAGAGGC GCTGAGGTGT
1051  GCTGGGTGCA CTGGACCACC GGGACCCCTT GAGGACATCG CCAGGCTCTG
1101  TGGCTTTTTC CCGAGCGGGA GAGGTGGAGA TGCTTATAGC AGTTACGCCT
1151  TAGGAAGGGG ACAACCAGGC CCCGCCACAC GCTCACACAC AAACCTGCTC
1201  ACGCAGCTGT GATGCTTGGC ACGGGGTGGC CAGTGCAGAT GGAGCCCAAG
1251  GCCCCCTCGG CCTCCTGGGC AACTTGGGGT ACACAGGATA CTGGGGGTGC
1301  CGCTCCTCAC TCAACCCCAG GCTAGGGGTA CACCTGACCC AGCTGGCCTC
1351  GGCCCGGGGC ACCTTCGGCT GGTCCTGTGG GGCCCTGGAC GGTGGCCCAG
1401  TGGTGGCAGG GGCTGCTCCT GGCTGTGGTT GTGCGCCCGG GGCTTGGGAG
1451  CGGCCGGTCA CGCTGCTGTG GGCCCGAGTG TGTTGCATGT CCACGCACCA
1501  CCCGTTCAGG GCCCTGAATA AACAGTTGGC AACAGCCCAA AAAAAAAAAA
1551  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAA
B:氨基酸序列:PP208 (SEQ ID NO:5)长度:159个氨基酸
  1  MGLSPDNRYL YVNSRAWPNG AVVADPMQPP PIAEEIDLLV FDLKTMREVR
 51  RALRAHRAYT PNDECFFIFL DVSRDFVASG AEDRHGYIWD RHYNICLARL
101  RHEDVVNSVV FSPQEQELLL TASDDATIKA WRSPRTMRVL QAPRPRPRTF
151  FSWLASQRR
C:核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:6)
克隆号和蛋白质名称:PP208
起始编码子:  566 ATG    终止编码子:1045 TGA
蛋白质分子量:18544.09
  1    T GGC TCA ACA ATG CCT TCC AGG ATG TGG AGT CAG AGA ACG TCA ACG      46
 47  TGG TGA AGC GGC TGT TCA AGA TCC AGA ACC TCA ATG CCA GCA CCG TCC      94
 95  GCA CGG TGA TGG TGG CCG ACT GCA GCC GCT TCG ACA GCC CTG ACC TGC     142
143  TGC TGG AAG CCG GTG ACC CGG CCA CGT CCC CCT GCC GCA TCT TTG ACC     190
191  TGG GCA GCG ACA ACG AGG AGG TGG TGG CTG GCC CGG CCC CCG CCC ACG     238
239  CCA AGG AGG GCT TGC GGC ACT TTC TGG ACC GCG TGC TGG AGG GGC GGG     286
287  CGC AGC ACA GCT GTC GGA GCG CAT GCT AGA GAC CAA GGT GCC GAG CTG     334
335  CTG GCC CAG GGC ACA CCA AGC CAC CCG AGC GCA GTG CCA CAG GCG CCA     382
383  AGA GCA AGT ACC TCA TCT TCA CCA CTG GCT GCC TCA CCT ACT CCC CAC     430
431  ACC AGA TCG GCA TCA AGC AGA TCC TGC CAC ACC AGA TGA CCA CGG CAG     478
479  GGC CCC GTG CTG GGT GAG GGC CGG GGC TCC GAT GCC TTC TTC GAC GCG     526
527  CTG GAC CAC GTC ATA GAC ATA CAC GGA CAC ATC ATC GGC ATG GGC CTG     574
  1                                                      Met Gly Leu       3
575  TCG CCC GAC AAC AGG TAC CTG TAC GTG AAC AGC CGC GCC TGG CCC AAC     622
  4  Ser Pro Asp Asn Arg Tyr Leu Tyr Val Asn Ser Arg Ala Trp Pro Asn      19
623  GGT GCG GTG GTG GCC GAC CCC ATG CAG CCG CCA CCA ATC GCG GAG GAG     670
 20  Gly Ala Val Val Ala Asp Pro Met Gln Pro Pro Pro Ile Ala Glu Glu      35
671  ATT GAC CTG CTG GTG TTC GAC CTC AAG ACC ATG CGG GAG GTG AGG CGG     718
 36  Ile Asp Leu Leu Val Phe Asp Leu Lys Thr Met Arg Glu Val Arg Arg      51
719  GCT CTG CGT GCG CAC CGC GCC TAC ACG CCC AAC GAC GAG TGC TTC TTC     766
 52  Ala Leu Arg Ala His Arg Ala Tyr Thr Pro Asn Asp Glu Cys Phe Phe      67
767  ATC TTC CTG GAC GTC AGC AGG GAC TTC GTG GCC AGC GGG GCG GAG GAC     814
 68  Ile Phe Leu Asp Val Ser Arg Asp Phe Val Ala Ser Gly Ala Glu Asp      83
815  CGG CAC GGC TAC ATC TGG GAC CGC CAC TAC AAC ATC TGT CTG GCC AGG     862
 84  Arg His Gly Tyr Ile Trp Asp Arg His Tyr Asn Ile Cys Leu Ala Arg      99
863  CTG CGG CAC GAG GAT GTG GTC AAC TCA GTG GTC TTC AGT CCC CAG GAG     910
100  Leu Arg His Glu Asp Val Val Asn Ser Val Val Phe Ser Pro Gln Glu     115
911  CAG GAG CTG CTG CTC ACG GCC AGC CAC GAC GCC ACC ATC AAA GCC TGG     958
116  Gln Glu Leu Leu Leu Thr Ala Ser Asp Asp Ala Thr Ile Lys Ala Trp     131
959  CGC TCC CCA CGC ACC ATG CGC GTC CTC CAG GCA CCT CGC CCA CGG CCT    1006
132  Arg Ser Pro Arg Thr Met Arg Val Leu Gln Ala Pro Arg Pro Arg Pro     147
1007  CGC ACC TTC TTC TCC TGG CTT GCC AGC CAG AGG CGC TGA GGT GTG CTG    1054
 148  Arg Thr Phe Phe Set Trp Leu Ala Ser Gln Arg Arg ***                160
1055  GGT GCA CTG GAC CAC CGG GAC CCC TTG AGG ACA TCG CCA GGC TCT GTG    1102
1103  GCT TTT TCC CGA GCG GGA GAG GTG GAG ATG CTT ATA GCA GTT ACG CCT    1150
1151  TAG GAA GGG GAC AAC CAG GCC CCG CCA CAC GCT CAC ACA CAA ACC TGC    1198
1199  TCA CGC AGC TGT GAT GCT TGG CAC GGG GTG GCC AGT GCA GAT GGA GCC    1246
1247  CAA GGC CCC CTC GGC CTC CTG GGC AAC TTG GGG TAC ACA GGA TAC TGG    1294
1295  GGG TGC CGC TCC TCA CTC AAC CCC AGG CTA GGG GTA CAC CTG ACC CAG    1342
1343  CTG GCC TCG GCC CGG GGC ACC TTC GGC TGG TCC TGT GGG GCC CTG GAC    1390
1391  GGT GGC CCA GTG GTG GCA GGG GCT GCT CCT GGC TGT GGT TGT GCG CCC    1438
1439  GGG GCT TGG GAG CGG CCG GTC ACG CTG CTG TGG GCC CGA GTG TGT TGC    1486
1487  ATG TCC ACG CAC CAC CCG TTC AGG GCC CTG AAT AAA CAG TTG GCA ACA    1534
1535  GCC CAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1582
1583  AAA AA                                                             1587
D:Blastp结果
Query=PP208蛋白[基因=PP208]    (159个氨基酸)
>SP_IN:O96698 O96698 drosophila melanogaster(果蝇).
            lissencephaly-1(lis1 homolog).8/1999
长度=411
分值=46.5bits(108),预计值=1e-04
相同性=28/70(40%),相似性=41/70(58%),缺口=4/70(5%)
Query:76  FVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLR-HEDVVNSVVFSPQEQELLLTASDDATIKAW--R 132
           F+ASG+ D+   IWD    +CL  L  H++ V  + F P   + L++ASDD TI+ W  R
Sbjct:311 FLASGSRDKTIRIWDVSVGLCLLTLSGHDNWVRGLAFHP-GGKYLVSASDDKTIRVWDLR 369
Query:133 SPRTMRVLQA 142
           + R M+ L A
Sbjct:370 NKRCMKTLYA 379
>SW:TUP1_CANAL P56093 candida albicans(yeast).transcriptional
           repressor tup1.7/1998
长度=514
分值=43.8bits(101),预计值=9e-04
相同性=37/125(29%),相似性=60/125(47%),缺口=14/125(11%)
Query:10  LYVNSRAW-PNGAVVADPMQPPPIAEEIDLLVFDLKTMREVRRALRAHRAYTPNDECFFI 68
           LY+ S  + P+G ++A        AE+  + ++DL T R ++  LR H       + + +
Sbjct:258 LYIRSVCFSPDGKLLATG------AEDKLIRIWDLSTKRIIK-ILRGHE-----QDIYSL 305
Query:69  FLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLRHEDVVNSVVFSPQEQELLLTASDDATI 128
                 D + SG+ DR   IWD   + C   L  ED V +V  SP + +L+   S D T+
Sbjct:306 DFFPDGDRLVSGSGDRSVRIWDLRTSQCSLTLSIEDGVTTVAVSP-DGKLIAAGSLDRTV 364
Query:129 KAWRS 133
           + W S
Sbjct:365 RVWDS 369
>SW:YA3A_SCHPO Q09715 schizosaccharomyces pombe (fission yeast).
             hypothetical 67.3 kd trp-asp repeats containing protein
             c18b11.10 in chromosome i.7/1998
长度=614
分值=43.4bits(100),预计值=0.001
相同性=36/136(26%),相似性=62/136(45%),缺口=15/136(11%)
Query:4   SPD-NRYLYVNSRAW-PNGAVVADPMQPPPIAEEIDLLVFDLKTMREVRRALRAHRAYTP 61
           SPD +R LYV + A+ P+G  +          E+  + ++DL T + VR     H
Sbjct:354 SPDPSRDLYVRTIAFSPDGKYLVTG------TEDRQIKLWDLSTQK-VRYVFSGHE---- 402
Query:62  NDECFFIFLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLRHEDVVNSVVFSPQEQELLLT 121
             + + +    +  F+ SG+ DR   +WD     C+ +L  E+ V ++  SP +Q  +
Sbjct:403 -QDIYSLDFSHNGRFIVSGSGDRTARLWDVETGQCILKLEIENGVTAIAISPNDQ-FIAV 460
Query:122 ASDDATIKAWRSPRTM 137
            S D  I+ W    T+
Sbjct:461 GSLDQIIRVWSVSGTL 476
分值=37.1bits(84),预计值=0.086
相同性=28/89(31%),相似性=42/89(46%),缺口=13/89(14%)
Query:58  AYTPNDECFFIFLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLRHEDVVNSVVFSPQEQE 117
           A +PND+           F+A G+ D+   +W     +      H++ V S+ FSP +
Sbjct:450 AISPNDQ-----------FIAVGSLDQIIRVWSVSGTLVERLEGHKESVYSIAFSP-DSS 497
Query:118 LLLTASDDATIKAWRSPRTMRV-LQAPRP 145
           +LL+ S D TIK W    T  V L A +P
Sbjct:498 ILLSGSLDKTIKVWELQATRSVGLSAIKP 526
>SP_IN:O96995 O96995 drosophila melanogaster(fruit fly).notchless
             protein.5/1999
长度=480
分值=43.0bits(99),预计值=0.002
相同性=26/92(28%),相似性=50/92(54%),缺口=12/92(13%)
Query:43  LKTMREVRRALRAHRAYTPNDECFFIFLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICLARLR- 101
           L T      AL+ ++A  P++           + + S ++D   Y+W  + N C+ R+
Sbjct:316 LSTEELQESALKRYQAVCPDEV----------ESLVSCSDDNTLYLWRNNQNKCVERMTG 365
Query:102 HEDVVNSVVFSPQEQELLLTASDDATIKAWRS 133
           H++VVN V +SP + +L ++AS D +++ WR+
Sbjct:366 HQNVVNDVKYSP-DVKLIASASFDKSVRLWRA 396
分值=30.9bits(68),预计值=6.5
相同性=25/97(25%),相似性=44/97(44%),缺口=3/97(3%)
Query:38  LLVFDLKTMREVRRALRAHRAYTPNDECFFIFLDVSRDFVASGAEDRHGYIWDRHYNICL 97
           ++++D +T ++  R L  H+ +           D     +AS + D    IWD     CL
Sbjct:177 IIIWDPETGQQKGRPLSGHKKHINCLAWEPYHRDPECRKLASASGDGDCRIWDVKLGQCL 236
Query:98  ARLR-HEDVVNSVVFSPQEQELLLTASDDATIKAWRS 133
             +  H + V +V +      L+ T+S D T+K WR+
Sbjct:237 MNIAGHTNAVTAVRWGGAG--LIYTSSKDRTVKMWRA 271
3.PP451
A:核苷酸序列:(SEQ ID NO:7)长度:1456bp
   1  GTCAACTTCA TCCACCTGAT CTTAGAAGCA CTAGTGGACG GCCCCCGCAT
  51  GCAGGCCTCA GCTCATGTGA CTCGGCCCTC TAAGAGGCCC AGCAAGATAG
 101  GGTTTGACGA GGTCTTTGTC ATCAGCCTGG CTCGCAGGCC TGACCGTCGG
 151  GAACGCATGC TCGCCTCGCT CTGGGAGATG GAGATCTCTG GGAGGGTGGT
 201  GGACGCTGTG GATGGCTGGA TGCTCAACAG CAGTGCCATC AGGAACCTCG
 251  GCGTAGACCT GCTCCCGGGC TACCAGGACC CTTACTCGGG CCGCACTCTG
 301  ACCAAGGGCG AGGTGGGCTG CTTCCTCAGC CATTACTCCA TCTGGGAAGA
 351  GGTGGTTGCC AGGGGCCTGG CCCGGGTCCT GGTGTTTGAG GATGACGTGC
 401  GCTTTGAGAG CAACTTCAGG GGGCGGCTGG AACGGCTGAT GGAGGATGTG
 451  GAAGCAGAGA AACTGTCTTG GGACCTGATC TACCTCGGAC GGAAGCAGGT
 501  GAACCCCTGA GAAGGAGACG GCCGTGGAGG GGCTGCCGGG CCTGGTGGTG
 551  GCTGGGTACT CCTACTGGAC GCTGGCCTAT GCCCTGCGTC TGGCGGGTGC
 601  CCGCAAGCTG CTGGCCTCAC AGCCTCTGCG CCGCATGCTG CCCGTGGACG
 651  AGTTCCTGCC CATCATGTTC GACCAGCACC CCAACGAGCA GTACAAGGCA
 701  CACTTCTGGC CACGGGACCT GGTGGCCTTC TCCGCCCAGC CCCTGCTCGC
 751  TGCCCCTACC CACTATGCCG GGGACGCCGA GTGGCTCAGT GACACGGAGA
 801  CATCCTCTCC ATGGGATGAT GACAGCGGCC GCCTCATCAG CTGGAGCGGC
 851  TCCCAAAAGA CCCTGCGCAG CCCCCGCCTG GACCTGACTG GCAGCAGCGG
 901  GCACAGCCTC CAACCCCAGC CCCGAGATGA GCTCTAGGTC CAGGTGATGA
 951  CTGCAAAGCA GTGTCCAGGA GCAGGCCACT ACTGCCCAGA GAGCAGAGGA
1001  GGAGGTTGTT GCCAGGGACT GCAGATCCTG TCAGACCTGG CCACCACCTT
1051  GGGCATGGCC ACTCTGCCCT CTGGACCTGT CTTTCATCGG GAGAAACCAC
1101  TCAGAGATGG ATCCCATTCC CTAAAGGTCT CACAGCAAAG GAGCAGGACT
1151  CCCAGGCCCC TGTACCCTGC CTGGCCTGAT TCAGGGCCTT GTGGCCCCCA
1201  GCTTCTTGTT TCAAGCTGGG CAGACCCCAG GATCCCTTCC CTCCCTAAGG
1251  ACTCAGCTGA GGGGCCCCTC TTGCCCCCTT CTTACCTCCA CCTCAGCACC
1301  CTCCCCCAGC TTGATGTTTG GGTCTCCCCA GCACCCTCCT CCTTGGCCGG
1351  TGCAAAGTAC AGGGAGGTAA AGCAGGACCC TTGCAGACAT GTTGCCCAGC
1401  ACACAGTAGG CCCTCAATAA AAGCCATTTG CACTTTAAAA AAAAAAAAAA
1451  AAAAAA
B:氨基酸序列:(SEQ ID NO:8)长度:157个氨基酸
   1  MTAKQCPGAG HYCPESRGGG CCQGLQILSD LATTLGMATL PSGPVFHREK
  51  PLRDGSHSLK VSQQRSRTPR PLYPAWPDSG PCGPQLLVSS WADPRIPSLP
 101  KDSAEGPLLP PSYLHLSTLP QLDVWVSPAP SSLAGAKYRE VKQDPCRHVA
 151  QHTVGPQ
C:核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:9)
克隆号和蛋白质名称:PP451
起始编码子:  947 ATG    终止编码子:1420 TAA
蛋白质分子量:16819.29
   1    G TCA ACT TCA TCC ACC TGA TCT TAG AAG CAC TAG TGG ACG GCC CCC     46
  47  GCA TGC AGG CCT CAG CTC ATG TGA CTC GGC CCT CTA AGA GGC CCA GCA     94
  95  AGA TAG GGT TTG ACG AGG TCT TTG TCA TCA GCC TGG CTC GCA GGC CTG    142
 143  ACC GTC GGG AAC GCA TGC TCG CCT CGC TCT GGG AGA TGG AGA TCT CTG    190
 191  GGA GGG TGG TGG ACG CTG TGG ATG GCT GGA TGC TCA ACA GCA GTG CCA    238
 239  TCA GGA ACC TCG GCG TAG ACC TGC TCC CGG GCT ACC AGG ACC CTT ACT    286
 287  CGG GCC GCA CTC TGA CCA AGG GCG AGG TGG GCT GCT TCC TCA GCC ATT    334
 335  ACT CCA TCT GGG AAG AGG TGG TTG CCA GGG GCC TGG CCC GGG TCC TGG    382
 383  TGT TTG AGG ATG ACG TGC GCT TTG AGA GCA ACT TCA GGG GGC GGC TGG    430
 431  AAC GGC TGA TGG AGG ATG TGG AAG CAG AGA AAC TGT CTT GGG ACC TGA    478
 479  TCT ACC TCG GAC GGA AGC AGG TGA ACC CCT GAG AAG GAG ACG GCC GTG    526
 527  GAG GGG CTG CCG GGC CTG GTG GTG GCT GGG TAC TCC TAC TGG ACG CTG    574
 575  GCC TAT GCC CTG CGT CTG GCG GGT GCC CGC AAG CTG CTG GCC TCA CAG    622
 623  CCT CTG CGC CGC ATG CTG CCC GTG GAC GAG TTC CTG CCC ATC ATG TTC    670
 671  GAC CAG CAC CCC AAC GAG CAG TAC AAG GCA CAC TTC TGG CCA CGG GAC    718
 719  CTG GTG GCC TTC TCC GCC CAG CCC CTG CTC GCT GCC CCT ACC CAC TAT    766
 767  GCC GGG GAC GCC GAG TGG CTC AGT GAC ACG GAG ACA TCC TCT CCA TGG    814
 815  GAT GAT GAC AGC GGC CGC CTC ATC AGC TGG AGC GGC TCC CAA AAG ACC    862
 863  CTG CGC AGC CCC CGC CTG GAC CTG ACT GGC AGC AGC GGG CAC AGC CTC    910
 911  CAA CCC CAG CCC CGA GAT GAG CTC TAG GTC CAG GTG ATG ACT GCA AAG    958
   1                                                  Met Thr Ala Lys      4
 959  CAG TGT CCA GGA GCA GGC CAC TAC TGC CCA GAG AGC AGA GGA GGA GGT   1006
   5  Gln Cys Pro Gly Ala Gly His Tyr Cys Pro Glu Ser Arg Gly Gly Gly     20
1007  TGT TGC CAG GGA CTG CAG ATC CTG TCA GAC CTG GCC ACC ACC TTG GGC   1054
  21  Cys Cys Gln Gly Leu Gln Ile Leu Ser Asp Leu Ala Thr Thr Leu Gly     36
1055  ATG GCC ACT CTG CCC TCT GGA CCT GTC TTT CAT CGG GAG AAA CCA CTC   1102
  37  Met Ala Thr Leu Pro Ser Gly Pro Val Phe His Arg Glu Lys Pro Leu     52
1103  AGA GAT GGA TCC CAT TCC CTA AAG GTC TCA CAG CAA AGG AGC AGG ACT   1150
  53  Arg Asp Gly Ser His Ser Leu Lys Val Ser Gln Gln Arg Ser Arg Thr     68
1151  CCC AGG CCC CTG TAC CCT GCC TGG CCT GAT TCA GGG CCT TGT GGC CCC   1198
  69  Pro Arg Pro Leu Tyr Pro Ala Trp Pro Asp Ser Gly Pro Cys Gly Pro     84
1199  CAG CTT CTT GTT TCA AGC TGG GCA GAC CCC AGG ATC CCT TCC CTC CCT   1246
  85  Gln Leu Leu Val Ser Ser Trp Ala Asp Pro Arg Ile Pro Ser Leu Pro    100
1247  AAG GAC TCA GCT GAG GGG CCC CTC TTG CCC CCT TCT TAC CTC CAC CTC   1294
 101  Lys Asp Ser Ala Glu Gly Pro Leu Leu Pro Pro Ser Tyr Leu His Leu    116
1295  AGC ACC CTC CCC CAG CTT GAT GTT TGG GTC TCC CCA GCA CCC TCC TCC   1342
 117  Ser Thr Leu Pro Gln Leu Asp Val Trp Val Ser Pro Ala Pro Ser Ser    132
1343  TTG GCC GGT GCA AAG TAC AGG GAG GTA AAG CAG GAC CCT TGC AGA CAT   1390
 133  Leu Ala Gly Ala Lys Tyr Arg Glu Val Lys Gln Asp Pro Cys Arg His    148
1391  GTT GCC CAG CAC ACA GTA GGC CCT CAA TAA AAG CCA TTT GCA CTT TAA   1438
 149  Val Ala Gln His Thr Val Gly Pro Gln ***                            158
1439  AAA AAA AAA AAA AAA AAA                                           1456
4.PP624
A:核苷酸序列:(SEQ ID NO:10)长度:1754bp
   1  AGATGACCTG GAAATAGGCC CAGGTCAGTT GTCATCTTCT ACATTTGACT
  51  CGGAGAAAAA TGAGAGTAGA CGAAATCTGG AACTTCCACG CCTCTCAGAA
 101  ACCTCTATAA AGGATCGAAT GGCCAAGTAC CAGGCAGCTG TGTCCAAACA
 151  AAGCAGCTCA ACCAACTATA CAAATGAGCT GAAAGCCAGT GGTGGCGAAA
 201  TCAAAATTCA TAAAATGGAG CAAAAGGAGA ATGTGCCCCC AGGTCCTGAG
 251  GTCTGCATCA CCCATCAGGA AGGGGAAAAG ATTTCTGCAA ATGAGAATAG
 301  CCTGGCAGTC CGTTCCACCC CTGCCGAAGA TGACTCCCGT GACTCCCAGG
 351  TTAAGAGTGA GGTTCAACAG CCTGTCCATC CCAAGCCACT AAGTCCAGAT
 401  CTCCAGAGCC TCCAGTCTTT CTGAAAGTTC TCCTCCCAAA GCAATGAAGA
 451  AGTTTCAGGC ACCTGCAAGA GAGACCTGCG TGGAATGTCA GAAGACAGTC
 501  TATRCAATGG AGCGTCTCTT GGCCAACCAG CAGGTGTTTC ACATCAGCTG
 551  CTTRCGTTGC TRCTATTGCA KCAACAAACT CAGTCTAGGA ACATATGCAT
 601  CTTTACATGG AAGAATCTAT TGTAAGCCTC ACTTCAATCA ACTCTTTAAA
 651  TCTAAGGGCA ACTATGATGA AGGCTTTGGG CACAGACCAC ACAAGGATCT
 701  ATGGGCAAGC AAAAATGAAA ACGAAGAGAT TTTGGAGAGA CCAGCCCAGC
 751  TTGCAAATGC AAGGGAGACC CCTCACAGCC CAGGGGTAGA AGATGCCCCT
 801  ATTGCTAAGG TGGGTGTCCT GGCTGCAAGT ATGGAAGCCA AGGCCTCCTC
 851  TCAGCAGGAG AAGGAAGACA AGCCAGCTGA AACCAAGAAG CTGAGGATCG
 901  CCTGGCCACC CCCCACTGAA CTTGGAAGTT CAGGAAGTGC CTTGGAGGAA
 951  GGGATCAAAA TGTCAAAGCC CAAATGGCCT CCTGAAGACG AAATCAGCAA
1001  GCCCGAAGTT CCTGAGGATG TCGATCTAGA TCTGAAGAAG CTAAGACGAT
1051  CTTCTTCACT GAAGGAAAGA AGCCGCCCAT TCACTGTAGC AGCTTCATTT
1101  CAAAGCACCT CTGTCAAGAG CCCAAAAACT GTGTCCCCAC CTATCAGGAA
1151  AGGCTGGAGC ATGTCAGAGC AGAGTGAAGA GTCTGTGGGT GGAAGAGTTG
1201  CAGAAAGGAA ACAAGTGGAA AATGCCAAGG CTTCTAAGAA GAATGGGAAT
1251  GTGGGAAAAA CAACCTGGCA AAACAAAGAA TCTAAAGGAG AGCAGGGAAG
1301  AGAAGTAAGG AAGGTCATAG TTTGGAGATG GAGAATGAGA ATCTTGTAGA
1351  AAATGGTGCA GACTCCGATG AAGATGATAA CAGCTTCCTC AAACAACAAT
1401  CTCCACAAGA ACCCAAGTCT CTGAATTGGT CGAGTTTTGT AGACAACACC
1451  TTTGCTGAAG AATTCACTAC TCAGAATCAG AAATCCCAGG ATGTGGAACT
1501  CTGGGAGGGA GAAGTGGTCA AAGAGCTCTC TGTGGAAGAA CAGATAAAGA
1551  GAAATCGGTA TTATGATGAG GATGAGGATG AAGAGTGACA AATTGCAATG
1601  ATGCTGGGCC TTAAATTCAT GTTAGTGTTA GCGAGCCACT GCCCTTTGTC
1651  AAAATGTGAT GCACATAAGC AGGTATCCCA GCATGAAATG TAATTTACTT
1701  GGAAGTAACT TTGGAAAAGA ATTCCTTCTT AAAATCAAAA AAAAAAAAAA
1751  AAAA
B:氨基酸序列:(SEQ ID NO:11)长度:301个氨基酸
   1  MKKFQAPARE TCVECQKTVY XMERLLANQQ VFHISCLRCX YCXNKLSLGT
  51  YASLHGRIYC KPHFNQLFKS KGNYDEGFGH RPHKDLWASK NENEEILERP
 101  AQLANARETP HSPGVEDAPI AKVGVLAASM EAKASSQQEK EDKPAETKKL
 151  RIAWPPPTEL GSSGSALEEG IKMSKPKWPP EDEISKPEVP EDVDLDLKKL
 201  RRSSSLKERS RPFTVAASFQ STSVKSPKTV SPPIRKGWSM SEQSEESVGG
 251  RVAERKQVEN AKASKKNGNV GKTTWQNKES KGEQGREVRK VIVWRWRMRI
 301  L
C:核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:12)
克隆号和蛋白质名称:PP624
起始编码子:  444 ATG    终止编码子:1349 TAG
蛋白质分子量:33999.27
   1   AG ATG ACC TGG AAA TAG GCC CAG GTC AGT TGT CAT CTT CTA CAT TTG     47
  48  ACT CGG AGA AAA ATG AGA GTA GAC GAA ATC TGG AAC TTC CAC GCC TCT     95
  96  CAG AAA CCT CTA TAA AGG ATC GAA TGG CCA AGT ACC AGG CAG CTG TGT    143
 144  CCA AAC AAA GCA GCT CAA CCA ACT ATA CAA ATG AGC TGA AAG CCA GTG    191
 192  GTG GCG AAA TCA AAA TTC ATA AAA TGG AGC AAA AGG AGA ATG TGC CCC    239
 240  CAG GTC CTG AGG TCT GCA TCA CCC ATC AGG AAG GGG AAA AGA TTT CTG    287
 288  CAA ATG AGA ATA GCC TGG CAG TCC GTT CCA CCC CTG CCG AAG ATG ACT    335
 336  CCC GTG ACT CCC AGG TTA AGA GTG AGG TTC AAC AGC CTG TCC ATC CCA    383
 384  AGC CAC TAA GTC CAG ATC TCC AGA GCC TCC AGT CTT TCT GAA AGT TCT    431
 432  CCT CCC AAA GCA ATG AAG AAG TTT CAG GCA CCT GCA AGA GAG ACC TGC    479
   1                  Met Lys Lys Phe Gln Ala Pro Ala Arg Glu Thr Cys     12
 480  GTG GAA TGT CAG AAG ACA GTC TAT RCA ATG GAG CGT CTC TTG GCC AAC    527
  13  Val Glu Cys Gln Lys Thr Val Tyr Xxx Met Glu Arg Leu Leu Ala Asn     28
 528  CAG CAG GTG TTT CAC ATC AGC TGC TTR CGT TGC TRC TAT TGC AKC AAC    575
  29  Gln Gln Val Phe His Ile Ser Cys Leu Arg Cys Xxx Tyr Cys Xxx Asn     44
 576  AAA CTC AGT CTA GGA ACA TAT GCA TCT TTA CAT GGA AGA ATC TAT TGT    623
  45  Lys Leu Ser Leu Gly Thr Tyr Ala Ser Leu His Gly Arg Ile Tyr Cys     60
 624  AAG CCT CAC TTC AAT CAA CTC TTT AAA TCT AAG GGC AAC TAT GAT GAA    671
  61  Lys Pro His Phe Asn Gln Leu Phe Lys Ser Lys Gly Asn Tyr Asp Glu     76
 672  GGC TTT GGG CAC AGA CCA CAC AAG GAT CTA TGG GCA AGC AAA AAT GAA    719
  77  Gly Phe Gly His Arg Pro His Lys Asp Leu Trp Ala Ser Lys Asn Glu     92
 720  AAC GAA GAG ATT TTG GAG AGA CCA GCC CAG CTT GCA AAT GCA AGG GAG    767
  93  Asn Glu Glu Ile Leu Glu Arg Pro Ala Gln Leu Ala Asn Ala Arg Glu    108
 768  ACC CCT CAC AGC CCA GGG GTA GAA GAT GCC CCT ATT GCT AAG GTG GGT    815
 109  Thr Pro His Ser Pro Gly Val Glu Asp Ala Pro Ile Ala Lys Val Gly    124
 816  GTC CTG GCT GCA AGT ATG GAA GCC AAG GCC TCC TCT CAG CAG GAG AAG    863
 125  Val Leu Ala Ala Ser Met Glu Ala Lys Ala Ser Ser Gln Gln Glu Lys    140
 864  GAA GAC AAG CCA GCT GAA ACC AAG AAG CTG AGG ATC GCC TGG CCA CCC    911
 141  Glu Asp Lys Pro Ala Glu Thr Lys Lys Leu Arg Ile Ala Trp Pro Pro    156
 912  CCC ACT GAA CTT GGA AGT TCA GGA AGT GCC TTG GAG GAA GGG ATC AAA    959
 157  Pro Thr Glu Leu Gly Ser Ser Gly Ser Ala Leu Glu Glu Gly Ile Lys    172
 960  ATG TCA AAG CCC AAA TGG CCT CCT GAA GAC GAA ATC AGC AAG CCC GAA   1007
 173  Met Ser Lys Pro Lys Trp Pro Pro Glu Asp Glu Ile Ser Lys Pro Glu    188
1008  GTT CCT GAG GAT GTC GAT CTA GAT CTG AAG AAG CTA AGA CGA TCT TCT   1055
 189  Val Pro Glu Asp Val Asp Leu Asp Leu Lys Lys Leu Arg Arg Ser Ser    204
1056  TCA CTG AAG GAA AGA AGC CGC CCA TTC ACT GTA GCA GCT TCA TTT CAA    1103
 205  Ser Leu Lys Glu Arg Ser Arg Pro Phe Thr Val Ala Ala Ser Phe Gln     220
1104  AGC ACC TCT GTC AAG AGC CCA AAA ACT GTG TCC CCA CCT ATC AGG AAA    1151
 221  Ser Thr Ser Val Lys Ser Pro Lys Thr Val Ser Pro Pro Ile Arg Lys     236
1152  GGC TGG AGC ATG TCA GAG CAG AGT GAA GAG TCT GTG GGT GGA AGA GTT    1199
 237  Gly Trp Ser Met Ser Glu Gln Ser Glu Glu Ser Val Gly Gly Arg Val     252
1200  GCA GAA AGG AAA CAA GTG GAA AAT GCC AAG GCT TCT AAG AAG AAT GGG    1247
 253  Ala Glu Arg Lys Gln Val Glu Asn Ala Lys Ala Ser Lys Lys Asn Gly     268
1248  AAT GTG GGA AAA ACA ACC TGG CAA AAC AAA GAA TCT AAA GGA GAG CAG    1295
 269  Asn Val Gly Lys Thr Thr Trp Gln Asn Lys Glu Ser Lys Gly Glu Gln     284
1296  GGA AGA GAA GTA AGG AAG GTC ATA GTT TGG AGA TGG AGA ATG AGA ATC    1343
 285  Gly Arg Glu Val Arg Lys Val Ile Val Trp Arg Trp Arg Met Arg Ile     300
1344  TTG TAG AAA ATG GTG CAG ACT CCG ATG AAG ATG ATA ACA GCT TCC TCA    1391
 301  Leu ***                                                             302
1392  AAC AAC AAT CTC CAC AAG AAC CCA AGT CTC TGA ATT GGT CGA GTT TTG    1439
1440  TAG ACA ACA CCT TTG CTG AAG AAT TCA CTA CTC AGA ATC AGA AAT CCC    1487
1488  AGG ATG TGG AAC TCT GGG AGG GAG AAG TGG TCA AAG AGC TCT CTG TGG    1535
1536  AAG AAC AGA TAA AGA GAA ATC GGT ATT ATG ATG AGG ATG AGG ATG AAG    1583
1584  AGT GAC AAA TTG CAA TGA TGC TGG GCC TTA AAT TCA TGT TAG TGT TAG    1631
1632  CGA GCC ACT GCC CTT TGT CAA AAT GTG ATG CAC ATA AGC AGG TAT CCC    1679
1680  AGC ATG AAA TGT AAT TTA CTT GGA AGT AAC TTT GGA AAA GAA TTC CTT    1727
1728  CTT AAA ATC AAA AAA AAA AAA AAA AAA                                1754
5.PP722
A:核苷酸序列:(SEQ ID NO:13)长度:1690bp
   1  GTCTGACCCA GGCCTGCCTC CCTTCCCTAG GCCTGGCTCC TTCTGTTGAC
  51  ATGGGAGATT TTAGCTCATC TTGGGGGCCT CCTTAAACAC CCCCATTTCT
 101  TGCGGAAGAT GCTCCCCATC CCACTGACTG CTTGACCTTT ACCTCCAACC
 151  CTTCTGTTCA TCGGGAGGGC TCCACCAATT GAGTCTCTCC CACCATGCAT
 201  GCAGGTCACT GTGTGTGTGC ATGTGTGCCT GTGTGAGTGT TGACTGACTG
 251  TGTGTGTGTG GAGGGGTGAC TGTCCGTGGA GGGGTGACTG TGTCCGTGGT
 301  GTGTATTATG CTGTCATATC AGAGTCAAGT GAACTGTGGT GTATGTGCCA
 351  CGGGATTTGA GTGGTTGCCG TGGGCAACAC TGTCAGGGTT TGGCGTGTGT
 401  GTCATGTGGC TGTGTGTGAC CTCTGCCTGA AAAAGCAGGT ATTTTCTCAG
 451  ACCCCAGAGC AGTATTAATG ATGCAGAGGT TGGAGGAGAG AGGTGGAGAC
 501  TGTGGCTCAG ACCCAGGTGT GCGGGCATAG CTGGAGCTGG AATCTGCCTC
 551  CGGTGTGAGG GAACCTGTCT CCTACCACTT CGGAGCCATG GGGGCAAGTG
 601  TGAAGCAGCC AGTCCCTGGG TCAGCCAGAG GCTTGAACTG TTACAGAAGC
 651  CCTCTGCCCT CTGGTGGCCT CTGGGCCTGC TGCATGTACA TATTTTCTGT
 701  AAATATACAT GCGCCGGGAG CTTCTTGCAG GAATACTGCT CCGAATCACT
 751  TTTAATTTTT TTCTTTTTTT TTTCTTGCCC TTTCCATTAG TTGTATTTTT
 801  TATTTATTTT TATTTTTATT TTTTTTTAGA GATGGAGTCT CACTATGTTG
 851  CTCAGGCTGG CCTTGAACTC CTGGGCTCAA GCAATCCTCC TGCCTCAGCC
 901  TCCCTAGTAG CTGGGACTTT AAGTGTACAC CACTGTGCCT GCTTTGAATC
 951  CTTTACGAAG AGAAAAAAAA AATTAAAGAA AGCCTTTAGA TTTATCCAAT
1001  GTTTACTACT GGGATTGCTT AAAGTGAGGC CCCTCCAACA CCAGGGGGTT
1051  AATTCCTGTG ATTGTGAAAG GGGCTACTTC CAAGGCATCT TCATGCAGGC
1101  AGCCCCTTGG GAGGGCACCT GAGAGCTGGT AGAGTCTGAA ATTAGGGATG
1151  TGAGCCTCGT GGTTACTGAG TAAGGTAAAA TTGCATCCAC CATTGTTTGT
1201  GATACCTTAG GGAATTGCTT GGACCTGGTG ACAAGGGCTC CTGTTCAATA
1251  GTGGTGTTGG GGAGAGAGAG AGCAGTGATT ATAGACCGAG AGAGTAGGAG
1301  TTGAGGTGAG GTGAAGGAGG TGCTGGGGGT GAGAATGTCG CCTTTCCCCC
1351  TGGGTTTTGG ATCACTAATT CAAGGCTCTT CTGGATGTTT CTCTGGGTTG
1401  GGGCTGGAGT TCAATGAGGT TTATTTTTAG CTGGCCCACC CAGATACACT
1451  CAGCCAGAAT ACCTAGATTT AGTACCCAAA CTCTTCTTAG TCTGAAATCT
1501  GCTGGATTTC TGGCCTAAGG GAGAGGCTCC CATCCTTCGT TCCCCAGCCA
1551  GCCTAGGACT TCGAATGTGG AGCCTGAAGA TCTAAGATCC TAACATGTAC
1601  ATTTTATGTA AATATGTGCA TATTTGTACA TAAAATGATA TTCTGTTTTT
1651  AAATAAACAG ACAAAACTTG AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA
B:氨基酸序列:PP722(SEQ ID NO:14)长度:137个氨基酸
   1  MRRELLAGIL LRITFNFFLF FFLPFPLVVF FIYFYFYFFL EMESHYVAQA
  51  GLELLGSSNP PASASLVAGT LSVHHCACFE SFTKRKKKLK KAFRFIQCLL
 101  LGLLKVRPLQ HQGVNSCDCE RGYFQGIFMQ AAPWEGT
C:核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:14)
克隆号和蛋白质名称:PP722
起始编码子:  709 ATG    终止编码子:1122 TGA
蛋白质分子量:15824.94
   1  GTC TGA CCC AGG CCT GCC TCC CTT CCC TAG GCC TGG CTC CTT CTG TTG     48
  49  ACA TGG GAG ATT TTA GCT CAT CTT GGG GGC CTC CTT AAA CAC CCC CAT     96
  97  TTC TTG CGG AAG ATG CTC CCC ATC CCA CTG ACT GCT TGA CCT TTA CCT    144
 145  CCA ACC CTT CTG TTC ATC GGG AGG GCT CCA CCA ATT GAG TCT CTC CCA    192
 193  CCA TGC ATG CAG GTC ACT GTG TGT GTG CAT GTG TGC CTG TGT GAG TGT    240
 241  TGA CTG ACT GTG TGT GTG TGG AGG GGT GAC TGT CCG TGG AGG GGT GAC    288
 289  TGT GTC CGT GGT GTG TAT TAT GCT GTC ATA TCA GAG TCA AGT GAA CTG    336
 337  TGG TGT ATG TGC CAC GGG ATT TGA GTG GTT GCC GTG GGC AAC ACT GTC    384
 385  AGG GTT TGG CGT GTG TGT CAT GTG GCT GTG TGT GAC CTC TGC CTG AAA    432
 433  AAG CAG GTA TTT TCT CAG ACC CCA GAG CAG TAT TAA TGA TGC AGA GGT    480
 481  TGG AGG AGA GAG GTG GAG ACT GTG GCT CAG ACC CAG GTG TGC GGG CAT    528
 529  AGC TGG AGC TGG AAT CTG CCT CCG GTG TGA GGG AAC CTG TCT CCT ACC    576
 577  ACT TCG GAG CCA TGG GGG CAA GTG TGA AGC AGC CAG TCC CTG GGT CAG    624
 625  CCA GAG GCT TGA ACT GTT ACA GAA GCC CTC TGC CCT CTG GTG GCC TCT    672
 673  GGG CCT GCT GCA TGT ACA TAT TTT CTG TAA ATA TAC ATG CGC CGG GAG    720
   1                                                  Met Arg Arg Glu      4
 721  CTT CTT GCA GGA ATA CTG CTC CGA ATC ACT TTT AAT TTT TTT CTT TTT    768
   5  Leu Leu Ala Gly Ile Leu Leu Arg Ile Thr Phe Asn Phe Phe Leu Phe     20
 769  TTT TTC TTG CCC TTT CCA TTA GTT GTA TTT TTT ATT TAT TTT TAT TTT    816
  21  Phe Phe Leu Pro Phe Pro Leu Val Val Phe Phe Ile Tyr Phe Tyr Phe     36
 817  TAT TTT TTT TTA GAG ATG GAG TCT CAC TAT GTT GCT CAG GCT GGC CTT    864
  37  Tyr Phe Phe Leu Glu Met Glu Ser His Tyr Val Ala Gln Ala Gly Leu     52
 865  GAA CTC CTG GGC TCA AGC AAT CCT CCT GCC TCA GCC TCC CTA GTA GCT     912
  53  Glu Leu Leu Gly Ser Ser Asn Pro Pro Ala Ser Ala Ser Leu Val Ala      68
 913  GGG ACT TTA AGT GTA CAC CAC TGT GCC TGC TTT GAA TCC TTT ACG AAG     960
  69  Gly Thr Leu Ser Val His His Cys Ala Cys Phe Glu Ser Phe Thr Lys      84
 961  AGA AAA AAA AAA TTA AAG AAA GCC TTT AGA TTT ATC CAA TGT TTA CTA    1008
  85  Arg Lys Lys Lys Leu Lys Lys Ala Phe Arg Phe Ile Gln Cys Leu Leu     100
1009  CTG GGA TTG CTT AAA GTG AGG CCC CTC CAA CAC CAG GGG GTT AAT TCC    1056
 101  Leu Gly Leu Leu Lys Val Arg Pro Leu Gln His Gln Gly Val Asn Ser     116
1057  TGT GAT TGT GAA AGG GGC TAC TTC CAA GGC ATC TTC ATG CAG GCA GCC    1104
 117  Cys Asp Cys Glu Arg Gly Tyr Phe Gln Gly Ile Phe Met Gln Ala Ala     132
1105  CCT TGG GAG GGC ACC TGA GAG CTG GTA GAG TCT GAA ATT AGG GAT GTG    1152
 133  Pro Trp Glu Gly Thr ***                                             138
1153  AGC CTC GTG GTT ACT GAG TAA GGT AAA ATT GCA TCC ACC ATT GTT TGT    1200
1201  GAT ACC TTA GGG AAT TGC TTG GAC CTG GTG ACA AGG GCT CCT GTT CAA    1248
1249  TAG TGG TGT TGG GGA GAG AGA GAG CAG TGA TTA TAG ACC GAG AGA GTA    1296
1297  GGA GTT GAG GTG AGG TGA AGG AGG TGC TGG GGG TGA GAA TGT CGC CTT    1344
1345  TCC CCC TGG GTT TTG GAT CAC TAA TTC AAG GCT CTT CTG GAT GTT TCT    1392
1393  CTG GGT TGG GGC TGG AGT TCA ATG AGG TTT ATT TTT AGC TGG CCC ACC    1440
1441  CAG ATA CAC TCA GCC AGA ATA CCT AGA TTT AGT ACC CAA ACT CTT CTT    1488
1489  AGT CTG AAA TCT GCT GGA TTT CTG GCC TAA GGG AGA GGC TCC CAT CCT    1536
1537  TCG TTC CCC AGC CAG CCT AGG ACT TCG AAT GTG GAG CCT GAA GAT CTA    1584
1585  AGA TCC TAA CAT GTA CAT TTT ATG TAA ATA TGT GCA TAT TTG TAC ATA    1632
1633  AAA TGA TAT TCT GTT TTT AAA TAA ACA GAC AAA ACT TGA AAA AAA AAA    1680
1681  AAA AAA AAA A                                                      1690
6.PP902
A:核苷酸序列:(SEQ ID NO:16)长度:2136bp
   1  TGTCGCTGCC GGAGAGTCTC TGCTTCCCCC TTCCTACGCG CTCCGCGGCG
  51  GTAGCTCGGG CTCTCCGGAG GAGGGGGCGA CAGAGAAAAA GAGAGGCTGA
 101  CTTAATAAAG TTTCCTGAAA CAACAACTAC CACCGAAAAG GCCCAAGGTG
 151  GGGGGAGACC CCCATTTTCC TCCGCCCCTC TCCTAAAGCC TGAGGGACCG
 201  TTGCAGGTGG AGCGGCGCTG GTGGGACCCG GGTTGCGGCG GCAGCCGTTG
 251  CCCCGGCGAG GGAAGCCTCA GGTCCTGCCC GCTCCGGTTC CGGCTCCTTC
 301  GGTGGTGGCG GCGGCAGCTG CTGCCGGGCG GTTCCTCCTG TCAACTGCCT
 351  CCGCCCGCGC GCCTCCCGCC TAGCCACACA GCGCGGAGGA CGCCGTGAGC
 401  CGCCGCCGCA GTCGTCTCGG CCCGCGGAGG GACGTGGTGA GCTGTGGCGC
 451  TTCCGCGTCA GCGCCGGCGG GGACTCTTTG GGAGCGCGTC GGGCCCGAGT
 501  CCGGGTTCCC CCGCGTGGTC AGCGGAGGCT GCGCCAGGTG GGGCCCGCAG
 551  CCGCCTCCCA CGCCAGGCTG TCCCCGCGGC CGCCCGGCCT GCCTTCCTTC
 601  CTTCCGCCCG CCCGCCGGCC CGCCCTAAGA GTTGACCACG CCGCAATGAA
 651  GAGCTTCTTA CAGTGAAAGC AAAGTAGGTC GAGTCCACTG AAAATGCCTT
 701  TAAGGGACAA ATACTGTCAG ACTGACCACC ATCATCACGG ATGCTGTGAA
 751  CCAGTTTATA TCCTGGAACC TGGAGATCCT CCTTTGTTAC AGCAACCACT
 801  ACAGACATCC AAATCTGGTA TTCAACAAAT AATTGAGTGC TTTCGATCAG
 851  GAACTAAACA ACTTAAGCAT ATTTTATTAA AAGATGTGGA CACTATTTTT
 901  GAATGTAAGT TATGCCGCAG TCTCTTCAGA GGATTACCAA ATTTAATTAC
 951  CCATAAAAAA TTCTACTGCC CACCAAGTCT CCAGATGGAT GACAACCTTC
1001  CTGATGTAAA TGATAAACAA AGCGAAGCCA TAAATGATCT CCTAGAAGCC
1051  ATATATCCAA GTGTGGACAA ACGAGAATAT ATTATTAAGC TAGAACCCAT
1101  AGAAACTAAT CAAAATGCAG TATTTCAATA TATTTCGAGG ACTGATAATC
1151  CTATTGAAGT CACAGAGTCA AGCAGTACTC CTGAACAAAC CGAAGTTCAG
1201  ATACAGGAAA CTAGCACTGA ACAGTCAAAA ACAGTACCGG TTACAGATAC
1251  AGAGGTGGAA ACTGTAGAGC CCCCTCCTGT TGAGATTGTT ACAGATGAAG
1301  TTGCACCTAC ATCTGATGAA CAACCTCAGG AGTCGCAGGC TGACTTGGAA
1351  ACTTCTGACA ATTCTGATTT TGGTCACCAG TTGATATGTT GTCTTTGTAG
1401  AAAAGAATTC AATTCTAGAC GAGGTGTTCG CCGTCACATT CGAAAAGTAC
1451  ACAAGAAAAA GATGGAAGAA CTAAAAAAGT ACATTGAAAC ACGAAAGAAT
1501  CCAAACCAAT CCTCTAAAGG ACGCAGTAAG AATGTTCTAG TTCCATTAAG
1551  TAGGAGTTGT CCAGTATGTT GTAAATCATT TGCTACAAAA GCGAATGTAA
1601  GGAGGCATTT TGATGAAGTT CATAGAGGAC TAAGGAGGGA TTCAATTACT
1651  CCTGATATAG CAACAAAGCC TGGGCAACCT TTGTTCCTGG ATTCATATTT
1701  CTCCTAAAAA ATCTTTTAAG ACTCGAAAAC AAAAGTCTTC TTCAAAGGCT
1751  GAATACAATT TAACTGCATG CAAATGCCTC CTTTGCAAGA GGAAATATAG
1801  TTCACAAATA ATGCTTAAAA GACATATGCA AATTGTCCAC AAGATAACTC
1851  TTTCTGGAAC AAACTCTAAA AGAGAAAAAG GCCCTAATAA TACTGCCAAC
1901  AGTTCAGAAA TAAAAGTTAA AGTTGAACCA GCAGATTCTG TAGAATCTTC
1951  ACCCCCTTCC ATTACCCATT CTCCACAGAA TGAATTAAAG GGAACAAATC
2001  ATTCAAATGA AAAAAAGAAC ACACCGGCAG CACAGAAAAA TAAAGTTAAA
2051  CAAGACTCTG AAAGCCCTAA ATCAACTAGT CCGTCGGCTG CAGGTGGCCA
2101  GCAAAAATAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAA
B:氨基酸序列:(SEQ ID NO:17)长度:337个氨基酸
   1  MPLRDKYCQT DHHHHGCCEP VYILEPGDPP LLQQPLQTSK SGIQQIIECF
  51  RSGTKQLKHI LLKDVDTIFE CKLCRSLFRG LPNLITHKKF YCPPSLQMDD
 101  NLPDVNDKQS QAINDLLEAI YPSVDKREYI IKLEPIETNQ NAVFQYISRT
 151  DNPIEVTESS STPEQTEVQI QETSTEQSKT VPVTDTEVET VEPPPVEIVT
 201  DEVAPTSDEQ PQESQADLET SDNSDFGHQL ICCLCRKEFN SRRGVRRHIR
 251  KVHKKKMEEL KKYIETRKNP NQSSKGRSKN VLVPLSRSCP VCCKSFATKA
 301  NVRRHFDEVH RGLRRDSITP DIATKPGQPL FLDSYFS
C:核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:18)
克隆号和蛋白质名称:PP902
起始编码子:  694 ATG    终止编码子:1707 TAA
蛋白质分子量:38572.81
   1  TGT CGC TGC CGG AGA GTC TCT GCT TCC CCC TTC CTA CGC GCT CCG CGG     48
  49  CGG TAG CTC GGG CTC TCC GGA GGA GGG GGC GAC AGA GAA AAA GAG AGG     96
  97  CTG ACT TAA TAA AGT TTC CTG AAA CAA CAA CTA CCA CCG AAA AGG CCC    144
 145  AAG GTG GGG GGA GAC CCC CAT TTT CCT CCG CCC CTC TCC TAA AGC CTG    192
 193  AGG GAC CGT TGC AGG TGG AGC GGC GCT GGT GGG ACC CGG GTT GCG GCG    240
 241  GCA GCC GTT GCC CCG GCG AGG GAA GCC TCA GGT CCT GCC CGC TCC GGT    288
 289  TCC GGC TCC TTC GGT GGT GGC GGC GGC AGC TGC TGC CGG GCG GTT CCT    336
 337  CCT GTC AAC TGC CTC CGC CCG CGC GCC TCC CGC CTA GCC ACA CAG CGC    384
 385  GGA GGA CGC CGT GAG CCG CCG CCG CAG TCG TCT CGG CCC GCG GAG GGA    432
 433  CGT GGT GAG CTG TGG CGC TTC CGC GTC AGC GCC GGC GGG GAC TCT TTG    480
 481  GGA GCG CGT CGG GCC CGA GTC CGG GTT CCC CCG CGT GGT CAG CGG AGG     528
 529  CTG CGC CAG GTG GGG CCC GCA GCC GCC TCC CAC GCC AGG CTG TCC CCG     576
 577  CGG CCG CCC GGC CTG CCT TCC TTC CTT CCG CCC GCC CGC CGG CCC GCC     624
 625  CTA AGA GTT GAC CAC GCC GCA ATG AAG AGC TTC TTA CAG TGA AAG CAA     672
 673  AGT AGG TCG AGT CCA CTG AAA ATG CCT TTA AGG GAC AAA TAC TGT CAG     720
   1                              Met Pro Leu Arg Asp Lys Tyr Cys Gln       9
 721  ACT GAC CAC CAT CAT CAC GGA TGC TGT GAA CCA GTT TAT ATC CTG GAA     768
  10  Thr Asp His His His His Gly Cys Cys Glu Pro Val Tyr Ile Leu Glu      25
 769  CCT GGA GAT CCT CCT TTG TTA CAG CAA CCA CTA CAG ACA TCC AAA TCT     816
  26  Pro Gly Asp Pro Pro Leu Leu Gln Gln Pro Leu Gln Thr Ser Lys Ser      41
 817  GGT ATT CAA CAA ATA ATT GAG TGC TTT CGA TCA GGA ACT AAA CAA CTT     864
  42  Gly Ile Gln Gln Ile Ile Glu Cys Phe Arg Ser Gly Thr Lys Gln Leu      57
 865  AAG CAT ATT TTA TTA AAA GAT GTG GAC ACT ATT TTT GAA TGT AAG TTA     912
  58  Lys His Ile Leu Leu Lys Asp Val Asp Thr Ile Phe Glu Cys Lys Leu      73
 913  TGC CGC AGT CTC TTC AGA GGA TTA CCA AAT TTA ATT ACC CAT AAA AAA     960
  74  Cys Arg Ser Leu Phe Arg Gly Leu Pro Asn Leu Ile Thr His Lys Lys      89
 961  TTC TAC TGC CCA CCA AGT CTC CAG ATG GAT GAC AAC CTT CCT GAT GTA    1008
  90  Phe Tyr Cys Pro Pro Ser Leu Gln Met Asp Asp Asn Leu Pro Asp Val     105
1009  AAT GAT AAA CAA AGC CAA GCC ATA AAT GAT CTC CTA GAA GCC ATA TAT    1056
 106  Asn Asp Lys Gln Ser Gln Ala Ile Asn Asp Leu Leu Glu Ala Ile Tyr     121
1057  CCA AGT GTG GAC AAA CGA GAA TAT ATT ATT AAG CTA GAA CCC ATA GAA    1104
 122  Pro Ser Val Asp Lys Arg Glu Tyr Ile Ile Lys Leu Glu Pro Ile Glu     137
1105  ACT AAT CAA AAT GCA GTA TTT CAA TAT ATT TCG AGG ACT GAT AAT CCT    1152
 138  Thr Asn Gln Asn Ala Val Phe Gln Tyr Ile Ser Arg Thr Asp Asn Pro     153
1152  ATT GAA GTC ACA GAG TCA AGC AGT ACT CCT GAA CAA ACC GAA GTT CAG    1200
 154  Ile Glu Val Thr Glu Ser Ser Ser Thr Pro Glu Gln Thr Glu Val Gln     169
1201  ATA CAG GAA ACT AGC ACT GAA CAG TCA AAA ACA GTA CCG GTT ACA GAT    1248
 170  Ile Gln Glu Thr Ser Thr Glu Gln Ser Lys Thr Val Pro Val Thr Asp     185
1249  ACA GAG GTG GAA ACT GTA GAG CCC CCT CCT GTT GAG ATT GTT ACA GAT    1296
 186  Thr Glu Val Glu Thr Val Glu Pro Pro Pro Val Glu Ile Val Thr Asp     201
1297  GAA GTT GCA CCT ACA TCT GAT GAA CAA CCT CAG GAG TCG CAG GCT GAC    1244
 202  Glu Val Ala Pro Thr Ser Asp Glu Gln Pro Gln Glu Ser Gln Ala Asp     217
1345  TTG GAA ACT TCT GAC AAT TCT GAT TTT GGT CAC CAG TTG ATA TGT TGT    1392
 218  Leu Glu Thr Ser Asp Asn Ser Asp Phe Gly His Gln Leu Ile Cys Cys     233
1393  CTT TGT AGA AAA GAA TTC AAT TCT AGA CGA GGT GTT CGC CGT CAC ATT    1440
 234  Leu Cys Arg Lys Glu Phe Asn Ser Arg Arg Gly Val Arg Arg His Ile     249
1441  CGA AAA GTA CAC AAG AAA AAG ATG GAA GAA CTA AAA AAG TAC ATT GAA    1488
 250  Arg Lys Val His Lys Lys Lys Met Glu Glu Leu Lys Lys Tyr Ile Glu     265
1489  ACA CGA AAG AAT CCA AAC CAA TCC TCT AAA GGA CGC AGT AAG AAT GTT    1536
 266  Thr Arg Lys Asn Pro Asn Gln Ser Ser Lys Gly Arg Ser Lys Asn Val     281
1537  CTA GTT CCA TTA AGT AGG AGT TGT CCA GTA TGT TGT AAA TCA TTT GCT    1584
 282  Leu Val Pro Leu Ser Arg Ser Cys Pro Val Cys Cys Lys Ser Phe Ala     297
1585  ACA AAA GCG AAT GTA AGG AGG CAT TTT GAT GAA GTT CAT AGA GGA CTA    1632
 298  Thr Lys Ala Asn Val Arg Arg His Phe Asp Glu Val His Arg Gly Leu     313
1633  AGG AGG GAT TCA ATT ACT CCT GAT ATA GCA ACA AAG CCT CGG CAA CCT    1680
 314  Arg Arg Asp Ser Ile Thr Pro Asp Ile Ala Thr Lys Pro Gly Gln Pro     329
1681  TTG TTC CTG GAT TCA TAT TTC TCC TAA AAA ATC TTT TAA GAC TCG AAA    1728
 330  Leu Phe Leu Asp Ser Tyr Phe Ser ***                                 338
1729  ACA AAA GTC TTC TTC AAA GGC TGA ATA CAA TTT AAC TGC ATG CAA ATG    1776
1777  CCT CCT TTG CAA GAG GAA ATA TAG TTC ACA AAT AAT GCT TAA AAG ACA    1824
1825  TAT GCA AAT TGT CCA CAA GAT AAC TCT TTC TGG AAC AAA CTC TAA AAG    1872
1873  AGA AAA AGG CCC TAA TAA TAC TGC CAA CAG TTC AGA AAT AAA AGT TAA    1920
1921  AGT TGA ACC AGC AGA TTC TGT AGA ATC TTC ACC CCC TTC CAT TAC CCA    1968
1969  TTC TCC ACA GAA TGA ATT AAA GGG AAC AAA TCA TTC AAA TGA AAA AAA    2016
2017  GAA CAC ACC GGC AGC ACA GAA AAA TAA AGT TAA ACA AGA CTC TGA AAG    2064
2065  CCC TAA ATC AAC TAG TCC GTC GGC TGC AGG TGG CCA GCA AAA ATA AAA    2112
2113  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA                                    2136
7.PP1628
A:核苷酸序列:(SEQ ID NO:19)长度:1913bp
   1  GCTGGGAGCA CACACGCTGG GACCTATGTG TTTGTGTGGT CGTTCCAAAC
  51  TGCCCCAGGG CTTTGGGGGC GGCACTTGGG GTTTCTGGGA ATGACATCAT
 101  CTCTGTTCCC CATCCCCAGT AGTTTACATT CCTGACTTCT GAATACAGCA
 151  CAGCTGAGCC CCCTGCAGCT CCGATCTCCA GCTATTCCTA GGCAAAGAGC
 201  CTCATGGCTA AGGCAGCCTC AAAGCCAGCC CCTCCTCCCA CCTATTCTGA
 251  GTAGCTGCAG AGGCCTTGGG TCCAGGCTCT AGGTTCATCC CTCAGTTGGG
 301  GGGAACGTAG GACCCAGCTG GAGCCTCTTG AGGGAGATGA GAGGCCTCTT
 351  TGTGAGGAGG ACATTAGCTG TGTGGCCTCT CTCTCTTTGG CCCTGTTTCC
 401  TTTTTTGCAA AACAAGGACA TTTTCTGCAG CCCCTTCCTC TCAGTGAGCT
 451  ATGATTGGAG GGCTTAGGTC TGGAGGATTC AAGAGTGGGA AGAGGAATTT
 501  AAGGGGGTCC CCTAGTCTAG TCTCTGCCCC TGGATAGTGT CCAGCCTTTA
 551  TATTTCTGAA GAGGTGGATC CCAGAGTGGC TCTGATGTCC ACATTAGAAA
 601  AGCTTACTTG TAATGATCAT GTCAGCCTTC AGAAGAGAAT CCCCACCAAC
 651  TTCTGTGCCT CCTCAGATGG GGATTTATCT GGATCTCTGT GGTTCCTTCT
 701  CAGCCGAAAC AGGTCCAGTA TCCCAGTCAT TTCTTCAAAT GCTGATAGGG
 751  GTATGTTGGA ATCCGAAGCC ACTTCCCCGC CTTCAAGCCC CAGATGGGCT
 801  GCTCTCCTGT AACTTTCTAG GAGAAGAGAC ATTTTCTTCT TTCCCTTTCC
 851  TGGTCCATCC CTGCACCCTG GTCCTCTCCC AGCCTCTCCC CCACATTGTC
 901  CCTGACTCTA GGGGCACATC CAGTCTCCAT CGTGCTGCAG CAGCTGGACT
 951  GAGGGCAGAG CCTGTAGGTG CAGAGGCCCT GGCTCCCGAG GTCCAGCCAC
1001  TCTCCCTGGG GCCTCTGGGG TGAGAGCAGC TTCCGATAGG ACCTGCCCAG
1051  ATTTCTGCAT GTGCACTTTT GTTTACTGAA AGAGAGAAAG GGGGGGGTCA
1101  CAGCAACATG CCCTGGCCTT TCTGCCCTGT TCCCCAACCC CACTGAGGCC
1151  TGCTGCACAG GTCAATGCCT TCGTTATCGT TATTGTACTG TCACTTTGTT
1201  CTTGAGGTAG TAGTCAAGGA TCAGGAGGGG CAGATGTCTT CTCTGGGCTG
1251  CGTGGGGCCG GAGCAGAGGT GAGCAGCAAT GCACTGGTTC GGGAGCCCCC
1301  ATCAGCCTCC TTGTGCAAAC TGGGCCCCCA TGCCACAGTC TGGCTTTCCC
1351  TCCATCTGCC CCAGGACAAG AGCAAGAAGG ACATCAGTTG CCCAGTCATG
1401  TGATCCCCTG CCATCTTGCC TTAGGAACAG CCTTCCCCCA CCAGCAGCCA
1451  TGGCTGGCTG GGGCGTTAGC CAAGCCACCT ACTGCCAGGA ATTGGAGCCT
1501  CAGTTCCCTC CTGTGTCAAG TAGCTAACTG CAGCAGCTGG ACTGAGGGCA
1551  GAGTCTGTGG GTGCAGAGAC CCTGCATGTA GGTCACAGGT TGAGGCCCAG
1601  CCACTCTCCC TGGGGCCTGG TGGGTAGGCA AGTAGCTCTG GGGCCACCTC
1651  AAGTGACCAA ATGCTATTAA TTTCCATCCT TTAGCAGGCT GGGCCCTAGG
1701  CAGGAAGCTG GCTTCTGGGA GAGGAGTGAG AACGTGCAGG GCCTGCCTAG
1751  CTTGCGTGCT TGAGGAAGGT GGCATTCCGT GCTTGCCTCC TTGAGGAGGG
1801  TGGCATTCTG TGTCTTCTGC TTATGAAGCG CCTTTCTTAA AGTTTGGCAA
1851  TAAATCCATT TTTATGGAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA
1901  AAAAAAAAAA AAA
B:氨基酸序列:(SEQ ID NO:20)长度:136个氨基酸
   1  MIMSAFRRES PPTSVPPQMG IYLDLCGSFS AETGPVSQSF LQMLIGVCWN
  51  PKPLPRLQAP DGLLSCNFLG EETFSSFPFL VHPCTLVLSQ PLPHIVPDSR
 101  GTSSLHRAAA AGLRAEPVGA EALAPEVQPL SLGPLG
C:核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:21)
克隆号和蛋白质名称:PP1628
起始编码子:  613 ATG    终止编码子:1023 TGA
蛋白质分子量:14421.90
   1  GCT GGG ACC ACA CAC GCT GGG ACC TAT GTG TTT GTG TGG TCG TTC CAA     48
  49  ACT GCC CCA GGG CTT TGG GGG CGG CAC TTG GGG TTT CTG GGA ATG ACA     96
  97  TCA TCT CTG TTC CCC ATC CCC AGT AGT TTA CAT TCC TGA CTT CTG AAT    144
 145  ACA GCA CAG CTG AGC CCC CTG CAG CTC CCA TCT CCA GCT ATT CCT AGG    192
 193  CAA AGA GCC TCA TGG CTA AGG CAG CCT CAA AGC CAG CCC CTC CTC CCA    240
 241  CCT ATT CTG AGT AGC TGC AGA GGC CTT GGG TCC AGG CTC TAG GTT CAT    288
 289  CCC TCA GTT GGG GGG AAC GTA GGA CCC AGC TGG AGC CTC TTG AGG GAG    336
 337  ATG AGA GGC CTC TTT GTG AGG AGG ACA TTA GCT GTG TGG CCT CTC TCT    384
 385  CTT TGG CCC TGT TTC CTT TTT TGC AAA ACA AGG ACA TTT TCT GCA GCC    432
 433  CCT TCC TCT CAG TGA GCT ATG ATT GGA GGG CTT AGG TCT GGA GGA TTC    480
 481  AAG AGT GGG AAG AGG AAT TTA AGG GGG TCC CCT AGT CTA GTC TCT GCC    528
 529  CCT GGA TAG TGT CCA GCC TTT ATA TTT CTG AAG AGG TGG ATC CCA GAG    576
 577  TGG CTC TGA TGT CCA CAT TAG AAA AGC TTA CTT GTA ATG ATC ATG TCA    624
   1                                                  Met Ile Met Ser      4
 625  GCC TTC AGA AGA GAA TCC CCA CCA ACT TCT GTG CCT CCT CAG ATG GGG    672
   5  Ala Phe Arg Arg Glu Ser Pro Pro Thr Ser Val Pro Pro Gln Met Gly     20
 673  ATT TAT CTG GAT CTC TGT GGT TCC TTC TCA GCC GAA ACA GGT CCA GTA    720
  21  Ile Tyr Leu Asp Leu Cys Gly Ser Phe Ser Ala Glu Thr Gly Pro Val     36
 721  TCC CAG TCA TTT CTT CAA ATG CTG ATA GGG GTA TGT TGG AAT CCG AAG    768
  37  Ser Gln Ser Phe Leu Gln Met Leu Ile Gly Val Cys Trp Asn Pro Lys      52
 769  CCA CTT CCC CGC CTT CAA GCC CCA GAT GGG CTG CTC TCC TGT AAC TTT     816
  53  Pro Leu Pro Arg Leu Gln Ala Pro Asp Gly Leu Leu Ser Cys Asn Phe      68
 817  CTA GGA GAA GAG ACA TTT TCT TCT TTC CCT TTC CTG GTC CAT CCC TGC     864
  69  Leu Gly Glu Glu Thr Phe Ser Ser Phe Pro Phe Leu Val His Pro Cys      84
 865  ACC CTG GTC CTC TCC CAG CCT CTC CCC CAC ATT GTC CCT GAC TCT AGG     912
  85  Thr Leu Val Leu Ser Gln Pro Leu Pro His Ile Val Pro Asp Ser Arg     100
 913  GGC ACA TCC AGT CTC CAT CGT GCT GCA GCA GCT GGA CTG AGG GCA GAG     960
 101  Gly Thr Ser Ser Leu His Arg Ala Ala Ala Ala Gly Leu Arg Ala Glu     116
 961  CCT GTA GGT GCA GAG GCC CTG GCT CCC GAG GTC CAG CCA CTC TCC CTG    1008
 117  Pro Val Gly Ala Glu Ala Leu Ala Pro Glu Val Gln Pro Leu Ser Leu     132
1009  GGG CCT CTG GGG TGA GAG CAG CTT CCG ATA GGA CCT GCC CAG ATT TCT    1056
 133  Gly Pro Leu Gly ***                                                 137
1057  GCA TGT GCA CTT TTG TTT ACT GAA AGA GAG AAA GGG GGG GGT CAC AGC    1104
1105  AAC ATG CCC TGG CCT TTC TGC CCT GTT CCC CAA CCC CAC TGA GGC CTG    1152
1153  CTG CAC AGG TCA ATG CCT TCG TTA TCG TTA TTG TAC TGT CAC TTT GTT    1200
1201  CTT GAG GTA GTA GTC AAG GAT CAG GAG GGG CAG ATG TCT TCT CTG GGC    1248
1249  TGC GTG GGG CCG GAG CAG AGG TGA GCA GCA ATG CAC TGG TTC GGG AGC    1296
1297  CCC CAT CAG CCT CCT TGT GCA AAC TGG GCC CCC ATG CCA CAG TCT GGC    1344
1345  TTT CCC TCC ATC TGC CCC AGG ACA AGA GCA AGA AGG ACA TCA GTT GCC    1392
1393  CAG TCA TGT GAT CCC CTG CCA TCT TGC CTT AGG AAC AGC CTT CCC CCA    1440
1441  CCA GCA GCC ATG GCT GGC TGG GGC GTT AGC CAA GCC ACC TAC TGC CAG    1488
1489  GAA TTG GAG CCT CAG TTC CCT CCT GTG TCA AGT AGC TAA CTG CAG CAG    1536
1537  CTG GAC TGA GGG CAG AGT CTG TGG GTG CAG AGA CCC TGC ATG TAG GTC    1584
1585  ACA GGT TGA GGC CCA GCC ACT CTC CCT GGG GCC TGG TGG GTA GGC AAG    1632
1633  TAG CTC TGG GGC CAC CTC AAG TGA CCA AAT GCT ATT AAT TTC CAT CCT    1680
1681  TTA GCA GGC TGG GCC CTA GGC AGG AAG CTG GCT TCT GGG AGA GGA GTG    1728
1729  AGA ACG TGC AGG GCC TGC CTA GCT TGC GTG CTT GAG GAA GGT GGC ATT    1776
1777  CCG TGC TTG CCT CCT TGA GGA GGG TGG CAT TCT GTG TCT TCT GCT TAT    1824
1825  GAA GCG CCT TTC TTA AAG TTT GGC AAT AAA TCC ATT TTT ATG GAA AAA    1872
1873  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA             1913
D:Blastp结果
Query=PP1628[基因=PP1628]    (136个氨基酸)
>SP_IN:Q24146 Q24146 drosophila melanogaster(fruit fly).hlh106.
             11/1998
长度=1113
分值=30.5bits(67),预计值=6.6
相同性=34/129(26%),相似性=52/129(39%),缺口=12/129(9%)
Query:7   RRESPPTSV-PPQMGIYLDLCGSFSAETGPVSQSF--LQMLIGVCWNPKP----LPRLQA 59
           +R  P T+V PP +G    +  S S  T PV  +   + ++  V   P P    LP+
Sbjct:145 QRMPPNTAVYPPSLGSSF-VYQSMSPPTSPVESANQNVNVMQPVAATPAPASAPLPQQSY 203
Query:60  PDGLLSCNFLGEETFSSFPFLVHPCTLVLSQPLPHIVPDSRGTSSLHRAAAAGLRAEPVG 119
           P   ++ N     T     +L+   T+    P P + P    T S     A+ +R  P+
Sbjct:204 PQPFITYNSKAGMTSDEAMYLLLQPTVASPTPSPPVAPPPTSTGS----RASKVRVAPLA 259
Query:120 AEALAPEVQ 128
               A EVQ
Sbjct:260 PSPAAMEVQ 268
8.PP1650
A:核苷酸序列:(SEQ ID NO:22)长度:1494bp
   1  TCTTTGTTCT GTCCCCGGTG TGTGGGTCTG TGACAGGGTC CAACAGGGCC
  51  TGGTCCGTGT CCGGTCCCCC AAATCTGTCG TCCCTGCCCC CAGGCATTGG
 101  CATCAACAAA AGTCAGAATT CCCGGGAACT TGAACAGAGG CTGCTAAATT
 151  CCCAGTAATT GCTCCTTTGG CCTTCTAGGG ACTGACTTCA AAGAAGGAAG
 201  GAAAGAATCA GGCAGTGCTT CCTCATTCTC TTTTAAAACC CGCTTCCCGC
 251  TGAGTCTGCA CCCAGGAGAC CAGAGAGCAC CTTGCCCTTC CATGGAAACT
 301  CAGGCTGATC TCGTATCTCA GGAACCTCAG GCCCTGCTTG ACAGTGCTCT
 351  TCCTTCAAAA GTTCCTGCCT TTTCCGACAA GGACAGCCTG GGGGATGAGA
 401  TGTTGGCGGC TGCGCTCCTA AAGGCCAAGT CCCAGGAGCT GGTAACCTTT
 451  GAGGATGTAG CTGTGTACTT CATCCGGAAG GAGTGGAAGC GTTTGGAACC
 501  TGCTCAGAGG GACCTCTATA GAGATGTGAT GCTGGAGAAT TACGGGAATG
 551  TGTTCTCACT GGACTGGATA CACGTCTGTT TAACTACGCA AAAGGTAATG
 601  CTGGCATGGC TTACTGGGAC CCTAAGTGTG GCGAAGGGAC TCTGCTCCAG
 651  TGAACTGGCG AGTGTGGAAC CTCCTGACAC CTTCTGAGGA CCTCCTGCCT
 701  GCCATGTTGC TGTGGAGCTC GCACTCCTCA GGCATCCCCT GATGTTGAGT
 751  GATACAAACT CTATCACCGG AATCGATGCT GCTGCAATGA CAAGACTTCT
 801  TTCTGGTTTT CAGATTCTAA AGTTTAAAAC AACGACAACA ACAGGAGCGC
 851  TTGAAAGTTA CGGTGCTTCT CCCTCTCCAG TGTGGACTCG CTGATGTTTG
 901  GAAAGATTGG ACTTGCTACA GAAGGTCTTT CCACAGTGAT GACACCAGTA
 951  GGGCTTTTCC CCGGTGTGGA TTCTGTGGTG TTTATTGAAG TTGGAGCTGT
1001  GGTTGAAGGC TTTCCCACAC TCCTTACACT TATATGGCTT CTCTCCGGTG
1051  TGGAGTCTCT GGTGGGAGCT GAGGCCCGCA TGCTGACTGA AGCTCTTCCC
1101  ACATTCGTTA CACTGATAAG GCTTCTCCCC AGTGTGGATC CGATAGTGAC
1151  GAATGAGGCT GCCTTTCCCG CTGAAAGCCT TGCCACAATC TTTGCACTGA
1201  TATGGCGCCT CTTCTGTGTG CATTCTCTGA TGTTTAAGAA GGTCTGAGCT
1251  CTGCCCAAAA GCTTTTCCAC ACTTACAGTC ATAGGGCCGG TCCACCAAGT
1301  GTGTTCTGTA GTGGAGGGTG AGGTTTGAGC TGTGGCTGAA AGCTTTCCCA
1351  CACTTGGTGC ACACGTAAGG TTTCTCCCCA GTGTGTGTTC TCCTGTGTTT
1401  GGTGAGATTT GAGCTATTAC TAAAGGCTTT GCCACATTCA GCCCAAAAAA
1451  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAASS AAAAAAAAAA AAAA
B:氨基酸序列:(SEQ ID NO:23)长度:131个氨基酸
   1  METQADLVSQ EPQALLDSAL PSKVPAFSDK DSLGDEMLAA ALLKAKSQEL
  51  VTFEDVAVYF IRKEWKRLEP AQRDLYRDVM LENYGNVFSL DWIHVCLTTQ
 101  KVMLAWLTGT LSVAKGLCSS ELASVEPPDT F
C:核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:24)
克隆号和蛋白质名称:PP1650
起始编码子:  292 ATG    终止编码子:687 TGA
蛋白质分子量:14625.94
   1  TCT TTG TTC TGT CCC CGG TGT GTG GGT CTG TGA CAG GGT CCA ACA GGG      48
  49  CCT GGT CCG TGT CCG GTC CCC CAA ATC TGT CGT CCC TGC CCC CAG GCA      96
  97  TTG GCA TCA ACA AAA GTC AGA ATT CCC GGG AAC TTG AAC AGA GGC TGC     144
 145  TAA ATT CCC AGT AAT TGC TCC TTT GGC CTT CTA GGG ACT GAC TTC AAA     192
 193  GAA GGA AGG AAA GAA TCA GGC AGT GCT TCC TCA TTC TCT TTT AAA ACC     240
 241  CGC TTC CCG CTG AGT CTG CAC CCA GGA GAC CAG AGA GCA CCT TGC CCT     288
 289  TCC ATG GAA ACT CAG GCT GAT CTC GTA TCT CAG GAA CCT CAG GCC CTG     336
   1      Met Glu Thr Gln Ala Asp Leu Val Ser Gln Glu Pro Gln Ala Leu      15
 337  CTT GAC AGT GCT CTT CCT TCA AAA GTT CCT GCC TTT TCC GAC AAG GAC     384
  16  Leu Asp Ser Ala Leu Pro Ser Lys Val Pro Ala Phe Ser Asp Lys Asp      31
 385  AGC CTG GGG GAT GAG ATG TTG GCG GCT GCG CTC CTA AAG GCC AAG TCC     432
  32  Ser Leu Gly Asp Glu Met Leu Ala Ala Ala Leu Leu Lys Ala Lys Ser      47
 433  CAG GAG CTG GTA ACC TTT GAG GAT GTA GCT GTG TAC TTC ATC CGG AAG     480
  48  Gln Glu Leu Val Thr Phe Glu Asp Val Ala Val Tyr Phe Ile Arg Lys      63
 481  GAG TGG AAG CGT TTG GAA CCT GCT CAG AGG GAC CTC TAT AGA GAT GTG     528
  64  Glu Trp Lys Arg Leu Glu Pro Ala Gln Arg Asp Leu Tyr Arg Asp Val      79
 529  ATG CTG GAG AAT TAC GGG AAT GTG TTC TCA CTG GAC TGG ATA CAC GTC     576
  80  Met Leu Glu Asn Tyr Gly Asn Val Phe Ser Leu Asp Trp Ile His Val      95
 577  TGT TTA ACT ACG CAA AAG GTA ATG CTG GCA TGG CTT ACT GGG ACC CTA     624
  96  Cys Leu Thr Thr Gln Lys Val Met Leu Ala Trp Leu Thr Gly Thr Leu     111
 625  AGT GTG GCG AAG GGA CTC TGC TCC AGT GAA CTG GCG AGT GTG GAA CCT     672
 112  Ser Val Ala Lys Gly Leu Cys Ser Ser Glu Leu Ala Ser Val Glu Pro     127
 673  CCT GAC ACC TTC TGA GGA CCT CCT GCC TGC CAT GTT GCT GTG GAG CTC     720
 128  Pro Asp Thr Phe ***                                                 132
 721  GCA CTC CTC AGG CAT CCC CTG ATG TTG AGT GAT ACA AAC TCT ATC ACC     768
 769  GGA ATC GAT GCT GCT GCA ATG ACA AGA CTT CTT TCT GGT TTT CAG ATT     816
 817  CTA AAG TTT AAA ACA ACG ACA ACA ACA GGA GCG CTT GAA AGT TAC GGT     864
 865  GCT TCT CCC TCT CCA GTG TGG ACT CGC TGA TGT TTG GAA AGA TTG GAC     912
 913  TTG CTA CAG AAG GTC TTT CCA CAG TGA TGA CAC CAG TAG GGC TTT TCC     960
 961  CCG GTG TGG ATT CTG TGG TGT TTA TTG AAG TTG GAG CTG TGG TTG AAG    1008
1009  GCT TTC CCA CAC TCC TTA CAC TTA TAT GGC TTC TCT CCG GTG TGG AGT    1056
1057  CTC TGG TGG GAG CTG AGG CCC GCA TGC TGA CTG AAG CTC TTC CCA CAT    1104
1105  TCG TTA CAC TGA TAA GGC TTC TCC CCA GTG TGG ATC CGA TAG TGA CGA    1152
1153  ATG AGG CTG CCT TTC CCG CTG AAA GCC TTG CCA CAA TCT TTG CAC TGA    1200
1201  TAT GGC GCC TCT TCT GTG TGC ATT CTC TGA TGT TTA AGA AGG TCT GAG    1248
1249  CTC TGC CCA AAA GCT TTT CCA CAC TTA CAG TCA TAG GGC CGG TCC ACC    1296
1297  AAG TGT GTT CTG TAG TGG AGG GTG AGG TTT GAG CTG TGG CTG AAA GCT    1344
1345  TTC CCA CAC TTG GTG CAC ACG TAA GGT TTC TCC CCA GTG TGT GTT CTC    1392
1393  CTG TGT TTG GTG AGA TTT GAG CTA TTA CTA AAG GCT TTG CCA CAT TCA    1440
1441  GCC CAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1488
1489  AAA AAA                                                            1494
D:Blastp结果
Query=PP1650[基因=PP1650]    (131个氨基酸)
>SP_HUM:O14709 O14709 homo sapiens(human).zinc finger protein.
             5/1999
长度=1029
分值=76.5bits(185),预计值=8e-14
相同性=45/90(50%),相似性=60/90(66%),缺口=6/90(6%)
Query:6   DLVS---QEPQALLDSALPSKVPAFSDKDSLGDEMLAAALLKAKSQELVTFEDVAVYFIR 62
           DLV+   Q+PQ   DS  P +  A S +++  ++++A  LL A+ QELV FE+V+V F
Sbjct:172 DLVAFNLQDPQH--DSPAP-EASALSQEENPRNQLMALMLLTAQPQELVMFEEVSVCFTS 228
Query:63  KEWKRLEPAQRDLYRDVMLENYGNVFSLDW 92
           +EW  L P QR LY DVMLENYGNV SL+W
Sbjct:229 EEWACLGPIQRALYWDVMLENYGNVTSLEW 258
9.PP2672
A:核苷酸序列:(SEQ ID NO:25)长度:2455bp
   1  GGCGTCTGGA CACCCTTCAT CTTTTAGCCG TTGCCCTGTT CTTGGTGAAC
  51  TGCTTGTTAG GACCAAAAGT GGCCCACCCC TTTCTCTGGG ACAGTGCAGA
 101  GCACCGGGGC CAGAGGCTCA AAGCACCTCC AAGCTGAGAT CAGAGACTTT
 151  GGATATCGTT GATCCAGAGG CTTCCAAACT TTTCCTGGTG ATTGAATTCT
 201  TACCATGAAA TCCAGTGAGG AGCTCCAATG CCTCAAGCAG ATGGAAGAGG
 251  AACTGCTCTT CTTGAAGGCA GGGCAGGGCT CTCAGAGGGC AAGACTCACC
 301  CCACCCCTGC CACGGGCTCT CCAGGGTAAC TTTGGAGCCC CAGCACTCTG
 351  TGGAATATGG TTCGCAGAAC ACTTGCATCC TGCTGTTGGG ATGCCCCCAA
 401  ACTATAATAG CAGCATGCTC AGTCTTTCAC CAGAAAGAAC CATCTTATCT
 451  GGAGGATGGT CAGGAAAACA AACTCAACAG CCAGTGCCTC CCCTCAGAAC
 501  TCTGCTCCTG AGGTCTCCTT TCAGTCTGCA TAAGTCCTCC CAACCTGGGA
 551  GCCCCAAAGC TTCTCAGCGG ATCCATCCCC TCTTCCATTC TATCCCAAGG
 601  TCTCAGCTGC ATTCTGTTCT GCTTGGTCTT CCTCTCCTCT TCATACAGAC
 651  TAGACCTTCA CCCCCTGCCC AGTATGGCGC GCAAATGCCA TTGAGATACA
 701  TTTGTTTTGG TCCCAATATC TTTTGGGGCT CCAAAAAGCC CCAGAAAGAG
 751  TAATGCCTTC AGCCATGGCC CATGTGATGA CTTTTCCCAG AGACAGCCCC
 801  ATGGGTCAGT GATCGCCGGT GGGAGGTCTC CCCAGCCTCC CTTCAAGCCT
 851  TCAAGTCTGT GTAGAGGCGC CTTCTCTTCT CTGGGCATTC CCCGCTTTGT
 901  TGCAGAGAAA TTATTTTCTA CTCAGCGGCT TTCAGGTAGA GAGAGAAAGT
 951  GCATGCGGTA TGAAGGATGT GAAGATGGAG GGCTTGACGT CGTGGGTCAT
1001  GTTTTGTGGT TAATTCCCCC ACATAACAAA ACAGTGAGCA AATGTTTATA
1051  AACAGGAACT CAGTGTTTCA GTGATGAAAG CCTCTGGCCT CGCCACACTG
1101  ATTGCTGGTG TGCGCGCACA CACACACTCA CACACCCTGT TTTTCTTACA
1151  CACACACAGC TTCATGGAGC AGAGAGCTGG AAAGGGTGTC CAGAATGGTG
1201  GATCAGGCTT ATTATTATTA CTTTTTTTAT CTCCACCAAA CTCTCTCCTT
1251  AAGCCCCAGC AGCCAACCCC CCCCCCCCCA CCAGACAGCA TGTCGAAGGA
1301  GTAAGCTGCA GGTCAGCCTA TATTTTAGGC AGAAAATTAG GCAACCTTGG
1351  GAGAGACCGG TTTCCAGCAG ACACGCACGG ACGCGATGGT GAGGTTGGGC
1401  TGAGACGGTC CTTCCTGGAT GCAGTCACCC TCCCCATCCC GAGTTTTACT
1451  CCCTGGGGGG ATTGTGGTGG GTGCCTGGCC TCCTCTCCCA CCAGCGCACT
1501  GCCCCAAGCT TGCCTAGGTA GTATCAGCAC TGGGGTGAGG GATGCAATGC
1551  GGGTTTATAG TTGGCTGTGG GGACTTCTGA TTTCTCCACC CCATAGATGA
1601  TAAACGACCG CGGGGCTTCC TCTCCCAGGT CTTTCCTCAC TCTCCTTCGT
1651  CTTTCCCTCT TTCTCCATGG GAAAGGTAGA ATGAGACTTG CCACCAGGGA
1701  CATCCAGGCA CATTCCTCTT CCCAATCAGC CTCTACCCAT TCTCTTTCTG
1751  TCTCGTGTGT ATCAGTGGCA TTTTCTTGTG TAGCTTCCCA GATTTGCAAA
1801  CCCGCTCCAC ATCCTGGACG CAGACCCCCT TCGCTGGCTC TATGAAGGCT
1851  TCACGTTCCT GGGGCATTCG AGACTTGACT TTCCAGAGCA ACTTTGGATC
1901  CACCCTGTTA CCCTTTTTTT TGTTTTGTTT TGTTTTGAGA GGGAGTCTCG
1951  CTGTGTTGTC CAGGCTGGAG TGCAGTGGTG TGATCTCGGC TTACTGCAAC
2001  CTCCGCCTAC TGGGTTCAAG TGATTCTCTT GCCTCAATCT CCCCAGTACC
2051  TGGGATTACA GGTAGACACC ATCACGCCTG GCTAATTTTT GTATTTTTAG
2101  TAAAGACAGG GTTTCATCAT GTTGGCCTGG CTGGTCTCAA ACTCCTGACC
2151  TCAGCCGATC CGCCCGCCTC AGCCTCCCAA AGTTCTGGGA TTACAAGTGT
2201  GAACCACCGT GCCCAACCTC CCCTCGTTTT TGACCTTTGT CCCCAAATGT
2251  CTTTCATCCA GTTACTAGGA CTTGTAGCCT TTTTGCAAAT AGGTATCTGT
2301  AAGCATAGAA GAATAGGGTG ATTTGTGAAG TGACCCTTAG TGGCATCTGT
2351  GGTGGTCCTA CTAATCAGAT TTGCAGAAGA AACATGGAAA CAAGGAAACT
2401  CCTCTCTTAT ATTAAAATAA ATAAGGTTTT TAATTTCAAA AAAAAAAAAA
2451  AAAAA
B:氨基酸序列:(SEQ ID NO:26)长度:182个氨基酸
   1  MKSSEELQCL KQMEEELLFL KAGQGSQRAR LTPPLPRALQ GNFGAPALCG
  51  IWFAEHLHPA VGMPPNYNSS MLSLSPERTI LSGGWSGKQT QQPVPPLRTL
 101  LLRSPFSLHK SSQPGSPKAS QRIHPLFHSI PRSQLHSVLL GLPLLFIQTR
 151  PSPPAQYGAQ MPLRYICFGP NIFWGSKKPQ KE
C:核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO:27)
克隆号和蛋白名称:PP2672
起始编码子:205 ATG  终止编码子:753 TAA
蛋白分子量:20179.43
   1  GGC GTC TGG ACA CCC TTC ATC TTT TAG CCG TTG CCC TGT TCT TGG TGA     48
  49  ACT GCT TGT TAG GAC CAA AAG TGG CCC ACC CCT TTC TCT GGG ACA GTG     96
  97  CAG AGC ACC GGG GCC AGA GGC TCA AAG CAC CTC CAA GCT GAG ATC AGA    144
 145  GAC TTT GGA TAT CGT TGA TCC AGA GGC TTC CAA ACT TTT CCT GGT GAT    192
 193  TGA ATT CTT ACC ATG AAA TCC AGT GAG GAG CTC CAA TGC CTC AAG CAG    240
   1                  Met Lys Ser Ser Glu Glu Leu Gln Cys Leu Lys Gln     12
 241  ATG GAA GAG GAA CTG CTC TTC TTG AAG GCA GGG CAG GGC TCT CAG AGG    288
  13  Met Glu Glu Glu Leu Leu Phe Leu Lys Ala Gly Gln Gly Ser Gln Arg     28
 289  GCA AGA CTC ACC CCA CCC CTG CCA CGG GCT CTC CAG GGT AAC TTT GGA    336
  29  Ala Arg Leu Thr Pro Pro Leu Pro Arg Ala Leu Gln Gly Asn Phe Gly     44
 337  GCC CCA GCA CTC TGT GGA ATA TGG TTC GCA GAA CAC TTG CAT CCT GCT    384
  45  Ala Pro Ala Leu Cys Gly Ile Trp Phe Ala Glu His Leu His Pro Ala     60
 385  GTT GGG ATG CCC CCA AAC TAT AAT AGC AGC ATG CTC AGT CTT TCA CCA    432
  61  Val Gly Met Pro Pro Asn Tyr Asn Ser Ser Met Leu Ser Leu Ser Pro     76
 433  GAA AGA ACC ATC TTA TCT GGA GGA TGG TCA GGA AAA CAA ACT CAA CAG    480
  77  Glu Arg Thr Ile Leu Ser Gly Gly Trp Ser Gly Lys Gln Thr Gln Gln     92
 481  CCA GTG CCT CCC CTC AGA ACT CTG CTC CTG AGG TCT CCT TTC AGT CTG     528
  93  Pro Val Pro Pro Leu Arg Thr Leu Leu Leu Arg Ser Pro Phe Ser Leu     108
 529  CAT AAG TCC TCC CAA CCT GGG AGC CCC AAA GCT TCT CAG CGG ATC CAT     576
 109  His Lys Ser Ser Gln Pro Gly Ser Pro Lys Ala Ser Gln Arg Ile His     124
 577  CCC CTC TTC CAT TCT ATC CCA AGG TCT CAG CTG CAT TCT GTT CTG CTT     624
 125  Pro Leu Phe His Ser Ile Pro Arg Ser Gln Leu His Ser Val Leu Leu     140
 625  GGT CTT CCT CTC CTC TTC ATA CAG ACT AGA CCT TCA CCC CCT GCC CAG     672
 141  Gly Leu Pro Leu Leu Phe Ile Gln Thr Arg Pro Ser Pro Pro Ala Gln     156
 673  TAT GGC GCG CAA ATG CCA TTG AGA TAC ATT TGT TTT GGT CCC AAT ATC     720
 157  Tyr Gly Ala Gln Met Pro Leu Arg Tyr Ile Cys Phe Gly Pro Asn Ile     172
 721  TTT TGG GGC TCC AAA AAG CCC CAG AAA GAG TAA TGC CTT CAG CCA TGG     768
 173  Phe Trp Gly Ser Lys Lys Pro Gln Lys Glu***                          183
 769  CCC ATG TGA TGA CTT TTC CCA GAG ACA GCC CCA TGG GTC AGT GAT CGC     816
 817  CGG TGG GAG GTC TCC CCA GCC TCC CTT CAA GCC TTC AAG TCT GTG TAG     864
 865  AGG CGC CTT CTC TTC TCT GGG CAT TCC CCG CTT TGT TGC AGA GAA ATT     912
 913  ATT TTC TAC TCA GCG GCT TTC AGG TAG AGA GAG AAA GTG CAT GCG GTA     960
 961  TGA AGG ATG TGA AGA TGG AGG GCT TGA CGT CGT GGG TCA TGT TTT GTG    1008
1009  GTT AAT TCC CCC ACA TAA CAA AAC AGT GAG CAA ATG TTT ATA AAC AGG    1056
1057  AAC TCA GTG TTT CAG TGA TGA AAG CCT CTG GCC TCG CCA CAC TGA TTG    1104
1105  CTG GTG TGC GCG CAC ACA CAC ACT CAC ACA CCC TGT TTT TCT TAC ACA    1152
1153  CAC ACA GCT TCA TGG AGC AGA GAG CTG GAA AGG GTG TCC AGA ATG GTG    1200
1201  GAT CAG GCT TAT TAT TAT TAC TTT TTT TAT CTC CAC CAA ACT CTC TCC    1248
1249  TTA AGC CCC AGC AGC CAA CCC CCC CCC CCC CAC CAG ACA GCA TGT CGA    1296
1297  AGG AGT AAG CTG CAG GTC AGC CTA TAT TTT AGG CAG AAA ATT AGG CAA    1344
1345  CCT TGG GAG AGA CCG GTT TCC AGC AGA CAC GCA CGG ACG CGA TGG TGA    1392
1393  GGT TGG GCT GAG ACG GTC CTT CCT GGA TGC AGT CAC CCT CCC CAT CCC    1440
1441  GAG TTT TAC TCC CTG GGG GGA TTG TGG TGG GTG CCT GGC CTC CTC TCC    1488
1489  CAC CAG CGC ACT GCC CCA AGC TTG CCT AGG TAG TAT CAG CAC TGG GGT    1536
1537  GAG GGA TGC AAT GCG GGT TTA TAG TTG GCT GTG GGG ACT TCT GAT TTC    1584
1585  TCC ACC CCA TAG ATG ATA AAC GAC CGC GGG GCT TCC TCT CCC AGG TCT    1632
1633  TTC CTC ACT CTC CTT CGT CTT TCC CTC TTT CTC CAT GGG AAA GGT AGA    1680
1681  ATG AGA CTT GCC ACC AGG GAC ATC CAG GCA CAT TCC TCT TCC CAA TCA    1728
1729  GCC TCT ACC CAT TCT CTT TCT GTC TCG TGT GTA TCA GTG GCA TTT TCT    1776
1777  TGT GTA GCT TCC CAG ATT TGC AAA CCC GCT CCA CAT CCT GGA CGC AGA    1824
1825  CCC CCT TCG CTG GCT CTA TGA AGG CTT CAC GTT CCT GGG GCA TTC GAG    1872
1873  ACT TGA CTT TCC AGA GCA ACT TTG GAT CCA CCC TGT TAC CCT TTT TTT    1920
1921  TGT TTT GTT TTG TTT TGA GAG GGA GTC TCG CTG TGT TGT CCA GGC TGG    1968
1969  AGT GCA GTG GTG TGA TCT CGG CTT ACT GCA ACC TCC GCC TAC TGG GTT    2016
2017  CAA GTG ATT CTC TTG CCT CAA TCT CCC CAG TAC CTG GGA TTA CAG GTA    2064
2065  GAC ACC ATC ACG CCT GGC TAA TTT TTG TAT TTT TAG TAA AGA CAG GGT    2112
2113  TTC ATC ATG TTG GCC TGG CTG GTC TCA AAC TCC TGA CCT CAG CCG ATC    2160
2161  CGC CCG CCT CAG CCT CCC AAA GTT CTG GGA TTA CAA GTG TGA ACC ACC    2208
2209  GTG CCC AAC CTC CCC TCG TTT TTG ACC TTT GTC CCC AAA TGT CTT TCA    2256
2257  TCC AGT TAC TAG GAC TTG TAG CCT TTT TGC AAA TAG GTA TCT GTA AGC    2304
2305  ATA GAA GAA AAG GGT GAT TTG TGA AGT GAC CCT TAG TGG CAT CTG TGG    2352
2353  TGG TCC TAC TAA TCA GAT TTG CAG AAG AAA CAT GGA AAC AAG GAA ACT    2400
2401  CCT CTC TTA TAT TAA AAT AAA TAA GGT TTT TAA TTT CAA AAA AAA AAA    2448
2449  AAA AAA A                                                          2455
D:Blastp结果
Query=PP2672[基因=PP2672]
         (182个氨基酸)
>SP_RO:O70132 O70132 rattus norvegicus(rat).ets domain
             transcription factor pet-1.5/1999
长度=340
分值=37.1bits(84),预计值=0.10
相同性=25/78(32%),相似性=37/78(47%),缺口=8/78(10%)
Query:84  GWSGKQTQQPVPPLRTLLLRSPFSLHKSSQPGSPKASQRIHPLFHSIPRSQLHSVLLGLP 143
           GW+G Q Q P+PP  TL  RS     + + P    ++   HP     PR+ + +    L
Sbjct:35  GWAGMQLQDPLPPHHTLAARS-----RQALPDPAASTLPCHP---QSPRAGIGTPSAKLT 86
Query:144 LLFIQTRPSPPAQYGAQM 161
              +++ PSP AQ  A M
Sbjct:87  CPPVRSPPSPTAQSPAAM 104

Claims (5)

1.一种分离的多核苷酸,其特征在于,它包含一核苷酸序列,该核苷酸序列选自下组:
(a)编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸,所述蛋白具有选自下组的氨基酸序列:
SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26;
(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。
2.如权利要求1所述的多核苷酸,其特征在于,该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列:SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:26。
3.如权利要求1所述的多核苷酸,其特征在于,该多核苷酸的序列选自下组:
SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:27的编码区序列或全长序列。
4.一种载体,其特征在于,它含有权利要求1所述的多核苷酸。
5.一种遗传工程化的宿主细胞,其特征在于,它是选自下组的一种宿主细胞:
(a)用权利要求4所述的载体转化或转导的宿主细胞;
(b)用权利要求1所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。
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