CN115611925A - Hpk1抑制剂及其用途 - Google Patents

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CN115611925A CN202210828860.9A CN202210828860A CN115611925A CN 115611925 A CN115611925 A CN 115611925A CN 202210828860 A CN202210828860 A CN 202210828860A CN 115611925 A CN115611925 A CN 115611925A
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刘斌
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及一类可用作HPK1抑制剂的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，含有所述化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其异构体的药物组合物及制剂，制备所述化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的方法，以及所述化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的用途。

Description

HPK1抑制剂及其用途
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一类可作为HPK1抑制剂的化合物、氘代物、其药学上可接受的盐、及其立体异构体，含有所述化合物、氘代物、其药学上可接受的盐及其立体异构体的药物组合物及制剂，制备所述化合物、氘代物、其药学上可接受的盐及其立体异构体的方法，以及所述化合物、氘代物、其药学上可接受的盐及其立体异构体的用途。
背景技术
T细胞受体(TCR)介导的T细胞活化在胸腺T细胞发育、T细胞亚群分化以及效应T细胞功能发挥过程中均起着重要的作用。TCR可以识别抗原提呈细胞表面的MHC(主要组织相容性复合物)，进而识别向细胞内部传递的信号。信号传递后引起下游信号通路的活化。TCR活化的典型胞内信号包括MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)、PKC(蛋白激酶C)以及钙离子等信号通路。这些信号的活化最终激活T细胞的特异性基因表达，引起细胞的增殖，并使得T细胞分化为效应T细胞。内源性或过继转移的效应T细胞是抗肿瘤免疫的重要介质。持续性的抗原暴露会导致T细胞逐渐分化为耗竭状态，其特征是效应器功能和增殖能力的层次性丧失，以及明显的转录、表观遗传和代谢变化。如何预防T细胞耗竭并拓展效应T细胞功能是目前肿瘤免疫学中最紧迫的问题之一。
造血祖细胞激酶HPK1(HematopoieticProgenitor Kinase1)是一种免疫抑制调节激酶，在造血干细胞中限制性表达。HPK1是T细胞受体(TCR)的负信号调节剂。TCR激活后，胞质HPK1被募集到细胞膜附近，活化的HPK1磷酸化衔接蛋白SLP76，以此激活SLP76作为负调节蛋白14-3-3的停靠位点，最终导致TCR信号复合物的不稳定，从而下调TCR信号。文献(Shui等，Nature Immunology(2007)8：84-91)披露HPK1缺乏导致TCR诱导的SLP-76和Erk磷酸化增强，Ca通量增加以及细胞因子和抗原特异性抗体的产生增加，表明HPK1负调节TCR信号传导和T细胞介导的免疫反应。此外，Sawasdikosol等发现H P K 1(-/-)T细胞对***素PGE2的抑制和凋亡作用有抵抗力(Sawasdikosol等人，Cancer Immunol.Immunother.(2010)59:419-429)。2020年清华大学廖学斌课题组报道了HPK1在T细胞免疫疗法中的功能意义，【Siet al.,Hematopoietic Progenitor Kinase1(HPK1)Mediates T CellDysfunction and Is a Druggable Target for T Cell-Based Immunotherapies,CancerCell(2020)】研究人员首先在公开的肿瘤数据库中分析得知MAP4K1(编码HPK1)与T细胞耗竭相关的信号分子(如：PDCD1、TIGIT、CTLA4、LAG3等)呈现很强的正相关性。在低级别胶质瘤(LGG)、浸润性乳腺癌(BRAC)等肿瘤中显著的表现出，MAP4K1低表达的患者有着更长的生存期。接下来，研究人员选取多发性骨髓瘤组织活检，分选测量T细胞中HPK1与免疫抑制分子的蛋白表达情况，实验结果可知在耗竭的T细胞中，HPK1的表达上调。此实验结果表明HPK1与肿瘤浸润性T细胞耗竭的正相关性，HPK1可能是调节T细胞耗竭并抑制抗肿瘤免疫反应的一个重要激酶。
HPK1又称为MAP4K1，属于MAP4K家族的成员，该家族中还有其他5位成员MAP4K2(GCK激酶)、MAP4K3(GLK激酶)、MAP4K4(HGK激酶)、MAP4K5(KHS激酶)和MAP4K6(MINK激酶)。其中GLK激酶的生物学作用与HPK1的作用正好相反，GLK可以通过与下游接头蛋白结合，促进TCR通路的激活。而文献【Huai-Chia Chuang等，Chapter Seven-MAP4K Family Kinasesin Immunity and Inflammation,Advances in Immunology,2016(129)277-314】发现HGK激酶的丢失会导致小鼠自发性全身炎症和2型糖尿病，家族中其他激酶的作用暂时不详。为了保证更好的安全性，我们需要找到对MAP4K家族其他成员具有高选择性的HPK1激酶抑制剂。
目前，该靶点药物的研究仍处于临床实验阶段，尚无药物上市，为了更好的满足临床需求，开发一款选择性高、活性高、安全性强的HPK1激酶抑制剂具有重要的临床意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种结构新颖的、对HPK1有良好抑制活性的HPK1抑制剂化合物。进一步的，该类化合物可用于抑制HPK1激酶活性，从而增强机体对肿瘤的免疫作用。更进一步的，该类化合物还可用于治疗或预防由HPK1所介导的相关疾病，尤其是癌症。该类化合物对多种癌细胞具有良好的抑制作用，并具有良好的成药性。
本发明的技术方案如下：
在一方面，本发明提供了如下通式(I)所示的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，
Figure BDA0003745146690000021
其中，
X1、X2分别独立地选自-C(R3)-或-N-；
Y1、Y2、Y3分别独立地选自-C(R4)或-N-；
L1选自化学键、-CRaRb-、-C(RaRb)-C(RaRb)-、-O-、-NRa-、-S-、-S(O)2NRa-、-S(O)-、-S(O)NRa-、-C(O)-、-C(O)O-、-C(O)NRa-、-C(O)N(Ra)O-、-OC(O)-、-OC(O)NRa-、-N(Ra)C(O)O-、-N(Ra)C(O)-、-N(Ra)S(O)2-、-C(RaRb)-NRa-或-NRa-C(RaRb)-；
各R3、各R4分别独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷氧基；
环A选自任选被1-3个Q1取代的7-15元环烷基、7-15元杂环烷基、6-15元芳基或5-15元杂芳基；
各Q1分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、-NRaRb、-ORa、-SRa、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的以下基团：C1-6烷基、C1-6烷氧基、-(CH2)m-3-10元环烷基、-(CH2)m-3-10元杂环烷基、-(CH2)m-5-10元杂芳基或-(CH2)m-6-10元芳基；
各Q2分别独立地选自氘、卤素、羟基、硝基、-NRcRd、氰基、羧基、3-10元环烷基、3-10元杂环烷基、5-10元杂芳基或6-10元芳基；
R1选自任选被1-3个Q3取代的6-15元芳基或5-15元杂芳基，所述Q3分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷硫基、卤代C1-6烷氧基、卤代C1-6烷硫基、羟基C1-6烷氧基、羟基C1-6烷硫基、氨基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷硫基；
R2选自氢、卤素、羟基、硝基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、-NRaRb、-ORa、-SRa、-NRa-C(O)-Rb-、-C(O)Ra、-C(O)NRa或-C(O)ORa；
各Ra、各Rb分别独立地选自氢、卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷硫基、卤代C1-6烷氧基、卤代C1-6烷硫基、羟基C1-6烷氧基、羟基C1-6烷硫基、氨基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷硫基或任选被取代基取代的以下基团：-(CH2)m-3-10元环烷基、-(CH2)m-3-10元杂环烷基、-(CH2)m-5-10元杂芳基、-(CH2)m-6-10元芳基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷基；
各Rc、各Rd分别独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基或卤代C1-6烷氧基；
p选自0、1或2；
各m分别独立地选自0、1、2、3、4或5。
在某些实施方案中，所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，
X1、X2分别独立地选自-C(R3)-或-N-；
Y1、Y2、Y3分别独立地选自-C(R4)或-N-；
L1选自化学键、-CRaRb-、-C(RaRb)-C(RaRb)-、-O-、-NRa-、-S-、-S(O)2NRa-、-S(O)-、-S(O)NRa-、-C(O)-、-C(O)O-、-C(O)NRa-、-C(RaRb)-NRa-或-NRa-C(RaRb)-；
各R3、各R4分别独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷氧基；
环A选自任选被1-3个Q1取代的5-6元杂芳基、7-10元环烷基或7-10元杂环烷基；
各Q1分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、-NRaRb、-ORa、-SRa、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的以下基团：C1-6烷基、C1-6烷氧基、-(CH2)m-3-8元环烷基、-(CH2)m-3-8元杂环烷基、-(CH2)m-5-8元杂芳基或-(CH2)m-苯基；
各Q2分别独立地选自氘、卤素、羟基、硝基、-NRcRd、氰基或羧基；
R1选自任选被1-3个Q3取代的5-15元杂芳基，所述Q3分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷硫基、卤代C1-6烷氧基、卤代C1-6烷硫基、羟基C1-6烷氧基、羟基C1-6烷硫基、氨基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷硫基；
R2选自氢、卤素、羟基、硝基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、-NRaRb或-ORa；
各Ra、各Rb分别独立地选自氢、卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷硫基、卤代C1-6烷氧基、卤代C1-6烷硫基、羟基C1-6烷氧基、羟基C1-6烷硫基、氨基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷硫基或任选被取代基取代的以下基团：-(CH2)m-3-10元环烷基、-(CH2)m-3-10元杂环烷基、-(CH2)m-5-10元杂芳基、-(CH2)m-6-10元芳基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷基；
各Rc、各Rd分别独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基或卤代C1-6烷氧基；
p选自0、1或2；
各m分别独立地选自0、1、2或3。
在某些实施方案中，所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，
环A选自任选被1-3个Q1取代的5-6元含氮杂芳基、7-8元单环烷基、8-10元稠环基、7-8元单杂环基或8-10元稠杂环基；
各Q1分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、-NRaRb、-ORa、-SRa、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的以下基团：C1-6烷基、C1-6烷氧基、-(CH2)m-3-8元环烷基、-(CH2)m-3-8元杂环烷基、-(CH2)m-5-8元杂芳基或-(CH2)m-苯基；各Q2分别独立地选自氘、卤素、羟基、硝基、-NRcRd、氰基或羧基；
R1选自任选被1-3个Q3取代的8-10元稠杂芳基，所述Q3分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、氨基C1-4烷氧基；
R2选自氢、卤素、羟基、硝基、氰基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、-NRaRb或-ORa；
各Ra、各Rb分别独立地选自氢、卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、氨基C1-4烷氧基或任选被取代基取代的-(CH2)m-3-8元环烷基、-(CH2)m-3-8元杂环烷基、-(CH2)m-5-8元杂芳基或-(CH2)m-苯基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷基；
各Rc、各Rd分别独立地选自氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基或卤代C1-4烷氧基；
p选自0、1或2；
各m分别独立地选自0、1、2或3。
在某些实施方案中，X1、X2分别独立地选自-C(R3)-或-N-；Y1、Y2、Y3分别独立地选自-C(R4)或-N-；各R3、各R4分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷氧基。
在某些实施方案中，X1、X2分别独立地选自-C(R3)-或-N-；Y1、Y2、Y3分别独立地选自-C(R4)或-N-；各R3、各R4分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基。
在某些实施方案中，X1、X2分别独立地选自-C(R3)-或-N-；Y1、Y2、Y3分别独立地选自-C(R4)或-N-；各R3、各R4分别独立地选自氢、卤素、C1-4烷基或卤代C1-4烷基。
在某些实施方案中，X1、X2分别独立地选自-C(R3)-或-N-；Y1、Y2、Y3分别独立地选自-C(R4)或-N-；各R3、各R4分别独立地选自氢、氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、异丙基或三氟甲基。
在某些实施方案中，X1、X2分别独立地选自-CH-或-N-；Y1、Y2、Y3分别独立地选自-CH-或-N-。
在某些实施方案中，L1选自化学键、-CRaRb-、-C(RaRb)-C(RaRb)-、-O-、-NRa-、-S-、-S(O)-、-C(O)-、-C(O)NRa-、-C(RaRb)-NRa-或-NRa-C(RaRb)-。
在某些实施方案中，L1选自化学键、-CRaRb-、-O-、-NRa-、-S-或-C(O)-。
在某些实施方案中，环A选自任选被1-3个Q1取代的5元含氮杂芳基或7-8元单杂环基；各Q1分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、-NRaRb、-ORa、-SRa、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的以下基团：C1-4烷基、C1-4烷氧基、-(CH2)m-3-6元环烷基、-(CH2)m-3-6元杂环烷基、-(CH2)m-5-8元杂芳基或-(CH2)m-苯基；所述Q2分别独立地选自氘、卤素、羟基、硝基、-NRcRd、氰基或羧基；Rc、Rd分别独立地选自氢、C1-4烷基或卤代C1-4烷基。
在某些实施方案中，环A选自
Figure BDA0003745146690000051
Figure BDA0003745146690000052
Figure BDA0003745146690000053
其中，n选自0、1、2或3。
在某些实施方案中，各Q1分别独立地选自氟、氯、溴、氨基、氰基、羟基、羧基、硝基、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、-(CH2)m-环丙基、-(CH2)m-环丁基、-(CH2)m-环戊基、-(CH2)m-环己基、-(CH2)m-氧杂环丙基、-(CH2)m-氧杂环丁基、-(CH2)m-四氢呋喃基、-(CH2)m-四氢吡喃基、-(CH2)m-四氢吡咯基、-(CH2)m-吡唑烷基、-(CH2)m-咪唑烷基、-(CH2)m-哌嗪基或-(CH2)m-哌啶基；所述Q2分别独立地选自氘、氟、氯、溴、羟基、-NRcRd、氰基、羧基、硝基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、四氢吡咯基、吡唑烷基、咪唑烷基、哌嗪基或哌啶基；Rc、Rd分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基。
在某些实施方案中，各Q1分别独立地选自氰基、-C(O)Ra或任选被1-3个Q2取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、-(CH2)m-环丙基、-(CH2)m-环丁基、-(CH2)m-环戊基、-(CH2)m-环己基、-(CH2)m-氧杂环丙基、-(CH2)m-氧杂环丁基、-(CH2)m-四氢呋喃基或-(CH2)m-四氢吡喃基；所述Q2分别独立地选自氘、氟、氯、溴、羟基、-NRcRd、氰基、羧基或硝基；Rc、Rd分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。
在某些实施方案中，R1选自任选被1-3个Q3取代的9元含氮稠杂芳基，所述Q3分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基或氨基C1-4烷氧基。
在某些实施方案中，R1选自任选被1-3个Q3取代的9元含氮稠杂芳基，所述Q3分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基或卤代C1-4烷氧基。
在某些实施方案中，R1选自任选被1-3个Q3取代的如下基团：
Figure BDA0003745146690000061
Figure BDA0003745146690000062
Figure BDA0003745146690000063
优选的，R1选自任选被1-3个Q3取代的如下基团：
Figure BDA0003745146690000064
Figure BDA0003745146690000065
在某些实施方案中，所述Q3分别独立地选自氟、氯、溴、碘、硝基、氰基、氨基、羟基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基或三氟乙氧基。
在某些实施方案中，各Ra、各Rb分别独立地选自氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、氨基C1-4烷氧基或任选被取代基取代的-(CH2)m-3-6元环烷基、-(CH2)m-3-6元杂环烷基、-(CH2)m-5-8元杂芳基或-(CH2)m-苯基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷基。
在某些实施方案中，各Ra分别独立地选自氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基或任选被取代基取代的-(CH2)m-3-6元环烷基、-(CH2)m-3-6元杂环烷基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷基；各Rb分别独立地选自氢或C1-4烷基。
在某些实施方案中，各Ra分别独立地选自氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基；各Rb分别独立地选自氢或C1-4烷基。
在某些实施方案中，各Ra分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟甲氧基或任选被取代基取代的环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氧杂环丙基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、吡唑烷基、咪唑烷基、哌嗪基或哌啶基；所述取代基选自氟、氯、溴、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基或三氟甲基；各Rb分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基或异丙基。
在某些实施方案中，各Ra分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基或任选被取代基取代的环丙基、环丁基、环戊基或环己基；所述取代基选自氟、氯、溴、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、甲基、乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基或三氟甲基；各Rb分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基或异丙基。
在某些实施方案中，各Ra分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基；各Rb分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基或异丙基。
在某些实施方案中，所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，具有如下通式(II-1)或通式(II-2)所示的结构：
Figure BDA0003745146690000071
其中，
L1选自化学键、-CRaRb-、-C(RaRb)-C(RaRb)-、-O-、-NRa-、-S-、-C(O)-、-C(O)NRa-、-C(RaRb)-NRa-或-NRa-C(RaRb)-；
各R2分别独立地选自氢、卤素、羟基、硝基、氰基、C1-4烷基或卤代C1-4烷基；
环A选自
Figure BDA0003745146690000072
Figure BDA0003745146690000073
各Q1分别独立地选自氰基、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的如下基团：C1-4烷基、C1-4烷氧基、-(CH2)m-3-6元环烷基或-(CH2)m-3-6元杂环烷基；优选地，各Q1分别独立地选自氰基、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、-(CH2)m-环丙基、-(CH2)m-环丁基、-(CH2)m-环戊基、-(CH2)m-环己基、-(CH2)m-氧杂环丙基、-(CH2)m-氧杂环丁基、-(CH2)m-四氢呋喃基或-(CH2)m-四氢吡喃基；
各Q2分别独立地选自氘、氟、氯、溴、羟基、-NRcRd、氰基、羧基或硝基；
Rc、Rd分别独立地选自氢、C1-4烷基或卤代C1-4烷基；优选地，Rc、Rd分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基；
R1选自任选被1-3个Q3取代的如下基团：
Figure BDA0003745146690000074
Figure BDA0003745146690000081
各Q3分别独立地选自氟、氯、溴、碘、硝基、氰基、氨基、羟基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、一氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基；
各Ra分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟甲氧基或任选被取代基取代的以下基团：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氧杂环丙基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、四氢吡咯基、吡唑烷基或咪唑烷基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基或三氟甲基；
各Rb分别独立地选自氢或C1-4烷基；
各m、n、p分别独立地选自0、1或2。
在某些实施方案中，R1选自任选被1-3个Q3取代的如下基团：
Figure BDA0003745146690000082
Figure BDA0003745146690000083
所述Q3分别独立地选自卤素、C1-4烷基或卤代C1-4烷基；优选地，所述Q3分别独立地选自氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。
在某些实施方案中，R1选自如下基团：
Figure BDA0003745146690000084
所述Q3分别独立地选自卤素、C1-4烷基或卤代C1-4烷基；优选地，所述Q3分别独立地选自氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。
在某些实施方案中，所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，具有如下通式(III-1)或通式(III-2)所示的结构：
Figure BDA0003745146690000085
其中，环A、R2、L1、Q1、Q2、Q3、Ra、Rb、Rc、Rd、m、n、p的定义如前文所述，q选自0、1、2或3。
在某些实施方案中，所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，具有如下通式(III-3)或通式(III-4)所示的结构：
Figure BDA0003745146690000091
其中，环A、R2、L1、Q1、Q2、Q3、Ra、Rb、Rc、Rd、m、n、p的定义如前文所述，q选自0、1、2或3。
在某些实施方案中，所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，具有如下通式(III-5)或通式(III-6)所示的结构：
Figure BDA0003745146690000092
其中，环A、R2、L1、Q1、Q2、Q3、Ra、Rb、Rc、Rd、m、n、p的定义如前文所述，q选自0、1、2或3。
在某些实施方案中，所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，
L1选自化学键、-CRaRb-、-O-或-NRa-；
各R2分别独立地选自氢、C1-4烷基或卤代C1-4烷基；优选地，各R2分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基；
环A选自
Figure BDA0003745146690000093
Figure BDA0003745146690000094
各Q1分别独立地选自氰基、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的如下基团：C1-4烷基或-(CH2)m-3-6元环烷基；优选地，各Q1分别独立地选自氰基、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、-(CH2)m-环丙基或-(CH2)m-环丁基；
各Q2分别独立地选自氘、氟、氯、溴、羟基、-NRcRd、氰基、羧基或硝基；
Rc、Rd分别独立地选自氢、C1-4烷基或卤代C1-4烷基；优选地，Rc、Rd分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基；
各Q3分别独立地选自卤素、C1-4烷基或卤代C1-4烷基；优选地，各Q3分别独立地选自氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基；
各Ra分别独立地选自氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基；优选地，各Ra分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基；
各Rb分别独立地选自氢或C1-4烷基；优选地，各Rb分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基或异丙基；
p选自0或1；
各m、n分别独立地选自0、1或2。
在某些实施方案中，环A选自
Figure BDA0003745146690000101
Figure BDA0003745146690000102
各Q1分别独立地选自氰基、-C(O)Ra、C1-4烷基、氘代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、卤代C1-4烷基或3-6元环烷基。
在某些实施方案中，Q1分别独立地选自氰基、-C(O)-甲基、甲基、乙基、异丙基、一氟甲基、一氟乙基、二氟甲基、二氟乙基、三氟甲基、三氟乙基、氘代甲基、氘代乙基、羟基甲基、羟基乙基、环丙基、环丁基或
Figure BDA0003745146690000103
在某些实施方案中，各R2分别独立地为H。
在某些实施方案中，Ra、Rb分别独立地为H。
在某些实施方案中，Rc、Rd分别独立地为H。
在某些实施方案中，L1选自-NH-或O。
在本发明技术方案中，所述环A中环氮原子上的氢可任选的被Q1取代。
在某些实施方案中，p为0。
在某些实施方案中，n为1。
本发明中各技术方案之间可以相互组合形成新的技术方案，所形成的新的技术方案同样包括在本发明的范围之内。
在某些实施方案，前述化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，选自如下化合物：
Figure BDA0003745146690000104
Figure BDA0003745146690000111
本发明还提供了一种药物组合物，其含有前述通式(I)、通式(II-1)、通式(II-2)、通式(III-1)、通式(III-2)、通式(III-3)、通式(III-4)、通式(III-5)、通式(III-6)所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，及一种或多种药用载体和/或稀释剂；所述药物组合物可以制成临床上或药学上可接受的任一剂型，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂、注射剂(包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液)、栓剂、吸入剂或喷雾剂等。
在本发明的某些实施方案中，上述药物制剂可以以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要这种治疗的患者或受试者。用于口服给药时，所述药物组合物可制成口服制剂，例如可以制成常规的口服固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，上述药物制剂也可制成注射剂、包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配置注射剂时，可以不加入附加剂，也可以根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，所述药物组合物可制成栓剂等。用于经肺给药时，所述药物组合物可制成吸入剂或喷雾剂等。
本发明的药物组合物或药物制剂中可用的药用载体和/或稀释剂可以是药物制剂领域中任何常规的载体和/或稀释剂，特定载体和/或稀释剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。
在另一方面，本发明还涉及前述通式(I)、通式(II-1)、通式(II-2)、通式(III-1)、通式(III-2)、通式(III-3)、通式(III-4)、通式(III-5)、通式(III-6)所述化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体在制备预防和/或治疗由HPK1所介导的疾病及相关疾病的药物中的用途，所述药物可与一种或多种其他药物联用以预防或治疗由HPK1所介导的疾病及相关病症。所述疾病及相关病症选自癌症或良性肿瘤，所述癌症包括原位癌和转移的癌症。进一步的，所述癌症包括但不限于肺癌、鳞状上皮细胞癌、膀胱癌、胃癌、卵巢癌、腹膜癌、胰腺癌、乳腺癌、头颈癌、子***、子宫内膜癌、直肠癌、肝癌、肾癌、食管腺癌、食管鳞状细胞癌、***癌、甲状腺癌、雌性生殖道癌、淋巴瘤、神经纤维瘤、骨癌、皮肤癌、脑癌、结肠癌、睾丸癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、胃肠道间质瘤、肥大细胞肿瘤、多发性骨髓瘤、黑色素瘤、白血病、胶质瘤或肉瘤等。
进一步的，本发明还涉及含有前述通式(I)、通式(II-1)、通式(II-2)、通式(III-1)、通式(III-2)、通式(III-3)、通式(III-4)、通式(III-5)、通式(III-6)所述化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的药物制剂在制备药物中的用途，所述药物可与一种或多种药物联用以治疗及/或预防由HPK1所介导的疾病及相关病症。
在另一方面，本发明涉及的含有前述通式(I)、通式(II-1)、通式(II-2)、通式(III-1)、通式(III-2)、通式(III-3)、通式(III-4)、通式(III-5)、通式(III-6)所述化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的药物可以单独给药，或者与一种或多种第二治疗活性剂联合使用，所述第二治疗活性剂与本申请的HPK1抑制剂化合物组合用于治疗和/或预防由HPK1所介导的疾病和相关病症。因此，在某些实施方案中，所述的药物组合物还含有一种或多种第二治疗活性剂。在某些实施方案中，所述的第二治疗活性剂选自抗癌剂，包括有丝***抑制剂、烷化剂、抗代谢物、反义DNA或RNA、抗肿瘤抗生素、生长因子抑制剂、信号传导抑制剂、细胞周期抑制剂、酶抑制剂、类维生素A受体调控剂、蛋白酶体抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、生物应答调节剂、激素类药物、血管再生抑制剂、细胞生长抑制剂、靶向抗体、HMG-CoA还原酶抑制剂和异戊二烯基蛋白质转移酶抑制剂。
在某些实施方案中，待组合的各成分(例如，本发明的化合物、其药学上可接受的盐、其立体异构体与第二治疗活性剂)可同时给药或依次顺序地分开用药。例如，可以在施用本发明化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体之前、同时或之后，施用第二治疗活性剂。此外，待组合的各成分还可以以同一制剂形式或以分开的不同制剂的形式联合给药。
在另一方面，本发明还提供了一种治疗由HPK1介导的疾病及相关病症的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的前述通式(I)、通式(II-1)、通式(II-2)、通式(III-1)、通式(III-2)、通式(III-3)、通式(III-4)、通式(III-5)、通式(III-6)所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，前述制剂或药物组合物；所述由HPK1介导的疾病及相关病症如上定义。
所述的“有效量”是指能够减轻、延缓、抑制或治愈受试者病症的药物剂量。给药剂量的大小与药物给药方式、药剂的药代动力学、疾病的严重程度、受试者的个性体征(性别、体重、身高、年龄)等来确定。
【发明详述】
在本发明中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员通常理解的含义，然而为了更好的理解本发明，下面提供了部分术语的定义。当本发明所提供的术语的定义和解释与本领域技术人员所通常理解的含义不符的时候，以本发明所提供的术语的定义和解释为准。
本发明所述的“卤素”是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
本发明所述的“C1-6烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，包括例如“C1-4烷基”、“C1-3烷基”、“C1-2烷基”、“C2-6烷基”、“C2-5烷基”、“C2-4烷基”、“C2-3烷基”、“C3-6烷基”、“C3-5烷基”、“C3-4烷基”等，具体实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。本发明所述的“C1-4烷基”指C1-6烷基中的含有1-4个碳原子的具体实例。
本发明所述的“C1-6烷氧基”是指“C1-6烷基-O-”，所述的“C1-6烷基”如前文所定义。本发明所述的“C1-4烷氧基”是指“C1-4烷基-O-”，所述的“C1-4烷基”如前文所定义。
本发明所述的“C1-6烷硫基”是指“C1-6烷基-S-”，所述的“C1-6烷基”如前文所定义。本发明所述的“C1-4烷硫基”是指“C1-4烷基-S-”，所述的“C1-4烷基”如前文所定义。
本发明所述的“羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、卤代C1-6烷基”是指C1-6烷基中的一个或多个氢分别被一个或多个羟基、氨基或卤素所取代。C1-6烷基如前文所定义
本发明所述“羟基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基”是指“C1-6烷氧基”中的一个或多个氢被一个或多个羟基、氨基或卤素所取代。
本发明所述“羟基C1-6烷硫基、氨基C1-6烷硫基、卤代C1-6烷硫基”是指“C1-6烷硫基”中的一个或多个氢被一个或多个羟基、氨基或卤素所取代。
本发明所述的“C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基”分别是指C1-6烷基-NH-、
Figure BDA0003745146690000131
本发明所述的“3-15元环烷基”是指包括“3-8元单环烷基”和“7-15元稠环烷基”。
本发明所述的“3-8元单环烷基”是指含有3-8个碳原子的饱和或部分饱和的且不具有芳香性的单环环状烷基，包括“3-8元饱和单环烷基”和“3-8元部分饱和单环烷基”；优选“3-4元单环烷基”、“3-5元单环烷基”、“3-6元单环烷基”、“3-7元单环烷基”、“4-5元单环烷基”、“4-6元单环烷基”、“4-7元单环烷基”、“4-8元单环烷基”、“5-6元单环烷基”、“5-7元单环烷基”、“5-8元单环烷基”、“6-7元单环烷基”、“6-8元单环烷基”、“7-8元单环烷基”、“3-6元饱和单环烷基”、“5-8元饱和单环烷基”、“5-7元饱和单环烷基”、“5-6元饱和单环烷基”等。所述的“3-8元饱和单环烷基”的具体实例包括但不限于：环丙烷基(环丙基)、环丁烷基(环丁基)、环戊烷基(环戊基)、环己烷基(环己基)、环庚烷基(环庚基)、环辛烷基(环辛基)等；所述的“3-8元部分饱和单环烷基”的具体实例包括但不限于环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己-1,3-二烯、环己-1,4-二烯、环庚烯基、环庚-1,3-二烯基、环庚-1,4-二烯基、环庚-1,3,5-三烯基，环辛烯基、环辛-1,3-二烯基、环辛-1,4-二烯基、环辛-1,5-二烯基、环辛-1,3,5-三烯基、环辛四烯基等。
本发明所述的“7-15元稠环烷基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的碳原子所形成的含有7-15个环原子的、饱和或部分饱和的、非芳香性环状基团，所述的稠环中的一个环可以为芳香性环，但稠环整体不具备芳香性；包括“8-9元稠环基”、“9-10元稠环基”等，其稠和方式可以为：5-6元环烷基并5-6元环烷基、苯并5-6元环烷基、苯并5-6元饱和环烷基等。其实例包括但不限于：二环[3.1.0]己烷基、二环[4.1.0]庚烷基、二环[2.2.0]己烷基、二环[3.2.0]庚烷基、二环[4.2.0]辛烷基、八氢并环戊二烯基、八氢-1H-茚基、十氢化萘基、十四氢菲基、双环[3.1.0]己-2-烯基、双环[4.1.0]庚-3-烯基、双环[3.2.0]庚-3-烯基、双环[4.2.0]辛-3-烯基、1,2,3,3a-四氢并环戊二烯基、2,3,3a,4,7,7a-六氢-1H-茚基、1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氢化萘基、1,2,4a,5,6,8a-六氢化萘基、1,2,3,4,5,6,7,8,9,10-十氢菲基、苯并环戊基、苯并环己基、苯并环己烯基、苯并环戊烯基等。
本发明所述的“3-10元环烷基”是指“3-15元环烷基”中的含有3-10个碳原子的具体实例。
本发明所述的“7-15元环烷基”是指“3-15元环烷基”中的含有7-15个碳原子的具体实例。
本发明所述的“3-15元杂环基”包括“3-8元单杂环基”和“7-15元稠杂环基”。
本发明所述的“3-8元单杂环基”是指至少含有一个杂原子(例如，含有1个、2个、3个、4个或5个)的且环原子数为3-8个的饱和或部分饱和的且不具有芳香性的单环环状基团，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。本发明所述的“3-8元单杂环基”包括“3-8元饱和单杂环基”和“3-8元部分饱和单杂环基”。优选地，本发明所述的“3-8元单杂环基”含有1-3个杂原子；优选地，本发明所述的“3-8元单杂环基”含有1-2个杂原子，且所述的杂原子选自氮原子和/或氧原子；优选地，本发明所述的“3-8元单杂环基”含有1个氮原子。所述“3-8元单杂环基”优选“3-7元单杂环基”、“3-6元单杂环基”、“4-7元单杂环基”、“4-6元单杂环基”、“6-8元单杂环基”、“7-8元单杂环基”、“5-7元单杂环基”、“5-6元单杂环基”、“3-6元饱和单杂环基”、“5-6元饱和单杂环基”、“3-6元含氮单杂环基”、“3-6元饱和含氮单杂环基”、“5-6元含氮单杂环基”、“5-6元饱和含氮单杂环基”等。例如，仅包含1个或2个氮原子，或者，包含一个氮原子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)。“3-8元单杂环基”的具体实例包括但不仅限于：氮杂环丙烷基、2H-氮杂环丙烷基、二氮杂环丙烷基、3H-二氮杂环丙烯基、氮杂环丁烷基、1,4-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、1,4-二氧杂环己二烯基、四氢呋喃基、二氢吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氢咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氢吡唑基、2,5-二氢噻吩基、四氢噻吩基、4,5-二氢噻唑基、噻唑烷基、哌啶基、四氢吡啶基、哌啶酮基、四氢吡啶酮基、二氢哌啶酮基、哌嗪基、吗啉基、4,5-二氢噁唑基、4,5-二氢异噁唑基、2,3-二氢异噁唑基、噁唑烷基、2H-1,2-噁嗪基、4H-1,2-噁嗪基、6H-1,2-噁嗪基、4H-1,3-噁嗪基、6H-1,3-噁嗪基、4H-1,4-噁嗪基、4H-1,3-噻嗪基、6H-1,3-噻嗪基、2H-吡喃基、2H-吡喃-2-酮基、3,4-二氢-2H-吡喃基等。
本发明所述“7-15元稠杂环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的含有7-15个环原子的、且至少一个环原子为杂原子的、饱和或部分饱和的、非芳香性环状基团，所述的稠环中其中一个环可以为芳香性环，但稠环整体不具备芳香性，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代，包括但不限于“8-9元稠杂环基”、“9-10元稠杂环基”、“10-11元稠杂环基”等，其稠和方式可以为5-6元杂环基并5-6元杂环基、5-6元杂环基并5-6元环烷基、苯并5-6元杂环基、苯并5-6元饱和杂环基、苯并6-7元杂环基、苯并6-7元饱和杂环基、5-6元杂芳基并5-6元杂环基、5-6元杂芳基并5-6元饱和杂环基；5-6元杂芳基如前文所定义；所述“8-10元稠杂环基”具体实例包括但不仅限于：吡咯烷基并环丙基、环戊基并氮杂环丙基、吡咯烷基并环丁基、吡咯烷基并吡咯烷基、吡咯烷基并哌啶基、吡咯烷基并哌嗪基、吡咯烷基并吗啉基、哌啶基并吗啉基、苯并吡咯烷基、苯并环戊基、苯并环己基、苯并四氢呋喃基、苯并吡咯烷基、苯并咪唑烷基、苯并噁唑烷基、苯并噻唑烷基、苯并异噁唑烷基、苯并异噻唑烷基、苯并哌啶基、苯并吗啉基、苯并哌嗪基、苯并四氢吡喃基、吡啶并环戊基、吡啶并环己基、吡啶并四氢呋喃基、吡啶并吡咯烷基、吡啶并咪唑烷基、吡啶并噁唑烷基、吡啶并噻唑烷基、吡啶并异噁唑烷基、吡啶并异噻唑烷基、吡啶并哌啶基、吡啶并吗啉基、吡啶并哌嗪基、吡啶并四氢吡喃基、嘧啶并环戊基、嘧啶并环己基、嘧啶并四氢呋喃基、嘧啶并吡咯烷基、嘧啶并咪唑烷基、嘧啶并噁唑烷基、嘧啶并噻唑烷基、嘧啶并异噁唑烷基、嘧啶并异噻唑烷基、嘧啶并哌啶基、嘧啶并吗啉基、嘧啶并哌嗪基、嘧啶并四氢吡喃基；四氢咪唑并[4,5-c]吡啶基、3,4-二氢喹唑啉基、1,2-二氢喹喔啉基、苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯基、2H-色原烯基、2H-色原烯-2-酮基、4H-色烯基、4H-色烯-4-酮基、4H-1,3-苯并噁嗪基、4,6-二氢-1H-呋喃并[3,4-d]咪唑基、3a,4,6,6a-四氢-1H-呋喃并[3,4-d]咪唑基、4,6-二氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑基、4,6-二氢-1H-吡咯并[3,4-d]咪唑基、八氢-苯并[d]咪唑基、十氢喹啉基、六氢噻吩并咪唑基、六氢呋喃并咪唑基、4,5,6,7-四氢-1H-苯并[d]咪唑基、八氢环戊烯并[c]吡咯基、4H-1,3-苯并噁嗪基等。
本发明所述的“3-10元杂环基”是指“3-15元杂环基”中的含有3-10个环原子的具体实例。
本发明所述的“7-15元杂环基”是指“3-15元杂环基”中的含有7-15个环原子的具体实例。
术语“苯并环戊基”，其结构是指
Figure BDA0003745146690000151
(亦可称之为2,3-二氢-1H-茚基)；术语“苯并吡咯烷”其结构包括
Figure BDA0003745146690000152
等；术语“吡啶并四氢呋喃基”其结构包括
Figure BDA0003745146690000153
Figure BDA0003745146690000154
前文所定义的其他“定义的其它稠杂环基”的具体实例具有与之类似的环状结构。
本发明所述的“6-15元芳基”包括“6-8元单环芳基”和“8-15元稠环芳基”。
本发明所述的“6-8元单环芳基”是指含有6-8个环碳原子的单环芳基，其实例包括但不限于：苯基、环辛四烯基等；优选苯基。
本发明所述的“8-15元稠环芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-15个环碳原子的、不饱和的、具有芳香性的环状基团，优选“9-10元稠环芳基”，具体实例如萘基等。
本发明所述的“5-15元杂芳基”包括“5-8元单杂芳基”和“8-15元稠杂芳基”。
本发明所述的“5-8元单杂芳基”是指含有5-8个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的单环环状基团。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。“5-8元单杂芳基”包括例如“5-7元单杂芳基”、“5-6元单杂芳基”、“5-6元含氮单杂芳基”、“6元含氮单杂芳基”等，所述的“含氮杂芳基”中的杂原子至少含有一个氮原子，例如，仅包含1个或2个氮原子，或者，包含一个氮原子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)，或者，包含2个氮原子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)。“5-8元单环杂芳基”的具体实例包括但不仅限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-***基、1,2,4-***基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基、氮杂环庚三烯基、1,3-二氮杂环庚三烯基、氮杂环辛四烯基等。所述“5-6元单杂芳基”是指5-8元杂芳基中含有5-6个环原子的具体实例。
本发明所述的“8-15元稠杂芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-15个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的、不饱和的具有芳香性的环状结构。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。包括“9-10元稠杂芳基”，“8-9元稠杂芳基”等，其稠和方式可以为苯并5-6元杂芳基、5-6元杂芳基并5-6元杂芳基等；具体实例包括但不限于：吡咯并吡咯、吡咯并呋喃、吡唑并吡咯、吡唑并噻吩、呋喃并噻吩、吡唑并噁唑、苯并呋喃基、苯并异呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并***基、喹啉基、2-喹啉酮基、4-喹啉酮基、1-异喹啉酮基、异喹啉基、吖啶基、菲啶基、苯并哒嗪基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、嘌呤基、萘啶基等。
本发明所述的“碳原子、氮原子或硫原子被氧代”是指形成C＝O、N＝O、S＝O或SO2的结构。
本发明所述的“C(Ra)(Rb)”是指Ra、Rb分别取代亚甲基上的两个氢原子形成的基团，具体的连接方式为
Figure BDA0003745146690000161
本发明所述“任选被取代”是指被取代基上的一个或多个氢原子可以被一个或多个取代基“取代”或“不取代”的两种情形。
本发明所述的“氘代物”是指化合物结构中的一个或多个1H被2H(也被表示为“D”)取代所形成的结构。
本发明所述的“药学上可接受的盐”指化合物中存在的酸性官能团(例如-COOH、-OH、-SO3H等)与适当的无机或者有机阳离子(碱)形成的盐，包括与碱金属或碱土金属形成的盐、铵盐，以及与含氮有机碱形成的盐；以及化合物中存在的碱性官能团(例如-NH2等)与适当的无机或者有机阴离子(酸)形成的盐，包括与无机酸或有机酸(例如羧酸等)形成的盐。其实例包括但不限于锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、铋盐、盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、四氟硼酸盐、精氨酸盐、天冬氨酸盐和谷氨酸等。
本发明所述的“异构体”是指当本发明化合物含有一个或多个不对称中心，因而可作为外消旋体和外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单一非对映异构体。本发明化合物可以有不对称中心，这类不对称中心各自独立地产生两个光学异构体。本发明的范围包括所有可能的光学异构体和它们的混合物。本发明所述的化合物若含有烯烃双键，除非特别说明，包括顺式异构体和反式异构体。本发明所述的化合物可以以互变异构体(官能团异构体的一种)形式存在，其通过一个或多个双键位移而具有不同的氢的连接点，例如，酮和它的烯醇形式是酮-烯醇互变异构体。本发明化合物含有螺环结构，受环的立体空间结构的影响，环上的取代基可存在于环两侧从而形成相对的顺式(cis)和反式(trans)异构体。各互变异构体及其混合物都包括在本发明的范围中。所有化合物的对映异构体、非对映异构体、外消旋体、内消旋体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物等，均包括在本发明范围中。
本发明化合物可通过对映体特异性合成或从对映异构体混合物拆分以得到个别对映异构体的形式制备。常规拆分技术包括使用光学活性酸形成对映异构体对的每一异构体的游离碱的盐(接着分步结晶和游离碱再生)、使用光学活性胺形成对映异构体对的每一对映异构体的酸形式的盐(接着分步结晶和游离酸再生)、使用光学纯酸、胺或醇形成对映异构体对的每一对映异构体中的每一种的酯或酰胺(接着为色谱分离和手性助剂去除)或使用各种众所周知的色谱方法拆分起始物质或最终产物的对映异构体的混合物。
当公开的化合物的立体化学通过结构命名或描绘时，命名或描绘的立体异构体相对于其他立体异构体为至少60％重量、70％重量、80％重量、90％重量、99％重量或99.9％重量纯。当单一异构体通过结构命名或描绘时，所描绘或命名的对映异构体为至少60％重量、70％重量、80％重量、90％重量、99％重量或99.9％重量纯。光学纯度重量％为对映异构体的重量与对映异构体重量加上其光学异构体的重量比率。
本发明所述的“剂型”指将药物制成的适用于临床使用的形式，包括但不限于散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、混悬剂、注射剂(包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液)、喷雾剂、气雾剂、粉雾剂、洗剂、搽剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂、含漱剂或栓剂，更优选散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、注射剂、软膏剂、含漱剂或栓剂。
发明的有益效果
1、本发明化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体具有优异的高选择性的HPK1活性抑制作用。
2、本发明化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体在生物体内具有良好的药代动力学性质，作用持久，具有良好的暴露量和生物利用度，能够治疗和/或预防由HPK1介导的疾病。
3、本发明化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体对HPK1介导的癌症具有较好的治疗作用。
具体实施方案
下面将结合具体实施方式对本发明技术方案进行描述，对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
下述实验中所用缩写代表的含义如下：
CuCl2·2H2O：二水合氯化铜 Boc2O：二碳酸二叔丁酯 DIEA：N,N-二异丙基乙胺
DCM：二氯甲烷 THF：四氢呋喃 PE：石油醚
EA：乙酸乙酯 MeOH：甲醇 TBSCl：叔丁基二甲基氯硅烷
CuI：碘化亚酮 MeCN：乙腈 SiO2：二氧化硅
Pd2(dba)3：三二亚苄基丙酮二钯 TFA：三氟乙酸
Xantphos：4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽 LDA：二异丙基氨基锂
XPhos-Pd-G2：氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)
RuPhosPdG3：甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)
Pd(dppf)Cl2：1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯 m-CPBA：间氯过氧苯甲酸
实施例1：7-((7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备(化合物1)
Figure BDA0003745146690000181
1. 6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-2-胺三氟乙酸盐的制备
将2-(叔丁基氨基)-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-6-羧酸叔丁酯(1.0g)溶于三氟乙酸(10mL)中，体系在80℃反应2小时后经浓缩直接用于下一步反应。
2. 2-氨基-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-6-羧酸叔丁酯的制备
将上步粗品溶于二氯甲烷(10mL)中，加入三乙胺(1.0g,9.89mmol)和Boc2O(680mg,3.11mmmol)体系在25℃反应1小时后经浓缩，残余物柱层析(EA/PE＝50％)得目标化合物100mg。
3. 2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-氯-3-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-6-羧酸叔丁酯的制备
将2-氨基-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-6-羧酸叔丁酯(100mg,0.38mmol)、7-溴-4氯-1-氧代异二氢吲哚-2-羧酸叔丁酯(134mg,0.39mmol)、Pd2(dba)3(40mg,0.05mmol)、Xantphos(29mg,0.05mmol)和碳酸铯(260mg,0.80mmol)溶于10ml二氧六环中，体系在N2100℃下反应5.5小时结束，经浓缩，残余物经柱层析(EA/PE＝50％)得目标产物85mg，收率为42.5％。
4. 2-((2-(叔丁氧羰基)-3-氧代-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-4-基)氨基)-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-6-羧酸叔丁酯的制备
将2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-氯-3-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-6-羧酸叔丁酯(75mg,0.14mmol)、双联硼酸频那醇酯(75mg,0.30mmol)、乙酸钾(35mg,0.36mmol)和XPhos-Pd-G2(20mg,0.03mmol)溶于二氧六环(5mL)中，在90℃下反应2小时结束。经浓缩，残余物柱层析(EA/PE＝35％)得目标产物80mg，收率为90.9％。
5. 2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-6-羧酸叔丁酯的制备
将2-((2-(叔丁氧羰基)-3-氧代-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-4-基)氨基)-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-6-羧酸叔丁酯(80mg,0.13mmol)、3-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶(35mg,0.16mmol)、磷酸钾(65mg,0.31mmol)和XPhos-Pd-G2(28mg,0.03mmol)溶于二氧六环(7mL)和水(1.3mL)中，在90℃下反应2小时结束。经浓缩，残余物柱层析(EA/PE＝50％)得目标产物30mg，收率为37.3％。
6. 4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-7-((6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-2-基)氨基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐的制备
将2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-c]氮杂卓-6-羧酸叔丁酯(25mg)溶于盐酸乙酸乙酯溶液5mL中，在25℃下反应1小时，浓缩后，直接用于下一步反应。
7. 7-((7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备
将上步粗品溶于甲醇(5.0mL)中，加入37％甲醛(30mg,0.37mmol)、乙酸(24mg,0.40mmol)和氰基硼氢化钠(30mg,0.48mmol)，在25℃下反应1.0小时结束。经浓缩，残余物柱层析(EA/PE＝60％)得目标产物2mg。
分子式:C26H26N6O 分子量:438.5 LC-MS(M/e):438.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:9.70(s,1H),8.81-8.8(m,1H),8.32(s,1H),7.96(s,1H),7.65-7.61(d,1H),7.59-7.57(d,1H),7.35(s,1H),7.15-7.05(d,1H),6.75-6.73(d,1H),6.08(s,1H),4.61-6.59(s,2H),3.3-3.2(m,2H),2.9-2.85(m,2H),2.75-2.6(m,4H),2.41(s,3H),2.39(s,3H).
实施例2：7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备(化合物2)
Figure BDA0003745146690000191
Figure BDA0003745146690000201
1. 7,8-二氢喹啉-5(6H)-一肟的制备
将7,8-二氢喹啉-5(6H)-酮(10g,67.9mmol)、盐酸羟胺(7.08g,101.9mmol)、吡啶(10.74g,135.8mmol)溶于乙醇(150mL)中,80℃下反应2h，降温后，加入水(600mL)，抽滤，滤饼干燥后得到目标化合物(11g,99.8％)。
2. 7,8-二氢喹啉-5(6H)-酮邻甲苯磺酰肟的制备
将7,8-二氢喹啉-5(6H)-一肟(11g,67.8mmol)、三乙胺(13.7g,135.6mmol)、对甲苯磺酰氯(15.5g,81.4mmol)溶于二氯甲烷(150mL)中，20℃下反应2小时，反应结束后加入水(200mL)洗涤，分液，有机相旋干后经柱层析(乙酸乙酯/正庚烷＝50％)得到目标化合物(19g,88.5％)。
3. 5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-6-酮的制备
将7,8-二氢喹啉-5(6H)-酮邻甲苯磺酰肟(19g,60mmol)、醋酸钾(17.66g,180mmol)溶于乙醇(100mL)与水(200mL)中，95℃下反应16小时，旋走乙醇，乙酸乙酯(100mLx5)萃取，合并有机相，有机相旋干经柱层析(乙酸乙酯/正庚烷＝0-100％)得到目标化合物(4.4g,45.2％)。
4. 5-甲基-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-6-酮的制备
将5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-b]氮杂-6-酮(3.4g,21.0mmol)溶于四氢呋喃(100mL)中，0℃加入60％氢化钠(1g,25.0mmol)，加料完毕后，0℃反应1小时，0℃条件下加入碘甲烷(3.55g,25.0mmol)，加料完毕后于25℃反应4小时，降温至0℃，加水淬灭，溶剂旋干后经柱层析(0-100％乙酸乙酯)得到目标化合物(3.3g,89.2％)。
5. 5-甲基-6-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-1-氧化物的制备
将5-甲基-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-b]氮杂-6-酮(3.3g,18.8mmol)溶于二氯甲烷(100mL)，加入间氯过氧苯甲酸(4.8g,28.1mmol)，25℃反应2小时。LCMS检测反应结束。二氯甲烷稀释反应液，饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，有机相干燥浓缩直接用于下一步。
6. 2-(叔丁胺基)-5-甲基-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-6-酮的制备
将5-甲基-6-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂1-氧化物(N/A,18.8mmol)溶于二氯甲烷(50mL)中，加入对甲苯磺酸酐(12.3g,37.6mmol)，叔丁胺(6.9g,94.0mmol)，加毕，25℃反应2小时。LCMS检测反应结束。加水洗涤，二氯甲烷萃取，有机相干燥，旋干，硅胶柱层析分离(甲醇:二氯甲烷＝1:10)得目标化合物700mg，收率15.1％(两步)。
7.N-(叔丁基)-5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-胺的制备
将2-(叔丁胺基)-5-甲基-5,7,8,9-四氢-6H-吡啶并[3,2-b]氮杂-6-酮(700.0mg,2.8mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，0℃下加入氢化锂铝(538.5mg,14.2mmol)，加毕，25℃反应4小时。LCMS检测反应结束。0℃下，加水淬灭反应，硅藻土过滤，滤液浓缩，硅胶柱层析分离(甲醇:二氯甲烷＝1：20)得目标化合物420mg，收率63.6％。
8. 5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-胺的制备
将N-(叔丁基)-5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-胺(420.0mg,1.80mmol)溶于三氟乙酸(10mL)中，80℃下反应6小时。LCMS检测反应结束。浓缩溶剂，固体用二氯甲烷溶解，饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干，硅胶柱层析分离(甲醇:二氯甲烷＝1:10)得目标化合物300mg，收率94.0％。
9. 4-氯-7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的制备
将5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-胺(297.7mg,1.7mmol)、7-溴-4-氯-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(581.9mg,1.7mmol)、Pd2(dba)3(155.6mg,0.17mmol)、XantPhos(196.8mg,0.34mmol)和碳酸铯(1.1g,3.4mmol)溶于1,4-二氧六环(22mL)中，氮气保护下，100℃下反应2小时。LCMS检测反应结束。降温至25℃，硅藻土过滤，滤液浓缩，经硅胶柱层析分离(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得目标化合物700mg，收率94.0％。
10. 7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基)-1-氧代-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧硼杂环-2-基)异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的制备
将4-氯-7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基)-1-氧异吲哚-2-羧酸叔丁酯(479.0mg,1.1mmol)溶于1,4-二氧六环(50mL)中，加入双联硼酸频哪醇酯(558.8mg,2.2mmol)、乙酸钾(215.8mg,2.2mmol)和Xphos Pd G2(85.8mg,0.11mmol)，加毕，氮气保护下90℃反应4小时。LCMS检测反应结束。浓缩溶剂，硅胶柱层析分离(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得目标化合物470mg，收率81.2％。
11. 7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的制备
将7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基)-1-氧代-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧硼杂环-2-基)异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(470.0mg,0.88mmol)，3-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶(139.7mg,0.66mmol)，Xphos Pd G2(177.8mg,0.23mmol)，磷酸钾(483.4mg,2.28mmol)溶于1,4-二氧六环(20mL)和水(2mL)中，加毕，氮气保护下90℃反应6小时。LCMS检测反应结束。浓缩溶剂，硅胶柱层析分离(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得目标化合物210mg，收率59.1％。
12. 7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐的制备
将7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(200.0mg,0.37mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)中，加入氯化氢/乙酸乙酯(5mL)，加毕，25℃反应30分钟。LCMS检测反应结束。过滤得固体，固体干燥得目标化合物160mg，收率90.7％。
13. 7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备
将7-((5-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,2-b]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐(60mg,0.13mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)中，25℃反应30分钟。分液，有机相浓缩Pre-TLC板纯化(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得目标化合物24.0mg，收率43.3％。
分子式:C26H26N6O 分子量:438.5 LC-MS(M/e):439.1(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:9.77(s,1H),8.74(s,1H),8.52-8.57(m,2H),8.23(s,1H),7.76(d,J＝8.8Hz,1H),7.66(d,J＝8.4Hz,1H),7.31(d,J＝8.8Hz,1H),7.17(d,J＝8.4Hz,1H),6.80(d,J＝8.4Hz,1H),4.49(s,2H),2.92-2.95(m,2H),2.83-2.85(m,2H),2.78(s,3H),2.33(s,3H),1.71-1.82(m,2H),1.55-1.68(m,2H).
实施例3：7-((7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基异吲哚啉-1-酮的制备(化合物4)
Figure BDA0003745146690000221
1. 5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯的制备
将炔丙胺(20.0g,0.36mol)溶于异丙醇(500mL)中，体系升至60℃，加入4-氧代氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(50.0g,0.23mol)和CuCl2·2H2O(4.0g,23.0mmol)，将体系温度升至84℃反应16.0小时结束。反应完毕，浓缩，残余物经柱层析(二氯甲烷:甲醇＝10:1))得到化合物17g，收率：29.8％。
2. 7-(叔丁氧基羰基)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-1-氧化物的制备
将5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯(17.0g，68.5mmol)溶于二氯甲烷(200mL)中，向体系中加入间氯过氧苯甲酸(14.3g,82.9mmol)，在25℃反应2.0小时。反应结束后，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经分液，浓缩有机相得到化合物17g，收率：94.0％。
3. 2-(叔丁基氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯的制备
将7-(叔丁氧基羰基)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-1-氧化物(17.0g，68.5mmol)溶于二氯甲烷(300mL)中，在20℃下向体系中加入对甲苯磺酸酐(14.3g,82.9mmol)和叔丁胺(21.0g,287.3mmol)，反应3.0小时后结束，经水洗、分液、浓缩有机相残余物并经柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝10％)得目标化合物900mg，收率：4.0％。
4. 6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-胺三氟乙酸盐的制备
将2-(叔丁基氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯(420mg，1.31mmol)溶于三氟乙酸(10mL)中，升温至80℃反应2小时。反应结束后经浓缩直接用于下一步反应。
5. 2-氨基-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯的制备
将上步粗品溶于二氯甲烷(10mL)中，加入三乙胺(300mg,2.96mmol)和Boc2O(370mg,1.69mmol)体系在25℃反应1小时。反应结束后浓缩反应液，经柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝50％)得目标化合物300mg，两步收率为86.7％。
6. 2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-氯-3-氧化异吲哚啉-4-基)氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯的制备
将2-氨基-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯(290mg,1.10mmol)、7-溴-4-氯-1-氧代异二氢吲哚-2-羧酸叔丁酯(400mg,1.15mmol)、Pd2(dba)3(120mg,0.13mmol)、Xantphos(70mg,0.12mmol)和碳酸铯(700mg,2.15mmol)溶于10ml二氧六环中，N2保护下升温至100℃反应6.0小时，反应结束后，经浓缩、柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝50％)得目标产物180mg收率为30.9％。
7. 2–((2-(叔丁氧羰基)-3-氧代-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-4-基)氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯的制备
将2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-氯-3-氧化异吲哚啉-4-基)氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯(160mg,0.30mmol)、双联硼酸频那醇酯(155mg,0.61mmol)、乙酸钾(60mg,0.61mmol)和XPhos-Pd-G2(25mg,0.03mmol)溶于二氧六环(10mL)中，在90℃下反应2小时。反应结束后经浓缩、柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝35％)得目标产物150mg，收率为80.0％。
8. 2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯的制备
将2–((2-(叔丁氧羰基)-3-氧代-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异吲哚啉-4-基)氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯(140mg,0.23mmol)、3-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶(50mg,0.23mmol)、磷酸钾(110mg,0.52mmol)和XPhos-Pd-G2(50mg,0.06mmol)溶于二氧六环(10mL)和水(2mL)中，在90℃下反应2小时。反应结束后，经浓缩、柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝50％)得目标产物100mg，收率为70.0％。
9. 4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-7-((6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐的制备
将2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯(90mg,0.14mmol)溶于盐酸乙酸乙酯溶液5mL中，在25℃下反应1小时，经浓缩后直接用于下一步反应。
10. 7-((7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基异吲哚啉-1-酮的制备
将上步粗品溶于甲醇(5.0mL)中，加入37％甲醛(40mg,0.49mmol)、乙酸(90mg,1.50mmol)和氰基硼氢化钠(120mg,1.91mmol)，在25℃下反应1.0小时。反应结束后经浓缩、柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝60％)得目标产物11mg，两步收率为17.4％。
分子式:C26H26N6O 分子量:438.5 LC-MS(M/e):439.0(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:9.70(s,1H),8.81-8.8(m,1H),8.32(s,1H),7.96(s,1H),7.65-7.61(d,1H),7.59-7.57(d,1H),7.35(s 1H),7.15-7.05(d,1H),6.75-6.73(d,1H),6.08(s,1H),4.61-6.59(s,2H),3.3-3.2(m,2H),2.9-2.85(m,2H),2.75-2.6(m,4H),2.41(s,3H),2.39(s,3H).
实施例4：7-((7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓-3-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备(化合物5)
Figure BDA0003745146690000241
1.N-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)特戊酰胺的制备
将5-溴-4-甲基-2-氨基吡啶(50g,0.27mol)溶于DCM(500mL)，0℃下加入三乙胺(35g,0.35mol)、特戊酰氯(39g,0.32mol)，加毕，移至35℃反应4h。反应液中加入二氯甲烷与水，分液萃取三次，有机相旋干，经硅胶柱分离(PE:EA＝5:1)得产品52g，收率72％。
2.N-(5-溴-4-(2-羟乙基)吡啶-2-基)特戊酰胺的制备
将N-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)特戊酰胺(44g,0.16mol)溶于THF(300mL)，氮气保护，零度下滴加LDA四氢呋喃溶液(2M,200mL,0.4mol)，1h后加入多聚甲醛(29g,0.96mol)，加毕，移至30℃反应16h。反应完毕，反应液加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭，再加入EA与水分液萃取三次，有机相干燥旋干，经正向制备分离(PE:EA＝5:1-1:1)得产品22.5g，收率46％。
3.N-(5-溴-4-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙基)吡啶-2-基)特戊酰胺的制备
将N-(5-溴-4-(2-羟乙基)吡啶-2-基)特戊酰胺(22g,73.3mmol)溶于DCM(200mL)，0℃下加入咪唑(10g,146.6mmol)，TBSCl(16.7g,110.0mmol)，30℃反应1h。反应完毕，加入DCM与稀盐酸分液萃取三次，有机相旋干，得产品28.1g，收率92.7％。
4.(E)-N-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-5-(2-乙氧基乙烯基)吡啶-2-基)特戊酰胺的制备
将N-(5-溴-4-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙基)吡啶-2-基)特戊酰胺(28g,67.6mmol)、(Z)-2-(2-乙氧基乙烯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(16g,81.1mmol)、四(三苯基膦)钯(7.9g,6.8mmol)和碳酸钠(14.3g,135.2mmol)溶于二氧六环(300mL)，加水(50mL)，氮气保护下，80℃反应4h。反应完毕，反应液加入EA与水分液萃取三次，有机相旋干，经正相制备分离(PE:EA＝10:1)得产品9g，收率32.8％。
5.N-(4-(2-羟乙基)-5-(2-氧乙基)吡啶-2-基)特戊酰胺的制备
将(E)-N-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-5-(2-乙氧基乙烯基)吡啶-2-基)特戊酰胺(8.9g,21.9mmol)溶于乙腈(200mL)，加入1M盐酸溶液(109.6mL,109.6mmol)，80℃下反应2h。反应完毕后。加入饱和碳酸氢钠溶液调pH＝8-9，加入EA与水分液萃取三次，有机相旋干，经反相制备分离(水:乙腈＝1:2)得产品3g，收率51.9％。
6.N-(4,5-双(2-羟乙基)吡啶-2-基)特戊酰胺的制备
将N-(4-(2-羟乙基)-5-(2-氧乙基)吡啶-2-基)特戊酰胺(3g,11.4mmol)溶于THF(5mL)，加甲醇(5mL)，0℃下加入硼氢化钠(0.8g,22.8mmol)，30℃反应2h。反应完毕，加水淬灭，再加入EA与水分液萃取三次，有机相旋干，经正相制备分离(DCM:MeOH＝20:1)得产品1.5g，收率50％。
7. 6-特戊酰胺基吡啶-3,4-双乙氧基甲磺酸酯的制备
将N-(4,5-双(2-羟乙基)吡啶-2-基)特戊酰胺(1.5g,5.6mmol)溶于DCM(20mL)，0℃下加入三乙胺(1.7g,16.8mmol)，甲磺酰氯(1.9g,16.8mmol)，移至30℃反应2h。反应完毕，加入DCM与水分液萃取三次，有机相旋干，得粗品2.3g。
8.N-(6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓-3-基)特戊酰胺的制备
将6-特戊酰胺基吡啶-3,4-双乙氧基甲磺酸酯(2.3g粗品)溶于乙腈(6mL)，加氨水(15mL)，封管90℃反应2h。反应完毕，旋干，经正相制备分离(DCM:MeOH＝10:1)得产品860mg，两步收率30.7％。
9.N-(7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓-3-基)特戊酰胺的制备
将N-(6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂-3-基)特戊酰胺(840mg,3.4mmol)溶于甲醇(30mL)，加入甲醛水溶液(1.4g,17.0mmol)和乙酸(304mg,3.4mmol)，30℃反应1h，再加入氰基硼氢化钠(1.1g,17.0mmol)，继续反应2h。反应完毕，加入EA与水分液萃取三次，有机相旋干，经正相制备分离(DCM:MeOH＝20:1)得产品530mg，收率59.7％。
10. 7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓-3-胺的制备
N-(7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂-3-基)特戊酰胺(510mg,1.9mmol)溶于6M HCl(40mL,240mmol)，80℃下反应16h。反应完毕，旋干反应液，得粗品500mg。
11. 3-氯-7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓的制备
将7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓-3-胺(250mg,1.2mmol)溶于浓盐酸，0℃下加入亚硝酸钠(248mg,3.6mmol)的水溶液(1mL)，0℃下反应1h。反应完毕后，加入饱和碳酸氢钠溶液调pH＝8-9，旋干溶剂，经反相C18制备色谱分离(水:甲醇＝4:1-2:1)得产品110mg。
12. 7-((7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓-3-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的制备
将3-氯-7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓(90mg,0.46mmol)、7-氨基-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(146mg,0.46mmol)、RuPhosPdG3(38mg,0.046mmol)、碳酸铯(299mg,0.92mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)，氮气保护下，100℃反应4h。反应完毕，旋干溶剂，经反相C18制备色谱分离(水:甲醇＝1:8)得产品110mg，收率44.5％
13. 7-((7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓-3-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备
将7-((7-甲基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[3,4-d]氮杂卓-3-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(100mg,0.2mmol)，溶于乙酸乙酯(2mL)，加入盐酸的乙酸乙酯溶液(10mL)，30℃反应1h。反应完毕，抽滤，滤饼经乙酸乙酯洗三次，旋干，得产品70mg，收率86.0％。
分子式：C26H26N6O分子量：438.5LC-MS(M/e):439.2
1H-NMR(400MHz,d-DMSO)δ:11.4(s,1H),10.3(s,1H),8.8(s,1H),8.6(s,1H),8.3(s,1H),8.2(d,1H),8.1(s,1H),7.8(d,2H),7.2(d,1H),7.1(s,1H),4.5(s,2H),3.5(m,2H),3.3(m,2H),3.0(m,4H),2.8(s,3H),2.3(s,3H).
实施例5：7-((7-环丙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]-吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐的制备(化合物6)
Figure BDA0003745146690000261
1. 7-环丙基-2-甲氧基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓的制备
30℃，将2-甲氧基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓(890mg,5.0mmol)、(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷(1.8g,10.0mmol)溶于甲醇(10mL)中，搅拌10min后，加入氰基硼氢化钠(1.0g,15.0mmol)，加毕，搅拌反应3h。检测反应结束。加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相干燥浓缩硅胶柱纯化(乙酸乙酯:石油醚＝2:5)得标题化合物1.0g，收率：91.7％。
2. 7-环丙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-醇的制备
将7-环丙基-2-甲氧基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓(1.0g,4.6mmol)和氢溴酸的醋酸溶液(33％)(8mL)。100℃下反应16小时。浓缩，粗品直接用于下一步。
3. 7-环丙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-氧基-三氟甲磺酸酯的制备
将7-环丙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-醇(粗品,4.6mmol)溶于二氯甲烷(25mL)中，加入三乙胺(930mg，9.2mmol)。降温至0℃，滴加三氟甲烷磺酸酐(1.5g，5.5mmol)，0℃下反应1小时。LCMS检测反应结束。浓缩，用硅胶柱层析纯化(正庚烷:乙酸乙酯＝1:2)得目标化合物1.0g，两步收率：66.7％。
4. 7-((7-环丙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的制备
将7-环丙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-氧基-三氟甲磺酸酯(120mg,0.36mmol)溶于1,4-二氧六环(12mL)，加入7-氨基-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异二氢吲哚-2-羧酸叔丁酯(169mg,0.45mmol)、RuPhos-Pd-G3(39mg,0.047mmol)和碳酸铯(293mg,0.90mmol)。N2保护下，100℃反应5h，反应完毕，浓缩，用硅胶柱层析纯化(正庚烷:乙酸乙酯＝1:4)得产品100mg，收率49.2％。
5. 7-((7-环丙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]-吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐的制备
30℃，7-((7-环丙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯溶于乙酸乙酯的盐酸溶液(10mL)中，搅拌1小时。LCMS检测反应结束。抽滤，减压蒸干得标题化合物70mg，收率：69.4％。
分子式:C28H29ClN6O分子量:500.2LC-MS(M/e):465.2(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.10(s,1H),10.07(s,1H),8.85(s,1H),8.59(s,1H),8.51(m,1H),8.27(s,1H),7.78-7.70(m,2H),7.62-7.60(m,1H),7.20-7.18(m,1H),6.95-6.93(m,1H),3.77-3.71(m,3H),3.67-3.39(m,2H),3.36-3.22(m,2H),2.99-2.89(m,2H),2.49(s,3H),1.26-1.23(m,2H),0.87-0.85(m,2H).
实施例6：7-(7-(2-羟乙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备(化合物8)
Figure BDA0003745146690000271
1. 6-甲氧基-2,3-双(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙基)吡啶的制备
将2,3-二溴-6-甲氧基吡啶(1.5g,5.6mmol)和2-(四氢-2H-吡喃-2-氧基)乙基三氟硼酸钾(4.0g,16.9mmol)溶于1,4-二氧六环/水(60mL/20mL)，加入醋酸钯(380mg，1.7mmol)、正丁基二(1-金刚烷基)膦(400mg，1.1mmol)和碳酸铯(11.0g，33.8mmol)，用氮气换气，在氮气保护下100℃下反应16小时。用水(20mL)和乙酸乙酯(30mL)萃取，粗品用硅胶柱层析纯化(正庚烷:乙酸乙酯＝7:1)得产品1.5g，收率73.0％。
2. 2,2'-(6-甲氧基吡啶-2,3-二基)双(乙烷-1-醇)的制备
将6-甲氧基-2,3-双(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙基)吡啶(1.5g,4.1mmol)溶于甲醇(50mL)中，加入对甲苯磺酸(750mg,4.3mmol)。25℃下反应16小时。加入饱和碳酸氢钠(20mL)，用二氯甲烷(50mL)萃取，有机相用水(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，干燥，浓缩，得粗品700mg。
3.(6-甲氧基吡啶-2,3-二基)双(乙烷-2,1-二基)二甲磺酸盐的制备
将2,2'-(6-甲氧基吡啶-2,3-二基)双(乙烷-1-醇)(700mg,粗品)溶于二氯甲烷(50mL)中，0℃下加入三乙胺(1.9g,18.8mmol)和甲基磺酰氯(1.4g,12.2mmol)。0℃下反应0.5小时。加入饱和碳酸氢钠(20mL)，用二氯甲烷(70mL)萃取，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，干燥，浓缩，粗品直接用于下一步。
4. 2-甲氧基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓的制备
将(6-甲氧基吡啶-2,3-二基)双(乙烷-2,1-二基)二甲磺酸盐(粗品)溶于二甲基亚砜(10mL)中，加入氨水(25％)(10mL)。40℃下反应5小时。加入水(30mL)和乙酸乙酯(50mL)萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，干燥，浓缩，得粗品240mg。水相浓缩加入(二氯甲烷/甲醇50mL/5mL)，过滤除去固体，浓缩，得粗品300mg。
5. 6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-醇的制备
封管中加入2-甲氧基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓(220mg,1.2mmol)和氢溴酸的醋酸溶液(33％)(8mL)。100℃下反应16小时。浓缩，粗品直接用于下一步。
6. 2-羟基-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯的制备
将6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-醇(粗品)溶于四氢呋喃(15mL)中，加入三乙胺(1.3g,12.8mmol)和二碳酸二叔丁酯(550mg,2.5mmol)。25℃下反应1小时。加入水(10mL)和乙酸乙酯(15mL)萃取，浓缩，C18柱纯化(甲醇＝0-70％)得目标化合物200mg。
7. 2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯的制备
将2-羟基-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯(180mg,0.68mmol)溶于二氯甲烷(15mL)中，加入三乙胺(210mg,2.1mmol)。降温至0℃，滴加三氟甲烷磺酸酐(290mg,1.0mmol)，0℃下反应1小时。浓缩，用硅胶柱层析纯化(正庚烷:乙酸乙酯＝1:2)得目标化合物180mg，收率：66.7％。
8. 2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯的制备
将2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯(180mg,0.45mmol)溶于1,4-二氧六环(12mL)，加入7-氨基-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异二氢吲哚-2-羧酸叔丁酯(169mg,0.45mmol)、RuPhos-Pd-G3(39mg,0.047mmol)和碳酸铯(293mg,0.90mmol)。N2保护下，100℃反应5h，反应完毕，浓缩，用硅胶柱层析纯化(正庚烷:乙酸乙酯＝1:4)得产品120mg，收率43.0％。
9. 4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-7-((6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐的制备
将2-((2-(叔丁氧基羰基)-7-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-3-氧代异吲哚啉-4-基)氨基)-5,6,8,9-四氢-7H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-7-羧酸叔丁酯(50mg，0.11mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M)(1mL)。25℃下反应1小时。浓缩，粗品直接用于下一步。
10. 7-((7-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备
将4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-7-((6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐(粗品)和叔丁基二甲基硅氧烷基乙醛(55mg,0.32mmol)溶于甲醇(5mL)中，加入醋酸(50mg,0.83mmol)。25℃下搅拌10min。加入氰基硼氢化钠(25mg，0.40mmol)。25℃下反应1小时。部分产物脱TBS，反应液直接用于下一步。
11. 7-(7-(2-羟乙基-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备
向7-((7-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-d]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的反应液中加入盐酸(2mL)。25℃下反应1小时。加入饱和碳酸氢钠调节pH至8左右，用二氯甲烷/甲醇＝10:1(20mL)萃取，浓缩，用制备硅胶板纯化(二氯甲烷/甲醇＝8:1)，得粗品50mg，C18柱纯化(甲醇/水(0.05％HCl)＝3:2)，得粗品30mg，加入饱和碳酸氢钠(10mL)，用(二氯甲烷/甲醇＝10:1)(20mL)萃取，浓缩得目标化合物19mg。
分子式:C27H28N6O2分子量:468.6LC-MS(M/e):469.2(M+H+)
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.71(s,1H),8.81(d,J＝8.8Hz,1H),8.33(s,1H),7.97(s,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.57-7.54(m,1H),7.33-7.31(m,1H),7.07-7.04(m,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),6.03(s,1H),4.47(s,2H),3.69-3.66(m,2H),3.20-3.18(m,2H),2.95-2.80(m,4H),2.76-2.71(m,4H),2.40(s,3H).
实施例7：7-((8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备(化合物11)
Figure BDA0003745146690000291
1. 3-(3-((叔丁氧羰基)氨基)丙-1-炔-1-基)吡啶甲酸甲酯的制备
依次称取3-溴吡啶甲酸甲酯(24.0g,0.11mol)、丙基氨基甲酸叔丁酯(25.6g,0.16mol)、CuI(2.1g,0.011mol)、Pd(dppf)Cl2(8.0g,0.011mol)、DIEA(42.6g,0.33mol)和乙腈(500mL)，氮气置换3次，85℃反应14h，LC-MS显示反应完毕，反应液过滤，滤液旋干，残余物经柱层析(SiO2，PE:EA＝5:1-3:1-2:1)分离，得产物23.0g，收率71.3％。
2. 3-(3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)吡啶甲酸甲酯的制备
向3-(3-((叔丁氧羰基)氨基)丙-1-炔-1-基)吡啶甲酸甲酯(23.0g,79.2mmol)的甲醇(400mL)溶液中，加入Pd/C(12.0g)，氢气置换3次，20℃反应15h，LC-MS显示反应完毕，反应液过滤，滤液旋干，得粗品23.0g。
3. 3-(3-氨基丙基)吡啶甲酸甲酯盐酸盐的制备
向3-(3-((叔丁氧羰基)氨基)丙基)吡啶甲酸甲酯(23.0g粗品)的甲醇(100mL)溶液中加入HCl/二氧六环溶液(4M,200mL,800.0mmol)，25℃反应1h，LC-MS显示反应完毕，反应液旋干，得粗品16.0g。
4. 5,6,7,8-四氢-9H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-9-酮的制备
向3-(3-氨基丙基)吡啶甲酸甲酯盐酸盐(16.0g粗品)的甲醇(100mL)和二氧六环(300mL)溶液中加入碳酸铯(45.2g,0.14mol)，100℃下反应15h，LC-MS显示反应完毕，反应液过滤，滤液旋干，残余物经柱层析(SiO2，DCM:MeOH＝98:2-95:5)分离，得产物11.0g。
5. 8-(甲基-d3)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-9-酮的制备
0℃下，向5,6,7,8-四氢-9H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-9-酮(6.0g,37.0mmol)的四氢呋喃(80mL)溶液中加入氢化钠(60％,2.2g,55.0mmol)，0℃反应0.5h，后加入氘代碘甲烷(5.4g,37.2mmol)，25℃反应13h，LC-MS显示反应完毕。向反应液加甲醇和少量水淬灭反应，反应液旋干，残余物经柱层析(SiO2，DCM：MeOH＝98:2-96:4)分离，得产物6.3g，收率95.0％。
6. 8-(甲基-d3)-9-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-1-氧化物的制备
向8-(甲基-d3)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-9-酮(6.3g,35.2mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液中加入m-CPBA(85％,10.7g,52.7mmol)，20℃反应13h，LC-MS显示反应完毕，向反应液中加入少量饱和碳酸氢钠溶液，反应液旋干，残余物用DCM/MeOH(10:1)打浆，过滤，滤液旋干，残余物经柱层析(SiO2，DCM:MeOH＝30:1-10:1)分离，得粗品7.0g。
7. 2-(叔丁胺基)-8-(甲基-d3)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-9-酮的制备
0℃下，向8-(甲基-d3)-9-氧代-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-1-氧化物(7.0g粗品)和叔丁基胺(18.4g,0.25mol)的二氯甲烷(300mL)溶液中加入对甲基苯磺酸酐(35.2g,0.12mol)，25℃反应14h，LC-MS显示反应完毕，反应液过滤，滤液旋干，残余物经柱层析(SiO2，DCM:MeOH＝98:2-95:5)分离，得产物3.5g。
8.N-(叔丁基)-8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-胺的制备
0℃下，向2-(叔丁胺基)-8-(甲基-d3)-5,6,7,8-四氢-9H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-9-酮(3.5g，14.0mmol)的四氢呋喃(80mL)溶液中加入氢化铝锂(1.6g，42.1mmol)，80℃反应4h，LC-MS显示反应完毕，0℃下，向反应液中滴加水(1.6mL)和氢氧化钠溶液(10％，1.6mL)，25℃搅拌1h，过滤，滤液旋干，残余物经柱层析(SiO2，DCM:MeOH＝98:2-96:4)分离，得产物1.7g，收率51.4％。
9. 8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-胺的制备
N-(叔丁基)-8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-胺(1.7g,7.2mmol)溶于三氟乙酸(30mL)中，80℃反应5h，LC-MS显示反应完毕，反应液旋干，残余物用DCM稀释，加少量饱和碳酸氢钠溶液调pH至8，旋干，残余物经柱层析(SiO2，DCM:MeOH＝10:1)分离，得粗品1.5g。
10. 4-氯-7-((8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶[2,3-c]氮杂卓-2-基)氨基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的制备
依次称取8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-胺(600mg粗品)、7-溴-4-氯-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(1.2g粗品)、Pd2(dba)3(300mg,0.33mmol)、XantPhos(191mg,0.33mmol)和碳酸铯(3.2g,9.9mmol)和二氧六环(20mL)，氮气置换3次，100℃反应13h，LC-MS显示反应完毕，反应液过滤，滤液旋干，残余物经柱层析(SiO2，DCM:MeOH＝98:2-94:6)分离，得产物960mg。
11. 7-((8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-基)氨基)-1-氧代-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的制备
依次称取4-氯-7-((8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶[2,3-c]氮杂卓-2-基)氨基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(900mg,2.0mmol)，乙酸钾(589mg,6.0mmol)，联硼酸频那醇酯(1.0g,3.9mmol)，XPhos-Pd-G2(157mg,0.20mmol)和二氧六环(30mL)，氮气置换3次，90℃反应2h，LC-MS显示反应完毕，反应液旋干，残余物经柱层析(SiO2，DCM：MeOH＝95:5-92:8)分离，得产物820mg，收率76.0％。
12. 7-((8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑基[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的制备
依次称取7-((8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-基)氨基)-1-氧代-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(800mg,1.5mmol)、3-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶(380mg,1.8mmol)、XPhos-Pd-G2(118mg,0.15mmol)、磷酸钾(955mg,4.5mmol)、二氧六环(20mL)和水(4mL)，氮气置换3次，100℃反应2h，LC-MS显示反应完毕。反应液旋干，残余物经柱层析(SiO2，DCM:MeOH＝98:2-95:5)分离，得产物670mg，收率82.6％。
13. 7-((8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮的制备
向7-((8-(甲基-d3)-6,7,8,9-四氢-5H-吡啶并[2,3-c]氮杂卓-2-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(650mg,1.2mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入HCl/二氧六环溶液(4M,10mL,40.0mmol)，30℃反应1h，LC-MS显示反应完毕，反应液旋干，残余物用DCM/MeOH溶解，饱和碳酸氢钠溶液洗涤，有机相旋干，残余物经柱层析(SiO2,DCM:MeOH＝96:4-94:6)分离，得粗品，再用DCM/MeOH打浆，过滤，滤饼干燥，得产物260mg，收率49.1％。
分子式:C26H23D3N6O分子量:441.6LC-MS(m/z):442.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.91(s,1H),8.79(s,1H),8.60(d,J＝8.4,1H),8.57(s,1H),8.24(s,1H),7.77(d,J＝9.0,1H),7.68(d,J＝8.4,1H),7.44(d,J＝8.0,1H),7.17(d,J＝8.0,1H),6.75(d,J＝8.0,1H),4.50(s,2H),3.87(s,2H),2.95-2.92(m,2H),2.79-2.75(m,2H),2.33(s,3H),1.70-1.63(m,2H).
实施例8：7-((1-(2-(二甲氨基)乙基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐的制备(化合物15的盐酸盐)
Figure BDA0003745146690000311
1.(2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将5-溴-1H-吡咯[2,3-c]吡啶(1.1g,5.58mmol)溶于DMF(25mL)中，0℃加入叔丁醇钾(813mg,7.25mmol)，10min后加入1,2,3-恶噻唑烷-3-羧酸叔丁酯2,2-二氧化物(1.5g,6.70mmol)，25℃继续反应16h，LCMS检测反应完成，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相旋干,硅胶柱层析(EA:PE＝1:1)得产品1.5g，收率79.0％。
2.(2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将(2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(900mg,2.65mmol)溶于DMF(15mL)中，0℃加入NaH(159mg,3.98mmol)，10min后加入碘甲烷(451mg,3.18mmol)，25℃继续反应2h，LCMS检测反应完成，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相旋干,硅胶柱层析(EA:PE＝1:1)得产品900mg，收率95.8％。
3. 2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基)-N-甲基乙烷-1-胺三氟乙酸盐的制备
将(2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(900mg,2.54mmol)溶于DCM(8mL)中，25℃加入TFA(2mL)，25℃继续反应2h，LCMS检测反应完成，反应液旋干得粗品1.8g，直接用于下一步反应。
4. 2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙烷-1-胺的制备
将2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基)-N-甲基乙烷-1-胺三氟乙酸盐(1.8g,粗品)溶于甲醇(25mL)中，加入乙酸(1.5g,24.7mmol)，0℃加入氰基硼氢化钠(666mg,10.6mmol)和甲醛(1.1g,13.6mmol)，LCMS检测反应完成，反应液旋干，饱和氢氧化钠水溶液调pH至8-9，二氯甲烷萃取，有机相旋干，硅胶柱层析(MeOH:DCM＝1:10)分离得产品350mg，两步收率51.2％。
5. 7-((1-(2-(二甲氨基)乙基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯的制备
将7-氨基-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(100mg,0.26mmol)和2-(5-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基)-N,N-二甲基乙烷-1-胺(78mg,0.29mmol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，加入RuPhos-Pd-G3(42mg,0.05mmol)和碳酸铯(169mg,0.52mmol)。N2保护下，100℃下氮气保护反应16h，LCMS检测反应完毕，加水淬灭，加入二氯甲烷与水分液萃取，有机相旋干，硅胶柱层析(MeOH:DCM＝1:10)分离得产品80mg，收率54.2％。
6. 7-((1-(2-(二甲氨基)乙基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐的制备
将7-((1-(2-(二甲氨基)乙基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-5-基)氨基)-4-(6-甲基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(30mg，0.053mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，加入氯化氢的乙酸乙酯溶液(2mL)。25℃下反应3小时。反应液浓缩旋干得目标化合物17.5mg，收率65.8％。
分子式:C27H28ClN7O分子量:502.0LC-MS(M/e):466.3(M+H+)
1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:9.71(d,J＝6.4Hz,1H),9.00-9.20(m,1H),9.13(d,J＝3.5Hz,1H),8.86(s,1H),8.61(s,1H),8.00-8.20(m,1H),7.70-7.90(m,3H),7.20(d,J＝9.3Hz,2H),6.71(s,1H),4.80(s,2H),4.55(s,2H),3.60-3.70(m,2H),2.83(d,J＝4.6Hz,6H),2.33(s,3H).
使用与上述制备例相同或相似的方法制备了以下表格所示的化合物：
Figure BDA0003745146690000321
Figure BDA0003745146690000331
实验方案
以下提供本发明部分化合物的示例性实验方案，以显示本发明化合物有利活性和有益技术效果。但是应当理解，下述实验方案仅仅是对本发明内容的示例，而不是对本发明范围的限制。
实验例1本发明化合物对体外酶学活性的抑制实验
测试物：本发明部分化合物，其结构式和制备方法见本发明制备例。
下述实验中所用缩写代表的含义如下：
DMSO：二甲基亚砜；
HEPES：羟乙基哌嗪乙硫磺酸
实验方法：用Lantha screen Assay方法，在体外6个激酶上对化合物进行评价。
实验步骤：
1.制备含50mM HEPES溶液，10mM氯化镁，4mM二硫苏糖醇，0.01％牛血清白蛋白和0.01％吐温-20的1×激酶缓冲液：
2.化合物稀释：
1)取90μl的100％DMSO，再加入10μl 10mM化合物溶液，即配制成1mM化合物溶液。在96孔板上第二个孔中加入90μl的100％DMSO，再加入10μl 1mM化合物溶液，即配制成100μM化合物溶液，其他孔加入60μl的100％DMSO。从第二孔中取30μl化合物加入第三孔中，依次往下做3倍稀释，共稀释10个浓度。
转移40μl上述配制的100μM化合物溶液到384孔Echo板中；
2)转移40μl 100％DMSO到两个空孔中作为不加化合物的阳性对照和不加酶的阴性对照；
3)使用Echo 550转移100nl化合物到384孔测试板中，化合物的检测起始浓度为1μM。
3.用1×激酶缓冲液配置2×激酶溶液，转移5μl 2×激酶溶液到384孔板反应孔中，阴性对照孔加入1×激酶缓冲液，450转/分钟振荡混匀，室温下静置孵育10分钟。
4.用1×激酶缓冲液配置2×底物溶液，转移5μl 2×底物溶液到384孔板反应孔中，450转/分钟振荡混匀。
5.室温进行反应90分钟。
6.配置2×含抗体的终止反应液，转移10μl 2×终止反应液到384孔板反应孔中，1000转/分钟离心1分钟，室温放置60分钟，检测。
7.数据读取：Envision2104 Multilable Reader上读取在340nm处激发，520nm和495nm处发射的数值。
8.数据计算
1)将荧光读数的数值比(Lantha signal(520nm/495nm))通过公式转换为抑制百分率：
抑制百分率＝(最大值-Lantha signal)/(最大值-最小值)*100
“最小值”为不加酶的阴性对照样孔读数；“最大值”为不加化合物的阳性对照孔读数。
2)将数据导入MS Excel，IC50结果使用XLFit excel add-in version 5.4.0.8进行曲线拟合。
实验结果
表1本发明化合物体外酶学抑制活性
Figure BDA0003745146690000341
实验结论
本发明化合物对MAP4K1/HPK1有很好的抑制活性，并且本发明化合物对HPK1具有优异的选择性。

Claims (10)

1.式(I)所示化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，
Figure FDA0003745146680000011
其中，
X1、X2分别独立地选自-C(R3)-或-N-；
Y1、Y2、Y3分别独立地选自-C(R4)或-N-；
L1选自化学键、-CRaRb-、-C(RaRb)-C(RaRb)-、-O-、-NRa-、-S-、-S(O)2NRa-、-S(O)-、-S(O)NRa-、-C(O)-、-C(O)O-、-C(O)NRa-、-C(O)N(Ra)O-、-OC(O)-、-OC(O)NRa-、-N(Ra)C(O)O-、-N(Ra)C(O)-、-N(Ra)S(O)2-、-C(RaRb)-NRa-或-NRa-C(RaRb)-；
各R3、各R4分别独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷氧基；
环A选自任选被1-3个Q1取代的7-15元环烷基、7-15元杂环烷基、6-15元芳基或5-15元杂芳基；
各Q1分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、-NRaRb、-ORa、-SRa、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的以下基团：C1-6烷基、C1-6烷氧基、-(CH2)m-3-10元环烷基、-(CH2)m-3-10元杂环烷基、-(CH2)m-5-10元杂芳基或-(CH2)m-6-10元芳基；
各Q2分别独立地选自氘、卤素、羟基、硝基、-NRcRd、氰基、羧基、3-10元环烷基、3-10元杂环烷基、5-10元杂芳基或6-10元芳基；
R1选自任选被1-3个Q3取代的6-15元芳基或5-15元杂芳基，所述Q3分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷硫基、卤代C1-6烷氧基、卤代C1-6烷硫基、羟基C1-6烷氧基、羟基C1-6烷硫基、氨基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷硫基；
R2选自氢、卤素、羟基、硝基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、-NRaRb、-ORa、-SRa、-NRa-C(O)-Rb-、-C(O)Ra、-C(O)NRa或-C(O)ORa；
各Ra、各Rb分别独立地选自氢、卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷硫基、卤代C1-6烷氧基、卤代C1-6烷硫基、羟基C1-6烷氧基、羟基C1-6烷硫基、氨基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷硫基或任选被取代基取代的以下基团：-(CH2)m-3-10元环烷基、-(CH2)m-3-10元杂环烷基、-(CH2)m-5-10元杂芳基、-(CH2)m-6-10元芳基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷基；
各Rc、各Rd分别独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基或卤代C1-6烷氧基；
p选自0、1或2；
各m分别独立地选自0、1、2、3、4或5。
2.如权利要求1所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，
X1、X2分别独立地选自-C(R3)-或-N-；
Y1、Y2、Y3分别独立地选自-C(R4)或-N-；
L1选自化学键、-CRaRb-、-C(RaRb)-C(RaRb)-、-O-、-NRa-、-S-、-S(O)2NRa-、-S(O)-、-S(O)NRa-、-C(O)-、-C(O)O-、-C(O)NRa-、-C(RaRb)-NRa-或-NRa-C(RaRb)-；
各R3、各R4分别独立地选自氢、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷氧基；
环A选自任选被1-3个Q1取代的5-6元杂芳基、7-10元环烷基或7-10元杂环烷基；
各Q1分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、-NRaRb、-ORa、-SRa、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的以下基团：C1-6烷基、C1-6烷氧基、-(CH2)m-3-8元环烷基、-(CH2)m-3-8元杂环烷基、-(CH2)m-5-8元杂芳基或-(CH2)m-苯基；
各Q2分别独立地选自氘、卤素、羟基、硝基、NRcRd、氰基或羧基；
R1选自任选被1-3个Q3取代的5-15元杂芳基，所述Q3分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷硫基、卤代C1-6烷氧基、卤代C1-6烷硫基、羟基C1-6烷氧基、羟基C1-6烷硫基、氨基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷硫基；
R2选自氢、卤素、羟基、硝基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、-NRaRb或-ORa；
各Ra、各Rb分别独立地选自氢、卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷硫基、卤代C1-6烷氧基、卤代C1-6烷硫基、羟基C1-6烷氧基、羟基C1-6烷硫基、氨基C1-6烷氧基、氨基C1-6烷硫基或任选被取代基取代的以下基团：-(CH2)m-3-10元环烷基、-(CH2)m-3-10元杂环烷基、-(CH2)m-5-10元杂芳基、-(CH2)m-6-10元芳基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤代C1-6烷基；
各Rc、各Rd分别独立地选自氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷基或卤代C1-6烷氧基；
p选自0、1或2；
各m分别独立地选自0、1、2或3。
3.如权利要求2所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，
环A选自任选被1-3个Q1取代的5-6元含氮杂芳基、7-8元单环烷基、8-10元稠环基、7-8元单杂环烷基或8-10元稠杂环基；
各Q1分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、-NRaRb、-ORa、-SRa、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的以下基团：C1-6烷基、C1-6烷氧基、-(CH2)m-3-8元环烷基、-(CH2)m-3-8元杂环烷基、-(CH2)m-5-8元杂芳基或-(CH2)m-苯基；
各Q2分别独立地选自氘、卤素、羟基、硝基、-NRcRd、氰基或羧基；
R1选自任选被1-3个Q3取代的8-10元稠杂芳基，所述Q3分别独立地选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、氨基C1-4烷氧基；
R2选自氢、卤素、羟基、硝基、氰基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、-NRaRb或-ORa；
各Ra、各Rb分别独立地选自氢、卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、氨基C1-4烷氧基或任选被取代基取代的-(CH2)m-3-8元环烷基、-(CH2)m-3-8元杂环烷基、-(CH2)m-5-8元杂芳基或-(CH2)m-苯基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷基；
各Rc、各Rd分别独立地选自氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基或卤代C1-4烷氧基；
p选自0、1或2；
各m分别独立地选自0、1、2或3。
4.如权利要求1-3任一项所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中：
X1、X2分别独立地选自-C(R3)-或-N-；
Y1、Y2、Y3分别独立地选自-C(R4)或-N-；
L1选自化学键、-CRaRb-、-C(RaRb)-C(RaRb)-、-O-、-NRa-、-S-、-S(O)-、-C(O)-、-C(O)NRa-、-C(RaRb)-NRa-或-NRa-C(RaRb)-；
各R3、各R4分别独立地选自氢、卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基；
环A选自
Figure FDA0003745146680000031
Figure FDA0003745146680000032
Figure FDA0003745146680000033
n选自0、1、2或3；
各Q1分别独立地选自氟、氯、溴、氨基、氰基、羟基、羧基、硝基、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、-(CH2)m-环丙基、-(CH2)m-环丁基、-(CH2)m-环戊基、-(CH2)m-环己基、-(CH2)m-氧杂环丙基、-(CH2)m-氧杂环丁基、-(CH2)m-四氢呋喃基、-(CH2)m-四氢吡喃基、-(CH2)m-四氢吡咯基、-(CH2)m-吡唑烷基、-(CH2)m-咪唑烷基、-(CH2)m-哌嗪基或-(CH2)m-哌啶基；
各Q2分别独立地选自氘、氟、氯、溴、羟基、-NRcRd、氰基、羧基、硝基；
Rc、Rd分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、一氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基；
R1选自任选被1-3个Q3取代的如下基团：
Figure FDA0003745146680000041
Figure FDA0003745146680000042
优选地，R1选自任选被1-3个Q3取代的如下基团：
Figure FDA0003745146680000043
Figure FDA0003745146680000044
各Q3分别独立地选自氟、氯、溴、碘、硝基、氰基、氨基、羟基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基或三氟乙氧基；
各Ra分别独立地选自氢、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷基、卤代C1-4烷氧基或任选被取代基取代的-(CH2)m-3-6元环烷基、-(CH2)m-3-6元杂环烷基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷基；各Rb分别独立地选自氢或C1-4烷基。
5.如权利要求1-4任一项所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其具有如下通式(II-1)或通式(II-2)所示的结构：
Figure FDA0003745146680000045
其中，
L1选自化学键、-CRaRb-、-C(RaRb)-C(RaRb)-、-O-、-NRa-、-S-、-C(O)-、-C(O)NRa-、-C(RaRb)-NRa-或-NRa-C(RaRb)-；
各R2分别独立地选自氢、卤素、羟基、硝基、氰基、C1-4烷基或卤代C1-4烷基；
环A选自
Figure FDA0003745146680000046
Figure FDA0003745146680000051
各Q1分别独立地选自氰基、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、-(CH2)m-环丙基、-(CH2)m-环丁基、-(CH2)m-环戊基、-(CH2)m-环己基、-(CH2)m-氧杂环丙基、-(CH2)m-氧杂环丁基、-(CH2)m-四氢呋喃基或-(CH2)m-四氢吡喃基；
各Q2分别独立地选自氘、氟、氯、溴、羟基、-NRcRd、氰基、羧基或硝基；
Rc、Rd分别独立地选自氢、C1-4烷基或卤代C1-4烷基；优选地，Rc、Rd分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基；
R1选自任选被1-3个Q3取代的如下基团：
Figure FDA0003745146680000052
Figure FDA0003745146680000053
各Q3分别独立地选自氟、氯、溴、碘、硝基、氰基、氨基、羟基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、一氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基；
各Ra分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟甲氧基或任选被取代基取代的以下基团：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氧杂环丙基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、四氢吡咯基、吡唑烷基或咪唑烷基；所述取代基选自卤素、羟基、硝基、氨基、氰基、羧基、甲基、乙基、丙基、异丙基或三氟甲基；
各Rb分别独立地选自氢或C1-4烷基；
各m、n、p分别独立地选自0、1或2。
6.如权利要求1-5任一项所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，
L1选自化学键、-CRaRb-、-O-或-NRa-；
各R2分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基；
环A选自
Figure FDA0003745146680000054
Figure FDA0003745146680000055
各Q1分别独立地选自氰基、-C(O)Ra、或任选被1-3个Q2取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、-(CH2)m-环丙基或-(CH2)m-环丁基；
各Q2分别独立地选自氘、氟、氯、溴、羟基、-NRcRd、氰基、羧基或硝基；
Rc、Rd分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基；
各Q3分别独立地选自氟、氯、溴、甲基、乙基、丙基、异丙基、一氟甲基、二氟甲基或三氟甲基；
各Ra分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基或三氟甲氧基；
各Rb分别独立地选自氢、甲基、乙基、丙基或异丙基；
p选自0或1；
各m、n分别独立地选自0、1或2。
7.如权利要求1所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，选自如下化合物：
Figure FDA0003745146680000061
Figure FDA0003745146680000071
8.含有权利要求1-7任一项所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的药物制剂，其特征在于，包含一种或多种药学上可接受的赋形剂，该药物制剂为药学上可接受的任一剂型。
9.含有权利要求1-7任一项所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体的药物组合物，其特征在于，包含一种或多种第二治疗活性剂，所述的第二活性治疗剂选自有丝***抑制剂、烷化剂、抗代谢物、反义DNA或RNA、抗肿瘤抗生素、生长因子抑制剂、信号传导抑制剂、细胞周期抑制剂、酶抑制剂、类维生素A受体调控剂、蛋白酶体抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、生物应答调节剂、激素类药物、血管再生抑制剂、细胞生长抑制剂、靶向抗体、HMG-CoA还原酶抑制剂和异戊二烯基蛋白质转移酶抑制剂。
10.权利要求1-7任一项所述的化合物、其氘代物、其药学上可接受的盐或其立体异构体、权利要求8所述的药物制剂、或权利要求9所述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防由HPK1所介导的疾病及相关病症的药物中的应用，所述由HPK1所介导的疾病及相关病症选自癌症或良性肿瘤。
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