CN115551471A - 包含白鸡蛋花花提取物的化妆品组合物和方法 - Google Patents
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Abstract
本公开涉及包含白鸡蛋花花提取物和水杨酸的成分的组合。组合物还可以包含羟基苯乙酮、二氧化钛和/或卡拉胶。已经证明这种成分的组合作为清洁组合物是有效的,其通过减少光泽和毛孔大小有助于减少皮脂、增加皮肤清净度和改善皮肤外观。还证明了这种成分的组合可以用于减少皮肤的刺激和炎症。
Description
相关申请的交叉引用
本申请要求于2020年4月29日提交的美国临时申请第63/017234号的权益,其内容通过引用整体并入本文。
发明背景
发明领域
本公开一般地涉及可以用于化妆品组合物的组合物,其用于清洁、调理、舒缓和/或保护皮肤,和/或改善皮肤状况和/或视觉外观。
B.背景
皮肤细胞非常敏感,即使受到很小的损伤也会受到影响。有些损伤一开始会引起干燥,然后逐渐导致皮肤出现多种问题。相反,一些损伤会导致不期望的油性皮肤,这也会导致其它皮肤问题。
哺乳动物的皮肤由皮脂腺组成,皮脂腺分泌称作皮脂的油性物质。皮脂是由在正常情况下不溶于水的脂肪组成的。皮脂帮助皮肤细胞吸收所需的水分以保持皮肤湿润。然而,对于不同年龄段的人,皮脂的组成是不同的,并且可能对水分流失或不期望的油性皮肤和/或堵塞毛孔的保护作用较小。
皮脂的产生可以通过环境和自然或人体内发生的不规则过程增加,如激素和饮食的变化。过多的皮脂可能会导致毛孔堵塞,从而形成缺氧的环境,促进导致痤疮的细菌的生长。研究还发现皮脂本身会导致炎症增加。皮脂代谢的副产物可能会导致可能出现在脸上的红色斑点的引发炎症免疫反应分子的积累。总之,皮脂分泌过多会导致皮肤紊乱,如痤疮、疙瘩等,由于炎症反应会导致发红,并且堵塞和扩大毛孔。
除去皮肤中多余的皮脂,同时保持皮肤健康所需的水分成为了挑战。已经显示了用已知的皮肤活性成分来改善皮肤的视觉外观的先前尝试具有各种缺点,如皮肤刺激、恢复期过长、或不能有效的提供所希望的皮肤益处。目前的产品可能无法解决这些缺点。
发明内容
发明人已经确定了与当前化妆品相关的问题的解决方案。解决方案在于白鸡蛋花花提取物和水杨酸的任意一种、任意组合或全部的独特组合。组合物还可以包含羟基苯乙酮、二氧化钛和卡拉胶,并且在一些情况下可以配制为美容面膜。已经显示这种成分的组合通过减少光泽和毛孔大小有助于减少皮脂,增加皮肤清净度,并改善皮肤外观。还证明了这种成分的组合有效地减少皮肤的刺激和炎症。在一些情况下,成分的组合向皮肤提供了水分。在一些情况下,成分的组合清洁了皮肤。
本公开的方面涉及包含白鸡蛋花花提取物和水杨酸的任意一种、任意组合或全部的组合。在一些情况下,组合物还包含羟基苯乙酮、二氧化钛和/或卡拉胶。在一些实施方案中,组合物为胶体悬浮体、乳液、润肤露、凝胶或软膏。在一些实施方案中,组合物包含胶体悬浮体。在一些实施方案中,组合物包含美容面膜。
组合物中成分的量可以变化(例如,量可以低至0.000001重量%至高达98重量%或其中的任何范围)。在一些实施方案中,组合物包含有效量的白鸡蛋花花提取物以抑制皮肤中的TNF-α产生。在一些实施方案中,组合物包含有效量的白鸡蛋花花提取物以抑制皮肤中5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%的TNF-α产生。在一些情况下,组合物包含有效量的白鸡蛋花花提取物以抑制皮肤中至少50%的TNF-α产生。在一些情况下,提取物为水提取物、醇提取物、水和醇提取物、乙醇提取物或超临界CO2提取物。在一些情况下,白鸡蛋花花提取物是水提取物。
在一些实施方案中,组合物包含0.001重量%至1重量%的白鸡蛋花花提取物。在一些实施方案中,组合物包含0.001重量%至1重量%的白鸡蛋花花提取物和0.1重量%至3重量%的水杨酸。在一些情况下,组合物还包含0.01重量%至1重量%的羟基苯乙酮、0.01重量%至1重量%的二氧化钛和0.01重量%至1重量%的卡拉胶。在一些实施方案中,组合物不包含由海军豆植物提取的氨基酸、龙头竹笋提取物和炭的组合以及忍冬叶提取物。
在一些实施方案中,组合物还包含溶剂。在一些实施方案中,溶剂包含水。在一些实施方案中,组合物还包含高岭土、硅酸镁铝、黄原胶和/或膨润土。在一些实施方案中,组合物包含20重量%至40重量%的高岭土、1重量%至10重量%的硅酸镁铝、0.1重量%至1重量%的黄胶原和/或1重量%至8重量%的膨润土。在一些实施方案中,组合物还包含一种或多于一种其他成分,所述其他成分选自乳化剂、保湿剂、着色剂、防腐剂、pH调节剂、增稠剂、螯合剂、皮肤调理剂和香精中的一种或多于一种。在一些实施方案中,组合物还包含甘油、丙二醇、EDTA二钠、苯氧乙醇、和/或三乙醇胺。在一些实施方案中,组合物包含1重量%至10重量%的甘油、1重量%至10重量%的丙二醇、0.01重量%至3重量%的苯氧乙醇、0.01重量%至3重量%的三乙醇胺和/或0.01重量%至1重量%的EDTA二钠。
本公开的其它方面涉及清洁皮肤的方法,其包括将本公开的组合物施用至皮肤,然后在施用后从皮肤上除去所述组合物。其它的方面涉及减少皮脂的存在、减少光泽的出现和/或减少毛孔大小外观的方法,所述方法包括将本公开的组合物施用至皮肤,然后在施用后从皮肤上除去所述组合物。其它方面涉及减少刺激和/或炎症的方法,所述方法包括将本公开的组合物施用至皮肤,然后在施用后从皮肤上除去所述组合物。其它方面涉及减少皮肤中TNF-α产生的方法,所述方法包括将本公开的组合物施用至皮肤,然后在施用后从皮肤上除去所述组合物。在一些实施方案中,皮肤中的TNF-α产生至少减少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%。在一些实施方案中,皮肤中的TNF-α产生减少至少50%。
在一些实施方案中,组合物被施用至皮肤至少约、至多约或恰好为1分钟、2分钟、4分钟、6分钟、8分钟、10分钟、15分钟、20分钟、25分钟、30分钟、35分钟、40分钟、45分钟、50分钟、55分钟或60分钟,或任何可获得的范围。在公开的方面的一些实施方案中,组合物被施用至皮肤至少2分钟。在一些实施方案中,组合物被施用至皮肤至少10分钟。在一些实施方案中,组合物被施用至皮肤至少约、至多约或恰好为2分钟、4分钟、6分钟、8分钟、10分钟、15分钟、20分钟、25分钟、30分钟、35分钟、40分钟、45分钟、50分钟、55分钟、60分钟或1.5小时、2小时或3小时,或任何可获得的范围。在一些实施方案中,组合物被施用至皮肤至少到组合物在皮肤上变干。
在一些实施方案中,组合物被施用至面部。在一些实施方案中,组合物被施用至脖子、胸部、手臂、手、躯干或腿。在一些实施方案中,方法包括将组合物施用至皮肤至少一天一次。在一些实施方案中,方法包括将组合物施用至皮肤至少约、至多约或正好一天1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次、8次、9次、或10次。在一些实施方案中,方法包括每天施用持续至少一周。在一些实施方案中,方法包括每天施用持续至少约、至多约或正好1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天、16天、18天、20天、22天、24天、26天、28天或5周、6周、7周、8周、9周、10周、12周、14周、16周、18周、20周、24周、28周、32周、36周、40周、44周、48周、52周、56周或1年、2年、3年、4年、5年、或6年或大于6年(或任何可获得的范围)。在一些实施方案中,在施用后从皮肤上除去组合物。在一些实施方案中,通过冲洗从皮肤上除去组合物。
在特别的方面,本公开的组合物被配制为局部用皮肤组合物。组合物可具有化合物和提取物的皮肤病学上可接受的载剂或载体。组合物还可以包含保湿剂、润湿剂、表面活性剂、含硅氧烷的化合物、UV剂、油和/或本说明书中确定的或本领域已知的其它成分。组合物可以为面膜、胶体悬浮体、润肤露、霜、凝胶、精华、乳液(例如,水包油、油包水、水包硅酮、硅酮包水、水包油包水、油包水包油、硅酮包水包油等)、溶液(例如,含水溶液或水醇溶液)、无水基质(例如,口红或粉剂)、软膏剂、乳剂、膏剂、喷雾、固体形式、眼胶、凝胶精华、凝胶样胶体悬浮体等。在本公开的其它方面,组合物可以是储存稳定的或颜色稳定的,或两者。还预期可以选择组合物的黏度以实现所需的结果,例如,取决于所需组合物的类型,组合物的黏度可以为约1cps至远超过100万cps或其间的任何值或其中可得出的整数(例如,使用TCspindle在2.5rpm和25℃下在Brookfield黏度计中测量的黏度为2cps、3cps、4cps、5cps、6cps、7cps、8cps、9cps、10cps、20cps、30cps、40cps、50cps、60cps、70cps、80cps、90cps、100cps、200cps、300cps、400cps、500cps、600cps、700cps、800cps、900cps、1000cps、2000cps、3000cps、4000cps、5000cps、6000cps、7000cps、8000cps、9000cps、10000cps、20000cps、30000cps、40000cps、50000cps、60000cps、70000cps、80000cps、90000cps、100000cps、200000cps、300000cps、400000cps、500000cps、600000cps、700000cps、800000cps、900000cps、1000000cps、2000000cps、3000000cps、4000000cps、5000000cps、10000000cps等)。
在非限制性方面,组合物的pH可以为约6至约9。在其他方面,pH可以为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14。组合物可以包含防腐剂。防腐剂的非限制性实例包括羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、或羟基苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯的混合物。在一些实施方案中,组合物不包含对羟基苯甲酸酯。
本公开的组合物可以具有UVA和UVB吸收特性。组合物可具有2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60或大于60或其中的任何整数或由其得到的整数的防晒系数。组合物可以是防晒乳液、喷雾剂或霜剂。
本公开的组合物还可以包含以下附加成分中的任何一种、任何组合或全部:水、螯合剂、保湿剂、防腐剂、增稠剂、含硅氧烷的化合物、精油、结构化剂、维生素、药物成分或抗氧化剂,或这些成分的任何组合或这些成分的混合物。在某些方面,该组合物可以包括至少两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或前一句中确定的所有这些附加成分。这些附加成分的非限制性实例在整个说明书中被确定并且通过引用并入本部分。此类成分的量可以为组合物重量或体积的0.0001%至99.9%,或如本说明书其它部分中所公开的介于两者之间的任何整数或范围,这些部分通过引用并入本段。
还考虑了包含本公开组合物的试剂盒。在某些实施方案中,组合物包含在容器中。容器可以是瓶子、分配器或盒子。容器可以分装预定量的组合物。在某些方面,组合物以喷雾、薄雾、团块或液体的形式分装。容器可以在其表面上包括标记。标记可以是单词、缩写、图片或符号。
还预期贯穿本说明书公开的组合物可用作免洗型组合物或冲洗型组合物。例如,免洗型组合物可以是局部施用至皮肤并在皮肤上保留一段时间(例如,至少5分钟、6分钟、7分钟、8分钟、9分钟、10分钟、20或30分钟,或至少1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、13小时、14小时、15小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23或24小时,或过夜或全天)。或者,冲洗型组合物可以是打算施用至皮肤然后在例如小于5分钟、4分钟、3分钟、2分钟或1分钟的时间段内从皮肤上除去或冲洗(例如用水)的产品。冲洗型组合物的实例可以是洗面奶、洗发水、护发素或肥皂。免洗型组合物的实例可以是皮肤保湿剂、防晒霜、面膜、晚霜或日霜。
预期本说明书中讨论的任何实施方案可以相对于本公开的任何方法或组合物来实施,反之亦然。此外,本公开的组合物可用于实现本公开的方法。
在本发明的上下文中,描述了至少以下42个方面。方面1包括美容面膜组合物,其包含白鸡蛋花花提取物、水杨酸、羟基苯乙酮、二氧化钛和卡拉胶,其中组合物为胶体悬浮体。方面2引用方面1,其包含有效量的白鸡蛋花花提取物以抑制皮肤中的TNF-α产生。方面3引用方面1和2中任一项,其包含有效量的白鸡蛋花花提取物以抑制皮肤中至少50%的TNF-α产生。方面4引用方面1至3中任一项,其包含0.001重量%至1重量%的白鸡蛋花花提取物。方面5引用方面1至4中任一项,其包含0.001重量%至1重量%的白鸡蛋花花提取物、0.1重量%至3重量%的水杨酸、0.01重量%至1重量%的羟基苯乙酮、0.01重量%至1重量%的二氧化钛和0.01重量%至1重量%的卡拉胶。方面6引用方面1至5中任一项,其中组合物不包含由海军豆植物提取的氨基酸、龙头竹笋提取物和炭的组合以及忍冬叶提取物。方面7引用方面1至6中任一项,其中组合物还包含溶剂。方面8引用方面7,其中溶剂包含水且组合物包含40重量%至60重量%的水。方面9引用方面1至8中任一项,其还包含高岭土、硅酸镁铝、膨润土和黄胶原。方面10引用方面9,其包含20重量%至40重量%的高岭土、1重量%至10重量%的硅酸镁铝、1重量%至8重量%的膨润土和0.1重量%至1重量%的黄胶原。方面11引用方面1至10中任一项,其还包含一种或多于一种其他成分,所述其他成分选自乳化剂、保湿剂、着色剂、防腐剂、pH调节剂、增稠剂、螯合剂、皮肤调理剂和香精中的一种或多于一种。方面12引用方面1至11中任一项,其还包含甘油、丙二醇、EDTA二钠、苯氧乙醇和三乙醇胺。方面13引用方面12,其包含1重量%至10重量%的甘油、1重量%至10重量%的丙二醇、0.01重量%至3重量%的苯氧乙醇、0.01重量%至3重量%的三乙醇胺和0.01重量%至1重量%的EDTA二钠。方面14引用方面1至13,其中白鸡蛋花花提取物是水提取物、醇提取物、水和醇提取物、乙醇提取物或超临界CO2提取物。方面15引用方面1至14中任一项,其中白鸡蛋花花提取物是水提取物。方面16包括一种清洁皮肤的方法。方法包括将方面1至15中任一项的组合物局部施用至皮肤,然后在施用后将组合物从皮肤上除去。方面17引用方面16,其中组合物被施用至面部。方面18引用方面16或17中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少2分钟。方面19引用方面16至18中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少10分钟。方面20引用方面16至19中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少到组合物在皮肤上变干。方面21引用方面16至20中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少一天一次。方面22引用方面16至21中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少一天一次持续至少一周。方面23引用方面16至22中任一项,其中通过冲洗从皮肤上除去组合物。方面24包括一种净化毛孔的方法,其包括将方面1至15中任一项的组合物局部施用至皮肤,然后在施用后将组合物从皮肤上除去。方面25引用方面24,其中组合物被施用至面部。方面26引用方面24或25中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少2分钟。方面27引用方面24至26中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少10分钟。方面28引用方面24至27中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少到组合物在皮肤上变干。方面29引用方面24至28中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少一天一次。方面30引用方面24至29中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少一天一次持续至少一周。方面31引用方面24至30中任一项,其中通过冲洗从皮肤上除去组合物。方面32包括一种减少炎症的方法,其包括将方面1至15中任一项的组合物局部施用至皮肤,然后在施用后将组合物从皮肤上除去。方面33引用方面32,其中组合物被施用至面部。方面34引用方面32或33中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少2分钟。方面35引用方面32至34中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少10分钟。方面36引用方面32至35中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少到组合物在皮肤上变干。方面37引用方面32至36中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少一天一次。方面38引用方面32至37中任一项,其中组合物被施用至皮肤至少一天一次持续至少一周。方面39引用方面32至38中任一项,其中通过冲洗从皮肤上除去组合物。方面40引用方面32至39中任一项,其中减少炎症的方法减少皮肤中的TNF-α产生。方面41引用方面32至40中任一项,其中减少炎症的方法减少皮肤中至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%的TNF-α产生。方面42引用方面32至41中任一项,其中减少炎症的方法减少皮肤中至少50%的TNF-α产生。
在一个实施方案中,本公开的组合物可以是药物上或化妆品上适用的或可以具有舒适的触觉特性。“药物上适用的”、“化妆品上适用的”和/或“舒适的触觉特性”描述了具有在皮肤上感觉舒适的特定触觉特性的组合物(例如,涂抹时起泡的组合物、不太水或不太油腻的组合物、具有丝滑质地的组合物、非黏性或黏性组合物等)。药物上适用的或化妆品上适用的也可以与组合物的乳脂状或润滑特性或组合物的保湿特性有关。
还考虑了包含本公开组合物的产品。在非限制性方面,产品可以是化妆品。化妆品可以是本说明书其它部分中描述的那些或本领域技术人员已知的那些。产品的非限制性实例包括保湿剂、霜剂、乳液、皮肤软化剂、凝胶、洗剂、粉底、晚霜、口红、清洁剂、爽肤水、防晒霜、面膜、抗老化产品、除臭剂、止汗剂、香水、古龙水等。
“局部施用”或“局部涂抹”是指将组合物接触、施用或涂抹到嘴唇或角质组织的表面上。接触是指接触一段时间。
“局部用皮肤组合物”包括适合在皮肤和/或角质组织上局部施用的组合物。此类组合物通常是皮肤病学可接受的,因为它们在应用于皮肤和/或角质组织时不具有异常毒性、不相容性、不稳定性、过敏反应等。本公开的局部用护肤组合物可具有选定的黏度以避免在施用于皮肤和/或角质组织后显著滴落或汇集。
“角质组织”包括设置为哺乳动物最外层保护性覆盖物的含角蛋白层,并且包括但不限于嘴唇、皮肤、毛发和指甲。
术语“约”或“大约”被定义为本领域普通技术人员所理解的接近于。在一个非限制性实施方案中,术语被定义为偏差在10%以内,优选偏差在5%以内,更优选偏差在1%以内,最优选偏差在0.5%以内。
术语“基本上”及其变体指偏差在10%以内、偏差在5%以内、偏差在1%以内或偏差在0.5%以内的范围。
术语“抑制”或“减少”或这些术语的任何变体包括实现期望结果的任何可测量的降低或完全抑制。术语“促进”或“增加”或这些术语的任何变体包括任何可测量的增加,例如蛋白质或分子的产生(例如,基质蛋白如纤连蛋白、层粘连蛋白、胶原蛋白或弹性蛋白或分子如透明质酸)以达到预期的效果。
说明书和/或权利要求中使用的术语“有效的”是指足以实现希望的、期望的或预期的结果。
当在权利要求或说明书中与术语“包含”、“包括”、“含有”或“具有”结合使用时,要素前无数量词可以表示“一个”,但也与“一个或更多个”、“至少一个”和“一个或多于一个”的含义一致。
如本说明书及权利要求书所使用的,词语“包含”、“具有”、“包括”或“含有”是包含性的或开放式的,并且不排除其它的、未列举的元素或方法步骤。
组合物及其使用方法可以“包含”、“基本上组成为”、或“组成为”整个说明书中的任何成分或步骤。关于短语“基本上由...组成”,本发明的组合物和方法的基本和新颖特性是能够制备一种可施用于皮肤的组合物,所述组合物在一些情况下能够清洁皮肤、净化毛孔和/或减少皮肤炎症。
由以下具体实施方式,本发明的其它目的、特征和优点变得明显。然而,应该理解的是,具体实施方案和实施例虽然说明了本发明的特定实施方案,但仅以说明的方式给出。此外,由该具体实施方式,预期在本发明的精神和范围内的改变和修改对于本领域技术人员将变得明显。
具体实施方式
本公开的特定组合物被设计用作局部用组合物。组合物在于白鸡蛋花花提取物和水杨酸的任意一种、任意组合或全部的独特组合。在一些情况下,组合物还可以包含羟基苯乙酮、二氧化钛和/或卡拉胶。这种组合物的非限制性实例在实施例1的表1中提供。在一些实施方案中,组合物包含有效量的白鸡蛋花花提取物以抑制皮肤中的TNF-α产生。在一些实施方案中,组合物包含有效量的白鸡蛋花花提取物以抑制皮肤中至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%或50%的TNF-α产生。在一些情况下,组合物包含有效量的白鸡蛋花花提取物以抑制皮肤中至少50%的TNF-α产生。
本文公开的组合物可以施用于皮肤并在皮肤上保留一段时间(例如,至少1分钟、2分钟、3分钟、4分钟、5分钟、10分钟、20分钟、30分钟或60分钟或大于60分钟)。然后,如果需要,可以将组合物从皮肤上除去或从皮肤上剥去。在某些实施方案中,通过冲洗除去组合物。在一些情况下,组合物施用至皮肤并保留在皮肤上至少到组合物在皮肤上变干。在一些实施方案中,组合物在皮肤上变干后从皮肤上除去组合物。
本公开的这些和其它非限制性方面在以下部分中描述。
A.活性成分
本公开的前提是确定活性成分-白鸡蛋花提取物和水杨酸的组合可用于制备面部清洁组合物,其通过减少光泽和毛孔大小有助于减少皮脂、提高皮肤清净度、减少肤色不均和不规则色素沉着、改善皮肤外观,并减少皮肤的刺激和炎症。
这种成分的组合可以以不同的产品形式使用,以处理本文所述的各种皮肤状况。通过非限制性实例,这些成分的组合可以配制为面膜、乳液、凝胶、凝胶乳液、凝胶精华、润肤露或身体乳。在一些情况下,组合物还包含羟基苯乙酮、二氧化钛和/或卡拉胶。
白鸡蛋花花提取物为白鸡蛋花植物的提取物。白鸡蛋花也被称为白鸡蛋花(WhiteFrangipani)或花束树(Nosegay Tree),其是在澳大利亚随处可见的树。白鸡蛋花具有绿色的叶子和白色和黄色的花。申请人发现白鸡蛋花花提取物能够抑制皮肤中促炎细胞因子TNF-α的产生。白鸡蛋花花提取物可以商购获得。在一些情况下,提取物可以由SouthernCross Botanicals获得,商品名为Abacross。在一些情况下,提取物为水提取物、醇提取物、水和醇提取物、乙醇提取物或超临界CO2提取物。在一些情况下,白鸡蛋花花提取物是水提取物。
水杨酸是单羟基苯甲酸,酚酸的一种,也是β羟基酸。这种无色结晶的有机酸被广泛用于有机合成,并作为植物激素发挥作用。水杨酸对减少和清除皮肤上的痤疮很有用,并为本公开的组合物提供抗痤疮活性。水杨酸可以商购获得。在一些情况下,水杨酸是美国药典可接受(USP)级水杨酸。
本文所述的提取物可以是通过本领域已知的提取方法及其组合制备的提取物。提取方法的非限制性实例包括使用液-液提取、固相提取、水提取、乙酸乙酯、乙醇、丙酮、油、超临界二氧化碳、热、压力、压降提取、超声提取等。提取物可以是液体、固体、干燥液体、再悬浮固体等。
B.成分的量
预期本公开的组合物可以包含任意量的本说明书所讨论的成分。组合物还可以包含任意数目的在本说明书全文中所描述的附加成分的组合(例如,颜料或附加的化妆品或药物成分)。在组合物中任意成分的浓度可以改变。例如,在非限制性实施方案中,组合物在其最终形式中可以包含以下组分、主要由以下组分组成或由以下组分组成:例如至少约0.0001%、0.0002%、0.0003%、0.0004%、0.0005%、0.0006%、0.0007%、0.0008%、0.0009%、0.0010%、0.0011%、0.0012%、0.0013%、0.0014%、0.0015%、0.0016%、0.0017%、0.0018%、0.0019%、0.0020%、0.0021%、0.0022%、0.0023%、0.0024%、0.0025%、0.0026%、0.0027%、0.0028%、0.0029%、0.0030%、0.0031%、0.0032%、0.0033%、0.0034%、0.0035%、0.0036%、0.0037%、0.0038%、0.0039%、0.0040%、0.0041%、0.0042%、0.0043%、0.0044%、0.0045%、0.0046%、0.0047%、0.0048%、0.0049%、0.0050%、0.0051%、0.0052%、0.0053%、0.0054%、0.0055%、0.0056%、0.0057%、0.0058%、0.0059%、0.0060%、0.0061%、0.0062%、0.0063%、0.0064%、0.0065%、0.0066%、0.0067%、0.0068%、0.0069%、0.0070%、0.0071%、0.0072%、0.0073%、0.0074%、0.0075%、0.0076%、0.0077%、0.0078%、0.0079%、0.0080%、0.0081%、0.0082%、0.0083%、0.0084%、0.0085%、0.0086%、0.0087%、0.0088%、0.0089%、0.0090%、0.0091%、0.0092%、0.0093%、0.0094%、0.0095%、0.0096%、0.0097%、0.0098%、0.0099%、0.0100%、0.0200%、0.0250%、0.0275%、0.0300%、0.0325%、0.0350%、0.0375%、0.0400%、0.0425%、0.0450%、0.0475%、0.0500%、0.0525%、0.0550%、0.0575%、0.0600%、0.0625%、0.0650%、0.0675%、0.0700%、0.0725%、0.0750%、0.0775%、0.0800%、0.0825%、0.0850%、0.0875%、0.0900%、0.0925%、0.0950%、0.0975%、0.1000%、0.1250%、0.1500%、0.1750%、0.2000%、0.2250%、0.2500%、0.2750%、0.3000%、0.3250%、0.3500%、0.3750%、0.4000%、0.4250%、0.4500%、0.4750%、0.5000%、0.5250%、0.0550%、0.5750%、0.6000%、0.6250%、0.6500%、0.6750%、0.7000%、0.7250%、0.7500%、0.7750%、0.8000%、0.8250%、0.8500%、0.8750%、0.9000%、0.9250%、0.9500%、0.9750%、1.0%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2.0%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3.0%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4.0%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5.0%、5.1%、5.2%、5.3%、5.4%、5.5%、5.6%、5.7%、5.8%、5.9%、6.0%、6.1%、6.2%、6.3%、6.4%、6.5%、6.6%、6.7%、6.8%、6.9%、7.0%、7.1%、7.2%、7.3%、7.4%、7.5%、7.6%、7.7%、7.8%、7.9%、8.0%、8.1%、8.2%、8.3%、8.4%、8.5%、8.6%、8.7%、8.8%、8.9%、9.0%、9.1%、9.2%、9.3%、9.4%、9.5%、9.6%、9.7%、9.8%、9.9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%、25%、26%、27%、28%、29%、30%、35%、40%、45%、50%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或99%或其中可获得的任何范围的至少一种在本说明书全文和权利要求中所提及的成分。在非限制性方面,百分比可以按整个组合物的重量或体积进行计算。本领域普通技术人员会理解,给定组合物中的浓度可以根据成分的添加、替换和/或减少而改变。
C.载剂
本公开的组合物可以包含所有类型的载剂和载体,或并入到所有类型的载剂和载体中。载剂或载体可以是药学或皮肤病学上可接受的载剂或载体。载剂或载体的非限制性实例包括水、甘油、醇、油、含硅化合物、硅酮化合物和蜡。变化方案和其他合适的载剂对于熟练技术人员是明显的,并且适用于本公开。在某些方面,化合物、成分和试剂的浓度和组合以这样的方式进行选择,使得组合物是化学相容的并且不形成从最终产品中沉淀出来的复合物。
D.结构
本发明的组合物可以被构建或配制为多种不同形式。非限制性实例包括乳液(例如,油包水、水包油包水、水包油、水包硅酮、硅酮包水、油包水包油、硅酮包水包油的乳液)、霜剂、洗剂、溶液(水溶液或者水-醇溶液)、无水基质(例如口红和粉末)、凝胶、面膜、去角质剂和软膏。变体和其它的结构对于熟练技术人员是明显的,并且适用于本公开。
E.其它成分
除了发明人所公开成分的组合之外,组合物还可以包含额外成分,例如化妆品成分和药物有效成分。这些额外成分的非限制性实例在以下子章节中进行描述。
1、化妆品成分
CTFA国际化妆品成分词典和手册(2004和2008)描述了多种可以在本公开的环境下使用的非限制性化妆品成分。这些成分种类的实例包括:芳香剂(人造的和天然的,例如葡萄糖酸、苯氧乙醇、留兰香叶(绿薄荷)提取物和三乙醇胺)、染料和着色剂(例如蓝1、蓝1色淀、红40、二氧化钛、D&C蓝色4号、D&C绿色5号、D&C橙色4号、D&C红色17号、D&C红色33号、D&C紫色2号、D&C黄色10号和D&C黄色11号、氧化铁)、调味剂/香味剂(例如,甜菊叶(Steviarebaudiana)提取物,以及薄荷醇)、吸附剂、润滑剂、溶剂、保湿剂(包括例如润肤剂、湿润剂、成膜剂、闭塞剂和影响皮肤天然保湿机制的试剂)、拒水剂、UV吸收剂(物理和化学吸收剂,例如对氨基苯甲酸(“PABA”)和相应的PABA衍生物、二氧化钛、氧化锌等)、精油、维生素(例如A、B、C、D、E和K)、微量金属(例如锌、钙和硒)、抗刺激物(例如类固醇和非类固醇抗炎药)、植物提取物(例如芦荟(Aloe vera)、柑橘、黄瓜提取物、银杏(Ginkgo biloba)、人参和迷迭香)、抗菌剂、抗氧化剂(例如BHT和生育酚)、螯合剂(例如EDTA二钠和EDTA四钠)、防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯)、pH调节剂(例如氢氧化钠、三乙醇胺和柠檬酸)、吸收剂(例如淀粉辛烯基琥珀酸铝、高岭土、玉米淀粉、燕麦淀粉、环糊精、滑石和沸石)、皮肤漂白和美白剂(例如氢醌和烟酰胺乳酸盐/酯)、湿润剂(例如山梨醇、脲、甲基葡糖醇聚醚-20、糖类同分异构体和甘露醇)、去角质剂、防水剂(例如氢氧化镁/铝硬脂酸盐)、皮肤调节剂(例如芦荟提取物、迷迭香(Rosemary)叶提取物、尿囊素、没药醇、神经酰胺、聚二甲基硅氧烷、透明质酸、生物糖胶-1、乙基己基甘油、戊二醇、氢化聚癸烯、油酸辛基十二烷醇酯和甘草酸二钾)。这些成分中一些的非限制性实例在以下子章节中提供。
a.UV吸收剂和/或反射剂
可以与本公开的组合物组合使用的UV吸收剂和/或反射剂包括化学和物理防晒物质。可以使用的化学防晒物质的非限制性实例包括对氨基苯甲酸(PABA)、PABA酯(PABA甘油酯、PABA戊基二甲酯和PABA辛基二甲酯)、PABA丁酯、PABA乙酯、PABA乙基二羟基丙酯、二苯甲酮(氧苯酮、磺异苯酮、二苯甲酮和二苯甲酮-1至二苯甲酮-12)、肉桂酸盐/酯(甲氧基肉桂酸辛酯(甲氧基肉桂酸乙基己酯))、对-甲氧基肉桂酸异戊酯、辛基甲氧基肉桂酸酯、西诺沙酯、肉桂酸二异丙基甲酯、DEA甲氧基肉桂酸盐、二异丙基肉桂酸乙酯、甘油辛酸酯二甲氧基肉桂酸酯和甲氧基肉桂酸乙酯)、肉桂酸酯、水杨酸盐/酯(水杨酸均甲酯、水杨酸苄酯、水杨酸乙二醇酯、水杨酸异丙基苄酯等)、邻氨基苯甲酸盐/酯、尿刊酸乙酯、胡莫柳酯、水杨酸辛酯、二苯甲酰基甲烷衍生物(例如阿伏苯宗)、奥克立林、辛基三嗪酮、棓酰棓酸三油酸酯、氨基苯甲酸甘油酯、2-羟基-1,4-萘醌和二羟基丙酮、乙基己基三嗪酮、二辛基丁酰胺基三嗪酮、苯亚甲基丙二酸脂聚硅氧烷、对苯二亚甲基二樟脑磺酸、苯基二苯并咪唑四磺酸酯二钠、二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸己酯、双二乙氨基羟基苯甲酰基苯甲酸酯、双苯并唑基苯基乙基己基亚氨基三嗪、甲酚曲唑三硅氧烷、亚甲基双苯并***基四甲基丁基苯酚和双乙基己基氧苯酚甲氧苯基三嗪、4-甲基苯亚甲基樟脑和4-甲氧基肉桂酸异戊酯。物理防晒物质的非限制性实例包括高岭土、滑石、矿脂和金属氧化物(例如二氧化钛和氧化锌)。
b.保湿剂
可以与本公开的组合物一起使用的保湿剂的非限制性实例包括氨基酸、硫酸软骨素、双甘油、赤藓糖醇、果糖、葡萄糖、甘油、甘油聚合物、乙二醇、1,2,6-己三醇、蜂蜜、透明质酸、氢化蜂蜜、氢化淀粉水解物、肌醇、乳糖醇、麦芽糖醇、麦芽糖、甘露醇、天然保湿因子、PEG-15丁二醇、聚甘油山梨醇、吡咯烷酮羧酸的盐、PCA钾、丙二醇、葡糖醛酸钠、糖类同分异构体、PCA钠、山梨醇、蔗糖、海藻糖、脲和木糖醇。
其他实例包括乙酰化羊毛脂、乙酰化羊毛脂醇、丙氨酸、藻类提取物、库拉索芦荟(Aloe barbadensis)、库拉索芦荟提取物、库拉索芦荟凝胶、药蜀葵(althea officinalis)提取物、杏(prunus armeniaca)仁油、精氨酸、精氨酸天冬氨酸盐/酯、山金车提取物、天冬氨酸、鳄梨(persea gratissima)油、屏障鞘脂、丁醇、蜂蜡、山萮醇、β-谷甾醇、白桦(betulaalba)树皮提取物、琉璃苣(Borago officinalis)提取物、假叶树(ruscus aculeatus)提取物、丁二醇、金盏花提取物、金盏花油、小烛树(euphorbia cerifera)蜡、菜籽油、辛酸/癸酸甘油三酯、小豆蔻(elettaria cardamomum)油、巴西棕榈(copernicia cerifera)蜡、胡萝卜(daucus carota sativa)油、蓖麻(ricinus communis)油、神经酰胺、地蜡、鲸蜡硬脂醇聚醚-5、鲸蜡硬脂醇聚醚-12、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂醇辛酸酯、鲸蜡醇聚醚-20、鲸蜡醇聚醚-24、鲸蜡醇乙酸酯、鲸蜡醇辛酸酯、鲸蜡醇棕榈酸酯、白花春黄菊(anthemisnobilis)油、胆固醇、胆固醇酯、胆甾醇羟基硬脂酸酯、柠檬酸、鼠尾草(salvia sclarea)油、可可(theobroma cacao)脂、椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、椰子(cocos nucifera)油、胶原蛋白、胶原蛋白氨基酸、玉米(zea mays)油、脂肪酸、油酸癸酯、聚二甲基硅氧烷共聚醇、聚二甲基硅氧烷醇、己二酸二辛酯、琥珀酸二辛酯、二聚季戊四醇六辛酸酯/六癸酸酯、DNA、赤藓糖醇、乙氧基二乙二醇、亚油酸乙酯、蓝桉(Eucalyptus globulus)油、月见草(oenotherabiennis)油、脂肪酸、斑点老鹳草(Geranium maculatum)油、葡萄糖胺、葡糖谷氨酸酯、谷氨酸、甘油聚醚-26、甘油、丙三醇、二硬脂酸甘油酯、羟基硬脂酸甘油酯、月桂酸甘油酯、亚油酸甘油酯、豆蔻酸甘油酯、油酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯SE、甘氨酸、硬酯酸乙二醇酯、硬酯酸乙二醇酯SE、葡糖氨基葡聚糖、葡萄(vitis vinifera)籽油、美洲榛(corylus americana)坚果油、欧洲榛(corylus avellana)坚果油、己二醇、透明质酸、混合红花(carthamus tinctorius)油、氢化蓖麻油、氢化椰油甘油酯、氢化椰子油、氢化羊毛脂、氢化卵磷脂、氢化棕榈油甘油酯、氢化棕榈仁油、氢化大豆油、氢化牛脂酸甘油酯、氢化植物油、水解胶原蛋白、水解弹性蛋白、水解葡糖氨基葡聚糖、水解角蛋白、水解大豆蛋白、羟基化羊毛脂、羟基脯氨酸、异鲸蜡醇硬脂酸酯、异鲸蜡醇硬脂酰氧基硬脂酸酯、油酸异癸酯、异硬脂酸异丙酯、羊毛脂酸异丙酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、异硬脂酰胺DEA、异硬脂酸、异硬脂醇乳酸酯、异硬脂醇新戊酸酯、茉莉(jasminum officinale)油、霍霍巴(buxus chinensis)油、巨藻、石栗(aleurites moluccana)坚果油、乳酰胺MEA、羊毛脂醇聚醚-16、羊毛脂醇聚醚-10乙酸酯、羊毛脂、羊毛脂酸、羊毛脂醇、羊毛脂油、羊毛脂蜡、薰衣草(lavandula angustifolia)油、卵磷脂、柠檬(citrus medica limonum)油、亚油酸、亚麻酸、澳洲坚果(Macadamia ternifolia)油、麦芽糖醇、母菊(chamomilla recutita)油、甲基葡糖倍半硬脂酸酯、甲基硅烷醇PCA酯、矿物油、貂油、黄褐色被孢霉油、肉豆蔻醇乳酸酯、肉豆蔻醇肉豆蔻酸酯、肉豆蔻醇丙酸酯、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯、辛基十二醇、肉豆蔻酸辛基十二醇酯、硬脂酰氧基硬脂酸辛基十二醇酯、羟基硬脂酸辛酯、棕榈酸辛酯、水杨酸辛酯、硬脂酸辛酯、油酸、橄榄(olea europaea)油、橙(citrus aurantium dulcis)油、棕榈(elaeis guineensis)油、棕榈酸、泛硫乙胺、泛醇、泛醇基乙基醚、石蜡、PCA、桃(prunuspersica)仁油、花生(arachis hypogaea)油、PEG-8C12-18酸酯、PEG-15椰油胺、PEG-150二硬脂酸酯、PEG-60甘油异硬脂酸酯、PEG-5甘油硬脂酸酯、PEG-30甘油硬脂酸酯、PEG-7氢化蓖麻油、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油、PEG-20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、PEG-40失水山梨醇全油酸酯、PEG-5大豆甾醇、PEG-10大豆甾醇、PEG-2硬脂酸酯、PEG-8硬脂酸酯、PEG-20硬脂酸酯、PEG-32硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯、PEG-50硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、PEG-150硬脂酸酯、十五内酯、薄荷(mentha piperita)提取物/油、矿脂、磷脂、浮游生物提取物、多氨基酸多糖缩合物、聚甘油-3二异硬脂酸酯、聚季铵盐-24、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯85、肉豆蔻酸钾、棕榈酸钾、丙二醇、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、丙二醇二辛酸酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇月桂酸酯、丙二醇硬脂酸酯、丙二醇硬脂酸酯SE、PVP、吡哆素二棕榈酸酯、视黄醇、视黄醇棕榈酸酯、米(oryzasativa)糠油、RNA、迷迭香(rosmarinus officinalis)油、玫瑰油、红花(carthamustinctorius)油、鼠尾草(salvia officinalis)油、檀香(santalum album)油、丝氨酸、血清蛋白、芝麻(sesamum indicum)油、牛油果(Butyrospermum parkii)脂、蚕丝粉、软骨素硫酸钠、透明质酸钠、乳酸钠、棕榈酸钠、PCA钠、聚谷氨酸钠、可溶性胶原、山梨坦月桂酸酯、山梨坦油酸酯、山梨坦棕榈酸酯、山梨坦倍半油酸酯、山梨坦硬脂酸酯、山梨醇、大豆(glycinesoja)油、鞘脂、角鲨烷、角鲨烯、硬脂酰胺MEA-硬脂酸酯、硬脂酸、硬脂氧基聚二甲硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷、硬脂醇、硬脂醇甘草亭酸酯、硬脂醇庚酸酯、硬脂醇硬脂酸酯、向日葵(helianthus annuus)籽油、甜扁桃(prunus amygdalus dulcis)油、合成蜂蜡、生育酚、生育酚乙酸酯、生育酚亚油酸酯、三山嵛精、十三烷醇新戊酸酯、十三烷醇硬脂酸酯、三乙醇胺、三硬脂精、脲、植物油、水、蜡、小麦(triticum vulgare)胚芽油和依兰(canangaodorata)油。
c.抗氧化剂
可以与本公开的组合物一起使用的抗氧化剂的非限制性实例包括乙酰半胱氨酸、抗坏血酸多肽、抗坏血酸二棕榈酸酯、抗坏血酸甲基硅烷醇果胶酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸硬脂酸酯、BHA、BHT、叔丁基氢醌、半胱氨酸、半胱氨酸HCI、二戊基氢醌、二叔丁基氢醌、二鲸蜡醇硫代二丙酸酯、二油基生育酚甲基硅烷醇、抗坏血酸硫酸酯二钠、二硬脂醇硫代二丙酸酯、双十三烷醇硫代二丙酸酯、十二醇棓酸酯、异抗坏血酸、抗坏血酸酯、阿魏酸乙酯、阿魏酸、棓酯、氢醌、巯基乙酸异辛酯、曲酸、抗坏血酸镁、抗坏血酸磷酸酯镁、甲基硅烷醇抗坏血酸酯、天然植物抗氧化剂,例如绿茶或葡萄籽提取物、去甲二氢愈创木酸、棓酸辛酯、苯基巯基乙酸、磷酸抗坏血酸酯生育酚酯钾、亚硫酸钾、棓酸丙酯、醌、迷迭香酸、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、异抗坏血酸钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、超氧化物歧化酶、巯基乙酸钠、山梨醇缩糠醛、硫二甘醇、亚硫基二乙酰胺、亚硫基二乙酸、巯基乙酸、硫代乳酸、硫代水杨酸、生育酚聚醚-5、生育酚聚醚-10、生育酚聚醚-12、生育酚聚醚-18、生育酚聚醚-50、生育酚、托可索仑、生育酚乙酸酯、生育酚亚油酸酯、生育酚烟酸酯、生育酚琥珀酸酯和三(壬基苯酚)亚磷酸酯。
d.结构化剂
在其它非限制性方面,本公开的组合物可以包含结构化剂。在特定的方面,结构化剂帮助向组合物提供流变学特征以有助于组合物的稳定性。在其它方面,结构化剂还可以起乳化剂或表面活性剂的作用。结构化剂的非限制性实例包括硬脂酸、棕榈酸、硬脂醇、鲸蜡醇、山嵛醇、硬脂酸、棕榈酸、具有平均约1至约21个亚乙基氧单元的硬脂醇的聚乙二醇醚、具有平均约1至约5个亚乙基氧单元的鲸蜡醇的聚乙二醇醚及其混合物。
e.乳化剂
在本公开的特定方面,组合物不包含乳化剂。然而,在其它方面,组合物可以包含一种或多于一种乳化剂。乳化剂可以降低相间表面张力并改善乳液的剂型和稳定性。乳化剂可以是非离子的、阳离子的、阴离子的和两性离子的乳化剂(参见McCutcheon’s(1986);美国专利第5011681号;第4421769号;第3755560号)。非限制性实例包括甘油酯、丙二醇酯、乙二醇的脂肪酸酯、聚丙二醇的脂肪酸酯、山梨醇的酯、失水山梨醇酐酯、羧酸共聚物、葡萄糖的酯和醚、乙氧基化的酯、乙氧基化的醇、磷酸烷醇酯、聚氧乙烯脂肪醚磷酸酯、脂肪酸酰胺、乳酰乳酸酯、脂肪酸盐、TEA硬脂酸酯、DEA油醇聚醚-3磷酸酯、聚乙二醇20失水山梨醇单月桂酸酯(聚山梨醇酯20)、聚乙二醇5大豆甾醇、硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-20、硬脂醇聚醚-21、鲸蜡硬脂醇聚醚-20、鲸蜡硬脂基葡糖苷、鲸蜡硬脂醇、C12-13烷醇聚醚-3、PPG-2甲基葡糖醚二硬脂酸酯、PPG-5-鲸蜡醇聚醚-20、双-PEG/PPG-20/20聚二甲基硅氧烷、鲸蜡醇聚醚-10、聚山梨醇酯80、鲸蜡醇磷酸酯、鲸蜡醇磷酸酯钾、二乙醇胺鲸蜡醇磷酸酯、聚山梨醇酯60、甘油硬脂酸酯、PEG-100硬脂酸酯、花生醇、花生醇葡糖苷、膨润土、羟丙基环糊精及其混合物。
f.含有硅酮的化合物
在非限制性方面,含硅酮的化合物包括分子主链由交替的硅和氧原子与连接在硅原子上的侧基组成的聚合产物家族中的任何成员。通过改变-Si-O-链的长度、侧基和交联,硅酮可以合成为各种各样的材料。它们的稠度可以从液体至凝胶至固体改变。
可以在本公开的环境下使用的含硅酮的化合物包括在本说明书中所描述的或本领域普通技术人员已知的那些。非限制性实例包括硅油(例如挥发性和非挥发性油)、凝胶和固体。在某些方面,含硅的化合物包括硅油,例如聚有机硅氧烷。聚有机硅氧烷的非限制性实例包括聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、聚硅氧烷-11、苯基聚三甲基硅氧烷、三甲基硅烷基氨端二甲基硅氧烷、硬脂氧基三甲基硅烷或它们的混合物和其它任何给定比例的有机硅氧烷材料,以根据预期的应用(例如,对特定区域例如皮肤、毛发或眼睛)达到期望的稠度和应用特征。“挥发性硅油”包括具有低气化热的硅油,即通常低于约50卡每克硅油。挥发性硅油的非限制性实例包括:环聚二甲基硅氧烷,例如Dow Corning 344Fluid、DowCorning 345Fluid、Dow Corning 244Fluid和Dow Corning 245Fluid、Volatile Silicon7207(康涅狄格州丹伯里的Union Carbide Corp.);低黏度聚二甲基硅氧烷,即黏度为约50cst或更低的聚二甲基硅氧烷(例如,聚二甲基硅氧烷,例如Dow Corning 200-0.5cstFluid)。Dow Corning Fluid可以从密歇根州米德兰的Dow Corning Corporation购得。在CTFA化妆品成分词典的第三版中(通过引用并入),环聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷分别被描述为环状二甲基聚硅氧烷化合物和用三甲基硅氧基单元封端的完全甲基化的线性硅氧烷的混合物。可以在本公开的环境下使用的其它非限制性挥发性硅油包括从纽约州沃特福德的General Electric Co.,Silicone Products Div.和密歇根州艾德里安的SWSSilicones Div.of Stauffer Chemical Co.购得的那些。
g.去角质剂
去角质剂包括去除皮肤外表面上的死皮细胞的成分。这些试剂可以通过机械、化学和/或其他方式起作用。机械去角质剂的非限制性实例包括研磨剂,例如浮石、二氧化硅、布、纸、壳、珠、固体晶体、固体聚合物等。化学去角质剂的非限制性实例包括酸和酶去角质剂。可用作去角质剂的酸包括但不限于乙醇酸、乳酸、柠檬酸、α羟基酸、β羟基酸等。本领域技术人员已知的其他去角质剂也可考虑为在本公开的范围内有用。
h.精油
精油包括来自药草、花、树木和其它植物的油。这类油一般以植物细胞间微小的液滴存在,并可以通过本领域技术人员已知的若干方法进行提取(例如,蒸气蒸馏、花香提取(即使用脂肪提取)、浸渍、溶剂提取或机械压榨)。当这些类型的油暴露于空气时,其趋于挥发(即挥发性油)。因此,虽然许多精油是无色的,但是随着时间其被氧化并且颜色变得更深。精油不溶于水,但溶于醇、醚、固定油(植物的)和其它有机溶剂。在精油中发现的一般物理特征包括约160℃至240℃的沸点和约0.759至约1.096的密度。
精油一般通过发现油的来源植物命名。例如,玫瑰油或薄荷油分别来自玫瑰或薄荷植物。可以在本公开的环境下使用的精油的非限制性实例包括芝麻油、澳洲坚果油、茶树油、月见草油、西班牙鼠尾草油、西班牙迷迭香油、芫荽油、百里香油、麝香草油、玫瑰油、大茴香油、凤仙花油、香柠檬油、玫瑰木油、香柏油、甘菊油、鼠尾草油、香紫苏油、丁香油、柏木油、桉油、茴香油、海茴香油、乳香油、香叶油、姜油、葡萄柚油、茉莉油、杜松子油、薰衣草油、柠檬油、柠檬草油、来檬油、橘子油、马郁兰油、没药油、苦橙花油、橙油、绿叶油、胡椒油、黑胡椒油、苦橙叶油、松油、奥图玫瑰油、迷迭香油、檀香油、绿薄荷油、甘松油、香根草油、冬青油、依兰油。还预期本领域技术人员已知的其它精油在本公开的环境下是有用的。
i.增稠剂
包括增稠剂或凝胶剂的增稠剂包括可以增加组合物黏度的物质。增稠剂包括可以增加组合物黏度而基本上不改变组合物内活性成分功效的那些。增稠剂还可以增加本公开的组合物的稳定性。在本公开的某些方面,增稠剂包括氢化聚异丁烯、三羟基硬脂精、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、或其混合物。
可以在本公开的环境下使用的另外的增稠剂的非限制性实例包括羧酸聚合物、交联的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖和胶。羧酸聚合物的实例包括含有一种或多于一种衍生自丙烯酸的单体的交联化合物、经取代的丙烯酸和这些丙烯酸的盐和酯和经取代的丙烯酸,其中所述交联剂含有两个或多于两个碳-碳双键,并衍生自多元醇(参见美国专利第5087445号;第4509949号;第2798053号;CTFA国际化妆品成分词典,第四版,1991,第12页和80页)。可商购获得的羧酸聚合物的实例包括卡波姆,其为丙烯酸与蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚交联的均聚物(例如,购自B.F.Goodrich的CarbopolTM 900系列)。
交联的聚丙烯酸酯聚合物的非限制性实例包括阳离子型和非离子型聚合物。一个实例为聚丙烯酸钠。其它的实例描述于美国专利第5100660号、第4849484号、第4835206号、第4628078号、第4599379号。
聚丙烯酰胺聚合物(包括非离子的聚丙烯酰胺聚合物,其包括经取代的支化的或未支化的聚合物)的非限制性实例包括聚丙烯酰胺、异构烷烃和月桂醇聚醚-7、丙烯酰胺与被丙烯酸和经取代的丙烯酸取代的丙烯酰胺的多嵌段共聚物。
多糖的非限制性实例包括纤维素、羧甲基羟乙基纤维素、乙酸丙酸羧酸纤维素、羟乙基纤维素、羟乙基乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、微晶纤维素、纤维素硫酸钠及其混合物。其他实例为烷基取代的纤维素,其中纤维素聚合物的羟基被羟烷基化(优选羟乙基化或羟丙基化)以形成羟烷基化的纤维素,其然后用C10至C30直链或带支链的烷基基团通过醚键进一步改性。一般这些聚合物为C10至C30直链或带支链的醇与羟烷基纤维素的醚。其它有用的多糖包括硬葡聚糖类,其包含每三个单元具有一个(1-6)连接的葡萄糖的(1-3)连接的葡萄糖单元的直链。
本公开可以使用的胶的非限制性实例包括***树胶、琼脂、藻胶、藻酸、藻酸铵、支链淀粉、藻酸钙、角叉菜胶钙、肉毒碱、角叉菜胶、糊精、明胶、结冷胶、瓜尔豆胶、瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵、锂蒙脱石、透明质酸、水合二氧化硅、羟丙基壳聚糖、羟丙基瓜尔胶、卡拉亚胶、纤维素胶、巨藻、角豆胶、纳豆胶、藻酸钾、角叉菜胶钾、藻酸丙二醇酯、菌核胶、羧甲基葡聚糖钠、角叉菜胶钠、黄蓍胶、黄原胶及其混合物。
j.防腐剂
可以在本公开的环境下使用的防腐剂的非限制性实例包括季铵盐防腐剂,例如苯甲酸钠、苯甲酸钾、山梨酸钾、碘丙炔基正丁氨基甲酸酯、聚季铵盐-1和苄烷铵卤化物(例如苯扎氯铵(“BAC”)和苯扎溴铵)、对羟基苯甲酸酯(例如对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯)、苯氧基乙醇、苄醇、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫汞撒或其组合。
2、药物成分
还预期药物活性成分对本公开的组合物是有用的。药物活性成分的非限制性实例包括抗粉刺剂、用于处理酒渣鼻的试剂、止痛剂、麻醉剂、***直肠剂、抗组胺药、包括非甾族消炎药的消炎剂、抗生素、抗真菌剂、抗病毒素、抗微生物剂、抗癌症活性剂、抗疥螨剂、灭虱剂、抗肿瘤药、防汗药、止痒剂、抗牛皮癣药、抗脂溢剂、生物活性蛋白质和多肽、烧伤处理剂、烧灼剂、脱色剂、脱毛剂、尿布疹处理剂、酶、毛发生长刺激剂、包括DFMO及其盐和类似物的毛发生长抑制剂、止血剂、角质分离剂、口疮处理剂、唇疱疹处理剂、牙科或牙周处理剂、光敏感活性剂、皮肤保护剂/屏障剂、包括激素和皮质激素的类固醇、晒伤处理剂、遮光剂、经皮活性剂、鼻活性剂、***活性剂、疣处理剂、创伤处理剂、创伤愈合剂等。
F.试剂盒
还预期了用于本公开的某些方面的试剂盒。例如,本公开的组合物可以包括在试剂盒内。试剂盒可以包括容器。容器可以包括瓶子、金属管、层压管、塑料管、分配器、加压容器、屏障容器、包装、分室、口红容器、压缩容器、能够保存化妆品组合物的化妆品盘或其它类型的容器,例如注射或吹塑成型的塑料容器,其中保存分散体或组合物或期望的瓶子、分配器或包装。试剂盒和/或容器在其表面上可包含标记。举例来说,标记可以是字词、短语、缩写、图片或符号。
所述容器可以分配预定量的组合物。在其他实施方案中,可以挤压容器(例如金属管、层压管或塑料管)以分配期望量的组合物。组合物可以分配为喷雾、气溶胶、液体、流体或半固体。容器可以具有喷雾、抽吸或挤压机构。试剂盒还可以包含使用试剂盒组分以及使用任何包含于容器内的其他组合物的说明书。说明书可以包含使用和保存组合物的说明。
实施例
列出了以下实施例以说明本公开的优选实施方案。本领域技术人员应理解,以下实施例中所公开的技术代表发明人发现的在本公开的实践中发挥良好作用的技术,并因此可以被认为为其实践建立优选的模式。然而,根据本公开,本领域技术人员应理解,在不脱离本公开的精神和范围的情况下,在所公开的具体实施方案中可以做许多改变,并仍获得类似或相似的结果。
本文所公开和要求保护的所有组合物和方法根据本公开可以不需要过多实验即可做出和实现。尽管本发明的组合物和方法已经按照优选实施方案进行了描述,但是对于本领域技术人员明显的是,在不脱离本发明的构思、精神和范围的情况下,可以对组合物和方法以及在本文所描述方法的步骤或步骤的顺序中进行改变。更具体地,明显地,化学和生理两方面都相关的特定试剂可以替代本文所描述的试剂,同时会实现相同或相似的结果。所有对本领域技术人员明显的这类相似的替代和改变都被视为在如所附权利要求限定的本发明的构思、范围和概念内。
实施例1
具有实施例1的成分的配方根据本公开的信息被制备为局部皮肤用组合物。表1中的配方是制备成美容面膜的局部皮肤用组合物的实例。
表1^
^可通过在烧杯中在70℃至75℃下加热将成分混合直至均匀来制备配方。随后,可以将配方冷却至常温(20℃至25℃)。此外,如果需要,可以添加其它的成分,例如,以改变组合物的流变性质或为皮肤提供益处的成分。
*例如,可以添加赋形剂以改变组合物的流变特性。或者,只要组合物中的水量为至少35重量%,优选40重量%至60重量%,水量可以改变。
实施例2
(使用的材料)
表2中的活性成分被用于获得下面提到的体外数据。
表2
成分 |
白鸡蛋花花提取物,由Southern Cross Botanicals以商品名Abacross供应 |
实施例3
(体外试验)
肿瘤坏死因子α(TNF-α)试验:TNF超家族的原型配体TNF-α是一种在炎症中起核心作用的多效性细胞因子。其表达的增加与促炎活性的上调有关。
使用的生物试验分析了白花鸡蛋花花提取物对人表皮角质细胞产生TNF-α的影响。该试验的终点是反映TNF-α的存在和细胞活力的分光光度测量。
在37℃下,5%CO2中,用佛波醇12-肉豆蔻酸13-乙酸酯(PMA,10ng/ml,SigmaChemical,#P1585-1MG)与Southern Cross Botanicals提供的0.1重量%的Abacross(Abacross含有白花鸡蛋花花提取物)或与载剂(作为阴性对照)处理在EpiLife标准生长培养基(Cascade Biologics)中培养的亚融合的正常成人角质形成细胞(CascadeBiologics)6小时。PMA会导致TNF-α分泌的急剧增加,该分泌在治疗后6小时达到峰值。孵育后,收集细胞培养基并使用来自R&D Systems(#DTA00C)的夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)定量TNF-α分泌量。
该酶联免疫吸附试验采用定量夹心酶联免疫试验技术,由此对TNF-α特异性的单克隆抗体预涂在微孔板上。将标准品和样品移液到孔中,并且存在的任何TNF-α都被固定化的抗体结合。在洗去任何未结合的物质后,将特异于TNF-α的酶联多克隆抗体添加到孔中。在洗涤以去除任何未结合的抗体-酶试剂后,将底物溶液添加到孔中,使用酶标仪在450nm处检测颜色与初始步骤中结合的TNF-α的量成比例。可以停止显色并测量显色的强度。
实验表明,由Southern Cross Botanicals提供的0.1重量%的Abacross使TNF-α的分泌量减少了54%。
实施例4
(其他测定)
可以通过本领域普通技术人员已知的方法来确定可用于确定任何一种成分或成分的任何组合或具有所述成分的组合的组合物在整个说明书和权利要求书中公开的功效的试验法。以下是可以在本公开的上下文中使用的非限制性试验。应该认识到可以使用其它测试程序,包括例如客观和主观程序。
B16色素沉着测定:黑色素生成是黑色素细胞产生黑色素的过程,黑色素是一种天然产生的色素,可以赋予皮肤、头发和眼睛颜色。抑制黑色素生成有利于防止皮肤变黑和淡化与老化相关的黑斑。这种生物测定可以利用永生小鼠黑色素瘤细胞系B16-F1黑色素细胞(ATCC)来分析化合物对黑色素生成的影响。该测定的终点可以是黑色素产生和细胞活力的分光光度法测量。B16-F1黑素细胞可以在具有10%胎牛血清(Mediatech)的标准DMEM生长培养基中在37℃和10%CO2中培养,然后用本说明书中公开的任何一种活性成分、成分组合或具有所述组合的组合物处理6天。孵育后,可通过405nm处的吸光度测量黑色素分泌并定量细胞活力。
胶原蛋白刺激测定:胶原蛋白是对皮肤结构至关重要的细胞外基质蛋白。增加胶原蛋白的合成有助于改善皮肤的紧致度和弹性。这种生物试验可以用于检查任何一种活性成分,成分组合,或说明书中公开的组合对人表皮成纤维细胞产生前胶原肽(胶原的前体)的影响。该试验的终点是反映前胶原肽的存在和细胞活力的分光光度测量。该试验采用定量夹心酶联免疫试验技术,由此对前胶原肽特异性的单克隆抗体预涂在微孔板上。将标准品和样品移液到孔中,并且存在的任何前胶原肽都被固定化的抗体结合。在洗去任何未结合的物质后,将特异于前胶原肽的酶联多克隆抗体添加到孔中。在洗涤以去除任何未结合的抗体-酶试剂后,将底物溶液添加到孔中,使用酶标仪在450nm处检测颜色与初始步骤中结合的前胶原肽的量成比例。可以停止显色并测量颜色的强度。对于样品和对照组的产生,将其在37℃和10%CO2中在含有10%胎牛血清(Mediatech)的标准DMEM生长培养基中培养,然后使用说明书中公开的每种组合的成分或组合物进行处理3天。孵育后,收集细胞培养基并使用来自R&D Systems(#DTA00C)的夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)定量前胶原肽的分泌量。与对照组相比,使用包含金银花叶提取物的组合物,胶原的产生增加了80%。
弹性蛋白刺激测定:弹性蛋白是一种***蛋白,可帮助皮肤在拉伸或收缩后恢复形状。弹性蛋白也是一种重要的用于需要储存机械能的地方承重蛋白。弹性蛋白是通过在赖氨酰氧化酶催化的反应中连接许多可溶性原弹性蛋白分子制成的。使用抗弹性蛋白的免疫荧光抗体对培养的人成纤维细胞染色,在培养的人成纤维细胞中检测弹性蛋白分泌和弹性蛋白纤维。
层黏连蛋白和纤连蛋白测定:层黏连蛋白和纤连蛋白是真皮-表皮连接(DEJ)(也称为基膜)中的主要蛋白质。DEJ位于真皮和表皮互锁之间,形成称为网状脊的指状突起。表皮细胞从真皮的血管中获取营养。网脊增加了暴露于这些血管和所需营养物质的表皮表面积。DEJ提供两个组织隔间的粘附并控制皮肤的结构完整性。层粘连蛋白和纤连蛋白是位于DEJ的两种结构糖蛋白。就像把细胞粘合在一起的胶水,层粘连蛋白和纤连蛋白由真皮成纤维细胞分泌,以帮助促进表皮细胞内和细胞间对DEJ的黏附。通过在含有或不含1.0%终浓度的培养基中处理3天的培养的人成纤维细胞的细胞上清中定量层粘连蛋白和纤连蛋白的分泌,可以监测层粘连蛋白和纤连蛋白的分泌。孵育后,用酶联免疫吸附试验(ELISA)中抗每个蛋白的免疫荧光抗体检测层粘连蛋白和纤连蛋白的含量。测量结果对细胞代谢活性进行了归一化处理,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺酸苯基)-2H-四唑鎓(MTS)的生物转化来确定。与对照组相比,使用包含金银花叶提取物的组合物,层粘连蛋白的分泌增加了78%。
抗氧化剂(AO)测定:测量说明书中公开的任何一种成分、成分组合或具有所述组合的组合物的总抗氧化能力体外生物试验。试验依赖于样品中抗氧化剂通过高铁肌红蛋白抑制((2,2'-联氮基-二-[3-乙基苯并噻唑啉磺酸盐])向·+的氧化能力。生物体的抗氧化***包括酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶;大分子例如白蛋白、铜蓝蛋白和铁蛋白;以及一系列小分子,包括抗坏血酸、α-生育酚、β-胡萝卜素、还原型谷胱甘肽、尿酸和胆红素。内源性和食物来源的抗氧化剂的总和代表细胞外液的总抗氧化活性。所有不同抗氧化剂的协同作用提供了比任何单一化合物更大的保护免受活性氧或氮自由基的攻击。因此,与通过测量单个成分获得的信息相比,整体抗氧化能力可能会提供更多相关的生物学信息,因为它考虑了血浆和体液中存在的所有抗氧化剂的累积效应。将样品中抗氧化剂防止ABTS氧化的能力与Trolox(水溶性生育酚类似物)的能力进行比较,并将其定量为摩尔Trolox等价物。来自Cayman Chemical(Ann Arbor,Michigan USA)的抗氧化能力试剂盒#709001作为体外生物来测量任何一种有效成分、成分的组合、或具有说明书中公开的组合的成分的总抗氧化能力。该协议可以根据制造商的建议来执行。与对照组相比,发现使用包含金银花叶提取物的组合物将抗氧化能力抑制了97%。
ORAC测定:本说明书中公开的任何一种活性成分、成分组合或具有所述组合的组合物的氧自由基吸收(或吸光度)能力(ORAC),也可以通过测量这些成分或组合物的抗氧化活性来试验。抗氧化活性表示还原氧化剂(氧化剂)的能力。该试验定量了会对细胞(例如皮肤细胞)造成损害的抑制氧化剂(例如氧自由基)作用所需的程度和时间长度。说明书中公开的任何一种活性成分、成分组合或具有所述组合的组合物的ORAC值可以通过本领域普通技术人员已知的方法确定(参见美国专利申请第2004/0109905号和第2005/0163880号;如商业上可用的试剂盒,例如Zen-Bio ORAC抗以氧化检测试剂盒(#AOX-2))。Zen-Bio ORAC抗氧化检测试剂盒可测量由于AAPH2,2'-偶氮二异丁基脒二盐酸盐分解形成过氧自由基而导致的荧光素荧光随时间的损失。Trolox是一种水溶性维生素E类似物,可作为阳性对照,以剂量依赖性方式抑制荧光素衰减。
酪胺酸酶活性测定:在哺乳动物细胞中,酪氨酸酶催化从酪氨酸(和多巴色素聚合)多步生物合成黑色素的两个步骤。酪氨酸酶定位于黑色素细胞并产生黑色素(芳香醌化合物),赋予皮肤、头发和眼睛颜色。纯化的酪氨酸酶(Sigma)可以在存在或不存在本行说明书公开的每种活性成分、任何一种成分组合或具有所述组合的组合物的情况下与其底物L-多巴(Fisher)一起孵育。可以通过在490nm的比色板读数来评估颜料的形成。与未处理的对照相比,可以计算酪氨酸酶活性的抑制百分比,以确定测试成分或其组合抑制纯化酶活性的能力。将测试提取物抑制与曲酸(Sigma)的抑制进行比较。与对照组相比,使用这种试验,发现包含植物类氨基酸的组合物抑制了酪氨酸酶39%。
基质金属蛋白酶3和9酶活性(MMP3;MMP9)测定:体外基质金属蛋白酶(MMP)抑制试验。MMP是细胞外蛋白酶,凭借其广泛的底物特异性在许多正常和疾病状态中发挥作用。MMP3底物包括胶原蛋白、纤连蛋白和层粘连蛋白;MMP9底物包括胶原蛋白VII、纤连蛋白和层粘连蛋白。使用来自BioMol International的用于MMP3(AK-400)和MMP-9(AK-410)的Colorimetric Drug Discovery试剂盒,此测定法设计为使用硫肽作为发色底物(Ac-PLG-[2-巯基-4-甲基戊酰基]-LG-OC2H5)5,6测定MMP酶活性。MMP裂解位点肽键被硫肽中的硫酯键取代。MMP对该键的水解产生了巯基,该巯基与DTNB[5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸),埃尔曼试剂]反应形成2-硝基-5-硫代苯甲酸,可通过在412nm处的吸光度进行检测(在pH 6.0和高于7时,ε=13600M-1cm-1)。说明书中公开的活性成分、任何一种成分的组合或具有所述组合的组合物都可以根据该方法进行测定。
基质金属蛋白酶1酶活性(MMP1)测定:体外基质金属蛋白酶(MMP)抑制试验。MMP是细胞外蛋白酶,凭借其广泛的底物特异性在许多正常和疾病状态中发挥作用。MMP1底物包括胶原蛋白IV。Molecular Probes Enz/Chek明胶酶/胶原酶检测试剂盒(#E12055)利用荧光明胶底物检测MMP1蛋白酶活性。在蛋白水解切割后,显示出亮绿色的荧光,并使用荧光酶标仪对其进行监测以测量酶活性。
Invitrogen的Enz/Chek明胶酶/胶原酶检测试剂盒(#E12055)设计为用于测量MMP1酶活性的体外检测。说明书中公开的活性成分、任何一种成分的组合或具有所述组合的组合物都可以根据该方法进行测定。该测定依赖于纯化的MMP1酶降解荧光明胶底物的能力。一旦底物被MMP1特异性切割,就会显示亮绿色荧光,并可以使用荧光酶标仪进行监测。在存在或不存在纯化的酶和底物的情况下孵育测试材料,以确定其蛋白酶抑制剂的能力。
环氧合酶(COX)测定:体外环氧合酶-1和环氧合酶-2(COX-1、COX-2)抑制试验。COX是一种展现出环氧合酶和过氧化物酶两者活性的双功能酶。环氧合酶活性将花生四烯酸转换为过氧化氢内过氧化物(***素G2;PGG2),过氧化物酶组分将内过氧化物(***素H2;PGH2)还原为相应的醇,***素、血栓素和环***素的前体。该COX抑制剂筛选测定测量环氧合酶的过氧化物酶组分。过氧化物酶活性通过监测氧化的N,N,N',N'-四甲基-对苯二胺(TMPD)的出现比色地进行分析。该抑制剂筛选分析包括COX-1和COX-2酶两者,以筛选同工酶特异性抑制剂。比色的COX(绵羊)抑制剂筛选分析(#760111,Cayman Chemical)可以用于分析说明书中所公开的活性成分、任一种成分组合、或具有所述组合的组合物对纯化的环氧合酶(COX-1或COX-2)活性的效果。根据制造商的用法说明,纯化的酶、血红素和测试提取物可以在分析缓冲液中混合,并在室温下摇动孵育15分钟。孵育之后,可以加入花生四烯酸和比色底物开始反应。颜色变化可以通过在590nm的比色板读数进行评估。COX-1或COX-2活性的抑制百分比可以通过与未处理的对照物比较进行计算,以确定测试提取物抑制纯化的酶活性的能力。
脂氧合酶(LO)测定:体外脂肪氧化酶(LO)抑制试验。LO是非血红素含铁双加氧酶,其催化分子氧加到脂肪酸中。亚油酸酯和花生四烯酸酯是植物和动物中LO的主要底物。然后可以将花生四烯酸转化为羟基二十烷三烯(HEAT)酸衍生物,随后其转化为有效的炎症介质白三烯。该测定提供了一种通过测量脂肪氧化酶(5-LO、12-LO或15-LO)与花生四烯酸孵育产生的氢过氧化物来筛选脂肪氧化酶抑制剂的准确而方便的方法。比色LO抑制剂筛选试剂盒(#760700,Cayman Chemical)可用于确定每种活性成分、任何一种成分组合或具有说明书中公开的所述组合的组合物抑制酶活性的能力。可以将纯化的15-脂氧合酶和测试成分在测定缓冲液中混合,并在室温下振摇孵育10分钟。孵育后,可以加入花生四烯酸以引发反应,并可以将混合物在室温下再孵育10分钟。可以添加比色底物以终止催化作用,并且可以通过在490nm处读取荧光板来评估颜色进展。与未处理的对照相比,可以计算脂肪氧合酶活性的抑制百分比,以确定每种活性成分、任何一种成分组合或具有说明书中公开的所述组合的组合物抑制纯化酶活性的能力。
弹性蛋白酶测定:来自Molecular Probes(Eugene,Oregon USA)的Elastase Assay(试剂盒编号E-12056)可用作体外酶抑制测定,用于测量说明书中公开的每种活性成分、任何一种成分组合或具有所述组合的组合物的弹性蛋白酶活性的抑制。EnzChek试剂盒包含可以用染料标记的可溶性牛颈韧带弹性蛋白,从而使结合物的荧光能够猝灭。非荧光底物可以被弹性蛋白酶或其他蛋白酶消化,以产生高荧光片段。由此产生的荧光增加可以用荧光酶标仪监测。来自弹性蛋白底物的消化产物在约505nm处具有最大吸收值,在约515nm处具有最大荧光发射。当使用EnzChek弹性蛋白酶检测试剂盒筛选弹性蛋白酶抑制剂时,该肽,N-甲氧基琥珀酰-Ala-Ala-Pro-Val-氯甲基酮可用作弹性蛋白酶的选择性集体抑制剂。
控油测定:用于测量皮脂腺中皮脂分泌的减少和/或皮脂腺中皮脂产生的减少的测定可以通过使用本领域普通技术人员已知的标准技术进行测定。在一个例子中,可以使用前额。可将本说明书中所公开的每种活性成分、任一种成分组合或具有所述组合的组合物每天一次或两次地施用到前额的一部分一段固定的日子(例如1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天或多于14天),而前额的其他部分不用组合物处理。在一段固定的日子期满后,皮脂分泌可以通过将细吸油纸施用到经处理的和未经处理的前额皮肤上进行分析。这是通过首先用湿的和干的布从经处理的和未经处理的区域除去所有皮脂完成的。然后吸油纸施用到经处理的和未经处理的前额区域,可以绕着前额放置橡皮筋以轻轻地将吸油纸压到皮肤上。2小时后,可以移去吸油纸,使其干燥,然后进行透照。较深的吸油纸对应于较多的皮脂分泌(或较浅的吸油纸对应于减少的皮脂分泌)。
红斑试验:测量皮肤发红减少的测定可以使用Minolta Chromometer进行评估。皮肤红斑可以通过在对象前臂施用0.2%的十二烷基硫酸钠溶液来引发。该区域用封闭的贴片保护24小时。24小时后,除去贴片,可以使用Minolta Chroma Meter的a*值对刺激引发的发红进行评估。a*值测量皮肤色调在红色区域的变化。在阅读后,立即用说明书中公开的每种活性成分、任一种成分组合、或具有所述组合的组合物来处理该区域。可以定期进行重复测量以确定制剂减少发红和刺激的能力。
皮肤水分/水合作用测定:可以通过Nova Dermal Phase Meter使用阻抗测量来测量皮肤水分/水合作用的益处。阻抗计测量皮肤水分含量的变化。皮肤的外层具有不同的电特性。当皮肤干燥时,它的导电性非常差。随着它变得更加水合,增加了电导率。因此,皮肤阻抗的变化(与电导率相关)可用于评估皮肤水合作用的变化。可以根据仪器说明在每个测试日对设备进行校准。还可以标记温度和相对湿度。可以如下评估对象:在测量之前,他们可以在具有规定湿度(例如,30-50%)和温度(例如,68-72℃)的房间中平衡。可以在面部的每一侧获取三个独立的阻抗读数,记录并取平均值。T5设置可用于阻抗计,它平均每五秒应用到面部的阻抗值。可以报告具有统计方差和显著性的变化。说明书中公开的每一种活性成分、任何一种成分组合或具有所述组合的组合物都可以根据该方法进行测定。
皮肤清透度和雀斑与老年斑减少的测定:皮肤清透度和雀斑与老年斑减少使用Minolta Chromometer进行评价。皮肤色调改变可以使用Minolta Chroma Meter的a*值进行评估以确定由于产品处理引起刺激的可能性。a*值测量皮肤色调在红色区域的变化。这用于确定说明书中公开的每种活性成分、任一种成分组合、或具有所述组合的组合物是否诱导刺激。测量可以在脸的每一侧上进行并进行平均,作为左脸和右脸的值。皮肤清透度也可以使用Minolta Meter进行测量。测量是Minolta Meter的a*值、b值、和L值的组合,并与皮肤的亮度有关,而且非常好的对应皮肤的光滑度和水合。皮肤读数如上进行。在一个非限制性方面,皮肤清透度可以描述为L/C,其中C是色度并定义为(a2+b2)1/2。
皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和皮肤色调测定:皮肤干燥、表面细纹、皮肤光滑度和皮肤色调可以用临床评分技术进行评估。例如,皮肤干燥的临床评分可以通过五点标准Kligman scale进行确定:(0)皮肤是柔软和湿润的;(1)皮肤呈现正常而没有可见的干燥;(2)皮肤触感轻微干燥而没有可见的剥落;(3)皮肤感觉干燥、坚韧并且具有鳞屑的发白外观;以及(4)皮肤感觉非常干燥、粗糙并且具有鳞屑的发白外观。评估可以由两个临床医师独立进行并进行平均。
皮肤色调临床评分测定:皮肤色调的临床评分可以通过十点模拟数值刻度实施:(10)平滑的均匀的皮肤、粉红棕色的颜色。手持放大镜检查时没有暗的、发红的或有鳞的斑块。皮肤的微观纹理摸上去非常均匀;(7)不用放大镜观察均匀的皮肤色调。没有鳞状区域,但是有由于色素淀积或红斑引起的色素异常。没有直径大于1cm的变色;(4)轻易地注意到皮肤色素异常和不均匀的纹理。轻微有鳞。一些区域摸上去粗糙的皮肤;以及(1)不均匀的皮肤着色和纹理。多个区域有鳞和变色,色素减退型、发红的或暗斑。直径超过1cm的大面积不均匀着色。评估由两个临床医师独立进行并进行平均。
皮肤光滑度的临床评分测定:皮肤光滑度的临床评分可以通过一个十点模拟数值量表进行分析:(10)光滑的,皮肤是湿润的和闪光的,手指划过表面时没有阻力;(7)一定程度光滑的,微小的阻力;(4)粗糙的、可见地改变的,摩擦时有摩擦力;以及(1)粗糙的、片状的、不均匀的表面。评估由两个临床医师独立进行并进行平均。
用Packman等人(1978)公开的方法进行的皮肤光滑度和皱纹减少测定:皮肤光滑度和皱纹的减少也可以通过使用Packman等人(1978)公开的方法进行可视化评估。例如,每名对象就诊时,对每名对象的表面面纹(SFL)的深度、浅度和总数量都可以进行认真的评分和记录。通过将数量因子乘以深度/宽度/长度因子得到数字的分数。获得眼睛区域和嘴巴区域(左侧和右侧)的分数,加到一起作为总的皱纹分数。
使用Hargens Ballistometer进行皮肤紧致度试验:皮肤紧致度可以用HargensBallistometer进行测量,Hargens Ballistometer是一种通过在皮肤上落下一个小物体并记录前两个反弹峰来评估皮肤弹性和紧致度的装置。Ballistometry是使用相对钝的探头(4平方毫米-接触面积)的小的轻量探测器。探测器轻轻地穿透进入皮肤,导致依赖于皮肤外层性质的测量,皮肤外层包括角质层和外表皮以及部分真皮层。
用Gas Bearing Electrodynamometer进行的皮肤柔软度/柔韧性试验:皮肤柔软度/柔韧性可以使用Gas Bearing Electrodynamometer进行评估,Gas BearingElectrodynamometer是一种测量皮肤压力/张力性质的仪器。皮肤的黏弹性与皮肤保湿有关。可以通过用双面胶将探测器附着在皮肤表面实现对脸颊区域预定位点的测量。大约3.5gm的力平行施加于皮肤表面,精确地测量皮肤的位移。然后可以计算皮肤的柔韧性,并表达为DSR(动态弹簧刚度,以gm/mm计)。
用复制品进行的纹和皱纹的显现试验:皮肤上纹和皱纹的显现可以使用复制品进行评估,复制品是皮肤表面的印模。可以使用如硅橡胶的材料。复制品可以通过图像分析进行分析。纹和皱纹可见性的变化可以通过利用硅复制品形成对象的脸并用计算机图像分析***分析复制品图像进行客观地定量。复制品可以从眼睛区域和颈部区域获得,并用数码相机以低照明入射角进行拍摄。数字图像可以用图像处理程序进行分析并确定复制品被皱纹和细纹覆盖的区域。
用表面光度仪/记录针的方法进行的皮肤表面轮廓分析:皮肤表面轮廓可以通过使用表面光度仪/记录针的方法进行测量。这包括闪光或拖动记录针穿过复制品表面。皮肤表面轮廓可以通过使用表面光度仪/记录针的方法进行测量。这包括闪光或拖动记录针穿过复制品表面。记录针的垂直位移通过距离传感器可以录入计算机,在扫描复制品的一定距离后,皮肤轮廓的分析可以以二维曲面产生。该扫描可以沿着固定的轴重复任意次数以产生模拟的皮肤3-D图像。使用记录针技术可以获得十个随机的复制品截面,并组合产生平均值。感兴趣的值包括Ra,其为通过积分相对于平局轮廓高度的轮廓高度计算得到的所有粗糙度(高度)值的算术平均数。Rt,其为最高峰和最低谷之间的最大垂直距离,以及Rz,其为平均峰振幅减去平均峰高度。数值以用mm为单位标定的数值给出。设备应在每次使用前通过扫描已知数值的金属标准物进行归一化。Ra值可以通过下式计算:Ra=归一化粗糙度;lm=横向(扫描)长度;以及y=轮廓位置相对于平均轮廓高度的绝对值(x-轴)。
MELANODERMTM试验:在其它非限制性方面,本说明书中公开的每种活性成分、任何一种成分组合或具有所述组合的组合物的功效可以通过使用皮肤类似物例如MELANODERMTM来评估。黑色素细胞是皮肤类似物中的细胞之一,当暴露于黑色素前体L-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)时会呈阳性染色。皮肤类似物MELANODERMTM可以用含有说明书中公开的每种活性成分的多种基质、任何一种成分组合、或具有所述组合的组合物或单独用基质作为对照组进行处理。或者,可以使用未经处理的皮肤类似物样品作为对照。
聚丝蛋白的制备:可以测量由于说明书中公开的每种活性成分、任何一种成分的组合或具有所述组合的组合物产生的角质细胞中聚丝蛋白的变化。聚丝蛋白是皮肤中天然保湿因子(NMF)的前体。增加的NMF会增加皮肤的水分含量。可以使用分析角质形成细胞裂解物中的聚丝蛋白浓度的生物试验来确定经处理和未经处理的角质形成细胞中的聚丝蛋白产生。可用于定量聚丝蛋白产生的生物测定的非限制性实例是simonTMwestern blotting protocol。对于每个样品,正常人表皮角质形成细胞(NHEK)在含有来自Life Technologies(M-EP-500-CA)的钙的EPI-200–Mattek生长培养基中生长。NHEK在处理前在37℃和5%的CO2的生长培养基中孵育过夜。然后将NHEK在含有1%测试化合物/提取物或无化合物/提取物(阴性对照)的生长培养基中孵育24小时至36小时。然后可以将NHEK洗涤、收集并储存在冰上或更冷的地方,直到使用裂解缓冲液和超声处理在冰上裂解。可以确定样品的蛋白质浓度并将其用于标准化样品。裂解物可以储存在-80℃,直到用于定量试验。
SimonTM蛋白质印迹生物测定法采用定量蛋白质印迹免疫测定技术,使用聚丝蛋白特异性抗体定量检测测试样品中的聚丝蛋白。裂解细胞样品并针对蛋白质浓度进行标准化。然后可以使用毛细管电泳装载标准化样品和分子量标准并在变性蛋白质分离凝胶上运行。然后使用对丝聚蛋白特异的一抗将凝胶中的蛋白质固定并进行免疫探测。然后可以用结合一抗的酶联检测抗体对固定的蛋白质进行免疫探测。然后可以将化学发光底物溶液添加到固定的蛋白质中,以使化学发光的发展与固定中结合的聚丝蛋白量成比例。化学发光的发展可以在特定时间停止,化学发光信号的强度可以测量并与阳性和阴性对照进行比较。
闭合蛋白:可以测量由于说明书中公开的每种活性成分、任何一种成分的组合或具有所述组合的组合物产生的角质细胞中闭合蛋白的变化。闭合蛋白是一种对形成紧密连接和皮肤的水分屏障功能至关重要的蛋白质。如何确定经处理和未经处理的角质形成细胞中闭合蛋白产生的非限制性实例是通过使用分析角质形成细胞裂解物中的闭合蛋白浓度的生物试验法。使用SimonTM蛋白质印迹检测生物测定。对于样品,LifeTechnologies(C-005-5C)的成人表皮角质形成细胞(HEKa)可以在37℃和5%的CO2下在含有来自Life Technologies(M-EP-500-CA)的钙并补充有来自Life Technologies(S-101-5)的角质细胞生长补充剂(HKGS)的Epilife生长介质下生长。然后将HEKa在含有测试化合物/提取物的生长培养基中、作为阴性对照的无化合物/提取物的生长培养基、作为阳性对照的1m MCaCl2的生长培养基中孵育24小时至48小时。然后可以将HEKa洗涤、收集并储存在冰上或更冷的地方,直到使用裂解缓冲液和超声处理在冰上裂解。可以确定样品的蛋白质浓度并将其用于标准化样品。裂解物储存在-80℃,直到用于生物试验。
SimonTM蛋白质印迹生物测定法采用定量蛋白质印迹免疫测定技术,使用闭合蛋白特异性抗体定量检测测试样品中的闭合蛋白。裂解细胞样品并针对蛋白质浓度进行标准化。然后使用毛细管电泳装载标准化样品和分子量标准并在变性蛋白质分离凝胶上运行。然后使用对闭合蛋白特异的一抗将凝胶中的蛋白质固定并进行免疫探测。固定的蛋白质用与一抗结合的酶联检测抗体进行免疫探测。然后将化学发光底物溶液添加到固定的蛋白质中,以使化学发光的发展与固定中结合的闭合蛋白量成比例。化学发光的发展可以在特定时间停止,化学发光信号的强度可以测量并与阳性和阴性对照进行比较。
角质形成细胞单层渗透性:可以测量由于说明书中公开的每种活性成分、任何一种成分的组合或具有所述组合的组合物产生的质形成细胞单层渗透性的变化。角质形成细胞单层渗透性是衡量皮肤屏障完整性的指标。作为非限制性实例,可使用Millipore(ECM642)体外血管通透性试验经处理和未经处理的角质形成细胞中的角质形成细胞单层渗透性。该试验分析内皮细胞吸附、转运和渗透性。简而言之,可以将来自LifeTechnologies(C-005-5C)的成人表皮角质形成细胞接种到收集孔内的多孔胶原蛋白涂层膜上。然后将角质形成细胞在37℃和5%CO2下的含有Life Technologies(M-EP-500-CA)的钙和Life Technologies(S-101-5)的角质形成细胞生长补充剂(HKGS)Epilife生长培养基中孵育24小时。该孵育时间允许细胞形成单层并封闭膜孔。然后将培养基更换为含有(测试样品)或不含(未处理的对照)测试化合物/提取物的新鲜培养基,并将角质形成细胞在37℃和5%CO2下再孵育48小时。为了确定在有/没有测试化合物/提取物孵育后角质形成细胞单层的渗透性,将培养基更换为含有高分子量异硫氰酸荧光素(FITC)-葡聚糖的新鲜培养基,并将角质形成细胞在37℃和5%的CO2下孵育4小时。在4小时的孵育过程中,FITC可以通过角质形成细胞单层和多孔膜以与单层渗透性成比例的速率进入收集孔。孵育4小时后,可以确定收集孔中的细胞活力和FITC含量。对于FITC含量,收集孔中的介质被收集并在520nm激发时在480nm(Em)确定介质的荧光。与未处理的对照相比,渗透率百分比和变化百分比可以通过以下等式确定:渗透率百分比=((测试样品的平均Ex/Em)/未处理对照的平均Ex/Em)*100;百分比变化=测试样品的百分比渗透-未处理对照的百分比渗透率。
透明质酸的制备:可以测量由于说明书中公开的每种活性成分、任何一种成分的组合或具有所述组合的组合物在人皮肤成纤维细胞中产生的透明质酸的变化。HA是一种参与稳定基质结构的多糖,并参与向组织和细胞提供膨胀压力。作为一个非限制性实例,可使用来自R&D Systems(DY3614)的Hyaluronan DuoSet ELISA试剂盒确定经处理和未经处理的成人真皮成纤维细胞(HDFa)细胞中的HA产生。在此测定中,为了制备样品,在处理前Cascade Biologics(C-13-5C)的亚融合HDFa细胞在37℃和10%的CO2下在饥饿培养基(0.15%胎牛血清和1%青霉素链霉素溶液中的Dulbecco’s Modified Eagle培养基中)孵育72小时。然后将细胞与含有测试化合物、阳性对照(来自Sigma-Aldrich(P1585)的佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸盐和来自Sigma-Aldrich(P3201)的血小板源生长因子)或无添加剂的新鲜饥饿培养基一起孵育24小时。然后收集培养基并在-80℃下冷冻,直到用于ELISA试验。
简而言之,ELISA试验采用定量夹心酶免疫试验技术,由此可以将HA特异性捕获抗体预包被到微孔板上。来自已处理和未处理细胞的标准品和培养基被移液到微孔板孔中,以使任何存在的HA与固定化抗体结合。在洗去任何未结合的物质后,将对HA特异的酶联检测抗体添加到孔中。在洗涤以除去任何未结合的抗体-酶试剂后,将底物溶液添加到孔中,并且允许显色与初始步骤中结合的HA的量成比例。停止显色并使用酶标仪在特定时间测量450nm处的颜色强度。
透明质酸酶活性的抑制:可测定由于本说明书中所公开的每种活性成分、任一种成分组合或具有所述组合的组合物的透明质酸酶活性的变化。透明质酸酶是一种分解HA的酶。HA是一种与基质结构的稳定性有关的多糖,其还与向组织和细胞提供膨压有关。作为一个非限制性实例,可以使用修改源自Sigma-Aldrich方案#EC 3.2.1.35的体外方案测定透明质酸活性。简略来说,向含有测试化合物或对照组的微孔板反应孔中添加来自Sigma-Aldrich(H3506)的1-S型透明质酸。可使用鞣酸作为阳性对照抑制剂,对于对照的酶不添加测试化合物,可使用具有测试化合物或阳性对照作但没有透明质酸的的孔为背景的阴性对照。在底物(HA)的添加之前,孔在37℃下孵育10分钟。添加底物,反应在37℃下培养45分钟。然后,将每个反应溶液的一部分转移并轻轻混合在乙酸钠和pH为3.75的乙酸的溶液中,以停止该部分反应(停止的孔)。在将一部分反应溶液加入到停止的孔中之后,停止的孔和反应孔应该都含有相同体积的溶液。反应孔和终止孔均在室温下孵育10分钟。然后测量反应孔和终止孔在600nm处的吸光度。抑制可以使用以下公式来计算:抑制剂(或对照)活性=(抑制剂终止孔在600nm处的吸光度-抑制剂反应孔在600nm处的吸光度);初始活性=对照酶在600nm处的吸光度;抑制百分数=[(初始活性/抑制剂活性)*100]-100。
过氧化物酶体增殖剂-激活的受体γ(PPAR-γ)的活性:可测定由于本说明书中所公开的每种活性成分、任一种成分组合或具有所述组合的组合物的PPAR-γ活性的变化。PPAR-γ是一种对皮脂产生至关重要的受体。作为一个非限制性实例,可使用分析测试化合物或组合物抑制配体结合的能力的生物测试测定PPAR-γ的活性。简略来说,可以使用荧光的小分子pan-PPAR配体,由Life Technologies(PV4894)获得的FLUORMONETM Pan-PPARGreen,来确定测试的化合物或组合物是否能够抑制配体结合至PPAR-γ。样品孔含有PPAR-γ和荧光配体和测试化合物或组合物(测试);参考抑制剂;罗格列酮(阳性对照);或者没有测试化合物(阴性对照)。将孔孵育一段时间以使得配体有机会与PPAR-γ结合。然后可测定每个样品孔的荧光偏振,并与阴性对照孔比较以确定测试化合物或组合物的抑制百分比。
细胞因子阵列:将人表皮角质形成细胞培养至70%至80%汇合度。吸出板中的培养基,并加入0.025%的胰蛋白酶/EDTA。当细胞变圆时,轻拍培养皿以释放细胞。从培养皿中取出含有胰蛋白酶/EDTA的细胞并中和。以180x g离心5分钟以形成细胞沉淀。吸出上清液。将所得沉淀重悬于EpiLifeTM培养基(Cascade Biologics)中。将细胞以约10%至20%汇合度接种在6孔板中。-细胞汇合约80%后,吸出培养基,并将1.0ml EpiLifeTM以及佛波醇13-肉豆蔻酸酯12-乙酸酯(“PMA”)(一种已知的炎症诱导剂)和测试组合物稀释液添加到两个重复孔中(即将1.0%(100μl的100X储备液)和0.1%(10μl的100X储备液)的测试组合物稀释至最终体积为1ml的EpiLife生长培养基)。轻轻旋转培养基以确保充分混合。此外,在有或没有其他PMA的情况下,将1.0ml EpiLifeTM添加到对照孔中。给药后,将板在37±1℃和5.0±1%CO2下孵育约5小时。孵育5小时后,将所有培养基收集在锥形管中,并于-70℃冷冻。
为了分析,将16格的杂交盒连接到16格的FAST基片,该基片一式三份与16种抗细胞因子抗体和实验对照(Whatman BioSciences)一起排列,然后将其放入FASTFrame(每框架4个基片)中进行处理。使用70ml S&S蛋白质阵列封闭缓冲液(Whatman Schleicher和Scheull)在室温下将阵列封闭15分钟。除去封闭缓冲液,并将70ml的每种上清液样品加入每个阵列。将阵列在室温温和搅拌下孵育3小时。将阵列用TBS-T洗涤3次。用70ml的抗体混合物处理阵列,该混合物包含一种生物素化的抗体,该抗体对应于每种阵列的捕获抗体。将阵列在室温温和搅拌下孵育1小时。将阵列用TBS-T洗涤3次。将阵列与70ml含有链霉亲和素-Cy5缀合物的溶液在室温温和搅拌下孵育1小时。将阵列用TBST洗涤3次,在去离子水中快速冲洗,然后干燥。
将基片在Perkin-Elmer ScanArray 4000共聚焦荧光成像***中成像。保存阵列图像并使用Imaging Research ArrayVision软件进行分析。简而言之,通过减去背景信号来确定光点强度。将每种样品条件下的斑点重复量取平均值,然后与适当的对照进行比较。
内皮管形成:内皮管的形成与血管生成和微血管毛细血管的形成有关。毛细血管的形成和血管生成可能会导致皮肤发红和红斑痤疮。在存在或不存在测试提取物和化合物的情况下,内皮细胞形成管的能力可以使用毛细管破坏试验与预成型的原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在细胞培养***中测定。
简而言之,在细胞外基质上体外培养HUVEC,其刺激内皮细胞的附着和管状形态发生,以形成毛细血管样腔结构。这些体外形成的毛细管在许多方面类似于人血管的毛细管。毛细管分析就是基于这种现象,并用于评估潜在的脉管靶向剂。
HUVEC培养物在5%CO2、37℃下的细胞培养箱中生长。HUVEC的完全生长培养基是内皮细胞基础培养基(EBM),其中补充有2%的胎牛血清(FBS)、12μg/ml的牛脑提取物、1μg/ml的氢化可的松和1μg/ml的GA-1000(庆大霉素-两性霉素)。可将第3代和第8代之间的HUVEC培养物用于所有测定实验。
HUVEC用荧光素钙黄绿素AM预先标记,并以其完全生长培养基接种到细胞外基质包被的96孔培养板中。在大约四个小时的形态发生过程后,应形成内皮毛细管。然后,将设计剂量为50μl的测试剂作为处理条件加到形成的毛细管培养物中。可以将未经处理的对照添加到测试剂的载体中。Sutent(一种FDA批准的抗血管生成药物)浓度可以作为分析性能对照。处理大约六个小时后,通过显微镜检查,成像对每个孔中的内皮小管形态进行成像,并可以定量分析处理条件下的毛细血管破坏活性。每个测试条件都可以在包括对照在内的双孔中进行。
**************
根据本公开,本文所公开和要求保护的所有组合物和/或方法可以无需过度实验即可制成和实现。尽管本发明所述的组合物和方法已经按照优选实施方案进行了描述,对于本领域技术人员而言显而易见的是,可以对所述组合物和/或方法以及在本文所描述方法的步骤或步骤的顺序中实施变化,而不脱离本发明的概念、精神和范围。更具体地,明显地,化学和生理两方面都相关的特定试剂可以替代本文所描述的试剂,同时会实现相同或相似的结果。所有对本领域技术人员明显的这类相似的替代和改变都被视为在如由所附权利要求限定的本发明的精神、范围和概念内。
参考文献
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Claims (20)
1.一种美容面膜组合物,其包含水杨酸、羟基苯乙酮、二氧化钛、卡拉胶和有效量的白鸡蛋花花提取物以抑制皮肤中至少50%的TNF-α产生,其中所述组合物为胶体悬浮体。
2.根据权利要求1所述的组合物,其包含0.001重量%至1重量%的白鸡蛋花花提取物。
3.根据权利要求1所述的组合物,其包含:
0.001重量%至1重量%的白鸡蛋花花提取物,
0.1重量%至3重量%的水杨酸,
0.01重量%至1重量%的羟基苯乙酮,
0.01重量%至1重量%的二氧化钛,和
0.01重量%至1重量%的卡拉胶。
4.根据权利要求1所述的组合物,其不包含由海军豆植物提取的氨基酸、龙头竹笋提取物和炭的组合以及忍冬叶提取物。
5.根据权利要求1所述的组合物,其中所述组合物还包含溶剂。
6.根据权利要求5所述的组合物,其中所述溶剂包含水且所述组合物包含40重量%至60重量%的水。
7.根据权利要求1所述的组合物,其还包含高岭土、硅酸镁铝、膨润土和黄原胶。
8.根据权利要求7所述的组合物,其包含:
20重量%至40重量%的高岭土,
1重量%至10重量%的硅酸镁铝,
1重量%至8重量%的膨润土,和
0.1重量%至1重量%的黄原胶。
9.根据权利要求1所述的组合物,其还包含一种或多于一种其它成分,所述其他成分选自乳化剂、保湿剂、着色剂、防腐剂、pH调节剂、增稠剂、螯合剂、皮肤调理剂和香精中的一种或多于一种。
10.根据权利要求1所述的组合物,其还包含甘油、丙二醇、EDTA二钠、苯氧乙醇和三乙醇胺。
11.根据权利要求10所述的组合物,其包含:1重量%至10重量%的甘油,
1重量%至10重量%的丙二醇,
0.01重量%至3重量%的苯氧乙醇,
0.01重量%至3重量%的三乙醇胺,和
0.01重量%至1重量%的EDTA二钠。
12.一种清洁皮肤、净化毛孔和/或减少炎症的方法,所述方法包括向皮肤局部施用包含白鸡蛋花花提取物、水杨酸、羟基苯乙酮、二氧化钛和卡拉胶的组合物,然后在施用后从皮肤上除去所述组合物,其中组合物为胶体悬浮体。
13.根据权利要求12所述的方法,其中组合物被施用至面部。
14.根据权利要求12所述的方法,其中组合物被施用至皮肤至少2分钟。
15.根据权利要求12所述的方法,其中组合物被施用至皮肤至少10分钟。
16.根据权利要求12所述的方法,其中组合物被施用至皮肤至少到组合物在皮肤上变干。
17.根据权利要求12所述的方法,其中组合物被施用至皮肤至少一天一次。
18.根据权利要求12所述的方法,其中组合物被施用至皮肤至少一天一次持续至少一周。
19.根据权利要求12所述的方法,其中通过冲洗从皮肤上除去组合物。
20.根据权利要求12所述的方法,其中减少炎症的方法减少皮肤中的TNF-α产生。
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