CN115948285A - 唾液乳杆菌bmc-06及禽畜养殖用的生物消毒剂和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种唾液乳杆菌BMC‑06及禽畜养殖用的生物消毒剂和应用，涉及环控益生菌改善畜禽养殖环境技术领域，该菌株已于2021年8月23日保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为Lactobacillus salivarius BMC‑06，保藏编号为CCTCC NO：M20211070，保藏地点为中国武汉，该菌株制成生物消毒剂，用于禽舍空气、禽舍器具等的消毒。
Description
技术领域
本发明属于环控益生菌改善畜禽养殖环境技术领域，特别是涉及一株唾液乳杆菌BMC-06及畜禽养殖用的生物消毒剂和应用。
背景技术
近些年畜禽养殖业发展迅速。然而畜禽养殖业带来的环境污染也成为严重的社会问题，其中持续关注的问题之一就是舍内空气颗粒物污染对动物的影响，该污染可通过器械、饲料、水槽、空气等渠道进行感染，进而造成畜禽养殖业经济上的损伤。目前在畜禽养殖过程中用于控制畜禽养殖舍环境颗粒物污染的方法，主要是使用抗生素和化学消毒剂。但是，随着抗生素和化学消毒剂的大量使用，其潜在的细菌耐药性、化学毒性、不稳定性及器械腐蚀性等问题日益突出。因此，研发天然无毒功能性强的生物消毒剂用于改善畜禽环境中环境颗粒物的污染，对于畜禽的健康生长及养殖业的可持续发展具有重要意义。
发明内容
发明目的：为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供一株唾液乳杆菌BMC-06及畜禽养殖用的生物消毒剂。
技术方案：为实现上述目的，本发明提供一株唾液乳杆菌BMC-06，该菌株已于2021年8月23日保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为Lactobacillus salivarius BMC-06，保藏编号为CCTCC NO：M20211070，保藏地点为中国武汉。
优选地，该菌株的16s rDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
所述唾液乳杆菌BMC-06可在消毒中的应用。
本发明还提供一种禽畜养殖用的生物消毒剂，该生物消毒剂包括唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16。
优选地，所述唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的活菌数比为(30～35)：(30～35)：(30～35)。
优选地，该生物消毒剂的剂型为液体制剂和/或固体制剂。
本发明还提供了上述生物消毒剂的制备方法，当生物消毒剂的剂型为液体制剂时，该制备方法为将唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的发酵液进行浓缩，浓缩得到的液体制剂的有效菌落浓度≥1010CFU/mL，其中，所述唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的活菌数比为(30～35)：(30～35)：(30～35)；
当生物消毒剂的剂型为固体制剂时，该制备方法为将唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的发酵液进行冷冻干燥，冷冻干燥得到的固体制剂的有效菌群浓度≥1010CFU/mL，其中，所述唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的活菌数比为(30～35)：(30～35)：(30～35)，。
本发明还提供了上述生物消毒剂的使用方法，当生物消毒剂的剂型为液体制剂时，所述生物消毒剂的稀释方法为：将生物消毒剂与水混合后稀释，所述生物消毒剂与水的体积比为1：(400～500)；当生物消毒剂的剂型为固体制剂时，所述生物消毒剂的稀释方法为：将生物消毒剂与水混合后稀释，所述生物消毒剂的质量与水的体积比为1g：(400～500)mL。
所述生物消毒剂的应用应至少包括在畜禽养殖过程中空气颗粒物中的条件性致病菌污染的应用以及在抑制畜禽舍的器械表面、物体表面、水槽、料槽、废弃物或排水沟中环境颗粒物细菌生长的应用。
优选地，当所述生物消毒剂用于减少畜禽养殖过程中空气颗粒物中的条件性致病菌污染时，将生物消毒剂喷洒于物体表面、装置表面或空气中，所述喷洒的用量为20～50mL/m3；喷洒频率先为1次/天，连续喷洒3d后，再为2次/周；
当所述生物消毒剂用于抑制畜禽舍的器械表面、物体表面、水槽、料槽、废弃物或排水沟中环境颗粒物细菌生长时，将生物消毒剂的稀释液添加至禽畜舍水槽、料槽、废弃物、排水沟中或涂抹于物体表面、地板排水装置的表面中，所述涂抹的用量为3～5mL/m2；所述涂抹的频率为1次/24h。
本发明的一株唾液乳杆菌BMC-06及畜禽养殖用的生物消毒剂和应用，至少具有以下技术效果：
(1)本发明提供的唾液乳杆菌BMC-06的发酵液中含有多种天然抑菌活性物质，是一种天然、无污染、安全的消毒剂，能够有效改善畜禽养殖环境，减少畜禽舍病原菌的传播；同时还能够解决因使用抗生素或化学消毒剂导致的细菌耐药性、环境中的药物残留和食品安全等方面的问题；
(2)该唾液乳杆菌BMC-06具有优越的消毒效果，以此为基础制成的生物消毒剂含有抗菌肽、细菌素、类细菌拮抗物质和其他具有抑菌作用的发酵液，能够有效降低畜禽舍内呼吸道和消化道疾病的发生，控制舍内环境，提高畜禽养殖的收益；
(3)本发明提供的唾液乳杆菌BMC-06能够有效起到降低空气中颗粒物PM10以及PM2.5浓度、降低器械表面细菌总浓度、减少空气中致病菌种类、降低致病菌的传播的作用；同时，本发明提供的含有唾液乳杆菌BMC-06的生物消毒剂也能起到上述技术效果，在唾液乳杆菌BMC-06的消毒效果基础上，通过多种菌类的特定配比，能够强化唾液乳杆菌BMC-06的消毒效果。
附图说明
图1为唾液乳杆菌BMC-06革兰氏染色光学显微镜照片图；
图2为唾液乳杆菌BMC-06的16s rDNA琼脂糖电泳图；
图3为单独使用唾液乳杆菌BMC-06消毒前后PM2.5与PM10的浓度变化；
图4为单独使用唾液乳杆菌BMC-06消毒禽畜舍前后，器械表面细菌总浓度的变化；
图5为单独使用唾液乳杆菌BMC-06消毒禽畜舍后，空气中细菌菌群多样性的变化；
图6为单独使用唾液乳杆菌BMC-06消毒禽畜舍后，器械表面细菌菌群多样性的变化；
图7为生物消毒剂对畜禽舍喷雾前后，空气中颗粒物PM10以及PM2.5的浓度变化；
图8为生物消毒剂对畜禽舍喷雾前后，空气中细菌总浓度的变化；
图9为生物消毒剂对畜禽舍喷雾前后，空气中细菌菌群多样性的变化；
图10为生物消毒剂对畜禽舍喷雾前后，器械表面细菌菌群多样性的变化。
具体实施方式
以下结合图1至图10对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
一、唾液乳杆菌BMC-06的分离、纯化、鉴定与保藏
1、唾液乳杆菌BMC-06菌株的分离纯化
取健康小鼠肠道内容物，加入1mL生理盐水，10倍梯度稀释至10-6，每个稀释浓度取150μL涂布于含1％ CaCO3的MRS培养基上，厌氧罐37℃培养48h。挑取平板上单菌落，在MRS固体培养基上纯化培养。对纯化后菌落进行革兰氏染色鉴定。本发明菌株在含CaCO3的MRS培养基上呈白色菌落、凸起、有明显的溶钙圈。经观察，该菌株革兰氏阳性，圆端直杆状。菌体革兰氏染色特性如图1所示。
2、唾液乳杆菌菌株16srDNA测序鉴定
对获得的菌株进行基因组DNA的提取。加入50μL的浓度为20mg/mL溶菌酶37℃水浴锅处理2h后，利用生工细菌基因组试剂盒进行DNA的提取。利用16s通用引物(27F和1492R，27F的引物序列如SEQ ID NO.1所示：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’；
1492R的引物序列如SEQ ID NO.2所示:5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’)对菌株cDNA基因序列进行PCR扩增，对PCR扩增产物进行电泳，电泳结果如图2所示。
经测序，菌株的16s rDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。经过16srDNA基因比对，与Genebank中的Lactobacillus salivarius菌株比对与唾液乳杆菌2019NCHU414的同源性达99％，为一株唾液乳杆菌，命名为唾液乳杆菌BMC-06。
SEQ ID NO.3：ctggctccttgcggttaccccaccggctttgggtgttacaaactctcatggtgtgacggg cggtgtgtacaaggcccgggaacgtattcaccgcgacatgctgattcgcgattactagcgattccgacttcatgtaggcgagttgcagcctacaatccgaactgagaacggctttaagagattagctaaacctcgcggtctcgcgactcgttgtaccgtccattgtagcacgtgtgtagcccaggtcataaggggcatgatgacttgacgtcgtccccaccttcctccggtttgtcaccggcagtctcgccagagtgcccaacttaatgctggcaactgacaacaagggttgcgctcgttgcgggacttaacccaacatctcacgacacgagctgacgacagccatgcaccacctgtcactttgtccccgaagggaaaacctaatctcttaggtggtcaaaggatgtcaagacctggtaaggttcttcgcgttgcttcgaattaaaccacatgctccaccgcttgtgcgggcccccgtcaattcctttgagtttcaaccttgcggtcgtactccccaggcggaatgcttattgcgttagctgcggcactgaagggcggaaaccctccaacacctagcattcatcgtttacggcgtggactaccagggtatctaatcctgtttgctacccacgctttcgaacctcagcgtcagttacagaccagagagccgctttcgccactggtgttcttccatatatctacgcatttcaccgctacacatggagttccactctcctcttctgcactcaagtcttccagtttccaatgcactactccggttaagccgaaggctttcacatcagacttaaaagaccgcctgcgttccctttacgcccaataaatccggacaacgcttgccacctacgtattaccgcggctgctggcacgtagttagccgtgacttgctggttagataccgtcatcgaatgaacagttactctcactcgtgttcttctctaacaacagagttttacgatccgaagaccttcttcactcacgcggcgttgctccatcagacttgcgtccattgtggaagattccctactgctgcctcccgtaggagtttgggccgtgtctcagtcccaatgtggccgatcaacctctcagttcggctacgtatcatcaccttggtaggccgttaccccaccaactagttaatacgccgcgggtccatctaaaagcgatagcagaaccatctttcatctaaggatcatgcgatccttagagatatacggtattagcacctgtttccaagtgttatccccttcttttaggcaggttacccacgtgttactcacccgtccgccactcaacttcttacgatgaatgcaagcattcggtgtaagaaagtttcgttcgactg
3、唾液乳杆菌菌株16srDNA的保藏
唾液乳杆菌BMC-06已于2021年8月23日保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为Lactobacillus salivarius BMC-06，保藏编号为CCTCC NO：M20211070，保藏地点为中国武汉。
二、唾液乳杆菌BMC-06在消毒中的应用
实施例一，唾液乳杆菌BMC-06对空气中颗粒物PM10以及PM2.5浓度的影响。
取1mL有效菌群浓度为1010CFU/mL的唾液乳杆菌BMC-06发酵液，与400mL水混合制成菌剂。将菌剂用超声波雾化消毒器进行喷雾消毒，按每立方米鸡舍20毫升计算喷雾所需消毒剂的量。每天喷洒一次，连续喷洒三天后，改为一周两次，两周后利用固定式颗粒采样器分别于消毒前及消毒后畜禽舍空气中PM2.5和PM10的数据(单位为μg/m3)进行采集。如图3所示，在封闭养殖模式下，畜禽舍内PM2.5(186.88μg/m3)及PM10(200.52μg/m3)颗粒物浓度较高，而使用微生物消毒剂后，明显可以降低舍内PM2.5(60.56μg/m3)及PM10(75.42μg/m3)颗粒物的浓度。
实施例二，唾液乳杆菌BMC-06对畜禽舍器械表面细菌总浓度的影响。
本发明使用国际标准的Andersen-6级空气微生物收集器进行采样，采样器是模拟人呼吸道的解剖结构和空气动力学特征，利用惯性撞击原理设计，分为6级，每级400个孔，从上至下孔的直径逐级缩小，空气流量一定，流速逐级增大，从而将空气中带菌粒子按粒径不同分别收集在采样器各级培养皿上。分别采集菌剂消毒前后畜禽舍内空气样品，气流速率28.3L·min-1，采样时间2min，采样介质为5％绵羊血大豆琼脂培养基，培养条件分别为37℃，24h。按以下公式计算各气载菌落数：C＝(N×1000)/(t×F)；公式中：C为细菌气溶胶浓度，cfu·m-3；N位各级菌落数；t为采样时间，min；F为采样时气体流量，L·min-1。
结果分析，检测结果如图4所示，由图4可知，菌剂处理后畜禽舍内气载需氧菌的分布比例在Anderson-6级收集器上呈现下降的趋势，与消毒前相比，菌剂能够显著降低鸡舍内的气载需氧菌浓度(P<0.05)，消毒前后细菌气溶胶分浓度分别为185.85cfu/m3和70.42cfu/m3。
实施例三，唾液乳杆菌BMC-06对禽畜舍空气中细菌菌群多样性的影响。
利用Biosampler采样器对空气中的总细菌气溶胶进行采集，采样瓶内放置50mL采样液，气流速率12.8L/min，采样时间2h。超速离心机70000rpm离心2h。采用试剂盒EasyPureViral DNA/RNA Kit(中国北京全式金)提取总细菌的RNA。利用逆转录试剂盒EasyScriptOne-Step gRNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix(中国北京全式金)反转录合成cDNA，-20℃保存。将DNA样本进行高通量测序，分析细菌菌群多样性的变化。
分析结果如图5所示，由微生物聚类热图属水平可知，菌剂处理前畜禽舍空气中的微生物菌群丰富，含有葡萄球菌、假单胞菌等多种条件性致病菌，而菌剂处理后，空气中的致病菌种类明显减少，乳酸杆菌等多种有益菌群丰度增高，改善了畜禽舍内空气中细菌菌群的多样性。
实施例四，唾液乳杆菌BMC-06对禽畜舍器械表面细菌菌群多样性的影响。
利用无菌棉签在畜禽舍内器械笼具表面进行擦拭，将棉签放置于含5mL采样液的西林瓶中，备用。超速离心机70000rpm离心2h。采用试剂盒EasyPure Viral DNA/RNA Kit(中国北京全式金)提取总细菌的RNA。利用逆转录试剂盒EasyScript One-Step gRNARemoval and cDNA Synthesis SuperMix(中国北京全式金)反转录合成cDNA，-20℃保存。将DNA样本进行高通量测序，分析细菌菌群多样性的变化。
分析结果如图6所示，从微生物聚类热图属水平可知，菌剂处理前畜禽舍器械表面中的微生物菌群丰富，含有金黄色葡萄球菌等多种条件性致病菌，而菌剂处理后，器械表面的致病菌种类明显减少，乳酸杆菌等多种有益菌群丰度增高，降低了条件性致病菌在畜禽舍的传播。
三、禽畜养殖用生物消毒剂
实施例一，该生物消毒剂包括唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16，制成活菌落数比为35:35:30。
实施例二，该生物消毒剂包括唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16，制成活菌落数比为30:30:35。
实施例三，该生物消毒剂包括唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16，制成活菌落数比为32:33:32。
上述实施例一至实施例三的生物消毒剂均可制成液体制剂或固体制剂。
四、禽畜养殖用生物消毒剂的制备方法。
实施例一，液体制剂型生物消毒剂的制备方法。
将唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的发酵液进行浓缩，浓缩得到的液体制剂的有效菌落浓度≥1010CFU/mL，其中，所述唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的活菌数比为35：35：30。
实施例二，固体制剂型生物消毒剂的制备方法。
将唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的发酵液进行冷冻干燥，冷冻干燥得到的固体制剂的有效菌群浓度≥1010CFU/mL，其中，所述唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的活菌数比为35：35：30。
五、禽畜养殖用生物消毒剂的使用方法。
实施例一
取液体制剂型生物消毒剂，将该生物消毒剂与水混合稀释，其中生物消毒剂与水的体积比为1:400。
实施例二
取液体制剂型生物消毒剂，将该生物消毒剂与水混合稀释，其中生物消毒剂与水的体积比为1:450。
实施例三
取液体制剂型生物消毒剂，将该生物消毒剂与水混合稀释，其中生物消毒剂与水的体积比为1:500。
实施例四
取固体制剂型生物消毒剂，将该生物消毒剂与水混合稀释，其中生物消毒剂的质量与水的体积比为1g:400mL。
实施例五
取固体制剂型生物消毒剂，将该生物消毒剂与水混合稀释，其中生物消毒剂的质量与水的体积比为1g:450mL。
实施例六
取固体制剂型生物消毒剂，将该生物消毒剂与水混合稀释，其中生物消毒剂的质量与水的体积比为1g:500mL。
六、生物消毒剂的使用方法。
实施例一，生物消毒剂对空气中颗粒物PM10以及PM2.5浓度的影响
取1mL液体制剂型生物消毒剂，加入到400mL水中进行稀释，然后将稀释后的消毒剂用超声波雾化消毒器进行喷雾消毒，按每立方米鸡舍20毫升计算喷雾所需消毒剂的量。每天喷洒一次，连续喷洒三天后，改为一周两次，两周后利用固定式颗粒采样器分别于消毒前及消毒后畜禽舍空气中PM2.5和PM10的数据(单位为μg/m3)进行采集。检测结果如图7所示，在封闭养殖模式下，畜禽舍内PM2.5(171.88μg/m3)及PM10(202.52μg/m3)颗粒物浓度较高，而使用生物消毒剂后，明显可以降低舍内PM2.5(66.39μg/m3)及PM10(70.24μg/m3)颗粒物的浓度。
实施例二，生物消毒剂对禽舍空气中细菌总浓度的影响
取1mL液体制剂型生物消毒剂，加入到400mL水中进行稀释，然后将稀释后的消毒剂用超声波雾化消毒器进行喷雾消毒，按每立方米鸡舍20毫升计算喷雾所需消毒剂的量。每天喷洒一次，连续喷洒三天后，改为一周两次，随后采用国际标准的Andersen-6级空气微生物收集器进行采样。采样器是模拟人呼吸道的解剖结构和空气动力学特征，利用惯性撞击原理设计，分为6级，每级400个孔，从上至下孔的直径逐级缩小，空气流量一定，流速逐级增大，从而将空气中带菌粒子按粒径不同分别收集在采样器各级培养皿上。分别采集菌剂消毒前后畜禽舍内空气样品，气流速率28.3L·min-1，采样时间2min，采样介质为5％绵羊血大豆琼脂培养基，培养条件分别为37℃，24h。按以下公式计算各气载菌落数：C＝(N×1000)/(t×F)；公式中：C为细菌气溶胶浓度，单位为cfu·m-3；N位各级菌落数；t为采样时间，单位为min；F为采样时气体流量，单位为L·min-1。
检测结果如图8所示。由图8可知，经由生物消毒剂处理后畜禽舍内气载需氧菌的分布比例在Anderson-6级收集器上呈现下降的趋势，与消毒前相比，消毒剂可显著降低鸡舍内的气载需氧菌浓度(P<0.05)，消毒前后细菌气溶胶分浓度分别为3.27×103cfu/m3和9.33×102cfu/m3。
实施例三，生物消毒剂对畜禽舍器械表面细菌群落生物多样性的影响
取1mL液体制剂型生物消毒剂，加入到400mL水中进行稀释，然后将稀释后的消毒剂用超声波雾化消毒器进行喷雾消毒，按每立方米鸡舍20毫升计算喷雾所需消毒剂的量。每天喷洒一次，连续喷洒三天后，改为一周两次。
利用无菌棉签在畜禽舍内器械笼具表面进行擦拭，将棉签放置于含5mL采样液的西林瓶中，备用。超速离心机70000rpm离心2h。采用试剂盒EasyPure Viral DNA/RNA Kit(中国北京全式金)提取总细菌的RNA。利用逆转录试剂盒EasyScript One-StepgRNARemoval and cDNA Synthesis SuperMix(中国北京全式金)反转录合成cDNA，-20℃保存。将DNA样本进行高通量测序，分析细菌菌群多样性的变化。
检测结果如图10所示。由微生物聚类热图属水平可知，生物消毒剂处理前畜禽舍器械表面中的微生物菌群丰富，含有弧菌、支气管杆菌等多种条件性致病菌，而乳酸菌消毒剂处理后，空气中的致病菌种类明显减少，乳杆菌、乳球菌等多种有益菌群丰度增高，降低了条件性致病菌在畜禽舍的传播。
将上述实施例中的液体制剂型生物消毒剂替换为固体制剂型生物消毒剂，其使用效果与液体制剂型生物消毒剂没有区别。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种唾液乳杆菌BMC-06，其特征在于，该菌株已于2021年8月23日保藏于中国典型培养物保藏中心，分类命名为Lactobacillus salivarius BMC-06，保藏编号为CCTCC NO：M20211070，保藏地点为中国武汉。
2.根据权利要求1所述的唾液乳杆菌BMC-06，其特征在于：该菌株的16srDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
3.权利要求1所述的唾液乳杆菌BMC-06在消毒中的应用。
4.一种禽畜养殖用的生物消毒剂，其特征在于，该生物消毒剂包括唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16。
5.根据权利要求4所述的禽畜养殖用的生物消毒剂，其特征在于，所述唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的活菌数比为(30～35)：(30～35)：(30～35)。
6.根据权利要求4～5任一项所述的禽畜养殖用的生物消毒剂，其特征在于，该生物消毒剂的剂型为液体制剂和/或固体制剂。
7.一种生物消毒剂的制备方法，其特征在于，当生物消毒剂的剂型为液体制剂时，将唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的发酵液进行浓缩，浓缩得到的液体制剂的有效菌落浓度≥1010CFU/mL，其中，所述唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的活菌数比为(30～35)：(30～35)：(30～35)；
当生物消毒剂的剂型为固体制剂时，将唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的发酵液进行冷冻干燥，冷冻干燥得到的固体制剂的有效菌群浓度≥1010CFU/mL，其中，所述唾液乳杆菌BMC-06、植物乳杆菌RS-09和副干酪乳杆菌MIT-16的活菌数比为(30～35)：(30～35)：(30～35)。
8.一种权利要求7所述的生物消毒剂的使用方法，其特征在于，当生物消毒剂的剂型为液体制剂时，所述生物消毒剂的稀释方法为：将生物消毒剂与水混合后稀释，所述生物消毒剂与水的体积比为1：(400～500)；当生物消毒剂的剂型为固体制剂时，所述生物消毒剂的稀释方法为：将生物消毒剂与水混合后稀释，所述生物消毒剂的质量与水的体积比为1g：(400～500)mL。
9.一种权利要求4所述的生物消毒剂的应用，其特征在于，该应用至少包括在畜禽养殖过程中空气颗粒物中的条件性致病菌污染的应用以及在抑制畜禽舍的器械表面、物体表面、水槽、料槽、废弃物或排水沟中环境颗粒物细菌生长的应用。
10.根据权利要求9所述的生物消毒机的应用，其特征在于，当所述生物消毒剂用于减少畜禽养殖过程中空气颗粒物中的条件性致病菌污染时，将生物消毒剂喷洒于物体表面、装置表面或空气中，所述喷洒的用量为20～50mL/m3；喷洒频率先为1次/天，连续喷洒3天后，再为2次/周；
当所述生物消毒剂用于抑制畜禽舍的器械表面、物体表面、水槽、料槽、废弃物或排水沟中环境颗粒物细菌生长时，将生物消毒剂的稀释液添加至禽畜舍水槽、料槽、废弃物、排水沟中或涂抹于物体表面、地板排水装置的表面中，所述涂抹的用量为3～5mL/m2；所述涂抹的频率为1次/24h。
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Legal Events
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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