CN116981669A - 嘧啶或吡啶并杂环类腺苷受体抑制剂及其制备方法和用途 - Google Patents

嘧啶或吡啶并杂环类腺苷受体抑制剂及其制备方法和用途 Download PDF

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CN116981669A CN202280012721.7A CN202280012721A CN116981669A CN 116981669 A CN116981669 A CN 116981669A CN 202280012721 A CN202280012721 A CN 202280012721A CN 116981669 A CN116981669 A CN 116981669A
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潘建峰
孙大庆
闫琪
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Shanghai Qilu Pharmaceutical Research and Development Centre Ltd
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Abstract

公开了一种新型嘧啶/吡啶并杂环类腺苷受体抑制剂及其制备方法和用途，其为如式II所示的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物。药物活性数据表明，该类化合物对A2a或/和A2b具有较好的抑制作用，且部分化合物表现出较好的选择性，可以用于治疗与A2a或/和A2b受体相关疾病。

Description

嘧啶或吡啶并杂环类腺苷受体抑制剂及其制备方法和用途
本申请要求申请日为2021/2/5的中国专利申请202110162277.4、申请日为2021/2/9的中国专利申请202110175181.1的优先权、申请日为2021/6/18的中国专利申请202110675861.X的优先权、申请日为2021/6/22的中国专利申请202110694192.0的优先权、申请日为2021/11/3的中国专利申请202111292681.X的优先权、申请日为2021/11/3的中国专利申请202111293263.2的优先权、申请日为2022/1/21的中国专利申请202210071111.6的优先权。本申请引用上述中国专利申请的全文。
技术领域
本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一类新型嘧啶/吡啶并杂环类化合物，其可以作为A2a或/和A2b腺苷受体抑制剂，用于治疗与A2a或/和A2b受体相关疾病。
背景技术
腺苷(Adenosine，ADO)作为一种神经递质和调质，广泛分布于神经***、心血管***、肾脏、胃肠道等组织，调节着各种重要的生理功能。ADO通过与其特异的受体A1R、A2aR、A2bR和A3R结合，参与了多种疾病的病理生理过程。在ADO的四种受体中，A1R和A2aR在脑内的分布及数量明显多于另外两种受体，且与ADO的亲和力也更强。
腺苷受体是存在于机体大多数组织细胞表面，A1受体主要存在于脑组织、脊髓和心脏中。心脏中的A1受体分布于心房肌、心室肌、窦房结和房室结细胞表面。腺苷及其类似物通过兴奋A1受体而抑制腺苷酸环化酶(AC)、G蛋白和儿茶酚胺，促进外向钾离子流而产生负性变时、变力和负性传导作用；通过受体后信号转导机制，即激活G蛋白，进而激活磷脂酶C(PLC)，PLC激活磷脂酰肌醇***生成三磷酸肌醇(IP3)和甘油二酯(DG)，DG激活相应蛋白激酶C(PKC)，进而激活ATP敏感性钾通道(KATP)离子流，使心肌产生缺血型预处理(PC)作用；激活窦房结和房室结细胞一氧化氮合成酶，使一氧化氮合成增加，抑制慢反应自律性细胞的内向钙离子流而产生负性变时、负性传导作用于扩血管作用。A2a受体主要分布于脑组织中的多巴胺富集区，其次是肾***部、血管(主动脉和冠状动脉等)内皮细胞、血小板及多形核白细胞膜。A2b受体主要分布于消化***。腺苷及其类似物与A2受体结合后，可激活AC，使环磷酸腺苷(cAMP)形成增加，进而扩张血管平滑肌和抑制中性粒细胞的毒性作用。腺苷A3受体广泛分布于大鼠、兔、狗、羊及人体的脾、心、肾等脏器以及大脑的不同区域和炎性细胞的表面。 A3受体与其放射性配基结合后具有抑制AC增加cAMP，产生PC的作用；同时通过百日咳毒素敏感的G蛋白而激活PLC，生成IP3和DG，进而激活PKC，亦产生PC作用；腺苷兴奋A3受体后可促进肥大细胞脱颗粒，增加肥大细胞过敏介质的释放。
根据已经公开文献，A2a拮抗剂已被建议用于管理和治疗例如帕金森氏症以及癌症；A2b的调节已被建议用于管理和治疗例如包括哮喘在内的慢性肺病；A3的调节被建议用于管理和治疗例如哮喘和慢性阻塞性肺病、青光眼、癌症和中风。
目前，腺苷受体抑制剂越来越多地受到关注。一些有潜力的A2a或/和A2b抑制剂被陆续发现。但是获得抑制作用更强、选择性更好的A2a和/或A2b抑制剂，特别是A2a/A2b双抑制剂，仍具有重要的意义和开发价值。
发明内容
第一方面，本发明提供了一种如式II所示的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、以及其药学上可接受的盐的溶剂合物：
其中，R 2为H、CN、卤原子、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、N(Re)(Rf)或Ar；优选地，R 2为NH 2或Ar；
Re和Rf独立地为H、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷基-CO-、C 1-4卤代烷基-CO-、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基；或者Re和Rf与连接的N原子一起形成4-6元环，所述4-6元环任选地被一个或多个选自CN、OH、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基和卤原子的取代基取代；优选地，所述4-6元环为4-6元杂环烷基；优选地，N(Re)(Rf)为NH 2、四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基；
Ar为芳基或杂芳基；所述芳基优选为苯基或萘基，更优选为苯基；所述杂芳基优选为5-6元杂芳环，更优选为吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑、噻唑基，更优选为吡啶基、呋喃基、吡唑基、噻吩基， 更优选吡啶基；所述芳基和所述杂芳基任选独立地被一个或多个Rc取代；优选地，Ar被1、2、3或4个Rc取代；Rc独立地为H、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、CN或卤原子；优选地，Rc独立地为H、CN、F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基或三氟甲基；更优选地，Rc独立地为H、CN、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基；
具体地，Ar可选自以下任一结构：
更具体地，Ar为
在本发明式II的一些实施方案中，R 2为NH 2；在另一些实施方案中，R 2为Ar，优选为
X 1为N或C-Ra；优选地，X 1为N或CH；更优选地，X 1为CH；
X 2、X 3、X 4独立地为O、S、N、N-Ra、CH 2、C-Ra或C＝O；优选地，X 2、X 3、X 4、以及与X 2、X 4直接相连的原子共同形成被1、2或3个Ra取代的五元杂芳环，所述五元杂芳环优选为吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、异恶唑基、异噻唑基、吡唑基、恶唑 基、噻唑基；
Z 1为N或CH；
当Z 1为N时，Z 1所在6元杂环的顶点原子之间的单双建可根据各顶点原子的化合价和所连基团进行重新确定；
Y 1、Y 2、Y 3独立地为N和C-Rb；优选地，Y 1为C-Rb，Y 2为N，Y 3为N；更优选地，Y 1为CH，Y 2为N，Y 3为N；
Ra独立地为H、CN、NH 2CO-、卤原子、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、3-6元环烷基、3-6元杂环烷基、芳基或5-6元杂芳基；优选地，Ra独立地为H、CN、卤原子、甲基、乙基、异丙基、二氟甲基、三氟甲基、环丙基、环丁基、环己基、氮杂环丁烷、苯基、吡唑基、呋喃基或咪唑基；Ra任选地被一个或多个选自卤原子、CN、C 1-4烷基和C 1-4卤代烷基的取代基取代；更优选地，Ra独立地为H、Br、Cl、F、CN、CHF 2、CF 3、NH 2CO-、甲基、吡唑基、苯基、环丙基或5-甲基-呋喃-2-基；
Rb独立地为H、CN、C 1-4烷基、C1-4卤代烷基或卤原子；优选地，Rb独立地为H、Cl、F、CN、甲基、乙基、异丙基或三氟甲基；更优选地，Rb独立地为H、Cl、甲基或三氟甲基；
L为-(CH 2)n-、-(CD 2)n-、-NH-(CH 2)n-、-O-(CH 2)n-或-S-(CH 2)n-；优选地，L为CH 2或CD 2；更优选地，L为CH 2；所述D是指氘；
为芳基或5-6元杂芳基，优选为苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、呋喃基、噻吩基、 更优选为苯基、吡啶基；
R 1独立地为H、CN、卤原子、NH 2、氨基羰基-C 1-4烷基、C 1-4烷基磺酰基、C 1-4烷基磺酰基氨基、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、C 1-4烷基-O-C 1-4烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环烷基、5-13元螺环基、5-13元杂螺环基、6-12元桥环基、6-12元杂桥环基、苯基、5-6元杂芳基、二C 1-4烷基P(O)-、3-7元环烷基-O-C 1-4烷基、3-7元杂环烷基-O-C 1-4烷基和苯氧基-C 1-4烷基；优选地，R 1独立地为F、CN、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；优选地，R 1独立地为C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元含氮杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；R 1任选地被一个或多个选自甲基、甲氧基、乙基、异丙基、OH、CN、卤原子、COOH和2-羟基-丙-2-基的取代基取代；
具体地，R 1为F、-OCH 3、 CN或 优选地，R 1为
在本发明式II的一些实施方案中，结构单元 为
或者，两个相邻R 1可以连同连接它们的原子一起环化形为饱和5-6元环或者不饱和5-6元环，所述饱和5-6元环和不饱和5-6元环任选地被一个或多个选自C 1-4烷基、C 1-4烷氧基和卤原子的取代基取代；优选地，所述饱和5-6元环和不饱和5-6元环为吡唑环、恶唑环、噻唑环、异噻唑环、异恶唑环、吡啶环、吡咯环、噻吩环、呋喃环、咪唑环、苯环、嘧啶环、吡嗪环、哒嗪环或1,3-二氧环戊环；更优选地，两个R 1与 共同环化为如下基团：
m为0、1、2或3；优选为1或2；更优选为1；
n为0、1、2或3，优选为1或2；更优选为1；
表示单键或双键。
在本发明式II的一些实施方案中，Ar为苯基，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，Ar为吡啶基，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，Z 1为C，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2为S，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2为S，X 3和X 4独立地为N或C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2为S，X 3为CH，X 4为C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2为S，X 3为CH，X 4为C-Br，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2为S，X 3为N，X 4为C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 4为S，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 4为S，X 2和X 3独立地为N或C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 4为S，X 2为C-Ra，X 3为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2为O，X 3和X 4独立地为N或C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2为N-Ra，X 3和X 4独立地为N或C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2、X 3和X 4独立地为C-Ra、N或N-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2为N，X 3为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2与X 3以双键相连，其他变量如本发明中的任一 方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2与X 3以双键相连，X 2和X 3独立地为N或C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2与X 3以单键相连，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，X 2与X 3以单键相连，X 2和X 3独立地选自NH、CH 2和C＝O；优选地，X 2和X 3独立地选自CH 2和C＝O，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，结构单元 选自以下任一结构： 优选为 更优选为
在本发明式II的一些实施方案中，结构单元 选自以下任一结构： 优选为
在本发明式II的一些实施方案中，结构单元 为
在本发明式II的一些实施方案中，Y 1、Y 2、Y 3均为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，Y 1为CH、Y 2为CH，Y 3为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，Y 1为CH，Y 2为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，Y 3为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，L为CH 2，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，L为CD 2，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，R 2为NH 2，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中， 为吡啶基，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中，R 1为 其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中， 选自 其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中， 选自 其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式II的一些实施方案中， 选自
在本发明式II的一些实施方案中，R 2为Ar；X 3与X 4之间以单键或双键相连接；当X 2与X 3以单键相连时，X 2和X 3独立地为NH、CH 2或C＝O；优选地，X 2和X 3独立地为CH 2或C＝O；当X 2与X 3以双键相连时，X 2和X 3独立地为N和C-Ra。
在本发明的一些实施方案中，式II所示化合物具有式II-a所示结构：
其中，X 2、X 3、X 4、Y 1、Y 2、L、R 1、m、 如本发明中的任一方案所定义；
X 5为N、CH或C＝O，优选为N或CH。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，Y 1为CH，Y 2为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 5为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 5为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，L为CH 2，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，L为CD 2，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，R 1为 其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 2为S，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 2为S，X 3和X 4独立地为N或C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 2为S，X 3为CH，X 4为C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 2为S，X 3为CH，X 4为C-Br，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 2为S，X 3为N，X 4为C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 4为S，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 4为S，X 2和X 3独立地为N或C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 4为S，X 2为C-Ra，X 3为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 2为O，X 3和X 4独立地为N或C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 2为N-Ra，X 3和X 4独立地为N或C-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-a中，X 2、X 3和X 4独立地为C-Ra、N或N-Ra，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II所示化合物具有式II-b所示结构：
其中，X 2、X 3、X 4、Y 1、Y 2、L、R 1、m、 如本发明中的任一方案所定义；
X 6和X 7选自N、O、S、NH、CH和CH 2。
在本发明的一些实施方案中，式II-b中，X 6为NH，X 7为N。
在本发明的一些实施方案中，式II-b中，结构单元 为 例如
在本发明的一些实施方案中，式II所示化合物具有式II-c所示结构：
其中，Ra、R 1如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II-c中，R 1为
在本发明的一些实施方案中，式II-c中，Ra选自甲基、Br、Cl、CN、CHF 2、CF 3和环丙基。
在本发明的一些实施方案中，式II所示化合物具有式I’所示结构，
其中，各基团如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II所示化合物具有式I’-a所示结构，
X 4-1和X 5-1独立地为N或CH；
p为0、1、2、3或4；
X 1、X 2、X 3、Y 1、Y 2、R 1、Rc、 如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-a中，X 1为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-a中，X 2和X 3以双键相连，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-a中，X 2和X 3以单键相连，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-a中，X 3为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-a中，X 4-1为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-a中，X 5-1为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-a中，Y 1为CH，Y 2为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式II所示化合物具有式I’-b所示结构，
其中，R 3、R 4和R 5独立地为Rc；
R 6为Rb；
R 1、Rb、Rc、X 1、X 2、X 3、 如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，X 2和X 3以双键相连，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，X 2和X 3以单键相连，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，R 3为H，CH 3、CH 3O或Cl，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，R 4为H、CH 3、Cl、CH 3O、F或CN，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，R 5为H或卤原子；优选为H或F，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，R 6为H、C 1-4烷基或C 1-4卤代烷基；优选为H或CH 3，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，R 3为CH 3，R 4为CN，R 5为H，R 6为H，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，X 1为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，X 1为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，X 2为N，其他变量如本发明中的任一方 案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，X 3为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I’-b中，R 1为 其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式I的一些实施方案中，式II所示化合物具有式I-c、式I-d或式I-e所示的结构，
其中，X 1、X 2、X 3、R 1、R 3、R 5、R 6如本发明中的任一方案所定义。
另一方面，本发明提供了一种如式II所示的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、以及其药学上可接受的盐的溶剂合物：
其中，R 2为H、CN、卤原子、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、N(Re)(Rf)或Ar；优选地，R 2为NH 2或Ar；
Re和Rf独立地为H、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷基-CO-、C 1-4卤代烷基-CO-、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基；或者Re和Rf与连接的N原子一起形成4-6元环，所述4-6元环任选地被一个或多个选自CN、OH、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基和卤原子的取代基 取代；优选地，所述4-6元环为4-6元杂环烷基；优选地，N(Re)(Rf)为NH 2、四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基；
Ar为芳基或杂芳基；所述芳基优选为苯基或萘基，更优选为苯基；所述杂芳基优选为5-6元杂芳环，更优选为吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑、噻唑基，更优选为吡啶基、呋喃基、吡唑基、噻吩基，更优选吡啶基；所述芳基和所述杂芳基任选独立地被一个或多个Rc取代；优选地，Ar被1、2、3或4个Rc取代；Rc独立地为H、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、CN或卤原子；优选地，Rc独立地为H、CN、F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基或三氟甲基；更优选地，Rc独立地为H、CN、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基；
具体地，Ar可选自以下任一结构：
更具体地，Ar为
Ra独立地为H、CN、NH 2CO-、卤原子、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、3-6元环烷基、3-6元杂环烷基、芳基或5-6元杂芳基；优选地，Ra独立地为H、CN、卤原子、甲基、乙基、异丙基、二氟甲基、三氟甲基、环丙基、环丁基、环己基、氮杂环丁烷、苯基、吡唑基、呋喃基或咪唑基；Ra任选地被一个或多个选自卤原子、CN、C 1-4烷基和C 1-4卤代烷基的取代基取代；更优选地，Ra独立地为H、Br、Cl、F、CN、CHF 2、CF 3、NH 2CO-、甲基、吡唑基、苯基、环丙基或5-甲基-呋喃-2-基；
在本发明的一些实施方案中，R 2为NH 2；在另一些实施方案中，R 2为Ar，优选
X 1为N或C-Ra；优选地，X 1为N或CH；更优选地，X 1为CH；
X 2、X 3、X 4独立地为O、S、N、N-Ra、CH 2、C-Ra或C＝O；优选地，X 2、X 3、X 4、以及与X 2、X 4直接相连的原子共同形成被1-3个Ra取代的五元杂芳环，所述五元杂芳环优选为吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、异恶唑基、异噻唑基、吡唑基、恶唑基、噻唑基；
Z 1为N或CH；
当Z 1为N时，Z 1所在6元杂环的顶点原子之间的单双建可根据各顶点原子的化合价和所连基团进行重新确定；
Y 1、Y 2、Y 3独立地为N或C-Rb；优选地，Y 1为C-Rb，Y 2为N，Y 3为N；更优选地，Y 1为CH，Y 2为N，Y 3为N；
Rb独立地为H、CN、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基或卤原子；优选地，Rb独立地为H、Cl、F、CN、甲基、乙基、异丙基或三氟甲基；更优选地，Rb独立地为H、Cl、甲基或三氟甲基；
L为-(CH 2)n-、-(CD 2)n-、-NH-(CH 2)n-、-O-(CH 2)n-或-S-(CH 2)n-；优选地，L为CH 2或CD 2；更优选地，L为CH 2；所述D是指氘；
为芳基或5-6元杂芳基；优选苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、呋喃基、噻吩基、 更优选苯基、吡啶基；
R 1独立地为H、卤原子、NH 2、氨基羰基-C 1-4烷基、C 1-4烷基磺酰基、C 1-4烷基磺酰基氨基、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、C 1-4烷基-O-C 1-4烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环烷基、5-13元螺环基、5-13元杂螺环基、6-12元桥环基、6-12元杂桥环基、苯基、5-6元杂芳基、二C 1-4烷基P(O)-、3-7元环烷基-O-C 1-4烷基、3-7元杂环烷基-O-C 1-4烷基或苯氧基-C 1-4烷基；优选地，R 1独立地为C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；优选地，R 1独立地为C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元含氮杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；R 1任选地被一个或多个选自甲基、甲氧基、乙基、异丙基、OH、CN、卤原子、COOH和2-羟基-丙-2-基的取代基取代；
具体地，R 1为F、-OCH 3、 优选地，R 1为
在本发明式II的一些实施方案中，结构单元 为
在本发明式II的一些实施方案中，m＝2，两个相邻R 1可以环化形为饱和5-6元环或者不饱和5-6元环，且这些环可以任选地被一个或多个选自C 1-4烷基、C 1-4烷氧基和卤原子的取代基取代；优选地，两个相邻R 1可以环化形为吡唑环、恶唑环、噻唑环、异噻唑环、异恶唑环、吡啶环、吡咯环、噻吩环、呋喃环、咪唑环、苯环、嘧啶环、吡嗪环、哒嗪环、1,3-二氧环戊环；优选地，两个R 1与 共同环化为如下基团：
m为0、1、2或3；优选为1或2；更优选为1；
n为0、1、2或3；优选为1或2；更优选为1。
在本发明式II的一些实施方案中，R 1独立地为H、NH 2、氨基羰基-C 1-4烷基、C 1-4 烷基磺酰基、C 1-4烷基磺酰基氨基、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、C 1-4烷基-O-C 1-4烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环烷基、5-13元螺环基、5-13元杂螺环基、6-12元桥环基、6-12元杂桥环基、苯基、5-6元杂芳基、二C 1-4烷基P(O)-、3-7元环烷基-O-C 1-4烷基、3-7元杂环烷基-O-C 1-4烷基或苯氧基-C 1-4烷基；优选地，R 1独立地为C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；优选地，R 1独立地为C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元含氮杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；R 1任选地被一个或多个选自甲基、甲氧基、乙基、异丙基、OH、CN、卤原子、COOH和2-羟基-丙-2-基的取代基取代；
具体地，R 1为
在本发明式II的一些实施方案中，结构单元 为
在本发明式II的一些实施方案中，结构单元 选自以下任一结构： 优选为 更优选为
在本发明式II的一些实施方案中，R 1独立地为H、NH 2、氨基羰基-C 1-4烷基、C 1-4烷基磺酰基、C 1-4烷基磺酰基氨基、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、C 1-4烷基-O-C 1-4烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环烷基、5-13元螺环基、5-13元杂螺环基、6-12元桥环基、6-12元杂桥环基、苯基、5-6元杂芳基、二C 1-4烷基P(O)-、3-7元环烷基-O-C 1-4烷基、3-7元杂环烷基-O-C 1-4烷基或苯氧基-C 1-4烷基；优选地，R 1独立地为C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；优选地，R 1独立地选自C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元含氮杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；且R 1任选地被一个或多个下述基团取代：甲基、甲氧基、乙基、异丙基、OH、CN、卤原子、COOH；
具体地，R 1为
另一方面，本发明提供了一种式I所示的化合物、其药学上可接受的盐：
其中，X 1为N或C-Ra；Ra独立地为H、CN、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基或卤原子；优选地，Ra独立地为H、Cl、F、CN、甲基、乙基、异丙基或三氟甲基；更优选地，Ra独立地为H、Cl、甲基或三氟甲基；优选地，X 1为CH；
X 2与X 3之间可以单键或双键相连接；当X 2与X 3以单键相连时，X 2、X 3独立地为NH、CH 2或C＝O，优选X 2、X 3独立地选自CH 2或C＝O；当X 2与X 3以双键相连时，X 2、X 3独立地为N或C-Ra；
Y 1、Y 2、Y 3独立地为N和C-Rb；Rb独立地为H、CN、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基或卤原子；优选地，Rb独立地为H、Cl、F、CN、甲基、乙基、异丙基或三氟甲基；更优选地，Rb独立地为H、Cl、甲基或三氟甲基；
L为-(CH 2)n-、-(CD 2)n-、-NH-(CH 2)n-、-O-(CH 2)n-或-S-(CH 2)n-；优选地，L为CH 2或CD 2；更优选地，L为CH 2；所述D是指氘；
Ar为芳基或杂芳基；所述芳基优选苯基和萘基，更优选苯基；所述杂芳基优选5-6元杂芳环，更优选吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑、噻唑基，更优选吡啶基、呋喃基、吡唑基、噻吩基，更优选吡啶基；所述芳基和所述杂芳基任选独立地被一个或多个Rc取代；Rc独立地为H、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、CN和卤原子；优选地，Rc独立地为H、CN、F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基或三氟甲基；更优选地，Rc独立地为H、CN、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基；
具体地，Ar可选自以下任一结构：
更具体地，Ar为
为芳基或5-6元杂芳基，优选为苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、呋喃基、噻吩基、 更优选为苯基、吡啶基；
R 1独立地为H、CN、卤原子、NH 2、氨基羰基-C 1-4烷基、C 1-4烷基磺酰基、C 1-4烷基磺酰基氨基、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、C 1-4烷基-O-C 1-4烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环烷基、5-13元螺环基、5-13元杂螺环基、6-12元桥环基、6-12元杂桥环基、苯基、5-6元杂芳基、二C 1-4烷基P(O)-、3-7元环烷基-O-C 1-4烷基、3-7元杂环烷基-O-C 1-4烷基或苯氧基-C 1-4烷基；优选地，R 1独立地为F、CN、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；优选地，R 1独立地为C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元含氮杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；且R 1任选地被一个或多个下述基团取代：甲基、甲氧基、乙基、异丙基、OH、CN、卤原子、COOH；
具体地，R 1独立地为F、CN、 优选地，R 1独立地为
在本发明的一些实施方案中， 为
在本发明式I的一些实施方案中，两个相邻R 1可以环化形为饱和5-6元环或者不饱和5-6元环，且这些环可以任选地被一个或多个选自C 1-4烷基、C 1-4烷氧基和卤原子的取代基取代；优选地，两个相邻R 1可以环化形为吡唑环、恶唑环、噻唑环、异噻唑环、异恶唑环、吡啶环、吡咯环、噻吩环、呋喃环、咪唑环、苯环、嘧啶环、吡嗪环、哒嗪环、1,3-二氧环戊环；优选地，两个相邻R 1与 共同环化为如下基团：
m为0、1、2或3；优选为1或2；更优选为1；
n为0、1、2或3；优选为1或2；更优选为1。
在本发明式I的一些实施方案中，结构单元 选自以下任一结构：
在本发明式I的一些实施方案中，结构单元 为
在本发明式I的一些实施方案中，所述化合物由式I-a所示，
其中，X 1、X 2、X 3、Y 1、Y 2、R 1、Rc如本发明中的任一方案所定义；
X 4和X 5独立地为N或CH；
p为0、1、2、3或4。
在本发明的一些实施方案中，式I-a中，X 1为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-a中，X 2和X 3以双键相连，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-a中，X 2和X 3以单键相连，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-a中，X 3为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-a中，X 4为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-a中，X 5为CH，其他变量如本发明中的任一方案 所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-a中，Y 1为CH，Y 2为N，其他变量如上所述定义。
在本发明式I的一些实施方案中，所述化合物由式I-b所示，
其中，R 1、X 1、X 2、X 3如式I-a所定义；
X 2和X 3之间以双键相连；或者X 2与X 3之间以单键连接；
R 3为H、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、卤原子或CN；优选地，R 3选自H，CH 3、CH 3O或Cl；
R 4为H、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、卤原子或CN；优选地，R 4选自H、CH 3、Cl、CH 3O、F或CN；
R 5为H或卤原子；优选地，R 5为H或F；
R 6为H、C 1-4烷基或C 1-4卤代烷基；优选地，R 6为H，或者R 6为CH 3。
在本发明的一些实施方案中，式I-b中，R 3为CH 3，R 4为CN，R 5为H，R 6为H，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-b中，X 1为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-b中，X 1为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-b中，X 2为N，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-b中，X 3为CH，其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明的一些实施方案中，式I-b中，R 1为 其他变量如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式I的一些实施方案中，所述化合物由式I-c、式I-d或式I-e所示，
其中，X 1、X 2、X 3、R 1、R 3、R 5、R 6如本发明中的任一方案所定义。
在本发明式I的一些实施方案中，Ar可选自以下任一结构：
在本发明式I的一些实施方案中，R 1独立地为H、NH 2、氨基羰基-C 1-4烷基、C 1-4烷基磺酰基、C 1-4烷基磺酰基氨基、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、C 1-4烷基-O-C 1-4烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环烷基、5-13元螺环基、5-13元杂螺环基、6-12元桥环基、6-12元杂桥环基、苯基、5-6元杂芳基、二C 1-4烷基P(O)-、3-7元环烷基-O-C 1-4烷基、3-7元杂环烷基-O-C 1-4烷基或苯氧基-C 1-4烷基；优选地，R 1独立地为C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元杂螺环基、苯 基或5-6元杂芳基；优选地，R 1独立地为C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元含氮杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；且R 1任选地被一个或多个下述基团取代：甲基、甲氧基、乙基、异丙基、OH、CN、卤原子和COOH；
具体地，R 1为
在本发明式I的一些实施方案中，R 1为
本发明中，不同实施方案中的取代基可以相互组合，其组合获得的实施方案仍属于本发明记载的实施方案。
在本发明的一些实施方案中，所述化合物选自：
另一方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含有效预防或治疗量的如上所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、以及其药学上可接受的盐的溶剂合物，以及任选的一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
另一方面，本发明提供了一种如上所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、以及其药学上可接受的盐的溶剂合物在用于制备治疗或/和预防哺乳动物(包括人)与A2a和/或A2b受体相关的疾病或病症的药物中的用途。
另一方面，本发明提供了一种如上所述的药物组合物在用于制备治疗或/和预防哺乳动物(包括人)与A2a和/或A2b受体相关的疾病或病症的药物中的用途。
另一方面，本发明提供了一种用于在有需要的哺乳动物(包括人)中治疗和/或预防与A2a和/或A2b受体相关的疾病或病症的方法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用(优选为治疗有效量的)如上所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、以及其药学上可接受的盐的溶剂合物。
另一方面，本发明提供了一种用于在有需要的哺乳动物(包括人)中治疗和/或预防与A2a和/或A2b受体相关的疾病或病症的方法，该方法包括给有需要的哺乳动物施用(优选为治疗有效量的)如上所述的药物组合物。
在本发明的一些实施方案中，所述与A2a和/或A2b受体相关的疾病或病症为癌症，所述癌症可以为实体瘤或非实体瘤。
说明和定义
在本发明中，所选或可选取代基能够以取代基的任意可连接位置与被修饰基团进行连接。
在本发明中，所述磺酰基是指-S(＝O) 2-；所述二C 1-4烷基磷氧基是指有两个C 1-4烷基直接与磷原子相连接的P(＝O)，例如二甲基磷氧基；
在本发明，特别是第一方面中，所述卤原子是指氟、氯、溴、碘；所述“卤代”是指取代基中的一个或多个氢原子被卤原子取代后所形成的基团。
术语“烷基”是指碳原子之间、以及碳原子与氢原子之间均以单键相连的直链或支链烃基。烷基优选C 1-4或者C 1-6的烷基；C 1-4烷基”表示具有1-4个碳原子的烷基，“C 1-6烷基”表示具有1-6个碳原子的烷基。烷基的实施例包括但限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、正己基。
术语“环烷基”是指原子之间以单键相连形成环的饱和烃基。C 3-7环烷基是指含有3-7个碳原子的环烷基。环烷基的实施例包括但不限于环丙基、环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷等。
术语“螺环”是指单环之间共用一个碳原子的多环烃基；螺环烷基优选C 5-13、C 6-12、或者C 7- 11螺环烷基；螺环烷基的实施例包括但不限于螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[3.3]庚烷、螺[3.4]辛烷、螺[4.4]壬烷、螺[4.5]癸烷、螺[5.5]十一烷、螺[5.6]十二烷、螺[6.6]十三烷、螺[6.7]十四烷。
术语“桥环”是指共用两个或两个以上碳原子的多环烃基。桥环基优选4-13元桥环、5-12元桥环基、6-12元桥环基、6-11元桥环基、7-11元桥环基。桥环基的实施例包括但不限于二环[3.1.0]己基、二环[3.2.0]庚基、二环[3.3.0]辛基、二环[4.1.0]庚基、二环[4.2.0]辛基、二环[4.3.0]壬基、二环[4.4.0]癸基、二环[3.2.1]辛基。术语“烷氧基”是指通过氧桥连接的烷基，也即是烷基将羟基中的氢原子取代所得到的基团。烷氧基优选C1-4或C1-6烷氧基；烷氧基的实施例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、新戊氧基、正己基氧基。
术语“卤代烷基”是指一个或多个氢原子被卤原子取代的烷基。卤代烷基优选C 1-6或者C 1-4卤代烷基。卤代烷基的实施例包括但不限于一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基。
术语“卤代烷氧基”是指一个或多个氢原子被卤原子取代的烷氧基。卤代烷氧基的实施例包括但不限于三氟甲氧基、三氯甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基、2,2,2-三氯乙氧基。
术语“杂环烷基”是指环状骨架结构中的一个或多个碳原子被杂原子取代的环烷基；所述杂原子一般选自N、O、S。杂环烷基优选3-6元、3-7元、4-6元、4-7元、5-6元、 5-7元的杂环烷基。杂环烷基的实施例包括但不限于氮杂环丁基、氧杂环丁基、四氢噻吩基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、四氢吡唑基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基。
术语“杂螺环基”是指螺环骨架结构中的一个或多个碳原子被杂原子取代的螺环基，所述杂原子选自N、O、S。优选地，杂螺环基选自螺环骨架碳原子被1-3个选自N、O、S的杂原子取代的如下螺环基：螺[2.2]戊基、螺[2.3]己基、螺[2.4]庚基、螺[2.5]辛基、螺[2.6]壬基、螺[3.3]庚基、螺[3.4]辛基、螺[3.5]壬基、螺[3.6]癸基、螺[4.4]壬基、螺[4.5]癸基、螺[4.6]十一烷基、螺[5.5]十一烷基、螺[5.6]十二烷基、螺[6.6]十三烷基、螺[6.7]十四烷基。杂螺环基的实施例还包括2-氧杂-7-氮杂螺[5.3]壬烷-7-基、2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基、2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基、2,7-二氮杂螺[5.3]壬基、2,7-二氧杂螺[5.3]壬基、3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基、1-氧杂-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基、1-氧杂-4,8-二氮杂螺[5.4]癸烷-8-基、3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-基、7-氮杂螺[3.5]癸烷-7-基、1-氧杂-4,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-4-基、6-氧杂-2,9-二氮杂螺[4.5]癸烷-9-基、9-氧杂-2,6-二氮杂螺[4.5]癸烷-6-基、3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-基、4-氧杂-1,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基。
术语“含氮杂螺环基”是指至少含一个N原子的杂螺环基，其还可以含有其他杂原子，如N、O、S；优选地，所述含氮杂螺环基为含有1个N和1个O的杂螺环；更优选地，所述含氮杂螺环通过其N原子与被取代基结构相连。
术语“杂桥环基”是指构成桥环骨架的一个或多个碳原子被杂原子取代的桥环基，所述杂原子选自N、O、S。优选地，杂桥环基选自桥环骨架碳原子被1-3个选自N、O、S的杂原子取代的如下桥环基：二环[3.1.0]己基、二环[3.2.0]庚基、二环[3.3.0]辛基、二环[4.1.0]庚基、二环[4.2.0]辛基、二环[4.3.0]壬基、二环[4.4.0]癸基、二环[3.2.1]辛基。杂桥环基的实施例包括但限于1,4-二氮杂二环[4.4.0]癸烷-4-基、1,4-二氮杂二环[4.3.0]-壬烷-4-基、8-氧杂-1,4-二氮杂二环[4.4.0]癸烷-4-基、1,4-二氮杂二环[4.4.0]癸烷-4-基、4,7-二氮杂二环[4.3.0]壬烷-4-基、2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷-5-基、3,7-二氮杂二环[4.3.0]壬烷-3-基、3,7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷-3-基、3,7-二氮杂二环[4.4.0]癸烷-3-基、3,6-二氮杂二环[4.3.0]壬烷-3-基、3,6-二氮杂二环[4.4.0]癸烷-3-基、3,6,9-三氮杂二环[4.4.0]癸烷-3-基。
术语“芳基”是指不饱和的、通常为芳族的烃基，其可为单环或稠合在一起的多个环。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基。
术语“杂芳基”是指稳定的单环或多环的芳族烃，其包含至少1个杂原子环成员，所述杂原子选自N、O、S，当所述杂芳基含N原子时，还包括其氮氧化物。杂芳基包括5-6元杂芳基、8-14元稠杂芳基。杂芳基的实例包括但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、恶唑基、异恶唑基、噻唑基、异塞唑基、吡 啶基、嘧啶基、吲唑基、吲哚基、异喹啉基、喹喔啉基、苯并恶唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、喹啉基、喹唑啉基。
术语“被取代的”是指特定基团上的一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定基团的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。
本发明所用的术语“组合物”意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。本领域技术人员可以通过改变本发明药物组合物中各活性成分的实际剂量水平，以便所得的活性化合物量能有效针对具体患者、组合物和给药方式得到所需的治疗反应。剂量水平需根据具体化合物的活性、给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史来选定。但是，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。在本发明中，所述药物组合物可特别专门配制成以固体或液体形式供口服给药、供胃肠外注射或供直肠给药。
术语“溶剂合物”是指由溶质和溶剂形成的可变化学计量的复合物。用于本发明的目的的这类溶剂可能不干扰溶质的生物活性。适合溶剂的实例包括但不限于水。
术语“药学上可接受的载体”是指本领域通常可接受的用于将生物活性药剂递送给动物、特别是哺乳动物的介质，根据给药方式和剂型的性质包括例如佐剂、赋形剂或赋形物，例如稀释剂、防腐剂、填充剂、流动调节剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、助悬剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、抗菌剂、抗真菌剂、润滑剂和分散剂。药学上可接受的载体在本领域普通技术人员的眼界范围内根据大量因素配制。其包括但不限于：配制的活性药剂的类型和性质，要将含有该药剂的组合物给药的对象，组合物的预期给药途径，和目标治疗适应症。药学上可接受的载体包括含水介质和非水介质这两者以及多种固体和半固体剂型。除了活性药剂以外，这样的载体包括许多不同的成分和添加剂，因多种原因(例如稳定活性药剂、粘合剂等)在处方中包括的这样的另外的成分对于本领域普通技术人员是众所周知的。
术语“赋形剂”通常是指配制有效的药物组合物所需要载体、稀释剂和/或介质。
术语“有效预防或治疗量”是指本发明化合物或其药学上可接受的盐指以适用于任何医学治疗和/或预防的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应认识到，本发明所示化合物或其药学上可接受的盐、组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物 的给药时间、给药途径和***率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。
本发明化合物可以与其它药物活性成分组合使用，只要它不产生其他不利作用，例如过敏反应。
本发明化合物可以单独作为抗癌药物使用，或者可以与一种或多种其他抗肿瘤药物联合使用。联合治疗通过将各个治疗组分同时、顺序或隔开给药来实现。
术语“药学上可接受的盐”指在可靠的医学判断范围内，适合用于与人类和低等动物的组织接触而不出现过度的毒性、刺激、过敏反应等，且与合理的效果/风险比相称的盐。药学上可接受的盐是本领域公知的。所述盐可通过使本发明化合物的酸性官能团与合适的有机碱或无机碱反应。在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备或者单独制备。所述的碱可以为药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、有机伯胺、仲胺或叔胺等。
本发明中所用的药学上可接受的盐具体地可列举本发明化合物与酸形成的盐，或与碱形成的盐。
本发明中，取代基中的 表示该取代基与母体结构或其他片段的连接位置。
本发明实施例中，洗脱剂的组成比例为体积比，例如“洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～2/1”表示该洗脱剂由石油醚与乙酸乙酯，且体积比为石油醚/乙酸乙酯＝10/1～2/1组成。所述比例“10/1～2/1”也可表示为(10～2)：1。
在本发明中使用的化学缩写形式及其指代的化学名称如下：
化学缩写 化学名称
DPPA 叠氮磷酸二苯酯
DBU 1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯
TBAF 四丁基氟化铵
DHP 二氢吡喃
THF 四氢呋喃
TEA 三乙胺
m-CPBA 间氯过氧苯甲酸
Pd(OAc) 2 醋酸钯
Pd(PPh 3) 2Cl 2 双(三苯基膦)氯化钯
Pd(dppf)Cl 2 [1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯
DMF N,N-二甲基甲酰胺
PMB 对甲氧基苄基
TIPS 三异丙基硅基
Me 甲基
TBSCl 叔丁基二甲基氯硅烷
-OTBS 叔丁基二甲基硅氧基
DAST 二乙胺基三氟化硫
具体实施方式
下面通过具体的制备实施例和生物学实验进一步详细说明本发明，但是，应当理解，这些实施例和生物学实验仅仅是用于具体地说明之用，而不应将其理解为用于以任何形式限制本发明。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，所用的材料是本领域公知的，可以通过市场购买得到或者本领域技术人员根据已经公开文献或常规方法即可获得。除非另外说明，本发明的所有反应均在连续的磁力搅拌下，在干燥氮气或氩气气氛下进行，溶剂为干燥溶剂，其中：(i)温度以摄氏度(℃)表示，操作在室温下进行，所述室温一般指15-35℃，优选20-30℃，更优选20-25℃；(ii)溶剂的去除采用旋转蒸发仪减压蒸发，浴温不高于60℃；(iii)反应过程用薄层色谱(TLC)跟踪；(iv)终产物具有满意的氢核磁共振光谱( 1H-NMR)和/或质谱(MS)数据。
测试仪器：
本发明的化合物结构是通过核磁共振(NMR)或/和液质联用色谱(LC-MS)来确定的。NMR化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。NMR的测定使用Bruker Neo400M或者Bruker Ascend 400核磁仪器，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d 6)、氘代甲醇(CD 3OD)和/或氘代氯仿(CDCl 3)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
液质联用色谱LC-MS的测定用Agilent 1260-6125B single quadrupole质谱仪或者Waters H-Class SQD2质谱仪(离子源为电喷雾离子化)。HPLC的测定使用Waters e2695-2998或Waters ARC和Agilent 1260或Agilent Poroshell HPH高效液相色谱。
制备高效液相色谱使用Waters 2555-2489(10μm，ODS 250cm×5cm)或GILSON Trilution LC，色谱柱为Welch XB-C18柱(5um，21.2*150mm)。
薄层层析硅胶板使用烟台江友硅胶开发有限公司GF254硅胶板或乳山市上邦新材料有限公司GF254硅胶板，TLC采用的规格是0.15mm～0.20mm，制备型20x 20cm，柱层析一般使用于成化工200～300目硅胶为载体。
实施例a-1:
2-(6-((4-(2-氨基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-1)的制备
反应步骤：
步骤1：将6-(羟甲基)吡啶甲酸甲酯(4.5g，26.9mmol)溶于四氢呋喃(70mL)，冷却至0℃，滴加甲基溴化镁的四氢呋喃溶液(3mol/L，54mL，162.0mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌4小时。TLC监测显示反应结束，向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(50mL)淬灭。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～2/1)得到2-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(1.3g，收率29％)。MS(ESI)M/Z:168.6[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.49(d,J＝7.6Hz,1H),7.29(t,J＝7.6Hz,1H),5.36(t,J＝5.6Hz,1H),5.21(s,1H),4.54(d,J＝5.6Hz,2H),1.41(s,6H).
步骤2：将2-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(1.0g，6.0mmol)溶于甲苯(30mL)，冷却至0℃，加入DPPA(2.0g，7.2mmol)和DBU(1.1g，7.2mmol)。反应体系自然升温 至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(1.0g，收率87％)。MS(ESI)M/Z:193.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.34(d,J＝8.0Hz,1H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),4.95(br s,1H),4.47(s,2H),1.55(s,6H).
步骤3：将2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(500mg，2.4mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V 四氢呋喃/V 三乙胺＝1/1，20mL)。氮气保护下，依次加入CuI(232mg，1.2mmol)、Pd(PPh 3) 4(277mg，0.24mmol)和三异丙基硅乙炔(1.3g，7.2mmol)。反应体系升温至60℃搅拌6小时。将反应液冷却至室温，加入5％柠檬酸水溶液(40mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝40/1)得到2-氯-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[3,2-d]嘧啶(0.8g，收率93％)。MS(ESI)M/Z:351.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.09(d,J＝5.6Hz,1H),7.51(d,J＝5.6Hz,1H),1.24-1.22(m,3H),1.21-1.14(m,18H).
步骤4：将2-氯-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[3,2-d]嘧啶(500mg，1.4mmol)溶于四氢呋喃(5mL)，室温下加入(4-甲氧基苯基)甲胺(3mL，23mmol)。反应体系升温至80℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(50mL)稀释。然后用5％柠檬酸水溶液(20mL×3次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝40/1)得到N-(4-甲氧基苄基)-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(334mg，黄色油状物，收率52％)。MS(ESI)M/Z:452.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ9.89(s,1H),7.85(dd,J 1＝6.8Hz,J 2＝2.0Hz,2H),7.31(d,J＝8.4Hz,1H),7.01(d,J＝8.8Hz,2H),6.86(d,J＝8.8Hz,1H),3.90(s,3H),3.81(s,2H),1.21-1.17(m,21H).
步骤5：将N-(4-甲氧基苄基)-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(334mg，0.74mmol)溶于二氯甲烷(2mL)，加入三氟乙酸(15mL)。反应体系在室温下搅拌过夜，减压浓缩，加入乙酸乙酯(50mL)，用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残余物溶于四氢呋喃(20mL)，加入TBAF.3H 2O(392mg，1.2mmol)，室温搅拌过夜。往反应液加入乙酸乙酯(50mL)稀释，然后用饱和食盐水(20mL×2次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到4-乙炔基噻吩并[3,2-d] 嘧啶-2-胺(65mg，收率50％)。MS(ESI)M/Z:176.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.90(d,J＝5.6Hz,1H),7.21(d,J＝5.6Hz,1H),5.14(br s,2H),3.57(s,1H).
步骤6：将4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(65mg，0.37mmol)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V/V＝2/1，9mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(71mg，0.37mmol)、五水硫酸铜(5mg，0.02mmol)和抗坏血酸钠(15mg，0.074mmol)。反应体系在室温下搅拌过夜，加入乙酸乙酯(50mL)稀释，先用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶制备色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得到终产物2-(6-((4-(2-氨基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(15.6mg，收率11％)。MS(ESI)M/Z:368.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.99(s,1H),8.50(dd,J 1＝5.6Hz,J 2＝1.2Hz,1H),7.85(t,J＝8.0Hz,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.39-7.31(m,2H),5.90(s,2H),1.49(s,6H).
实施例a-2:
2-(6-((4-(2-氨基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-2)的制备
反应步骤：
步骤1：将1H-吡唑-4-频哪醇硼酸酯(500mg，2.6mmol)和6-(溴甲基)吡啶甲酸甲酯(460mg，2.0mmol)溶于乙腈(30mL)，加入碳酸铯(1.1g，3.4mmol)。反应体系在室温下搅拌3小时，用乙酸乙酯(100mL)稀释，过滤，滤液用饱和食盐水(30mL×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝4/1)得到6-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧代硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶甲酸甲酯(550mg，收率80％)。MS(ESI)M/Z:344.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.12(s,1H),7.98-7.96(m,2H),7.67(s,1H),7.19(dd,J 1＝6.4Hz, J 2＝2.4Hz,1H),5.55(s,2H),3.89(s,3H),1.25(s,12H).
步骤2：将6-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧代硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶甲酸甲酯(500mg，1.5mmol)和2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(837mg，4.1mmol)溶于1,4-二氧六环和水的混合溶剂(V 1,4-二氧六环/V 水＝4/1，25mL)。氮气保护下，依次加入碳酸钾(673mg，4.9mmol)和Pd(dppf)Cl 2(89mg，0.12mmol)。反应体系升温至80℃并搅拌过夜。冷却至室温，向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(40mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到6-((4-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶甲酸甲酯(370mg，收率66％)。MS(ESI)M/Z:386.2[M+H] +.
步骤3：将甲基溴化镁的四氢呋喃溶液(3M，1.3mL，3.9mmol)冷却至-10℃，氮气保护下，滴加6-((4-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶甲酸甲酯(370mg，0.96mmol)的四氢呋喃溶液(5mL)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜，向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(40mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝2/1)得到2-(6-((4-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(40mg，浅黄色油状物，收率11％)。MS(ESI)M/Z:386.2[M+H] +.
步骤4：将2-(6-((4-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(40mg，0.10mmol)溶于四氢呋喃(2mL)，室温下加入(4-甲氧基苯基)甲胺(0.5mL，3.8mmol)。反应体系升温至80℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(50mL)稀释。然后用5％柠檬酸水溶液(20mL×3次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得2-(6-((4-(2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇粗品直接用于下步反应(黄色油状物)。MS(ESI)M/Z:487.2[M+H] +.
步骤5：将2-(6-((4-(2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(粗品)溶于二氯甲烷(0.5mL)，加入三氟乙酸(1.0mL)。反应体系在室温下搅拌过夜，减压浓缩，加入乙酸乙酯(50mL)，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)和饱和食盐水(20mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶制备色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)得到终产物2-(6-((4-(2-氨基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(25mg， 二步收率66％)。MS(ESI)M/Z:367.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.62(s,1H),8.29(s,1H),8.07(d,J＝5.2Hz,1H),7.76(t,J＝8.0Hz,1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.19(d,J＝5.2Hz,1H),7.08(d,J＝7.6Hz,1H),5.57(s,2H),1.51(s,6H).
实施例a-3:
2-(6-((4-(2-氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-3)的制备
反应步骤：
步骤1：将2,4-二氯噻吩并[2,3-d]嘧啶(500mg，2.4mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V 四氢呋喃/V 三乙胺＝1/1，20mL)。氮气保护下，依次加入CuI(232mg，1.2mmol)、Pd(PPh 3) 4(277mg，0.24mmol)和三异丙基硅乙炔(0.88g，4.8mmol)。反应体系升温至60℃搅拌3小时。将反应液冷却至室温，加入5％柠檬酸水溶液(40mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝50/1)得到2-氯-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[2,3-d]嘧啶(0.8g，收率93％)。MS(ESI)M/Z:351.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.61(d,J＝5.6Hz,1H),7.45(d,J＝5.6Hz,1H),1.26-1.15(m,21H).
步骤2：将2-氯-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[2,3-d]嘧啶(1.0g，2.8mmol)溶于四氢呋喃(2mL)，室温下加入(4-甲氧基苯基)甲胺(5mL，38mmol)。反应体系升温至80℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(50mL)稀释。然后用5％柠檬酸水溶液(20mL×3次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝40/1)得到N-(4-甲氧基苄基)-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-胺(483mg，黄色油状物，收率37％)。MS(ESI)M/Z: 452.1[M+H] +.
步骤3：将N-(4-甲氧基苄基)-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-胺(480mg，1.1mmol)溶于二氯甲烷(2mL)，加入三氟乙酸(5mL)。反应体系在室温下搅拌过夜，减压浓缩，加入乙酸乙酯(50mL)，用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残余物溶于四氢呋喃(20mL)，加入TBAF·3H 2O(392mg，1.2mmol)，室温搅拌过夜。往反应液加入乙酸乙酯(50mL)稀释，然后用饱和食盐水(20mL×2次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到4-乙炔基噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-胺(65mg，收率35％)。MS(ESI)M/Z:176.1[M+H] +.
步骤4：将4-乙炔基噻吩并[2,3-d]嘧啶-2-胺(60mg，0.34mmol)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝2/1，3mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(66mg，0.34mmol)、五水硫酸铜(14mg，0.06mmol)和抗坏血酸钠(15mg，0.074mmol)。反应体系在室温下搅拌过夜，加入乙酸乙酯(50mL)稀释，先用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶制备色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到终产物2-(6-((4-(2-氨基噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(20mg，收率16％)。MS(ESI)M/Z:368.3[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.46(s,1H),8.28(d,J＝6.0Hz,1H),7.73(t,J＝8.0Hz,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.16-7.13(m,2H),5.77(s,2H),5.08(br s,2H),4.72(br s,1H),1.55(s,6H).
实施例a-4:
2-(6-((4-(6-氨基-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-4)的制备
反应步骤：
步骤1：将4,6-二氯-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(490mg，2.4mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V 四氢呋喃/V 三乙胺＝1/1，20mL)。氮气保护下，依次加入CuI(228mg，1.2mmol)、Pd(dppf)Cl 2(175mg，0.24mmol)和三异丙基硅乙炔(0.66g，3.6mmol)。反应体系在室温下搅拌6小时，加入5％柠檬酸水溶液(40mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝50/1)得到6-氯-1-甲基-4-((三异丙基硅)乙炔)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(200mg，收率24％)。MS(ESI)M/Z:349.2[M+H] +.
步骤2：将6-氯-1-甲基-4-((三异丙基硅)乙炔)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(200mg，0.57mmol)溶于四氢呋喃(5mL)，室温下加入(4-甲氧基苯基)甲胺(3mL，23mmol)。反应体系升温至80℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(50mL)稀释。然后用5％柠檬酸水溶液(20mL×3次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到N-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-4-((三异丙基硅)乙炔)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(180mg，黄色油状物，收率70％)。MS(ESI)M/Z:450.3[M+H] +.
步骤3：将N-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-4-((三异丙基硅)乙炔)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(180mg，0.4mmol)溶于四氢呋喃(10mL)，冷却至0℃，加入TBAF·3H 2O(156mg，0.5mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌1小时，加入乙酸乙酯(50mL)稀释。混合液用饱和食盐水(20mL×2次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝2/1)得到4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(110mg，收率94％)。MS(ESI)M/Z:294.2[M+H] +.
步骤4：将4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6-胺(110mg，0.38mmol)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝2/1，6mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(72mg，0.38mmol)、五水硫酸铜(5mg，0.02mmol)和抗坏血酸钠(15mg，0.074mmol)。反应体系在室温下搅拌过夜，加入乙酸乙酯(50mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶制备色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到2-(6-((4-(6-((4-甲氧基苄基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(130mg，收率71％)。MS(ESI)M/Z:486.4[M+H] +. 1H NMR (400MHz,CDCl 3):δ8.71(br s,1H),7.74(t,J＝8.0Hz,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.35-7.26(m,4H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),6.88(dd,J 1＝6.8Hz,J 2＝2.0Hz,2H),5.80(s,2H),4.67(d,J＝6.0Hz,2H),3.97(s,3H),3.80(s,3H),1.55(s,6H).
步骤5：将2-(6-((4-(6-((4-甲氧基苄基)氨基)-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(100mg，0.21mmol)溶于二氯甲烷(3mL)，加入三氟乙酸(5mL)。反应体系在室温下搅拌过夜，加入乙酸乙酯(50mL)稀释，依次用水(50mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(50mL×2次)和饱和食盐水(20mL×2次)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残余物溶于四氢呋喃(20mL)，加入TBAF·3H 2O(392mg，1.2mmol)，室温搅拌过夜。往反应液加入乙酸乙酯(50mL)稀释，然后用饱和食盐水(20mL×2次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶制备色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝40/1)得到终产物2-(6-((4-(6-氨基-1-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(31mg，收率41％)。MS(ESI)M/Z:366.3[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.80(s,1H),8.33(s,1H),7.81(t,J＝7.6Hz,1H),7.61(d,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,1H),6.91(br s,2H),5.85(s,2H),5.23(s,1H),3.83(s,3H),1.34(s,6H).
实施例a-5:
2-(6-((4-(6-氨基-3-甲基异噻唑并[5,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-5)的制备
反应步骤：
以4,6-二氯-3-甲基异噻唑并[5,4-d]嘧啶为原料，参照实施例a-4的操作经五步制备得到终产物2-(6-((4-(6-氨基-3-甲基异噻唑并[5,4-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(135mg)。MS(ESI)M/Z:382.8[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.73(s,1H),7.83(t,J＝7.6Hz,1H),7.63(d,J＝7.6Hz,1H),7.47(br s,2H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),5.87(s,2H),2.46(s,3H),1.38(s,6H).
实施例a-6:
2-(6-((4-(2-氨基-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-6)的制备
反应步骤：
以2,4-二氯-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶为原料，参照实施例a-4的操作经五步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(56mg)。MS(ESI)M/Z:382.3[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.46(s,1H),7.73(t,J＝8.0Hz,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,1H),6.94(s,1H),5.78(s,2H),5.22(br s,2H),3.77(br s,1H),2.66(s,3H),1.55(s,6H).
实施例a-7:
2-(6-((4-(2-氨基-6-(三氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-7)的制备方法
反应步骤：
以2,4-二氯-6-三氟甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶为原料，参照实施例a-4的操作经五步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-6-(三氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基) 甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(50mg)。MS(ESI)M/Z:436.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.91(s,1H),7.88(s,1H),7.82(t,J＝8.0Hz,1H),7.62(d,J＝8.0Hz,1H),7.18(d,J＝7.6Hz,1H),6.98(br s,2H),5.90(s,2H),1.37(s,6H).
实施例a-8:
2-(6-((4-(2-氨基-7-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-8)的制备
反应步骤：
以2,4-二氯-7-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶为原料，参照实施例a-4的操作经五步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-7-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(32mg)。MS(ESI)M/Z:382.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.48(s,1H),7.73(t,J＝7.6Hz,1H),7.63(s,1H),7.38(d,J＝7.6Hz,1H),7.15(d,J＝7.2Hz,1H),5.79(s,2H),5.23(br s,2H),4.70(br s,1H),2.42(s,3H),1.55(s,6H).
实施例a-9:
2-(6-((4-(2-氨基-5-甲基噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-9)的制备
反应步骤：
以2,4-二氯-5-甲基噻吩并[2,3-d]嘧啶为原料，参照实施例a-4的操作经五步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-5-甲基噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(63mg)。MS(ESI)M/Z:382.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.50(s,1H),7.84(t,J＝8.0Hz,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.27(d,J＝7.6Hz,1H),6.87(d,J＝1.2Hz,1H),5.86(s,2H),2.09(d,J＝1.2Hz,3H),1.52(s,6H).
实施例a-10:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-10)的制备
反应步骤：
步骤1：将噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(5.0g，29.8mmol)溶于冰乙酸(200mL)，加入液溴(4.5mL，82.9mmol)。反应体系升温至120℃搅拌24小时，冷却至室温，减压浓缩除去大部分溶剂，加入冰水(600mL)和乙酸乙酯(600mL)，搅拌0.5小时，过滤，滤饼干燥后得到7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(6.0g，收率82％)，直接用于下一步反应。MS(ESI)M/Z:247.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.57(s,1H),11.45(s,1H),8.24(s,1H).
步骤2：将7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(12.0g，48.8mmol)溶于三氯氧磷(70mL)，加入N,N-二异丙基乙胺(12.5g，96.9mmol)。反应体系升温至100℃搅拌16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩除去大部分三氯氧磷，加入乙酸乙酯和四氢呋喃的混合溶剂(V 乙酸乙酯/V 四氢呋喃＝1/1，200mL)稀释后，慢慢倒入到冷水(300mL)中，搅拌0.5小时后分液，有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸 乙酯＝200/1)得到7-溴-2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(7.6g，收率55％)。MS(ESI)M/Z:283.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.87(s,1H).
步骤3：将7-溴-2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(2.0g，7.1mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V 四氢呋喃/V 三乙胺＝3/2，15mL)。氮气保护下，依次加入CuI(230mg，1.2mmol)、Pd(dppf)Cl 2(307mg，0.42mmol)和三异丙基硅乙炔(1.4g，7.5mmol)。反应体系在室温下搅拌过夜，TLC监测显示反应结束，向反应液中加入5％柠檬酸水溶液(40mL)。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝200/1)得到7-溴-2-氯-4-((三异丙基硅基)乙炔)噻吩并[3,2-d]嘧啶(1.8g，收率59％)。MS(ESI)M/Z:429.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.06(s,1H),1.26-1.16(m,21H).
步骤4：将7-溴-2-氯-4-((三异丙基硅基)乙炔)噻吩并[3,2-d]嘧啶(900mg，2.1mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)，室温下加入(4-甲氧基苯基)甲胺(3.2g，23.4mmol)。反应体系升温至80℃并搅拌4小时。将反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(50mL)稀释。然后用5％柠檬酸水溶液(20mL×3次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝40/1)得到7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(1.1g，收率98％)。MS(ESI)M/Z:530.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.83(s,1H),7.36(d,J＝8.0Hz,2H),6.86(d,J＝8.0Hz,2H),4.67(d,J＝5.6Hz,2H),3.79(s,3H),1.26-1.17(m,21H).
步骤5：将7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-4-((三异丙基硅)乙炔)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(370mg，0.7mmol)溶于四氢呋喃(26mL)，冷却至-10℃，加入TBAF·3H 2O(298mg，0.95mmol)。反应体系在-10℃下搅拌1小时，加入乙酸乙酯(50mL)稀释，混合液用饱和食盐水(20mL×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(248mg，收率95％)，直接用于下一步反应。MS(ESI)M/Z:374.0[M+H] +.
步骤6：将7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(70mg，0.19mmol)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝2/1，6mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(36mg，0.19mmol)、五水硫酸铜(12mg，0.05mmol)和抗坏血酸钠(8mg，0.04mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌2小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1～3/1)得到2-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3- 三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(60mg，收率56％)。MS(ESI)M/Z:566.1[M+H] +.
步骤7：将2-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(60mg，0.11mmol)溶于二氯甲烷(3mL)，加入三氟乙酸(5mL)。反应体系在40℃下搅拌5小时，减压浓缩，加入二氯甲烷(50mL)稀释，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝10/1/1)得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(35mg，收率74％)。MS(ESI)M/Z:446.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.85(s,1H),8.45(s,1H),7.79(t,J＝7.6Hz,1H),7.61(d,J＝7.6Hz,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),6.92(br s,2H),5.87(s,2H),5.22(s,1H),1.36(s,6H).
实施例a-11:
2-(6-((4-(2-氨基-7-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-11)的制备
反应步骤：
步骤1：将噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(8.0g，47.6mmol)溶于6mol/L盐酸/冰乙酸混合溶剂(V 盐酸/V 冰乙酸＝1/1，480mL)，氮气保护下升温至100℃，加入NCS(6.4g，47.6mmol)。反应体系在100℃搅拌3小时，冷却至室温，加入冰水(2000mL)和乙酸乙酯(200mL)，有固体析出，搅拌0.5小时，过滤，滤饼干燥后得到7-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(4.3g，收率45％)。MS(ESI)M/Z:203.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ11.67(s,1H),11.38(s,1H),6.98(s,1H).
以7-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮为原料，参照实施例a-10的操作经六步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-7-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(90mg)。MS(ESI)M/Z:402.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.83 (s,1H),7.81(t,J＝7.6Hz,1H),7.61(d,J＝8.0Hz,1H),7.34(s,1H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),6.75(br s,2H),5.87(s,2H),5.23(br s,1H),1.37(s,6H).
实施例a-12:
2-氨基-4-(1-((6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲腈(化合物a-12)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(200mg，0.35mmol)溶于NMP(18mL)，加入CuCN(127mg，1.4mmol)。反应体系升温至180℃搅拌4小时，冷却至室温，加入乙酸乙酯(100mL)稀释，过滤，滤液用水(200mL×3次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯＝15/15/1～5/5/1)得到4-(1-((6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲腈(65mg，收率36％)。MS(ESI)M/Z:513.2[M+H] +.
步骤2：将4-(1-((6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲腈(60mg，0.12mmol)溶于三氟乙酸(5mL)。反应体系在40℃下搅拌5小时，减压浓缩，加入二氯甲烷(50mL)稀释，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝10/1/1)得到终产物2-氨基-4-(1-((6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲腈(16mg，收率35％)。MS(ESI)M/Z:392.9[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.23(s,1H),8.88(s,1H),7.81(t,J＝7.6Hz,1H),7.61(d,J＝8.0Hz,1H),7.16(d,J＝7.6Hz, 1H),7.11(br s,2H),5.88(s,2H),5.22(s,1H),1.36(s,6H).
实施例a-13:
4-(1-((6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(化合物a-13)的制备
反应步骤：
步骤1：将6-溴-2-吡啶甲酸乙酯(0.5g，2.2mmol)和2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷(0.22g，2.2mmol)溶于DMF(20mL)，加入碳酸钾(1.5g，10.9mmol)。反应体系升温至90℃并搅拌过夜。TLC监测显示反应结束，反应液冷却至室温，加水(60mL)稀释。混合液用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～5/1)得到6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2-吡啶甲酸乙酯(0.42g，收率78％)。MS(ESI)M/Z:249.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.58-7.54(m,1H),7.44(dd,J 1＝7.2Hz,J 2＝0.8Hz,1H),6.46(dd,J 1＝8.4Hz,J 2＝0.8Hz,1H),4.85(s,4H),4.40(q,J＝7.2Hz,2H),4.25(s,4H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H).
步骤2：将6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2-吡啶甲酸乙酯(750mg，3.0mmol)溶于四氢呋喃(35mL)，冷却至0℃，氮气保护下，滴加红铝甲苯溶液(3.6M，1.0mL，3.6mmol)。反应体系在0℃搅拌2小时，加入10％碳酸钠水溶液(70mL)淬灭反应。混合液用硅藻土过滤除去铝盐，分液，水相用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到(6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇(560mg，收率90％)。MS(ESI)M/Z:207.1[M+H] +.
步骤3：将(6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇(540mg，2.6mmol)溶于 甲苯(15mL)，冷却至0℃，加入DPPA(860mg，3.1mmol)和DBU(480mg，3.1mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(15mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到6-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷(450mg，收率74％)。MS(ESI)M/Z:232.1[M+H] +.
以2,4-二氯-7-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶为原料，参照实施例a-1的操作经四步制备得到终产物4-(1-((6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(67mg)。MS(ESI)M/Z:421.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.72(s,1H),7.89(s,1H),7.52(t,J＝8.0Hz,1H),6.63(br s,2H),6.54(d,J＝7.2Hz,1H),6.34(d,J＝8.0Hz,1H),5.66(s,2H),4.69(br s,4H),4.04(br s,4H),2.30(s,3H).
实施例a-14:
2-(6-((4-(2-氨基-7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-14)的制备
反应步骤：
步骤1：将2,4-二甲氧基-7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶(2.0g，7.6mmol)溶于冰乙酸(10mL)，分批加入碘化钠(5.6g，37.3mmol)。反应体系升温至100℃搅拌2小时，冷却至室温，减压浓缩除去大部分溶剂，加入乙酸乙酯(20mL)稀释，用饱和硫代硫酸钠(15mL)洗涤，分出有机层，水相用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到7-三氟甲基噻 吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1.0g，收率56％)。MS(ESI)M/Z:237.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.73(s,1H),11.55(s,1H),8.72(s,1H).
步骤2：将7-三氟甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(294mg，1.2mmol)溶于重蒸三氯氧磷(5mL)，室温下加入N,N-二异丙基乙胺(0.11mL，0.9mmol)。反应体系升温至80℃搅拌16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩除去大部分三氯氧磷，加入乙酸乙酯(20mL)稀释后，慢慢倒入到饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)中，搅拌至无气泡产生，分出有机层，水相用乙酸乙酯(10mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到2,4-二氯-7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶(195mg，收率58％)。MS(ESI)M/Z:273.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.53(s,1H).
以2,4-二氯-7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶为原料，参照实施例a-10的操作经五步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-7-(三氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(16mg)。MS(ESI)M/Z:436.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.47(s,1H),8.35(d,J＝1.1Hz,1H),7.74(t,J＝8.0Hz,1H),7.39(dd,J 1＝8.0Hz,J 2＝0.8Hz,1H),7.17(dd,J 1＝7.6Hz,J 2＝0.8Hz,1H),5.78(s,2H),5.24(s,1H),1.55(s,6H).
实施例a-15:
2-(6-((4-(2-氨基-7-环丙基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-15)的制备
反应步骤：
步骤1：将7-碘-2,4-二甲氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶(400mg，1.2mmol)和环丙基硼酸(154mg，1.8mmol)溶于1,4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝10/1，2.2mL)。氮气保护下，加入磷酸钾(763mg，3.6mmol)和Pd(dppf)Cl 2(175mg，0.24mmol)。反应体系升温至120℃并搅拌4小时。将反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(10mL)，分液，水相用乙酸乙酯(5mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1)得到7-环丙基-2,4-二甲氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶(161mg，收率56％)。MS(ESI)M/Z:237.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.16(s,1H),4.13(s,3H),4.06(s,3H),2.32-2.25(m,1H),1.01-0.90(m,4H).
步骤2：将7-环丙基-2,4-二甲氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶(161mg，0.68mmol)溶于冰乙酸(5mL)，分批加入碘化钠(510mg，3.4mmol)。反应体系升温至110℃搅拌2小时，冷却至室温，减压浓缩除去大部分溶剂，加入乙酸乙酯(10mL)稀释，用饱和硫代硫酸钠(10mL)洗涤，分出有机相，先用饱和食盐水(10mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到7-环丙基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(117mg，收率82％)。MS(ESI)M/Z:209.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.53(s,1H),11.23(s,1H),7.51(s,1H),2.00-1.96(m,1H),0.94-0.85(m,2H),0.69-0.61(m,2H).
步骤3：将7-环丙基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(117mg，0.56mmol)溶于重蒸三氯氧磷(2mL)，室温下加入N,N-二异丙基乙胺(0.053mL，0.42mmol)。反应体系升温至80℃搅拌过夜。反应液冷却至室温，减压浓缩除去大部分三氯氧磷，加入乙酸乙酯(10mL)稀释后，慢慢倒入到饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)中，搅拌至无气泡产生，分出有机层，水相用乙酸乙酯(10mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到2,4-二氯-7-环丙基噻吩并[3,2-d]嘧啶(106mg，收率77％)。MS(ESI)M/Z:245.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.45(d,J＝0.8Hz,1H),2.39-2.32(m,1H),1.16-1.02(m,2H),0.97-0.85(m,2H).
以2,4-二氯-7-环丙基噻吩并[3,2-d]嘧啶为原料，参照实施例a-10的操作经五步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-7-环丙基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(18mg)。MS(ESI)M/Z:408.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.43(s,1H),7.70(t,J＝8.0Hz,1H),7.36(dd,J 1＝8.0Hz,J 2＝0.8Hz,1H),7.32(d,J＝0.8Hz,1H),7.11(dd,J 1＝7.6Hz,J 2＝0.8Hz,1H),5.76(s,2H),2.28-2.21(m,1H),1.53(s,6H), 1.05-0.98(m,2H),0.84-0.78(m,2H).
实施例a-16:
2-(6-((4-(2-氨基-7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-16)的制备
反应步骤：
步骤1：将7-溴-2,4-二甲氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶(1.0g，3.6mmol)溶于1,4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝10/1，22mL)。氮气保护下，加入乙烯基硼酸频哪醇酯(1.1g，7.2mmol)，PdCl 2(dppf)(531mg，0.72mmol)和磷酸钾(2.3g，10.8mmol)。反应体系升温至120℃搅拌2小时，冷却至室温，加入乙酸乙酯(10mL)，分出有机层，水层用乙酸乙酯萃取(5mL×3次)，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂；石油醚/乙酸乙酯＝20/1)得到2,4-二甲氧基-7-乙烯基噻吩并[3,2-d]嘧啶(300mg，收率38％)。MS(ESI)M/Z:223.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.68(s,1H),7.04-6.93(m,1H),6.41(dd,J＝17.6,1.6Hz,1H),5.44(dd,J＝11.2,1.6Hz,1H),4.15(s,3H),4.08(s,3H).
步骤2：将N-甲基吗啉氧化物(CAS号：7529-22-8，632mg，5.4mmol)和二水合锇酸钾(50mg，0.14mmol)溶于四氢呋喃和水的混合溶剂(V 四氢呋喃/V 水＝2/1，6mL)，搅拌15分钟后，加入2,4-二甲氧基-7-乙烯基噻吩并[3,2-d]嘧啶(300mg，1.4mmol)，室温反应？小时。加入饱和Na 2SO 3溶液(10mL)淬灭反应，搅拌30分钟后，加入乙酸乙酯(10mL)，分出有机层，水层用乙酸乙酯(5mL×3次)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，剩余物溶于四氢呋喃(4mL)。高碘酸钠(577mg，2.7mmol)溶于水(2mL)中，冰浴条件下滴加至上述溶液中，室温反应1小时。加入乙酸乙酯(10mL)，分出有机层，水层用乙酸乙酯(5mL×3次)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干 燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到2,4-二甲氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(99mg，收率33％)。MS(ESI)M/Z:225.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ10.39(s,1H),8.62(s,1H),4.18(s,3H),4.11(s,3H).
步骤3：将2,4-二甲氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(362mg，1.6mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，降温至-20℃，滴加DAST(519mg，3.2mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌3小时，反应结束后缓慢加入饱和碳酸氢钠水溶液至无气泡产生，分出有机层，水相用二氯甲烷(5mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到7-(二氟甲基)-2,4-二甲氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶(330mg，收率83％)。MS(ESI)M/Z:247.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.12(td,J＝2.0,1.2Hz,1H),7.02(td,J＝55.2,0.8Hz,1H),4.16(s,3H),4.07(s,3H). 19F NMR(376MHz,CDCl 3)δ-113.28.
步骤4：将7-(二氟甲基)-2,4-二甲氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶(330mg，1.3mmol)溶于冰乙酸(6mL)，分批加入碘化钠(602mg，4.0mmol)。反应体系升温至110℃搅拌2小时后，冷却至室温，减压浓缩除去大部分溶剂，加入乙酸乙酯(10mL)稀释，用饱和硫代硫酸钠(20mL)洗涤，分出有机相。水相用乙酸乙酯(5mL×3次)萃取，合并有机层，先用饱和食盐水(15mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(192mg，粗品)，直接用于下步反应。MS(ESI)M/Z:219.0[M+H] +.
步骤5：将7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(100mg，粗品)溶于重蒸三氯氧磷(1mL)，室温下加入N,N-二甲基苯胺(44mg，0.36mmol)。反应体系升温至80℃搅拌过夜。反应液冷却至室温，减压浓缩除去大部分三氯氧磷，加入乙酸乙酯(10mL)稀释后，冰浴下缓慢滴加饱和碳酸氢钠溶液直至无气泡放出，分出有机层，水相用乙酸乙酯(5mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到2,4-二氯-7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶(70mg，二步总收率41％)。MS(ESI)M/Z:255.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ8.44(s,1H),7.08(td,J＝54.4,0.8Hz,1H). 19F NMR(376MHz,CDCl 3)δ-113.65.
以2,4-二氯-7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶为原料，参照实施例a-10的操作经五步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-7-(二氟甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(14mg)。MS(ESI)M/Z:418.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3): δ8.46(s,1H),8.26(t,J＝1.6Hz,1H),7.73(t,J＝7.6Hz,1H),7.38(dd,J＝8.0,0.8Hz,1H),7.16(dd,J＝7.6,0.8Hz,1H),7.00(t,J＝55.2Hz,1H),5.78(s,2H),5.15(s,2H),4.66(s,1H),1.54(s,6H). 19F NMR(376MHz,CDCl 3)δ-113.52.
实施例a-17:
1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)环丁基-1-醇(化合物a-17)的制备
反应步骤：
步骤1：将(6-溴吡啶-2-基)甲醇(17.6g，94.1mmol)溶于二氯甲烷(200mL)。氮气保护下，冷却至0℃，依次加入咪唑(7.7g，113mmol)和TBSCl(15.7g，113mmol)。反应体系升温至25℃并搅拌2小时，加入水(100mL)，分液，水相用二氯甲烷(100mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(200mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝19/1～9/1)得到2-溴-6-(((叔丁基二甲基硅)氧基)甲基)吡啶(25.0g，收率88％)。MS(ESI)M/Z:302.0[M+H] +.
步骤2：将2-溴-6-(((叔丁基二甲基硅)氧基)甲基)吡啶(6.0g，19.9mmol)溶于干燥四氢呋喃(60mL)，氮气保护下，降温至-78℃，滴加正丁基锂(8.1mL，20.3mmol)，搅拌0.5小时后，加入环丁基酮(1.54g，22.0mmol)。然后反应体系自然升温至室温，搅拌2小时后再冷却至0℃，加入TBAF·3H 2O(6.3g，20.0mmol)，室温继续搅拌20小时。缓慢加入饱和氯化铵水溶液(50mL)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(100mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～2/1)得到1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)环丁基-1-醇(2.0g，收率56％)。MS(ESI)M/Z:180.1[M+H] +.
步骤3：将1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)环丁基-1-醇(1.0g，5.6mmol)溶于甲苯(20mL)，冷却至0℃，加入DPPA(1.9g，6.8mmol)和DBU(1.0g，6.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(30mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～10/1)得到1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)环丁基-1-醇(700mg，收率61％)。MS(ESI)M/Z:204.7[M+H] +.
步骤4：将7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(150mg，0.40mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，4mL)。氮气保护下，依次加入1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)环丁基-1-醇(87mg，0.43mmol)、五水硫酸铜(26mg，0.08mmol)和抗坏血酸钠(16mg，0.07mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌2小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1～3/1)得到1-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)环丁基-1-醇(80mg，收率19％)。MS(ESI)M/Z:578.2[M+H] +.
步骤5：将1-(6-((4-(7-溴-2-((4-甲氧基苄基)氨基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)环丁基-1-醇(80mg，0.14mmol)溶于二氯甲烷(3mL)，加入三氟乙酸(5mL)。反应体系在40℃下搅拌5小时，减压浓缩，加入乙酸乙酯(50mL)稀释，然后用饱和碳酸钠水溶液(20mL×3次)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用叔丁基甲醚打浆得到终产物1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)环丁基-1-醇(20mg，收率30％)。MS(ESI)M/Z:457.9[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.87(s,1H),8.45(s,1H),7.81(t,J＝8.0Hz,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.23(d,J＝7.6Hz,1H),6.92(br s,2H),5.93(s,2H),5.75(s,1H),2.43-2.37(m,2H),2.19-2.11(m,2H),1.79-1.64(m,2H).
实施例a-18:
1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)环戊基-1-醇(化合物a-18)的制备
反应步骤：
以环戊酮替换环丁酮，参照实施例a-17的操作经五步制备得到终产物1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)环戊基-1-醇(36mg)。MS(ESI)M/Z:471.9[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.84(s,1H),8.46(s,1H),7.80(t,J＝7.6Hz,1H),7.63(d,J＝7.6Hz,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),6.92(br s,2H),5.87(s,2H),5.08(s,1H),2.00-1.97(m,2H),1.80-1.66(m,6H).
实施例a-19:
(S)-7-溴-4-(1-((6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(化合物a-19)的制备
反应步骤：
以(S)-2-(叠氮甲基)-6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶为原料，参照实施例a-17的操 作经二步制备得到终产物(S)-7-溴-4-(1-((6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(45mg)。MS(ESI)M/Z:488.3[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.85(s,1H),8.46(s,1H),7.86(t,J＝7.6Hz,1H),7.40(d,J＝7.6Hz,1H),7.29(d,J＝7.6Hz,1H),6.92(brs,2H),5.88(s,2H),4.51(s,2H),4.24(brs,1H),3.76-3.60(m,4H),1.96-1.93(m,2H).
实施例a-20:
(R)-7-溴-4-(1-((6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(化合物a-20)的制备
反应步骤：
以(R)-2-(叠氮甲基)-6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶为原料，参照实施例a-17的操作经二步制备得到终产物(R)-7-溴-4-(1-((6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(55mg)。MS(ESI)M/Z:488.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.85(s,1H),8.46(s,1H),7.86(t,J＝7.6Hz,1H),7.40(d,J＝7.6Hz,1H),7.29(d,J＝7.6Hz,1H),6.93(brs,2H),5.88(s,2H),4.51(s,2H),4.24(brs,1H),3.76-3.59(m,4H),1.96-1.91(m,2H).
实施例a-21:
7-溴-4-(1-((6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(化合物a-21)的制备
反应步骤：
以2-(叠氮甲基)-6-(甲氧基甲基)吡啶为原料，参照实施例a-17的操作经二步制备得到终产物7-溴-4-(1-((6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(40mg)。MS(ESI)M/Z:432.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.85(s,1H),8.46(s,1H),7.86(t,J＝7.6Hz,1H),7.39(d,J＝7.6Hz,1H),7.27(d,J＝7.6Hz,1H),6.93(brs,2H),5.88(s,2H),4.46(s,2H),3.35(s,3H).
实施例a-22:
2-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-1-氧化物(化合物a-22)的制备
反应步骤：
步骤1：将7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(1.6g，4.3mmol)溶于三氟乙酸(20mL)。反应体系升温至50℃搅拌12小时，减压浓缩除去大部分三氟乙 酸，加入30％碳酸钠水溶液(30mL)。混合液用二氯甲烷(30mL×3次)萃取。合并有机相，先用饱和食盐水(20毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(1.0g，收率92％)。MS(ESI)M/Z:254.6[M+H] +.
步骤2：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(100mg，0.40mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，4mL)。氮气保护下，依次加入2-(叠氮甲基)-6-(2-羟丙-2-基)吡啶-1-氧化物(92mg，0.40mmol)、五水硫酸铜(20mg，0.08mmol)和抗坏血酸钠(8mg，0.04mmol)。反应体系升温至50℃搅拌2小时后，冷却至室温，加入水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶制备色谱纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～1/1/1)得到终产物2-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-1-氧化物(70mg，收率38％)。MS(ESI)M/Z:462.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.94(s,1H),8.46(s,1H),7.73(d,J＝6.8Hz,1H),7.49(t,J＝7.6Hz,1H),7.16(d,J＝6.8Hz,1H),6.96(brs,2H),6.63(s,1H),5.98(s,2H),1.60(s,6H).
参照实施例a-22的合成方法制备得到如下目标产物：
实施例a-28:
2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)苯基)丙-2-醇(化合物a-28)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-(3-(羟甲基)苯基)丙-2-醇(750mg，4.5mmol)溶于甲苯(30mL)，冷却至0℃，加入DPPA(1.2g，4.3mmol)和DBU(653mg，4.3mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到2-(3-(叠氮甲基)苯基)丙-2-醇(492mg，收率57％)。MS(ESI)M/Z:174.0[M-H 2O+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.47-7.43(m,2H),7.33(t,J＝7.6Hz,1H),7.19(d,J＝7.6Hz,1H),5.07(s,1H),4.44(s,2H),1.44(s,6H).
步骤2：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(40mg，0.16mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，4mL)。氮气保护下，依次加入2-(3-(叠氮甲基)苯基)丙-2-醇(38mg，0.20mmol)、五水硫酸铜(13mg，0.04mmol)和抗坏血酸钠(8mg，0.04mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌2小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1～3/1)得到2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基) 苯基)丙-2-醇(30mg，收率43％)。MS(ESI)M/Z:445.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.81(s,1H),8.45(s,1H),7.59(s,1H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.33(t,J＝7.6Hz,1H),7.23(d,J＝7.6Hz,1H),6.91(s,2H),5.75(s,2H),5.07(s,1H),1.45(s,6H).
实施例a-29:
3-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)氧杂环丁烷-3-醇(化合物a-29)的制备
反应步骤：
步骤1：将3-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)氧杂环丁烷-3-醇(1.0g，5.5mmol)溶于甲苯(20ml)，冷却至0℃，加入DPPA(1.9g，6.8mmol)和DBU(1.0g，6.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20ml)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(30ml×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～10/1)得到3-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)氧杂环丁烷-3-醇(200mg，收率18％)。MS(ESI)M/Z:207.1[M+H +].
步骤2：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(50mg，0.20mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，4mL)。氮气保护下，依次加入3-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)氧杂环丁烷-3-醇(46mg，0.22mmol)、五水硫酸铜(20mg，0.07mmol)和抗坏血酸钠(8mg，0.04mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌2小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～3/1/1)得到3-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)氧杂环丁烷-3-醇(50mg，收率43％)。MS(ESI)M/Z:459.9[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.89(s,1H),8.46(s,1H),7.88(t,J＝ 7.6Hz,1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.28(d,J＝7.6Hz,1H),6.92(s,2H),6.56(s,1H),5.95(s,2H),4.84(d,J＝6.0Hz,2H),4.60(d,J＝6.0Hz,2H).
实施例a-30:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(化合物a-30)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-甲基-2-(6-甲基吡啶-2-基)丙腈(800mg，5.0mmol)溶于四氯化碳(6mL)，室温下依次加入N-溴代丁二酰亚胺(976mg，5.5mmol)和过氧化苯二甲酰(120mg，0.5mmol)。反应体系氮气保护下升温至78℃搅拌16小时，冷却至室温，向反应液中慢慢加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)淬灭反应。混合液用二氯甲烷(40mL×2次)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝49/1)得到2-(6-(溴甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(400mg，收率34％)。MS(ESI)M/Z:239.1[M+H +].
步骤2：将2-(6-(溴甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(200mg，0.84mmol)溶于二甲亚砜(6mL)，室温下加入叠氮化钠(82mg，1.3mmol)。反应体系升温至50℃搅拌16小时。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(100mL×2次)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝9/1)得到2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(80mg，收率47％)。MS(ESI)M/Z:201.8[M+H +].
步骤3：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(56mg，0.22mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，6mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(44mg，0.22mmol)、五水硫酸铜(17mg，0.067mmol)和 抗坏血酸钠(10mg，0.05mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌3小时。将反应液冷却至室温，加入水(20mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(100mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。残余物用无水***搅拌结晶纯化得到2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(20mg，收率43％)。MS(ESI)M/Z:455.6[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.89(s,1H),8.46(s,1H),7.94(t,J＝7.6Hz,1H),7.59(d,J＝8.0Hz,1H),7.30(d,J＝7.6Hz,1H),6.93(s,2H),5.94(s,2H),1.64(s,6H).
实施例a-31:
7-溴-4-(1-((6-(cis-2,6-二甲基***啉)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(化合物a-31)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-溴-6-(((叔丁基二甲基硅基)氧)甲基)吡啶(1.0g，3.3mmol)溶于DMF(15mL)，室温下依次加入cis-2,6-二甲基***啉(460mg，4.0mmol)，碘化亚铜(63mg，0.33mmol)和碳酸钾(2.3g，16.7mmol)。反应体系在氮气保护下升温至95℃搅拌16小时，冷却至室温，向反应液中慢慢加入水(30mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝20/1/1～3/1/1)得到cis-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧)甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基***啉(600mg，收率52％)。MS(ESI)M/Z:337.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.52-7.48(m,1H),6.84(d,J＝7.2Hz,1H),6.48(d,J＝8.4Hz,1H),4.68(s,2H),4.07-4.03(m,2H),3.75-3.71(m,2H),2.50-2.44(m,2H),1.27(d,J＝6.4Hz,6H),0.96(s,9H),0.11(s,6H).
步骤2：将cis-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧)甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基***啉(600mg，1.8mmol)溶于四氢呋喃(6ml)，加入TBAF.3H 2O(560mg，2.1mmol)。反应体系在室温下搅拌16小时后，加入水(3mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到(6-(cis-2,6-二甲基***啉)吡啶-2-基)甲醇(350mg，收率88％)。MS(ESI)M/Z:222.9[M+H +].
步骤3：将(6-(cis-2,6-二甲基***啉)吡啶-2-基)甲醇(350mg，1.6mmol)溶于甲苯(10mL)，冷却至0℃，加入DPPA(492mg，1.8mmol)和DBU(273mg，1.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌5小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～3/1/1)得到cis-4-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基***啉(150mg，收率38％)。MS(ESI)M/Z:248.1[M+H +].
步骤4：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(51mg，0.20mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，4mL)。氮气保护下，依次加入cis-4-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基***啉(49mg，0.20mmol)、五水硫酸铜(20mg，0.07mmol)和抗坏血酸钠(8mg，0.04mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌2小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～3/1/1)得到7-溴-4-(1-((6-(cis-2,6-二甲基***啉)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(30mg，收率43％)。MS(ESI)M/Z:500.9[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.80(s,1H),8.45(s,1H),7.58-7.54(m,1H),6.90(brs,2H),6.78(d,J＝8.4Hz,1H),6.57(d,J＝7.2Hz,1H),5.72(s,2H),4.04(d,J＝11.2Hz,2H),3.51-3.47(m,2H),2.34-2.28(m,2H),1.05(d,J＝6.0Hz,6H).
实施例a-32:
1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇(化合物a-32)的制备
反应步骤：
步骤1：将1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇(397mg，1.8mmol)溶于甲苯(6mL)，冷却至0℃，加入DPPA(492mg，1.8mmol)和DBU(273mg，1.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌5小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～3/1/1)得到1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇(230mg，收率52％)。MS(ESI)M/Z:248.2[M+H +].
步骤2：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(51mg，0.20mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，4mL)。氮气保护下，依次加入1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇(49mg，0.20mmol)、五水硫酸铜(20mg，0.07mmol)和抗坏血酸钠(8mg，0.04mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌2小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～3/1/1)得到1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇(32mg，收率32％)。MS(ESI)M/Z:500.9[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.78(s,1H),8.45(s,1H),7.50(t,J＝8.0Hz,1H),6.91(brs,2H),6.77(d,J＝8.8Hz,1H),6.48(d,J＝7.2Hz,1H),5.67(s,2H),4.30(s,1H),3.76-3.73(m,2H),3.33-3.25(m,2H),1.40-1.35(m,4H),1.08(s,3H).
实施例a-33:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基-d2)吡啶-2-基)丙 -2-醇(化合物a-33)的制备
反应步骤：
步骤1：将6-(2-羟丙-2-基)吡啶甲酸甲酯(1.0g，5.1mmol)溶于无水四氢呋喃(20mL)，冷却至0℃，加入氘代四氢铝锂(430mg，10.2mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌2小时。向反应液中慢慢加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到2-(6-(羟甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇(650mg，收率75％)。MS(ESI)M/Z:169.9[M+H +].
步骤2：将2-(6-(羟甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇(650mg，3.8mmol)溶于甲苯(10mL)，冷却至0℃，加入DPPA(1.0g，3.9mmol)和DBU(591mg，3.9mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌5小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～3/1)得到2-(6-(叠氮甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇(350mg，收率47％)。MS(ESI)M/Z:195.1[M+H +].
步骤3：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(51mg，0.20mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，4mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇(39mg，0.20mmol)、五水硫酸铜(20mg，0.07mmol)和抗坏血酸钠(8mg，0.04mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌2小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～1/1/1)得到2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇(22mg，收率32％)。MS(ESI)M/Z:448.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.85(s,1H),8.45(s,1H),7.81(t,J＝8.0Hz,1H),7.61(d,J＝8.0Hz,1H),7.17(d,J＝7.6Hz,1H),6.92(s,2H),5.22(s,1H),1.36(s,6H).
实施例a-34:
1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(化合物a-34)的制备
反应步骤：
步骤1：将1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(350mg，1.8mmol)溶于甲苯(10mL)，冷却至0℃，加入DPPA(492mg，1.8mmol)和DBU(273mg，1.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌5小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～1/1)得到1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(150mg，收率38％)。MS(ESI)M/Z:242.3[M+Na +].
步骤2：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(51mg，0.20mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，4mL)。氮气保护下，依次加入1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(44mg，0.20mmol)、五水硫酸铜(20mg，0.07mmol)和抗坏血酸钠(8mg，0.04mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌2小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～2/1/1)得到1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(60mg，收率64％)。MS(ESI)M/Z:472.8[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.77(s,1H),8.45(s,1H),7.52(t,J＝8.0Hz,1H),6.93(s,2H),6.52(d,J＝7.2Hz,1H),6.35(d,J＝8.4Hz,1H),5.67(s,2H),5.53(s,1H),3.78-3.70(m,4H),1.41(s,3H).
实施例a-35:
2-(1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(化合物a-35)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-溴-6-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)吡啶(1.4g，4.7mmol)，2-(氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇盐酸盐(850mg，5.6mmol)，碳酸铯(3.0g，9.3mmol)，醋酸钯(105mg，0.47mmol)和1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(290mg，0.47mmol)溶于甲苯(30mL)中，氮气置换三次，升温至120℃回流搅拌2小时。LCMS监测显示原料反应完毕，反应液冷却至室温，加入水(20mL)。混合液用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/5)得到2-(1-(6-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(600mg，收率38％)。MS(ESI)M/Z:337.3[M+H +].
步骤2：将2-(1-(6-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(600mg，1.8mmol)溶于四氢呋喃(5mL)，冰浴冷却下加入四丁基氟化铵(560mg，2.1mmol)，升至室温搅拌2小时。LCMS监测显示原料反应完毕，加入水(10mL)，混合液用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到2-(1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(350mg，收率88％)。MS(ESI)M/Z:222.8[M+H +].
步骤3：将2-(1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(350mg，1.6mmol)溶于甲苯和四氢呋喃的混合溶液(V 甲苯/V 四氢呋喃＝5/1，6mL)，冷却至0～5℃，加入DPPA(492mg，1.8mmol)和DBU(273mg，1.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌5小 时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/10)得到2-(1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(120mg，收率31％)。MS(ESI)M/Z:248.1[M+H +].
步骤4：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(110mg，0.43mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，6mL)。氮气保护下，依次加入2-(1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(109mg，0.44mmol)、五水硫酸铜(20mg，0.07mmol)和抗坏血酸钠(18mg，0.08mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌3小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(50mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用***结晶纯化得到2-(1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(40mg，收率18％)。MS(ESI)M/Z:500.9[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.77(s,1H),8.46(s,1H),7.49(t,J＝7.6Hz,1H),6.92(s,2H),6.45(d,J＝7.6Hz,1H),6.30(d,J＝8.4Hz,1H),5.65(s,2H),4.44(s,1H),3.81-3.75(m,4H),2.70-2.60(m,1H),1.03(s,6H).
实施例a-36:
7-溴-4-(1-((6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(化合物a-36)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-(溴甲基)-6-(((叔丁基二甲基硅)氧)甲基)吡啶(800mg，2.5mmol)和2-氟苯酚(341mg，3.0mmol)溶于干燥DMF(10mL)中，加入碳酸钾(525mg，3.8mmol)， 反应体系在25℃搅拌20小时。LCMS监测显示原料反应完毕，加入水(20mL)，混合液用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取。合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝9/1)得到2-(((叔丁基二甲基硅)氧)甲基)-6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶(800mg，收率91％)。MS(ESI)M/Z:347.9[M+H +].
步骤2：将2-(((叔丁基二甲基硅)氧)甲基)-6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶(800mg，2.3mmol)溶于四氢呋喃(10mL)，冰浴冷却下加入三水合四丁基氟化铵(728mg，2.3mmol)，保持0℃搅拌1小时。LCMS监测显示原料反应完毕，加入水(10mL)，混合液用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～2/1)得到(6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶-2-基)甲醇(500mg，收率93％)。MS(ESI)M/Z:234.7[M+H +].
步骤3：将(6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶-2-基)甲醇(300mg，1.3mmol)溶于甲苯(10mL)，冷却至0～5℃，加入DPPA(425mg，1.5mmol)和DBU(235mg，1.5mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝50/1～20/1)得到2-(叠氮甲基)-6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶(300mg，收率90％)。MS(ESI)M/Z:259.2[M+H +].
步骤4：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(30mg，0.12mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，6mL)。氮气保护下，依次加入2-(叠氮甲基)-6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶(30mg，0.12mmol)、五水硫酸铜(7mg，0.03mmol)和抗坏血酸钠(5mg，0.02mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌3小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(50mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用***打浆纯化得到7-溴-4-(1-((6-((2-氟苯氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(40mg，收率65％)。MS(ESI)M/Z:512.0[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.86(s,1H),8.46(s,1H),7.92(t,J＝7.6Hz,1H),7.52(d,J＝7.6Hz,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),7.24-7.18(m,2H),7.07(t,J＝8.0Hz,1H),6.94-6.85(m,3H),5.92(s,2H),5.21(s,2H).
实施例a-37:
(R)-1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基) 吡咯啉-3-醇(化合物a-37)的制备
反应步骤：
步骤1：将6-氟吡啶甲酸甲酯(1.0g，6.5mmol)和(R)-吡咯啉-3-醇(562mg，6.5mmol)溶于干燥DMF(100mL)中，加入碳酸钾(4.5g，32.2mmol)和碘化亚铜(124mg，0.65mmol)，氮气置换3次，反应体系升温至98℃搅拌过夜。TLC监测显示原料反应完毕，反应液冷却至室温，过滤，滤饼用乙酸乙酯(20mL×2次)洗涤，混合液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1)得到(R)-6-(3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯(850mg，收率59％)。MS(ESI)M/Z:222.7[M+H +].
步骤2：将(R)-6-(3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯(850mg，3.8mmol)和咪唑(785mg，11.5mmol)溶于二氯甲烷(30mL)，冰浴冷却下加入TBSCl(1160mg，7.7mmol)，室温搅拌过夜。TLC监测显示原料反应完毕，加入水(50mL)，分液，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到(R)-6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯(1.0g，收率78％)。MS(ESI)M/Z:336.9[M+H +].
步骤3：将(R)-6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯(1.0g，3.0mmol)溶于无水四氢呋喃(30mL)，冷却至0℃，滴加硼氢化锂的四氢呋喃溶液(1M,6.6mL，6.6mmol)。反应体系自然升温至室温搅拌2小时。缓慢向反应液中加入冷饱和氯化铵溶液(50mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(50mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到(R)-(6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇(400mg，收率43％)。MS(ESI)M/Z:309.3[M+H +].
步骤4：将(R)-(6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇(400mg，1.3mmol)溶于无水四氢呋喃(50mL)，冷却至0～5℃，加入DPPA(430mg，1.6mmol) 和DBU(240mg，1.6mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(50mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(50mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到(R)-2-(叠氮甲基)-6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶(60mg，收率14％)。MS(ESI)M/Z:334.3[M+H +].
步骤5：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(30mg，0.12mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，6mL)。氮气保护下，依次加入(R)-2-(叠氮甲基)-6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶(40mg，0.12mmol)、五水硫酸铜(5mg，0.02mmol)和抗坏血酸钠(10mg，0.03mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌3小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(50mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到(R)-7-溴-4-(1-((6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(51mg，收率73％)。MS(ESI)M/Z:587.2[M+H] +.
步骤6：将(R)-7-溴-4-(1-((6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(50mg，0.085mmol)溶于四氢呋喃(5mL)，冰浴冷却下加入三水合四丁基氟化铵(54mg，0.17mmol)，室温搅拌12小时。TLC监测显示原料反应完毕，加入水(10mL)，混合液用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用***结晶纯化得到(R)-1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)吡咯啉-3-醇(30mg，收率74％)。MS(ESI)M/Z:473.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.77(s,1H),8.45(s,1H),7.49(t,J＝7.6Hz,1H),6.93(s,2H),6.47(d,J＝6.8Hz,1H),6.38(d,J＝8.4Hz,1H),5.66(s,2H),4.92(s,1H),4.34(brs,1H),3.43-3.24(m,4H),1.96-1.86(m,2H).
实施例a-38:
(S)-1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)吡咯啉-3-醇(化合物a-38)的制备
反应步骤：
以(S)-吡咯啉-3-醇为原料，参照实施例a-37的操作经六步制备得到终产物(S)-1-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)吡咯啉-3-醇(50mg)。MS(ESI)M/Z:473.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.77(s,1H),8.45(s,1H),7.49(t,J＝7.6Hz,1H),6.93(s,2H),6.47(d,J＝7.2Hz,1H),6.38(d,J＝8.0Hz,1H),5.66(s,2H),4.92(s,1H),4.34(brs,1H),3.42-3.22(m,4H),1.98-1.86(m,2H).
实施例a-39:
7-溴-4-(1-((6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(化合物a-39)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-溴-6-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)吡啶(2.0g，6.6mmol)，3,3-二氟氮杂环丁烷盐酸盐(2.1g，16.3mmol)，碳酸铯(3.0g，9.3mmol)，醋酸钯(149mg，0.66mmol)和1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(414mg，0.66mmol)溶于甲苯(30mL)中，氮气置换三次， 升温至120℃回流搅拌2小时。LCMS监测显示原料反应完毕，反应液冷却至室温，加入水(20mL)。混合液用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝50/1)得到2-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)-6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶(700mg，收率34％)。MS(ESI)M/Z:315.3[M+H +].
步骤2：将2-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)-6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶(700mg，2.2mmol)溶于四氢呋喃(5mL)，冰浴冷却下加入三水合四丁基氟化铵(696mg，2.2mmol)，室温搅拌2小时。LCMS监测显示原料反应完毕，加入水(10mL)，混合液用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到(6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲醇(400mg，收率90％)。MS(ESI)M/Z:200.6[M+H +].
步骤3：将(6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲醇(400mg，2.0mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，冷却至0～5℃，依次加入三乙胺(606mg，6.0mmol)和甲烷磺酰氯(344mg，3.0mmol)。反应体系自然升温至室温搅拌2小时。TLC监测显示原料反应完毕，加入水(10mL)，混合液用二氯甲烷(40mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到(6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲磺酸甲酯(500mg，收率90％)。MS(ESI)M/Z:278.8[M+H +].
步骤4：将7-溴-4-乙炔基-N-(4-甲氧基苄基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(3.0g，8.0mmol)溶于DMF和无水乙醇的混合溶剂(V DMF/V 无水乙醇＝1/1，60mL)，加入叠氮基三甲基硅烷(1.4g，12.0mmol)和碘化亚铜(7.6mg，0.04mmol)。反应体系升温至90℃并搅拌12小时。将反应液冷却至室温，加入水(200mL)稀释，混合液用乙酸乙酯(200mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-4-(1H-1,2,3-***-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(2.5g，收率75％)。MS(ESI)M/Z:417.2[M+H] +.
步骤5：将7-溴-N-(4-甲氧基苄基)-4-(1H-1,2,3-***-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(800mg，1.9mmol)和(6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲磺酸甲酯(500mg，1.8mmol)溶于干燥DMF(3mL)中，加入碳酸钾(730mg，5.3mmol)和碘化钠(264mg，1.8mmol)，反应体系在30℃搅拌3小时。TLC监测显示原料反应完毕，加入水(10mL)，混合液用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经高效制备液相色谱纯化得到7-溴-4-(1-(((6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-N-(4-甲 氧基苄基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(100mg，收率10％)。MS(ESI)M/Z:599.1[M+H +].
步骤6：将7-溴-4-(1-(((6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-N-(4-甲氧基苄基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(100mg，0.17mmol)溶于三氟乙酸(5mL)，反应体系升温至50℃搅拌12小时。TLC监测显示原料反应完毕，减压浓缩除去大部分三氟乙酸，加入30％碳酸钠水溶液(10mL)，混合液用二氯甲烷(20mL×3次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用***结晶纯化得到7-溴-4-(1-((6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(45mg，收率56％)。MS(ESI)M/Z:478.9[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.81(s,1H),8.46(s,1H),7.64(t,J＝7.6Hz,1H),6.93(s,2H),6.67(d,J＝7.2Hz,1H),6.55(d,J＝8.4Hz,1H),5.73(s,2H),4.35(t,J＝12.4Hz,4H).
实施例a-40:
7-溴-4-(1-((6-(2-氟丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(化合物a-40)的制备
反应步骤：
将2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基]-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(300mg，0.67mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，冷却至0-5℃，滴加二乙胺基三氟化硫(161mg，1.0mmol)，室温下搅拌12小时。TLC监测显示原料反应完毕，加入饱和氯化铵溶液(10mL)，混合液用二氯甲烷(50mL×2次)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(10mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用***打浆纯化得到7-溴-4-(1-((6-(2-氟丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(40mg，收率13％)。MS(ESI)M/Z:448.0[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.88(s,1H),8.46(s,1H),7.90(t,J＝7.6Hz,1H),7.51(d,J＝7.6Hz,1H),7.26 (d,J＝7.6Hz,1H),6.94(s,2H),5.91(s,2H),1.62(s,3H),1.56(s,3H).
实施例a-41:
4-(1-(苯并呋喃-6-基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(化合物a-41)的制备
反应步骤：
以苯并呋喃-6-基甲醇为原料，参照实施例a-37的操作经二步制备得到终产物4-(1-(苯并呋喃-6-基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(34.4mg)。MS(ESI)M/Z:426.9[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.81(s,1H),8.45(s,1H),8.03(d,J＝2.0Hz,1H),7.76(s,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),7.00(s,1H),6.90(brs,2H),5.84(s,2H).
实施例a-42:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙-1-醇(化合物a-42)的制备
反应步骤：
以6-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)吡啶甲酸甲酯(制备可参考WO2020/264499A1)为原料，参照实施例a-37的操作经五步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙-1-醇(29mg)。MS(ESI)M/Z:460.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.85(s,1H),8.46(s,1H),7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,1H),6.93(brs,2H),5.87(s,2H),4.59(t,J＝5.6Hz,1H),3.47(d,J＝5.6Hz,1H),1.18(s,6H).
实施例a-43:
2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇(化合物a-43)的制备
反应步骤：
步骤1：将((3-溴-2-氟苄基)氧)(叔丁基)二甲基硅烷(1.2g，3.8mmol)溶于甲醇和二甲亚砜的混合溶液(V 甲醇/V 二甲亚砜＝1/1,120mL)，依次加入三乙胺(0.9g，8.9mmol)，醋酸钯(80mg，0.36mmol)和1.3-双二苯基膦丙烷(160mg，0.39mmol)，在一氧化碳8公斤压力氛围下，升温至80℃回流搅拌16小时。TLC监测显示原料消失，冷却至室温，过滤除去催化剂，滤液减压浓缩。残留物溶于乙酸乙酯(60mL)，用水洗涤2-3次，饱和食盐水洗涤1次，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯(800mg，收率34％)。MS(ESI)M/Z:299.1[M+H +].
步骤2：在氮气氛围下往烧瓶中加入甲基溴化镁(6.0mL，18.2mmol，3M在2-甲基四氢呋喃中)，冷却至0℃，滴加3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯(800mg，2.7mmol)的干燥四氢呋喃(5mL)溶液，约20分钟滴完，滴完后升至室温搅拌3小时。TLC监测显示原料消失，将反应液在冰浴下用饱和氯化铵溶液(30mL)淬灭，乙酸乙酯(50mL×2次)萃取。合并有机层，饱和食盐水(30mL×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到2-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-氟苯基) 丙-2-醇(300mg，收率38％)。MS(ESI)M/Z:299.2[M+H] +.
步骤3：将2-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇(300mg，1.0mmol)溶于四氢呋喃(10mL)，加入四丁基氟化铵(316mg，1.2mmol)，室温搅拌12小时。TLC监测显示原料消失，往反应液中加入乙酸乙酯(20mL)稀释，用水(100mL×3次)洗涤，再用饱和食盐水(30mL×2次)洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到2-(2-氟-3-(羟甲基)苯基)丙-2-醇(190mg，粗品)。MS(ESI)M/Z:185.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.49(d,J＝7.6Hz,1H),7.34(t,J＝6.8Hz,1H),7.13(t,J＝7.6Hz,1H),4.76(s,2H),1.64(s,6H).
步骤4：将2-(2-氟-3-(羟甲基)苯基)丙-2-醇(190mg，约1.0mmol)溶于干燥甲苯(7mL升)，冷却至0-5℃，依次加入叠氮磷酸二苯酯(282mg，1.0mmol)和1,8-二氮杂环[5,4,0]十一烯-7(157mg，1.0mmol)，升至室温搅拌2小时。TLC监测显示原料消失，减压浓缩得到2-(3-(叠氮甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇(200mg，粗品)，直接用于下步反应。MS(ESI)M/Z:210.1[M+H] +.
步骤5：将7-溴-4-乙炔基噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-胺(100mg，0.40mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝2/1/1，6mL)。氮气保护下，依次加入2-(3-(叠氮甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇(100mg，0.44mmol)、五水硫酸铜(26mg，0.05mmol)和抗坏血酸钠(18mg，0.06mmol)。反应体系升温至50℃并搅拌3小时。将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(50mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩，无水***结晶纯化得到终产物2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇(41.5mg)。MS(ESI)M/Z:463.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.80(s,1H),8.45(s,1H),7.66-7.62(m,1H),7.27-7.25(m,1H),7.21-7.17(m,1H),6.93(brs,2H),5.81(s,2H),5.34(s,1H),1.48(s,6H).
实施例a-44:
2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-5-甲氧基苯基)丙-2-醇(化合物a-44)的制备
反应步骤：
以3-(((叔丁基二甲基硅基)氧基)甲基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯为原料，参照实施例a-43的操作经四步制备得到终产物2-(3-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-5-甲氧基苯基)丙-2-醇(4.8mg)。MS(ESI)M/Z:475.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.80(s,1H),8.45(s,1H),7.13(s,1H),7.01-6.98(m,1H),6.91(brs,2H),6.86-6.84(m,1H),5.69(s,2H),5.07(s,1H),3.74(s,3H),1.39(s,6H).
实施例a-45:
2-(2-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-4-基)丙-2-醇(化合物a-45)的制备
反应步骤：
以2-(羟甲基)异烟酸甲酯为原料，参照实施例a-43的操作经三步制备得到终产物2-(2-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-4-基)丙-2-醇(50mg)。MS(ESI)M/Z:445.9[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.84(s,1H),8.46(s,2H),7.58(s,1H),7.42-7.40(m,1H),6.94(brs,2H),5.88(s,2H),5.33(s,1H),1.41(s,6H).
实施例a-46:
2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-5-氟吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物a-46)的制备
反应步骤：
步骤1：将6-氯-5-氟吡啶甲酸甲酯(500mg，2.6mmol)溶于二氧六环/水(V 二氧六环/V 水＝3:1，24mL)，加入苯乙烯基硼酸(781mg，5.3mmol)和碳酸铯(2.5g，7.9mmol)。氮气置换3次，加入Pd(dppf)Cl 2(95mg，0.13mmol)，再氮气置换3次，室温搅拌16小时。TLC监测显示原料消失，反应液用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到5-氟-6-苯乙烯基吡啶甲酸甲酯(600mg，收率88％)。MS(ESI)M/Z:258.1[M+H +].
步骤2：将5-氟-6-苯乙烯基吡啶甲酸甲酯(800mg，3.1mmol)溶于四氢呋喃/水(18/9mL)，依次加入2,6-二甲基吡啶(670mg，6.2mmol)、高碘酸钠(4g，18.6mmol)和二水合锇酸钾(52mg，0.16mmol)，室温搅拌20小时。TLC监测显示原料消失，反应液用乙酸乙酯(30mL×2次)萃取，合并有机层，用饱和食盐水(30mL×2次)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得残余物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到5-氟-6-甲酰甲基吡啶甲酸甲酯(400mg，收率70％)。MS(ESI)M/Z:184.2[M+H +].
步骤3：将5-氟-6-甲酰甲基吡啶甲酸甲酯(300mg，1.6mmol)溶于甲醇(10mL)，冷却至0℃，加入硼氢化钠(100mg，2.6mmol)，加完升至室温搅拌3小时。TLC监测显示原料消失，反应液在冰浴下用饱和氯化铵溶液(20mL)淬灭，再用乙酸乙酯(30mL×2次)萃取。合并有机层，用饱和食盐水(30mL×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过 滤并减压浓缩。所得残余物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3/1)得到5-氟-6-(羟甲基)吡啶甲酸甲酯(100mg，收率33％)。MS(ESI)M/Z:185.8[M+H +].
以5-氟-6-(羟甲基)吡啶甲酸甲酯为原料，参照实施例a-43的操作经三步制备得到终产物2-(6-((4-(2-氨基-7-溴噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-5-氟吡啶-2-基)丙-2-醇(7mg)。MS(ESI)M/Z:464.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.79(s,1H),8.20(s,1H),7.71-7.60(m,2H),5.93(d,J＝1.6Hz,2H),1.44(s,6H).
实施例b-1:
3-(4-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-1)的制备
反应步骤：
步骤1：将6-(羟甲基)吡啶甲酸甲酯(4.5g，26.9mmol)溶于四氢呋喃(70mL)，冷却至0℃，滴加甲基溴化镁的四氢呋喃溶液(3mol/L，54mL，162.0mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌4小时。TLC监测显示反应结束，向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(50mL)淬灭。乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩；所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～2/1)得到2-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(1.3g，收率29％)。
MS(ESI)M/Z:168.6[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.49(d,J＝7.6Hz,1H),7.29(t,J＝7.6Hz,1H),5.36(t,J＝5.6Hz,1H),5.21(s,1H),4.54(d,J＝5.6Hz,2H),1.41(s,6H).
步骤2：将2-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(1.0g，6.0mmol)溶于甲苯(30mL)，冷却至0℃，加入DPPA(2.0g，7.2mmol)和DBU(1.1g，7.2mmol)。反应体系自然升温 至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(1.0g，收率87％)。MS(ESI)M/Z:193.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.34(d,J＝8.0Hz,1H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),4.95(br s,1H),4.47(s,2H),1.55(s,6H).
步骤3：将4-溴-6-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(554mg，2.4mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V THF/V TEA＝2/3，20mL)。氮气保护下，依次加入CuI(45mg，0.24mmol)、三苯基膦(63mg，0.24mmol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(84mg，0.12mmol)和三甲基硅乙炔(282mg，2.9mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到6-氯-4-((三甲基硅)乙炔)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(0.5g，收率84％)。MS(ESI)M/Z:249.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.68-7.64(m,2H),7.57-7.53(m,1H),7.49-7.45(m,2H)，0.00(s,9H).
步骤4：将6-氯-4-((三甲基硅)乙炔)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(124mg，0.5mmol)溶于四氢呋喃(10mL)，冷却至0℃，加入TBAF·3H 2O(189mg，0.6mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(10mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得6-氯-4-乙炔基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶粗品(88mg)直接用于下一步反应。MS(ESI)M/Z:177.1[M+H] +.
步骤5：将6-氯-4-乙炔基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(88mg，粗品)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝2/1，9mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(84mg，0.44mmol)、五水硫酸铜(2.4mg，0.01mmol)和抗坏血酸钠(5mg，0.025mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(10mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～3/1)得到2-(6-((4-(6-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(120mg，收率65％)。MS(ESI)M/Z:369.4[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ9.17(br s,1H),8.28(s,1H),7.81(t,J＝7.6Hz,1H),7.62(s,1H),7.44-7.38(m,2H),7.25-7.20(m,1H),7.02-7.00(m,1H),5.86(s,2H),1.58(s,6H).
步骤6：将2-(6-((4-(6-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(90mg，0.24mmol)和3-氰基-2-甲基苯硼酸(78mg，0.48mmol)溶于 1,4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝3/1，24mL)。氮气保护下，依次加入碳酸钠(76mg，0.72mmol)和Pd(dppf)Cl 2(17mg，0.024mmol)。反应体系升温至98℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～1/1)得到终产物3-(4-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(30mg，收率27％)。MS(ESI)M/Z:450.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.94(s,1H),9.11(s,1H),7.87-7.75(m,4H),7.67-7.59(m,2H),7.54-7.50(m,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,1H),7.07-7.06(m,1H),5.82(s,2H),5.24(s,1H),2.56(s,3H),1.38(s,6H).
实施例b-2:
3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-2)的制备
反应步骤：
步骤1：将5，7-二氯-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(600mg，3.2mmol)和3-氰基-2-甲基苯硼酸(565mg，3.5mmol)溶于1,4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝3/1，20mL)。氮气保护下，依次加入碳酸钠(1.0g，9.5mmol)和Pd(dppf)Cl 2(117mg，0.16mmol)。反应体系升温至95℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～1/1)得到3-(7-氯-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(200mg，收率23％)。
MS(ESI)M/Z:269.1[M+H] +.
步骤2：将3-(7-氯-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(110mg，0.41mmol) 溶于乙腈(10mL)，加入乙酰氯(161mg，2.1mmol)和碘化钠(369mg，2.5mmol)。反应体系升温至90℃并搅拌20小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，加入饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)，用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(15mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～2/1)得到3-(7-碘-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(147mg，收率99％)。
MS(ESI)M/Z:361.1[M+H] +.
步骤3：将3-(7-碘-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(147mg，0.41mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，加入一水合对甲苯磺酸(8mg，0.04mmol)和DHP(53mg，0.63mmol)。反应体系室温下搅拌4小时，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)和饱和食盐水(15mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～10/1)得到3-(7-碘-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(110mg，收率60％)。
MS(ESI)M/Z:445.1[M+H] +.
步骤4：将3-(7-碘-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(110mg，0.25mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V THF/V TEA＝2/3，10mL)。氮气保护下，依次加入CuI(5mg，0.03mmol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(9mg，0.01mmol)和三异丙基硅乙炔(273mg，1.5mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～10/1)得到2-甲基-3-(3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-((三异丙基硅基)乙炔)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(103mg，收率83％)。
MS(ESI)M/Z:499.4[M+H] +.
步骤5：将2-甲基-3-(3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-((三异丙基硅基)乙炔)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(103mg，0.21mmol)溶于四氢呋喃(10mL)，冷却至0℃，加入TBAF·3H 2O(78mg，0.25mmol)。反应体系在0℃搅拌20分钟。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(15mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得3-(7-乙炔基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈粗品直接用于下一步反应(100mg)。
MS(ESI)M/Z:259.0[M+H] +.
步骤6：将3-(7-乙炔基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(100mg，粗品)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝1/1，20mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠 氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(75mg，0.39mmol)、五水硫酸铜(1mg，0.004mmol)和抗坏血酸钠(4mg，0.02mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(15mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经制备型高效液相色谱纯化得到终产物3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(40mg，收率42％)。
MS(ESI)M/Z:451.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.96(s,1H),8.44(s,1H),7.87(s,1H),7.73-7.67(m,3H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),7.40(t,J＝8.0Hz,1H),7.17(d,J＝7.6Hz,1H),5.77(s,2H),2.47(s,3H),1.39(s,6H).
实施例b-3:
3-(4-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-3)的制备
反应步骤：
步骤1：将2,4-二氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(500mg，2.7mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V THF/V TEA＝2/3，100mL)。氮气保护下，依次加入CuI(101mg，0.53mmol)、Pd(PPh 3) 4(307mg，0.27mmol)和三异丙基硅乙炔(581mg，3.2mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：V石油醚/V乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到2-氯-4-((三异丙基硅基)乙炔)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(650mg，收率71％)。
MS(ESI)M/Z:334.1[M+H] +.
步骤2：将2-氯-4-((三异丙基硅基)乙炔)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(334mg，1.0mmol)溶于四氢呋喃(10mL)，冷却至0℃，加入TBAF·3H 2O(379mg，1.2mmol)。反应体系 在0℃搅拌30分钟。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(10mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得2-氯-4-乙炔基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶粗品直接用于下一步反应(177mg)。
MS(ESI)M/Z:178.0[M+H] +.
步骤3：将2-氯-4-乙炔基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(177mg，粗品)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝2/1，9mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(192mg，1.0mmol)、五水硫酸铜(2.5mg，0.01mmol)和抗坏血酸钠(10mg，0.05mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(10mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～2/1)得到2-(6-((4-(2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(260mg，收率70％)。MS(ESI)M/Z:370.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ10.83(s,1H),8.56(s,1H),7.75(t,J＝7.6Hz,1H),7.46(s,2H),7.40(d,J＝7.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,1H),5.82(s,2H),1.56(s,6H).
步骤4：将2-(6-((4-(2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(120mg，0.33mmol)和3-氰基-2-甲基苯硼酸(105mg，0.66mmol)溶于1，4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝3/1，24mL)。氮气保护下，依次加入碳酸钠(106mg，1.0mmol)和Pd(dppf)Cl 2(24mg，0.033mmol)。反应体系升温至98℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～1/1)得到终产物3-(4-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-甲基苯甲腈(50mg，收率34％)。
MS(ESI)M/Z:451.4[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.35(s,1H),9.07(s,1H),8.16-8.14(m,1H),7.91-7.89(m,1H),7.82-7.78(m,1H),7.71(m,1H),7.60(d,J＝8.0Hz,1H),7.54(t,J＝8.0Hz,1H),7.22(d,J＝3.6Hz,1H),7.19-7.16(m,1H),5.84(s,2H),5.22(s,1H),2.77(s,3H),1.38(s,6H).
实施例b-4:
3-(4-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-甲基-1H-吡咯并 [2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-4)的制备
反应步骤：
步骤1：将4-溴-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(1.0g，4.8mmol)溶于***(20mL)。氮气保护下，加入m-CPBA(1.2g，7.0mmol)。反应体系室温搅拌过夜。TLC监测显示反应结束，反应液过滤，滤饼经***(20mL)洗涤，干燥得到4-溴-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-7-氧化物(870mg，收率81％)。
MS(ESI)M/Z:226.7. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ13.33(br s,1H),7.95(d,J＝6.4Hz,1H),7.18(d,J＝6.4Hz,1H),6.27(s,1H),2.53(s,3H).
步骤2：将4-溴-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-7-氧化物(340mg，1.5mmol)溶于三氯氧磷(10mL)，升温至110℃搅拌24小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，往剩余物加入冷水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到4-溴-6-氯-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(321mg，收率87％)。
MS(ESI)M/Z:244.9. 1H NMR(400MHz，CDCl 3):δ9.02(br s，1H)，7.30(s，1H)，6.24(s，1H)，2.50(s，3H).
步骤3：将4-溴-6-氯-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(260mg，1.1mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V THF/V TEA＝2/3，15mL)。氮气保护下，依次加入CuI(40mg，0.21mmol)、三苯基膦(28mg，0.11mmol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(74mg，0.11mmol)和三异丙基硅乙炔(212mg，1.2mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～10/1)得到6-氯-2-甲基-4-((三异丙基硅基)乙炔)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(290mg，收率79％)。
MS(ESI)M/Z:347.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.98(br s,1H),7.11 (s,1H),6.17(s,1H),2.41(s,3H),2.01-1.99(m,3H),1.13(s,18H).
步骤4：将6-氯-2-甲基-4-((三异丙基硅基)乙炔)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(290mg，0.84mmol)溶于四氢呋喃(10mL)，冷却至0℃，加入TBAF·3H 2O(315mg，1.0mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌20分钟。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(15mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(15mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩，得到6-氯-4-乙炔基-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶粗品(133mg)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)M/Z:190.8[M+H] +.
步骤5：将6-氯-4-乙炔基-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(133mg，粗品)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝1/1，24mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(110mg，0.57mmol)、五水硫酸铜(1.2mg，0.005mmol)和抗坏血酸钠(6mg，0.03mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(15mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝100/1～50/1)得到2-(6-((4-(6-氯-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(79mg，收率36％)。
MS(ESI)M/Z:383.0[M+H] +.
步骤6：将2-(6-((4-(6-氯-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(79mg，0.21mmol)和3-氰基-2-甲基苯硼酸(100mg，0.62mmol)溶于1，4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝3/1，12mL)。氮气保护下，依次加入碳酸钠(66mg，0.62mmol)和Pd(dppf)Cl 2(30mg，0.04mmol)。反应体系升温至98℃并搅拌48小时。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(15mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经制备型高效液相色谱纯化得到终产物3-(4-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-甲基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(12.4mg，收率13％)。
MS(ESI)M/Z:464.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.85(s,1H),7.77-7.68(m,4H),7.53(d,J＝7.6Hz,1H),7.43(t,J＝7.6Hz,1H),7.18(d,J＝7.6Hz,1H),6.82(s,1H),5.78(s,2H),2.48(s,3H),2.45(s,3H),1.40(s,6H).
实施例b-5:
3-(4-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-5)的制备
反应步骤：
步骤1：将4，6-二氯-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶(400mg，2.1mmol)和3-氰基-2-甲基苯硼酸(410mg，2.5mmol)溶于1，4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝3/1，20mL)。氮气保护下，依次加入碳酸铯(1.7g，5.3mmol)和Pd(OAc) 2(47.6mg，0.21mmol)。反应体系升温至98℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～1/1)得到3-(4-氯-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(183mg，收率32％)。
MS(ESI)M/Z:269.1[M+H] +.
步骤2：将3-(4-氯-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(183mg，0.68mmol)溶于乙腈(10mL)，加入乙酰氯(267mg，3.4mmol)和碘化钠(613mg，4.1mmol)。反应体系升温至98℃并搅拌过夜。反应液冷却至室温，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～2/1)得到3-(4-碘-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(195mg，收率79％)。
MS(ESI)M/Z:360.9[M+H] +.
步骤3：将3-(4-碘-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(180mg，0.5mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V THF/V TEA＝2/3，10mL)。氮气保护下，依次加入CuI(15mg，0.08mmol)、三苯基膦(20mg，0.08mmol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(27mg，0.04mmol)和三甲基硅乙炔(76mg，0.78mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到2-甲基-3-(4-((三甲基硅)乙炔基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)苯甲腈(140mg，收率 85％)。
MS(ESI)M/Z:331.1[M+H] +.
步骤4：将2-甲基-3-(4-((三甲基硅)乙炔基)-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)苯甲腈(140mg，0.42mmol)溶于四氢呋喃和水的混合溶剂(V THF/V TEA＝1/1，10mL)，加入碳酸钠(135mg，1.3mmol)。反应体系在室温搅拌2小时。向反应液中加入乙酸乙酯(10mL)稀释，分液，有机相用饱和食盐水(5mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到3-(4-乙炔基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(70mg，收率64％)。
MS(ESI)M/Z:259.0[M+H] +.
步骤5：将3-(4-乙炔基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(70mg，0.27mmol)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝2/1，9mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(104mg，0.54mmol)、五水硫酸铜(1.4mg，0.005mmol)和抗坏血酸钠(3mg，0.014mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(15mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经制备型高效液相色谱纯化得到终产物3-(4-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(27mg，收率22％)。
MS(ESI)M/Z:451.3[M+H] +. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.90(br s,1H),9.26(s,1H),8.68(s,1H),7.92(d,J＝7.6Hz,1H),7.85-7.80(m,3H),7.62-7.54(m,2H),7.19(d,J＝7.6Hz,1H),5.84(s,2H),5.22(s,1H),2.55(t,3H),1.37(s,6H).
实施例b-6:
3-(4-(1-((6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-6)的制备
反应步骤：
步骤1：将6-溴-2-吡啶甲酸乙酯(0.5g，2.2mmol)和2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷(0.22g，2.2mmol)溶于DMF(20mL)，加入碳酸钾(1.5g，10.9mmol)。反应体系升温至90℃并搅拌过夜。TLC监测显示反应结束，反应液冷却至室温，加水(60mL)稀释。混合液用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～5/1)得到6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2-吡啶甲酸乙酯(0.42g，收率78％)。
MS(ESI)M/Z:249.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.58-7.54(m,1H),7.44(dd,J 1＝7.2Hz,J 2＝0.8Hz,1H),6.46(dd,J 1＝8.4Hz,J 2＝0.8Hz,1H),4.85(s,4H),4.40(q,J＝7.2Hz,2H),4.25(s,4H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H).
步骤2：将6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2-吡啶甲酸乙酯(750mg，3.0mmol)溶于四氢呋喃(35mL)，冷却至0℃，氮气保护下，滴加红铝甲苯溶液(3.6M，1.0mL，3.6mmol)。反应体系在0℃搅拌2小时，加入10％碳酸钠水溶液(70mL)淬灭反应。混合液用硅藻土过滤除去铝盐，分液，水相用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到(6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇(560mg，收率90％)。
MS(ESI)M/Z:207.1[M+H] +.
步骤3：将(6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇(540mg，2.6mmol)溶于甲苯(15mL)，冷却至0℃，加入DPPA(860mg，3.1mmol)和DBU(480mg，3.1mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(15mL)洗涤，然 后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到6-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷(450mg，收率74％)。
MS(ESI)M/Z:232.1[M+H] +.
步骤4：将6-氯-4-乙炔基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(88mg，0.5mmol)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V/V＝2/1，9mL)。氮气保护下，依次加入6-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷(102mg，0.44mmol)、五水硫酸铜(2.4mg，0.01mmol)和抗坏血酸钠(5mg，0.025mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(10mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1～3/1)得到6-(6-((4-(6-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷(80mg，收率65％)。MS(ESI)M/Z:408.2[M+H] +.
步骤5：将6-(6-((4-(6-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)-2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷(80mg，0.2mmol)和3-氰基-2-甲基苯硼酸(65mg，0.4mmol)溶于1，4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝3/1，20mL)。氮气保护下，依次加入碳酸钠(32mg，0.3mmol)和Pd(dppf)Cl 2(15mg，0.02mmol)。反应体系升温至98℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经制备型高效液相色谱纯化得到终产物3-(4-(1-((6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(13.5mg，收率14％)。
MS(ESI)M/Z:489.4[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ9.91(br s,1H),8.30(s,1H),7.75-7.70(m,3H),7.47-7.37(m,3H),7.01(s,1H),6.59(d,J＝7.2Hz,1H),6.26(d,J＝8.4Hz,1H),5.60(s,2H),4.83(s,4H),4.17(s,4H),2.60(s,3H).
实施例b-7:
3-(4-(1-((6-(7-氧-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-7)的制备
反应步骤：
参照实施例b-6的制备步骤，以7-氧-2-氮杂螺[3.5]壬烷替代2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷，得到终产物3-(4-(1-((6-(7-氧-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-6-基)-2-甲基苯甲腈(15mg，收率14％)。
MS(ESI)M/Z:517.4[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.53(s,1H),7.74-7.70(m,3H),7.52-7.45(m,3H),6.96(d,J＝3.2Hz,1H),6.59(d,J＝7.2Hz,1H),6.32(d,J＝8.4Hz,1H),5.62(s,2H),3.81(s,4H),3.68(t,J＝5.2Hz,4H),2.58(s,3H),1.85(t,J＝5.2Hz,4H).
实施例b-8:
3-(6-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-9H-嘌呤-2-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-8)的制备
反应步骤：
步骤1：将2，6-二氯-9H-嘌呤(500mg，2.7mmol)溶于二氯甲烷(50mL)，加入一水合对甲苯磺酸(50mg，0.25mmol)和DHP(400mg，4.8mmol)。反应体系室温下搅拌过夜，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)和饱和食盐水(30mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到2，6-二氯-9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(500mg，收率69％)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)M/Z:273.1[M+H] +.
步骤2：将2，6-二氯-9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤(500mg，1.8mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V THF/V TEA＝1/1，20mL)。氮气保护下，依次加入CuI(175mg，0.9mmol)、Pd(dppf)Cl 2(131mg，0.18mmol)和三异丙基硅乙炔(335mg，1.8mmol)。反应体系在室温下搅拌过夜，TLC监测显示反应结束，向反应液中加入5％柠檬酸水溶液(40mL)。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-((三异丙基硅基)乙炔)-9H-嘌呤(490mg，收率64％)。
MS(ESI)M/Z:419.2[M+H] +.
步骤3：将2-氯-9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-((三异丙基硅基)乙炔)-9H-嘌呤(420mg，1.0mmol)和3-氰基-2-甲基苯硼酸(161mg，1.0mmol)溶于1，4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝4/1，25mL)。氮气保护下，依次加入碳酸钾(277mg，2.0mmol)和Pd(dppf)Cl 2(73mg，0.1mmol)。反应体系升温至80℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(50mL)稀释，混合液用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到2-甲基-3-(9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-((三异丙基硅基)乙炔)-9H-嘌呤-2-基)苯甲腈(560mg，粗品)。
MS(ESI)M/Z:500.4[M+H] +.
步骤4：将2-甲基-3-(9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-((三异丙基硅基)乙炔)-9H-嘌呤-2-基)苯甲腈(200mg，粗品)溶于四氢呋喃(10mL)，加入TBAF·3H 2O(125mg，0.4mmol)。反应体系在室温下搅拌2小时，加入乙酸乙酯(50mL)稀释，混合液用饱和食盐水(20mL×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到3-(6-乙炔基-9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-2-基)-2-甲基苯甲腈(65mg，收率53％)，直接用于下一步反应。
MS(ESI)M/Z:344.3[M+H] +.
步骤5：将3-(6-乙炔基-9-(四氢-2H-吡喃-2-基)-9H-嘌呤-2-基)-2-甲基苯甲腈(65mg， 0.2mmol)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝2/1，15mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(65mg，0.34mmol)、五水硫酸铜(7mg，0.03mmol)和抗坏血酸钠(22mg，0.1mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(50mL)稀释，混合液用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经制备型高效液相色谱纯化得到终产物3-(6-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-9H-嘌呤-2-基)-2-甲基苯甲腈(21mg，收率25％)。MS(ESI)M/Z:452.2[M+H] +. 1H NMR(400MHz，DMSO-d6):δ9.24(br s,1H),8.72(s,1H),8.15(d,J＝7.6Hz,1H),7.92(d,J＝6.8Hz,1H),7.81(t,J＝8.0Hz,1H),7.61(d,J＝7.6Hz,1H),7.56(t,J＝7.6Hz,1H),7.20(d,J＝7.2Hz,1H),5.90(s,2H),5.24(s,1H),2.73(s,3H),1.37(s,6H).
实施例b-9:
3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-甲基-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-9)的制备
反应步骤：
参照实施例b-2的制备步骤，以5,7-二氯-2-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶替代5,7-二氯-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶，得到70mg终产物3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-2-甲基-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈。
MS(ESI)M/Z:464.6[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.04(s,1H),7.83-7.74(m,4H),7.61(d,J＝7.6Hz,1H),7.48(t,J＝7.6Hz,1H),7.26(d,J＝7.6Hz,1H),5.85(s,2H),2.69(s,3H),2.55(s,3H),1.50(s,6H).
实施例b-10:
2-氟-3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(化合物b-10)的制备
反应步骤：
步骤1：将5,7-二氯-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(1.15g，4.2mmol)和3-氰基-2-氟苯硼酸(700mg，4.2mmol)溶于1,4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝3/1，90mL)。氮气保护下，依次加入碳酸钠(1.4g，13.0mmol)和Pd(dppf)Cl 2(155mg，0.21mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(100mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(100mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/二氯甲烷/乙酸乙酯＝20/10/3～2/1/2)得到3-(7-氯-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-氟苯甲腈(300mg，收率20％)。
MS(ESI)M/Z:356.8[M+H +].
步骤2：将3-(7-氯-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-氟苯甲腈(300mg，0.84mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入氯化氢的乙酸乙酯溶液(3.7M，1mL，3.7mmol)。反应体系在室温下搅拌2小时，加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)，用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。剩余物溶于乙腈(10mL)，加入乙酰氯(328mg，4.2mmol)和碘化钠(756mg，5.0mmol)。反应体系升温至90℃并搅拌20小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)，用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～1/4)得到2-氟-3-(7-碘-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(160mg，收率52％)。
MS(ESI)M/Z:365.0[M+H +].
步骤3：将2-氟-3-(7-碘-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(160mg，0.44mmol)溶于二氯甲烷(15mL)，加入一水合对甲苯磺酸(8mg，0.04mmol)和DHP(370mg，4.4mmol)。 反应体系在30℃下搅拌4小时，依次用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～3/1)得到2-氟-3-(7-碘-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(196mg，收率99％)。
MS(ESI)M/Z:449.1[M+H +].
步骤4：将2-氟-3-(7-碘-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(196mg，0.44mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V THF/V TEA＝2/3，20mL)。氮气保护下，依次加入CuI(8mg，0.04mmol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(16mg，0.02mmol)和三异丙基硅乙炔(480mg，2.6mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到2-氟-3-(3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-((三异丙基硅基)乙炔)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(90mg，收率41％)。
MS(ESI)M/Z:503.3[M+H +].
步骤5：将2-氟-3-(3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-((三异丙基硅基)乙炔)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(90mg，0.18mmol)溶于四氢呋喃(10mL)，冷却至-10℃，加入TBAF·3H 2O(68mg，0.22mmol)。反应体系在0℃搅拌20分钟。向反应液中加入饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得2-氟-3-(3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-(7-乙炔基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈粗品直接用于下一步反应(62mg)。
MS(ESI)M/Z:347.1[M+H +].
步骤6：将2-氟-3-(3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-(7-乙炔基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(62mg，粗品)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝1/1，24mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(35mg，0.18mmol)、五水硫酸铜(1mg，0.004mmol)和抗坏血酸钠(4mg，0.02mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1～1/4)得到2-氟-3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(40mg，两步收率41％)。
MS(ESI)M/Z:538.7[M+H +].
步骤7：将2-氟-3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(40mg，0.074mmol)溶于二氯甲烷(2mL)。氮气保护下，加入氯化氢的乙酸乙酯溶液(3.7M，0.03mL，0.10mmol)。反应体系在室温下搅拌2小时，将反应液倒入到饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)中，用乙酸乙酯(50mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经制备型高效液相色谱纯化得到终产物2-氟-3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(25mg，收率74％)。
MS(ESI)M/Z:455.3[M+H +].
1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.05(s,1H),8.50(s,1H),8.30(t,J＝7.6Hz,1H),7.86-7.79(m,3H),7.60(d,J＝7.6Hz,1H),7.51(t,J＝7.6Hz,1H),7.27(d,J＝8.0Hz,1H),5.87(s,2H),1.50(s,6H).
实施例b-11:
2-(6-((4-(5-(3-氟-2-甲基苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物b-11)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的制备步骤，以3-氟-2-甲基苯硼酸替代3-氰基-2-氟苯硼酸，得到终产物2-(6-((4-(5-(3-氟-2-甲基苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(20mg)。
MS(ESI)M/Z:444.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.38(s,1H),9.23(s,1H),8.57(s,1H),7.99(s,1H),7.86-7.79(m,1H),7.62(d,J＝7.6Hz,1H),7.36-7.26(m,3H),7.18(d,J＝7.6Hz,1H),5.89(s,2H),5.22(s,1H),2.28(s,3H),1.39(s,6H).
实施例b-12:
3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(化合物b-12)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的制备步骤，以3-氰基苯硼酸替代3-氰基-2-氟苯硼酸，得到终产物3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(10mg,白色固体)。
MS(ESI)M/Z:437.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.43(s,1H),9.25(s,1H),8.65-8.45(m,4H),7.93-7.62(m,4H),7.18(d,J＝7.6Hz,1H),5.91(s,2H),5.22(s,1H),1.39(s,6H).
实施例b-13:
2-(6-((4-(5-(3,5-二氟苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(化合物b-13)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的制备步骤，以3,5-二氟苯硼酸替代3-氰基-2-氟苯硼酸，得到终产物2-(6-((4-(5-(3,5-二氟苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(22mg)。
MS(ESI)M/Z:448.0[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.68(s,1H),8.43(s,1H), 8.22(s,1H),7.83-7.79(m,3H),7.61(d,J＝8.0Hz,1H),7.25(d,J＝7.6Hz,1H),7.12(s,1H),5.82(s,2H),1.50(s,6H).
实施例b-14:
(S)-2-甲基-3-(7-(1-((6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(化合物b-14)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的制备步骤，以(S)-2-(叠氮甲基)-6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶替代2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到终产物(S)-2-甲基-3-(7-(1-((6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(80mg)。
MS(ESI)M/Z:493.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.42(s,1H),9.19(s,1H),8.60(s,1H),8.00(s,1H),7.90-7.80(m,3H),7.53(t,J＝7.6Hz,1H),7.40(d,J＝7.6Hz,1H),7.26(d,J＝7.6Hz,1H),5.91(s,2H),4.52(s,2H),4.24(br s,1H),3.74-3.61(m,4H),2.54(s,3H),1.94-1.93(m,2H).
实施例b-15:
(R)-2-甲基-3-(7-(1-((6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(化合物b-15)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的制备步骤，以(R)-2-(叠氮甲基)-6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶替代2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到终产物(R)-2-甲基-3-(7-(1-((6-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(30mg)。
MS(ESI)M/Z:493.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.42(s,1H),9.19(s,1H),8.60(s,1H),8.00(s,1H),7.90-7.81(m,3H),7.53(t,J＝7.6Hz,1H),7.40(d,J＝7.6Hz,1H),7.25(d,J＝7.6Hz,1H),5.91(s,2H),4.52(s,2H),4.25(br s,1H),3.72-3.64(m,4H),2.54(s,3H),1.95-1.92(m,2H).
实施例b-16:
3-(7-(1-((6-(1-羟环戊基)吡啶-2-基)基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-16)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的类似制备步骤，以1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)环戊-1-醇替代2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到终产物3-(7-(1-((6-(1-羟环戊基)吡啶-2-基)基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(8mg)。
MS(ESI)M/Z:476.9[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.12(s,1H),8.49(s,1H),8.02(s,1H),7.85-7.74(m,3H),7.62(d,J＝8.0Hz,1H),7.49(t,J＝7.6Hz,1H),7.25(d,J＝7.2Hz,1H),5.86(s,2H),2.57(s,3H),2.20-2.10(m,2H),1.95-1.75(m,6H).
实施例b-17:
3-(7-(1-((6-(1-羟环丁基)吡啶-2-基)基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-17)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的类似制备步骤，以1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)环丁-1-醇替代2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到终产物3-(7-(1-((6-(1-羟环丁基)吡啶-2-基)基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(20mg)。
MS(ESI)M/Z:463.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.10(s,1H),8.48(s,1H),7.95(s,1H),7.80-7.74(m,3H),7.54(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(t,J＝8.0Hz,1H),7.28(d,J＝7.6Hz,1H),5.88(s,2H),2.60-2.50(m,5H),2.27-2.19(m,2H),1.90-1.75(m,2H).
实施例b-18:
3-(7-(1-((6-(7-氧-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-18)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的类似制备步骤，以2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-7-氧-2-氮杂螺[3.5]壬烷替代2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到终产物3-(7-(1-((6-(7-氧-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(15mg)。
MS(ESI)M/Z:518.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.13(s,1H),8.48(s,1H),8.03(s,1H),7.77(d,J＝7.6Hz,2H),7.53-7.47(m,2H),6.60(d,J＝6.8Hz,1H),6.36(d,J＝8.4Hz,1H),5.65(s,2H),3.75(br s,4H),3.62(t,J＝5.2Hz,4H),2.57(s,3H),1.79(t,J＝5.2Hz,4H).
实施例b-19:
3-(7-(1-((6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-19)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的类似制备步骤，以2-(叠氮甲基)-6-(甲氧基甲基)吡啶替代2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到终产物3-(7-(1-((6-(甲氧基甲基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(100mg)。
MS(ESI)M/Z:437.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.41(s,1H),9.19(s,1H),8.60(s,1H),7.99(s,1H),7.90-7.80(m,3H),7.54(t,J＝7.6Hz,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.23(d,J＝7.6Hz,1H),5.91(s,2H),4.47(s,2H),3.35(s,3H),2.54(s,3H).
实施例b-20:
3-(7-(1-((1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑 [4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-20)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的类似制备步骤，以1-(3-(叠氮甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇替代2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到终产物3-(7-(1-((1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-3-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(10mg)。
MS(ESI)M/Z:454.0[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.96(s,1H),8.76(s,1H),8.03(s,1H),7.7-7.75(m,2H),7.64(d,J＝2.0Hz,1H),7.48(t,J＝7.6Hz,1H),6.40(s,1H),5.73(s,2H),4.10(s,2H),2.55(s,3H),1.16(s,6H).
实施例b-21:
3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基-d2)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-21)的制备
反应步骤：
步骤1：将6-(2-羟丙-2-基)吡啶甲酸甲酯(1.0g，5.1mmol)溶于无水四氢呋喃(20mL)，冷却至0℃，加入氘代四氢铝锂(430mg，10.2mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌2小时。向反应液中慢慢加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到2-(6-(羟甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇(650mg，收率75％)。
MS(ESI)M/Z:169.9[M+H +].
步骤2：将2-(6-(羟甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇(650mg，3.8mmol)溶于甲苯(10mL)，冷却至0℃，加入DPPA(1.0g，3.9mmol)和DBU(591mg，3.9mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌5小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～3/1)得到2-(6-(叠氮甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇(350mg，收率47％)。
MS(ESI)M/Z:195.1[M+H +].
步骤3：参照实施例b-10的相关制备步骤，以2-(6-(叠氮甲基-d2)吡啶-2-基)丙-2-醇为原料，得到终产物3-(7-(1-((6-(2-羟丙基-2-基)吡啶-2-基)甲基-d2)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(40mg)。
MS(ESI)M/Z:453.3[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.06(s,2H),8.06(s,1H),7.85-7.79(m,3H),7.62(d,J＝8.0Hz,1H),7.51(t,J＝7.6Hz,1H),7.29(d,J＝7.6Hz,1H),2.58(s,3H),1.48(s,6H).
实施例b-22:
2-((4-(5-(3-氰基-2-甲基苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-6-(2-羟丙-2-基)吡啶-1-氧化物(化合物b-22)的制备
反应步骤：
参照实施例b-10的类似制备步骤，以2-(叠氮甲基)-6-(2-羟丙-2-基)吡啶-1-氧化物替代2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇，得到终产物2-((4-(5-(3-氰基-2-甲基苯基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-7-基)-1H-1,2,3-三氮唑-1-基)甲基)-6-(2-羟丙-2-基)吡啶-1-氧化物(40mg)。
MS(ESI)M/Z:467.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.16(s,1H),8.49(s,1H),8.04(s,1H),7.77(d,J＝7.6Hz,2H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.56-7.49(m,2H),7.31(d,J＝7.6Hz,1H),6.02(s,2H),2.57(s,3H),1.68(s,6H).
实施例b-23:
3-(7-(1-((6-(cis-2,6-二甲基***啉)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-23)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-溴-6-(((叔丁基二甲基硅基)氧)甲基)吡啶(1.0g，3.3mmol)溶于DMF(15mL)，室温下依次加入cis-2,6-二甲基***啉(460mg，4.0mmol)，碘化亚铜(63mg，0.33mmol)和碳酸钾(2.3g，16.7mmol)。反应体系氮气保护下升温至95℃搅拌16小时，冷却至室温，向反应液中慢慢加入水(30mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝20/1/1～3/1/1)得到cis-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧)甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基***啉(600mg，收率52％)。
MS(ESI)M/Z:337.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.52-7.48(m,1H),6.84(d,J＝7.2Hz,1H),6.48(d,J＝8.4Hz,1H),4.68(s,2H),4.07-4.03(m,2H),3.75-3.71(m,2H),2.50-2.44(m,2H),1.27(d,J＝6.4Hz,6H),0.96(s,9H),0.11(s,6H).
步骤2：将cis-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧)甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基***啉(600mg，1.8mmol)溶于四氢呋喃(6mL)，加入TBAF.3H 2O(560mg，2.1mmol)。反应体系在室温下搅拌16小时后，加入水(3mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到(6-(cis-2,6-二甲基***啉)吡啶-2-基)甲醇(350mg，收率88％)。
MS(ESI)M/Z:222.9[M+H +].
步骤3：将(6-(cis-2,6-二甲基***啉)吡啶-2-基)甲醇(350mg，1.6mmol)溶于甲苯(10mL)，冷却至0℃，加入DPPA(492mg，1.8mmol)和DBU(273mg，1.8mmol)。 反应体系自然升温至室温并搅拌5小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～3/1/1)得到cis-4-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基***啉(150mg，收率38％)。
MS(ESI)M/Z:248.1[M+H +].
后续步骤参照实施例b-10的类似制备步骤，以cis-4-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2,6-二甲基***啉为原料，得到终产物3-(7-(1-((6-(cis-2,6-二甲基***啉)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(24mg)。
MS(ESI)M/Z:506.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.03(s,1H),8.71(s,1H),8.00(s,1H),7.79-7.76(m,2H),7.57-7.48(m,2H),6.74-6.68(m,2H),5.69(s,2H),4.07(d,J＝11.6Hz,2H),3.60-3.56(m,2H),2.56(s,3H),2.40-2.34(m,2H),1.09(d,J＝6.4Hz,6H).
实施例b-24:
3-(7-(1-((6-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-24)的制备
反应步骤：
步骤1：将1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇(397mg，1.8mmol)溶于甲苯(6mL)，冷却至0℃，加入DPPA(492mg，1.8mmol)和DBU(273mg，1.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌5小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝5/1/1～3/1/1)得到1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇(230mg，收率52％)。
MS(ESI)M/Z:248.2[M+H +].
后续步骤参照实施例b-10的类似制备步骤，以1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-4-甲基哌 啶-4-醇为原料，得到终产物3-(7-(1-((6-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(22mg)。
MS(ESI)M/Z:506.3[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.29(s,1H),9.18(s,1H),8.54(s,1H),7.95(s,1H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.81(d,J＝7.2Hz,1H),7.55-7.48(m,2H),6.77(d,J＝8.8Hz,1H),6.51(d,J＝7.2Hz,1H),5.68(s,2H),4.29(s,1H),3.80-3.77(m,2H),3.33-3.27(m,2H),2.51(s,3H),1.48-1.30(m,4H),1.06(s,3H).
实施例b-25:
3-(7-(1-((6-(3-羟基-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-25)的制备
反应步骤：
步骤1：将1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(350mg，1.8mmol)溶于甲苯(10mL)，冷却至0℃，加入DPPA(492mg，1.8mmol)和DBU(273mg，1.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌5小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～1/1)得到1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(150mg，收率38％)。
MS(ESI)M/Z:242.3[M+Na +].
后续步骤参照实施例b-10的类似制备步骤，以1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇为原料，得到终产物3-(7-(1-((6-(3-羟基-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(34mg)。
MS(ESI)M/Z:478.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ8.99(s,1H),8.48(s,1H),7.95(s,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,2H),7.54-7.47(m,2H),6.62(d,J＝7.2Hz,1H),6.37(d,J＝8.4Hz,1H),5.65(s,2H),3.91-3.82(m,4H),2.57(s,3H),1.50(s,3H).
实施例b-26:
3-(7-(1-((6-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-26)的制备
反应步骤：
步骤1：将3-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)氧杂环丁烷-3-醇(1.0g，5.5mmol)溶于甲苯(20mL)，冷却至0℃，加入DPPA(1.9g，6.8mmol)和DBU(1.0g，6.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(30mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～10/1)得到3-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)氧杂环丁烷-3-醇(200mg，收率18％)。
MS(ESI)M/Z:206.9[M+H +].
后续步骤参照实施例b-10的类似制备步骤，以3-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)氧杂环丁烷-3-醇为原料，得到终产物3-(7-(1-((6-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(8mg)。
MS(ESI)M/Z:465.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.15(s,1H),8.48(s,1H),8.02(s,1H),7.86(t,J＝8.0Hz,1H),7.77(d,J＝7.6Hz,2H),7.66(d,J＝7.6Hz,1H),7.49(t,J＝8.0Hz,1H),7.38(d,J＝7.2Hz,1H),5.93(s,2H),5.01(br s,2H),4.77(d,J＝6.4Hz,2H),2.56(s,3H).
实施例b-27:
3-(7-(1-((6-(2-氰基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-27)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-甲基-2-(6-甲基吡啶-2-基)丙腈(800mg，5.0mmol)溶于四氯化碳(6mL)，室温下依次加入N-溴代丁二酰亚胺(976mg，5.5mmol)和过氧化苯二甲酰(120mg，0.5mmol)。反应体系氮气保护下升温至78℃搅拌16小时，冷却至室温，向反应液中慢慢加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)淬灭反应。混合液用二氯甲烷(40mL×2次)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝49/1)得到2-(6-(溴甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(400mg，收率34％)。
MS(ESI)M/Z:239.1[M+H +].
步骤2：将2-(6-(溴甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(200mg，0.84mmol)溶于二甲亚砜(6mL)，室温下加入叠氮化钠(82mg，1.3mmol)。反应体系升温至50℃搅拌16小时。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(100mL×2次)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝9/1)得到2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(80mg，收率47％)。
MS(ESI)M/Z:201.8[M+H +].
后续步骤参照实施例b-10的类似制备步骤，以2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)-2-甲基丙腈为原料，得到终产物3-(7-(1-((6-(2-氰基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(12mg)。
MS(ESI)M/Z:460.0[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.07(s,1H),8.50(s,1H),7.96(s,1H),7.89(t,J＝7.6Hz,1H),7.77(d,J＝7.6Hz,2H),7.59(d,J＝8.0Hz,1H),7.49(t,J＝7.6Hz,1H),7.39(d,J＝8.0Hz,1H),5.91(s,2H),2.57(s,3H),1.70(s,6H).
实施例b-28:
3-(7-(1-((6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-28)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-溴-6-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)吡啶(2.0g，6.6mmol)，3,3-二氟氮杂环丁烷盐酸盐(2.1g，16.3mmol)、碳酸铯(3.0g，9.3mmol)、醋酸钯(149mg，0.66mmol)和1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(414mg，0.66mmol)溶于甲苯(30mL)中，氮气置换三次，升温至120℃回流搅拌2小时。LCMS监测显示原料反应完毕，反应液冷却至室温，加入水(20mL)。混合液用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝50/1)得到2-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)-6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶(700mg，收率34％)。
MS(ESI)M/Z:315.3[M+H +].
步骤2：将2-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)-6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶(700mg，2.2mmol)溶于四氢呋喃(5mL)，冰浴冷却下加入三水合四丁基氟化铵(696mg，2.2mmol)，室温搅拌2小时。LCMS监测显示原料反应完毕，加入水(10mL)，混合液用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到(6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲醇(400mg，收率90％)。
MS(ESI)M/Z:200.6[M+H +].
步骤3：将(6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲醇(100mg，0.5mmol)溶于四氢呋喃(7mL)，冷却至0℃，加入DPPA(165mg，0.6mmol)和DBU(91mg，0.6mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌20小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝40/1)得到2-(叠氮甲 基)-6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶(39mg，收率29％)。
MS(ESI)M/Z:226.2[M+H +].
后续步骤参照实施例b-10的类似制备步骤，以2-(叠氮甲基)-6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶为原料，得到终产物3-(7-(1-((6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(23mg)。
MS(ESI)M/Z:484.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.42(s,1H),9.22(s,1H),8.59(s,1H),7.99(s,1H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.82(d,J＝7.2Hz,1H),7.63(t,J＝7.6Hz,1H),7.54(t,J＝7.6Hz,1H),6.70-6.68(m,1H),6.55(d,J＝8.4Hz,1H),5.75(s,2H),4.41-4.34(m,4H),2.54(s,3H).
实施例b-29:
3-(7-(1-(3-(2-羟丙-2-基)苄基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-29)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-(3-(羟甲基)苯基)丙-2-醇(750mg，4.5mmol)溶于甲苯(30mL)，冷却至0℃，加入DPPA(1.2g，4.3mmol)和DBU(653mg，4.3mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(20mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20mL×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)得到2-(3-(叠氮甲基)苯基)丙-2-醇(492mg，收率57％)。MS(ESI)M/Z:174.0[M-H 2O+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.47-7.43(m,2H),7.33(t,J＝7.6Hz,1H),7.19(d,J＝7.6Hz,1H),5.07(s,1H),4.44(s,2H),1.44(s,6H).
步骤2：将3-(7-乙炔基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(70mg，0.27mmol)溶于叔丁醇和水的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水＝1/1，10mL)。氮气保护下，依次加入2-(3-(叠氮甲基)苯基)丙-2-醇(62mg，0.33mmol)、五水硫酸铜(1mg，0.004mmol)和抗坏血酸 钠(4mg，0.02mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(30mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经制备型高效液相色谱纯化得到终产物3-(7-(1-(3-(2-羟丙-2-基)苄基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(81mg，收率66％)。
MS(ESI)M/Z:450.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.41(s,1H),9.13(s,1H),8.58(s,1H),7.97(s,1H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.80(d,J＝7.6Hz,1H),7.58-7.51(m,2H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.32(t,J＝7.6Hz,1H),7.21(d,J＝7.2Hz,1H),5.78-5.76(m,2H),5.06(br s,1H),2.53(s,3H),1.41(s,6H).
实施例b-30:
3-(7-(1-((6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-30)的制备
反应步骤：
参照实施例b-29的制备步骤，以(6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲醇替代2-(3-(羟甲基)苯基)丙-2-醇，得到终产物3-(7-(1-((6-(2-氧-6-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(4mg)。
MS(ESI)M/Z:490.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,CD 3OD):δ9.00(s,1H),8.65(s,1H),7.98(s,1H),7.79-7.76(m,2H),7.60-7.54(m,1H),7.50(t,J＝7.6Hz,1H),6.67-6.44(m,2H),5.70(s,2H),4.81(br s,4H),4.21(br s,4H),2.57(s,3H).
实施例b-31:
(R)-3-(7-(1-((6-(3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-31)的制备
反应步骤：
步骤1：将6-氟吡啶甲酸甲酯(1.0g，6.5mmol)和(R)-吡咯啉-3-醇(562mg，6.5mmol)溶于干燥DMF(100mL)中，加入碳酸钾(4.5g，32.2mmol)和碘化亚铜(124mg，0.65mmol)，氮气置换3次，反应体系升温至98℃搅拌过夜。TLC监测显示原料反应完毕，反应液冷却至室温，过滤，滤饼用乙酸乙酯(20mL×2次)洗涤，混合液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1)得到(R)-6-(3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯(850mg，收率59％)。MS(ESI)M/Z:222.7[M+H +].
步骤2：将(R)-6-(3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯(850mg，3.8mmol)和咪唑(785mg，11.5mmol)溶于二氯甲烷(30mL)，冰浴冷却下加入TBSCl(1160mg，7.7mmol)，室温搅拌过夜。TLC监测显示原料反应完毕，加入水(50mL)，分液，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到(R)-6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯(1.0g，收率78％)。MS(ESI)M/Z:336.9[M+H +].
步骤3：将(R)-6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶甲酸甲酯(1.0g，3.0mmol)溶于无水四氢呋喃(30mL)，冷却至0℃，滴加硼氢化锂的四氢呋喃溶液(1M,6.6mL，6.6mmol)。反应体系自然升温至室温搅拌2小时。缓慢向反应液中加入冷饱和氯化铵溶液(50mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(50mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到(R)-(6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇(400mg，收率43％)。MS(ESI)M/Z:309.3[M+H +].
步骤4：将(R)-(6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇(400mg，1.3mmol)溶于无水四氢呋喃(50mL)，冷却至0～5℃，加入DPPA(430mg，1.6mmol)和DBU(240mg，1.6mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌过夜。向反应液中加入水(50mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(50mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸 钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到(R)-2-(叠氮甲基)-6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶(60mg，收率14％)。MS(ESI)M/Z:334.3[M+H +].
步骤5：将3-(7-乙炔基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(61mg，0.18mmol)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝5/5/2，12mL)。氮气保护下，依次加入(R)-2-(叠氮甲基)-6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶(60mg，0.18mmol)、五水硫酸铜(0.5mg，0.002mmol)和抗坏血酸钠(2mg，0.01mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加入水(50m1)淬灭，混合液用乙酸乙酯(50mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1)得到3-(7-(1-((6-((R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(40mg，收率33％)。MS(ESI)M/Z:676.8[M+H] +.
步骤6：将3-(7-(1-((6-((R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(40mg，0.06mmol)溶于四氢呋喃(10m1)，冰浴冷却下加入四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(1.0M,0.06mL，0.06mmol)，室温搅拌过夜。TLC监测显示原料反应完毕，加入碳酸氢钠水溶(20mL)，混合液用乙酸乙酯(30mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经高效液相制备色谱纯化得到3-(7-(1-((6-((R)-3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(20mg，收率59％)。MS(ESI)M/Z:584.3[M+Na +].
步骤7：将3-(7-(1-((6-((R)-3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(20mg，0.035mmol)溶于二氯甲烷(2m1)，冰浴冷却下加入氯化氢的乙酸乙酯溶液(3.7M，0.1mL，0.37mmol)。反应体系在室温下搅拌过夜，有固体析出，过滤，将滤饼加到饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)中，用乙酸乙酯(30mL×3次)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到(R)-3-(7-(1-((6-(3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(20mg，收率59％)。
MS(ESI)M/Z:478.4[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.41(s,1H),9.23(s,1H),8.59(s,1H),7.99(s,1H),7.90-7.81(m,2H),7.55-7.43(m,2H),6.48(d,J＝7.2Hz,1H), 6.38(d,J＝8.4Hz,1H),5.68(s,2H),4.92(s,1H),4.34(s,1H),3.45-3.25(m,4H),2.55(s,3H),1.99-1.86(m,2H).
实施例b-32:
(S)-3-(7-(1-((6-(3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-32)的制备
反应步骤：
参照实施例b-31的制备步骤，以(S)-吡咯啉-3-醇替代(R)-吡咯啉-3-醇，得到终产物(S)-3-(7-(1-((6-(3-羟基吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(25mg)。
MS(ESI)M/Z:478.2[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.41(s,1H),9.23(s,1H),8.59(s,1H),7.99(s,1H),7.90-7.81(m,2H),7.56-7.47(m,2H),6.49(d,J＝7.2Hz,1H),6.38(d,J＝8.4Hz,1H),5.68(s,2H),4.92(s,1H),4.34(s,1H),3.44-3.25(m,4H),2.55(s,3H),1.99-1.86(m,2H).
实施例b-33:
3-(7-(1-((6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈(化合物b-33)的制备
反应步骤：
步骤1：将7-溴-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(4.6g，23.0mmol)溶于二氯甲烷(50mL)，加入二氢吡喃(19.5g，230mmol)和对甲苯磺酸一水合物(0.44g，2.3mmol)，30℃下搅拌20小时。TLC监测显示原料反应完毕，加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)，分液，水相用二氯甲烷(40mL×3次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到7-溴-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(6.0g，收率92％)。
MS(ESI)M/Z:282.1[M+H +].
步骤2：将7-溴-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(6.0g，21.3mmol)溶于四氢呋喃和三乙胺的混合溶剂(V THF/V TEA＝2/3，175mL)。氮气保护下，依次加入CuI(0.39g，0.23mmol)、Pd(dppf)Cl 2(1.6g，2.1mmol)和三异丙基硅烷乙炔(13.5g，63.9mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌20小时。将反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-(三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(6.8g，收率83％)。
MS(ESI)M/Z:384.0[M+H +].
步骤3：将3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-(三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(6.8g，17.8mmol)溶于二氯甲烷(70mL)，降温至0℃，加入氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M，14mL，56mmol)，室温搅拌2小时。TLC监测显示原料反应完毕，慢慢加入饱和碳酸氢钠水溶液调节pH＝8～9，分液，水相用乙酸乙酯(40mL×3次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到7-((三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(4.0g，收率75％)。
MS(ESI)M/Z:300.1[M+H +].
步骤4：将7-((三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(1.0g，3.3mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，冰浴冷却下加入m-CPBA(864mg，5.0mmol)，反应体系自然升温至30℃搅拌20小时。TLC监测显示原料反应完毕，加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)，分液，水相用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3/1)得到7-((三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-4-氧化物(700mg，收率67％)。
MS(ESI)M/Z:316.3[M+H +].
步骤5：将7-((三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-4-氧化物(700mg，2.2mmol)溶于DMF(20mL)，降温至0℃，滴加入甲磺酰氯(380mg，3.3mmol)，反应体系升温至80℃搅拌5小时。TLC监测显示原料反应完毕，反应液降至室温，加入饱和碳酸氢钠水溶液调节pH＝8～9，混合液用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝10/1)得到5-氯-7-(三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(400mg，收率54％)。
MS(ESI)M/Z:333.9[M+H +].
步骤6：将5-氯-7-(三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(400mg，1.2mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，加入二氢吡喃(1.0g，12.0mmol)和对甲苯磺酸一水合物(22mg，0.12mmol)，30℃下搅拌20小时。TLC监测显示原料反应完毕，加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)，分液，水相用二氯甲烷(20mL×3次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20/1)得到5-氯-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-(三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(450mg，收率90％)。
MS(ESI)M/Z:418.3[M+H +].
步骤7：将5-氯-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-(三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(126mg，0.3mmol)和2-甲氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)苯甲腈(156mg，0.6mmol)溶于1,4-二氧六环和水的混合溶剂(V 二氧六环/V 水＝3/1，12mL)。氮气保护下，依次加入碳酸铯(300mg，0.9mmol)和Pd(dppf)Cl 2(22mg，0.03mmol)。反应体系升温至98℃搅拌20小时。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1)得到2-甲氧基-3-(3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-(三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(140mg，收率91％)。
MS(ESI)M/Z:515.4[M+H +].
步骤8：将2-甲氧基-3-(3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-(三异丙基硅烷)乙炔基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(140mg，0.27mmol)溶于THF(10mL)，降温至-10℃，加入TBAF.3H 2O(103mg，0.32mmol),反应体系升温至0℃下搅拌0.5小时。TLC监测显示原料反应完毕，往反应液中加入饱和氯化铵溶液(10mL)，用乙酸乙酯(20mL×3次) 萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到3-(7-乙炔基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈(80mg，粗品)直接用于下一步反应。
MS(ESI)M/Z:359.1[M+H +].
步骤9：将3-(7-乙炔基-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈(80mg，粗品)溶于叔丁醇、水和四氢呋喃的混合溶剂(V 叔丁醇/V 水/V 四氢呋喃＝5/5/2，12mL)。氮气保护下，依次加入2-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)丙-2-醇(52mg，0.27mmol)、五水硫酸铜(1mg，0.004mmol)和抗坏血酸钠(4mg，0.02mmol)。反应体系升温至60℃并搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加入水(30m1)，混合液用乙酸乙酯(30mL×3次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物经高效液相制备色谱纯化得到3-(7-(1-((6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈(40mg，二步收率27％)。
MS(ESI)M/Z:551.4[M+H] +.
步骤10：将3-(7-(1-((6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈(40mg，0.07mmol)溶于二氯甲烷(5m1)，冰浴冷却下加入氯化氢的乙酸乙酯溶液(3.7M，0.1mL，0.37mmol)。反应体系在室温下搅拌2小时，加入异丙醚(5m1)，有固体析出，过滤，将滤饼加到饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)中，用乙酸乙酯(30mL×3次)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到3-(7-(1-((6-(2-羟基丙-2-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲氧基苯甲腈(28mg，收率83％)。
MS(ESI)M/Z:467.5[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.44(s,1H),9.23(s,1H),8.60(s,1H),8.39(s,1H),8.09(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.90(dd,J＝7.6,1.6Hz,1H),7.81(t,J＝7.6Hz,1H),7.61(d,J＝8.0Hz,1H),7.46(t,J＝7.6Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),5.89(s,2H),5.23(s,1H)3.74(s,3H),1.39(s,6H).
参照实施例b-33的合成方法制备得到如下目标产物：
实施例b-50:
3-(7-(1-(苯并[d][1,3]二噁英-4-基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-50)的制备
反应步骤：
参照实施例b-31的制备步骤，以苯并[d][1,3]二噁英-4-基甲醇替代(R)-(6-(3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)吡咯啉-1-基)吡啶-2-基)甲醇，得到终产物3-(7-(1-(苯并[d][1,3]二噁英 -4-基甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(140mg)。
MS(ESI)M/Z:436.3[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.42(s,1H),9.09(s,1H),8.59(s,1H),7.98(s,1H),7.90-7.80(m,2H),7.53(t,J＝8.0Hz,1H),6.96-6.87(m,3H),6.07(s,2H),5.76(s,2H),2.51(s,3H).
实施例b-51:
3-(7-(1-(2-氟-3-(2-羟丙-2-基)苄基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(化合物b-51)的制备
反应步骤：
步骤1：将((3-溴-2-氟苄基)氧)(叔丁基)二甲基硅烷(1.2g，3.8mmol)溶于甲醇和二甲亚砜的混合溶液(V 甲醇/V 二甲亚砜＝1/1,120mL)，依次加入三乙胺(0.9g，8.9mmol)，醋酸钯(80mg，0.36mmol)和1.3-双二苯基膦丙烷(160mg，0.39mmol)，在一氧化碳8公斤压力氛围下，升温至80℃回流搅拌16小时。TLC监测显示原料消失，冷却至室温，过滤除去催化剂，滤液减压浓缩。残留物溶于乙酸乙酯(60mL)，用水洗涤2-3次，饱和食盐水洗涤1次，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯(800mg，收率34％)。MS(ESI)M/Z:299.1[M+H +].
步骤2：在氮气氛围下往烧瓶中加入甲基溴化镁(6.0mL，18.2mmol，3M的2-甲基四氢呋喃中)，冷却至0℃，滴加3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-氟苯甲酸甲酯(800mg，2.7mmol)的干燥四氢呋喃(5mL)溶液，约20分钟滴完，滴完后升至室温搅拌3小时。TLC监测显示原料消失，将反应液在冰浴下用饱和氯化铵溶液(30mL)淬灭，乙酸乙酯(50mL×2次)萃取。合并有机层，饱和食盐水(30mL×2次)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到2-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇(300mg，收率38％)。MS(ESI)M/Z:299.2[M+H] +.
步骤3：将2-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-2-氟苯基)丙-2-醇(300mg，1.0mmol)溶于四氢呋喃(10mL)，加入四丁基氟化铵(316mg，1.2mmol)，室温搅拌12 小时。TLC监测显示原料消失，往反应液中加入乙酸乙酯(20mL)稀释，用水(100mL×3次)洗涤，再用饱和食盐水(30mL×2次)洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩得到2-(2-氟-3-(羟甲基)苯基)丙-2-醇(190mg，粗品)。MS(ESI)M/Z:185.1[M+H] +. 1H NMR(400MHz,CDCl 3):δ7.49(d,J＝7.6Hz,1H),7.34(t,J＝6.8Hz,1H),7.13(t,J＝7.6Hz,1H),4.76(s,2H),1.64(s,6H).
后续步骤参照实施例b-29的制备步骤，以2-(2-氟-3-(羟甲基)苯基)丙-2-醇替代2-(3-(羟甲基)苯基)丙-2-醇，得到终产物3-(7-(1-(2-氟-3-(2-羟丙-2-基)苄基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)-2-甲基苯甲腈(160mg)。
MS(ESI)M/Z:468.1[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.45(s,1H),9.13(s,1H),8.58(s,1H),7.96(s,1H),7.87(d,J＝7.6Hz,1H),7.80(d,J＝7.6,Hz,1H),7.64(t,J＝8.0Hz,1H),7.53(t,J＝7.6Hz,1H),7.26(t,J＝7.6Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),5.84(s,2H),5.34(s,2H),2.53(s,3H),1.48(s,6H).
实施例b-52:
3-(7-(1-((6-(3-(2-羟丙-2-基)氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(化合物b-52)的制备
反应步骤：
步骤1：将2-溴-6-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)吡啶(1.4g，4.7mmol)、2-(氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇盐酸盐(850mg，5.6mmol)、碳酸铯(3.0g，9.3mmol)、醋酸钯(105mg，0.47mmol)和1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(290mg，0.47mmol)溶于甲苯(30mL)中，氮气置换三次，升温至120℃回流搅拌2小时。LCMS监测显示原料反应完毕，反应液冷却至室温，加入水(20mL)。混合液用乙酸乙酯(20mL×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得 残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/5)得到2-(1-(6-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(600mg，收率38％)。MS(ESI)M/Z:337.3[M+H +].
步骤2：将2-(1-(6-((叔丁基二甲基甲硅烷氧基)甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(600mg，1.8mmol)溶于四氢呋喃(5mL)，冰浴冷却下加入四丁基氟化铵(560mg，2.1mmol)，升至室温搅拌2小时。LCMS监测显示原料反应完毕，加入水(10mL)，混合液用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取。合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩得到2-(1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(350mg，收率88％)。MS(ESI)M/Z:222.8[M+H +].
步骤3：将2-(1-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(350mg，1.6mmol)溶于甲苯和四氢呋喃的混合溶液(V 甲苯/V 四氢呋喃＝5/1，6mL)，冷却至0～5℃，加入DPPA(492mg，1.8mmol)和DBU(273mg，1.8mmol)。反应体系自然升温至室温并搅拌5小时。向反应液中加入水(10mL)淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(40mL×2次)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/10)得到2-(1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇(120mg，收率31％)。MS(ESI)M/Z:248.1[M+H +].
后续步骤参照实施例b-33的制备步骤，以2-(1-(6-(叠氮甲基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)丙-2-醇和5-氯-3-(四氢-2H-吡喃-2-基)-7-((三异丙基硅基)乙炔基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶为原料，经四步反应得到终产物3-(7-(1-((6-(3-(2-羟丙-2-基)氮杂环丁烷-1-基)吡啶-2-基)甲基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-基)-3H-咪唑[4,5-b]吡啶-5-基)苯甲腈(14mg)。
MS(ESI)M/Z:492.3[M+H +]. 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.23(s,1H),8.65-8.43(m,4H),7.92(d,J＝8.0Hz,1H),7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.50(t,J＝8.0Hz,1H),6.48(d,J＝7.2Hz,1H),6.31(d,J＝8.0Hz,1H),5.69(s,2H),4.43(s,1H),3.84-3.82(m,4H),1.27-1.23(m,1H),1.01(s,6H).
生物活性试验
测试例1：本发明化合物对人腺苷A2a/A2b受体的拮抗作用的评价
本实验采用荧光共振能量转移(TR-FRET)检测cAMP水平的方法测试化合物对人腺苷A2a/A2b的拮抗作用，并得出化合物对拮抗人腺苷A2a/A2b后降低cAMP水平的半数抑制浓度IC 50。
1.实验材料
培养基，FBS，100X Pen/Strep购自Gibico公司；cAMP试剂盒购自Perkin Elmer公司；
Rolipram，Forskolin，NECA购自Sigma公司；ZM241385购自MCE公司。
2.实验方法
1)准备cAMP缓冲液如下
Reagent Vol
1x HBSS with Ca 2+and Mg 2+ 14ml
1M HEPES 75μl
7.5％(w/v)BSA stabilizer(pH 7.4) 200μl
20mM Rolipram 7.5μl
2)准备Eu-cAMP tracer工作液and Ulight-anti-cAMP工作液如下
3)消化稳定转染ADORA2A/ADORA2B受体的HEK293细胞，用细胞计数仪计数(85％以上活细胞才可用于后续实验)后分别用cAMP缓冲液稀释成2x10 4细胞/ml、5x10 4细胞/ml。
4)在384孔板中每孔铺不同密度的细胞(HEK293-ADORA2A为200/孔，HEK293-ADORA2B为500/孔)。
5)确定NECA的EC50和EC90浓度：
a)配置1000X NECA浓度梯度储存液(12梯度，起始浓度0.1mmol/L，1:3稀释)。
b)配置1000X ZM241385浓度梯度储存液(10梯度，起始浓度0.3mmol/L，1:3稀释)。
c)配置1000X目的化合物浓度梯度储存液(10梯度，起始浓度1mmol/L或10mmol/L，1:3稀释)。
d)于已铺细胞的384孔板中加入10nl浓度梯度NECA储存液(1000X)，然后25℃孵育10分钟
e)Eu-cAMP tracer工作液和Ulight-anti-cAMP工作液各5ul每孔.1000rpm离心1分钟，600rpm震荡2分钟。
f)EnVision读板(λex＝320nm,λem＝615nm and 665nm),对比665nm/615nm的比值并根据不同的化合物浓度为X轴作图，计算得出NECA的EC50和EC90浓度。
6)根据计算得到的浓度，准备1000X EC90浓度的NECA储存液(100％v/v于DMSO中)。
7)用Echo转移10nl每孔配好的ZM241385梯度储存液和待测化合物梯度储存液于铺好细胞的384孔板中。
8)1000rpm离心1分钟，600rpm震荡2分钟，将384孔板孵育于37度孵箱。
9)每孔加入10nl 1000X EC90浓度的NECA，1000rpm离心1分钟，600rpm震荡2分钟，将384孔板孵育于25度。
10)Eu-cAMP tracer工作液和Ulight-anti-cAMP工作液各5ul每孔.1000rpm离心1分钟，600rpm震荡2分钟。
11)EnVision读板(λex＝320nm,λem＝615nm and 665nm),对比665nm/615nm的比值并根据不同的化合物浓度为X轴作图，计算得出待测化合物的IC50浓度。
经测定，本发明化合物对A2a和/或A2b受体具有较好的抑制效果，其IC 50值一般低于1000nmol/L；部分本发明化合物的对A2a和/或A2b受体的IC 50值低于100nmmol/L，更为优异的本发明化合物的IC 50值低于10nmol/L，甚至小于1nmol/L。部分本发明化合物对人腺苷A2a/A2b受体抑制结果见表1a和表1b。
表1a对人腺苷A2a/A2b受体cAMP信号通路的抑制结果
实施例 A2a IC 50 A2b IC 50
a-1 B C
a-2 C F
a-3 B C
a-4 B E
a-5 D F
a-6 B E
a-7 D F
a-8 A C
a-9 D F
a-10 A B
a-11 B B
a-12 B C
a-13 A B
a-14 A C
a-15 A C
a-16 A C
a-17 A B
a-18 A B
a-19 B C
a-20 B B
a-21 A B
a-22 A B
a-23 C E
a-24 B D
a-25 A B
a-26 B B
a-27 C E
a-28 A B
a-29 A B
a-30 B B
a-31 C E
a-32 A B
a-33 A B
a-34 A B
a-35 A B
a-36 B C
a-37 A B
a-38 A B
a-39 A B
a-40 A B
a-41 B D
a-42 A B
a-43 A B
a-44 B B
a-45 B B
a-46 A B
表1b本发明部分实施例化合物对人腺苷A2a/A2b受体cAMP信号通路的抑制结果
实施例 A2a IC 50(nM) A2b IC 50(nM)
b-1 B B
b-2 B B
b-3 B B
b-4 B B
b-5 B B
b-6 B C
b-7 C D
b-8 B B
b-9 B B
b-10 A B
b-11 C B
b-12 A B
b-13 B C
b-14 C B
b-15 C B
b-16 C C
b-17 B B
b-18 C C
b-19 B B
b-20 C B
b-21 B B
b-22 C B
b-23 C C
b-24 C C
b-25 B B
b-26 B B
b-27 B B
b-28 C B
b-29 B B
b-30 C C
b-31 B B
b-32 B B
b-33 B B
b-34 A B
b-35 C C
b-36 A B
b-37 B B
b-38 B B
b-39 A B
b-40 A B
b-41 A B
b-42 B B
b-43 B B
b-44 A A
b-45 B B
b-46 B B
b-47 B B
b-48 B B
b-49 B B
b-50 C B
b-51 B B
b-52 B B
注：A表示IC 50<1nmol/L；B表示IC 50在1-10nmol/L；C表示IC 50在10-50nmol/L；D表示50-100nmol/L；E表示IC 50在100-500nmol/L；F表示IC 50>500nmol/L；
从表1a和表1b中可以看出，本发明化合物对人腺苷A2a、A2b受体均具有较好的抑制作用。
测试例2：本发明化合物对人腺苷A1/A3受体的拮抗作用的评价
本实验采用荧光共振能量转移(TR-FRET)检测cAMP水平的方法测试化合物对人腺苷A1/A3的拮抗作用，并得出化合物对拮抗人腺苷A1/A3后降低cAMP水平的半数抑制浓度IC 50。
1.实验材料
培养基，FBS，100X Pen/Strep购自Gibico公司，cAMP试剂盒购自Perkin Elmer公司。Rolipram，Forskolin，NECA，DPCPX购自Sigma公司。MRS 1220购自Tocris公司。
2.实验方法
1)准备cAMP缓冲液如下
Reagent Vol
1x HBSS with Ca 2+and Mg 2+ 14ml
1M HEPES 75μl
7.5％(w/v)BSA stabilizer(pH 7.4) 200μl
20mM Rolipram 7.6μl
2)准备Eu-cAMP tracer工作液和Ulight-anti-cAMP工作液如下
3)消化稳定转染ADORA1受体的CHO细胞/稳转ADORA3的CHO-K1细胞，用细胞计数仪计数(85％以上活细胞才可用于后续实验)后分别用cAMP缓冲液稀释成2x10 5细胞/ml。
4)在384孔板中每孔铺2000个细胞。
5)确定Forskolin的EC50和EC90浓度：
a)配置1000X Forskolin/NECA浓度梯度储存液(12梯度，起始浓度100mmol/L或1mmol/L，1:3稀释)。
b)配置1000X DPCPX/MRS 1220浓度梯度储存液(10梯度，起始浓度0.3mmol/L，1:3稀释)。
c)配置1000X目的化合物浓度梯度储存液(10梯度，起始浓度10mmol/L，1:3稀释)。
d)于已铺细胞的384孔板中加入10nl浓度梯度Forskolin储存液(1000X)，然后25℃孵育10分钟
e)Eu-cAMP tracer工作液和Ulight-anti-cAMP工作液各5ul每孔.1000rpm离心1分钟，600rpm震荡2分钟。
f)EnVision读板(λex＝320nm,λem＝615nm and 665nm),对比665nm/615nm的比值并根据不同的化合物浓度为X轴作图，计算得出NECA的EC50和EC90浓度。
6)根据计算得到的浓度，准备1000X EC90浓度的Forskolin储存液(100％v/v于DMSO中)。
7)确定NECA的EC50和EC90浓度：
a)于已铺细胞的384孔板中加入10nl浓度梯度NECA和EC90浓度的Forskolin储存液(1000X)，然后25℃孵育10分钟
b)Eu-cAMP tracer工作液和Ulight-anti-cAMP工作液各5ul每孔.1000rpm离心1分钟，600rpm震荡2分钟。
c)EnVision读板(λex＝320nm,λem＝615nm and 665nm),对比665nm/615nm的比值并根据不同的化合物浓度为X轴作图，计算得出NECA的EC50和EC90浓度。
8)将10nl不同浓度梯度的DPCPX/MRS1220，待测化合物加入384孔板，37℃孵育。1000rpm离心1分钟，600rpm震荡2分钟。
9)将10nl 1000X Forskolin和NECA的EC90浓度储存液加入384孔板，1000rpm离心1分钟，600rpm震荡2分钟。25度孵育。
10)Eu-cAMP tracer工作液和Ulight-anti-cAMP工作液各5ul每孔.1000rpm离心1分钟，600rpm震荡2分钟。
11)EnVision读板(λex＝320nm,λem＝615nm and 665nm),对比665nm/615nm的比值并根据不同的化合物浓度为X轴作图，计算得出待测化合物的EC50。
通过测定本发明化合物,本发明部分化合物对A1/A3腺苷受体的抑制作用相对较弱，部分本发明化合物对人腺苷A1/A3受体抑制结果见表2a和表2b。
表2a对人腺苷A1/A3受体cAMP信号通路的抑制结果
实施例 A1IC 50 A3IC 50
a-1 D F
a-3 B E
a-8 C E
a-10 B D
a-11 B D
a-12 D E
a-13 B E
a-14 B E
a-15 B E
a-17 B D
a-18 B D
a-19 C F
a-20 B E
a-21 B E
a-22 C F
a-25 A D
a-26 B E
a-28 B E
a-29 B E
a-30 C E
a-32 B E
a-33 B D
a-34 B E
a-35 A E
a-37 A E
a-38 A E
a-39 B E
a-40 B E
a-42 B E
a-43 C F
表2b对人腺苷A1/A3受体cAMP信号通路的抑制结果
实施例 A1IC 50 A3IC 50
b-1 B B
b-2 D C
b-3 C B
b-4 C B
b-5 D B
b-6 C C
b-8 E C
b-9 C B
b-10 B B
b-12 B B
b-17 C C
b-19 C C
b-21 C C
b-25 B C
b-26 D C
b-29 B C
b-33 D C
b-34 A A
b-36 B A
b-38 C C
b-39 C B
b-40 B B
b-44 A B
b-45 C C
注：A表示IC 50<1nmol/L；B表示IC 50在1-10nmol/L；C表示IC 50在10-50nmol/L；D表示50-100nmol/L；E表示IC 50在100-500nmol/L；F表示IC 50>500nmol/L；
从表2a和表2b中可以看出，本发明部分化合物其对A1或/和A3的抑制作用相对较弱，展现出对A2a/A2b的选择性。

Claims (22)

  1. 一种如式II所示的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物：
    其中，R 2为H、CN、卤原子、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、N(Re)(Rf)或Ar；
    Re和Rf独立地为H、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷基-CO-、C 1-4卤代烷基-CO-、3-6元环烷基或3-6元杂环烷基；或者Re和Rf与连接的N原子一起形成4-6元环，所述4-6元环任选地被一个或多个选自CN、OH、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基和卤原子的取代基取代；
    Ar为芳基或杂芳基；所述芳基优选为苯基或萘基；所述杂芳基优选为5-6元杂芳环；所述芳基或杂芳基任选独立地被一个或多个Rc取代；
    Ra独立地为H、CN、NH 2CO-、卤原子、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、3-6元环烷基、3-6元杂环烷基、芳基或5-6元杂芳基；Ra任选地被一个或多个选自卤原子、CN、C 1-4烷基和C 1-4卤代烷基的取代基取代；
    Rb独立地为H、CN、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基或卤原子；
    Rc独立地为H、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、CN和卤原子；
    X 1为N或C-Ra；
    X 2、X 3、X 4独立地为O、S、N、N-Ra、CH 2、C-Ra或C＝O；
    Z 1为选自N或CH；
    Y 1、Y 2、Y 3独立地为N和C-Rb；
    L为-(CH 2)n-、-(CD 2)n-、-NH-(CH 2)n-、-O-(CH 2)n-或-S-(CH 2)n-；
    选自芳基和5-6元杂芳基；
    R 1独立地为H、CN、卤原子、NH 2、氨基羰基-C 1-4烷基、C 1-4烷基磺酰基、C 1-4烷基磺酰基氨基、C 1-4烷基、C 1-4卤代烷基、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、C 1-4烷基-O-C 1-4烷基、3-7元环烷基、3-7元杂环烷基、5-13元螺环基、5-13元杂螺环基、6-12元桥环基、6-12元杂桥环基、苯基、5-6元杂芳基、二C 1-4烷基P(O)-、3-7元环烷基-O-C 1-4烷基、3-7元杂环烷基-O-C 1-4烷基和苯氧基-C 1-4烷基；R 1任选地被一个或多个选自甲基、甲氧基、乙基、异丙基、OH、CN、卤原子、COOH和2-羟基-丙-2-基的取代基取代；
    或者，两个相邻R 1连同连接它们的原子一起环化形为饱和5-6元环或者不饱和5-6元环，所述饱和5-6元环和不饱和5-6元环任选地被一个或多个选自C 1-4烷基、C 1-4烷氧基和卤原子的取代基取代；
    m为0、1、2或3；
    n为0、1、2或3；
    表示单键或双键。
  2. 根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，N(Re)(Rf)选自NH 2、四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基；
    和/或，Ar中，所述杂芳基选自如下基团：吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑和噻唑基，优选为吡啶基、呋喃基、吡唑基、噻吩基；
    和/或，Ar中，所述芳基和杂芳基任选独立地被被1、2、3或4个Rc取代；
    和/或，Rc独立地为H、CN、F、Cl、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基和三氟甲基，优选为H、CN、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基。
  3. 根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，Ar为被一个或多个Rc取代的吡啶基，或者，Ar为被一个或多个Rc取代的苯基。
  4. 根据权利要求1或2所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，Ar选自以下任一结构：
  5. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，Ra独立地为H、CN、NH 2CO-、卤原子、甲基、乙基、异丙基、二氟甲基、三氟甲基、环丙基、环丁基、环己基、氮杂环丁烷、苯基、吡唑基、呋喃基或咪唑基；Ra任选地被一个或多个选自卤原子、CN、C 1-4烷基和C 1-4卤代烷基的取代基取代；更优选地，Ra选自H、Br、Cl、F、CN、CHF 2、CF 3、NH 2CO-、甲基、吡唑基、苯基、环丙基和5-甲基-呋喃-2-基；
    和/或，Rb独立地为H、Cl、F、CN、甲基、乙基、异丙基或三氟甲基，优选为H、Cl、甲基或三氟甲基。
  6. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，R 2为N(Re)(Rf)；优选地，R 2为NH 2。
  7. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，R 2为Ar，优选为
  8. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，L为CH 2或CD 2，优选为CH 2。
  9. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、 或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于， 为苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、呋喃基、噻吩基、 优选为吡啶。
  10. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，R 1独立地为卤原子、C 1-4烷氧基、C 1-4卤代烷氧基、3-6元环烷基、4-6元杂环烷基、7-9元含氮杂螺环基、苯基或5-6元杂芳基；
    或者，两个相邻R 1连同连接它们的原子一起环化形为饱和5-6元环或者不饱和5-6元环，所述饱和5-6元环和不饱和5-6元环为吡唑环、恶唑环、噻唑环、异噻唑环、异恶唑环、吡啶环、吡咯环、噻吩环、呋喃环、咪唑环、苯环、嘧啶环、吡嗪环、哒嗪环或1,3-二氧环戊环。
  11. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，R 1独立地为F、-OCH 3、
    或者，两个相邻R 1与 共同环化为如下基团：
    优选地，R 1为
  12. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，结构单元 为 优选为 更优选为
  13. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，X 1、X 2、X 3或X 4满足以下任一种情况：
    (1)X 1为N或CH；优选地，X 1为CH；
    (2)X 2、X 3、X 4独立地为C-Ra、N或N-Ra；
    (3)X 2与X 3以双键相连；优选地，X 2和X 3独立地为N和C-Ra；
    (4)X 2与X 3以单键相连；优选地，X 2和X 3独立地选自NH、CH 2和C＝O；
    (5)X 2为S；
    (6)X 2为S，X 3和X 4独立地为N和C-Ra；
    (7)X 2为S，X 3为CH，X 4为C-Ra；
    (8)X 2为S，X 3为CH，X 4为C-Br；
    (9)X 2为S，X 3为N，X 4为C-Ra；
    (10)X 4为S；
    (11)X 4为S，X 2和X 3独立地为N或C-Ra；
    (12)X 4为S，X 2为C-Ra，X 3为N；
    (13)X 2为O，X 3和X 4独立地为N或C-Ra；
    (14)X 2为N-Ra，X 3和X 4独立地为N或C-Ra；
    (15)X 2为N；
    (16)X 2为N，X 3为CH。
  14. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，式II中的结构单元 选自如 下结构： 优选 更优选
  15. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，Y 1、Y 2或Y 3满足以下任一种情况：
    (1)Y 1、Y 2、Y 3均为N；
    (2)Y 1为C-Rb，Y 2为N，Y 3为N；
    (3)Y 1为CH，Y 2为N，Y 3为N；
    (4)Y 1为CH，Y 2为CH，Y 3为N；
    (5)Y 1为CH，Y 2为N；
    (6)Y 3为N。
  16. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，Z 1为C；
    和/或，m为1或2；
    和/或，n为1或2。
  17. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，所述化合物由式II-a、式II-b或式II-c 所示：
    其中，
    X 5为N、CH或C＝O；优选地，X 5为N或CH；
    X 6和X 7独立地为N、O、S、NH、CH或CH 2；优选地，X 6为NH，X 7为N；
    表示单键或双键；
    Ra如权利要求1或5所定义；优选地，Ra独立地为甲基、Br、Cl、CN、CHF 2、CF 3或环丙基；
    L如权利要求1或8所定义；R 1如权利要求1和10-11中任一项所定义；m如权利要求1或16所定义；X 2、X 3、X 4如权利要求1或13所定义；Y 1、Y 2如权利要求1或15所定义。
  18. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，所述化合物由式I’、式I’-a、式I’-b、式I-c、式I-d或式I-e所示：
    其中，
    X 4-1和X 5-1独立地为N或CH；
    R 3、R 4和R 5独立地为Rc；
    R 6为Rb；
    p为0、1、2、3或4；
    表示单键或双键；
    Rb如权利要求1或5所定义；Rc如权利要求1或2所定义；R 1如权利要求1或11所定义；m如权利要求1或16所定义；X 1、X 2、X 3如权利要求1或13所定义；Y 1、Y 2如权利要求1或15所定义。
  19. 根据权利要求18所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，X 4-1为N；
    和/或，X 5-1为CH；
    和/或，R 3为H，CH 3、CH 3O或Cl；
    和/或，R 4为H、CH 3、Cl、CH 3O、F或CN；
    和/或，R 5为H或卤原子；优选为H或F；
    和/或，R 6为H、C 1-4烷基或C 1-4卤代烷基；优选为H或CH 3。
  20. 根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上 可接受的盐的溶剂合物，其特征在于，所述化合物选自：
  21. 一种药物组合物，其包含有效预防或治疗量的如权利要求1-20中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物，以及任选的一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
  22. 如权利要求1-20中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其溶剂合物、或其药学上可接受的盐的溶剂合物在用于制备药物中的用途；所述药物优选为治疗或/和预防哺乳动物与A2a和/或A2b受体相关的疾病或病症的药物；所述与A2a和/或A2b受体相关的疾病或病症优选为癌症，例如实体瘤或非实体瘤。
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