CN116349772A - 一种促进水产动物生长的酵母组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种促进水产动物生长的酵母组合物及其制备方法，本发明方案的酵母组合物可以对水产动物产生多种有益效果，包括提高免疫力、促进生长、增加营养、抑菌消毒和提高品质等方面。通过增强免疫力、促进生长、增加营养吸收等多种途径，酵母组合物能够很好地辅助水产养殖，提高水产动物的数量和质量，带来更好的经济效益，所述酵母组合物按重量份数包括以下组分：酵母提取物3‑5份、含虾青素的提取物1‑3份、嘉宝果果皮提取物1‑2份、苹果酸0.1‑0.3份、碳酸氢钠0.4‑0.8份、蛋白质混合体2‑3份和抑菌混合物0.2‑0.3份，属于生物饲料制造的技术领域。

Description

一种促进水产动物生长的酵母组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于生物饲料制造的技术领域，涉及一种促进水产动物生长的酵母组合物及其制备方法。
背景技术
随着水产集约化养殖的迅速发展，养殖密度逐渐增大，同时投喂配方饲料、水质恶化以及种质退化等原因，导致水产动物疾病频发，而药物的大量使用，又会造成水体污染及水产品药物残留问题，如何让养殖水产动物健康生长，减少疾病的发生，继而减少药物的使用，在保证产量的同时给广大消费者提供健康优质的水产品，是目前的养殖困境。
发明内容
本发明的目的在于提供一种促进水产动物生长的酵母组合物及其制备方法，本发明方案的酵母组合物可以对水产动物产生多种有益效果，包括提高免疫力、促进生长、增加营养、抑菌消毒和提高品质等方面。通过增强免疫力、促进生长、增加营养吸收等多种途径，酵母组合物能够很好地辅助水产养殖，提高水产动物的数量和质量，带来更好的经济效益。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
所述酵母组合物按重量份数包括以下组分：酵母提取物3-5份、含虾青素的提取物1-3份、嘉宝果果皮提取物1-2份、苹果酸0.1-0.3份、碳酸氢钠0.4-0.8份、蛋白质混合体2-3份和抑菌混合物0.2-0.3份。
作为本发明的一种优选技术方案，所述蛋白质混合体由按质量比2-4：1-3：8-10的缬氨酸、精氨酸及蛋氨酸混合而成；所述抑菌混合物由按质量比7-9：2-3的大蒜素、黄连粉混合而成。
本发明方案公开了所述含虾青素的提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)预处理：将新鲜的铜绿微囊藻放入混合液中浸泡，研磨后取浆状物进行喷雾干燥，得到干燥微囊藻粉；
(2)萃取：将干燥微囊藻粉置于超临界流体萃取器，调节温度和压力，超临界流体与干燥微囊藻粉接触并进行萃取，得到萃取液；
(3)分离：将萃取液通过减压器调压分离后，得到含虾青素的提取物。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤(1)中，所述混合液为柠檬酸和壳聚糖的混合溶液；所述混合液的质量浓度为0.1-2.0moL/L、pH为3.0-6.5，所述铜绿微囊藻与混合液的料液比为1g:10mL；所述浸泡条件为在45-60℃中浸泡25-30min；所述喷雾干燥条件为入口温度185℃。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤(2)中，所述超临界流体为二氧化碳，流速为20L/h；所述调节温度为40-70℃，所述调节压力为20-45Mpa，所述萃取时间为2-4h。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤(3)中，所述调压条件为压力0.1-1.0Mpa，所述分离温度20-30℃。
进一步地，本发明含虾青素的提取物的制备方法采用超临界流体萃取技术，萃取效率高、能耗低，萃取后虾青素纯度高，产品稳定性好，符合环保要求；采用柠檬酸和壳聚糖的混合液作为预处理液，能够有效增强铜绿微囊藻细胞壁的脆性，提高提取率；调节温度和压力等反应因素，能够精确控制虾青素的萃取率和质量；萃取液通过减压器调压分离，操作简便，不需要繁琐的分离步骤。
本发明方案公开了所述酵母提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)酵母源经过过滤除杂后，加入蒸馏水，搅拌混合后，得到悬浮液；
2)对悬浮液进行超声震荡，离心后，得到沉淀物；
3)将沉淀物与蒸馏水混合，调节pH和温度，加入酵母破壁酶溶液水解处理，离心后，得固体物；
4)向固体物加入蒸馏水后调节pH值，边搅拌边加入酵母抽提酶溶液，加热后进行水解反应，离心后，得酵母提取物。
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤1)中，所述酵母源与蒸馏水的质量体积比为10g：100mL；
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤2)中，超声处理时间为40min，超声功率为325W；
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤3)中，所述沉淀物与蒸馏水的质量体积比为6g：10mL，调节pH值为5.5-6，温度为55-60℃，酵母破壁酶溶液的浓度为0.5％，水解时间为90min；
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤4)中，所述固体物与蒸馏水的质量体积比为6g：100mL，调节pH值为10-10.5，所述酵母抽提酶溶液的浓度为0.6％，所述加热温度为55-60℃，所述水解反应时间为60-70min；
作为本发明的一种优选技术方案，在步骤4)中，所述酵母破壁酶为β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纤维素酶、木聚糖酶和糖化酶按质量比2-5：1.5-3：0.5-1：1-2：0.1-0.2混合而成。所述酵母抽提酶由按质量比1：1：1：1的木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶及核酸酶混合而成。
进一步地，在本发明方案酵母提取物的制备方法中，采用超声震荡和酵母破壁酶水解处理，可以有效提高酵母细胞壁的脆性和水解效率，从而使得酵母提取物的产量和质量都得到提高；在水解反应中添加酵母抽提酶，可以迅速分离出酵母细胞壁外的蛋白质和核酸等成分，从而进一步提高酵母提取物的纯度和活性；优选酵母破壁酶和酵母抽提酶的配比结合，可以达到最佳的蛋白质和核酸分离效果，同时最大限度地保持酵母提取物的活性和稳定性，酵母提取物制备流程简单，操作易于控制，可适应工业化生产需要，过程环保、节能，符合现代化工业发展趋势，具有广泛应用前景。
作为本发明的一种优选技术方案，所述嘉宝果果皮提取物的制备方法为将嘉宝果果皮经过干燥、粉碎、浸提、过滤和旋蒸制得，浸提试剂为60-70％浓度的乙醇。
进一步地，本发明方案的嘉宝果果皮提取物制备方法具有以下优点：工艺简单，操作容易，不需要复杂的设备和技术，可适用于工业化生产；采用60-70％浓度的乙醇作为浸提试剂，可以有效提取嘉宝果果皮中的有效成分，同时减少对人体的毒性和副作用；采用干燥、粉碎、浸提、过滤和旋蒸的工艺步骤，可以保证嘉宝果果皮提取物的高纯度、高活性和长期稳定性。
嘉宝果果皮提取物富含多种生物活性物质，如多酚类物质、芳香酸类物质和黄酮类物质等，具有抗氧化、抗炎的作用；具有天然、安全、无毒、无副作用等特点，是一种理想的天然药物和功能性食品。
本发明方案公开一种促进水产动物生长的酵母组合物的制备方法，包括以下步骤：
S1将酵母提取物、苹果酸、碳酸氢钠和蛋白质混合体20-25℃下混合均匀，得混合料；
S2向混合料加入含虾青素的提取物、嘉宝果果皮提取物和抑菌混合物，在30-35℃搅拌混合，即得酵母组合物。
本发明的有益效果：
1、提高免疫力：酵母提取物、含虾青素的提取物和嘉宝果果皮提取物成分含有丰富的天然抗氧化物质，可以增强水产动物免疫力，减少病原菌感染的发生。
2、促进生长：蛋白质混合体中含有多种必需氨基酸和营养成分，能够加速生长发育，提高水产动物的肌肉含量和产量。
3、增加营养：苹果酸可以促进食物消化，增加养分的吸收，同时碳酸氢钠可以中和消化道中的酸性环境，提高饲料的利用率。
4、抑菌消毒：抑菌混合物中含有多种具有抑菌消炎功效的成分，可以预防水产动物细菌、病毒感染和炎症的发生。
5、提高品质：含虾青素的提取物可以提高水产动物的生长和繁殖性能，同时增加鱼体的色泽和口感。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明为实现预定发明目的所采取的技术手段及功效，以下结合实施例，对依据本发明的具体实施方式、结构、特征及其功效，详细说明如下。
本发明实施例中所述的标准菌株ATCC43700购自美国模式培养集存库，舒伯特气单胞菌菌株HYL2由中国水产科学研究院珠江水产研究所水产病害与免疫研究室馈赠。
实施例1
一种促进水产动物生长的酵母组合物，所述酵母组合物按重量份数包括以下组分：酵母提取物3份、含虾青素的提取物1份、嘉宝果果皮提取物1-2份、苹果酸0.1份、碳酸氢钠0.4份、蛋白质混合体2份和抑菌混合物0.2份；所述蛋白质混合体由按质量比2：1：8的缬氨酸、精氨酸及蛋氨酸混合而成；所述抑菌混合物由按质量比7：2的大蒜素、黄连粉混合而成。
所述含虾青素的提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)预处理：将新鲜的铜绿微囊藻放入质量浓度为0.1moL/L、pH为3.0的柠檬酸和壳聚糖的混合溶液中，在45℃中浸泡25min，研磨后取浆状物在入口温度185℃进行喷雾干燥，得到干燥微囊藻粉；其中，所述铜绿微囊藻与混合液的料液比为1g:10mL；
(2)萃取：将干燥微囊藻粉置于超临界流体萃取器，调节温度至40℃和调节压力至20Mpa，超临界流体与干燥微囊藻粉接触并进行萃取2h，得到萃取液；其中，所述超临界流体为二氧化碳，流速为20L/h；
(3)分离：将萃取液通过减压器调压至0.1Mpa，在20℃下分离后，得到含虾青素的提取物。
所述酵母提取物的制备方法包括以下步骤：
1)酵母源经过过滤除杂后，加入蒸馏水，搅拌混合后，得到悬浮液；其中，所述酵母源与蒸馏水的质量体积比为10g：100mL；
2)对悬浮液进行超声震荡40min，超声功率为325W，离心后，得到沉淀物；
3)将沉淀物与蒸馏水混合，调节pH值至5.5和调节温度至55℃，加入浓度为0.5％的酵母破壁酶溶液水解处理90min，离心后，得固体物；其中，所述沉淀物与蒸馏水的质量体积比为6g：10mL；
4)向固体物加入蒸馏水后调节pH值至10，边搅拌边加入浓度为0.6％的酵母抽提酶溶液，加热至55℃后进行水解反应60min，离心后，得酵母提取物；其中，所述固体物与蒸馏水的质量体积比为6g：100mL；所述酵母破壁酶为β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纤维素酶、木聚糖酶和糖化酶按质量比3：2：0.7：1.5：0.15混合而成。所述酵母抽提酶由按质量比1：1：1：1的木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶及核酸酶混合而成。
所述嘉宝果果皮提取物的制备方法为将嘉宝果果皮经过干燥、粉碎、浸提、过滤和旋蒸制得，浸提试剂为60％浓度的乙醇。
一种促进水产动物生长的酵母组合物的制备方法，包括以下步骤：
S1将酵母提取物、苹果酸、碳酸氢钠和蛋白质混合体20℃下混合均匀，得混合料；
S2向混合料加入含虾青素的提取物、嘉宝果果皮提取物和抑菌混合物，在30℃搅拌混合，即得酵母组合物。
实施例2
一种促进水产动物生长的酵母组合物，所述酵母组合物按重量份数包括以下组分：酵母提取物4份、含虾青素的提取物2份、嘉宝果果皮提取物1.5份、苹果酸0.2份、碳酸氢钠0.6份、蛋白质混合体2.5份和抑菌混合物0.25份；所述蛋白质混合体由按质量比3：2.5：9的缬氨酸、精氨酸及蛋氨酸混合而成；所述抑菌混合物由按质量比8：2.5的大蒜素、黄连粉混合而成。
所述含虾青素的提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)预处理：将新鲜的铜绿微囊藻放入质量浓度为1moL/L、pH为4.8的柠檬酸和壳聚糖的混合溶液中，在52℃中浸泡28min，研磨后取浆状物在入口温度185℃进行喷雾干燥，得到干燥微囊藻粉；其中，所述铜绿微囊藻与混合液的料液比为1g:10mL；
(2)萃取：将干燥微囊藻粉置于超临界流体萃取器，调节温度至55℃和调节压力至30Mpa，超临界流体与干燥微囊藻粉接触并进行萃取3h，得到萃取液；其中，所述超临界流体为二氧化碳，流速为20L/h；
(3)分离：将萃取液通过减压器调压至0.5Mpa，在25℃下分离后，得到含虾青素的提取物。
所述酵母提取物的制备方法包括以下步骤：
1)酵母源经过过滤除杂后，加入蒸馏水，搅拌混合后，得到悬浮液；其中，所述酵母源与蒸馏水的质量体积比为10g：100mL；
2)对悬浮液进行超声震荡40min，超声功率为325W，离心后，得到沉淀物；
3)将沉淀物与蒸馏水混合，调节pH值至5.8和调节温度至58℃，加入浓度为0.5％的酵母破壁酶溶液水解处理90min，离心后，得固体物；其中，所述沉淀物与蒸馏水的质量体积比为6g：10mL；
4)向固体物加入蒸馏水后调节pH值至10.2，边搅拌边加入浓度为0.6％的酵母抽提酶溶液，加热至58℃后进行水解反应65min，离心后，得酵母提取物；其中，所述固体物与蒸馏水的质量体积比为6g：100mL；所述酵母破壁酶为β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纤维素酶、木聚糖酶和糖化酶按质量比3：2：0.7：1.5：0.15混合而成。所述酵母抽提酶由按质量比1：1：1：1的木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶及核酸酶混合而成。
所述嘉宝果果皮提取物的制备方法为将嘉宝果果皮经过干燥、粉碎、浸提、过滤和旋蒸制得，浸提试剂为65％浓度的乙醇。
一种促进水产动物生长的酵母组合物的制备方法，包括以下步骤：
S1将酵母提取物、苹果酸、碳酸氢钠和蛋白质混合体22℃下混合均匀，得混合料；
S2向混合料加入含虾青素的提取物、嘉宝果果皮提取物和抑菌混合物，在32℃搅拌混合，即得酵母组合物。
实施例3
一种促进水产动物生长的酵母组合物，所述酵母组合物按重量份数包括以下组分：酵母提取物5份、含虾青素的提取物3份、嘉宝果果皮提取物2份、苹果酸0.3份、碳酸氢钠0.8份、蛋白质混合体3份和抑菌混合物0.3份；所述蛋白质混合体由按质量比4：3：10的缬氨酸、精氨酸及蛋氨酸混合而成；所述抑菌混合物由按质量比9：3的大蒜素、黄连粉混合而成。
所述含虾青素的提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)预处理：将新鲜的铜绿微囊藻放入质量浓度为2.0moL/L、pH为6.5的柠檬酸和壳聚糖的混合溶液中，在60℃中浸泡30min，研磨后取浆状物在入口温度185℃进行喷雾干燥，得到干燥微囊藻粉；其中，所述铜绿微囊藻与混合液的料液比为1g:10mL；
(2)萃取：将干燥微囊藻粉置于超临界流体萃取器，调节温度至70℃和调节压力至45Mpa，超临界流体与干燥微囊藻粉接触并进行萃取4h，得到萃取液；其中，所述超临界流体为二氧化碳，流速为20L/h；
(3)分离：将萃取液通过减压器调压至1.0Mpa，在30℃下分离后，得到含虾青素的提取物。
所述酵母提取物的制备方法包括以下步骤：
1)酵母源经过过滤除杂后，加入蒸馏水，搅拌混合后，得到悬浮液；其中，所述酵母源与蒸馏水的质量体积比为10g：100mL；
2)对悬浮液进行超声震荡40min，超声功率为325W，离心后，得到沉淀物；
3)将沉淀物与蒸馏水混合，调节pH值至6和调节温度至60℃，加入浓度为0.5％的酵母破壁酶溶液水解处理90min，离心后，得固体物；其中，所述沉淀物与蒸馏水的质量体积比为6g：10mL；
4)向固体物加入蒸馏水后调节pH值至10.5，边搅拌边加入浓度为0.6％的酵母抽提酶溶液，加热至60℃后进行水解反应70min，离心后，得酵母提取物；其中，所述固体物与蒸馏水的质量体积比为6g：100mL；所述酵母破壁酶为β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纤维素酶、木聚糖酶和糖化酶按质量比3：2：0.7：1.5：0.15混合而成。所述酵母抽提酶由按质量比1：1：1：1的木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶及核酸酶混合而成。
所述嘉宝果果皮提取物的制备方法为将嘉宝果果皮经过干燥、粉碎、浸提、过滤和旋蒸制得，浸提试剂为70％浓度的乙醇。
一种促进水产动物生长的酵母组合物的制备方法，包括以下步骤：
S1将酵母提取物、苹果酸、碳酸氢钠和蛋白质混合体25℃下混合均匀，得混合料；
S2向混合料加入含虾青素的提取物、嘉宝果果皮提取物和抑菌混合物，在35℃搅拌混合，即得酵母组合物。
对比例1-4
与实施例3相比，不同之处在于，对比例1-4的酵母提取物、含虾青素的提取物、嘉宝果果皮提取物和苹果酸的重量份如表1所示，其余组分、制备步骤和参数均一致。
表1
Figure BDA0004187990090000101
对比例5-9
与实施例3相比，不同之处在于，对比例5-7的缬氨酸、精氨酸及蛋氨酸的质量比如表2所示，其余组分、制备步骤和参数均一致。
表2
缬氨酸 精氨酸 蛋氨酸
对比例5 0 3 10
对比例6 4 0 10
对比例7 4 3 0
对比例8 4 3 5
对比例9 1 1 1
对比例10-13
与实施例3相比，不同之处在于，对比例10-13的大蒜素、黄连粉的质量比如表3所示，其余组分、制备步骤和参数均一致。
表3
大蒜素 黄连粉
对比例10 0 1
对比例11 3 0
对比例12 2 1
对比例13 5 1
抑菌测试：
1、培养基的制备
BHI培养基购自美国BD公司；5％绵羊血琼脂平板、细菌生化微量鉴定管等购自广州环凯微生物有限公司。
2、菌悬液的制备
试验菌培养：将菌株活化，用接种针在固体培养基上划线，再28℃培养24h后，挑取单个菌落，接种到营养肉汤培养基上震荡培养24h。采用平板计数法将菌液稀释到合适浓度，菌液浓度为1×103CFU/mL。
3、药物敏感性试验
药敏试验采用琼脂扩散法，将培养至对数生长期的菌悬液稀释至浓度约为1×103CFU/mL，使用无菌棉签蘸取菌液均匀涂抹在培养基上，涂抹均匀后，在平板上均匀打孔，每个平板上打4个孔，做好标记。每孔加入100μl(1g/mL)组合物(实施例1-3和对比例10-13制备的酵母组合物)，然后将之放入28℃培养箱中培养24h；平板取出后，观察孔周围是否有抑菌圈，若有，则用游标卡尺测量抑菌圈直径。每种酵母组合物做三次重复，同时以无菌水做空白对照。
结果判断标准按《中药药理学》介绍的标准：抑菌圈≥20mm，属于极敏；抑菌圈15-19mm属于高敏；抑菌圈10-14mm属于中敏；抑菌圈小于10mm，属于低敏；没有抑菌圈，属于不敏(无抑菌效果)。
4、二次筛选试验
用营养肉汤培养基以二倍稀释法对提取物进行梯度稀释，在每个试管中加入细菌悬液，使细菌浓度达到105CFU/mL，在不同的试管中加入实施例1-3和对比例10-13制备的酵母组合物，不加组合物作为空白对照，不加细菌作为阴性对照，每个重复3次。置28℃摇床中震荡(180r/min)培养24h，然后取出与对照管对比观察，抑菌圈直径及抑菌等级如表4所示。
表4抑菌圈直径及抑菌等级
抑菌圈直径(mm) 抑菌等级
实施例1 24.12±0.34 ++++
实施例2 25.22±1.02 ++++
实施例3 24.57±0.58 ++++
对比例10 5.42±0.71 +
对比例11 10.64±0.63 ++
对比例12 18.52±0.63 +++
对比例13 20.38±1.08 ++++
空白对照 - -
阴性对照 - -
由表4结果可知，说明本发明提供的酵母组合物具有抑菌作用，而对比例10-13由于改变了抑菌剂的组成，其抑菌效果显著降低。
对鲤鱼生长、免疫及抗病力测试
实验设计：
实验设对照组和实施例1-3组和对比例1-9组，每组分别设置三个平行。每个平行鲤鱼苗30尾(初始体重6.98±0.14g)。其中，对照组以市售饲料为基础饲料，在基础饲料中按3.5％各自添加上述实施例1-3和对比例1-9制备的酵母组合物，混合均匀投喂鲤鱼苗。养殖实验在室内循环水养殖***开展，共进行30天，每天投饵两次，pH7.6±0.4，水温20-22℃，溶氧充足。养殖实验结束后，对鲤鱼进行计数并称重，计算其特定生长率。每组随机抽取3尾鱼。用100mL/L的丁香油麻醉，采用尾静脉采血法抽取鲤鱼血液，37℃静置1h，5000r/min离心10min，收集血清于-80℃保存；检测血清中的超氧化物歧化酶(SOD)活力。以副溶血弧菌为病原菌，对鲤鱼进行腹腔注射，进行2周的观察，及时捞出死亡的鲤鱼苗，计算存活率；具体结果如表5所示。
表5对鲤鱼生长、免疫及抗病力的影响
初始体重g 终末体重g SOD活力mU/L 存活率％
对照组 6.99±0.14 13.25±0.09 0.42±0.04a 67.8±5.1a
实施例1组 6.95±0.11 16.38±0.47 0.68±0.03b 85.6±1.8b
实施例2组 6.97±0.09 16.55±0.36 0.71±0.05b 87.6±2.1b
实施例3组 6.96±0.12 16.31±0.51 0.72±0.07b 88.2±1.3b
对比例1组 6.97±0.23 14.11±0.09 0.46±0.08a 72.1±3.3a
对比例2组 6.96±0.18 14.35±0.11 0.52±0.07a 73.8±4.5a
对比例3组 6.96±0.11 14.38±0.07 0.48±0.07a 72.8±3.2a
对比例4组 6.97±0.13 15.87±0.06 0.61±0.06b 82.8±2.9b
对比例5组 6.97±0.18 14.51±0.04 0.55±0.05a 81.5±2.7b
对比例6组 6.96±0.15 14.48±0.06 0.53±0.07a 81.8±2.5b
对比例7组 6.96±0.21 14.25±0.06 0.54±0.08a 78.8±3.8a
对比例8组 6.96±0.23 14.55±0.05 0.61±0.04b 82.8±2.9b
对比例9组 6.97±0.12 14.42±0.08 0.58±0.07a 79.8±2.5a
注：不同的字母表示差异显著(P＜0.05)。
从表5测试结果可知，实施例1-3组与对比例1-9组相比，实施例1-3组对鲤鱼生长、免疫及抗病力均有显著的影响。结合表1和表2分析可知，酵母提取物、含虾青素的提取物、嘉宝果果皮提取物和蛋白质混合体显著促进水产动物的存活率和SOD活力，并有利于它们的生长；缺乏苹果酸成分，水产动物消化能力下降，难以充分吸收，导致营养不均衡，影响生长发育。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限定本发明，任何本领域技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的技术内容做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简介修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (10)

1.一种促进水产动物生长的酵母组合物，其特征在于，所述酵母组合物按重量份数包括以下组分：酵母提取物3-5份、含虾青素的提取物1-3份、嘉宝果果皮提取物1-2份、苹果酸0.1-0.3份、碳酸氢钠0.4-0.8份、蛋白质混合体2-3份和抑菌混合物0.2-0.3份。
2.根据权利要求1所述的一种促进水产动物生长的酵母组合物，其特征在于：所述蛋白质混合体由按质量比2-4：1-3：8-10的缬氨酸、精氨酸及蛋氨酸混合而成；所述抑菌混合物由按质量比7-9：2-3的大蒜素、黄连粉混合而成。
3.根据权利要求1所述的一种促进水产动物生长的酵母组合物，其特征在于，所述含虾青素的提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)预处理：将新鲜的铜绿微囊藻放入混合液中浸泡，研磨后取浆状物进行喷雾干燥，得到干燥微囊藻粉；
(2)萃取：将干燥微囊藻粉置于超临界流体萃取器，调节温度和压力，超临界流体与干燥微囊藻粉接触并进行萃取，得到萃取液；
(3)分离：将萃取液通过减压器调压分离后，得到含虾青素的提取物。
4.根据权利要求3所述的一种促进水产动物生长的酵母组合物，其特征在于：在步骤(1)中，所述混合液为柠檬酸和壳聚糖的混合溶液；所述混合液的质量浓度为0.1-2.0moL/L、pH为3.0-6.5，所述铜绿微囊藻与混合液的料液比为1g:10mL；所述浸泡条件为在45-60℃中浸泡25-30min；所述喷雾干燥条件为入口温度185℃。
5.根据权利要求3所述的一种促进水产动物生长的酵母组合物，其特征在于：在步骤(2)中，所述超临界流体为二氧化碳，流速为20L/h；所述调节温度为40-70℃，所述调节压力为20-45Mpa，所述萃取时间为2-4h。
6.根据权利要求3所述的一种促进水产动物生长的酵母组合物，其特征在于：在步骤(3)中，所述调压条件为压力0.1-1.0Mpa，所述分离温度20-30℃。
7.根据权利要求1所述的一种促进水产动物生长的酵母组合物，其特征在于，所述酵母提取物的制备方法包括以下步骤：
1)酵母源经过过滤除杂后，加入蒸馏水，搅拌混合后，得到悬浮液；
2)对悬浮液进行超声震荡，离心后，得到沉淀物；
3)将沉淀物与蒸馏水混合，调节pH和温度，加入酵母破壁酶溶液水解处理，离心后，得固体物；
4)向固体物加入蒸馏水后调节pH值，边搅拌边加入酵母抽提酶溶液，加热后进行水解反应，离心后，得酵母提取物。
8.根据权利要求7所述的一种促进水产动物生长的酵母组合物，其特征在于：
在步骤1)中，所述酵母源与蒸馏水的质量体积比为10g：100mL；
在步骤2)中，超声处理时间为40min，超声功率为325W；
在步骤3)中，所述沉淀物与蒸馏水的质量体积比为6g：10mL，调节pH值为5.5-6，温度为55-60℃，酵母破壁酶溶液的浓度为0.5％，水解时间为90min；
在步骤4)中，所述固体物与蒸馏水的质量体积比为6g：100mL，调节pH值为10-10.5，所述酵母抽提酶溶液的浓度为0.6％，所述加热温度为55-60℃，所述水解反应时间为60-70min；
在步骤4)中，所述酵母破壁酶为β-葡聚糖酶、甘露聚糖酶、纤维素酶、木聚糖酶和糖化酶按质量比2-5：1.5-3：0.5-1：1-2：0.1-0.2混合而成。所述酵母抽提酶由按质量比1：1：1：1的木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶及核酸酶混合而成。
9.根据权利要求1所述的一种促进水产动物生长的酵母组合物，其特征在于：所述嘉宝果果皮提取物的制备方法为将嘉宝果果皮经过干燥、粉碎、浸提、过滤和旋蒸制得，浸提试剂为60-70％浓度的乙醇。
10.一种如权利要求1～9任一项所述的促进水产动物生长的酵母组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
S1将酵母提取物、苹果酸、碳酸氢钠和蛋白质混合体20-25℃下混合均匀，得混合料；
S2向混合料加入含虾青素的提取物、嘉宝果果皮提取物和抑菌混合物，在30-35℃搅拌混合，即得酵母组合物。
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