CN1193040C - 具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白及其编码序列 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一类新的具有抑癌功能的人蛋白，编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病如癌症等的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。

Description

具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白及其编码序列
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及新的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸，以及此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。
背景技术
人基因组学研究目前是国际上的热点，除人染色体DNA大规模测序，表达序列测序(EST)的方法外，还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。
癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤，目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此，本领域迫切需要开发研究具有抑癌功能的人蛋白及其激动剂/抑制剂。
发明内容
本发明的目的是提供一类新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。
本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。
本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。
在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的具有抑癌功能的蛋白多肽，它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20；或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
较佳地，该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20。
在本发明的第二方面，提供了一种分离的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85％相同性：(a)编码上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20。更佳地，该多核苷酸的序列选自下组；SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：21的编码区序列或全长序列。
在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。
在本发明的第四方面，提供了制备具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制备方法，该方法包含：(a)在适合表达具有抑癌功能的蛋白的条件下，培养上述被转化或转导的宿主细胞：(b)从培养物中分离出具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。
在本发明的第五方面，提供了与上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中连续的10-800个核苷酸。
在本发明的第六方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。
本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。
具体实施方式
本发明采用大规模cDNA克隆转染癌细胞，在获得具有抑癌作用的基础上，经测序证明为新的基因，进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明，本发明的具有抑癌功能的蛋白对癌细胞(肝癌细胞)具有抑制克隆形成的作用，其抑制率在50％或50％以上。
如本文所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。
如本文所用，“分离的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有抑癌功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。具有抑癌功能的蛋白多肽的纯度能用氨基酸序列分析。
本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。
本发明还包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。
本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以PP3895蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：3所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO：2的蛋白质，但与SEQ ID NO：3所示的编码区序列有差别的核酸序列。以PP3993蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：6所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO：5的蛋白质，但与SEQ ID NO：6所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。
编码成熟多肽的多核苷酸包括：只编码成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。
术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。
本发明还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和***变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或***，但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。
本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50％，较佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中，“严格条件”是指：(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95％以上，更好是97％以上时才发生杂交。并且，可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO：2所示的成熟多肽有相同的生物学功能和活性。
本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。
本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供，更佳地被纯化至均质。
本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如，用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于：1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列，和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。
编码具有抑癌功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得：1)从基因组DNA分离双链DNA序列；2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。
上述提到的方法中，分离基因组DNA最不常用。当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时，DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时，DNA序列的直接化学合成是不可能的，选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录，形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术，试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook，et al.，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory.New York，1989)。还可得到商业供应的cDNA文库，如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时，即使极少的表达产物也能克隆。
可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于)：(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交；(2)标志基因的功能出现或丧失：(3)测定具有抑癌功能的蛋白的转录本的水平；(4)通过免疫学技术或测定生物学活性，来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用，也可多种方法联合应用。
在第(1)种方法中，杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源，其长度至少15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸。此外，探针的长度通常在2kb之内，较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素，荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。
在第(4)种方法中，检测具有抑癌功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法，放射免疫沉淀法，酶联免疫吸附法(ELISA)等。
应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki，et al.Science 1985；230：1350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时，可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法)，用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择，并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。
如上所述得到的本发明的基因，或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS，1977，74：5463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列，测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列，才能拼接成全长的cDNA序列。
本发明也涉及包含本发明的多核苷酸的载体，以及用本发明的载体或具有抑癌功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞，以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。
通过常规的重组DNA技术，可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有抑癌功能的蛋白多肽(Science，1984；224：1431)。一般来说有以下步骤：
(1).用本发明的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体)，或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞；
(2).在合适的培养基中培养的宿主细胞；
(3).从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。
本发明中，具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可***到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于：在细菌中表达的基于T7的表达载体(Rosenberg，et al.Gene，1987，56：125)；在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体(Lee and Nathans，J Bio Chem.263：3521，1988)和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之，只要能在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。
本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有抑癌功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等(Sambroook，et al.Molecular Cloning，a Laboratory Manual，coldSpring Harbor Laboratory.New York，1989)。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上，以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有：大肠杆菌的lac或trp启动子；λ噬菌体PL启动子；真核启动子包括CMV立即早期启动子、HSV胸苷激酶启动子、早期和晚期SV40启动子、反转录病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。
此外，表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因，以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状，如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP)，或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。
包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体，可以用于转化适当的宿主细胞，以使其能够表达蛋白质。
宿主细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高等真核细胞，如哺乳动物细胞。代表性例子有：大肠杆菌，链霉菌属；鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞；真菌细胞如酵母；植物细胞；果蝇S2或Sf9的昆虫细胞；CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。
本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时，如果在载体中***增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子，通常大约有10到300个碱基对，作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。
本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。
用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时，能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获，用CaCl2法处理，所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl2。如果需要，转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物，可选用如下的DNA转染方法：磷酸钙共沉淀法，常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。
获得的转化子可以用常规方法培养，表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞，培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后，用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子，将细胞再培养一段时间。
在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要，可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于：常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。
重组的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于)：直接做为药物治疗具有抑癌功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病，和用于筛选促进或对抗具有抑癌功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如，抗体可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表达的重组具有抑癌功能的人蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。
本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有抑癌功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有抑癌功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能，而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症。例如，能在药物的存在下，将哺乳动物细胞或表达具有抑癌功能的人蛋白的膜制剂与标记的具有抑癌功能的人蛋白一起培养。然后测定药物提高或阻遏此相互作用的能力。
具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有抑癌功能的人蛋白结合并消除其功能，或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的产生，或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。
在筛选作为拮抗剂的化合物时，可以将具有抑癌功能的蛋白加入生物分析测定中，通过测定化合物影响具有抑癌功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法，可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。
本发明的多肽可直接用于疾病治疗，例如，各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。
本发明的多肽，及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术，三瘤技术，人B-细胞杂交瘤技术，EBV-杂交瘤技术等。
可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。
本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒，容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起，可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示，该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外，本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。
药物组合物可以以方便的方式给药，如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有抑癌功能的蛋白以有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素，如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。
具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有抑癌功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有抑癌功能的蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。重组的基因治疗载体(如病毒载体)可设计成表达变异的具有抑癌功能的蛋白，以抑制内源性的具有抑癌功能的蛋白活性。例如，一种变异的具有抑癌功能的蛋白可以是缩短的、缺失了信号传导功能域的具有抑癌功能的蛋白，虽可与下游的底物结合，但缺乏信号传导活性。因此重组的基因治疗载体可用于治疗具有抑癌功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有抑癌功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有抑癌功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook，et al.)。另外重组具有抑癌功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。
抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子，其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得，如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性，可用多种方法对其进行修饰，如增加两侧的序列长度，核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。
多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括：将多聚核苷酸直接注入到体内组织中；或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中，再将细胞移植到体内等。
本发明的多肽还可用作肽谱分析，例如，多肽可用物理的、化学或酶进行特异性切割，并进行一维或二维或三维的凝胶电泳分析。
本发明还提供了针对具有抑癌功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于)：多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。
抗具有抑癌功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中，检测活检标本中的具有抑癌功能的人蛋白。
与具有抑癌功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记，注入体内可跟踪其位置和分布。这种放射性标记的抗体可作为一种非创伤性诊断方法用于肿瘤细胞的定位和判断是否有转移。
本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有抑癌功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以刺激或阻断具有抑癌功能的人蛋白的产生或活性。
抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素，蓖麻蛋白，红豆碱等)共价结合。一种通常的方法是用巯基交联剂如SPDP，攻击抗体的氨基，通过二硫键的交换，将毒素结合于抗体上，这种杂交抗体可用于杀灭具有抑癌功能的人蛋白阳性的细胞。
多克隆抗体的生产可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫动物，如家兔，小鼠，大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏佐剂等。
具有抑癌功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler and Milstein.Nature，1975，256：495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al，PNAS，1985，81：6851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.PatNo.4946778)也可用于生产抗具有抑癌功能的人蛋白的单链抗体。
能与具有抑癌功能的人蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时，必须对具有抑癌功能的人蛋白分子进行标记。
本发明还涉及定量和定位检测具有抑癌功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的，且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有抑癌功能的人蛋白水平，可以用作解释具有抑癌功能的人蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。
具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面，具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有抑癌功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有抑癌功能的蛋白的异常表达。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有抑癌功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法，Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术，相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上，用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有抑癌功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有抑癌功能的蛋白的转录产物。
检测具有抑癌功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有抑癌功能的蛋白相关的疾病。具有抑癌功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外，突变有可能影响蛋白的表达，因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。
本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。该序列会特异性地针对某条人染色体具***置且并可以与其杂交。目前，需要鉴定染色体上的各基因的具***点。现在，只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色***置。根据本发明，为了将这些序列与疾病相关基因相关联，其重要的第一步就是将这些DNA序列定位于染色体上。
简而言之，根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp)，可以将序列定位于染色体上。然后，将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。
体细胞杂合细胞的PCR定位法，是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物，通过类似方法，可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选，从而构建染色体特异的cDNA库。
将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH)，可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述，参见Verma等，Human Chromosomes：a Manual of BasicTechniques，Pergamon Press，New York(1988)。
一旦序列被定位到准确的染色***置，此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如，V.Mckusick，Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析，确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。
接着，需要测定患病和未患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变，而该突变在任何正常个体中未观察到，则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体，通常涉及首先寻找染色体中结构的变化，如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。根据目前的物理作图和基因定位技术的分辨能力，被精确定位至与疾病有关的染色体区域的cDNA，可以是50至500个潜在致病基因间之一种(假定1兆碱基作图分辨能力和每20kb对应于一个基因)。
本发明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。
一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。
此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。
目前，已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外，还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。
此外，由于本发明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列，因此，与来源于其他物种的同族蛋白相比，预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York：Cold Spring Harbor LaboratoryPress，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1：cDNA基因的获得及对癌细胞克隆形成的抑制作用
PP3895，PP3993，PP4052，PP4068，PP4135，PP4189，PP2500是通过用常规方法构建人胎盘cDNA文库获得的。取3、6、10月龄的胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反转录反应在42℃进行。转化XL 10-Gold感受细胞，获得了1×106cfu/μg cDNA滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆，其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针，杂交筛选cDNA文库，挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen96孔板质粒抽提试剂盒，按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染肝癌细胞系7721。100ng DNA酒精沉淀干燥后，加6μl H2O溶解，待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液，混匀后，室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液，均分加入3孔生长于96孔板的7721细胞中，37℃放置2小时，每孔再加50μl无血清培液，37℃24小时。每孔换100μl全培液，37℃24小时，换含G418的全培液100μl，37℃24～48小时，边观察，边换G418浓度不等的培液。约2～3次后，直到镜检细胞有克隆形成，计数。发现以上克隆有抑制细胞克隆形成作用，结果如下表所示。
                    cDNA克隆转染细胞(7721)克隆形成情况
cDNA克隆名称     CDNA克隆数(三个重复)     空载体克隆数(三个重复)
    PP3895     3     9     0     33     34     38
    PP3993     17     8     12     35     24     32
    PP4052     0     1     0     16     20     18
    PP4068     0     1     1     27     30     23
    PP4135     14     12     10     27     30     23
    PP4189     6     5     9     27     30     23
    PP2500     0     2     0     28     30     27
对cDNA克隆采用双脱氧终止法，在ABI377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后，确定为新基因克隆，进行另一端测序。如仍未获得全长cDNA序列，则设计引物，再次进行测序，直到获得全长序列(SEQ ID NO：1、4、7、10、13、16、19)。
实施例2：从胎盘cDNA中通过PCR获得基因克隆：
取3、6、10月龄的人胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-SuperscriptH(GIBCO BRL)反转录酶在42℃进行反转录反应，获得胎盘cDNA。利用各个基因的转异引物(如下表所示)，按90℃3′1个循环。94℃30秒，60℃30秒72℃1分钟，共35个循环，72℃10′1个循环进行PCR扩增，获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证，与实施例1测得的序列相符，随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞，获得重组蛋白。
                    基因特异引物序列
 克隆名称  特异引物1(5′→3′)  特异引物2(5′→3′)
 PP3895  GGTTTACTGACACCCCCACCCCA  GCGCCCGGCCTCTTTTTATCCTT
 PP3993  ACTTGCATTTGCCCTGACACCCA  GTTCTGCTTGGCCGAGCTGTTGA
 PP4052  GTGTATGCTGCCCCCTTTCTGGG  ACAGGATGGTAGTGGCGATGGCA
 PP4068  CTGGGCCCAAGGACAAAGCTCAC  ATCATGGGGCATGCACAGCATCT
 PP4135  TGCCCCTAACCACTGAGACAGCA  CAACTGCACATTTTGCTCATGTA
 PP4189  TCAAGGTTGCTCTCCAGCTCAAGG  GTTATTAGGCCCACCACTAAGAG
 PP2500  CTTGCTGCTCTTCTCGTTCCCGA  GCAGGGTCCTGGAACTTCTTGGC
实施例3：cDNA克隆序列分析
1.PP3895蛋白
A：核苷酸序列(SEQ ID NO：1)长度：1972bp
   1  GGTTTAGTGA CACCCCCACC CCACCCCATC TGCATATTTT TTCACCACCC
  51  CTCCCTTCTG TATATGATGC TTCTGTAGCT CTGTAACGCC CCCTACATTT
 101  ACCTTCCTTA TATCTCCCCC GTCTTCCTCT CCATAGATCT CCTCCCATTT
 151  CCCCTTCCAT GGTCCCCATC TTCCTTCTGA AATGTCTACT CCTTCATGTT
 201  CCTTTATGTA TGTCTTCCAA TCTTTCCTTC CATAGCTCTC ATCACCTTCA
 251  TATATTTCTT CCATCTTTCT CCTCCCACCT GCCTCGCCCT CTGTATATAC
 301  CCCCACTCTC CCCCTTTTAT ATCTTCTCCA TCTCCCCCCA TATCTTTCCT
 351  CTATGTCCAC ATCTGTGTAT TCCCCCCAAC TTCCCCTCCA TATATCTTTT
 401  TTTACTCCCC TTTTCCTCCC TGTATCCTCT GTGTTCCCCC CATCTTGCTC
 451  TACATCATTC TTCCCAAGAT CTTTACGTCT CCCATCTTGA TCTCTCCATC
 501  TCCACTTTCT CCTAACATTT TCATTTCCGT TCCTTAGTGT CTCTAGAGAG
 551  ATCATTCTTG ATAGCCTCAG CTCTTTCTCT GTGTTTTTCA GGTTTGTATT
 601  CTGCTCTGCT CTACCTCTCC TCCTTGCCCC TTTTCTCTCC CAGGATGTCT
 651  CTCCTTTCCA AATCCTTTTT GTACCTGAAT ACCTTTTGCC CCACCCTGGG
 701  CTCTCATTTC CATCTCAGAC CTTAGCCTGG GATCTAAAGG GCTGACAGTG
 751  TCCCTTTCTT CATGCAGATG ACAGTCGTCT AGAGGAGCTC AAAGCCACTC
 801  TGCCCAGCCC AGACAAGCTC CCTGGATTCA AGATGTACCC CATTGACTTT
 851  GAGAAGGTAT GGGGTGGGGC TCAGGACAGG GAAGGAGGAT GGGCAAAGCA
 901  TAGACAGGCT GGAGAAAACA GAAGTATCTG GAGCCAGCCC CGGGCCTTTG
 951  TGGGGATCAG ATTGTGGGCC TGCCATATGG CTCTGAATGA GTAGGTGTTC
1001  CCAGCCATCC CTTTGTGATC TGGGAGAGTC CAGCAGGCAA TTGCAGTGGA
1051  GGATACACAT CTTCTTTATC TGATCCTCTC CCCACTGCCT TCACACCCTC
1101  CCCACTCATA ACAGGATGAT GACAGCAACT TTCATATGGA TTTCATCGTG
1151  GCTGCATCCA ACCTCCGGGC AGAAAACTAT GACATTCCTT CTGCAGACCG
1201  GCACAAGAGC AAGCTGATTG CAGGGAAGAT CATCCCAGCC ATTGCCACGA
1251  CCACAGCAGC CGTGGTTGGC CTTGTGTGTC TGGAGCTGTA CAAGGTTGTG
1301  CAGGGGCACC GACAGCTTGA CTCCTACAAG AATGGTTTCC TCAACTTGGC
1351  CCTGCCTTTC TTTGGTTTCT CTGAACCCCT TGCCGCACCA CGTCACCAGG
1401  TGGGGGCCTG CATCCGAAGC AGGGTTTGGG TGGGGTGTAT CTGTGTAGAT
1451  CTGGTTCTGA TTCACGTCAT ACCCTGTCAC CAGGGGAGGG TTTCTGTCTG
1501  TGTACCTACC CTTTTTGTGT ATCCTTTTTC ACTTATTCAT TAATCACATT
1551  ATTTGAGTAC GTGCGAAAAG ATGGGATATT TGAATTGTGC CCTGGGAGAT
1601  TATTAGTAAC TACACAATAA TGGCAGCCAA AATTTATTGG ACGCTTCCTA
1651  CACTTAAGTG CTTTGCTTGC TTCATTAATG AATTCACTCA AATATTTATT
1701  GAGCACCTTT TGTGGGCAGG GACTCTTCTA AGTTATGTTC CTCAAGTAGA
1751  TTATATAAAT AACCTATTAA ATGATTTTGG AATCAAAAAA GGATAAAAAG
1801  AGGCCGGGCG CGGTGGCTTA CGCCTGTAAT CCCAGCACTT TGGGAGGCCG
1851  AGGCACGTGG TTCACCTGAA GTCAGGAGTT TGAGACCAGC CTGGCCAACA
1901  TGATGAAACC CTGTCTCTAC TAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA
1951  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AA
B：氨基酸序列(SEQ ID NO：2)长度：135个氨基酸
  1  MDFIVAASNL RAENYDIPSA DRHKSKLIAG KIIPAIATTT AAVVGLVCLE LYKVVQGHRQ
 61  LDSYKNGFLN LALPFFGFSE PLAAPRHQVG ACIRSRVWVG CICVDLVLIH VIPCHQGRVS
121  VCVPTLFVYP FSLIH
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：3)
克隆号：PP3895
起始编码子：1136 ATG                  终止编码子：1543 TAA
蛋白质分子量：14799
   1    G GTT TAC TGA CAC CCC CAC CCC ACC CCA TCT GCA TAT TTT TTC ACC      46
  47  ACC CCT CCC TTC TGT ATA TGA TGC TTC TGT AGC TCT GTA ACG CCC CCT      94
  95  ACA TTT ACC TTC CTT ATA TCT CCC CCG TCT TCC TCT CCA TAG ATC TCC     142
 143  TCC CAT TTC CCC TTC CAT GGT CCC CAT CTT CCT TCT GAA ATG TCT ACT     190
 191  CCT TCA TGT TCC TTT ATG TAT GTC TTC CAA TCT TTC CTT CCA TAG CTC     238
 239  TCA TCA CCT TCA TAT ATT TCT TCC ATC TTT CTC CTC CCA CCT GCC TCG     286
 287  CCC TCT GTA TAT ACC CCC ACT CTC CCC CTT TTA TAT CTT CTC CAT CTC     334
 335  CCC CCA TAT CTT TCC TCT ATG TCC ACA TCT GTG TAT TCC CCC CAA CTT     382
 383  CCC CTC CAT ATA TCT TTT TTT ACT CCC CTT TTC CTC CCT GTA TCC TCT     430
 431  GTG TTC CCC CCA TCT TGC TCT ACA TCA TTC TTC CCA AGA TCT TTA CGT     478
 479  CTC CCA TCT TGA TCT CTC CAT CTC CAC TTT CTC CTA ACA TTT TCA TTT     526
 527  CCG TTC CTT AGT GTC TCT AGA GAG ATC ATT CTT GAT AGC CTC AGC TCT     574
 575  TTC TCT GTG TTT TTC AGG TTT GTA TTC TGC TCT GCT CTA CCT CTC CTC     622
 623  CTT GCC CCT TTT CTC TCC CAG GAT GTC TCT CCT TTC CAA ATC CTT TTT     670
 671  GTA CCT GAA TAC CTT TTG CCC CAC CCT GGG CTC TCA TTT CCA TCT CAG     718
 719  ACC TTA GCC TGG GAT CTA AAG GGC TGA CAG TGT CCC TTT CTT CAT GCA     766
 767  GAT GAC AGT CGT CTA GAG GAG CTC AAA GCC ACT CTG CCC AGC CCA GAC     814
 815  AAG CTC CCT GGA TTC AAG ATG TAC CCC ATT GAC TTT GAG AAG GTA TGG     862
 863  GGT GGG GCT CAG GAC AGG GAA GGA GGA TGG GCA AAG CAT AGA CAG GCT     910
 911  GGA GAA AAC AGA AGT ATC TGG AGC CAG CCC CGG GCC TTT GTG GGG ATC     958
 959  AGA TTG TGG GCC TGC CAT ATG GCT CTG AAT GAG TAG GTG TTC CCA GCC    1006
1007  ATC CCT TTG TGA TCT GGG AGA GTC CAG CAG GCA ATT GCA GTG GAG GAT    1054
1055  ACA CAT CTT CTT TAT CTG ATC CTC TCC CCA CTG CCT TCA CAC CCT CCC    1102
1103  CAC TCA TAA CAG GAT GAT GAC AGC AAC TTT CAT ATG GAT TTC ATC GTG    1150
  1                                               Met Asp Phe Ile Val       5
1151  GCT GCA TCC AAC CTC CGG GCA GAA AAC TAT GAC ATT CCT TCT GCA GAC    1198
   6  Ala Ala Ser Asn Leu Arg Ala Glu Asn Tyr Asp Ile Pro Ser Ala Asp      21
1199  CGG CAC AAG AGC AAG CTG ATT GCA GGG AAG ATC ATC CCA GCC ATT GCC    1246
  22  Arg His Lys Ser Lys Leu Ile Ala Gly Lys Ile Ile Pro Ala Ile Ala      37
1247  ACG ACC ACA GCA GCC GTG GTT GGC CTT GTG TGT CTG GAG CTG TAC AAG    1294
  38  Thr Thr Thr Ala Ala Val Val Gly Leu Val Cys Leu Glu Leu Tyr Lys      53
1295  GTT GTG CAG GGG CAC CGA CAG CTT GAC TCC TAC AAG AAT GGT TTC CTC    1342
  54  Val Val Gln Gly His Arg Gln Leu Asp Ser Tyr Lys Asn Gly Phe Leu      69
1343  AAC TTG GCC CTG CCT TTC TTT GGT TTC TCT GAA CCC CTT GCC GCA CCA    1390
  70  Asn Leu Ala Leu Pro Phe Phe Gly Phe Ser Glu Pro Leu Ala Ala Pro      85
1391  CGT CAC CAG GTG GGG GCC TGC ATC CGA AGC AGG GTT TGG GTG GGG TGT    1438
  86  Arg His Gln Val Gly Ala Cys Ile Arg Ser Arg Val Trp Val Gly Cys     101
1439  ATC TGT GTA GAT CTG GTT CTG ATT CAC GTC ATA CCC TGT CAC CAG GGG    1486
 102  Ile Cys Val Asp Leu Val Leu Ile His Val Ile Pro Cys His Gln Gly     117
1487  AGG GTT TCT GTC TGT GTA CCT ACC CTT TTT GTG TAT CCT TTT TCA CTT    1534
 118  Arg Val Ser Val Cys Val Pro Thr Leu Phe Val Tyr Pro Phe Ser Leu     133
1535  ATT CAT TAA TCA CAT TAT TTG AGT ACG TGC GAA AAG ATG GGA TAT TTG    1582
 134  Ile His ***                                                         136
1583  AAT TGT GCC CTG GGA GAT TAT TAG TAA CTA CAC AAT AAT GGC AGC CAA    1630
1631  AAT TTA TTG GAC GCT TCC TAC ACT TAA GTG CTT TGC TTG CTT CAT TAA    1678
1679  TGA ATT CAC TCA AAT ATT TAT TGA GCA CCT TTT GTG GGC AGG GAC TCT    1726
1727  TCT AAG TTA TGT TCC TCA AGT AGA TTA TAT AAA TAA CCT ATT AAA TGA    1774
1775  TTT TGG AAT CAA AAA AGG ATA AAA AGA GGC CGG GCG CGG TGG CTT ACG    1822
1823  CCT GTA ATC CCA GCA CTT TGG GAG GCC GAG GCA CGT GGT TCA CCT GAA    1870
1871  GTC AGG AGT TTG AGA CCA GCC TGG CCA ACA TGA TGA AAC CCT GTC TCT    1918
1919  ACT AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1966
1967  AAA AAA                                                            1972
2.PP3993蛋白
A：核苷酸序列(SEQ ID NO：4)长度：2064bp
  1  TTCAGACAAA CCTCAGGTAA GATGGGACTG GGCTTCCCCG CCACTGCGCA
 51  GCAGCTCCCG CCCTCCTGGG TGCTGTCCCA GGGGTGAAAG GAAGAGGTGG
101  GGAGGTACAG CTGGGAGTGT GGGGGATGGG GAAGGATGGG GAGGGAACGG
151  GCCCGTGGAC AACTTGCATT TGCCCTGACA CCCACCCTCC CTGCAGCTCT
201  ACACCCTCAC CGTGATCGGC CCAGGACCGC CAGATTGCCA GCCAGCCCAG
251  ATCTCTCGCC GTTACTCGGA CTTTGAGCGG CTGCACCGAA ACCTGCAGCG
301  GCAATTCCGG GGCCCAATGG CTGCCATCTC CTTCCCCCGT AAGCGGCTGC
351  GCCGGAATTT TACTGCAGAG ACCATTGCCC GCCGTAGCCG GGCCTTTGAG
401  CAGTTTTTGG GTCACCTGCA GGCAGTGCCT GAGCTGCGCC ATGCCCCGGA
451  CCTGCAGGAC TTCTTCGTGC TGCCGGAGCT GCGGCGGGCA CAGAGCCTCA
501  CCTGTACTGG CCTCTATCGT GAGGCTCTGG CACTCTGGGC CAATGCCTGG
551  CAGCTGCAAG CCCAGCTGGG CACCCCCTCT GGCCCAGACC GCCCCCTGCT
601  GACCCTGGCT GGGCTGGCCG TGTGCCACCA GGAGCTGGAA GACCCTGGAG
 651  AGGCCCGGGC ATGCTGTGAG AAGGCCCTGC AGCTGCTTGG GGACAAGAGC
 701  CTCCACCCTT TGCTGGCACC CTTTCTGGAG GCCCATGTCC GGCTCTCCTG
 751  GCGCCTGGGC CTGGACAAAC GTCAATCAGA GGCTCGGCTC CAAGCCCTGC
 801  AGGAGGCAGG CCTTACCCCC ACACCACCCC CCAGTCTCAA AGAATTGCTC
 851  ATCAAGGAGG TGCTGGACTA ACCCTTGCCT AGATTTAAGG CCACTGTGAG
 901  GAGAGGGGTT GCCCCAGAAG GCAGGGGAAG GACCTGATGA GAACAGAATA
 951  GCTGGGAGGC TGCAGAGGGT GCTGGGAGCC CCTAGAAGTT CCAAAAGAGA
1001  ATGTGAAGCA GATCAAGGAA ACTTCTGTTG AGCTAGGCTC AGGGTGAGCT
1051  TTGGCTGGGG TTGCCCTTGT GTAGTACAGG GAAGTCTGAC ACAGCCTCTC
1101  CAGCCTATAA ACAGCCGGGG GGCTGTGGCA CAGGTTGGGG CAATGTTCCC
1151  TTGTTGGTGG GCCCCCAAGC TGGCAAGGCC TCTTGGCTGA AGGCCAGGGA
1201  CTCTGCCCCT GGAGTCCTGG AGTTAAGGGA TGAAGGCAAG GCTGCAGGTC
1251  TGGCCCAGGG GAATTAAAAG CCAGCCACTC CAGTGGTATC AGTCTCTTTA
1301  TTGGATGTGA GGGCCAAAAG GGACTGTAAC TCCTGTCTCA GGAATGGGGA
1351  TAGATGGGAG GTTCTTGAAG CCCCAGGCGA AGCTGGTACC TCTGGCTACA
1401  GCTTGCTCTC TGAGACCTGG GGCTTCACTC GGATCACGCC CTCCTGGGCA
1451  CAGGTCACAG CTAGGACTCC ATCCTGACGC CACAGCCGCC CATGGACCAG
1501  CCCCCGAGAG CCACCTGTGG GTGAGGTGAA GGGTGATGAT GGCCTGCTTC
1551  AGAACAGCCA AATACACTTT TTTTTTTTTT CCTGAAACAG AGTCCCACTA
1601  AGTTGCCAGG CTGGTCTCAA GCCGCCTGGG TTCAAGGGAT CCTCCCGCCT
1651  CAGCCTCCTG AGCAGCTGGG ATTACAGGCG CACATCACCA TGCCCAACCT
1701  CCAAGTGGAC TTCTTGCAAA GGGTCTGGCC CAGGGCAGGG CTGCCCCACA
1751  CAAGGGTGCA CTGAGTGTCG TGGCTGCTCC AAATGCCCCT TCATGAGCTT
1801  ATTATGGACC GTCATTGAGG GGTAACTCCT CCCACAGGAA CCCCAGTTGA
1851  CAGTTTAAAA GCACTTTTAC ACCTCTCCTC GCTTCCTCAA AAAGATCACA
1901  GAGGGAGGAG CTCTGAGAAC AGTCTCCTTC AACAGCTCGG CCAAGCAGAA
1951  CTGCTGTACC TCTGACCACT TGTGTTAGGA AAACTATCGG CTCCCTGTAT
2001  AATAAATCAA GCCAGGTCCT CCCCAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA
2051  AAAAAAAAAA AAAA
B：氨基酸序列(SEQ ID NO：5)长度：184个氨基酸
  1  MAAISFPRKR LRRNFTAETI ARRSRAFEQF LGHLQAVPEL RHAPDLQDFF VLPELRRAQS
 61  LTCTGLYREA LALWANAWQL QAQLGTPSGP DRPLLTLAGL AVCHQELEDP GEARACCEKA
121  LQLLGDKSLH PLLAPFLEAH VRLSWRLGLD KRQSEARLQA LQEAGLTPTP PPSLKELLIK
181  EVLD
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：6)
克隆号：PP3993
起始编码子：317 ATG                  终止编码子：871 TAA
蛋白质分子量：20611
  1    T TCA GAC AAA CCT CAG GTA AGA TGG GAC TGG GCT TCC CCG CCA CTG     46
 47  CGC AGC AGC TCC CGC CCT CCT GGG TGC TGT CCC AGG GGT GAA AGG AAG     94
 95  AGG TGG GGA GGT ACA GCT GGG AGT GTG GGG GAT GGG GAA GGA TGG GGA    142
143  GGG AAC GGG CCC GTG GAC AAC TTG CAT TTG CCC TGA CAC CCA CCC TCC    190
191  CTG CAG CTC TAC ACC CTC ACC GTG ATC GGC CCA GGA CCG CCA GAT TGC    238
239  CAG CCA GCC CAG ATC TCT CGC CGT TAC TCG GAC TTT GAG CGG CTG CAC    286
287  CGA AAC CTG CAG CGG CAA TTC CGG GGC CCA ATG GCT GCC ATC TCC TTC    334
  1                                          Met Ala Ala Ile Ser Phe      6
335  CCC CGT AAG CGG CTG CGC CGG AAT TTT ACT GCA GAG ACC ATT GCC CGC    382
  7  Pro Arg Lys Arg Leu Arg Arg Asn Phe Thr Ala Glu Thr Ile Ala Arg     22
 383  CGT AGC CGG GCC TTT GAG CAG TTT TTG GGT CAC CTG CAG GCA GTG CCT     430
  23  Arg Ser Arg Ala Phe Glu Gln Phe Leu Gly His Leu Gln Ala Val Pro      38
 431  GAG CTG CGC CAT GCC CCG GAC CTG CAG GAC TTC TTC GTG CTG CCG GAG     478
  39  Glu Leu Arg His Ala Pro Asp Leu Gln Asp Phe Phe Val Leu Pro Glu      54
 479  CTG CGG CGG GCA CAG AGC CTC ACC TGT ACT GGC CTC TAT CGT GAG GCT     526
  55  Leu Arg Arg Ala Gln Ser Leu Thr Cys Thr Gly Leu Tyr Arg Glu Ala      70
 527  CTG GCA CTC TGG GCC AAT GCC TGG CAG CTG CAA GCC CAG CTG GGC ACC     574
  71  Leu Ala Leu Trp Ala Asn Ala Trp Gln Leu Gln Ala Gln Leu Gly Thr      86
 575  CCC TCT GGC CCA GAC CGC CCC CTG CTG ACC CTG GCT GGG CTG GCC GTG     622
  87  Pro Ser Gly Pro Asp Arg Pro Leu Leu Thr Leu Ala Gly Leu Ala Val     102
 623  TGC CAC CAG GAG CTG GAA GAC CCT GGA GAG GCC CGG GCA TGC TGT GAG     670
 103  Cys His Gln Glu Leu Glu Asp Pro Gly Glu Ala Arg Ala Cys Cys Glu     118
 671  AAG GCC CTG CAG CTG CTT GGG GAC AAG AGC CTC CAC CCT TTG CTG GCA     718
 119  Lys Ala Leu Gln Leu Leu Gly Asp Lys Ser Leu His Pro Leu Leu Ala     134
 719  CCC TTT CTG GAG GCC CAT GTC CGG CTC TCC TGG CGC CTG GGC CTG GAC     766
 135  Pro Phe Leu Glu Ala His Val Arg Leu Ser Trp Arg Leu Gly Leu Asp     150
 767  AAA CGT CAA TCA GAG GCT CGG CTC CAA GCC CTG CAG GAG GCA GGC CTT     814
 151  Lys Arg Gln Ser Glu Ala Arg Leu Gln Ala Leu Gln Glu Ala Gly Leu     166
 815  ACC CCC ACA CCA CCC CCC AGT CTC AAA GAA TTG CTC ATC AAG GAG GTG     862
 167  Thr Pro Thr Pro Pro Pro Ser Leu Lys Glu Leu Leu Ile Lys Glu Val     182
 863  CTG GAC TAA CCC TTG CCT AGA TTT AAG GCC ACT GTG AGG AGA GGG GTT     910
 183  Leu Asp ***                                                         185
 911  GCC CCA GAA GGC AGG GGA AGG ACC TGA TGA GAA CAG AAT AGC TGG GAG     958
 959  GCT GCA GAG GGT GCT GGG AGC CCC TAG AAG TTC CAA AAG AGA ATG TGA    1006
1007  AGC AGA TCA AGG AAA CTT CTG TTG AGC TAG GCT CAG GGT GAG CTT TGG    1054
1055  CTG GGG TTG CCC TTG TGT AGT ACA GGG AAG TCT GAC ACA GCC TCT CCA    1102
1103  GCC TAT AAA CAG CCG GGG GGC TGT GGC ACA GGT TGG GGC AAT GTT CCC    1150
1151  TTG TTG GTG GGC CCC CAA GCT GGC AAG GCC TCT TGG CTG AAG GCC AGG    1198
1199  GAC TCT GCC CCT GGA GTC CTG GAG TTA AGG GAT GAA GGC AAG GCT GCA    1246
1247  GGT CTG GCC CAG GGG AAT TAA AAG CCA GCC ACT CCA GTG GTA TCA GTC    1294
1295  TCT TTA TTG GAT GTG AGG GCC AAA AGG GAC TGT AAC TCC TGT CTC AGG    1342
1343  AAT GGG GAT AGA TGG GAG GTT CTT GAA GCC CCA GGC GAA GCT GGT ACC    1390
1391  TCT GGC TAC AGC TTG CTC TCT GAG ACC TGG GGC TTC ACT CGG ATC ACG    1438
1439  CCC TCC TGG GCA CAG GTC ACA GCT AGG ACT CCA TCC TGA CGC CAC AGC    1486
1487  CGC CCA TGG ACC AGC CCC CGA GAG CCA CCT GTG GGT GAG GTG AAG GGT    1534
1535  GAT GAT GGC CTG CTT CAG AAC AGC CAA ATA CAC TTT TTT TTT TTT TCC    1582
1583  TGA AAC AGA GTC CCA CTA AGT TGC CAG GCT GGT CTC AAG CCG CCT GGG    1630
1631  TTC AAG GGA TCC TCC CGC CTC AGC CTC CTG AGC AGC TGG GAT TAC AGG    1678
1679  CGC ACA TCA CCA TGC CCA ACC TCC AAG TGG ACT TCT TGC AAA GGG TCT    1726
1727  GGC CCA GGG CAG GGC TGC CCC ACA CAA GGG TGC ACT GAG TGT CGT GGC    1774
1775  TGC TCC AAA TGC CCC TTC ATG AGC TTA TTA TGG ACC GTC ATT GAG GGG    1822
1823  TAA CTC CTC CCA CAG GAA CCC CAG TTG ACA GTT TAA AAG CAC TTT TAC    1870
1871  ACC TCT CCT CGC TTC CTC AAA AAG ATC ACA GAG GGA GGA GCT CTG AGA    1918
1919  ACA GTC TCC TTC AAC AGC TCG GCC AAG CAG AAC TGC TGT ACC TCT GAC    1966
1967  CAC TTG TGT TAG GAA AAC TAT CGG CTC CCT GTA TAA TAA ATC AAG CCA    2014
2015  GGT CCT CCC CAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    2062
2063  AA                                                                 2064
3.PP4052蛋白
A：核苷酸序列(SEQ ID NO：7)长度：1794bp
   1  CTAAGAGAGC TTGGAAAGGG ATAGAGAAGT CTGACCCAAA TTTGCGGAGC
  51  GACTGAGTGT ATGCTGCCCC CTTTCTGGGC CTTGGCTTCT TCCTCAATCA
 101  TCTAGGCACA GTCCTATGAC TGCCTGTTTT TGAGGATGTG GGAAGGGTCT
 151  GCAAATACAG TGCTTTCCCA TTGACACACG CTGGTGAGGA TGCAGGCTCC
 201  CTGGCACCAG CAGTGAGGGC TCAGATTGCA AGAGTAAAAA CTTCCATCAC
 251  TGGGAAGAGA AGTCTGCAGG GGACTGGAGG TGATCTGAAG ATTCTGAAAT
 301  AACTCTTCCT CTCTCTGCAG AGAAGGATGG TGCTTCATCC TGTTTAGGTA
 351  AGGGTGATAG CCAAGTGTGT TCAGGGTGGC TGCACCAACC CACCCTGAGT
 401  CCATGTGGCT CAAGACTGCT GCTCAGGTGG GGTCAGCTGA GTGGGTAGGA
 451  AGTCGGGAGG CACTGCCTAG CAGGTTTCAA CTTTAGTCTG GAGGCTGCAT
 501  CTGTCTCCTC TAAACACAGT GGTTCTCATT GGTTATACCC CAAAATCACA
 551  CCAGGAAACT TTAAAACTAG TGACGACTGA GTCCCGTCTC CAGAAACTCT
 601  GACTTAATTG TGGGGGTGTG GCCTGGACAT CAGGATTTGT AATAACTCCT
 651  CAGGTGATTC TCATGTAGTC AAGGTTGAGA ACCACTGCTT TAACTTTCTC
 701  CAAATCCTAA TTACTTCTAG TGTGGCCTGA GGACTGCACT TTGAATGGCA
 751  AGGGCCAAAT AACCAAGTTT TTGTTTTTTT CCAGGAAGTG GAGAAGAATT
 801  TGGGGTTGGG ACTAGACTGG GGGTGAGCTG GGGAGATGGA AGATGGAAGT
 851  GGGGTCAGTG GGAGGCAATG ATGGTAGGTA TCTTGGAAGA AGGATGCTTA
 901  ATTTTAACAC GGAAAGACTG GAAGAAGGGA AGATACAAAG AGGTGGTCTC
 951  CAGAAGACAG TCAGACAAAT AACAGAGCCT TAGAAATAAA ACCTTTTGGG
1001  CTGGGTGGCC CAGGTTCTCA ATTGCTGCCT CTACAGGAAA GTCTTTGGGT
1051  TCGGAGGATT CCAGAAACAT GAAGGAGAAG TTGGAGGACA TGGAGAGTGT
1101  CCTCAAGGAC CTGACAGAGG AGAAGAGAAA AGATGTGCTA AACTCCCTCG
1151  CTAAGTGCCT CGGCAAGGAG GATATTCGGC AGGATCTAGA GCAAAGAGTA
1201  TCTGAGGTCC TGATTTCCGG GGAGCTACAC ATGGAGGACC CAGACAAGCC
1251  TCTCCTAAGC AGCCTTTTTA ATGCTGCTGG GGTCTTGGTA GAAGCGCGTG
1301  CAAAAGCCAT TCTGGACTTC CTGGATGCCC TGCTAGAGCT GTCTGAAGAG
1351  CAGCAGTTTG TGGCTGAGGC CCTGGAGAAG GGGACCCTTC CTCTGTTGAA
1401  GGACCAGGTG AAATCTGTCA TGGAGCAGAA CTGGGATGAG CTGGCCAGCA
1451  GTCCTCCTGA CATGGACTAT GACCCTGAGG CACGAATTCT CTGTGCGCTG
1501  TATGTTGTTG TCTCTATCCT GCTGGAGCTG GCTGAGGGGC CTACCTCTGT
1551  CTCTTCCTAA CTACAAAAGC CCTTTCTCCC CACAAGCCTC TGGGTTTTCC
1601  CTTTACCAGT CTGTCCTCAC TGCCATCGCC ACTACCATCC TGTCACCAGT
1651  GGGACCTCTT TAAAACAAGC AGCCAACCAT TCTTTGATGT ATCCCATTCG
1701  CTCCATGTTA ACATCCAAAA CCAGCCTGGA TTTCATACAT GGACTTCTGA
1751  TTAAAAGTGG CAGGTTGTGC ATGTTAAAAA AAAAAAAAAA AAAA
B：氨基酸序列(SEQ ID NO：8)长度：163个氨基酸
1    MKEKLEDMES VLKDLTEEKR KDVLNSLAKC LGKEDIRQDL EQRVSEVLIS GELHMEDPDK
61   PLLSSLFNAA GVLVEARAKA ILDFLDALLE LSEEQQFVAE ALEKGTLPLL KDQVKSVMEQ
121  NWDELASSPP DMDYDPEARI LCALYVVVSI LLELAEGPTS VSS
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：9)
克隆号：  PP4052
起始编码子：1069 ATG      终止编码子：1560 TAA
蛋白质分子量：18158
   1  CTA AGA GAG CTT GGA AAG GGA TAG AGA AGT CTG ACC CAA ATT TGC GGA      48
  49  GCG ACT GAG TGT ATG CTG CCC CCT TTC TGG GCC TTG GCT TCT TCC TCA      96
  97  ATC ATC TAG GCA CAG TCC TAT GAC TGC CTG TTT TTG AGG ATG TGG GAA     144
 145  GGG TCT GCA AAT ACA GTG CTT TCC CAT TGA CAC ACG CTG GTG AGG ATG     192
 193  CAG GCT CCC TGG CAC CAG CAG TGA GGG CTC AGA TTG CAA GAG TAA AAA     240
 241  CTT CCA TCA CTG GGA AGA GAA GTC TGC AGG GGA CTG GAG GTG ATC TGA     288
 289  AGA TTC TGA AAT AAC TCT TCC TCT CTC TGC AGA GAA GGA TGG TGC TTC     336
 337  ATC CTG TTT AGG TAA GGG TGA TAG CCA AGT GTG TTC AGG GTG GCT GCA     384
 385  CCA ACC CAC CCT GAG TCC ATG TGG CTC AAG ACT GCT GCT CAG GTG GGG     432
 433  TCA GCT GAG TGG GTA GGA AGT CGG GAG GCA CTG CCT AGC AGG TTT CAA     480
 481  CTT TAG TCT GGA GGC TGC ATC TGT CTC CTC TAA ACA CAG TGG TTC TCA     528
 529  TTG GTT ATA CCC CAA AAT CAC ACC AGG AAA CTT TAA AAC TAG TGA CGA     576
 577  CTG AGT CCC GTC TCC AGA AAC TCT GAC TTA ATT GTG GGG GTG TGG CCT     624
 625  GGA CAT CAG GAT TTG TAA TAA CTC CTC AGG TGA TTC TCA TGT AGT CAA     672
 673  GGT TGA GAA CCA CTG CTT TAA CTT TCT CCA AAT CCT AAT TAC TTC TAG     720
 721  TGT GGC CTG AGG ACT GCA CTT TGA ATG GCA AGG GCC AAA TAA CCA AGT     768
 769  TTT TGT TTT TTT CCA GGA AGT GGA GAA GAA TTT GGG GTT GGG ACT AGA     816
 817  CTG GGG GTG AGC TGG GGA GAT GGA AGA TGG AAG TGG GGT CAG TGG GAG     864
 865  GCA ATG ATG GTA GGT ATC TTG GAA GAA GGA TGC TTA ATT TTA ACA CGG     912
 913  AAA GAC TGG AAG AAG GGA AGA TAC AAA GAG GTG GTC TCC AGA AGA CAG     960
 961  TCA GAC AAA TAA CAG AGC CTT AGA AAT AAA ACC TTT TGG GCT GGG TGG    1008
1009  CCC AGG TTC TCA ATT GCT GCC TCT ACA GGA AAG TCT TTG GGT TCG GAG    1056
1057  GAT TCC AGA AAC ATG AAG GAG AAG TTG GAG GAC ATG GAG AGT GTC CTC    1104
   1                  Met Lys Glu Lys Leu Glu Asp Met Glu Ser Val Leu      12
1105  AAG GAC CTG ACA GAG GAG AAG AGA AAA GAT GTG CTA AAC TCC CTC GCT    1152
  13  Lys Asp Leu Thr Glu Glu Lys Arg Lys Asp Val Leu Asn Ser Leu Ala      28
1153  AAG TGC CTC GGC AAG GAG GAT ATT CGG CAG GAT CTA GAG CAA AGA GTA    1200
  29  Lys Cys Leu Gly Lys Glu Asp Ile Arg Gln Asp Leu Glu Gln Arg Val      44
1201  TCT GAG GTC CTG ATT TCC GGG GAG CTA CAC ATG GAG GAC CCA GAC AAG    1248
  45  Ser Glu Val Leu Ile Ser Gly Glu Leu His Met Glu Asp Pro Asp Lys      60
1249  CCT CTC CTA AGC AGC CTT TTT AAT GCT GCT GGG GTC TTG GTA GAA GCG    1296
  61  Pro Leu Leu Ser Ser Leu Phe Asn Ala Ala Gly Val Leu Val Glu Ala      76
1297  CGT GCA AAA GCC ATT CTG GAC TTC CTG GAT GCC CTG CTA GAG CTG TCT    1344
  77  Arg Ala Lys Ala Ile Leu Asp Phe Leu Asp Ala Leu Leu Glu Leu Ser      92
1345  GAA GAG CAG CAG TTT GTG GCT GAG GCC CTG GAG AAG GGG ACC CTT CCT    1392
  93  Glu Glu Gln Gln Phe Val Ala Glu Ala Leu Glu Lys Gly Thr Leu Pro     108
1393  CTG TTG AAG GAC CAG GTG AAA TCT GTC ATG GAG CAG AAC TGG GAT GAG    1440
 109  Leu Leu Lys Asp Gln Val Lys Ser Val Met Glu Gln Asn Trp Asp Glu     124
1441  CTG GCC AGC AGT CCT CCT GAC ATG GAC TAT GAC CCT GAG GCA CGA ATT    1488
 125  Leu Ala Ser Ser Pro Pro Asp Met Asp Tyr Asp Pro Glu Ala Arg Ile     140
1489  CTC TGT GCG CTG TAT GTT GTT GTC TCT ATC CTG CTG GAG CTG GCT GAG    1536
 141  Leu Cys Ala Leu Tyr Val Val Val Ser Ile Leu Leu Glu Leu Ala Glu     156
1537  GGG CCT ACC TCT GTC TCT TCC TAA CTA CAA AAG CCC TTT CTC CCC ACA    1584
 157  Gly Pro Thr Ser Val Ser Ser ***                                     164
1585  AGC CTC TGG GTT TTC CCT TTA CCA GTC TGT CCT CAC TGC CAT CGC CAC    1632
1633  TAC CAT CCT GTC ACC AGT GGG ACC TCT TTA AAA CAA GCA GCC AAC CAT    1680
1681  TCT TTG ATG TAT CCC ATT CGC TCC ATG TTA ACA TCC AAA ACC AGC CTG    1728
1729  GAT TTC ATA CAT GGA CTT CTG ATT AAA AGT GGC AGG TTG TGC ATG TTA    1776
1777  AAA AAA AAA AAA AAA AAA                                            1794
4.PP4068蛋白
A：核苷酸序列(SEQ ID NO：10)长度：1949bp
   1  GGAAGGCAAA GGTAGAGCAA CTGGATCTCT GGCTCTCCAC ATAGCTTCTG
  51  ATCTCAGACC TTACTAAAAT GCTTTCTGGG CCCAAGGACA AAGCTCACAT
 101  GAACAAATGA TTTTGAGTCA TGAATGAAAA ATCTTGCTCT TTCCATAGTA
 151  AAGAAGAATT AAGAGATGGA CAGGGTGAAA GATTGTCTGC TGGATATTCT
 201  CCATCATATG ACAAGGACAA GAGTGTTCTG GCTTTCAGAG GAATCCCTAT
 251  CTCAGAGTTG AAGAACCATG GCATTCTCCA GGCTCTGACC ACAGAAGCTT
 301  ATGAATGGGA GCCACGTGTT GTGAGTACAG AGGTGGTCAG AGCCCAAGAA
 351  GAATGGGAAG CTGTGGACAC CATCCAGCCA GAGACAGGGA GCCAAGCTAG
 401  CTCAGAGCAG CCTGGGCAGC TAATCTCCTT CGGTGAGGCC CTGCAGCACT
 451  TCCAGACTGT GGACCTTTCC CCCTTCAAGA AAAGAATCCA GCCAACTATT
 501  CGAAGGACTG GGCTCGCCGC CCTCCGACAC TACCTCTTCG GGCCTCCAAA
 551  GCTCCACCAG CGCCTTCGGG AAGAAAGGGA CTTGGTCCTG ACCATTGCTC
 601  AGTGAGCGAA TCCAGCCACA GACCTGAGAG GCGCAGGCTT CCTTGCCCTC
 651  CTGCATCTGC TCTACCTGGT GATGGACTCA AAGACCTTGC CGATGGCGCA
 701  GGAGATTTTC CGCCTGTCTC GTCACCACAT CCAGCAATTC CCTTTCTGTT
 751  TGATGTCCGT GAACATCACC CACATTGCCA TCCAGGCCTT GAGAGAGGAG
 801  TGTCTCTCCA GAGAGTGTAA TCGGCAGCAG AAGGTCATCC CCGTGGTGAA
 851  CAGCTTCTAT GCCGCCACAT TCCTCCACCT CGCACATGTC TGGAGGACAC
 901  AGCGGAAGAC CATCTCAGAC TCGGGCTTTG TCCTCAAAGA GTTGGAAGTA
 951  TTGGCCAAGA AGAGCCCACG GCGGCTGCTC AAGACCCTGG AGCTGTACTT
1001  GGCCAGGGTG TCAAAGGGAC AGGCCTCCTT GTTGGGAGCA CAGAAGTGCT
1051  ATGGGCCAGA AGCCCCTCCC TTCAAGGATC TCACCTTCAC AGGTGAGAGT
1101  GACCTGCAGT CTCACTCATC CGAAGGCGTA TGGCTGATCT GACCTCCGAG
1151  ATGAATGGAG GCTTAAAGGC TGAGCTGCAG GGGCTTTCAG GGGGTCAGTG
1201  GAGCCATGTC AGGAGCCTGG CCAGGCCGCA CCCCTTGCTG TCTCAGCAGA
1251  TGGGATATAG GAAGCTCCTG GGCTTAGCTG TGGGAAGCCA AGTACCCTCA
1301  CCGGCATGGG ACATGAGGGG CAGCTAGACT TCACCCCCTT CCCGCAGACC
1351  TGCCTCCAGA GCAAGGAGAA TTCTGCCTTA ATCTGTTGGG CTCCAGTCTC
1401  CGGGTTGAAT TCCAGTGTAT CCCACTGGGA GTGAATGGAT CATGAGGTGG
1451  GATGGCCCCA TCTGGATGTT CTGCAGATCC CCACATGGGA GGAGATTCCC
1501  AAGTAGAGGC AGCCAGAATT CTGACTCCCT GGCAGCAGCA GGGCTTTCAG
1551  GCACCAGTGT CTGTGTTGTT AGAACTCAGA GGAAGAGGCA GGGGCAGCAG
1601  CCGACAGGGG GCAGCATGAC CCAAGCAAGG GGCCTGAGGC CTCAGTGGGG
1651  GTAGGGCAAG GAGGTACCTC ACAGGTGGGT GTGAGGCCCC CTCTGGAGTT
1701  TCTGGCCATT CACTTACCCA CTCTCTTCTC CCCCTGACCC CCGCTCCATT
1751  GTTTATGATG GAAAAACGGA CATTTGGCTA GGTGTCTCTC ACGGCTGCTC
1801  CATCCTAGCC CCCACAAGCT GGGGCTTCCT CCTGTAGATG CTGTGCATGC
1851  CCCATGATGA GTTTCTGGCC TAATTGAGGG AAGGAGGAAA TTCATACCAG
1901  CAGTTTTCAA ATAAAAGAAT TGTTCTAATT AAAAAAAAAA AAAAAAAAA
B：氨基酸序列(SEQ ID NO：11)长度：161个氨基酸
  1  MNEKSCSFHS KEELRDGQGE RLSAGYSPSY DKDKSVLAFR GIPISELKNH GILQALTTEA
 61  YEWEPRVVST EVVRAQEEWE AVDTIQPETG SQASSEQPGQ LISFGEALQH FQTVDLSPFK
121  KRIQPTIRRT GLAALRHYLF GPPKLHQRLR EERDLVLTIA Q
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：12)
克隆号：PP4068
起始编码子：120 ATG                   终止编码子：605 TGA
蛋白质分子量：18261
  1   GG AAG GCA AAG GTA GAG CAA CTG GAT CTC TGG CTC TCC ACA TAG CTT       47
 48  CTG ATC TCA GAC CTT ACT AAA ATG CTT TCT GGG CCC AAG GAC AAA GCT       95
 96  CAC ATG AAC AAA TGA TTT TGA GTC ATG AAT GAA AAA TCT TGC TCT TTC      143
  1                                  Met Asn Glu Lys Ser Cys Ser Phe        8
144  CAT AGT AAA GAA GAA TTA AGA GAT GGA CAG GGT GAA AGA TTG TCT GCT      191
  9  His Ser Lys Glu Glu Leu Arg Asp Gly Gln Gly Glu Arg Leu Ser Ala       24
192  GGA TAT TCT CCA TCA TAT GAC AAG GAC AAG AGT GTT CTG GCT TTC AGA      239
 25  Gly Tyr Ser Pro Ser Tyr Asp Lys Asp Lys Ser Val Leu Ala Phe Arg       40
240  GGA ATC CCT ATC TCA GAG TTG AAG AAC CAT GGC ATT CTC CAG GCT CTG      287
 41  Gly Ile Pro Ile Ser Glu Leu Lys Asn His Gly Ile Leu Gln Ala Leu       56
288  ACC ACA GAA GCT TAT GAA TGG GAG CCA CGT GTT GTG AGT ACA GAG GTG      335
 57  Thr Thr Glu Ala Tyr Glu Trp Glu Pro Arg Val Val Ser Thr Glu Val       72
336  GTC AGA GCC CAA GAA GAA TGG GAA GCT GTG GAC ACC ATC CAG CCA GAG      383
 73  Val Arg Ala Gln Glu Glu Trp Glu Ala Val Asp Thr Ile Gln Pro Glu       88
384  ACA GGG AGC CAA GCT AGC TCA GAG CAG CCT GGG CAG CTA ATC TCC TTC      431
 89  Thr Gly Ser Gln Ala Ser Ser Glu Gln Pro Gly Gln Leu Ile Ser Phe      104
432  GGT GAG GCC CTG CAG CAC TTC CAG ACT GTG GAC CTT TCC CCC TTC AAG      479
105  Gly Glu Ala Leu Gln His Phe Gln Thr Val Asp Leu Ser Pro Phe Lys      120
480  AAA AGA ATC CAG CCA ACT ATT CGA AGG ACT GGG CTC GCC GCC CTC CGA      527
121  Lys Arg Ile Gln Pro Thr Ile Arg Arg Thr Gly Leu Ala Ala Leu Arg      136
528  CAC TAC CTC TTC GGG CCT CCA AAG CTC CAC CAG CGC CTT CGG GAA GAA      575
137  His Tyr Leu Phe Gly Pro Pro Lys Leu His Gln Arg Leu Arg Glu Glu      152
576  AGG GAC TTG GTC CTG ACC ATT GCT CAG TGA GCG AAT CCA GCC ACA GAC      623
153  Arg Asp Leu Val Leu Thr Ile Ala Gln ***                              162
624  CTG AGA GGC GCA GGC TTC CTT GCC CTC CTG CAT CTG CTC TAC CTG GTG      671
672  ATG GAC TCA AAG ACC TTG CCG ATG GCG CAG GAG ATT TTC CGC CTG TCT      719
720  CGT CAC CAC ATC CAG CAA TTC CCT TTC TGT TTG ATG TCC GTG AAC ATC      767
768  ACC CAC ATT GCC ATC CAG GCC TTG AGA GAG GAG TGT CTC TCC AGA GAG      815
816  TGT AAT CGG CAG CAG AAG GTC ATC CCC GTG GTG AAC AGC TTC TAT GCC      863
 864  GCC ACA TTC CTC CAC CTC GCA CAT GTC TGG AGG ACA CAG CGG AAG ACC     911
 912  ATC TCA GAC TCG GGC TTT GTC CTC AAA GAG TTG GAA GTA TTG GCC AAG     959
 960  AAG AGC CCA CGG CGG CTG CTC AAG ACC CTG GAG CTG TAC TTG GCC AGG    1007
1008  GTG TCA AAG GGA CAG GCC TCC TTG TTG GGA GCA CAG AAG TGC TAT GGG    1055
1056  CCA GAA GCC CCT CCC TTC AAG GAT CTC ACC TTC ACA GGT GAG AGT GAC    1103
1104  CTG CAG TCT CAC TCA TCC GAA GGC GTA TGG CTG ATC TGA CCT CCG AGA    1151
1152  TGA ATG GAG GCT TAA AGG CTG AGC TGC AGG GGC TTT CAG GGG GTC AGT    1199
1200  GGA GCC ATG TCA GGA GCC TGG CCA GGC CGC ACC CCT TGC TGT CTC AGC    1247
1248  AGA TGG GAT ATA GGA AGC TCC TGG GCT TAG CTG TGG GAA GCC AAG TAC    1295
1296  CCT CAC CGG CAT GGG ACA TGA GGG GCA GCT AGA CTT CAC CCC CTT CCC    1343
1344  GCA GAC CTG CCT CCA GAG CAA GGA GAA TTC TGC CTT AAT CTG TTG GGC    1391
1392  TCC AGT CTC CGG GTT GAA TTC CAG TGT ATC CCA CTG GGA GTG AAT GGA    1439
1440  TCA TGA GGT GGG ATG GCC CCA TCT GGA TGT TCT GCA GAT CCC CAC ATG    1487
1488  GGA GGA GAT TCC CAA GTA GAG GCA GCC AGA ATT CTG ACT CCC TGG CAG    1535
1536  CAG CAG GGC TTT CAG GCA CCA GTG TCT GTG TTG TTA GAA CTC AGA GGA    1583
1584  AGA GGC AGG GGC AGC AGC CGA CAG GGG GCA GCA TGA CCC AAG CAA GGG    1631
1632  GCC TGA GGC CTC AGT GGG GGT AGG GCA AGG AGG TAC CTC ACA GGT GGG    1679
1680  TGT GAG GCC CCC TCT GGA GTT TCT GGC CAT TCA CTT ACC CAC TCT CTT    1727
1728  CTC CCC CTG ACC CCC GCT CCA TTG TTT ATG ATG GAA AAA CGG ACA TTT    1775
1776  GGC TAG GTG TCT CTC ACG GCT GCT CCA TCC TAG CCC CCA CAA GCT GGG    1823
1824  GCT TCC TCC TGT AGA TGC TGT GCA TGC CCC ATG ATG AGT TTC TGG CCT    1871
1872  AAT TGA GGG AAG GAG GAA ATT CAT ACC AGC AGT TTT CAA ATA AAA GAA    1919
1920  TTG TTC TAA TTA AAA AAA AAA AAA AAA AAA                            1949
5.PP4135蛋白
A：核苷酸序列(SEQ ID NO：13)长度：1585bp
   1  CATACTTGGT CTATCTTCTA CTTTGTCTTC TCTTAGGACC CAAGGTCTCT
  51  TAGCACAAAC ACTGCCTCTT GAGTTCCCAG TGCATCTGTA TCAATCTGGA
 101  GATTACGTCC TCATCAAAAG CTGGAAAGAA GAAAAACTCG AACCAACCTG
 151  GGAGACCTTA TCTAGTGCCC CTAACCACTG AGACAGCAGT CTGGACCGTT
 201  AAGAAAGGGT AGACCCATCA CACTCAGGTG AAAAAGGCAT GACCCCCTTT
 251  GGAGGCATAG GTTGTCACTC CCGGGCCAAC ACCTTCCAAA CTAATATTCA
 301  AAAAAACTTA ACCTGTCTAA TTTGCTTCCT CTTTCTTTCG TTAGCTACCC
 351  AGGAACATTT TATTTTATCA ATGTAACCTG ATCATCGTTT CCTCAAACAA
 401  TTACATTTGA TGCTTGTCTT GTTATGCCCT GTGGGGACCT ACAAACCCAA
 451  AGGCAACTAG CCTCTTCAGG CAATAACATA CAGGACATAG GAATGGGCAA
 501  AGACTTCATG ACTAAAACAC CAAAAGCAAC AGCAACAAAA GCCAAAATTG
 551  ACAAATGGGA TCTAATTAAA CTAAAGAGAT TCTGCGCAGC AAAGGAAACT
 601  ATCATCAGAG TGAACAGGCA ACCTACAGAA TGGGAGAAAA TTTTTGCAAT
 651  CTATCCATTT GACAAAGGGC TAATATCCAG AATCTATAAA GAACTTAAAT
 701  TTACAAGAAA AAAACAACCC CATCAAAAAG CGGGCGAAGG ATATGAACAG
 751  ACACTTCTCC AAAGAAGACA TTTATGCAGC CAACAAACAT GAAAAATAGC
 801  TGATCATCAC TGGTCATTAT AGAAATGCAA ATCAAAACCA CAGTAAGATA
 851  CTAACTCATG CCAGTTAGAA TGGCGATCAT TAAAAAGTCA GGAAACAACA
 901  GATGCTGGAG AGGATGTGCA GAAATAGGAA TGCTTTTTAT ACTGTTGGTG
 951  AAAGTGTAAA TTAGTTCAAC CATTGTGGAA GACAGTGTGG CGATTCCTCA
1001  AGGATCTATA GAACCAGAAC TACCACATGA CCCAGCAATC CCATTACTGG
1051  GTATATACCC AAAGGATTAT ACATCATTCT GCTATAAAGA CACATGCACA
1101  CGTACGTTTA TTGCAGCACT ATTTACAATA GCAAAGACTT GGAATCAACC
1151  CAAATCCCCG TCAATGATAG ACTGGATAAA GACAATGTGG CACTTATACA
1201  CCATGGAATA CTATGCAGCC AAAAAAAGGA TGAATTCATG TCCTTTGCAG
1251  CGACATGGAT GAAGCTGAAA ACCATCATTC TCAGCAAACT AACACGAGAA
1301  CAGAAAACCA AACACTACAT GTTCTCACTC ATAAGTGGGA GTTGAACAAT
1351  GAGAACACAT GGACACACGG AGGGGAACAC CACACACCAG GGCCTGTCGG
1401  CGGGTGGGGA GGCTAGGGGA GGGATAGCAT TAGGAGAAAT ACCTAATGTA
1451  GATGACAGGT TGATGGGTCT GACAAACCAC CATGACACGT GTATACCTAT
1501  GTAATGCAAC TGCACATTTT GCTCATGTAC CCCAGAACTT AAACTATAAT
1551  TAAAAACACA TAATTTCAAA AAAAAAAAAA AAAAA
B：氨基酸序列(SEQ ID NO：14)长度：122个氨基酸
  1  MPCGDLQTQR QLASSGNNIQ DIGMGKDFMT KTPKATATKA KIDKWDLIKL KRFCAAKETI
 61  IRVNRQPTEW EKIFAIYPFD KGLISRIYKE LKFTRKKQPH QKAGEGYEQT LLQRRHLCSQ
121  QT
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：15)
克隆号：PP424
起始编码子：424 ATG                   终止编码子：792 TGA
蛋白质分子量：14172
  1  CAT ACT TGG TCT ATC TTC TAC TTT GTC TTC TCT TAG GAC CCA AGG TCT     48
 49  CTT AGC ACA AAC ACT GCC TCT TGA GTT CCC AGT GCA TCT GTA TCA ATC     96
 97  TGG AGA TTA CGT CCT CAT CAA AAG CTG GAA AGA AGA AAA ACT CGA ACC    144
145  AAC CTG GGA GAC CTT ATC TAG TGC CCC TAA CCA CTG AGA CAG CAG TCT    192
193  GGA CCG TTA AGA AAG GGT AGA CCC ATC ACA CTC AGG TGA AAA AGG CAT    240
241  GAC CCC CTT TGG AGG CAT AGG TTG TCA CTC CCG GGC CAA CAC CTT CCA    288
289  AAC TAA TAT TCA AAA AAA CTT AAC CTG TCT AAT TTG CTT CCT CTT TCT    336
337  TTC GTT AGC TAC CCA GGA ACA TTT TAT TTT ATC AAT GTA ACC TGA TCA    384
385  TCG TTT CCT CAA ACA ATT ACA TTT GAT GCT TGT CTT GTT ATG CCC TGT    432
 1                                                       Met Pro Cys      3
433  GGG GAC CTA CAA ACC CAA AGG CAA CTA GCC TCT TCA GGC AAT AAC ATA    480
 4   Gly Asp Leu Gln Thr Gln Arg Gln Leu Ala Ser Ser Gly Asn Asn Ile     19
481  CAG GAC ATA GGA ATG GGC AAA GAC TTC ATG ACT AAA ACA CCA AAA GCA    528
 20  Gln Asp Ile Gly Met Gly Lys Asp Phe Met Thr Lys Thr Pro Lys Ala     35
529  ACA GCA ACA AAA GCC AAA ATT GAC AAA TGG GAT CTA ATT AAA CTA AAG    576
 36  Thr Ala Thr Lys Ala Lys Ile Asp Lys Trp Asp Leu Ile Lys Leu Lys     51
577  AGA TTC TGC GCA GCA AAG GAA ACT ATC ATC AGA GTG AAC AGG CAA CCT    624
 52  Arg Phe Cys Ala Ala Lys Glu Thr Ile Ile Arg Val Asn Arg Gln Pro     67
625  ACA GAA TGG GAG AAA ATT TTT GCA ATC TAT CCA TTT GAC AAA GGG CTA    672
 68  Thr Glu Trp Glu Lys Ile Phe Ala Ile Tyr Pro Phe Asp Lys Gly Leu     83
673  ATA TCC AGA ATC TAT AAA GAA CTT AAA TTT ACA AGA AAA AAA CAA CCC    720
 84  Ile Ser Arg Ile Tyr Lys Glu Leu Lys Phe Thr Arg Lys Lys Gln Pro     99
721  CAT CAA AAA GCG GGC GAA GGA TAT GAA CAG ACA CTT CTC CAA AGA AGA    768
100  His Gln Lys Ala Gly Glu Gly Tyr Glu Gln Thr Leu Leu Gln Arg Arg    115
769  CAT TTA TGC AGC CAA CAA ACA TGA AAA ATA GCT GAT CAT CAC TGG TCA    816
116  His Leu Cys Ser Gln Gln Thr ***                                    123
 817  TTA TAG AAA TGC AAA TCA AAA CCA CAG TAA GAT ACT AAC TCA TGC CAG     864
 865  TTA GAA TGG CGA TCA TTA AAA AGT CAG GAA ACA ACA GAT GCT GGA GAG     912
 913  GAT GTG CAG AAA TAG GAA TGC TTT TTA TAC TGT TGG TGA AAG TGT AAA     960
 961  TTA GTT CAA CCA TTG TGG AAG ACA GTG TGG CGA TTC CTC AAG GAT CTA    1008
1009  TAG AAC CAG AAC TAC CAC ATG ACC CAG CAA TCC CAT TAC TGG GTA TAT    1056
1057  ACC CAA AGG ATT ATA CAT CAT TCT GCT ATA AAG ACA CAT GCA CAC GTA    1104
1105  CGT TTA TTG CAG CAC TAT TTA CAA TAG CAA AGA CTT GGA ATC AAC CCA    1152
1153  AAT CCC CGT CAA TGA TAG ACT GGA TAA AGA CAA TGT GGC ACT TAT ACA    1200
1201  CCA TGG AAT ACT ATG CAG CCA AAA AAA GGA TGA ATT CAT GTC CTT TGC    1248
1249  AGC GAC ATG GAT GAA GCT GAA AAC CAT CAT TCT CAG CAA ACT AAC ACG    1296
1297  AGA ACA GAA AAC CAA ACA CTA CAT GTT CTC ACT CAT AAG TGG GAG TTG    1344
1345  AAC AAT GAG AAC ACA TGG ACA CAC GGA GGG GAA CAC CAC ACA CCA GGG    1392
1393  CCT GTC GGC GGG TGG GGA GGC TAG GGG AGG GAT AGC ATT AGG AGA AAT    1440
1441  ACC TAA TGT AGA TGA CAG GTT GAT GGG TCT GAC AAA CCA CCA TGA CAC    1488
1489  GTG TAT ACC TAT GTA ATG CAA CTG CAC ATT TTG CTC ATG TAC CCC AGA    1536
1537  ACT TAA ACT ATA ATT AAA AAC ACA TTT TTT CAA AAA AAA AAA AAA AAA    1584
1585  A                                                                  1585
6.PP4189蛋白
A：核苷酸序列(SEQ ID NO：16)长度：1762bp
   1  GAAAAAGGTA GAATTCTTAT GAATGTTTCA TGATCATGTA TGTGTGGTTA
  51  ACGCAGATAC ATTTGGAAGT CGGTTATCAA GGTTGCTCTC CAGCTCAAGG
 101  CCTTTGCCCT TTTTGTCAAA ACCAAAGAAG TTCCAACAAA AAGGAGTTTT
 151  GAATGTAAAG AAAAATTGTG GAAATGCTGT CAGCAGCTAT TCACAGACCA
 201  AACCAGCATC CATAGACATG TGGCAACACA ACATGCTGAT GAAATTTATC
 251  ACCAGACAGC TTCTATTTTA AAGCAACTGG CTGTGACATT GAGCACCTCA
 301  AAGAGTCTTT CGTCTGCAGA TGAAAAGAAC CCTTTAAAAG AGTGCCTTCC
 351  ACATAGCCAT GACGTGTCTG CTTGGCTCCC TGATATAAGC TGCTTTAACC
 401  CTGATGAGCT GATAAGTGGC CAGGGCAGTG AAGAAGGGGA GGTGCTCCTT
 451  TATTACTGCT ACCATGACCT GGAGGATCCC CAATGGATCT GTGCCTGGCA
 501  GACAGCTCTG TGTCAGCACC TGCACCTCAC AGGCAAGGAA TCCATTTATC
 551  CCCAGGTGAA TTTCATAAAG AAGTAGAAAA GTTTTTATCT CAGGCAAATC
 601  AAGAACAAAG TGATACTATC CTTCTTGATT GCAGAAACTT CTATGAAAGC
 651  AAAATAGGAC GATTCCAAGG CTGCTTAGCC CCAGACATCA GGAAATTCAG
 701  TTACTTCCCT AGCTACGTTG ACAAAAATCTAGAACTTTTC AGAGAGAAGA
 751  GAGTGCTGAT GTACTGTACC GGGGGCATCC GCTGTGAGCG GGGTTCAGCC
 801  TACCTCAAAG CCAAGGGAGT GTGCAAGGAG GTGTTCCAGC TCAAGGGTGG
 851  CATCCACAAG TACCTGGAAG AGTTTCCTGA TGGCTTTTAC AAAGGGAAGT
 901  TGTTTGTTTT TGATGAACGC TATGCTCTGT CCTACAACAG TGATGTGGTG
 951  TCAGGTAGGT CAGCACAGGC TCAGAGCCCA AACTGAAATG AAGCACATTG
1001  TCAGTTCACC ATTCTAGAAA AATGACACAG GGAAGACAGG CCAGTGCTCA
1051  TTACTGAGCA CTGAATAAGC AGGGAAAATA AGTACATTGT GCCACCATTT
1101  TCCCAGCTGT GGAGCTGAGA GAACCCTAGC CCAGGAGTCA GGAGGCCTGG
1151  GTTGGGATCC TGGCTTCACC ATTGCTAGCT GGACAAGCCC ATTAACATGG
1201  GGATCATCTC ACCTGCCCTG CCTGCCTGTC TACCTGCCAA GAGCTGTACT
1251  ACTGGGCTAA TTCAGGGCTC TTAACCTGGA ATTGGTACAT AGATTTCAGG
1301  GATTCTGTGA ATTTGGATGG AAAAATAATT GTATCTTTGT TTTCAATAAC
1351  ACCTCACTAA AATGAAGCAT TTCCTTTAGT TATGAATGTA GGCAACAAAG
1401  TACCAGTTGT ATTAATGTAC CTGTGACTTT GTCTTCAGTA GGATTCACAA
1451  TACTTTCATA TCATGTTCTA GTTGCCTCAG ATATCTCAAA ATAGTATTTA
1501  TACTCATCAC TGCTTCAAAA TGAAAATAGT TATTAGGCCC ACCACTAAGA
1551  GTTGATATAT AATGTGTTAA TAAATGGCAC GTCTTATTAT ATATTACAGA
1601  TTTTGAAAAA GAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAACAAAAAA
1651  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA
1701  AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA
1751  AAAAAAAAAA AA
B：氨基酸序列(SEQ ID NO：17)长度：167个氨基酸
  1  MDLCLADSSV SAPAPHRQGI HLSPGEFHKE VEKFLSQANQ EQSDTILLDC RNFYESKIGR
 61  FQGCLAPDIR KFSYFPSYVD KNLELFREKR VLMYCTGGIR CERGSAYLKA KGVCKEVFQL
121  KGGIHKYLEE FPDGFYKGKL FVFDERYALS YNSDVVSGRS AQAQSPN
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：18)
克隆号：PP4198
起始编码子：483 ATG                  终止编码子：986 TGA
蛋白质分子量：19000
  1   GA AAA AGG TAG AAT TCT TAT GAA TGT TTC ATG ATC ATG TAT GTG TGG     47
 48  TTA ACG CAG ATA CAT TTG GAA GTC GGT TAT CAA GGT TGC TCT CCA GCT     95
 96  CAA GGC CTT TGC CCT TTT TGT CAA AAC CAA AGA AGT TCC AAC AAA AAG    143
144  GAG TTT TGA ATG TAA AGA AAA ATT GTG GAA ATG CTG TCA GCA GCT ATT    191
192  CAC AGA CCA AAC CAG CAT CCA TAG ACA TGT GGC AAC ACA ACA TGC TGA    239
240  TGA AAT TTA TCA CCA GAC AGC TTC TAT TTT AAA GCA ACT GGC TGT GAC    287
288  ATT GAG CAC CTC AAA GAG TCT TTC GTC TGC AGA TGA AAA GAA CCC TTT    335
336  AAA AGA GTG CCT TCC ACA TAG CCA TGA CGT GTC TGC TTG GCT CCC TGA    383
384  TAT AAG CTG CTT TAA CCC TGA TGA GCT GAT AAG TGG CCA GGG CAG TGA    431
432  AGA AGG GGA GGT GCT CCT TTA TTA CTG CTA CCA TGA CCT GGA GGA TCC    479
480  CCA ATG GAT CTG TGC CTG GCA GAC AGC TCT GTG TCA GCA CCT GCA CCT    527
  1      Met Asp Leu Cys Leu Ala Asp Ser Ser Val Ser Ala Pro Ala Pro     15
528  CAC AGG CAA GGA ATC CAT TTA TCC CCA GGT GAA TTT CAT AAA GAA GTA    575
 16  His Arg Gln Gly Ile His Leu Ser Pro Gly Glu Phe His Lys Glu Val     31
576  GAA AAG TTT TTA TCT CAG GCA AAT CAA GAA CAA AGT GAT ACT ATC CTT    623
 32  Glu Lys Phe Leu Ser Gln Ala Ash Gln Glu Gln Ser Asp Thr Ile Leu     47
624  CTT GAT TGC AGA AAC TTC TAT GAA AGC AAA ATA GGA CGA TTC CAA GGC    671
 48  Leu Asp Cys Arg Asn Phe Tyr Glu Ser Lys Ile Gly Arg Phe Gln Gly     63
672  TGC TTA GCC CCA GAC ATC AGG AAA TTC AGT TAG TTC CCT AGC TAC GTT    719
 64  Cys Leu Ala Pro Asp Ile Arg Lys Phe Ser Tyr Phe Pro Ser Tyr Val     79
720  GAC AAA AAT CTA GAA CTT TTC AGA GAG AAG AGA GTG CTG ATG TAC TGT    767
 80  Asp Lys Asn Leu Glu Leu Phe Arg Glu Lys Arg Val Leu Met Tyr Cys     95
768  ACC GGG GGC ATC CGC TGT GAG CGG GGT TCA GCC TAC CTC AAA GCC AAG    815
 96  Thr Gly Gly Ile Arg Cys Glu Arg Gly Ser Ala Tyr Leu Lys Ala Lys    111
816  GGA GTG TGC AAG GAG GTG TTC CAG CTC AAG GGT GGC ATC CAC AAG TAC    863
112  Gly Val Cys Lys Glu Val Phe Gln Leu Lys Gly Gly Ile His Lys Tyr    127
864  CTG GAA GAG TTT CCT GAT GGC TTT TAC AAA GGG AAG TTG TTT GTT TTT    911
128  Leu Glu Glu Phe Pro Asp Gly Phe Tyr Lys Gly Lys Leu Phe Val Phe    143
 912  GAT GAA CGC TAT GCT CTG TCC TAC AAC AGT GAT GTG GTG TCA GGT AGG     959
 144  Asp Glu Arg Tyr Ala Leu Ser Tyr Asn Ser Asp Val Val Ser Gly Arg     159
 960  TCA GCA CAG GCT CAG AGC CCA AAC TGA AAT GAA GCA CAT TGT CAG TTC    1007
 160  Ser Ala Gln Ala Gln Ser Pro Asn ***                                 168
1008  ACC ATT CTA GAA AAA TGA CAC AGG GAA GAC AGG CCA GTG CTC ATT ACT    1055
1056  GAG CAC TGA ATA AGC AGG GAA AAT AAG TAC ATT GTG CCA CCA TTT TCC    1103
1104  CAG CTG TGG AGC TGA GAG AAC CCT AGC CCA GGA GTC AGG AGG CCT GGG    1151
1152  TTG GGA TCC TGG CTT CAC CAT TGC TAG CTG GAC AAG CCC ATT AAC ATG    1199
1200  GGG ATC ATC TCA CCT GCC CTG CCT GCC TGT CTA CCT GCC AAG AGC TGT    1247
1248  ACT ACT GGG CTA ATT CAG GGC TCT TAA CCT GGA ATT GGT ACA TAG ATT    1295
1296  TCA GGG ATT CTG TGA ATT TGG ATG GAA AAA TAA TTG TAT CTT TGT TTT    1343
1344  CAA TAA CAC CTC ACT AAA ATG AAG CAT TTC CTT TAG TTA TGA ATG TAG    1391
1392  GCA ACA AAG TAC CAG TTG TAT TAA TGT ACC TGT GAC TTT GTC TTC AGT    1439
1440  AGG ATT CAC AAT ACT TTC ATA TCA TGT TCT AGT TGC CTC AGA TAT CTC    1487
1488  AAA ATA GTA TTT ATA CTC ATC ACT GCT TCA AAA TGA AAA TAG TTA TTA    1535
1536  GGC CCA CCA CTA AGA GTT GAT ATA TAA TGT GTT AAT AAA TGG CAC GTC    1583
1584  TTA TTA TAT ATT ACA GAT TTT GAA AAA GAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1631
1632  AAA AAA AAA AAA CAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1679
1680  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA    1727
1728  AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA                     1762
7.PP2500蛋白
A：核苷酸序列(SEQ ID NO：19)长度：2153bp
   1  CTGGGACGGG GGAAAGGAGA CGCTTCTTCC TCTTGCTGCT CTTCTCGTTC
  51  CCGAGATCAG CGGCGGCGGT GACCGCGAGT GGGTCGGCAC CGTCTCCGGC
 101  TCCGGGTGCG AACAATGCTG ACTGATAGCG GAGGCGGCGG CACCTCCTTT
 151  GAGGAGGACC TGGACTCTGT GGCTCCGCGA TCCGCCCCAG CTGGGGCCTC
 201  GGAGCCGCCT CCGCCGGGAG GGGTCGGTCT GGGGATCCGC ACCGTGAGGC
 251  TCTTTGGGGA GGCCGGGCCA GCGTCGGGAG TCGGCAGCAG CGGCGGCGGC
 301  GGCAGCGGCA GCGGTACGGG CGGAGGGGAC GCGGCGCTGG ATTTCAAGTT
 351  GGCGGCTGCC GTGCTGAGGA CCGGGGGTGG AGGTGGTGCC TCTGGCAGTG
 401  ACGAGGACGA AGTGTCCGAG GTTGAATCAT TTATTTTGGA CCAAGAAGAT
 451  CTGGATAACC CAGTGCTTAA AACAACATCA GAGATATTCT TATCAAGTAC
 501  TGCAGAAGGA GCAGACTTAC GCACTGTGGA TCCAGAGACA CAGGCACGAC
 551  TAGAAGCATT GCTAGAAGCA GCAGGAATTG GCAAATTGTC AACTGCTGAT
 601  GGTAAAGCTT TTGCAGATCC TGAGGTACTC CGGAGACTGA CATCCTCAGT
 651  TAGTTGTGCA CTGGATGAAG CTGCTGCTGC ACTGACACGG ATGAAAGCAG
 701  AAAACAGCCA CAATGCAGGA CAAGTGGACA CTCGCAGTCT AGCAGAAGCT
 751  TGTTCAGATG GGGATGTTAA TGCTGTTCGT AAATTGCTAG ATGAAGGCAG
 801  AAGTGTAAAT GAACATACAG AAGAAGGAGA AAGCCTGCTG TGTTTGGCTT
 851  GTTCAGCAGG GTATTATGAA TTAGCACAAG TATTGCTTGC TATGCATGCT
 901  AATGTTGAAG ATCGAGGGAA TAAAGGAGAC ATAACTCCCC TGATGGCAGC
 951  TTCCAGTGGA GGTTACTTAG ATATTGTGAA ATTATTACTT CTTCATGATG
1001  CTGATGTCAA CTCCCAGTCT GCAACAGGAA ACACTGCGCT AACTTATGCA
1051  TGTGCTGGAG GATTTGTTGA CATTGTTAAA GTGCTCCTTA ATGAAGGTGC
1101  AAATATAGAA GATCATAATG AAAATGGACA TACTCCCTTA ATGGAAGCAG
1151  CCAGTGCAGG TCATGTGGAA GTTGCAAGAG TTCTTTTAGA TCATGGTGCA
1201  GGCATCAACA CTCATTCTAA TGAATTCAAA GAAAGTGCTC TAACACTTGC
1251  TTGCTACAAA GGCCATTTGG ATATGGTTCG CTTTCTACTT GAAGCTGGTG
1301  GAGATCAAGA GCACAAAACA GATGAGATGC ACACTGCCTT AATGGAGGCC
1351  TGCATGGATG GACATGTAGA GGTGGCACGT TTGCTTTTGG ATAGTGGTGC
1401  TCAAGTGAAC ATGCCTGCAG ATTCATTTGA ATCTCCATTG ACGCTAGCTG
1451  CCTGTGGAGG ACATGTTGAA TTGGCAGCTC TACTTATTGA AAGGGGAGCA
1501  AATCTTGAAG AAGTTAATGA TGAAGGATAC AGTCCCTTGA TGGAAGCTGC
1551  CCGGGAAGGA CATGAAGAAA TGGTGGCACT ACTCTTAGCA CAAGGAGCAA
1601  ATATAAATGC CCAGACAGAA GAAACTCAAG AAACTGCTCT TACCTTGGCT
1651  TGCTGTGGAG GATTTTCTGA AGTTGCAGAC TTTCTTATTA AGGCAGGGGC
1701  TGATATAGAA CTTGGCTGCT CCACACCTCT GATGGAGGCA TCTCAGGAGG
1751  GACACCTGGA ATTGGTTAAA TATTTGCTGG CTTCTGGCGC TAATGTGCAT
1801  GCTACAACAG CAACAGGAGA CACAGCCTTA ACCTATGCTT GTGAAAATGG
1851  ACATACGGAT GTTGCAGATG TTTTACTTCA AGCAGGGGCT GATTTAGACA
1901  AGCAGGAGGA CATGAAGACT ATTTTGGAGG GCATAGATCC GGCCAAGCAT
1951  CAGGTGAGGG TGGCCTTTGA TGCTTGTAAG CTACTACGTA AAGAATAGAT
2001  GTTGTAGGTA ACCAGAACTC TGGATATCTG AATTCCAGCC AAGAAGTTCC
2051  AGGACCCTGC TGGGTGACAA AGGAAATCCT CTTCAATTGA AAAAGATTAT
2101  GAAGTCCCAA TAAAAAGAGA TTTGTATTGC TAAAAAAAAA AAAAAAAAAA
2151  AAA
B：氨基酸序列(SEQ ID NO：20)长度：627个氨基酸
  1  MLTDSGGGGT SFEEDLDSVA PRSAPAGASE PPPPGGVGLG IRTVRLFGEA GPASGVGSSG
 61  GGGSGSGTGG GDAALDFKLA AAVLRTGGGG GASGSDEDEV SEVESFILDQ EDLDNPVLKT
121  TSEIFLSSTA EGADLRTVDP ETQARLEALL EAAGIGKLST ADGKAFADPE VLRRLTSSVS
181  CALDEAAAAL TRMKAENSHN AGQVDTRSLA EACSDGDVNA VRKLLDEGRS VNEHTEEGES
241  LLCLACSAGY YELAQVLLAM HANVEDRGNK GDITPLMAAS SGGYLDIVKL LLLHDADVNS
301  QSATGNTALT YACAGGFVDI VKVLLNEGAN IEDHNENGHT PLMEAASAGH VEVARVLLDH
361  GAGINTHSNE FKESALTLAC YKGHLDMVRF LLEAGADQEH KTDEMHTALM EACMDGHVEV
421  ARLLLDSGAQ VNMPADSFES PLTLAACGGH VELAALLIER GANLEEVNDE GYTPLMEAAR
481  EGHEEMVALL LAQGANINAQ TEETQETALT LACCGGFSEV ADFLIKAGAD IELGCSTPLM
541  EASQEGHLEL VKYLLASGAN VHATTATGDT ALTYACENGH TDVADVLLQA GADLDKQEDM
601  KTILEGIDPA KHQVRVAFDA CKLLRKE
C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：21)
克隆号：PP2500
起始编码子：115 ATG                  终止编码子：1998 TAG
蛋白质分子量：64908
  1  CTG GGA CGG GGG AAA GGA GAC GCT TCT TCC TCT TGC TGC TCT TCT CGT     48
 49  TCC CGA GAT CAG CGG CGG CGG TGA CCG CGA GTG GGT CGG CAC CGT CTC     96
 97  CGG CTC CGG GTG CGA ACA ATG CTG ACT GAT AGC GGA GGC GGC GGC ACC    144
  1                          Met Leu Thr Asp Ser Gly Gly Gly Gly Thr     10
145  TCC TTT GAG GAG GAC CTG GAC TCT GTG GCT CCG CGA TCC GCC CCA GCT    192
 11  Ser Phe Glu Glu Asp Leu Asp Ser Val Ala Pro Arg Ser Ala Pro Ala     26
193  GGG GCC TCG GAG CCG CCT CCG CCG GGA GGG GTC GGT CTG GGG ATC CGC    240
 27  Gly Ala Ser Glu Pro Pro Pro Pro Gly Gly Val Gly Leu Gly Ile Arg     42
241  ACC GTG AGG CTC TTT GGG GAG GCC GGG CCA GCG TCG GGA GTC GGC AGC    288
 43  Thr Val Arg Leu Phe Gly Glu Ala Gly Pro Ala Ser Gly Val Gly Ser     58
 289  AGC GGC GGC GGC GGC AGC GGC AGC GGT ACG GGC GGA GGG GAC GCG GCG    336
  59  Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Gly Gly Asp Ala Ala     74
 337  CTG GAT TTC AAG TTG GCG GCT GCC GTG CTG AGG ACC GGG GGT GGA GGT    384
  75  Leu Asp Phe Lys Leu Ala Ala Ala Val Leu Arg Thr Gly Gly Gly Gly     90
 385  GGT GCC TCT GGC AGT GAC GAG GAC GAA GTG TCC GAG GTT GAA TCA TTT    432
  91  Gly Ala Ser Gly Ser Asp Glu Asp Glu Val Ser Glu Val Glu Ser Phe    106
 433  ATT TTG GAC CAA GAA GAT CTG GAT AAC CCA GTG CTT AAA ACA ACA TCA    480
 107  Ile Leu Asp Gln Glu Asp Leu Asp Asn Pro Val Leu Lys Thr Thr Ser    122
 481  GAG ATA TTC TTA TCA AGT ACT GCA GAA GGA GCA GAC TTA CGC ACT GTG    528
 123  Glu Ile Phe Leu Ser Ser Thr Ala Glu Gly Ala Asp Leu Arg Thr Val    138
 529  GAT CCA GAG ACA CAG GCA CGA CTA GAA GCA TTG CTA GAA GCA GCA GGA    576
 139  Asp Pro Glu Thr Gln Ala Arg Leu Glu Ala Leu Leu Glu Ala Ala Gly    154
 577  ATT GGC AAA TTG TCA ACT GCT GAT GGT AAA GCT TTT GCA GAT CCT GAG    624
 155  Ile Gly Lys Leu Ser Thr Ala Asp Gly Lys Ala Phe ALa Asp Pro Glu    170
 625  GTA CTC CGG AGA CTG ACA TCC TCA GTT AGT TGT GCA CTG GAT GAA GCT    672
 171  Val Leu Arg Arg Leu Thr Ser Ser Val Ser Cys Ala Leu Asp Glu Ala    186
 573  GCT GCT GCA CTG ACA CGG ATG AAA GCA GAA AAC AGC CAC AAT GCA GGA    720
 187  Ala Ala Ala Leu Thr Arg Met Lys Ala Glu Asn Ser His Asn Ala Gly    202
 721  CAA GTG GAC ACT CGC AGT CTA GCA GAA GCT TGT TCA GAT GGG GAT GTT    768
 203  Gln Val Asp Thr Arg Ser Leu Ala Glu Ala Cys Ser Asp Gly Asp Val    218
 769  AAT GCT GTT CGT AAA TTG CTA GAT GAA GGC AGA AGT GTA AAT GAA CAT    816
 219  Asn Ala Val Arg Lys Leu Leu Asp Glu Gly Arg Ser Val Asn Glu His    234
 817  ACA GAA GAA GGA GAA AGC CTG CTG TGT TTG GCT TGT TCA GCA GGG TAT    864
 235  Thr Glu Glu Gly Glu Ser Leu Leu Cys Leu Ala Cys Ser Ala Gly Tyr    250
 865  TAT GAA TTA GCA CAA GTA TTG CTT GCT ATG CAT GCT AAT GTT GAA GAT    912
 251  Tyr Glu Leu Ala Gln Val Leu Leu Ala Met His Ala Asn Val Glu Asp    266
 913  CGA GGG AAT AAA GGA GAC ATA ACT CCC CTG ATG GCA GCT TCC AGT GGA    960
 267  Arg Gly Asn Lys Gly Asp Ile Thr Pro Leu Met Ala Ala Ser Ser Gly    282
 961  GGT TAC TTA GAT ATT GTG AAA TTA TTA CTT CTT CAT GAT GCT GAT GTC   1008
 283  Gly Tyr Leu Asp Ile Val Lys Leu Leu Leu Leu His Asp Ala Asp Val    298
1009  AAC TCC CAG TCT GCA ACA GGA AAC ACT GCG CTA ACT TAT GCA TGT GCT   1056
 299  Asn Ser Gln Ser Ala Thr Gly Asn Thr Ala Leu Thr Tyr Ala Cys Ala    314
1057  GGA GGA TTT GTT GAC ATT GTT AAA GTG CTC CTT AAT GAA GGT GCA AAT   1104
 315  Gly Gly Phe Val Asp Ile Val Lys Val Leu Leu Asn Glu Gly Ala Asn    330
1105  ATA GAA GAT CAT AAT GAA AAT GGA CAT ACT CCC TTA ATG GAA GCA GCC   1152
 331  Ile Glu Asp His Asn Glu Asn Gly His Thr Pro Leu Met Glu Ala Ala     346
1153  AGT GCA GGT CAT GTG GAA GTT GCA AGA GTT CTT TTA GAT CAT GGT GCA    1200
 347  Ser Ala Gly His Val Glu Val Ala Arg Val Leu Leu Asp His Gly Ala     362
1201  GGC ATC AAC ACT CAT TCT AAT GAA TTC AAA GAA AGT GCT CTA ACA CTT    1248
 363  Gly Ile Asn Thr His Ser Asn Glu Phe Lys Glu Ser Ala Leu Thr Leu     378
1249  GCT TGC TAC AAA GGC CAT TTG GAT ATG GTT CGC TTT CTA CTT GAA GCT    1296
 379  Ala Cys Tyr Lys Gly His Leu Asp Met Val Arg Phe Leu Leu Glu Ala     394
1297  GGT GCA GAT CAA GAG CAC AAA ACA GAT GAG ATG CAC ACT GCC TTA ATG    1344
 395  Gly Ala Asp Gln Glu His Lys Thr Asp Glu Met His Thr Ala Leu Met     410
1345  GAG GCC TGC ATG GAT GGA CAT GTA GAG GTG GCA CGT TTG CTT TTG GAT    1392
 411  Glu Ala Cys Met Asp Gly His Val Glu Val Ala Arg Leu Leu Leu Asp     426
1393  AGT GGT GCT CAA GTG AAC ATG CCT GCA GAT TCA TTT GAA TCT CCA TTG    1440
 427  Ser Gly Ala Gln Val Asn Met Pro Ala Asp Ser Phe Glu Ser Pro Leu     442
1441  ACG CTA GCT GCC TGT GGA GGA CAT GTT GAA TTG GCA GCT CTA CTT ATT    1488
 443  Thr Leu Ala Ala Cys Gly Gly His Val Glu Leu Ala Ala Leu Leu Ile     458
1489  GAA AGG GGA GCA AAT CTT GAA GAA GTT AAT GAT GAA GGA TAC ACT CCC    1536
 459  Glu Arg Gly Ala Asn Leu Glu Glu Val Asn Asp Glu Gly Tyr Thr Pro     474
1537  TTG ATG GAA GCT GCC CGG GAA GGA CAT GAA GAA ATG GTG GCA CTA CTC    1584
 475  Leu Met Glu Ala Ala Arg Glu Gly His Glu Glu Met Val Ala Leu Leu     490
1585  TTA GCA CAA GGA GCA AAT ATA AAT GCC CAG ACA GAA GAA ACT CAA GAA    1632
 491  Leu Ala Gln Gly Ala Asn Ile Asn Ala Gln Thr Glu Glu Thr Gln Glu     506
1633  ACT GCT CTT ACT TTG GCT TGC TGT GGA GGA TTT TCT GAA GTT GCA GAC    1680
 507  Thr Ala Leu Thr Leu Ala Cys Cys Gly Gly Phe Ser Glu Val Ala Asp     522
1681  TTT CTT ATT AAG GCA GGG GCT GAT ATA GAA CTT GGC TGC TCC ACA CCT    1728
 523  Phe Leu Ile Lys Ala Gly Ala Asp Ile Glu Leu Gly Cys Ser Thr Pro     538
1729  CTG ATG GAG GCA TCT CAG GAG GGA CAC CTG GAA TTG GTT AAA TAT TTG    1776
 539  Leu Met Glu Ala Ser Gln Glu Gly His Leu Glu Leu Val Lys Tyr Leu     554
1777  CTG GCT TCT GGC GCT AAT GTG CAT GCT ACA ACA GCA ACA GGA GAC ACA    1824
 555  Leu Ala Ser Gly Ala Asn Val His Ala Thr Thr Ala Thr Gly Asp Thr     570
1825  GCC TTA ACC TAT GCT TGT GAA AAT GGA CAT ACG GAT GTT GCA GAT GTT    1872
 571  Ala Leu Thr Tyr Ala Cys Glu Asn Gly His Thr Asp Val Ala Asp Val     586
1873  TTA CTT CAA GCA GGG GCT GAT TTA GAC AAG CAG GAG GAC ATG AAG ACT    1920
 587  Leu Leu Gln AAa Gly Ala Asp Leu Asp Lys Gln Glu Asp Met Lys Thr     602
1921  ATT TTG GAG GGC ATA GAT CCG GCC AAG CAT CAG GTG AGG GTG GCC TTT    1968
 603  Ile Leu Glu Gly Ile Asp Pro Ala Lys His Gln Val Arg Val Ala Phe     618
1969  GAT GCT TGT AAG CTA CTA CGT AAA GAA TAG ATG TTG TAG GTA ACC AGA    2016
 619  Asp Ala Cys Lys Leu Leu Arg Lys Glu ***                             628
2017  ACT CTG GAT ATC TGA ATT CCA GCC AAG AAG TTC CAG GAC CCT GCT GGG    2064
2065  TGA CAA AGG AAA TCC TCT TCA ATT GAA AAA GAT TAT GAA GTC CCA ATA    2112
2113  AAA AGA GAT TTG TAT TGC TAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA             2153
D.Blastp结果
Query＝PP2500(627个氨基酸)
>SP_IN：Q21920 Q21920 caenorhabditis elegans.r11a8.7 protein.11/1999
             长度＝2606个氨基酸
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相同性＝115/306(37％)，相似性＝168/306(54％)，缺口＝9/306(2％)
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            T  T LT ACA G  DIV++LL EGANIE  ++ G +PL+ AA+AGH  V  VLL + A
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Query：464  LEEVNDEGYTPLMEAAREGHEEMVALLLAQGANINXXXXXXXXXXXXXXCCGGFSEVADF 523
               V     T L  +A +GHE+ V +LL   A ++              C GG+   A
Sbjct：1451 ASPVQQTKDTALTISAEKGHEKFVRMLLNGDAAVD-VRNKKGCTALWLACNGGYLSTAQA 1509
Query：524  LIKAGADIELGCS---TPLMEASQEGHLELVKYLLAS 557
            L++ GAD ++  +   +P+M A ++GH+E+VKY++ S
Sbjct：1510 LLEKGADPDMFDNRKISPMMAAFRKGHVEIVKYMVNS 1546
分值＝160bits(400)，预计值＝3e-38
相同性＝120/400(30％)，相似性＝206/400(51％)，缺口＝32/400(8％)
Query：230 SVNEHTEEGESLLCLACSAGYYELAQVLLAMHANVEDRGNK-GDITPLMAASSGGYLDIV 288
           S++    +  ++L LA   G  +  +    +   ++ RG+K   ITPLM A++     IV
Sbjct：199 SIDSQIVQQNAMLLLAARVGIEQFVEYSHEIGV-MQFRGDKLSKITPLMEAAASSSETIV 257
Query：289 KLLLLHDADVNSQSATG-NTALTYACAGGFVDIVK-VLLNEGANIEDH---NENGHTPLM 343
           +LL    AD N  S    NTAL YA+     D+V+ +L +EG    D    N + H  +M
Sbjct：258 RRLLELGADPNVASIPNCNTALIYAASTDGRDVVREILMTEGPKKPDVYLINNHYHDAMM 317
Query：344 EAASAGHVEVARVLLDHGAG---INTHSNEFKESALTLACYKGHLDMVRFLLEAGADQEH 400
           E A  G  +  +  L+ G     +N    E ++SALTL+  KGH+ +V   +++
Sbjct：318 EVALVGGTDTLKEFLEMGYRPRFLNLRQQE-RDSALTLSAQKGHIKIVTAIMDYYEKNPP 376
Query：401 KTDE--------MHTALMEACMDGHVEVARLLLDSGAQVNMPADSF--ESPLTLAACGGH 450
           +T+E         ++ALMEA M+GH++V +L+L  G   ++  +     SPL +A+ GG+
Sbjct：377 QTEEEKQELCLERYSALMEAAMEGHIDVCKLMLSRGTPADLCTEVTIEPSPLIVASAGGY 436
Query：451 VELAALLIERGANLEEVNDEGYTPLMEAAREGHEE---MVALLLAQGANINXXXXXXXXX 507
            E+  +L+  GA +EE++++  TPLMEA      +   +V LLL++ A ++
Sbjct：437 PEVVEVLLAAGAKIEELSNKKNTPLMEACAGDQGDQAGVVKLLLSKHAEVDVSNPDTGDT 496
Query：508 XXXXXCCGGFSEVADFLIKAGADIELGCSTPLMEASQEGHLELVKYLLASGANVHATTAT 567
                   G+  +   LI+ G D+  G++P++EA++  GHLE ++++LA     H  T
Sbjct：497 PLSLAARNGYIAIMKMLIEKGGDLTAGKTSPIVEAARNGHLECIQFILA-----HCKTIP 551
Query：568 GD---TALTYACENGHTDVADVLLQAGADLDKQEDMKTIL 604
            D    AL  A+G     + + +++AGADL+ ++D +T L
Sbjct：552 QDQLSRALVSAADFGSLLIVEEVIRAGADLNFEQDERTAL 591

Claims (10)

1.一种分离的具有抑癌功能的人多肽，其特征在于，它含有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ IDNO：17、SEQ ID NO：20，所述的多肽对培养的肝癌细胞系7721的克隆形成具有抑制作用。
2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，该多肽的氨基酸序列选自下组：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20。
3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，它选自下组：
(a)编码如权利要求1所述多肽的多核苷酸；
(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。
4.如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：17、SEQ IDNO：20。
5.如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的序列选自下组：
SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：15、SEQID NO：18、SEQ ID NO：21的编码区序列或全长序列。
6.一种载体，其特征在于，它含有权利要求3所述的多核苷酸。
7.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它是选自下组的一种宿主细胞：
(a)用权利要求6所述的载体转化或转导的宿主细胞；
(b)用权利要求3所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。
8.一种具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽的制备方法，其特征在于，该方法包含：
(a)在适合表达具有抑癌功能的人蛋白的条件下，培养权利要求7所述的宿主细胞；
(b)从培养物中分离出具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽，所述的多肽对培养的肝癌细胞系7721的克隆形成具有抑制作用。
9.一种能与权利要求1所述的具有抑癌功能的人多肽特异性结合的抗体，其中所述的多肽对培养的肝癌细胞系7721的克隆形成具有抑制作用。
10.一种药物组合物，其特征在于，它含有安全有效量的权利要求1所述的多肽以及药学上可接受的载体。
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