CN116635371A - 一种作为sos1抑制剂的多环哒嗪酮类衍生物、其制备方法及用途 - Google Patents

一种作为sos1抑制剂的多环哒嗪酮类衍生物、其制备方法及用途 Download PDF

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Abstract

提供作为SOS1抑制剂的多环哒嗪酮类衍生物、其制备方法及用途。所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(I)所示，其具有显著的抑制RAS信号通路和治疗癌症的作用，所述癌症为胰腺癌、结直肠癌、肺癌、肝细胞癌、肾癌、胃癌和胆管癌等。

Description

一种作为SOS1抑制剂的多环哒嗪酮类衍生物、其制备方法及用途 技术领域
本发明属于多环哒嗪酮类衍生物技术领域，具体涉及一种作为SOS1抑制剂的多环哒嗪酮类衍生物、其制备方法及用途。
背景技术
RAS家族蛋白属于一种小GTP酶，包含了KRAS、NRAS和HRAS三种亚家族。突变的RAS基因是一种重要的致癌基因，RAS基因突变的发现存在于20-30％的人类肿瘤中，特别是胰腺癌、结直肠癌和肺癌。各种亚型的RAS蛋白都存在着GTP结合的激活态和GDP结合的失活态的平衡，GTP酶活化蛋白(GTPase-activating proteins,GAPs)可以促使GTP转为GDP，从而使RAS蛋白向失活态转变，而鸟嘌呤核苷酸交换因子(guanine nucleotide exchange factor,GEFs)能够促使GDP的释放和GTP的结合，从而使RAS蛋白转向激活态。RAS蛋白的激活会通过RAS-RAF-MEK-ERK和RAS-PI3K-PDK1-AKT的信号通路促进细胞的增殖，凋亡逃避和代谢重组等从而促进肿瘤的发生和发展。
SOS1(son of sevenless 1)是一种关键的鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)能够与RAS蛋白结合，促进RAS蛋白与GTP的结合，使RAS蛋白转向激活态。最近的研究发现SOS1的抑制剂不单能够抑制RAS突变细胞的生长，还可以和MEK抑制剂产生协同效应，对KRAS驱动的肿瘤产生显著的抑制作用 1-2。SOS1抑制剂的开发成为了研究的热点，多篇专利中报道了不同结构类型的SOS1抑制剂，比如WO2018172250，WO2019201848，WO2018115380，WO2019122129，WO2020173935，WO2020180768和WO2020180770等。
但这些现有技术中公开的化合物以及试验药物在有效性、安全性或选择性等方面依然存在不确定性，因此有必要研究和开发新的选择性的SOS1抑制剂。
参考文献：
1、Hillig et al.Discovery of poetent SOS1inhibitors that block RAS activation via disruption of the RAS-SOS1interaction.PNAS.116,2251-2560(2019).
2、Hofmann et al.BI-3406,a potent and selective SOS1::KRAS interaction inhibitor,is effective in KRAS-driven cancers through combined MEK inhibition.Cancer Discov.CD-20-0142(2020).
发明内容
为了解决现有技术的上述问题，本发明的目的在于提供一种多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，以筛选出在有效性、安全性和选择性等性能方面均具有优异性能的用作SOS1抑制剂的化合物。
本发明的另一个目的是提供所述衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体的制备方法。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(I)所示：
其中：R 1选自氢或甲基；
R 2选自C 1-C 3烷基、-OR 21、卤素、3-7元环烷基、5-7元环烯基、6-10元的稠环烷基、7-10元的桥环烷基、7-10元的螺环烷基、4-7元杂环基、5-7元杂环烯基、6-10元的稠杂环基、7-10元的桥杂环基、7-10元的螺杂环基，其中3-7元环烷基、5-7元环烯基、6-10元的稠环烷基、7-10元的桥环烷基、7-10元的螺环烷基、4-7元杂环基、5-7元杂环烯基、6-10元的稠杂环基、7-10元的桥杂环基、7-10元的螺杂环基任选地被1-3个R 22所取代；
R 21选自H、C 1-C 3烷基、3-7元环烷基、4-7元杂环基，其中C 1-C 3烷基、3-7元环烷基、4-7元杂环基任选地被1-3个R 22所取代；
R 22选自C 1-C 3烷基、羟基、卤素、氰基、-NR aR b、C 1-C 3烷氧基、-C(O)R a、-C(O)OR a、-OC(O)R a、-NR bC(O)R a、-NR bC(O)OR a、-C(O)NR aR b、苯基、5-6元杂芳基和＝O，其中的烷基、烷氧基、苯基、5-6元杂芳基任选地进一步被1-3个卤素、C 1-C 3烷基、羟基、氰基、氨基和C 1-C 3烷氧基所取代；
R a和R b独立地选自H、取代或未取代的C 1-C 3的烷基、取代或未取代的3-6元的环烷基或取代或未取代的4-7元杂环基；此处“取代”是指任选地被1-3个选自C 1-C 3的烷基、羟基、卤素、氰基、氨基或烷氧基的取代基取代；
Q选自N或-CR 3；
R 3选自H、C 1-C 3烷基、卤素、氰基或-OR 21；
AR选自6-10元的芳基或5-10元的杂芳基，其中的芳基或杂芳基任选被1-4个R c所取代；
R c选自H、卤素、C 1-C 4烷基、C 1-C 4卤代烷基、羟基-C 1-C 4烷基、羟基-C 1-C 4卤代烷基、3-6元环烷基、4-7元杂环基、-OR 21、-NR aR b、NR aR b-C 1-C 4烷基、NR aR b-C 1-C 4卤代烷基、6-10元的芳基或5-10元的杂芳基，其中的6-10元的芳基或5-10元的杂芳基任选被1-4个R d所取代；
R d选自H、卤素、C 1-C 4烷基、C 1-C 4卤代烷基、羟基-C 1-C 4烷基、羟基-C 1-C 4卤代烷基、3-6元环烷基、4-7元杂环基、-OR 21、-NR aR b、NR aR b-C 1-C 4烷基、NR aR b-C 1-C 4卤代烷基；
所述式(I)中的杂环基、杂芳基、杂环烯基、稠杂环基、桥杂环基、螺杂环基中的杂原子为1-7个并选自氧、氮、硫和S(O)m中的一种或多种，m为1或2。
优选地，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(Ⅱ)所示：
其中，R 1、R 2、Q和R c具有与上述相同的限定范围；n＝1-4(例如n＝1、n＝2、n＝3、n＝4)。
优选地，对于式(II)化合物，所述的苯基任选被1-3个R c所取代，当所述R c的个数为2-3个时，所述的R c可相同或不同；
和/或，当所述R c为C 1-C 4卤代烷基时，其中的卤原子为氟；
和/或，当所述R c为卤素时，其中的卤原子为氟；
和/或，当所述R c为-NR aR b时，所述的R a和R b可相同或不同。
优选地，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(III)所示：
其中，R 1、R 2和R c具有与上述相同的限定范围；n＝1-4(例如n＝1、n＝2、n＝3、n＝4)。
优选地，对于式(III)化合物，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22为2-3个时，R 22相同或不同；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基含有1-2个杂原子；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为氮和/或氧；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为两个时，两个杂原子相同或不同；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22选自C 1-C 3烷基、-NR aR b、-C(O)R a、-NR bC(O)R a、-NR bC(O)OR a、-C(O)NR aR b和＝O。
优选地，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(IV)所示：
其中，R 1、R 2、R 3和R c具有与上述相同的限定范围；n＝1-4(例如n＝1、n＝2、n＝3、n＝4)。
优选地，对于式(Ⅳ)化合物，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22为2-3个时，R 22相同或不同；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基含有1-2个杂原子；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为氮和/或氧；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为两个时，两个杂原子相同或不同；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22选自C 1-C 3烷基、-NR aR b、-C(O)R a、-NR bC(O)R a、-NR bC(O)OR a、-C(O)NR aR b和＝O；
和/或，所述R 3为-OR 21时，R 21选自未取代的C 1-C 3烷基或未取代的3-7元环烷基。
优选地，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(V)所示：
其中，R 1、R 2、Q和R d具有与上述相同的限定范围；n＝1-4(例如n＝1、n＝2、n＝3、n＝4)。
优选地，所述R d为1个-NR aR b时，所述的R a和R b独立地选自H、取代或未取代的C 1-C 3的烷基；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22为2-3个时，R 22相同或不同；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基含有1-2个杂原子；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为氮和/或氧；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为两个时，两个杂原子相同或不同；
和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22选自C 1-C 3烷基、-NR aR b、-C(O)R a、-NR bC(O)R a、-NR bC(O)OR a、-C(O)NR aR b和＝O；
和/或，所述R 2为-OR 21时，R 21为4-7元杂环基；
和/或，所述R 21为4-7元杂环基时，所述4-7元杂环基为5-6元杂环基；
和/或，所述R 21为4-7元杂环基时，所述的杂环基的杂原子为氮和/或氧；
和/或，所述R 21为4-7元杂环基时，所述杂环基含有1-2个杂原子；
和/或，所述R 21为4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为两个时，两个杂原子相同或不同。
优选地，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(VI)所示：
其中，R 1、R 2和R d具有与上述相同的限定范围；n＝1-4(例如n＝1、n＝2、n＝3、n＝4)。
优选地，当所述R 2为-OR 21，所述R 21为4-7元杂环基；
和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述4-7元杂环基为5-7元杂环基；
和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述的杂环基的杂原子为氮和/或氧；
和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述杂环基含有两个杂原子；
和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述两个杂原子相同或不同；
和/或，所述R d选自卤素、C 1-C 4烷基、-NR aR b、-OR 21、NR aR b-C 1-C 4烷基；
和/或，所述R d为1个-NR aR b-C 1-C 4烷基时，所述的R a和R b独立地选自H、取代或未取代的C 1-C 3的 烷基。
优选地，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(VII)所示：
其中，R 1、R 2、R 3和R d具有与上述相同的限定范围；n＝1-4(例如n＝1、n＝2、n＝3、n＝4)。
优选地，当所述R 2为-OR 21，所述R 21为4-7元杂环基；
和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述4-7元杂环基为5-7元杂环基；
和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述的杂环基的杂原子为氮和/或氧；
和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述杂环基含有两个杂原子；
和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述两个杂原子相同或不同；
和/或，所述R d选自卤素、C 1-C 4烷基、-NR aR b、-OR 21、NR aR b-C 1-C 4烷基；
和/或，所述R d为1个NR aR b-C 1-C 4烷基时，所述的R a和R b独立地选自H、取代或未取代的C 1-C 3的烷基。
进一步优选地，所述多环哒嗪酮类衍生物选自如下结构的任意一种：
本发明的典型化合物包括但不限于如下表格中的化合物：
第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体的制备方法，其选自如下两种方案中的一种：
方案一
本发明通式(I)所述的化合物或其立体异构体、互变异构体或其药用盐的制备方法，包括以下步骤：
关键中间体(I-A)的制备：
第一步，通式(I-1)的芳香族化合物经金属催化交叉偶联得到通式(I-2)的化合物；
第二步，通式(I-2)的化合物在催化剂条件下反应得到通式(I-3)的手性磺酰亚胺化合物；
第三步，通式(I-3)的化合物经金属还原剂还原得到通式(I-4)的手性化合物；
第四步，通式(I-4)的化合物在酸性条件下磺酰胺裂解得到通式(I-A)的手性苄胺化合物；
其中，X卤素，优选为溴。
关键中间体(I-B)的制备，方法一：
第一步，通式(I-5)的化合物经重氮化反应得到通式(I-6)的化合物；
第二步，通式(I-6)的化合物和氰化亚铜经取代反应得到通式(I-7)的化合物；
第三步，通式(I-7)的化合物中氰基成脒，再和酯基经酯交换反应得到通式(I-B)的化合物；
其中，X、X 1为卤素，X优选为溴，X 1优选为碘；
关键中间体(I-B)的制备，方法二：
第一步，通式(I-12)的化合物经卤化反应得到通式(I-13)的化合物；
第二步，通式(I-13)的化合物经酯化反应得到通式(I-6)的化合物；
第三步，通式(I-6)的化合物经取代反应得到通式(I-14)的化合物；
第四步，通式(I-14)的化合物经氧化反应得到通式(I-15)的化合物；
第五步，通式(I-15)的化合物和羟胺磺酸反应得到通式(I-16)的化合物；
第六步，通式(I-16)的化合物经Abnormal Beckmann重排反应得到通式(I-7)的化合物；
第七步，通式(I-7)的化合物中氰基成脒，再和酯基经酯交换反应得到通式(I-B)的化合物；
其中，X、X 1为卤素，X优选为氯，X 1优选为碘；
通式(I)的制备：
第一步，通式(I-A)的化合物和通式(I-B)的化合物经亚胺加成反应得到通式(I-8)的化合物；
第二步，通式(I-8)的化合物和水合肼经亚胺加成再扩环反应得到通式(I-9)的化合物；
第三步，通式(I-9)的化合物和通式(I-10)的化合物经取代反应得到通式(I-11)的化合物(如R 1＝H则该步省略)；
第四步，通式(I-11)的化合物和通式(I-25)的化合物在碱性条件下，在金属催化剂和配体的存在下经Buchwald/Suzuki反应得到通式(I)的化合物；
其中，X、X 1为卤素，X优选为溴和氯，X 1优选为碘；W为H、 Q、AR、R 1和R 2具有与上述相同的限定范围。
方案二
本发明通式(I)所述的化合物或其立体异构体、互变异构体或其药用盐的制备方法，包括以下步骤：
第一步，通式(I-17)的化合物经取代反应得到通式(I-18)的化合物；
第二步，通式(I-18)的化合物在酸性条件下脱去保护基得到通式(I-19)的化合物；
第三步，通式(I-19)的化合物和通式(I-26)的化合物在碱性条件下得到通式(I-20)的化合物；
第四步，通式(I-20)的化合物经氧化反应得到通式(I-21)的化合物；
第五步，通式(I-21)的化合物经Bouveault醛合成反应得到通式(I-22)的化合物；
第六步，通式(I-22)的化合物和水合肼经加成环合反应得到通式(I-23)的化合物；
第七步，通式(I-23)的化合物经取代反应得到通式(I-24)的化合物；
第八步，通式(I-24)的化合物和通式(I-10)的化合物经取代反应得到通式(I-Bb)的化合物(如R 1＝H则该步省略)；
第九步，通式(I-Bb)的化合物和通式(I-A)的化合物在碱性条件下，在金属催化剂和配体的存在下经Buchwald反应得到通式(I)的化合物；
其中，X 2、X 3、X 4为卤素，X 2、X 3优选为溴，X 4优选为碘；Q选自N或CR 3；R 3选自H、C 1-C 3烷基、卤素、氰基或-OR 21；R 1选自氢或甲基；AR和R 2具有与上述相同的限定范围。
对于上述制备方法中，提供碱性条件的试剂选自有机碱或无机碱，所述的有机碱类为三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、双三甲基硅基胺基锂、叔丁醇钠、甲醇钠和叔丁醇钾中的一种或多种，所述的无机碱类为氢化钠、磷酸钾、碳酸钠、碳酸钾、醋酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠和氢氧化锂中的一种或多种；
提供酸性条件的试剂为氯化氢、氯化氢的1,4-二氧六环溶液、氯化氢的甲醇溶液、三氟乙酸、甲酸、 乙酸、盐酸、硫酸、甲磺酸、硝酸和磷酸中的一种或多种；
金属催化剂为钯/碳、雷尼镍、四-三苯基膦钯、二氯化钯、醋酸钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(Pd(dppf)Cl 2)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物、双三苯基磷二氯化钯(Pd(PPh 3)Cl 2)和三(二亚苄基丙酮)二钯(Pd 2(dba) 3)中的一种或多种；
配体为2-双环己基膦-2,6'-二甲氧基联苯(SPhos)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(XantPhos)、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(XPhos)、2-二环己膦基-2'-(N,N-二甲胺)-联苯(DavePhos)、1,1'-双(二苯基膦)二茂铁(Dppf)和1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(BINAP)中的一种或多种，优选为1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(BINAP)；
还原剂为硼氢化钠、硼氢化钾、氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、四氢铝锂中的一种或多种；
氧化剂为高锰酸钾、二氧化锰、重铬酸钾、重铬酸钠和锇酸钾中的一种或多种；
上述反应优选在溶剂中进行，所用溶剂为N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、水、四氢呋喃、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲醇、乙醇、甲苯、石油醚、乙酸乙酯、正己烷和丙酮中的一种或多种。
第三方面，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包括如第一方面所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体；
优选地，所述药物组合物还包括可药用载体和/或赋形剂。
第四方面，本发明提供一种如第一方面所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体或如第三方面所述的药物组合物在制备用于治疗癌症的药物或在制备SOS1抑制剂中的用途；
优选地，所述癌症为胰腺癌、结直肠癌、肺癌、肝细胞癌、肾癌、胃癌或胆管癌。
第五方面，本发明提供一种用于预防和/或治疗癌症的方法，其包括向人类给予治疗有效量的如第一方面所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体或如第三方面所述的药物组合物。
术语解释
除非有相反陈述，否则本发明在说明书和权利要求书中所使用的部分术语定义如下：
“烷基”指饱和脂肪族烃基团，包括1-20个碳原子，或1-10个碳原子，或1-6个碳原子，或1-4个碳原子，或1-3个碳原子，或1-2个碳原子饱和直链或支链的单价烃基，其中烷基可以独立任选地被一个或多个本发明所描述地取代基所取代。烷基基团更近一步地实例包括，包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是任选取代或未取代的。
“烯基”指2-12个碳原子，或2-8个碳原子，或2-6个碳原子，或2-4个碳原子直链或支链的一价烃基，其中至少一个C-C为sp 2双键，其中烯基的基团可以独立任选地被1个或多个本发明所描述的取代基所取代，其中具体的实例包括，但并不限于乙烯基、烯丙基和烯丁基等等。烯基可以是任选取代或未取代的。
“环烷基”是指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包括3至20个碳原子，优选包括3至12个碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实施例包括，但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。环烷基可以是任选取代的或未取代的。
“螺环烷基”指5至18元，两个或两个以上环状结构，且单环之间彼此共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，环内含有1个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子的芳香***。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺、双螺或多螺环烷基，优选为单螺和双螺环烷基，优选为4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元。“螺环烷基”的非限制性实施例包括但不限于：
“稠环烷基”指5至18元，含有两个或两个以上环状结构彼此公用一对碳原子的全碳多环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子的芳香***，优选为6至12元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。“稠环烷基”的非限制性实施例包括但不限于：
“桥环烷基”指5至18元，含有两个或两个以上环状结构，彼此共用两个不直接相连接碳原子的全碳多环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子的芳香***，优选为6至12元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。“桥环烷基”的非限制性实施例包括但不限于：
所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实施例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。
“杂环基”、“杂环”或“杂环的”在本申请中可交换使用，本申请中可交换使用，都是指包含3-12个环原子的饱和或部分不饱和的单环、双环或三环的非芳香性杂环基，其中至少一个环原子原子是杂原子，如氧、氮、硫原子等。优选具有5至7元单环或7至10元双-或三环，其可以包含1，2或3个选自氮、氧和/或硫中的原子。“杂环基”的实例包括但不限于吗啉基，氧杂环丁烷基，硫代吗啉基，四氢吡喃基，1，1-二氧代-硫代吗啉基，哌啶基，2-氧代-哌啶基，吡咯烷基，2-氧代-吡咯烷基，哌嗪-2-酮，8-氧杂-3-氮杂-双环[3.2.1]辛基和哌嗪基。所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基。杂环基可以是任选取代的或未取代的。
“螺杂环基”指5至18元，两个或两个以上环状结构，且单环之间彼此共用一个原子的多环基团，环内含有1个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子的芳香***，其中一个或多个环原子选自氮、氧、硫或S(O) m的杂原子，其余环原子为碳，m＝1或2。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。“螺杂环基”的非限制性实施例包括但不限于：
“稠杂环基”指含有两个或两个以上环状结构彼此公用一对原子的全碳多环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子的芳香***，其中一个或多个环原子选自氮、氧、硫或S(O) m的杂原子，其余环原子为碳，m＝1或2。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环 的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。“稠杂环基”的非限制性实施例包括但不限于：
“桥杂环基”指5至18元，含有两个或两个以上环状结构，彼此共用两个不直接相连接的原子的多环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子的芳香***，其中一个或多个环原子选自氮、氧、硫或S(O) m的杂原子，其余环原子为碳，m＝1或2。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。“桥杂环基”的非限制性实施例包括但不限于：
“芳基”是指含有一个或者两个环的碳环芳香***，其中所述环可以以稠合的方式连接在一起。术语“芳基”包括比如苯基、萘基、四氢萘基的芳香基团。优选芳基为C 6-C 10芳基，更优选芳基为苯基和萘基，最优选为苯基。芳基可以是取代或未取代的。所述“芳基”可与杂芳基、杂环基或环烷基稠合，其中与母体结构连接在一起的为芳基环，非限制性实施例包括但不限于：
“杂芳基”是指芳香族5至6元单环或9至10元双环，其可以包含1至4个选自氮、氧和/或硫中的原子。“杂芳基”的实施例包括但不限于呋喃基，吡啶基，2-氧代-1，2-二氢吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡咯基、吡唑基、***基、四唑基、噻唑基、异噻唑基、1，2，3-噻二唑基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、1，3-二氧代-异吲哚基、喹啉基、吲唑基、苯并异噻唑基、苯并噁唑基和苯并异噁唑基。杂芳基可以是任选取代或未取代的。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，非限制性实施例包括但不限于：
“烷氧基”是指(烷基-O-)的基团。其中，烷基见本文有关定义。C 1-C 6的烷氧基为优先选择。其实例包括，但不限于：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基等。
“卤代烷基”指具有一个或者多个卤素取代基的烷基，其中烷基基团具有如本发明所述的含义。卤代烷基的实例包括，但并不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、全氟乙基、1,1-二氯乙基、1,2-二氯丙基等。
“羟基”指-OH基团。
“卤素”是指氟、氯、溴和碘，优选氟、氯和溴。
“氨基”指-NH 2。
“氰基”指-CN。
“硝基”指-NO 2。
“苄基”指-CH 2-苯基。
“羧基”指-C(O)OH。
“乙酰基”指-C(O)CH 3或Ac。
“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或(环烷基)，其中烷基、环烷基的定义如上所述。
“任选”意味着其所描述的事件可以但不必发生。例如，“AR任选被1到多个R c取代”该说明包含着AR基团可以被1到多个R c取代或者不被R c取代的情形。
“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1-3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
本说明书所述的“取代”或“取代的”，如无特别指出，均是指基团可被一个或多个选自以下的基团取代：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、疏基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氨基、卤代烷基、羟烷基、羧基、羧酸酯基、＝O、-C(O)R b、-OC(O)R b、-NR bR b、-C(O)NR bR b、-NR bC(O)R b、-S(O)NR bR b或-S(O) 2NR bR b，其中，R b的定义如通式(I)中所述。
如此处所用，“主体”、“个体”或“病人”一词交替使用，指任何动物，包括老鼠、老鼠、其他啮齿动物、兔子、狗、猫、猪、牛、羊、马、灵长类动物和人类。在一些实施例中，病人是人类。在一些实施例中，被试已经经历和/或显示了要治疗和/或预防的疾病或疾病的至少一个症状。在一些实施例中，该研究对象已被确定或诊断为具有KRAS G12或G13突变的癌症(例如，由经FDA批准的监管机构确定，如FDA批准的、化验或试剂盒)。在一些实施例，所述对象具有对KRAS G12C突变、KRAS G12D突变、KRAS G12S突变、KRAS G12V突变、KRAS G12A突变、KRAS G13D突变或KRAS G13C突变呈阳性的肿瘤(例如，由监管机构-批准的检测或试剂盒确定)。该研究对象可以是具有KRAS G12C突变、KRAS G12D突变、KRAS G12V突变、KRAS G12S突变、KRAS G12A突变、KRAS G13D突变或KRAS G13C突变(例如，经批准的监管机构-如FDA批准的、分析或试剂盒)阳性的肿瘤患者。该对象可以是其肿瘤具有KRAS G12C突变、KRAS G12D突变、KRAS G12V突变、KRAS G12S突变、KRAS G12A突变、KRAS G13D突变或KRAS G13C突变的对象(例如，该肿瘤是通过经FDA批准的监管机构、试剂盒或化验确定的)。在一些实施例中，被试被怀疑患有KRAS G12或G13基因相关的癌症。在一些实施例中，被试具有临床记录，表明被试具有具有KRAS G12C突变的肿瘤(以及可选的临床记录表明应使用本文提供的任何组合物治疗该对象)。
此处使用的“儿科病人”一词是指在诊断或治疗时未满16岁的病人。“儿童”一词还可分为以下几个亚类：新生儿(从出生到出生第一个月)；婴儿(1个月至两岁)；儿童(2岁至12岁)；青少年(12岁至21岁(直到但不包括22岁生日))。Berhman RE，Kliegman R，Arvin AM，Nelson we.尼尔森儿科教科书，第15版。费城：W.B.Saunders公司，1996年；Rudolph AM，等人。鲁道夫的儿科，第21版。纽约：McGrow-Hill，2002年；和Avery MD，第一LR。儿科医学，第二版。巴尔的摩：Williams&Wilkins；1994。
如本文所用，化合物的“有效量”是指足以负调节或抑制SOS 1酶活性的量。
如本文所用，化合物的“治疗有效剂量”是指足以改善或以某种方式减少症状、停止或逆转病情进展、或负调节或抑制SOS 1活性的量。这种剂量可以作为单一剂量使用，也可以按照一种方案服用，从而有效。
如此处所用，“治疗”是指以任何方式改善或以其他方式改变患者的病情、紊乱或疾病的症状或病理。
如本文所述，“通过使用某一特定化合物或药物组合物来改善某一特定疾病的症状”是指可归因于或与该组合物的使用有关的任何减少，不论是永久性的还是暂时性的、持久的或暂时性的。
本发明中立体化学的定义和惯例的使用通常参考以下文献：
S.P.Parker,Ed.,McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-HillBook Company,New York；and Eliel,E.and Wilen,S.,"Stereochemistry of Organic Compounds",John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994.本发明的化合物可以包含不对称中心或手性中心，因此存在不同的立体异构体。本发明的化合物所有的立体异构形式，包括但绝不限于，非对映体，对映异构体，阻转异构体，和它们的混合物，如外消旋混合物，组成了本发明的一部分。非对映异构体可以以其物理化学差异为基础，通过层析、结晶、蒸馏或升华等方法被分离为个别非对映异构体。对映异构体可以通过分离，使手性异构混合物转化为非对映异构混合物，其方式是与适当光学活性化合物(例如手性辅助剂，譬如手性醇或Mosher氏酰氯)的反应，分离非对映异构体，且使个别非对映异构体转化为相应的纯对映异构体。本发明的中间体与化合物也可以不同互变异构形式存在，且所有此种形式被包含在本发明的范围内。很多有机化合物都以光学活性形式存在，即它们有能力旋转平面偏振光的平面。在描述光学活性化合物时，前缀D、L或R、S用来表示分子手性中心的绝对构型。前缀d、l或(+)、(-)用来命名化合物平面偏振光旋转的符号，(-)或l是指化合物是左旋的，前缀(+)或d是指化合物是右旋的。这些立体异构体的原子或原子团互相连接次序相同，但是它们的立体结构不一样。特定的立体异构体可以是对映体，异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。50：50的对映体混合物被称为外消旋混合物或外消旋体，这可能导致化学反应过程中没有立体选择性或立体定向性。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指等摩尔的两个对映异构体的混合物，缺乏光学活性。
“互变异构体”或“互变异构的形式”是指不同能量的结构的同分异构体可以通过低能垒互相转化。例如质子互变异构体(即质子移变的互变异构体)包括通过质子迁移的互变，如酮式-烯醇式和亚胺-烯胺的同分异构化作用。原子价(化合价)互变异构体包括重组成键电子的互变。除非其他方面表明，本发明所描述的结构式包括所有的同分异构形式(如对映异构，非对映异构，和几何异构)：例如含有不对称中心的R、S构型，双键的(Z)、(E)异构体，和(Z)、(E)的构象异构体。因此，本发明的化合物的单个立体化学异构体或其对映异构体，非对映异构体，或几何异构体的混合物都属于本发明的范围。
“药学上可接受的盐”指本发明化合物的盐，这类盐用于人或动物体内时具有安全性和有效性。化合物的盐可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶解中用足量的碱或酸获得相应的加成盐。可药用的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机氨或镁盐等，可药用的酸加成盐包括无机酸盐和有机酸盐，所述的无机酸和有机酸包括盐酸、氢溴酸、碳酸、碳酸氢根、磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、硫酸、硫酸一氢根、乙酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、饭丁烯二酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸和甲磺酸等(参见Berge et al.,“Pharmaceutical Salts”,Journal of Pharmaceutical Science 66:1-19(1977))。
本发明提供了一种新结构的SOS1抑制剂，试验结果表明，该多环哒嗪酮类衍生物表现出优异的SOS1抑制活性，同时表现出优异的安全性和选择性，可用于制备治疗癌症，尤其是胰腺癌、结直肠癌、肺癌、肝细胞癌、肾癌、胃癌和胆管癌等疾病的药物。
附图说明
图1是本发明所涉及化合物对K-562细胞KRAS/ERK1/2信号转导通路的影响结果图。
图2是本发明所涉及化合物对K-562细胞KRAS/ERK1/2信号转导通路的影响结果图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明，以使本发明技术方案更易于理解、掌握，但本发明并不局限于此。下述实施例中 1H NMR图谱是用Bruker仪器(400MHz)测定而得，化学位移用ppm表示。使用四甲基硅烷内标准(0.00ppm)。 1H NMR的表示方法：s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，br＝宽峰，dd＝双重峰的双重峰，dt＝三重峰的双重峰。若提供偶合常数时，其单位为Hz。
质谱是用LC/MS仪测定得到，离子化方式为ESI。
高效液相色谱仪型号：安捷伦1260、赛默飞U3000；色谱柱型号：Waters xbrige C18(4.6*150mm,3.5μm)；流动相：A:ACN,B:Water(0.1％H 3PO 4)；流速：1.0mL/min；梯度：5％A for 1min,increase to 20％A within 4min,increase to 80％A within 8min,80％A for 2min,back to 5％A within 0.1min；波长：220nm；柱温箱：35℃。
薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规 格是0.2mm-0.3mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm-0.5mm。
柱层析一般使用烟台黄海硅胶200-300目硅胶为载体。
在下列实例中，除非另有指明，所有温度为摄氏温度，除非另有指明，各种起始原料和试剂来自市售或者是根据已知的方法合成，市售原料和试剂均不经进一步纯化直接使用，除非另有指明，市售厂家包括但不限于国药集团，百灵威科技有限公司，梯希爱(上海)化成工业发展有限公司，上海毕得医药科技有限公司和上海迈瑞尔化学科技有限公司等。
CD 3OD：氘代甲醇
CDCl 3：氘代氯仿
DMSO-d 6：氘代二甲基亚砜
Pd 2(dba) 3：三(二亚苄基丙酮)二钯
Pd(dppf)Cl 2：[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯
XantPhos：4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽
XPhos：2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯
HATU：2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯
TLC：薄层色谱法
HPLC：高效液相色谱法
purity：纯度
&：和
氢气氛围是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。
实施例中无特殊说明，反应中的溶液是指水溶液。
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃-30℃。
实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂，纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系或薄层色谱法的展开剂体系包括：A：石油醚和乙酸乙酯体系；B：二氯甲烷和甲醇体系；C：正己烷：乙酸乙酯；其中溶剂的体积比根据化合物的极性不同而不同，也可以加入少量的酸性或碱性试剂进行调节，如醋酸或三乙胺等。
中间体的制备
中间体1
(R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙胺IN-1
第一步 1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮IN-1b
3-溴-5-硝基三氟甲苯IN-1a(2.0g,7.41mmol)，三丁基(1-乙氧基乙烯)锡(3.5g,9.69mmol)和双三苯基磷二氯化钯(520mg,0.74mmol)依次加入到甲苯(25mL)中，氮气保护下，加热至100℃反应过夜，TLC显示反应完全。反应液冷却至室温，加入盐酸(15mL,3N)，搅拌30分钟，垫硅藻土过滤，滤液分液，水相乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得黄色油状标题化合物IN-1b(1.25g,收率72％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.94(s,1H),8.68(s,1H),8.53(s,1H),2.75(s,3H).
第二步 (R,Z)-2-甲基-N-(1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)亚乙基)丙烷-2-亚磺酰胺IN-1c
化合物IN-1b(1.25g,5.36mmol)、(R)-(+)-叔丁基亚磺酰胺(974mg,8.04mmol)和钛酸四乙酯(10mL,47.70mmol)的混合物加热至80℃反应3小时，TLC显示有少量原料剩余。反应液冷却至室温，倒入冰水(60mL)中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析得到黄色油状标题化合物IN-1c(1.01g,收率56％)。
第三步 (R)-2-甲基-N-((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺IN-1d
化合物IN-1c(260mg,0.77mmol)溶于四氢呋喃(2.5mL)和水(0.05mL)中，降温至-60℃，分批加入硼氢化钠(74mg,1.95mmol)，加毕，保持-60℃继续搅拌1小时，TLC显示反应完全。反应液中滴加水淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析得到白色固体标题化合物IN-1d(150mg,收率58％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.43-8.42(m,2H),7.95(s,1H),4.75-4.69(m,1H),3.55(d,J＝4.4Hz,1H),1.61(d,J＝6.8Hz,3H),1.25(s,9H).
第四步 (R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙胺IN-1
化合物IN-1d(164mg,0.48mmol)溶于四氢呋喃(3mL)中，滴加浓盐酸(0.5mL)，滴毕，室温反应1小时，TLC显示反应完全。反应液滴加饱和碳酸钠水溶液调节pH＝8，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色油状标题化合物IN-1(105mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝235.1[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.56(s,1H),8.32(s,1H),8.24(s,1H),4.24(q,J＝6.8Hz,1H),2.22(br,2H),1.30(d,J＝2.8Hz,3H).
中间体2
(R)-6-溴-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮IN-2
第一步 4-溴-2-碘苯甲酸甲酯IN-2b
2-氨基-4-溴苯甲酸甲酯IN-2a(2.0g,8.70mmol)分散在盐酸(20mL,120mmol,6M)中，冷却至0℃左右，滴加亚硝酸钠(360mg,5.22mmol)的水(1mL)溶液，加毕，继续反应1小时，滴加碘化钾(1.4g,8.43mmol)，加毕，室温继续反应2小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄色油标题化合物IN-2b(2.1g,收率70％)。
第二步 4-溴-2-氰基苯甲酸甲酯IN-2c
化合物IN-2b(2.1g,6.16mmol)溶于N-甲基吡咯烷酮(10mL)中，室温下加入氰化亚铜(834mg,9.31mmol)，升温至60℃反应过夜，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，垫硅藻土过滤，滤饼洗涤，滤液倒入水中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到白色固体标题化合物IN-2c(1.2g,收率80％)。
第三步 5-溴-3-氨基异吲哚-1-酮IN-2d
化合物IN-2c(1.2g,5.00mmol)溶于甲醇(20mL)中，氮气保护下，冷却至0℃，通入氨气至饱和后，反应液缓慢恢复至室温反应48小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液浓缩得到黄色固体标题化合物 IN-2d(1.05g,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝225.0[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ10.27(br,1H),9.69(br,1H),8.30(s,1H),7.88(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H).
第四步 (R)-5-溴-3-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1H-异吲哚-1-酮IN-2e
化合物IN-2d(1.05g,粗品)和中间体IN-1(1.6g,6.83mmol)溶于异丙醇(50mL)中，加热至90℃反应48小时，TLC检测部分原料剩余。反应液浓缩得到淡黄色固体标题化合物IN-2e(2.3g,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝442.0[M+H] +
第五步 (R)-6-溴-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮IN-2
化合物IN-2e(2.25g,粗品)溶于乙醇(40mL)中，室温下加入水合肼(636mg,10.16mmol,80％)，加热至40℃反应2小时，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，过滤，滤液浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄色固体标题化合物IN-2(1.1g,三步收率48％)。
LCMS:m/z＝457.0[M+H] +
中间体3
(R)-7-氯-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮IN-3
第一步 6-氯-4-碘烟酸IN-3b
2,2,6,6-四甲基哌啶(11.2g,79.29mmol)溶于四氢呋喃(100mL)中，氮气保护下，冷却至-60℃左右，滴加正丁基锂(31.7mL,79.25mmol,2.5M)，加毕，缓慢恢复至0℃反应半小时，再冷却至-60℃左右，分批加入6-氯烟酸IN-3a(5.0g,31.74mmol)，加毕-60℃继续搅拌1小时，滴加碘(9.7g,38.22mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液，加毕，缓慢恢复至室温反应过夜，TLC显示大部分原料反应完。反应液加1N盐酸淬灭，过滤，滤饼洗涤干燥得到棕黄色固体标题化合物IN-3b(4.7g,粗品)，直接用于下一步。
第二步 6-氯-4-碘烟酸甲酯IN-3c
化合物IN-3b(4.7g,粗品)溶于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中，加入碳酸钾(6.9g,49.92mmol)，室温搅10分钟后，加入碘甲烷(4.7g,33.11mmol)，室温反应过夜，TLC检测原料反应完全。反应液加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到淡黄色固体标题化合物IN-3c(2.0g,两步收率21％)。
第三步 6-氯-4-乙烯基烟酸甲酯IN-3d
化合物IN-3c(3.0g,10.08mmol)和乙烯基三氟乙酸钾(1.35g,10.08mmol)溶于1,4-二氧六环(36mL)和水(12mL)中，室温下加入三乙胺(3.06g,30.24mmol)和Pd(dppf)Cl 2二氯甲烷络合物(200mg,0.24mmol)，氮气置换3次，加热至80℃反应5小时，LCMS监测反应完全。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到淡黄色固体标题化合物 IN-3d(1.9g,收率95％)。
LC-MS:m/z＝198.1[M+H] +
第四步 6-氯-4-甲酰基烟酸甲酯IN-3e
化合物IN-3d(1.8g,9.11mmol)溶于乙醇(20mL)，四氢呋喃(10mL)和水(10mL)的混合溶剂中，室温下加入高碘酸钠(19.2g,89.76mmol)，搅拌下滴加入锇酸钾(催化量)的水(少量)溶液，加毕，室温继续反应0.5小时，TLC检测反应完全。反应液加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析纯化得到淡黄色油(放置固化)标题化合物IN-3e(1.3g,收率72％)。
第五步 (E)-6-氯-4-((羟基亚氨基)甲基)烟酸甲酯IN-3f
化合物IN-3e(1.0g,5.01mmol)和羟胺磺酸(1.70g,15.04mmol)溶于水(15mL)中，室温反应过夜，TLC检测反应完全。反应液加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到类白色固体标题化合物IN-3f(1.05g,粗品)，直接用于下一步。
LCMS:m/z＝215.1[M+H] +
第六步 6-氯-4-氰基烟酸甲酯IN-3g
化合物IN-3f(1.05g,粗品)溶于三氯氧磷(10mL)中，加热至100℃反应2小时，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，剩余物倒入冰水中，用碳酸氢钠水溶液中和，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到白色固体标题化合物IN-3g(800mg,两步收率81％)。
LCMS:m/z＝197.1[M+H] +
第七步 6-氯-1-亚氨基-1,2-二氢-3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-3-酮IN-3h
化合物IN-3g(800mg,4.07mmol)溶于甲醇(60mL)中，冷却至0℃左右，通入氨气至饱和，反应液缓慢升至室温反应过夜，TLC检测原料反应完全。反应液浓缩得淡黄色固体标题化合物IN-3h(766mg,粗品)，直接用于下一步。
LCMS:m/z＝182.1[M+H] +
第八步 (R)-6-氯-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-3-酮IN-3i
化合物IN-3h(766mg,粗品)溶于异丙醇(30mL)中，室温下加入中间体IN-1(988mg,4.22mmol)，加热至85℃反应过夜，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，浓缩得到黄色固体标题化合物IN-3i(1.75g,粗品)，直接用于下一步。
LCMS:m/z＝399.1[M+H] +
第九步 (R)-7-氯-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮IN-3
化合物IN-3i(1.75g,粗品)溶于乙醇(15mL)中，室温下加入水合肼(579mg,9.25mmol,80％)，升温至40℃反应1小时，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄色固体标题化合物IN-3(1.0g,三步收率59％)。
LCMS:m/z＝414.4[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.86(s,1H),9.19(s,1H),8.54(s,1H),8.43(s,1H),8.34(s,1H),8.26(s,1H),7.41(d,J＝2.8Hz,1H),5.18-5.08(m,1H),1.57(d,J＝2.8Hz,3H).
实施例1
4-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-甲氧基-2-甲基-6-(((S)-四氢呋喃-3-基)氧基)酞嗪-1(2H)-酮1
第一步 5-溴-4-甲酰基-2-甲氧基苯基乙酸酯1b
乙酰香兰素1a(20.0g,103.0mmol)和溴化钾(39.96g,335.8mmol)溶于水(100mL)中，冷却至0℃，滴加液溴(18.27g,114.3mmol)。加完升至室温搅拌15小时，TLC显示原料少量剩余。反应液过滤，滤饼水洗干燥得标题化合物1b(含水粗品)，直接用于下一步。
第二步 2-溴-4-羟基-5-甲氧基苯甲醛1c
化合物1b(粗品)溶于浓盐酸(400mL,6N)中，升温至90℃反应过夜，TLC检测原料基本反应完全。反应液冷却至室温，过滤，滤饼洗涤干燥得标题化合物1c(16.8g,粗品)，直接用于下一步。
第三步 (R)-3-羟基四氢呋喃对甲苯磺酸酯1e
(R)-3-羟基四氢呋喃1d(1.0g,11.35mmol)溶于二氯甲烷(8mL)中，降温至0℃，加入吡啶(2.5g,31.61mmol)，分批加入对甲苯磺酰氯(3.03g,15.89mmol)，升至室温反应过夜。反应液浓缩，加水稀释，水相用盐酸(3N)调节pH＝1,乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析得到无色油状标题化合物1e(2.57g,三步收率93％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.78(d,J＝8.4Hz,2H),7.35(d,J＝8.4Hz,2H),5.11-5.09(m,1H),3.91-3.77(m,4H),2.45(s,3H),2.10-2.02(m,2H).
第四步 (S)-2-溴-5-甲氧基-4-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯甲醛1f
化合物1c(3.7g,粗品)，化合物1e(4.3g,17.75mmol)和碳酸铯(7.8g,24.0mmol)分散至N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，升温至100℃反应过夜，LCMS检测原料反应完全(TLC显示原料和产品一个点)。反应液冷却至室温，乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物1f(4.7g,粗品)，直接用于下一步。
第五步 (S)-2-溴-5-甲氧基-4-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯甲酸1g
高锰酸钾(1.94g,12.29mmol)和化合物1f(3.7g,粗品)分散至水(120mL)中，升温至75℃搅拌5小时，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，加水稀释，过滤，滤饼用水和乙酸乙酯洗涤，滤液分液，丢弃有机相，水相用乙酸乙酯萃取1次。合并水相，加入稀盐酸(1N)调制酸性，有大量白色固体析出，过滤，滤饼洗涤干燥得标题化合物1g(2.0g,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝317.02[M+H] +
第六步 (S)-2-甲酰基-5-甲氧基-4-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯甲酸1h
化合物1g(2.4g,粗品)溶于四氢呋喃(50mL)中，氮气保护下，冷却至-78℃，滴加正丁基锂(6.8mL,17.0mmol,2.5M正己烷溶液)，加完-78℃搅拌半小时，滴加N,N-二甲基甲酰胺(719mg,9.84mmol)，加完缓慢升至室温，TLC检测反应完全。反应液加稀盐酸(1N)调至弱酸性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐 水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品硅胶柱层析纯化得标题化合物1h(1.4g,三步收率21％)。
第七步 (S)-7-甲氧基-6-((四氢呋喃-3-基)氧基)酞嗪-1(2H)-酮1i
化合物1h(1.0g,3.76mmol)和水合肼水溶液(1.96g,31.36mmol,80％)溶于异丙醇(10mL)中，升温至80℃搅拌3小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液冷却至室温，加水稀释，浓缩去除异丙醇，有固体析出，过滤，滤饼洗涤干燥得标题化合物1i(800mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝263.1[M+H] +
第八步 (S)-4-溴-7-甲氧基-6-((四氢呋喃-3-基)氧基)酞嗪-1(2H)-酮1j
化合物1i(500mg,粗品)，苄基三甲基三溴化铵(1.49g,3.82mmol)和碳酸钾(528mg,3.82mmol)分散至N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，升温至40℃搅拌5小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液加入乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗，水洗，浓缩，粗品Prep-TLC纯化得标题化合物1j(538mg,两步收率67％)。
第九步 (S)-4-溴-7-甲氧基-2-甲基-6-((四氢呋喃-3-基)氧基)酞嗪-1(2H)-酮1k
化合物1j(492mg,1.44mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入氢化钠(699mg,1.73mmol,60％)，室温搅拌30分钟，加入碘甲烷(409mg,2.88mmol)，室温搅拌2小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液加水，有白色固体析出，过滤，滤饼洗涤干燥得标题化合物1k(461mg,粗品)，直接用于下一步。
第十步 7-甲氧基-2-甲基-4-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(((S)-四氢呋喃-3-基)氧基)酞嗪-1(2H)-酮1l
化合物1k(161mg,粗品)，中间体IN-1(130mg,0.56mmol)，叔丁醇钾(101mg,0.90mmol)，BINAP(13mg,0.02mmol)和Pd 2(dba) 3(21mg,0.02mmol)分散至1,4-二氧六环(5mL)中，氮气保护下，升温至100℃搅拌过夜。TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，垫硅藻土助滤，滤饼乙酸乙酯洗涤，滤液浓缩，粗品Prep-TLC纯化得标题化合物1l(50mg,两步收率20％)。
LC-MS:m/z＝509.2[M+H] +
第十一步 4-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-甲氧基-2-甲基-6-(((S)-四氢呋喃-3-基)氧基)酞嗪-1(2H)-酮1
化合物1l(52mg,0.10mmol)和钯/碳(5mg,10％)分散至甲醇(5mL)中，氢气氛围下室温反应3小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液硅藻土助滤，滤饼甲醇洗，滤液浓缩，粗品Prep-TLC纯化得标题化合物1(22mg,收率46％)。
LC-MS:m/z＝479.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.70(s,1H),7.59(s,1H),6.98(s,2H),6.78(s,1H),5.32-5.29(m,1H),4.99(q,J＝6.8Hz,1H),4.08-3.99(m,3H),3.98-3.89(m,4H),3.56(s,3H),2.40-2.31(m,1H),2.24-2.18(m,1H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H).(98.25％purity by HPLC)
实施例2
(R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)酞嗪-1(2H)-酮2
第一步 (R)-6-溴-2-甲基-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮2a
中间体IN-2(300mg,0.66mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入碳酸钾(182mg,1.32mmol)，室温搅拌5分钟后，加入碘甲烷(280mg,1.97mmol)，室温反应过夜，TLC检测原料反应完全。反应液加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体标题化合物2a(280mg,粗品)，直接用于下一步
第二步 (R)-2-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮2c
化合物2a(280mg,粗品)和N-甲基哌嗪2b(298mg,2.97mmol)溶于1,4-二氧六环(30mL)中，室温下加 入碳酸铯(384mg,1.18mmol)，BINAP(60mg,0.10mmol)和Pd 2(dba) 3(60mg,0.06mmol)，氮气置换3次后，加热至100℃反应过夜，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到棕黄色固体标题化合物2c(240mg,两步收率74％)。
LCMS:m/z＝491.2[M+H] +
第三步 (R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)酞嗪-1(2H)-酮2
化合物2c(240mg,0.49mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)和甲醇(3mL)中，加入钯/碳(50mg,10％)，滴加浓盐酸(3滴)，氢气氛围下室温反应2小时，TLC检测原料反应完全。反应液用氨甲醇溶液中和，垫硅藻土过滤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到淡黄色固体标题化合物2(126mg,收率56％)。
LCMS:m/z＝461.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.01(d,J＝9.2Hz,1H),7.48(d,J＝2.0Hz,1H),7.40(dd,J＝9.2,2.0Hz,1H),6.91(d,J＝7.2Hz,1H),6.85(s,2H),6.67(s,1H),5.49(s,2H),4.96-4.89(m,1H),3.46(s,4H),3.39(s,3H),2.58(s,4H),2.31(s,3H),1.51(d,J＝7.2Hz,3H).(99.72％purity by HPLC)
实施例3
(R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)酞嗪-1(2H)-酮3
第一步 (R)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮3a
中间体IN-2(200mg,0.44mmol)和N-甲基哌啶2b(219mg,2.19mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，室温下加入碳酸铯(430mg,1.32mmol)、BINAP(40mg,0.06mmol)和Pd 2(dba) 3(40mg,0.04mmol)，氮气置换3次后，加热至100℃反应过夜，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，粗品硅胶柱层析纯化得到棕黄色固体标题化合物3a(48mg,收率23％)。
第二步 (R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)酞嗪-1(2H)-酮3
化合物3a(48mg,0.10mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)和甲醇(3mL)中，加入钯/碳(50mg,10％)，滴加浓盐酸(2滴)，氢气氛围下室温反应2小时，TLC检测原料反应完全。反应液用氨甲醇溶液中和，垫硅藻土过滤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到淡黄色固体标题化合物3(20mg,收率44％)。
LCMS:m/z＝447.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.11(s,1H),7.99(d,J＝9.2Hz,1H),7.50(s,1H),7.40(d,J＝9.2Hz,1H),6.83-6.72(m,3H),6.66(s,1H),5.47(s,2H),4.95-4.83(m,1H),3.47(s,4H),2.58(s,3H),2.31(s,3H),1.49(d,J＝6.8Hz,3H).(97.85％purity by HPLC)
实施例4
(R)-1-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3-甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮4
第一步 (R)-7-氯-3-甲基-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮4a
中间体IN-3(460mg,1.11mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入碳酸钾(268mg,1.94mmol)，室 温搅拌5分钟后，加入碘甲烷(275mg,1.94mmol)，室温搅拌反应2小时，TLC检测反应基本完全。反应液加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体标题化合物4a(430mg,收率90％)。
LCMS:m/z＝428.2[M+H] +
第二步 (R)-3-甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮4b
化合物4a(150mg,0.35mmol)溶于二氧六环(10mL)中，室温下加入碳酸铯(352mg,1.08mmol)，N-甲基哌嗪(180mg,1.80mmol)，Pd 2(dba) 3(50mg,0.05mmol)和BINAP(50mg,0.08mmol)，氮气置换3次后，加热至100℃反应5小时，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄色固体标题化合物4b(105mg,收率61％)。
LCMS:m/z＝492.2[M+H] +
第三步 (R)-1-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3-甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮4
化合物4b(105mg,0.21mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)和甲醇(2mL)中，加入浓盐酸(3滴)和10％钯/碳(催化量)，氢气氛围下室温反应2小时，TLC检测原料反应完全。反应液用氨甲醇溶液中和，垫硅藻土过滤，滤饼洗涤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到黄色固体标题化合物4(70mg,收率70％)。
LCMS:m/z＝462.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.04(s,1H),7.29(s,1H),6.96(s,2H),6.78(s,1H),4.94(q,J＝6.8Hz,1H),3.97(s,4H),3.49(s,3H),2.97(s,4H),2.64(s,3H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H).(98.96％purity by HPLC)
实施例5
(R)-1-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮5
第一步 (R)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮5a
中间体IN-3(150mg,0.36mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，室温下加入碳酸铯(352mg,1.08mmol)，N-甲基哌嗪2b(180mg,1.80mmol)，Pd 2(dba) 3(50mg,0.05mmol)和BINAP(50mg,0.08mmol)，氮气置换3次后，加热至100℃反应过夜，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，粗品硅胶柱层析纯化得到黄色固体标题化合物5a(40mg,粗品)(TLC纯度约60％)，直接用于下一步。
第二步 (R)-1-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮5
化合物5a(40mg,粗品)溶于乙酸乙酯(5mL)和甲醇(1mL)中，加入浓盐酸(2滴)和10％钯/碳(催化量)，氢气氛围下室温反应2小时，TLC检测原料反应完全。反应液用氨甲醇中和后，垫硅藻土过滤，滤饼洗涤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到黄色固体标题化合物5(12mg,两步收率7％)。
LCMS:m/z＝448.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.04(s,1H),7.27(s,1H),6.92(s,2H),6.77(s,1H),4.94(q,J＝6.8Hz,1H),3.95(s,4H),2.90(s,4H),2.60(s,3H),1.57(d,J＝7.2Hz,3H).(97.91％purity by HPLC)
实施例6
(R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-吗啉代酞嗪-1(2H)-酮6
第一步 (R)-6-吗啉代-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮6b
氮气保护下，将中间体IN-2(200mg,0.44mmol)和吗啉6a(381mg,4.37mmol)溶于1,4-二氧六环(20mL)中，室温下加入Pd 2(dba) 3(82mg,0.09mmol)，BINAP(82mg,0.13mmol)和碳酸铯(428mg,1.31mmol)，升温至100℃反应过夜，TLC检测原料反应完全。反应液浓缩，粗品硅胶柱层析纯化得到标题化合物6b(55mg,收率27％)。
LC-MS:m/z＝464.2[M+H] +
第二步 (R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-吗啉代酞嗪-1(2H)-酮6
化合物6b(55mg,0.12mmol)溶于甲醇(10mL)中，加入钯/碳(20mg,10％)，氢气氛围下室温反应2小时，TLC检测反应完全。反应液过滤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到标题化合物6(16mg,收率31％)。
LC-MS:m/z＝434.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.12(d,J＝8.8Hz,1H),7.45(s,1H),7.39(d,J＝9.2Hz,1H),6.98(s,2H),6.80(s,1H),4.98(q,J＝6.8Hz,1H),3.91-3.83(m,4H),3.50-3.40(m,4H),1.57(d,J＝6.8Hz,3H).(96.33％purity by HPLC)
实施例7
(R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(4-甲基-3-氧代哌嗪-1-基)酞嗪-1(2H)-酮7
第一步 3-氧代哌嗪-1-甲酸苄酯7b
2-哌嗪酮7a(1.0g,9.99mmol)溶于乙酸乙酯(20mL)中，加入水(20mL)和碳酸钠(3.2g,30.19mmol)，室温搅拌10分钟，冷却至0℃，缓慢滴加氯甲酸苄酯(2.1g,12.31mmol)，加毕室温搅拌过液，TLC检测反应完全。反应液乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品硅胶柱层析提纯得到标题化合物7b(2.3g,收率98％)。
LC-MS:m/z＝235.1[M+H] +
第二步 4-甲基-3-氧代哌嗪-1-甲酸苄酯7c
化合物7b(2.3g,9.82mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中，冷却至0℃，分批加入氢化钠(780mg,19.50mmol,60％)，加毕继续搅拌20分钟，加入碘甲烷(2.8g,19.73mmol)，升至室温搅拌2小时。反应液 加水淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品硅胶柱层析提纯得到标题化合物7c(2.0g,收率82％)。
LC-MS:m/z＝249.1[M+H] +
第三步 1-甲基哌嗪-2-酮7d
化合物7c(2.0g,8.06mmol)溶于乙酸乙酯(30mL)中，加入钯/碳(1.0g,10％)，氢气氛围下室温反应过夜，TLC检测反应完全。反应液过滤，滤饼乙酸乙酯淋洗3次，滤液浓缩得到标题化合物7d(950mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝115.2[M+H] +
第四步 (R)-6-(4-甲基-3-氧代哌嗪-1-基)-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)胺)酞嗪-1(2H)-酮7e
化合物7d(200mg,0.44mmol)和中间体IN-2(75mg,0.66mmol)溶于甲苯(10mL)中，室温下加入Pd 2(dba) 3(80mg,0.09mmol)、BINAP(82mg,0.13mmol)和碳酸铯(328mg,1.01mmol)，加热至100℃反应4小时。反应液浓缩，粗品硅胶柱层析提纯得到标题化合物7e(38mg,两步收率18％)。
LC-MS:m/z＝491.2[M+H] +
第五步 (R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(4-甲基-3-氧代哌嗪-1-基)酞嗪-1(2H)-酮7
化合物7e(38mg,0.08mmol)溶于乙酸乙酯(15mL)中，加入钯/碳(50mg,10％)，氢气氛围下室温搅拌2小时。反应液过滤，滤液浓缩，粗品Prep-TLC纯化得到标题化合物7(18mg,收率51％)。
LC-MS:m/z＝461.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.13(s,1H),8.01(d,J＝8.8Hz,1H),7.56-7.35(m,2H),6.85(d,J＝7.2Hz,1H),6.79(s,2H),6.66(s,1H),5.48(s,2H),5.10-4.78(m,1H),4.15-4.06(m,2H),3.82-3.69(m,2H),3.57-3.46(m,2H),2.95(s,3H),1.50(d,J＝6.8Hz,3H).(98.33％purity by HPLC)
实施例8
(R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲基酞嗪-1(2H)-酮8
第一步 (R)-6-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲基-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮8b
化合物2a(100mg,0.21mmol)和N,N,N'-三甲基乙二胺8a(109mg,1.07mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，室温下加入Pd 2(dba) 3(20mg,0.04mmol)、BINAP(40mg,0.06mmol)和碳酸铯(140mg,0.43mmol)，加热至100℃反应4小时。反应液浓缩，粗品硅胶柱层析提纯得到标题化合物8b(50mg,收率48％)。
LC-MS:m/z＝493.3[M+H] +
第二步 (R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲基酞嗪-1(2H)-酮8
化合物8b(50mg,0.10mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)中，加入钯/碳(30mg,10％)，氢气氛围下室温搅拌过夜。反应液过滤，滤液浓缩，粗品Prep-TLC纯化得到标题化合物8(28mg,收率60％)。
LC-MS:m/z＝463.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ7.98(d,J＝8.8Hz,1H),7.27-7.14(m,2H),6.93-6.84(m,3H),6.68(s,1H),5.47(s,2H),5.01-4.86(m,1H),3.72(t,J＝6.4Hz,2H),3.39(s,3H),3.10(s,3H),2.63(s,2H),2.36(s,6H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H).(98.53％purity by HPLC)
实施例9
(R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮9
第一步 6-溴-4-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-2-基)酞嗪-1(2H)-酮9a
中间体IN-2(500mg,1.09mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入3,4-二氢-2H-吡喃(276mg，3.28mmol)和对甲苯磺酸吡啶盐(55mg,0.22mmol)，加热回流反应3小时，TLC检测还剩大部分原料。补加3,4-二氢-2H-吡喃(276mg,3.28mmol)，加热回流反应过夜，TLC检测还剩一大半原料没有反应。补加3,4-二氢-2H-吡喃(460mg,5.47mmol)，加热回流反应过夜，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，粗品经硅胶柱层析提纯得到标题化合物9a(620mg,收率105％)。
LC-MS:m/z＝541.0[M+H] +
第二步 6-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-2-基)酞嗪-1(2H)-酮9b
化合物9a(150mg,0.28mmol)和N,N,N'-三甲基乙二胺8a(142mg,1.39mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，室温下加入Pd 2(dba) 3(51mg,0.06mmol)、BINAP(52mg,0.08mmol)和碳酸铯(183mg,0.56mmol)，加热至100℃反应3小时。反应液浓缩，粗品硅胶柱层析提纯得到标题化合物9b(90mg,收率58％)。
LC-MS:m/z＝563.3[M+H] +
第三步 (R)-6-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮9c
化合物9b(90mg,0.16mmol)溶于盐酸/甲醇(5mL,20.0mmol,4M)中，室温搅拌1小时，TLC检测反应完全。反应液氨甲醇中和后浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到标题化合物9c(70mg,收率82％)。
LC-MS:m/z＝479.2[M+H] +
第四步 (R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮9
化合物9c(70mg,0.15mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)和甲醇(3mL)中，氢气氛围室温反应2小时。反应液过滤，滤液浓缩，粗品Prep-TLC提纯得到标题化合物9(18mg,收率28％)。
LC-MS:m/z＝449.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.13(d,J＝9.2Hz,1H),7.28-7.23(m,2H),6.95(d,J＝1.4Hz,2H),6.77(s,1H),5.00(q,J＝6.8Hz,1H),3.85(t,J＝7.2Hz,2H),3.20(s,3H),2.99(t,J＝6.8Hz,2H),2.65(s,6H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H).(98.53％purity by HPLC)
实施例10
(R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)酞嗪-1(2H)-酮10
第一步 6-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)-4-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-(四氢-2H-吡喃-2-基)酞嗪-1(2H)-酮10b
化合物9a(150mg,0.28mmol)和4-二甲氨基哌啶10a(178mg,1.39mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，室温下加入Pd 2(dba) 3(51mg,0.06mmol)、BINAP(52mg,0.08mmol)和碳酸铯(183mg,0.56mmol)，加热至100℃反应过夜。反应液浓缩，粗品Prep-TLC提纯得到标题化合物10b(90mg,收率55％)。
LC-MS:m/z＝589.3[M+H] +
第二步 (R)-6-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)酞嗪-1(2H)-酮 10c
化合物10b(90mg,0.15mmol)溶于盐酸/甲醇(5mL,20.0mmol,4M)中，室温搅拌2小时。反应液浓缩得到标题化合物10c(70mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝505.3[M+H] +
第三步 (R)-4-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)酞嗪-1(2H)-酮10
化合物10c(70mg,粗品)溶于乙酸乙酯(5mL)和甲醇(3mL)中，氢气氛围下室温反应2小时。反应液过滤，滤液浓缩，粗品Prep-TLC提纯得到标题化合物10(36mg,两步收率54％)。
LC-MS:m/z＝475.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.08(d,J＝8.8Hz,1H),7.45(d,J＝2.4Hz,1H),7.36(dd,J＝9.2,2.4Hz,1H),6.95(s,2H),6.77(s,1H),4.98(q,J＝6.8Hz,1H),4.23(d,J＝13.2Hz,2H),3.35(s,1H),2.97(t,J＝12.0Hz,2H),2.87-2.75(m,1H),2.53(s,6H),2.09(d,J＝12.0Hz,2H),1.71-1.61(m,2H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H).(97.80％purity by HPLC)
实施例11
N-((R)-1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3-甲基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)吡咯烷-3-基)乙酰胺11
第一步 ((R)-1-(3-甲基-1-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯11b
化合物4a(130mg,0.30mmol)溶于1,4-二氧六环(8mL)中，室温下加入(R)-3-叔丁氧羰基氨基吡咯烷11a(169mg,0.91mmol)，Pd 2(dba) 3(40mg,0.04mmol)，BINAP(40mg,0.06mmol)和碳酸铯(198mg,0.61mmol)，氮气置换3次，加热至100℃反应过夜，TLC显示原料反应完。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析得到黄色固体标题化合物11b(190mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝578.3[M+H] +
第二步 7-((R)-3-氨基吡咯烷-1-基)-3-甲基-1-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮11c
化合物11b(190mg,粗品)溶于盐酸乙醇溶液(3mL,12mmol,4M)中，室温反应1小时，TLC显示原料反应完。反应液滴加碳酸氢钠水溶液调节至碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品Prep-TLC纯化得到黄色油标题化合物11c(90mg,两步收率63％)。
LC-MS:m/z＝478.2[M+H] +
第三步 N-((R)-1-(3-甲基-1-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)吡咯烷-3-基)乙酰胺11d
化合物11c(50mg,0.10mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，加入三乙胺(44mg,0.43mmol)和醋酸酐(23mg,0.22mmol)，室温反应1小时，TLC显示原料反应完。反应液加水，二氯甲烷萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品Prep-TLC纯化得到黄色固体标题化合物11d(57mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝520.2[M+H] +
第四步 N-((R)-1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3-甲基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)吡咯烷-3-基)乙酰胺11
化合物11d(57mg,粗品)溶于乙醇(10mL)和水(3mL)中，室温下加入还原铁粉(30mg,0.54mmol)和氯 化铵(27mg,0.50mmol)，加热至90℃反应2小时，TLC显示原料反应完。反应液降至室温，过滤，滤液加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品Prep-TLC纯化得到淡黄色固体标题化合物11(25mg,两步收率47％)。
LC-MS:m/z＝490.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.97(s,1H),6.96(s,2H),6.88(s,1H),6.78(s,1H),4.94(q,J＝6.8Hz,1H),4.55-4.49(m,1H),3.85-3.80(m,1H),3.76-3.62(m,2H),3.53-3.43(m,4H),2.37-2.28(m,1H),2.12-2.03(m,1H),1.96(s,3H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H).(97.19％purity by HPLC)
实施例12
(R)-1-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮12
第一步 (R)-7-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮12b
中间体IN-3(130mg,0.31mmol)和1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-硼酸频哪醇酯12a(105mg,0.47mmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)中，室温下依次加入碳酸钠(67mg,0.63mmol)和Pd(dppf)Cl 2(26mg,0.03mmol)，氮气置换多次，升温至100℃搅拌3小时，TLC显示原料反应完全。反应液冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得黄色固体标题化合物12b(130mg,收率87％)。
LC-MS:m/z＝475.2[M+H] +
第二步 (R)-1-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮12
化合物12b(120mg,0.25mmol)溶于乙酸乙酯(4mL)和甲醇(1mL)中，加入浓盐酸(2滴)和钯/碳(催化量,10％)，氢气氛围下室温搅拌5小时，LCMS显示主要为产物。反应液加氨甲醇溶液调节pH为碱性，垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得白色固体标题化合物12(31mg,收率27％)。
LC-MS:m/z＝447.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.69(s,1H),9.32(s,1H),8.18(s,1H),7.15(d,J＝6.8Hz,1H),6.79(d,J＝8.0Hz,2H),6.68(s,1H),5.50(s,2H),4.90-4.83(m,1H),3.19-3.15(m,2H),3.02-2.93(m,1H),2.47(s,3H),2.03(s,4H),1.50(d,J＝6.8Hz,3H).(95.98％purity by HPLC)
实施例13
(R)-1-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮13
第一步 (R)-7-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪 -4(3H)-酮13a
中间体IN-3(100mg,0.24mmol)溶于4-二甲氨基哌啶10a(310mg,2.42mmol)中，室温下滴加二甲基亚砜(3滴)，升温至80℃搅拌3小时，TLC显示原料反应完全。反应液冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物13a(140mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝506.3[M+H] +
第二步 (R)-1-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮13
化合物13a(130mg,粗品)溶于乙醇(4mL)和水(2mL)中，室温下加入铁粉(72mg,1.29mmol)和氯化铵(70mg,1.31mmol)，升温至80℃搅拌2小时，LCMS显示反应完全。反应液趁热过滤，滤饼乙醇洗涤多次，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得白色固体标题化合物13(7.7mg,两步收率6％)。
LC-MS:m/z＝476.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.18(s,1H),8.93(s,1H),7.41(s,1H),6.94(d,J＝6.8Hz,1H),6.78(s,2H),6.67(s,1H),5.51(s,2H),4.90-4.83(m,1H),4.80-4.76(m,2H),3.51-3.46(m,1H),3.04-2.98(m,2H),2.74(s,6H),2.17(d,J＝11.2Hz,2H),1.69-1.61(m,2H),1.50(d,J＝6.8Hz,3H).(97.49％purity by HPLC)
实施例14
(R)-1-((1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮14
第一步 1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯乙醇14b
2-氟-3-三氟甲基苯甲醛14a(10.0g,52.05mmol)溶于四氢呋喃(200mL)中，冷却至0℃，慢慢滴加甲基溴化镁(9.3g,78.00mmol)，滴毕，缓慢升至室温搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液倒入饱和氯化铵水溶液中淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物14b(11.1g,粗品)，直接用于下一步。
第二步 2-氟-3-(三氟甲基)苯乙酮14c
化合物14b(11.1g,粗品)溶于二氯甲烷(200mL)中，冷却至0℃，氮气置换多次，加入戴斯马丁试剂(26.9g,63.42mmol)，升至室温搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应也倒入饱和碳酸钠水溶液中淬灭，二氯甲烷萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得黄色液体标题化合物14c(7.3g,两步收率68％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.10-8.06(m,1H),7.83-7.79(m,1H),7.35(t,J＝8.0Hz,1H),2.69(d,J＝5.2Hz,3H).
第三步 (R,Z)-N-(1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺14d
化合物14c(7.3g,35.41mmol)溶于钛酸四乙脂(80mL)中，室温下加入(R)-(+)-叔丁基亚磺酰胺(12.9g,106.4mmol)，加毕，缓慢升温至100℃搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液倒入剧烈搅拌的冰水中，持续搅拌10分钟，过滤，滤饼反复用乙酸乙酯洗涤，滤液乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物14d(11.0g,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝310.1[M+H] +
第四步 (R)-N-((R)-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺14e
化合物14d(11.0g,粗品)溶于四氢呋喃(120mL)和水(2mL)中，降温至-60℃左右，然后分批加入硼氢化钠(4.0g,105.7mmol)。加毕继续反应2小时，TLC显示原料被耗尽。反应液倒入冰水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相水洗多次，饱和食盐水洗涤，硫酸钠干燥，浓缩得粗品。粗品经硅胶柱层析纯化得黄色油状标题化合物14e(3.4g,两步收率28％)。
LC-MS:m/z＝312.1[M+H] +
第五步 (R)-1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯乙胺14f
化合物14e(3.4g,10.92mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中，加入浓盐酸(800mg,21.8mmol)，升温至80℃搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液冷却至室温，倒入饱和碳酸氢钠水溶液调节pH为碱性，乙酸乙酯萃取，有机相饱和盐水洗，硫酸钠干燥，浓缩得黄色液体标题化合物14f(2.0g,收率87％)。
LC-MS:m/z＝208.1[M+H] +
第六步 (R)-6-氯-1-((1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-3-酮14g
化合物IN-3h(400mg,2.20mmol)和化合物14f(411mg,1.98mmol)溶于异丙醇(15mL)中，加热至90℃反应过夜，TLC检测原料基本反应完全。反应液冷却至室温，浓缩得到黄色固体标题化合物14g(800mg,粗品)，直接用于下一步。
第七步 (R)-7-氯-1-((1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮14h
化合物14g(800mg,粗品)溶于乙醇(10mL)中，室温下加入水合肼(300mg,4.79mmol,80％)，加热至40℃反应1小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄色固体标题化合物14h(340mg,两步收率44％)。
第八步 (R)-1-((1-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮14
化合物14h(80mg,0.21mmol)和N-甲基哌嗪(105mg,1.05mmol)溶于甲苯(10mL)中，室温下依次加入BINAP(30mg,0.048mmol)，醋酸钯(30mg,0.13mmol)和叔丁醇钠(81mg,0.84mmol)，氮气置换3次，加热至100℃反应5小时，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，粗品经经Prep-TLC纯化得到类白色固体标题化合物14(20mg,收率21％)。
LC-MS:m/z＝451.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.18(s,1H),8.92(s,1H),7.71(t,J＝7.2Hz,1H),7.63(t,J＝7.2Hz,1H),7.42-7.30(m,2H),7.06(d,J＝6.8Hz,1H),5.26-5.21(m,1H),3.80(s,4H),2.60(s,4H),2.35(s,3H),1.56(d,J＝6.8Hz,3H).(99.25％purity by HPLC)
实施例15
(R)-1-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮15
第一步 1-溴-3-二氟甲基-2-氟苯15b
2-氟-3-溴苯甲醛15a(10.0g,49.26mmol)溶于二氯甲烷(200mL)中，冷却至0℃，慢慢滴加二乙胺基三氟化硫(15.9g,98.64mmol)，滴毕，缓慢升至室温搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液倒入饱和碳酸氢钠水溶液中淬灭，二氯甲烷萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶 柱层析纯化得黄色液体标题化合物15b(8.1g,收率73％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.68(t,J＝7.2Hz,1H),7.55(t,J＝7.2Hz,1H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),6.89(t,J＝54.8Hz,1H).
第二步 1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯乙酮15c
化合物15b(8.1g,36.00mmol)溶于1,4-二氧六环(80mL)中，室温下依次加入三乙胺(9.1g,89.93mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯)锡(15.6g,43.20mmol)，氮气鼓泡15分钟，加入双三苯基膦二氯化钯(250mg,0.36mmol)，氮气置换多次，升温至100℃搅拌1小时，TLC显示反应完全。反应液冷却至室温，加入稀盐酸(14.4mL,72.0mmol,5M)，室温搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得黄色液体标题化合物15c(5.6g,收率83％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.00(t,J＝7.2Hz,1H),7.79(t,J＝6.8Hz,1H),7.34(t,J＝7.6Hz,1H),6.94(t,J＝54.8Hz,1H),2.67(d,J＝5.2Hz,3H).
第三步 (R,Z)-N-(1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺15d
化合物15c(5.6g,29.76mmol)溶于钛酸四乙脂(50mL)中，室温下加入(R)-(+)-叔丁基亚磺酰胺(10.8g,89.11mmol)，缓慢升温至100℃搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液冷却至室温，倒入剧烈搅拌的冰水中，持续搅拌10分钟，过滤，滤饼反复用乙酸乙酯洗涤，滤液乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色油状标题化合物15d(9.5g,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝292.1[M+H] +
第四步 (R)-N-((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺15e
化合物15d(9.5g,粗品)溶于四氢呋喃(100mL)和水(2mL)中，降温至-60℃左右，分批加入硼氢化钠(3.7mg,97.80mmol)，加毕，缓慢升温至室温继续反应2小时，TLC显示原料被耗尽。反应液倒入冰水淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得黄色油状标题化合物15e(2.9g,两步收率33％)。
LC-MS:m/z＝294.1[M+H] +
第五步 (R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯乙胺15f
化合物15e(2.9g,9.88mmol)溶于四氢呋喃(50mL)中，室温下加入浓盐酸(720mg,19.8mmol)，升温至80℃搅拌1小时，TLC显示原料被耗尽。反应液冷却至室温，倒入饱和碳酸氢钠水溶液调节pH为碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得棕色液体标题化合物15f(2.0g,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝190.1[M+H] +
第六步 (R)-6-氯-1-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-3-酮15g
化合物IN-3h(400mg,2.20mmol)和化合物15f(375mg,1.98mmol)溶于异丙醇(15mL)中，加热至90℃反应过夜，TLC检测原料基本反应完全。反应液冷却至室温，浓缩得到黄色固体标题化合物15g(826mg,粗品)，直接用于下一步。
第七步 (R)-7-氯-1-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮15h
化合物15g(800mg,粗品)溶于乙醇(10mL)中，加入水合肼(300mg,4.79mmol,80％)，反应液加热至40℃反应1小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液冷却至室温，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄色固体标题化合物15h(360mg,三步收率46％)。
第八步 (R)-1-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮15
化合物15h(80mg,0.22mmol)和N-甲基哌嗪(220mg,2.20mmol)溶于二甲基亚砜(0.5mL)中，加热至100℃反应2小时，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，加水，析出固体，过滤，滤饼洗涤得到粗品，经Prep-TLC纯化得到黄色固体标题化合物15(43mg,收率46％)。
LC-MS:m/z＝433.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.16(s,1H),8.91(s,1H),7.56(t,J＝7.2Hz,1H),7.48(t,J＝6.8Hz,1H),7.35(s,1H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.22(t,J＝54.4Hz,1H),7.00(d,J＝6.8Hz,1H),5.24-5.19(m,1H), 3.77(s,4H),2.52(s,4H),2.30(s,3H),1.54(d,J＝6.8Hz,3H).(97.61％purity by HPLC)
实施例16
(R)-1-((1-(5-氨基-3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮
16
第一步 1-(3-(二氟甲基)-2-氟-5-硝基苯基)乙-1-酮16a
硝酸钾(45.6g,0.45mmol)溶于浓硫酸(100mL)中，室温搅拌30分钟，冷却至0℃左右，缓慢滴加化合物15c(8.5g,45.18mmol)，0℃搅拌5分钟，TLC显示反应完全。反应液慢慢加入冰水中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和碳酸氢钠水溶液洗，饱和盐水洗，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得淡黄色液体标题化合物16a(9.0g,收率86％)。
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.88-8.86(m,1H),8.66-8.64(m,1H),7.12-6.85(m,1H),2.73(d,J＝4.8Hz,3H).
第二步 (R,Z)-N-(1-(3-(二氟甲基)-2-氟-5-硝基苯基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺16b
化合物16a(9.0g,38.60mmol)分散在钛酸四乙脂(90mL)中，室温下加入(R)-(+)-叔丁基亚磺酰胺(7.0g,57.76mmol)，缓慢升温至100℃搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液冷却至室温，倒入剧烈搅拌的冰水中，持续搅拌10分钟，过滤，滤饼反复用乙酸乙酯洗涤，滤液乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色油状标题化合物16b(9.0g,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝337.1[M+H] +
第三步 (R)-N-((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟-5-硝基苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺16c
化合物16b(9.0g,粗品)溶于四氢呋喃(150mL)和水(2mL)中，降温至-60℃左右，分批加入硼氢化钠(3.1g,81.95mmol)，加毕，缓慢升温至室温继续反应2小时，TLC显示原料被耗尽。反应液倒入冰水淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得棕色油状标题化合物16c(2.8g,两步收率21％)。
LC-MS:m/z＝339.1[M+H] +
第四步 (R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟-5-硝基苯基)乙-1-胺16d
化合物16c(2.8g,8.28mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中，加入浓盐酸(1.4mL,16.52mmol)，室温搅拌1小时，TLC显示原料被耗尽。反应液冷却至室温，倒入饱和碳酸氢钠水溶液调节pH为碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得棕色液体，放置固化成棕色固体标题化合物16d(1.8g,收率95％)。
LC-MS:m/z＝235.1[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.76-8.74(m,1H),8.41-8.39(m,1H),7.52-7.25(m,1H),4.42(q,J＝6.4Hz,1H),2.48-2.24(m,2H),1.35(d,J＝6.8Hz,3H).
第五步 (R)-3-(1-氨基乙基)-5-(二氟甲基)-4-氟苯胺16e
化合物16d(300mg,1.28mmol)溶于乙醇和水(6mL/2mL)中，室温下加入还原铁粉(358mg,6.41mmol)和氯化铵(346mg,6.69mmol)，加热至90℃反应2小时，TLC检测显示反应完全。反应液冷却至室温，垫 硅藻土过滤，滤液浓缩得到标题化合物16e(600mg,粗品)，直接用于下一步。
第六步 (R)-1-((1-(5-氨基-3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-6-氯-3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-3-酮16f
化合物16e(200mg,粗品)和化合物IN-3h(89mg,0.45mmol)分散于异丙醇(5mL)中，加热至90℃反应12小时，TLC检测显示反应完全。反应液冷却至室温，浓缩得到黄色固体标题化合物16f(180mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝369.1[M+H] +
第七步 (R)-1-((1-(5-氨基-3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-7-氯-吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮16g
化合物16f(180mg,粗品)溶于甲醇(10mL)中，室温下滴加水合肼(100mg,1.60mmol,80％)，滴毕加热至45℃反应1.5小时，TLC检测显示反应完全。反应液冷却至室温，过滤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到黄色固体标题化合物16g(44mg,三步收率27％)。
LC-MS:m/z＝382.1[M-H] -
第八步 (R)-1-((1-(5-氨基-3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮16
化合物16g(20mg,0.05mmol)溶于DMSO(0.5mL)中，室温下加入N-甲基哌嗪(52mg,0.52mmol)，加热至85℃反应12小时，TLC检测显示反应完全。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到黄色固体标题化合物16(7mg,收率30％)。
LC-MS:m/z＝448.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.04(s,1H),7.33(s,1H),6.95-6.82(m,2H),6.76-6.72(m,1H),5.20(q,J＝6.8Hz,1H),3.99(s,4H),3.00(s,4H),2.66(s,3H),1.58(d,J＝7.2Hz,3H).(97.85％purity by HPLC)
实施例17
1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮17
第一步 (R)-5-(1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯17b
中间体IN-3(110mg,0.27mmol)和1-叔丁氧羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-5-硼酸频哪醇酯17a(123mg,0.40mmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)中，室温下依次加入碳酸钠(56mg,0.53mmol)和Pd(dppf)Cl 2(22mg,0.023mmol)，加毕，氮气置换多次，升温至100℃搅拌3小时，TLC显示原料反应完全。反应液冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经由硅胶柱纯化得黄色固体标题化合物17b(120mg,收率81％)。
LC-MS:m/z＝561.3[M+H] +
第二步 (R)-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮17c
化合物17b(120mg,0.21mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，室温搅拌1小时，TLC显示原料被耗尽。反应液浓缩，饱和碳酸氢钠水溶液调节pH为碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色油状标题化合物17c(110mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝461.2[M+H] +
第三步 (R)-7-(1-甲基-1,2,5,6-四氢吡啶-3-基)-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮17d
化合物17c(100mg,粗品)溶于乙腈(2mL)中，加入碳酸钾(60mg,0.43mmol)和对甲苯磺酸甲酯(32mg,0.17mmol)，室温搅拌过夜。反应液加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得黄色固体标题化合物17d(25mg,两步收率25％)。
LC-MS:m/z＝475.2[M+H] +
第四步 1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮17
化合物17d(25mg,0.053mmol)溶于乙酸乙酯(1mL)和四氢呋喃(1mL)的混合溶剂中，室温下加入钯/碳(20mg,10％)，氢气氛围下升温至50℃搅拌过夜。反应液垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤多次，滤液浓缩，粗品Prep-TLC纯化得黄色固体标题化合物17(10mg,收率42％)。
LC-MS:m/z＝447.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.41(s,1H),8.09(s,1H),6.92(s,2H),6.76(s,1H),4.96(q,J＝6.8Hz,1H),3.38-3.32(m,2H),3.14-3.11(m,1H),2.82-2.70(m,1H),2.56(s,3H),2.50-2.37(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.95-1.78(m,3H),1.57(d,J＝7.2Hz,3H).(94.55％purity by HPLC)
实施例18
1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(6-甲基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮18
第一步 3-(1-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯18b
中间体IN-3(300mg,0.73mmol)和6-(叔丁氧羰基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷18a(575mg,2.90mmol)溶于二甲基亚砜(6mL)中，升温至100℃搅拌2小时，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，加水，有固体析出，过滤，滤饼洗涤干燥得到黄色固体标题化合物18b(400mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝576.3[M+H] +
第二步 7-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-1-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮18c
化合物18b(200mg,粗品)溶于甲醇(2mL)中，加入盐酸甲醇溶液(4mL,4M)，室温搅拌3小时，TLC检测反应完全。反应液用氨甲醇中和，过滤，滤液浓缩得到标题化合物18c(170mg,粗品)，直接用于下一步。
第三步 7-(6-甲基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)-1-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮18d
化合物18c(170mg,粗品)和对甲苯磺酸甲酯(65mg,0.35mmol)溶于乙腈(15mL)中，加入碳酸钾(72mg,0.52mmol)，室温搅拌过夜，TLC检测原料大量剩余。反应液升温至80℃搅拌8小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥， 浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到标题化合物18d(37mg,三步收率21％)。
LC-MS:m/z＝490.2[M+H] +
第四步 1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(6-甲基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮18
化合物18d(37mg,0.076mmol)溶于乙醇(10mL)和水(2mL)中，室温下加入铁粉(21mg,0.38mmol)和氯化铵(20mg,0.37mmol)，升温至90℃搅拌2小时，TLC检测反应完全。反应液趁热过滤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到标题化合物18(20mg,收率57％)。
LC-MS:m/z＝460.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6+D 2O)δ9.03(s,1H),7.22(s,1H),6.97-6.73(m,3H),4.88(q,J＝6.8Hz,1H),4.03-3.61(m,6H),2.57(s,3H),2.32-2.22(m,1H),1.83-1.68(m,1H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H).(98.46％purity by HPLC)
实施例19
1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-((R)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮19
第一步 (R)-2,4-二甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯19b
将(R)-2-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯19a(12.0g,59.92mmol)溶于甲醇(50mL)中，加入甲醛水溶液(9.7g,119.51mmol,37％)和钯/碳(500mg,10％)，氢气氛围下室温搅拌2.5小时，TLC检测反应完全。反应液垫硅藻土过滤，滤液浓缩得到透明油状标题化合物19b(12.2g,粗品)，直接用于下一步。
第二步 (R)-1,3-二甲基哌嗪二盐酸盐19c
化合物19b(12.2g,粗品)溶于盐酸甲醇溶液(20mL,4M)中，室温搅拌30分钟，TLC检测反应完全。反应液浓缩得到微黄色油状标题化合物19c(12.0g,粗品)，直接用于下一步。
第三步 (R)-2,4-二甲基哌嗪-1-羧酸苄酯19d
化合物19c(13.2g,粗品)溶于四氢呋喃(130mL)中，室温下加入水(50mL)和碳酸钠(37.4g,352.86mmol)，降温至0℃，滴加氯甲酸苄酯(20.9g,122.52mmol)，滴毕，升至室温搅拌1小时，TLC检测原料反应完全。反应液加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄色油状标题化合物19d(8.9g,三步收率54％)。
第四步 (R)-1,3-二甲基哌嗪19e
化合物19d(8.9g,35.84mmol)溶于四氢呋喃(80mL)中，加入钯/碳(2.0g,10％)，氢气氛围下室温搅拌1.5小时，TLC检测反应完全。反应液垫硅藻土过滤，滤液浓缩得到黄色油状标题化合物19e(1.8g,粗品)，直接用于下一步。
第五步 7-((R)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)-1-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪 -4(3H)-酮19f
化合物19e(311mg,粗品)溶于二甲基亚砜(1.5mL)中，室温下加入中间体IN-3(120mg,0.29mmol)，升温至120℃反应过夜，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，加水(3mL)，析出固体，过滤，滤饼洗涤干燥得到黄色固体标题化合物19f(45mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝492.3[M+H] +
第六步 1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-((R)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮19
化合物19f(45mg,粗品)分散在乙醇和水(3mL/1mL)中，室温下加入还原铁粉(25mg,0.45mmol)和氯化铵(24mg,0.45mmol)，加热至90℃反应3小时，TLC检测反应完全。反应液垫硅藻土趁热过滤，滤饼洗涤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到黄色固体标题化合物19(28mg,三步收率21％)。
LC-MS:m/z＝462.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.05(s,1H),7.24(s,1H),6.99-6.87(m,2H),6.77(s,1H),5.05-4.91(m,2H),4.56(d,J＝14.4Hz,1H),3.44-3.34(m,1H),3.30-3.25(m,1H),3.22(d,J＝12.0Hz,1H),2.85-2.73(m,1H),2.64(s,4H),1.57(d,J＝6.8Hz,3H),1.37(d,J＝6.8Hz,3H).(96.26％purity by HPLC)
实施例20
1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-((S)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮20
第一步 1-苄基4-(叔丁基)(S)-2-甲基哌嗪-1,4-二羧酸酯20b
(S)-4-N-叔丁氧羰基-2-甲基哌嗪20a(3.0g,14.98mmol)溶于乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)中，室温下加入碳酸氢钠(4.0g,47.61mmol)，冷却至0℃左右，滴加氯甲酸苄酯(3.8g,22.28mmol)，滴毕，0℃反应1小时。反应液乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得黄色油状标题化合物20b(5.0g,收率99.8％)。
第二步 (S)-2-甲基哌嗪-1-羧酸苄酯20c
化合物20b(5.0g,14.95mmol)溶于二氯甲烷(50mL)中，加入三氟乙酸(10mL)，室温搅拌1小时，TLC显示反应完全。反应液浓缩，加饱和碳酸氢钠水溶液调节pH为碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色油状标题化合物20c(3.7g,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝235.2[M+H] +
第三步 (S)-2,4-二甲基哌嗪-1-羧酸苄酯20d
化合物20c(3.7g,粗品)溶于甲酸(3.1g,67.35mmol)中，室温下加入甲醛水溶液(2.4g,29.57mmol,37％)，升温至80℃搅拌过夜，TLC显示反应完全。反应液冷却至室温，反应液浓缩，饱和碳酸氢钠水溶液调节pH为碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得无色液体标题化合物20d(3.1g,两步收率84％)。
LC-MS:m/z＝249.2[M+H] +
第四步 (S)-1,3-二甲基哌嗪20e
化合物20d(3.0g,12.08mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中，加入钯/碳(300mg,10％)，氢气氛围下室温搅拌过夜，TLC显示原料反应完全。反应液垫硅藻土过滤，滤饼乙酸乙酯洗涤，滤液浓缩得黄色油状标题化合物20e(500mg,粗品)，直接用于下一步。
第五步 7-((S)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)-1-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮20f
中间体IN-3(80mg,0.19mmol)溶于二甲基亚砜(0.5mL)中，室温下加入化合物20e(230mg,粗品)，升温至120℃搅拌过夜，TLC显示原料被耗尽。反应液冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得棕色固体标题化合物20f(90mg,收率95％)。
LC-MS:m/z＝492.3[M+1] +
第六步 1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-((S)-2,4-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮20
化合物20f(90mg,0.18mmol)溶解在乙醇(4mL)和水(2mL)中，室温下加入铁粉(57mg,1.02mmol)和氯化铵(55mg,1.03mmol)，加毕，升温至80℃搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液趁热过滤，滤饼乙醇洗涤，滤液浓缩，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得黄色固体标题化合物20(22mg,收率26％)。
LC-MS:m/z＝462.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.06(s,1H),7.20(s,1H),6.92(s,2H),6.77(s,1H),4.94(q,J＝6.8Hz,2H),4.47(d,J＝12.4Hz,1H),3.37-3.33(m,1H),3.13-3.02(m,2H),2.54-2.31(m,5H),1.56(d,J＝6.8Hz,3H),1.35(d,J＝6.8Hz,3H).(96.68％purity by HPLC)
实施例21
1-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-7-(1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮21
第一步 (R)-5-(1-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯21a
化合物15h(110mg,0.30mmol)和1-叔丁氧羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-5-硼酸频哪醇酯17a(113mg,0.37mmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)中，室温下依次加入碳酸钠(52mg,0.49mmol)和Pd(dppf)Cl 2(20mg,0.027mmol)，氮气置换多次，升温至100℃搅拌3小时，TLC显示原料反应完全。反应液冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得黄色固体标题化合物21a(120mg,收率78％)。
LC-MS:m/z＝516.3[M+H] +
第二步 3-(1-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯21b
化合物21a(120mg,0.23mmol)溶于乙酸乙酯(2mL)和四氢呋喃(2mL)中，室温下加入钯/碳(40mg,10％)，氢气氛围下升温至50℃搅拌过夜。反应液冷却至室温，垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤，滤液浓缩得白色固体标题化合物21b(110mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝518.3[M+H] +
第三步 1-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-7-(哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮21c
化合物21b(50mg,粗品)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，室温搅拌1小时，TLC显示反应完全。反应液浓缩，加氨甲醇溶液(7M)调节pH为碱性，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得白色固体标题化合物21c(30mg,两步收率69％)。
LC-MS:m/z＝418.2[M+H] +
第四步 1-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-7-(1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮21
化合物21c(30mg,0.072mmol)分散在甲醇(2mL)中，加入甲醛水溶液(58mg,0.71mmol,37％)和钯/碳(20mg,10％)，氢气氛围下室温搅拌过夜。反应液垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤多次，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得白色固体标题化合物21(8mg,收率26％)。
LC-MS:m/z＝432.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.42(s,1H),8.13(s,1H),7.57(t,J＝7.2Hz,1H),7.44(t,J＝6.8Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),6.98(t,J＝54.8Hz,1H),5.32(q,J＝7.2Hz,1H),3.45-3.31(m,2H),3.20-3.12(m,1H),2.98-2.78(m,1H),2.62(s,3H),2.54-2.42(m,1H),2.17-2.14(m,1H),1.96-1.84(m,3H),1.63(d,J＝6.8Hz,3H).(96.73％purity by HPLC)
实施例22
1-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-3-甲基-7-(1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮22
第一步 3-(1-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-3-甲基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯22a
化合物21b(80mg,0.15mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中，依次加入碳酸钾(43mg,0.31mmol)和碘甲烷(33mg,0.23mmol)，室温搅拌4小时，TLC显示原料反应完全。反应液加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，水洗，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得白色固体标题化合物22a(100mg,粗品)，直接用于下一步。
第二步 1-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-3-甲基-7-(哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮22b
化合物22a(100mg,粗品)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，室温搅拌1小时，TLC显示反应完全。反应液浓缩，加氨甲醇溶液(7M)调节pH为碱性，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得白色固体标题化合物22b(50mg,两步收率75％)。
LC-MS:m/z＝432.2[M+H] +
第三步 1-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-3-甲基-7-(1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4-(3H)-酮22
化合物22b(50mg,0.12mmol)分散在甲醇(2mL)中，加入甲醛水溶液(94mg,1.16mmol,37％)和钯/碳(30mg,10％)，氢气氛围下室温搅拌过夜。反应液垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤多次，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得淡黄色固体标题化合物22(13mg,收率25％)。
LC-MS:m/z＝446.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.40(s,1H),8.07(s,1H),7.59(t,J＝7.2Hz,1H),7.45(t,J＝7.2Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.01(t,J＝54.8Hz,1H),5.31(q,J＝6.8Hz,1H),3.50(s,3H),3.28-3.18(m,2H),3.06-2.98(m,1H),2.52-2.47(m,1H),2.43(s,3H),2.29-2.15(m,1H),2.13-2.05(m,1H),1.93-1.71(m,3H),1.64(d,J＝6.8Hz,3H).(99.14％purity by HPLC)
实施例23
(R)-1-(((1-(4-(2-(((甲基氨基)甲基)苯基)噻吩-2-基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮23
第一步 (2-((甲基氨基)甲基)苯基)硼酸23b
邻甲酰基硼酸23a(5.0g,33.35mmol)溶于甲胺乙醇溶液(30mL,7M)中，加入钯/碳(200mg,10％)，氢气氛围下室温反应5小时，TLC检测原料反应完全。反应液垫硅藻土过滤，滤饼洗涤，滤液浓缩得到淡黄色拉泡固体标题化合物23b(5.3g,粗品)，直接用于下一步。
第二步 (2-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)硼酸23c
化合物23b(5.3g,粗品)溶于四氢呋喃(100mL)和水(20mL)中，室温下加入碳酸钠(10.3g,97.18mmol)，冷却至0℃，滴加二碳酸二叔丁酯(8.5g,38.95mmol)，滴毕，恢复至室温反应过夜，TLC检测反应完全。反应液加水，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品石油醚和乙酸乙酯打浆，过滤，滤饼洗涤干燥得到白色固体标题化合物23c(7.4g,两步收率84％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.14(s,2H),7.50(dd,J＝7.2,0.8Hz,1H),7.38-7.30(m,1H),7.21(t,J＝7.2Hz,1H),7.08(d,J＝7.6Hz,1H),4.56(s,2H),2.74(s,3H),1.40(s,9H).
第三步 (R)-1-(4-溴噻吩-2-基)乙-1-胺23e
化合物23d(1.1g,3.59mmol)溶于盐酸甲醇溶液(10mL,4mol/L)中，室温反应1小时，TLC检测原料反应完全。反应液用饱和碳酸氢钠水溶液中和，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色油状标题化合物23e(1.0g,粗品)，直接用于下一步。
第四步 (R)-(2-(5-(1-氨基乙基)噻吩-3-基)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯23f
化合物23e(1.0g,粗品)和化合物23c(1.9g,7.17mmol)溶于1,4-二氧六环(20mL)和水(5mL)中，室温下加入碳酸钠(1.5g,14.15mmol)和Pd(dppf)Cl 2二氯甲烷络合物(200mg,0.24mmol)，氮气置换3次，加热至100℃反应4小时，TLC检测原料反应完全。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析纯化得到红色油状标题化合物23f(800mg,两步收率64％)。
LC-MS:m/z＝347.2[M+H] +
第五步 (R)-(2-(5-(1-((6-氯-3-氧代-3H-吡咯并[3,4-c]吡啶-1-基)氨基)乙基)噻吩-3-基)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯23g
化合物23f(800mg,2.31mmol)和化合物IN-3h(400mg,2.20mmol)溶于异丙醇(20mL)中，加热至90℃搅拌过夜，TLC检测反应基本完全。反应液冷却至室温，浓缩得到棕色拉泡固体标题化合物23g(1.1g,粗品)，直接用于下一步。
第六步 (R)-(2-(5-(1-((7-氯-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)噻吩-3-基)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯23h
化合物23g(1.1g,粗品)溶于甲醇(15mL)中，室温下加入水合肼(269mg,4.30mmol,80％)，加热至40℃反应2小时，TLC检测反应完全。反应液冷却室温，过滤，滤液浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄棕色油状标题化合物23h(910mg,两步收率79％)。
第七步 (R)-甲基(2-(5-(1-((7-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)噻吩-3-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯23i
化合物23h(100mg,0.17mmol)和N-甲基哌嗪2b(95mg,0.95mmol)溶于二甲基亚砜(1mL)中，加热至80℃反应2小时，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体标题化合物23i(75mg,粗品)，直接用于下一步。
第八步 (R)-1-(((1-(4-(2-(((甲基氨基)甲基)苯基)噻吩-2-基)乙基)氨基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮23
化合物23i(75mg,粗品)溶于盐酸/1,4-二氧六环溶液(3mL,4M)中，室温反应1小时，TLC检测反应完全。反应液用饱和碳酸钠水溶液中和，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到黄色固体标题化合物23(17mg,两步收率20％)。
LC-MS:m/z＝490.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.31(s,1H),8.93(s,1H),7.50-7.46(m,1H),7.44(d,J＝1.2Hz,1H),7.34-7.29(m,3H),7.23(d,J＝8.0Hz,2H),7.00(d,J＝7.6Hz,1H),5.41-5.25(m,1H),3.76-3.69(m,4H),3.68(s,2H),2.47-2.40(m,4H),2.28(s,3H),2.24(s,3H),1.67(d,J＝6.8Hz,3H).(99.72％purity by HPLC)
实施例24
1-(((R)-1-(4-(2-((甲基氨基)甲基)苯基)噻吩-2-基)乙基)氨基)-7-(((S)-四氢呋喃-3-基)氧基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮24
第一步 甲基(2-(5-((R)-1-((4-氧代-7-(((S)-四氢呋喃-3-基)氧基)-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)噻吩-3-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯24a
(S)-(+)-3-羟基四氢呋喃(1mL)冷却至0℃，加入钠氢(76mg,1.90mmol,60％)，室温搅拌1小时，反应液由乳浊液变成橙色透明，加入化合物23h(100mg,0.19mmol)，升温至80℃搅拌过夜。反应液加水淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，水洗，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得白色固体 标题化合物24a(100mg,收率91％)
LC-MS:m/z＝578.3[M+H] +
第二步 1-(((R)-1-(4-(2-((甲基氨基)甲基)苯基)噻吩-2-基)乙基)氨基)-7-(((S)-四氢呋喃-3-基)氧基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮24
化合物24a(100mg,0.17mmol)溶于盐酸/1,4-二氧六环溶液(1mL,4M)中，室温搅拌1小时，TLC显示原料消失。反应液加饱和碳酸氢钠水溶液调节pH为碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得黄色固体标题化合物24(7mg,收率8％)。
LC-MS:m/z＝478.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.12(s,1H),7.44-7.36(m,2H),7.34-7.25(m,3H),7.14(s,1H),7.11(s,1H),5.77-5.68(m,1H),5.39-5.29(m,1H),4.07-3.80(m,6H),2.39-2.30(m,1H),2.24(s,3H),2.20-2.14(m,1H),1.72(d,J＝6.8Hz,3H).(88.28％purity by HPLC)
实施例25
1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮25
第一步 3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯25b
3-氨基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯25a(800mg,4.30mmol)分散在甲醇(10mL)中，加入甲醛水溶液(3.5g,43.12mmol,37％)和钯/碳(200mg,10％)，氢气氛围下室温搅拌过夜。反应液垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤多次，滤液浓缩，粗品硅胶柱层析纯化得黄色液体标题化合物25b(900mg,收率98％)。
LC-MS:m/z＝215.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ3.52-3.44(m,1H),3.23-3.17(m,1H),3.04-2.96(m,1H),2.63-2.54(m,1H),2.19(s,6H),2.01-1.95(m,1H),1.74-1.55(m,2H),1.39(s,6H).
第二步 N,N-二甲基吡咯烷-3-胺25c
化合物25b(900mg,4.20mmol)溶解在盐酸/1,4-二氧六环溶液中(10mL,4M)，室温搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液浓缩得棕色液体标题化合物25c(700mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝115.2[M+H] +
第三步 7-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-1-(((R)-1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮25d
中间体IN-3(70mg,0.17mmol)溶于二甲基亚砜(0.5mL)中，室温下加入化合物25c(58mg,粗品)和N,N-二异丙基乙胺(87mg,0.68mmol)，升温至80℃搅拌过夜，TLC监控消失原料消失。反应液加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得棕色固体标题化合物25d(50mg,收率60％)。
LC-MS:m/z＝492.2[M+H] +
第四步 1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3,4-d]哒 嗪-4(3H)-酮25
化合物25d(50mg,0.10mmol)溶于乙醇(2mL)和水(1mL)中，室温下加入铁粉(28mg,0.50mmol)和氯化铵(27mg,0.50mmol)，升温至80℃搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液趁热过滤，滤饼乙醇洗涤，滤液浓缩，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品Prep-TLC纯化得黄色固体标题化合物25(30mg,收率64％)。
LC-MS:m/z＝462.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.98(s,1H),6.94(s,1H),6.92(s,1H),6.87(s,1H),6.77(s,1H),4.95(q,J＝7.2Hz,1H),3.92-3.83(m,2H),3.57-3.48(m,1H),3.40-3.33(m,1H),3.10-3.05(m,1H),2.44(s,6H),2.41-2.34(m,1H),2.07-1.93(m,1H),1.57(d,J＝7.2Hz,3H).(99.28％purity by HPLC)
实施例26
1-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)氨基)-7-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮26
化合物15h(60mg,0.16mmol)溶于二甲基亚砜(0.5mL)中，室温下加入化合物25c(56mg,0.49mmol)和N,N-二异丙基乙胺(84mg,0.65mmol)，升温至80℃搅拌过夜，TLC消失原料消失。反应液加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得灰色固体标题化合物26(25mg,收率34％)。
LC-MS:m/z＝447.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.00(s,1H),7.56(t,J＝7.6Hz,1H),7.43(t,J＝6.8Hz,1H),7.20(t,J＝8.0Hz,1H),7.11-6.84(m,2H),5.30(q,J＝6.8Hz,1H),4.04-3.99(m,1H),3.91-3.87(m,1H),3.63-3.50(m,2H),3.41-3.38(m,1H),2.62(s,6H),2.52-2.45(m,1H),2.17-2.07(m,1H),1.62(d,J＝7.2Hz,3H).(99.44％purity by HPLC)
实施例27
1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(1-甲基吡咯烷-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮27
第一步 (R)-3-(1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)-2,5- 二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯27b
中间体IN-3(100mg,0.24mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)和水(1mL)中，室温下加入1-叔丁氧羰基-2,5-二氢-1H-吡咯-3-硼酸频哪醇酯27a(85mg,0.29mmol)，碳酸钠(76mg,0.72mmol)和Pd(dppf)Cl 2二氯甲烷络合物(20mg,0.024mmol)，氮气置换3次后，加热至100℃反应3小时，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄色固体标题化合物27b(115mg,收率87％)。
LC-MS:m/z＝547.3[M+H] +
第二步 3-(1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯27c
化合物27b(115mg,0.21mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)中，室温下加入钯/碳(20mg,10％)，氢气氛围下50℃反应8小时，LCMS检测原料反应完全。反应液冷却至室温，垫硅藻土过滤，滤饼洗涤，滤液浓缩得到黄色固体标题化合物27c(100mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝519.3[M+H] +
第三步 3-(1-(((R)-1-(3-乙酰氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯27d
化合物27c(100mg,粗品)溶于二氯甲烷(10mL)中，室温下加入N,N-二异丙基乙胺(65mg,0.50mmol)和醋酸酐(38mg,0.37mmol)，加热至30℃反应4小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液冷却至室温，二氯甲烷萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到黄色固体标题化合物27d(50mg,两步收率42％)。
第四步 N-(3-((1R)-1-((4-氧代-7-(吡咯烷-3-基)-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺27e
化合物27d(50mg,0.096mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(1mL)，室温反应2小时，TLC检测原料反应完全。反应液用饱和碳酸氢钠水溶液中和，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体标题化合物27e(38mg,粗品)，直接用于下一步。
第五步 N-(3-((1R)-1-((7-(1-甲基吡咯烷-3-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺27f
化合物27e(38mg,粗品)溶于甲醇(3mL)中，加入甲醛水溶液(3d)和钯/碳(15mg,10％)，氢气氛围下室温反应2小时，TLC检测原料基本反应完全。反应液垫硅藻土过滤，滤液浓缩得到标题化合物27f(54mg,粗品)，直接用于下一步。
第六步 1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-(1-甲基吡咯烷-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮27
化合物27f(54mg,粗品)溶于乙醇(3mL)中，室温下加入氢氧化钠水溶液(3mL,12mmol,4M)，加热至80℃反应过夜，TLC检测基本反应完全。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到淡黄色固体标题化合物27(8mg,三步收率19％)。
LC-MS:m/z＝433.2[M+H] +
1HNMR(400MHz,CD 3OD)δ9.43(s,1H),8.07(s,1H),6.93(s,2H),6.77(s,1H),4.95(q,J＝6.8Hz,1H),4.05-3.75(m,1H),3.40-3.36(m,1H),3.12-3.06(m,3H),2.63(s,3H),2.59-2.42(m,1H),2.27-2.22(m,1H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H).(97.64％purity by HPLC)
实施例28
1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3-甲基-7-(1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮28
第一步 (R)-5-(3-甲基-1-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯28a
化合物4a(200mg,0.47mmol)和1-叔丁氧羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-5-硼酸频哪醇酯17a(217mg,0.70mmol)溶于1,4-二氧六环(15mL)和水(3mL)中，室温下加入Pd(dppf)Cl 2二氯甲烷络合物(18mg,0.022mmol)和碳酸钠(148mg,1.40mmol)，升温至100℃搅拌1小时，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱层析纯化得到黄色固体标题化合物28a(282mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝575.3[M+H] +
第二步 3-(1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3-甲基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯28b
化合物28a(282mg,粗品)溶于乙酸乙酯(10mL)中，加入钯/碳(100mg,10％)，氢气氛围下50℃反应过夜，LCMS检测原料反应完。反应液冷却至室温，垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤，滤液浓缩得到黄色固体标题化合物28b(290mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝547.3[M+H] +
第三步 3-(1-(((R)-1-(3-乙酰氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3-甲基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯28c
化合物28b(290mg,粗品)溶于二氯甲烷(3mL)中，室温下加入乙酸酐(81mg,0.79mmol)和三乙胺(107mg,1.06mmol)，升温至30℃反应4小时，TLC显示原料反应完。反应液浓缩，粗品经Prep-TLC得到淡黄色固体标题化合物28c(152mg,三步收率55％)。
LC-MS:m/z＝589.3[M+H] +
第四步 N-(3-((1R)-1-((3-甲基-4-氧代-7-(哌啶-3-基)-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺28d
化合物28c(152mg,0.26mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，室温反应2小时，TLC显示原料反应完。反应液加饱和碳酸氢钠水溶液调节至碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体标题化合物28d(143mg,粗品)，直接用于下一步。
第五步 N-(3-((1R)-1-((3-甲基-7-(1-甲基哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺28e
化合物28d(143mg,粗品)溶于甲醇(5mL)中，加入甲醛水溶液(71mg,0.87mmol,37％)和钯/碳(70mg,10％)，氢气氛围下室温反应2小时，TLC显示原料反应完。反应液垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤，滤液浓缩得到黄色油状标题化合物28e(190mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝503.3[M+H] +
第六步 1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-3-甲基-7-(1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪 -4(3H)-酮28
化合物28e(190mg,粗品)溶于甲醇(4mL)中，室温下加入氢氧化钠水溶液(1.89ml,7.56mmol,4N)，加热至80℃反应过夜，TLC显示原料反应完。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到白色固体标题化合物28(47mg,三步收率39％)。
LC-MS:m/z＝461.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.41(s,1H),8.07(s,1H),6.97(s,2H),6.78(s,1H),4.96(q,J＝6.8Hz,1H),3.56(s,3H),3.38-3.26(m,2H),3.15-3.08(m,1H),2.82-2.65(m,1H),2.55(s,3H),2.50-2.36(m,1H),2.16-2.07(m,1H),1.99-1.70(m,3H),1.60(d,J＝7.2Hz,3H).(99.78％purity by HPLC)
实施例29
4-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(1-甲基哌啶-3-基)酞嗪-1(2H)-酮29
第一步 (R)-5-(4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1-氧代-1,2-二氢酞嗪-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯29a
中间体IN-2(300mg,0.66mmol)和1-叔丁氧羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-5-硼酸频哪醇酯17a(325mg,1.05mmol)溶于1,4-二氧六环(6mL)和水(2mL)中，室温下依次加入碳酸钠(150mg,1.42mmol)和Pd(dppf)Cl 2(58mg,0.08mmol)，氮气置换多次，升温至100℃搅拌1小时，TLC显示原料反应完全。反应液冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经硅胶柱纯化得黄色固体标题化合物29a(260mg,收率70％)。
LC-MS:m/z＝560.3[M+H] +
第二步 3-(4-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1-氧代-1,2-二氢酞嗪-6-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯29b
化合物29a(250mg,0.45mmol)溶于乙酸乙酯(8mL)中，加入钯/碳(60mg,10％)，氢气氛围下升温至50℃搅拌过夜。反应液垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤多次，滤液浓缩，粗品经硅胶柱纯化得白色固体标题化合物29b(210mg,收率88％)。
LC-MS:m/z＝532.3[M+H] +
第三步 3-(4-(((R)-1-(3-乙酰氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1-氧代-1,2-二氢酞嗪-6-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯29c
化合物29b(210mg,0.40mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，室温下依次加入N,N-二异丙基乙胺(102mg,0.79mmol)和乙酸酐(61mg,0.60mmol)，升温至30℃搅拌5小时，TLC显示反应基本完全。反应液加水稀释，二氯甲烷萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得白色固体标题化合物29c(250mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝574.3[M+H] +
第四步 N-(3-((1R)-1-((4-氧代-7-(哌啶-3-基)-3,4-二氢酞嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺29d
化合物29c(250mg,粗品)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，室温搅拌1小时，TLC显示反应完全。反应液浓缩，饱和碳酸氢钠水溶液调节pH为弱碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得白色固体标题化合物29d(200mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝474.3[M+H] +
第五步 N-(3-((1R)-1-((7-(1-甲基哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺29e
化合物29d(200mg,粗品)溶于甲醇(4mL)中，依次加入甲醛水溶液(127mg,1.56mmol,37％)和钯/碳(50mg,10％)，氢气氛围下室温搅拌过夜，TLC显示反应完全。反应液垫硅藻土过滤，滤饼甲醇洗涤，滤液浓缩得白色固体标题化合物29e(200mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝488.3[M+H] +
第六步 4-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-6-(1-甲基哌啶-3-基)酞嗪-1(2H)-酮29
化合物29e(200mg,粗品)溶于乙醇(6mL)中，室温下加入氢氧化钠水溶液(3mL,15mmol,5M)，加热回流过夜。将反应液浓缩，加水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和盐水洗，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得黄色固体标题化合物29(37mg,四步收率21％)。
LC-MS:m/z＝446.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ11.43(s,1H),8.21(s,1H),8.13(d,J＝8.4Hz,1H),7.73(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),6.92(d,J＝6.8Hz,1H),6.80(d,J＝6.0Hz,2H),6.66(s,1H),5.50(s,2H),4.92-4.85(m,1H),3.03-2.85(m,3H),2.25(s,3H),2.13-1.84(m,3H),1.80-1.76(m,1H),1.71-1.58(m,2H),1.50(d,J＝7.2Hz,3H).(98.90％purity by HPLC)
实施例30
4-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(1-甲基哌啶-3-基)酞嗪-1(2H)-酮30
第一步 (R)-5-(2-甲基-4-((1-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-1-氧代-1,2-二氢酞嗪-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯30a
化合物2a(200mg,0.42mmol)和1-叔丁氧羰基-3,6-二氢-2H-吡啶-5-硼酸频哪醇酯17a(197mg,0.64mmol)溶于1,4-二氧六环(15mL)和水(3mL)中，室温下加入Pd(dppf)Cl 2二氯甲烷络合物(18mg,0.022mmol)和碳酸钠(90mg,0.85mmol)，氮气保护下升温至100℃搅拌1小时，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品硅胶柱层析纯化得到标题化合物30a(240mg,收率99％)。
LC-MS:m/z＝574.3[M+H] +
第二步 3-(4-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代-1,2-二氢酞嗪-6-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯30b
化合物30a(240mg,0.42mmol)溶于四氢呋喃(10mL)和乙酸乙酯(6mL)中，室温下加入钯/碳(催化量)，氢气氛围下升温至50℃反应过夜，TLC检测反应完全。反应液冷却至室温，垫硅藻土过滤，滤液浓缩得到标题化合物30b(240mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝546.3[M+H] +
第三步 3-(4-(((R)-1-(3-乙酰氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基-1-氧代-1,2-二氢酞嗪-6-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯30c
化合物30b(240mg,粗品)和N,N-二异丙基乙胺(108mg,0.84mmol)溶于1,4-二氧六环(60mL)中，加入乙酸酐(64mg,0.63mmol)，室温搅拌过夜，TLC检测反应完全。反应液加水，二氯甲烷萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到标题化合物30c(270mg,粗品)，直接用于下一步。
第四步 N-(3-((1R)-1-((3-甲基-4-氧代-7-(哌啶-3-基)-3,4-二氢酞嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺30d
化合物30c(270mg,粗品)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，室温搅拌2小时，TLC检测反应完全。反应液浓缩，残余物用饱和碳酸氢钠水溶液中和，二氯甲烷萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得到标题化合物30d(220mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝488.3[M+H] +
第五步 N-(3-((1R)-1-((3-甲基-7-(1-甲基哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺30e
化合物30d(125mg,粗品)和甲醛水溶液(62mg,0.76mmol,37％)溶于甲醇(15mL)中，加入钯/碳(催化量)，氢气氛围下室温反应2小时，TLC检测反应完全。反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物30e(130mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝502.3[M+H] +
第六步 4-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-2-甲基-6-(1-甲基哌啶-3-基)酞嗪-1(2H)-酮30
化合物30e(130mg,粗品)溶于乙醇(6mL)中，室温下加入氢氧化钠(103mg,2.58mmol)，升温至90℃反应过夜，TLC检测原料基本反应完全。反应液冷却至室温，过滤，滤液浓缩，粗品经Prep-TLC纯化得到标题化合物30(40mg,五步收率36％)。
LC-MS:m/z＝460.3[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.24(d,J＝8.4Hz,1H),8.11(d,J＝1.2Hz,1H),7.72(dd,J＝1.2,8.0Hz,1H),7.00-6.97(m,2H),6.78(s,1H),5.00(q,J＝7.2Hz,1H),3.56(s,3H),3.14-3.03(m,3H),2.44(s,3H),2.41-2.33(m,1H),2.27-2.19(m,1H),2.02-1.99(m,1H),1.95-1.89(m,1H),1.88-1.76(m,1H),1.71-1.64(m,1H),1.60(d,J＝6.8Hz,3H).(98.98％purity by HPLC)
实施例31
1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-((R)-1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮31-1
1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-((S)-1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮31-2
第一步 (R)-5-(1-((1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯31a
化合物17b(260mg,0.46mmol)溶于乙醇(10mL)和水(3mL)中，室温下加入还原铁粉(129mg,2.31mmol)和氯化铵(125mg,2.31mmol)，加热至90℃反应3小时，TLC显示原料反应完。反应液垫硅藻土热过滤，滤液加水(10mL)，乙酸乙酯萃取(10mL)，合并有机相，饱和盐水洗(10mL)，无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色固体标题化合物31a(296mg,粗品)，直接用于下一步。
第二步 (R)-3-(1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯31b-1&(S)-3-(1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯31b-2
化合物31a(290mg,粗品)溶于乙醇(5mL)中，加入钯/碳(50mg,10％)，氢气氛围下室温反应5小时，TLC显示原料反应完。反应液垫硅藻土过滤，滤液浓缩得黄色固体标题化合物31b(120mg,两步收率46％)，化合物31b经手性拆分(大赛璐AD-H,30*250mm,5μm,20mL/min,EtOH:Hexane＝1:9)得到淡黄色固体标题化合物31b-1(1号峰,RT 15.577min)(40mg,收率33％)和淡黄色固体标题化合物31b-2(2号峰,RT 19.628 min)(41mg,收率34％)。
化合物构型及性质需进一步检测，暂定31b-1、31b-2为以上构型。
第三步 (R)-3-(1-(((R)-1-(3-乙酰氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯31c-1&(S)-3-(1-(((R)-1-(3-乙酰氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-7-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯31c-2
化合物31b-1(40mg,0.075mmol)溶于四氢呋喃(6mL)中，室温下加入N,N-二异丙基乙胺(58mg,0.45mmol)和醋酸酐(30mg,0.30mmol)，加热至35℃反应16小时，TLC显示原料反应完。反应液加水稀释(10mL)，乙酸乙酯萃取(10mL)，合并有机相，饱和盐水洗(10mL)，无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色固体标题化合物31c-1(75mg,粗品)，直接用于下一步。
化合物31b-2(41mg,0.076mmol)溶于四氢呋喃(6mL)中，室温下加入N,N-二异丙基乙胺(59mg,0.46mmol)和醋酸酐(31mg,0.31mmol)，加热至35℃反应16小时，TLC显示原料反应完。反应液加水稀释(10mL)，乙酸乙酯萃取(10mL)，合并有机相，饱和盐水洗(10mL)，无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色固体标题化合物31c-2(75mg,粗品)，直接用于下一步。
LC-MS:m/z＝575.3[M+H] +
化合物构型及性质需进一步检测，暂定31c-1、31c-2为以上构型。
第四步 N-(3-((R)-1-((4-氧代-7-((R)-哌啶-3-基)-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺31d-1&N-(3-((R)-1-((4-氧代-7-((S)-哌啶-3-基)-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺31d-2
化合物31c-1(75mg,粗品)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，室温反应2小时，TLC显示原料反应完。反应液滴加饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)调节至PH＝8～9，乙酸乙酯萃取(10mL)，合并有机相，饱和盐水洗(10mL)，无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色固体标题化合物31d-1(67mg,粗品)，直接用于下一步。
化合物31c-2(75mg,粗品)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，室温反应2小时，TLC显示原料反应完。反应液滴加饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)调节至PH＝8～9，乙酸乙酯萃取(10mL)，合并有机相，饱和盐水洗(10mL)，无水硫酸钠干燥，浓缩得黄色固体标题化合物31d-2(50mg,粗品)，直接用于下一步。
化合物构型及性质需进一步检测，暂定31d-1、31d-2为以上构型。
第五步 N-(3-((R)-1-((7-((R)-1-甲基哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺31e-1&N-(3-((R)-1-((7-((S)-1-甲基哌啶-3-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[3,4-d]哒嗪-1-基)氨基)乙基)-5-(三氟甲基)苯基)乙酰胺31e-2
化合物31d-1(67mg,粗品)溶于乙醇(3mL)中，加入甲醛水溶液(35mg,0.43mmol,30％)、钯/碳(20mg,10％)，氢气氛围下室温反应4小时，TLC显示原料反应完。反应液垫硅藻土过滤，滤液浓缩得黄色固体标题化合物31e-1(70mg,粗品)，直接用于下一步。
化合物31d-2(50mg,粗品)溶于乙醇(3mL)中，加入甲醛水溶液(35mg,0.43mmol,30％)、钯/碳(20mg,10％)，氢气氛围下室温反应4小时，TLC显示原料反应完。反应液垫硅藻土过滤，滤液浓缩得黄色固体标题化合物31e-2(60mg,粗品)，直接用于下一步。
化合物构型及性质需进一步检测，暂定31e-1、31e-2为以上构型。
第六步 1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-((R)-1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮31-1&1-(((R)-1-(3-氨基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)氨基)-7-((S)-1-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,4-d]哒嗪-4(3H)-酮31-2
化合物31e-1(70mg,粗品)溶于甲醇(3mL)中，室温下加入氢氧化钠水溶液(2mL,8mmol,4N)，加热至70℃反应16小时，TLC显示原料反应完。反应液冷却至室温，加水稀释(10mL)，乙酸乙酯萃取(10mL)，合并有机相，饱和盐水洗(10mL)，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品Prep-TLC纯化(二氯甲烷/氨的甲醇溶液＝10/1)得淡黄色固体标题化合物31-1(15mg,四步收率45％)。
LC-MS:m/z＝447.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.43(s,1H),8.13(s,1H),6.96-6.89(m,2H),6.79-6.75(m,1H),4.96(q,J＝6.8Hz,1H),3.49-3.39(m,2H),3.28-3.20(m,1H),3.18-2.99(m,1H),2.83-2.62(m,4H),2.24-2.12(m,1H), 2.03-1.82(m,3H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H).(96.67％purity by HPLC)
化合物31e-2(60mg,粗品)溶于甲醇(3mL)中，室温下加入氢氧化钠水溶液(2mL,8mmol,4N)，加热至70℃反应16小时，TLC显示原料反应完。反应液冷却至室温，加水稀释(10mL)，乙酸乙酯萃取(10mL)，合并有机相，饱和盐水洗(10mL)，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品Prep-TLC纯化(二氯甲烷/氨的甲醇溶液＝10/1)得淡黄色固体标题化合物31-2(13mg,四步收率37％)。
LC-MS:m/z＝447.2[M+H] +
1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.41(s,1H),8.09(s,1H),6.98-6.88(m,2H),6.81-6.73(m,1H),4.95(q,J＝6.8Hz,1H),3.30-3.20(m,2H),3.13-3.01(m,1H),2.75-2.58(m,1H),2.51(s,3H),2.44-2.28(m,1H),2.16-2.05(m,1H),1.97-1.71(m,3H),1.58(d,J＝6.8Hz,3H).(99.69％purity by HPLC)
化合物构型及性质需进一步检测，暂定31-1、31-2为以上构型。
测试例1 化合物对K-562细胞增殖抑制的IC 50测定
本发明中使用的人慢性髓原性白血病细胞K-562(CCL-243)购自American Type Culture Collection(ATCC)。细胞在10％胎牛血清(FBS)及1％双抗的RPMI 1640培养基，在37℃，5％CO 2的环境中生长。
化合物对体外培养的K-562细胞增殖抑制作用通过以下方法进行测定：
1)细胞接种：取对数生长期状态良好的K-562细胞以20000个/孔、90μL接种到96孔板中，在37℃、5％CO 2条件下培养24小时。
2)加药：将需要测试的化合物以完全培养基进行梯度稀释，取10μL稀释的化合物加入到90μL的细胞中，使化合物终浓度为10000、3000、1000、300、100、30、10、3、1nM，同时设相应的溶媒对照。置于37℃、5％CO 2细胞培养箱中培养96小时。
3)检测：每孔加10μL 5mg/mL MTT工作液(ABCONE,M9609)，37℃作用4小时后，加入三联液(10％SDS,0.5％异丙醇，0.1mol/L HCL)，至细胞裂解物完全溶解，使用TECAN SPARK酶标仪读取OD570和OD690数值。
4)计算：以下列公式计算细胞生长抑制率：
抑制率＝(对照孔 OD570nm-OD690nm－给药孔 OD570nm-OD690nm)/对照孔 OD570nm-OD690nm×100％
用Graphpad prism 5.0软件根据化合物浓度与对应的抑制率计算IC 50值。试验结果见表1。
表1 本发明中化合物对K-562细胞的增值抑制的IC 50(nM)
化合物编号 IC 50(nM) 化合物编号 IC 50(nM) 化合物编号 IC 50(nM)
BI3406 35.2 11 1619 22 107.7
1 735.7 12 134 23 142.8
2 822.7 13 104 24 231.9
3 111.1 14 362.3 25 125.9
4 150.8 15 279.25 26 137.6
5 44.7 16 43.8 27 91.3
6 2489 17 33.1 28 66.65
7 5917 18 60.0 29 51.0
8 1599 19 63.4 30 143.9
9 988 20 39.3 31-1 43.4
10 121.4 21 97.7 31-2 13.1
结论：如表1所示，本发明实施例化合物对K-562细胞具有增殖抑制作用，且多个化合物的活性与BI-3402相当。
测试例2 化合物对K-562细胞中KRAS下游信号分子ERK1/2磷酸化水平的影响
本发明的化合物对K-562细胞中ERK1/2磷酸化水平的影响通过以下方法检测：
1)细胞接种：取对数生长期状态良好的K-562细胞以1*10 6个/孔接种到六孔板中，在37℃、5％CO2条件下培养过夜。
2)加药：将需要测试的化合物以完全培养基进行梯度稀释后，加入细胞中，使化合物的终浓度为1000、100、10、1nM。置于37℃、5％CO 2细胞培养箱中培养24小时。
3)蛋白样品制备：收集细胞悬液，500g离心5分钟，弃上清，PBS洗涤3次，以1×SDS凝胶上样缓冲液(50mM Tris-HCl(pH 6.8)，100mM DTT，2％SDS，10％甘油，0.1％溴酚蓝)100μL裂解细胞。细胞裂解物在100℃中加热10分钟变性。
4)Western blot：将蛋白样品进行SDS-PAGE电泳，电泳结束后，用湿转***将蛋白转移至PVDF膜，将PVDF膜置于封闭液(5％脱脂奶粉稀释于TBS/T)中室温封闭1小时，然后I，II抗反应；洗膜后，用Immobilon Western HRP Substrate luminal reagent试剂发色，Western Blot成像仪(Tanon,4600)拍照。以下是所用抗体信息：p-ERK1/2(CST:4370)；ERK1/2(CST:9102)；β-tubulin(CST:2146)；GAPDH(CST:5174)。化合物对K-562细胞中ERK1/2磷酸化水平影响的结果见图1和图2。
结论：本发明实施例中化合物5，20，31-1，31-2对K-562细胞ERK1/2的磷酸化具有明显抑制作用；抑制活性呈浓度梯度依赖；总体上，活性与BI-3406大致相当。
测试例3 化合物对SOS1的抑制活性
实验步骤：
1.化合物的处理：配制400倍终浓度的化合物，如检测终浓度为5uM，配制成400倍浓度，即2mM。用自动微孔移液器将化合物梯度稀释成设置的浓度点个数。
2.转移化合物到384孔板反应板：用超声波纳升液体处理***将上述稀释好的化合物从Echo 384孔板中转移50nL到384孔反应板中，阴性对照和阳性对照均转移50nL的100％DMSO。
3.配制并转移4倍Tag1-SOS1溶液：用试剂盒(KRAS-G12C/SOS1BINGDING ASSAY KIT(Cisbio,Cat.No.63ADK000CB16PEG))中提供的Diluent配制4倍Tag1-SOS1溶液，转移5ul至384孔反应板中，对于阴性对照孔，转移5ul Diluent替代酶溶液，1000rpm离心1分钟。
4.配制4倍Tag2-KRAS G12C溶液：用试剂盒中提供的Diluent配制4倍Tag2-KRAS G12C溶液，转移5ul至384孔反应板中，1000rpm离心1分钟。
5.转移2倍检测溶液溶液：用试剂盒中提供的Detection Buffer配制2倍Anti-Tag1-Tb3+和Anti-Tag2-XL665溶液，转移10ul至384孔反应板中，1000rpm离心1分钟，室温下孵育60分钟。
6.读数：用酶标仪Envision读取数据荧光信号数值(Ex665/Em615)。
7.抑制率计算与IC50拟合
从读板仪器上复制数值，其中最大值是指阳性对照的读值，最小值是指阴性对照的读值。抑制率(％)＝(最大值-样本值)/(最大值-最小值)×100％。
将数据导入MS Excel并用XLFit excel add-in version5.4.0.8拟合IC50值；
表2 化合物对SOS1的抑制活性
化合物编号 IC 50(nM) 化合物编号 IC 50(nM) 化合物编号 IC 50(nM)
3 15 4 13 5 7.6
10 16 12 9.7 13 7.8
14 18 15 14 16 8.0
17 7.7 18 12 19 6.8
20 6.0 21 20 22 29
23 5.4 24 18 25 11
26 30 28 12 29 14
30 23
测试例4 化合物对小鼠和人的肝微粒体稳定性实验
实验步骤:
(1).从-80℃冰箱中取出肝微粒体(20mg蛋白/mL)，置于37℃水浴恒温振荡器上预温孵3min，融化待用。
(2).按照上面“实验温孵体系的构成”比例，制备温孵体系混合溶液(不含β-NADPH)。
(3).制备100μM的测试化合物工作溶液，备用。
(4).对照组(不含β-NADPH)：分别取25μL PB溶液到75μL(2)所述温孵体系混合液中，涡旋30s，混匀，反应总体积100μL，复样。放入到37℃水浴恒温振荡器中进行孵育，并开始计时，取样时间点为0min和60min。
(5).样品组：分别取25μLβ-NADPH溶液(4mM)加入75μL(2)所述反应体系中，涡旋30s，混匀，反应总体积100μL，复样。放入到37℃水浴恒温振荡器中进行孵育，并开始计时，取样时间点为0min,5min,15min,30min,60min。
(6).于各个时间点将样品管中取出，加入300μL冷的终止剂(含内标)，终止反应。
(7).涡旋并离心。
(8).取上清液150μL加入150μL水，涡旋混匀，LC-MS/MS进样分析。
数据分析：用下列一级动力学公式计算半衰期(t 1/2)和清除率(CL)
C t＝C 0*e -kt
C t＝(1/2)*C 0
t 1/2＝ln2/k＝0.693/k
CL＝V d*k
Vd＝1/肝微粒体中蛋白含量
CL int(liver)＝CL int(mic)×肝重体重比×每克肝脏中的肝微粒体蛋白浓度
公式中的参数见表3:
表3 小鼠，大鼠，人的肝和血的常见参数
实验结果见表4：
表4 化合物在不同种属中的肝微粒体稳定性
在人肝微粒体稳定性实验中，可见多个化合物的人微粒体稳定性和BI-3406相当，小鼠肝微粒稳定性较BI-3406优越，这更有利于开展药物研究。
测试例5 化合物的小鼠药代动力学性质
将实施例20的化合物(10mg/kg)给禁食过夜的ICR小鼠(雌性，n＝3)口服。分别在给药前以及给药后0.25小时、0.5小时、1小时、2小时、4小时和8小时采集血样，在4℃离心(4500rpm)10min，获得血清。将100μL MeOH/ACN(1:1，v/v)添加到10μL血清中将混合物沉淀，之后涡旋1min，再离心(11000rpm)5min获得上清液。将20μL上清液溶解于20μL ACN/H 2O(1:1，v/v)并用超高效液相 色谱仪对其进行分析。结果见表5：
表5 化合物20的小鼠药物代谢动力学特征
由表5可知，化合物20在小鼠体内较好的血浆暴露量。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种作为SOS1抑制剂的多环哒嗪酮类衍生物及其制备方法和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims (12)

  1. 一种多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，
    其特征在于，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(I)所示：
    其中：R 1选自氢或甲基；
    R 2选自C 1-C 3烷基、-OR 21、卤素、3-7元环烷基、5-7元环烯基、6-10元的稠环烷基、7-10元的桥环烷基、7-10元的螺环烷基、4-7元杂环基、5-7元杂环烯基、6-10元的稠杂环基、7-10元的桥杂环基、7-10元的螺杂环基，其中3-7元环烷基、5-7元环烯基、6-10元的稠环烷基、7-10元的桥环烷基、7-10元的螺环烷基、4-7元杂环基、5-7元杂环烯基、6-10元的稠杂环基、7-10元的桥杂环基、7-10元的螺杂环基任选地被1-3个R 22所取代；
    R 21选自H、C 1-C 3烷基、3-7元环烷基、4-7元杂环基，其中C 1-C 3烷基、3-7元环烷基、4-7元杂环基任选地被1-3个R 22所取代；
    R 22选自C 1-C 3烷基、羟基、卤素、氰基、-NR aR b、C 1-C 3烷氧基、-C(O)R a、-C(O)OR a、-OC(O)R a、-NR bC(O)R a、-NR bC(O)OR a、-C(O)NR aR b、苯基、5-6元杂芳基和＝O，其中的烷基、烷氧基、苯基、5-6元杂芳基任选地进一步被1-3个卤素、C 1-C 3烷基、羟基、氰基、氨基和C 1-C 3烷氧基所取代；
    R a和R b独立地选自H、取代或未取代的C 1-C 3的烷基、取代或未取代的3-6元的环烷基或取代或未取代的4-7元杂环基；此处“取代”是指任选地被1-3个选自C 1-C 3的烷基、羟基、卤素、氰基、氨基或烷氧基的取代基取代；
    Q选自N或-CR 3；
    R 3选自H、C 1-C 3烷基、卤素、氰基或-OR 21；
    AR选自6-10元的芳基或5-10元的杂芳基，其中的芳基或杂芳基任选地被1-4个R c所取代；
    R c选自H、卤素、C 1-C 4烷基、C 1-C 4卤代烷基、羟基-C 1-C 4烷基、羟基-C 1-C 4卤代烷基、 3-6元环烷基、4-7元杂环基、-OR 21、-NR aR b、NR aR b-C 1-C 4烷基、NR aR b-C 1-C 4卤代烷基、6-10元的芳基或5-10元的杂芳基，其中的6-10元的芳基或5-10元的杂芳基任选地被1-4个R d所取代；
    R d选自H、卤素、C 1-C 4烷基、C 1-C 4卤代烷基、羟基-C 1-C 4烷基、羟基-C 1-C 4卤代烷基、3-6元环烷基、4-7元杂环基、-OR 21、-NR aR b、NR aR b-C 1-C 4烷基、NR aR b-C 1-C 4卤代烷基；
    所述式(I)中的杂环基、杂芳基、杂环烯基、稠杂环基、桥杂环基、螺杂环基中的杂原子为1-7个并选自氧、氮、硫和S(O)m中的一种或多种，m为1或2。
  2. 如权利要求1所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，其特征在于，
    所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(Ⅱ)所示：
    其中，R 1、R 2、Q和R c具有与权利要求1相同的限定范围；n＝1-4；
    优选地，对于式(II)化合物，所述的苯基任选被1-3个R c所取代，当所述R c的个数为2-3个时，所述的R c可相同或不同；
    和/或，当所述R c为C 1-C 4卤代烷基时，其中的卤原子为氟；
    和/或，当所述R c为卤素时，其中的卤原子为氟；
    和/或，当所述R c为-NR aR b时，所述的R a和R b可相同或不同。
  3. 如权利要求1或2所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，其特征在于，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(III)所示：
    其中，R 1、R 2和R c具有与权利要求1相同的限定范围；n＝1-4；
    优选地，对于式(III)化合物，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22为2-3个时，R 22相同或不同；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基含有1-2个杂原子；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为氮和/或氧；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为两个时，两个杂原子相同或不同；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22选自C 1-C 3烷基、-NR aR b、-C(O)R a、-NR bC(O)R a、-NR bC(O)OR a、-C(O)NR aR b和＝O。
  4. 如权利要求1或2所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，其特征在于，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(IV)所示：
    其中，R 1、R 2、R 3和R c具有与权利要求1相同的限定范围；n＝1-4；
    优选地，对于式(Ⅳ)化合物，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22为2-3个时，R 22相同或不同；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基含有1-2个杂原子；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为氮和/或氧；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为两个时，两个杂原子相同或不同；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22选自C 1-C 3烷基、-NR aR b、-C(O)R a、-NR bC(O)R a、-NR bC(O)OR a、-C(O)NR aR b和＝O；
    和/或，所述R 3为-OR 21时，R 21选自未取代的C 1-C 3烷基或未取代的3-7元环烷基。
  5. 如权利要求1所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，其特征在于，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(V)所示：
    其中，R 1、R 2、Q和R d具有与权利要求1相同的限定范围；n＝1-4；
    优选地，对于式(V)化合物，所述R d为1个-NR aR b时，所述的R a和R b独立地选自H、取代或未取代的C 1-C 3的烷基；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22为2-3个时，R 22相同或不同；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基含有1-2个杂原子；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为氮和/或氧；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为两个时，两个杂原子相同或不同；
    和/或，所述R 2为任选地被1-3个R 22所取代的4-7元杂环基时，所述R 22选自C 1-C 3烷基、-NR aR b、-C(O)R a、-NR bC(O)R a、-NR bC(O)OR a、-C(O)NR aR b和＝O；
    和/或，所述R 2为-OR 21时，R 21为4-7元杂环基；
    和/或，所述R 21为4-7元杂环基时，所述4-7元杂环基为5-6元杂环基；
    和/或，所述R 21为4-7元杂环基时，所述的杂环基的杂原子为氮和/或氧；
    和/或，所述R 21为4-7元杂环基时，所述杂环基含有1-2个杂原子；
    和/或，所述R 21为4-7元杂环基时，所述杂环基的杂原子为两个时，两个杂原子相同或不同。
  6. 如权利要求1或5所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，其特征在于，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(VI)所示：
    其中，R 1、R 2和R d具有与权利要求1相同的限定范围；n＝1-4；
    优选地，当所述R 2为-OR 21，所述R 21为4-7元杂环基；
    和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述4-7元杂环基为5-7元杂环基；
    和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述的杂环基的杂原子为氮和/或氧；
    和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述杂环基含有两个杂原子；
    和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述两个杂原子相同或不同；
    和/或，所述R d选自卤素、C 1-C 4烷基、-NR aR b、-OR 21、-NR aR b-C 1-C 4烷基；
    和/或，所述R d为1个-NR aR b-C 1-C 4烷基时，所述的R a和R b独立地选自H、取代或未取代的C 1-C 3的烷基。
  7. 如权利要求1或5所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，其特征在于，所述多环哒嗪酮类衍生物的结构如式(VII)所示：
    其中，R 1、R 2、R 3和R d具有与权利要求1相同的限定范围；n＝1-4；
    优选地，当所述R 2为-OR 21，所述R 21为4-7元杂环基；
    和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述4-7元杂环基为5-7元杂环基；
    和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述的杂环基的杂原子为氮和/或氧；
    和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述杂环基含有两个杂原子；
    和/或，当所述R 21为4-7元杂环基时，所述两个杂原子相同或不同；
    和/或，所述R d选自卤素、C 1-C 4烷基、-NR aR b、-OR 21、NR aR b-C 1-C 4烷基；
    和/或，所述R d为1个NR aR b-C 1-C 4烷基时，所述的R a和R b独立地选自H、取代或未取代的C 1-C 3的烷基。
  8. 如权利要求1所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，其特征在于，所述多环哒嗪酮类衍生物选自如下结构的任意一种：
  9. 一种如权利要求1-8中任一项所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体的制备方法，其选自如下两种方法中的一种：
    方法一、
    第一步，通式(I-A)的化合物和通式(I-B)的化合物经亚胺加成反应得到通式(I-8)的化合物；
    第二步，通式(I-8)的化合物和水合肼经亚胺加成再扩环反应得到通式(I-9)的化合物；
    第三步，通式(I-9)的化合物和通式(I-10)的化合物经取代反应得到通式(I-11)的化合物；
    第四步，通式(I-11)的化合物和通式(I-25)的化合物在碱性条件下，在金属催化剂和配体的存在下经Buchwald/Suzuki反应得到通式(I)的化合物；
    其中，X、X 1为卤素，X优选为溴和氯，X 1优选为碘；W为H、 Q、AR、R 1和R 2具有与权利要求1相同的限定范围；当R 1为H时省略第三步。
    方法二、
    第一步，通式(I-17)的化合物经取代反应得到通式(I-18)的化合物；
    第二步，通式(I-18)的化合物在酸性条件下脱去保护基得到通式(I-19)的化合物；
    第三步，通式(I-19)的化合物和通式(I-26)的化合物在碱性条件下得到通式(I-20)的化合物；
    第四步，通式(I-20)的化合物经氧化反应得到通式(I-21)的化合物；
    第五步，通式(I-21)的化合物经Bouveault醛合成反应得到通式(I-22)的化合物；
    第六步，通式(I-22)的化合物和水合肼经加成环合反应得到通式(I-23)的化合物；
    第七步，通式(I-23)的化合物经取代反应得到通式(I-24)的化合物；
    第八步，通式(I-24)的化合物和通式(I-10)的化合物经取代反应得到通式(I-Bb)的化合物；
    第九步，通式(I-Bb)的化合物和通式(I-A)的化合物在碱性条件下，在金属催化剂和配体的存在下经Buchwald反应得到通式(I)的化合物；
    其中，X 2、X 3、X 4为卤素，X 2、X 3优选为溴，X 4优选为碘；Q选自N或CR 3；R 3选自H、C1-C3烷基、卤素、氰基或-OR 21；R 1选自氢或甲基；AR和R 2具有与权利要求1相同的限定范围；当R 1为H时省略第八步。
  10. 一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括如权利要求1-8中任一项所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体；优选地，所述药物组合物还包括可药用载体和/或赋形剂。
  11. 如权利要求1-8中任一项所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体，或如权利要求10所述的药物组合物在制备用于治疗癌症的药物或在制备SOS1抑制剂中的用途；
    优选地，所述癌症为胰腺癌、结直肠癌、肺癌、肝细胞癌、肾癌、胃癌或胆管癌。
  12. 一种用于预防和/或治疗癌症的方法，其包括向人类给予治疗有效量的如权利要求1-8中任一项所述的多环哒嗪酮类衍生物、其药学上可接受的盐、其互变异构体或其立体异构体或如权利要求10所述的药物组合物。
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