CN111642622A - 一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备及应用 - Google Patents
一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备及应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111642622A CN111642622A CN201911398570.XA CN201911398570A CN111642622A CN 111642622 A CN111642622 A CN 111642622A CN 201911398570 A CN201911398570 A CN 201911398570A CN 111642622 A CN111642622 A CN 111642622A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- myrtle
- fermentation
- extract
- fermented
- culture medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 240000005125 Myrtus communis Species 0.000 title claims abstract description 130
- 235000013418 Myrtus communis Nutrition 0.000 title claims abstract description 127
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 80
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 80
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 57
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 claims abstract description 46
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 41
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000013329 compounding Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims abstract description 9
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 40
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 35
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims description 34
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims description 34
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims description 34
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims description 30
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims description 30
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 29
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 28
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 22
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 22
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 15
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 14
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 12
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 11
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 11
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 11
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 10
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims description 10
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims description 7
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 6
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 6
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 6
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 6
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 6
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 claims description 5
- 241000235646 Cyberlindnera jadinii Species 0.000 claims description 5
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 5
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 claims description 5
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 claims description 5
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 claims description 5
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 5
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 5
- -1 alcohol polyphenols Chemical class 0.000 claims description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 5
- KLOIYEQEVSIOOO-UHFFFAOYSA-N carbocromen Chemical compound CC1=C(CCN(CC)CC)C(=O)OC2=CC(OCC(=O)OCC)=CC=C21 KLOIYEQEVSIOOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 5
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 claims description 5
- 229940012969 lactobacillus fermentum Drugs 0.000 claims description 5
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 5
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 claims description 5
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 claims description 5
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 5
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 5
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- OHZCFWMJMWFNFP-ZVGUSBNCSA-L (2r,3r)-2,3-dihydroxybutanedioate;iron(2+) Chemical compound [Fe+2].[O-]C(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O OHZCFWMJMWFNFP-ZVGUSBNCSA-L 0.000 description 2
- 241000409657 Rhodomyrtus Species 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 229940057006 ferrous tartrate Drugs 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 150000003000 phloroglucinols Chemical class 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 description 1
- 240000006053 Garcinia mangostana Species 0.000 description 1
- 235000017048 Garcinia mangostana Nutrition 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000219926 Myrtaceae Species 0.000 description 1
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000023011 digestive tract development Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 235000021050 feed intake Nutrition 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000031891 intestinal absorption Effects 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/12—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/61—Myrtaceae (Myrtle family), e.g. teatree or eucalyptus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/169—Plantarum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/10—General cosmetic use
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Botany (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Physiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Birds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备及应用。以桃金娘叶子为原材料，一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备包括耐多酚菌种筛选，桃金娘叶原料处理，桃金娘发酵菌种复配，微生物发酵，桃金娘发酵提取物制备。本发明通过菌种筛选和复配技术获得耐抗菌物质多酚的发酵复合菌。将生物发酵技术运用到桃金娘活性成分多酚的提取领域，能够显著提高提取率。该制备方法条件温和、易操控，不仅能最大程度地提取出桃金娘叶中的活性成分，还能有效避免活性成分被破坏。所得到的桃金娘发酵提取物对动物的生产性能、饲料的利用及预防腹泻具有积极的效果。
Description
技术领域
本发明具体涉及桃金娘发酵复合菌和发酵提取物的制备及应用，属于生物发酵技术领域。
背景技术
桃金娘(Rhodomyrtus tomentosa)，又称桃娘、棯子、山棯、岗稔、稔子树、豆稔等，为桃金娘科（Myrtaceae）桃金娘属（Rhodomyrtus）的常绿灌木。桃金娘是一种常见的中草药，全株可供药用。近年来，国内外研究者发现桃金娘叶有显著的抗菌、抗炎、抗病毒、抗风湿、抗疟、降糖的活性。其中，间苯三酚衍生物为桃金娘中的代表性成分，作为抗菌及抗氧化剂在饲料及化妆品领域具有较大的应用市场。当前，单纯的水提、醇提取方式对桃金娘中的提取率较低，大部分活性成分被留在残渣中丢弃，浪费严重。加入酶前期处理，成本又太高，且单一的酶往往降解效果并不理想。
微生物发酵利用微生物充分破坏植物细胞组织结构，将植物组织分解成小分子物质，减少提取传质阻力，充分释放活性成分，具有提取稳定、纯度高、能耗低、有机溶剂使用量少等特点。利用微生物发酵能更好地提取桃金娘中多酚物质，此外通过发酵，桃金娘叶的风味、质地都大幅提高，同时去除不良成分，增加了有益成分。
酵母菌、芽孢杆菌及乳酸菌是发酵常用的益生菌，通过对原料中糖分等营养物质的利用大量繁殖，提高了发酵底物的蛋白质水平，使其转化为更利于肠道吸收的小分子物质。间苯三酚衍生物作为多酚中的成分，具有抗菌活性。为了能发酵桃金娘叶提高多酚提取率，需要具有耐抗菌物质多酚的生物菌种。
发明内容
本发明的目的在于以桃金娘为原料，通过菌种筛选和复配技术制备一种桃金娘发酵复合菌，并利用其发酵，提供一种易操作、生产周期短，可大规模化生产获得桃金娘发酵提取物的制备方法，实现桃金娘植物的高值化利用。
为了实现上述目的，本发明将采用以下技术方案：
一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备方法，其特征在于以下所述制备步骤：
1）耐多酚菌种筛选：将酵母菌（啤酒酵母、产朊假丝酵母、酿酒酵母）、乳酸菌（植物乳杆菌、发酵乳酸菌、嗜酸乳杆菌）和芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌）分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；分别以5%的比例接种于含80mg/L桃金娘醇提多酚的MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下发酵48h；观察培养液浑浊程度，挑选出了相对浑浊程度高的菌种（枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌）进行以下实验；
2）桃金娘叶原料处理：将新鲜叶子自然风干，粉碎过80目筛，得桃金娘叶粉；加20 g/L桃金娘叶粉于改良后MRS液体培养基中，搅拌均匀，超声破碎20min，121℃蒸汽灭菌20min，冷却；
3）桃金娘叶发酵菌种复配：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；将不同配比的菌种以5％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养48h；选出多酚提取率高的菌种配比（植物乳杆菌：芽孢杆菌=1:1）进行后续桃金娘叶发酵实验；
4）微生物发酵：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在 MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液，以体积比1:1按5％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养48h；
5）桃金娘发酵提取物制备：将发酵后物质过滤分离，得到发酵后桃金娘叶粉和含有丰富酵素、益生菌、氨基酸、各种有机酸、多糖等营养成分的发酵液；发酵后的桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物A；发酵液喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物B；
步骤1）中桃金娘醇提多酚为：桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，减压真空浓缩至原体积的十分之一，40℃条件下真空干燥，制得桃金娘醇提多酚；
步骤2）中改良后的MRS培养基配方为10.0g/L蛋白胨，10.0g/L酵母膏，2.0g/L柠檬酸氢二铵，0.6 g/L硫酸镁，2.0 g/L磷酸氢二钾，0.3 g/L硫酸锰，1.0mL吐温-80，pH6.2-6.6；
步骤3）中不同配比的菌种为单一植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌以及复合的植物乳杆菌：枯草芽孢杆菌=1:1；
步骤5）中发酵后的桃金娘叶或发酵液可直接应用于饲料生产中；；
进一步的，步骤5）中发酵液高温灭菌后，可直接应用于化妆品生产中；
进一步的，步骤5）中桃金娘发酵提取物A和B可单独或者混合应用于饲料及化妆品组合物中。
本发明具有以下有益效果为：
1.本发明通过菌种筛选和复配技术，获得一种耐多酚的复合菌种，有助于在多酚环境中，充分利用桃金娘植物中的糖分，破坏其组织结构，提高桃金娘多酚的提取率，显著增加桃金娘发酵提取物的抗菌及抗氧化活性。同时通过发酵，桃金娘叶的风味、质地都大幅提高，产生了丰富的酵素、益生菌、氨基酸、各种有机酸、多糖等营养成分，所获得的桃金娘发酵提取物在饲料及化妆品领域具有很好的经济和实用价值，有较大的应用前景。
2.本发明工艺条件简单，生产周期短，成本低，易操控，且所用的原料为纯天然组分，安全无污染，廉价易得，所得到的桃金娘发酵提取物对动物的生产性能、饲料的利用及预防腹泻具有积极的效果。
附图说明
图1为不同菌种复配下桃金娘叶多酚提取率图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的技术方案做进一步描述，但不用于限制本发明。凡根据上述发明的内容对本发明做出的非本质上的修改，替换等，仍属于本发明的保护范围。
实施例1
1）耐多酚菌种筛选：将酵母菌（啤酒酵母、产朊假丝酵母、酿酒酵母）、乳酸菌（植物乳杆菌、发酵乳酸菌、嗜酸乳杆菌）和芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌）分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；分别以5%的比例接种于含80mg/L桃金娘醇提多酚的MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下发酵48h；观察培养液浑浊程度，挑选出了相对浑浊程度高的菌种（枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌）进行以下实验；
所述桃金娘醇提多酚为：桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，减压真空浓缩至原体积的十分之一，40℃条件下真空干燥，制得桃金娘醇提多酚；
2）桃金娘叶原料处理：将新鲜叶子自然风干，粉碎过80目筛，得桃金娘叶粉；加20 g/L桃金娘叶粉于改良后MRS液体培养基中，搅拌均匀，超声破碎20min，121℃蒸汽灭菌20min，冷却；
3）桃金娘叶发酵菌种复配：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；将不同配比的菌种以5％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养48h；选出多酚提取率高的菌种配比（植物乳杆菌：芽孢杆菌=1:1）进行后续桃金娘叶发酵实验；
所述不同配比的菌种为单一植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌以及复合的植物乳杆菌：枯草芽孢杆菌=1:1；
所述改良后的MRS培养基配方为10.0g/L蛋白胨，10.0g/L酵母膏，2.0g/L柠檬酸氢二铵，0.6 g/L硫酸镁，2.0 g/L磷酸氢二钾，0.3 g/L硫酸锰，1.0mL吐温-80，pH6.2-6.6；
4）微生物发酵：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在 MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液，以体积比1:1按5％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养48h；
5）桃金娘发酵提取物制备：将发酵后物质过滤分离，得到发酵后桃金娘叶粉和含有丰富酵素、益生菌、氨基酸、各种有机酸、多糖等营养成分的发酵液；发酵后的桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物A；发酵液喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物B；
实施例2
1）耐多酚菌种筛选：将酵母菌（啤酒酵母、产朊假丝酵母、酿酒酵母）、乳酸菌（植物乳杆菌、发酵乳酸菌、嗜酸乳杆菌）和芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌）分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；分别以6%的比例接种于含80mg/L桃金娘醇提多酚的MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下发酵48h；观察培养液浑浊程度，挑选出了相对浑浊程度高的菌种（枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌）进行以下实验；
所述桃金娘醇提多酚为：桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，减压真空浓缩至原体积的十分之一，40℃条件下真空干燥，制得桃金娘醇提多酚；
2）桃金娘叶原料处理：将新鲜叶子自然风干，粉碎过80目筛，得桃金娘叶粉；加25 g/L桃金娘叶粉于改良后MRS液体培养基中，搅拌均匀，超声破碎20min，121℃蒸汽灭菌20min，冷却；
3）桃金娘叶发酵菌种复配：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；将不同配比的菌种以6％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养48h；选出多酚提取率高的菌种配比（植物乳杆菌：芽孢杆菌=1:1）进行后续桃金娘叶发酵实验；
不同配比的菌种为单一植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌以及复合的植物乳杆菌：枯草芽孢杆菌=1:1；
改良后的MRS培养基配方为10.0g/L蛋白胨，10.0g/L酵母膏，2.0g/L柠檬酸氢二铵，0.6g/L硫酸镁，2.0 g/L磷酸氢二钾，0.3 g/L硫酸锰，1.0mL吐温-80，pH6.2-6.6；
4）微生物发酵：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在 MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液，以体积比1:1按6％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养48h；
5）桃金娘发酵提取物制备：将发酵后物质过滤分离，得到发酵后桃金娘叶粉和含有丰富酵素、益生菌、氨基酸、各种有机酸、多糖等营养成分的发酵液；发酵后的桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物A；发酵液喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物B。
实施例3
1）耐多酚菌种筛选：将酵母菌（啤酒酵母、产朊假丝酵母、酿酒酵母）、乳酸菌（植物乳杆菌、发酵乳酸菌、嗜酸乳杆菌）和芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌）分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；分别以5%的比例接种于含80mg/L桃金娘醇提多酚的MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下发酵36h；观察培养液浑浊程度，挑选出了相对浑浊程度高的菌种（枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌）进行以下实验；
其中桃金娘醇提多酚为：桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，减压真空浓缩至原体积的十分之一，40℃条件下真空干燥，制得桃金娘醇提多酚；
2）桃金娘叶原料处理：将新鲜叶子自然风干，粉碎过80目筛，得桃金娘叶粉；加20 g/L桃金娘叶粉于改良后MRS液体培养基中，搅拌均匀，超声破碎20min，121℃蒸汽灭菌20min，冷却；
3）桃金娘叶发酵菌种复配：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；将不同配比的菌种以5％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养36h；选出多酚提取率高的菌种配比（植物乳杆菌：芽孢杆菌=1:1）进行后续桃金娘叶发酵实验；
不同配比的菌种为单一植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌以及复合的植物乳杆菌：枯草芽孢杆菌=1:1；
改良后的MRS培养基配方为10.0g/L蛋白胨，10.0g/L酵母膏，2.0g/L柠檬酸氢二铵，0.6g/L硫酸镁，2.0 g/L磷酸氢二钾，0.3 g/L硫酸锰，1.0mL吐温-80，pH6.2-6.6；
4）微生物发酵：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在 MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液，以体积比1:1按5％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养32h；
5）桃金娘发酵提取物制备：将发酵后物质过滤分离，得到发酵后桃金娘叶粉和含有丰富酵素、益生菌、氨基酸、各种有机酸、多糖等营养成分的发酵液；发酵后的桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物A；发酵液喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物B。
实施例4
1）将新鲜叶子自然风干，粉碎过80目筛，得桃金娘叶粉；加20 g/L桃金娘叶粉于改良后MRS液体培养基中，用搅拌均匀，超声破碎20min，121℃蒸汽灭菌20min，冷却；
2）在37℃，160r/min转速条件下放置48h；
3）将物质过滤分离，得到桃金娘叶粉残渣和滤液；
4）将步骤3）中得到的桃金娘叶粉残渣按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，喷雾干燥，制得桃金娘叶提取物A；滤液喷雾干燥，制得桃金娘提取物B。
实施例5
在本发明中，桃金娘提取物中的总多酚含量测定采用基于如下原理的方法：过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应生成稳定的紫褐色络合物，溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比，采用酒石酸亚铁比色法对实施例1-4所获得的提桃金娘发酵提取物中的总多酚含量进行检测，计算各实施例中桃金娘总多酚的提取率。按以下公式计算：提取率=提取液中总多酚含量/提取原料重量*100%。
各实施例中总多酚提取率的计算结果参见下表1：
表1中桃金娘发酵总多酚的有效提取率的比较
由表1的结果可发现，本发明的实施例1-3通过生物发酵后，能够显著的提高了桃金娘总多酚的提取率，相比实施例4的单纯醇提的提取量能提高近一倍。相比现有的技术而言，本发明在多酚提取量上获得了显著的进步效果。
仔猪处于生命早期，尤其是此阶段的肠胃及消化道发育不完善，免疫力低下，容易受生理、营养及外界环境的不良影响而生病，甚至还会导致死亡，给生产造成重大损失。本发明中一种桃金娘发酵提取物的制备方法，其特征在于所得的提取物可作为饲料添加剂在生猪饲料中进行应用，在生猪饲料中的添加量为100g/t。
试验例
选取30日龄、健康、体重无显著差异的杜长大三元杂交仔猪36头，随机分为3组，试验组和对照组各12头，对照组饲喂基础日粮，试验组1-2在基础日粮的基础上添加实施例1-3方法中制得的1:1桃金娘发酵提取物A和B混合物。试验期30天。三组采用相同的饲养管理技术及免疫方法。试验起始和截止日期日测量仔猪空腹体重，记录采食量，计算日增重及料重比（消耗饲料总重/增重总量），观察记录全过程仔猪腹泻情况，计算腹泻率。试验结果如表2所示：
表2 试验结果
由表2可以看出，添加桃金娘发酵提取物的饲料能有效增强仔猪的生产性能，提高饲料的利用率，并且可以预防细菌性疫病的发生，对预防仔猪腹泻具有良好的效果。
Claims (7)
1.一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备方法，其特征在于以下所述制备步骤：
1）耐多酚菌种筛选：将酵母菌（啤酒酵母、产朊假丝酵母、酿酒酵母）、乳酸菌（植物乳杆菌、发酵乳酸菌、嗜酸乳杆菌）和芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌）分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；分别以5%的比例接种于含80mg/L桃金娘醇提多酚的MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下发酵48h；观察培养液浑浊程度，挑选出了相对浑浊程度高的菌种（枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌）进行以下实验；
2）桃金娘叶原料处理：将新鲜叶子自然风干，粉碎过80目筛，得桃金娘叶粉；加20 g/L桃金娘叶粉于改良后MRS液体培养基中，搅拌均匀，超声破碎20min，121℃蒸汽灭菌20min，冷却；
3）桃金娘叶发酵菌种复配：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液；将不同配比的菌种以5％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养48h；选出多酚提取率高的菌种配比（植物乳杆菌：芽孢杆菌=1:1）进行后续桃金娘叶发酵实验；
4）微生物发酵：将枯草芽孢杆菌及植物乳杆菌分别在 MRS液体培养基中培养，得到菌落数为1.0×108CFU/ml的种子液，以体积比1:1按5％的比例加到改良后MRS液体培养基中，在37℃，160r/min转速条件下进行发酵培养48h；
5）桃金娘发酵提取物制备：将发酵后物质过滤分离，得到发酵后桃金娘叶粉和含有丰富酵素、益生菌、氨基酸、各种有机酸、多糖等营养成分的发酵液；发酵后的桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物A；发酵液喷雾干燥，制得桃金娘发酵提取物B。
2.如权利要求1所述的桃金娘发酵提取物的制备方法，其特征在于：步骤1）中桃金娘醇提多酚为：桃金娘叶粉按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；滤渣再按液固比10:1添加80%乙醇超声30min，过滤；合并两次提取液，减压真空浓缩至原体积的十分之一，40℃条件下真空干燥，制得桃金娘醇提多酚。
3.如权利要求1所述的桃金娘发酵提取物的制备方法，其特征在于：步骤2）中改良后的MRS培养基配方为10.0g/L蛋白胨，10.0g/L酵母膏，2.0g/L柠檬酸氢二铵，0.6 g/L硫酸镁，2.0 g/L磷酸氢二钾，0.3 g/L硫酸锰，1.0mL吐温-80，pH6.2-6.6。
4.如权利要求1所述的桃金娘发酵提取物的制备方法，其特征在于：步骤3）中不同配比的菌种为单一植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌以及复合的植物乳杆菌：枯草芽孢杆菌=1：1。
5.如权利要求1所述的桃金娘发酵提取物的制备方法，其特征在于：步骤5）中发酵后的桃金娘叶或发酵液可直接应用于饲料生产中。
6.如权利要求1所述的桃金娘发酵提取物，其特征在于：步骤5）中发酵液高温灭菌，可直接应用于化妆品生产中。
7.如权利要求1所述的桃金娘发酵提取物，其特征在于：步骤5）中桃金娘发酵提取物A和B可单独或者混合应用于饲料及化妆品组合物中。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911398570.XA CN111642622A (zh) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | 一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911398570.XA CN111642622A (zh) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | 一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备及应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111642622A true CN111642622A (zh) | 2020-09-11 |
Family
ID=72340739
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911398570.XA Pending CN111642622A (zh) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | 一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备及应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111642622A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112535237A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-03-23 | 广州立达尔生物科技股份有限公司 | 一种山竹发酵提取物、制备方法和应用 |
| CN112891283A (zh) * | 2021-02-01 | 2021-06-04 | 浙江万里学院 | 一种铁皮石斛发酵提取液、护肤品及其制备方法 |
| CN113151067A (zh) * | 2021-03-31 | 2021-07-23 | 绽妍生物科技有限公司 | 一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺 |
| CN114539115A (zh) * | 2022-02-25 | 2022-05-27 | 云南立达尔生物科技有限公司 | 新型万寿菊鲜花发酵工艺 |
| CN115737706A (zh) * | 2022-11-23 | 2023-03-07 | 海南皇隆制药股份有限公司 | 一种苯扎氯铵溶液及其制备方法 |
| CN118078718A (zh) * | 2024-04-29 | 2024-05-28 | 诺德溯源(广州)生物科技有限公司 | 一种含愈创木提取物的晒后修复、抗氧化组合物及其应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108753463A (zh) * | 2018-03-28 | 2018-11-06 | 广西秀美壮乡能源环保有限公司 | 一种富硒桃金娘精油的提取方法 |
| CN109329916A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-02-15 | 华南协同创新研究院 | 一种流加式快速生产桃金娘酵素的方法及桃金娘酵素 |
| CN110024910A (zh) * | 2019-05-17 | 2019-07-19 | 河南农业大学 | 用纤维素酶与复合益生菌发酵提高艾草发酵产物品质的方法 |
-
2019
- 2019-12-30 CN CN201911398570.XA patent/CN111642622A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108753463A (zh) * | 2018-03-28 | 2018-11-06 | 广西秀美壮乡能源环保有限公司 | 一种富硒桃金娘精油的提取方法 |
| CN109329916A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-02-15 | 华南协同创新研究院 | 一种流加式快速生产桃金娘酵素的方法及桃金娘酵素 |
| CN110024910A (zh) * | 2019-05-17 | 2019-07-19 | 河南农业大学 | 用纤维素酶与复合益生菌发酵提高艾草发酵产物品质的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 杨建平等: "枸杞叶发酵物生物活性成分及营养成分的变化研究", 《中国饲料》 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112535237A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-03-23 | 广州立达尔生物科技股份有限公司 | 一种山竹发酵提取物、制备方法和应用 |
| CN112891283A (zh) * | 2021-02-01 | 2021-06-04 | 浙江万里学院 | 一种铁皮石斛发酵提取液、护肤品及其制备方法 |
| CN113151067A (zh) * | 2021-03-31 | 2021-07-23 | 绽妍生物科技有限公司 | 一种乳酸菌发酵提取物的提取分离工艺 |
| CN114539115A (zh) * | 2022-02-25 | 2022-05-27 | 云南立达尔生物科技有限公司 | 新型万寿菊鲜花发酵工艺 |
| CN115737706A (zh) * | 2022-11-23 | 2023-03-07 | 海南皇隆制药股份有限公司 | 一种苯扎氯铵溶液及其制备方法 |
| CN115737706B (zh) * | 2022-11-23 | 2023-08-29 | 海南皇隆制药股份有限公司 | 一种苯扎氯铵溶液及其制备方法 |
| CN118078718A (zh) * | 2024-04-29 | 2024-05-28 | 诺德溯源(广州)生物科技有限公司 | 一种含愈创木提取物的晒后修复、抗氧化组合物及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111642622A (zh) | 一种发酵复合菌和桃金娘发酵提取物的制备及应用 | |
| CN111363698B (zh) | 一种降低发酵饲料霉变及霉菌毒素危害的菌剂与应用 | |
| CN103598420B (zh) | 一种香蕉茎叶青贮的微生物复合菌剂及其制备方法 | |
| CN103060228B (zh) | 一株植物乳杆菌及青贮用微生态制剂 | |
| CN106260504B (zh) | 一种利用啤酒酵母泥生产微生物发酵湿饲料的方法 | |
| CN102934736A (zh) | 一种红薯皮或红薯粉渣发酵饲料的制备方法 | |
| CN107853478B (zh) | 一种降低牛甲烷排放的含酶中草药发酵饲料添加剂 | |
| CN102907572A (zh) | 一种香蕉青贮饲料微生物添加剂及其制备方法 | |
| CN102273548B (zh) | 一种饲用微生态制剂及其制备方法 | |
| CN102488087A (zh) | 一种茶籽饼粕的生物脱毒方法 | |
| CN103184174A (zh) | 培养基中含腐植酸钠饲料用枯草芽孢杆菌生物制剂的生产 | |
| CN103749977A (zh) | 一种高效饲料添加剂 | |
| CN110916177A (zh) | 一种通过酶酵耦合技术制备的海带酵素方法 | |
| CN114107403B (zh) | 一种微生物群落发酵石榴皮联产鞣花酸和生物饲料的方法 | |
| CN117070427B (zh) | 一株布氏乳杆菌及其青贮饲料发酵剂 | |
| CN114903154A (zh) | 一种基于酵母-乳酸菌分步发酵获得降血糖型发酵海藻产品的方法 | |
| CN110959748A (zh) | 一种以尾菜为原料制备的液体发酵饲料及其制备方法 | |
| CN112961806B (zh) | 高产乳酸的凝结芽孢杆菌、生物发酵饲料及其制备方法和应用 | |
| CN104082528A (zh) | 一种饲料添加剂及其制备方法 | |
| CN109287853B (zh) | 一种玉米秸秆-豆粕混合发酵料、其制备方法及应用 | |
| CN114766596A (zh) | 薏苡仁糠和五倍子渣降解方法及其应用、生物发酵饲料 | |
| CN111363692B (zh) | 一种复合菌剂及其发酵产物的应用 | |
| CN103734477A (zh) | 一种高效饲料添加剂的制备方法 | |
| CN110157648B (zh) | 一种利用养猪行业废弃物资源的微生物肥料及其制备方法 | |
| CN113648254A (zh) | 可用于化妆品的羽扇豆针叶樱桃发酵物及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20200911 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |