CN115093989B - 一株具有抗氧化活性的唾液链球菌qs-20及其应用 - Google Patents
一株具有抗氧化活性的唾液链球菌qs-20及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115093989B CN115093989B CN202210562002.4A CN202210562002A CN115093989B CN 115093989 B CN115093989 B CN 115093989B CN 202210562002 A CN202210562002 A CN 202210562002A CN 115093989 B CN115093989 B CN 115093989B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- streptococcus salivarius
- strain
- streptococcus
- antioxidant
- antioxidant activity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000194024 Streptococcus salivarius Species 0.000 title claims abstract description 54
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 title claims abstract description 23
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims abstract description 7
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 claims abstract description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 6
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 claims abstract description 6
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 claims abstract description 6
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 6
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims 5
- 230000002053 acidogenic effect Effects 0.000 claims 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 claims 1
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 6
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 3
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 abstract description 2
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 abstract description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 abstract description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 7
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 7
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 5
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 3
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- -1 DPPH free radical Chemical class 0.000 description 2
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000002856 computational phylogenetic analysis Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 2
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- 239000004368 Modified starch Substances 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000019426 modified starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
- A23V2400/245—Salivarius
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一株具有抗氧化活性的唾液链球菌QS‑20及其应用。所述唾液链球菌QS‑20的分类名为Streptococcus salivarius，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC 7.456，该菌能够有效清除DPPH自由基、过氧化氢等氧化物质；还具有良好的产酸耐酸特性和耐胆盐能力，有利于该菌在肠道中定植，并且其对多种病原菌，比如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌具有很好的抑制活性。因此，唾液链球菌QS‑20应用场景广泛。
Description
技术领域
本发明属于微生物领域，具体涉及一株具有抗氧化活性的唾液链球菌QS-20及其应用。
背景技术
人乳中存在丰富的微生物（包括细菌，病毒和真菌），这些微生物不仅在新生儿肠道免疫***启动、婴儿肠道免疫功能发育以及程序化进程中发挥重要作用，而且可以保护婴儿免受疾病和成长过程中一些感染。目前，已经从母乳中分离并鉴定的微生物主要有葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、乳酸杆菌属、双歧杆菌属和明串珠菌属等。其中，葡萄球菌、链球菌、双歧杆菌和乳酸菌是母乳中的优势菌群，具有重要的益生作用。因此，研究及开发人乳中链球菌的具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供了一株具有抗氧化活性的唾液链球菌QS-20及其应用，该菌具有抗氧化活性、产酸特性、耐胆盐能力和抑菌能力。
为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：
本发明提供了一株具有抗氧化活性的唾液链球菌QS-20，所述唾液链球菌QS-20的分类名为Streptococcus salivarius，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC 7.456，保藏日期：2022年1月13日；该生物材料的存活性检测结果为：存活。
进一步的，所述唾液链球菌QS-20为白色凸起菌落，表面光滑，菌落直径0.2-1mm，细胞呈球形或者卵圆形，直径不超过1 μm，呈链状排列。
进一步的，所述唾液链球菌QS-20具有抗氧化活性、产酸特性、耐胆盐能力和抑菌能力。
进一步的，所述唾液链球菌QS-20的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示
本发明还提供了所述的唾液链球菌QS-20在用于制备抗氧化剂中的应用。
进一步的，所述抗氧化剂的作用时间为12h~36h。
进一步的，所述唾液链球菌QS-20通过清除DPPH自由基、过氧化氢达到抗氧化的作用。
本发明还提供了所述的唾液链球菌QS-20在用于制备发酵剂中的应用。
进一步的，所述发酵剂的发酵时间为0h~3h。
本发明还提供了所述的唾液链球菌QS-20在用于制备抑菌剂中的应用。
进一步的，所述抑菌剂能够抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌。
本发明与现有技术相比，具有以下优点和有益效果：
本发明从母乳中分离出益生菌，以DPPH清除率为筛选指标获得一株具有较好抗氧化能力的唾液链球菌QS-20，该菌具有很好的抗氧化活性，能够有效清除DPPH自由基、过氧化氢等氧化物质；还具有良好的产酸耐酸特性，为其在发酵食品中的应用提供依据。除此之外，唾液链球菌QS-20还具有耐胆盐能力，有利于该菌在肠道中定植，并且其对多种病原菌，比如大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌具有很好的抑制活性。因此，唾液链球菌QS-20应用场景广泛。
附图说明
图1为部分菌株的16S rDNA扩增PCR产物电泳图。
图2为QS-20菌株***进化树分析。
图3为唾液链球菌QS-20的菌落形态和细胞形态图。
图4为唾液链球菌QS-20的生长曲线和产酸曲线。
图5为唾液链球菌QS-20的DPPH自由基清除作用。
图6为唾液链球菌QS-20的耐酸曲线。
图7为唾液链球菌QS-20的耐胆盐曲线。
图8为唾液链球菌QS-20对细菌的抑制效果。
具体实施方式
结合以下具体实例对本发明的技术方案作进一步详细的说明。
下述实施例中，如无特殊说明，所使用的实验方法均为常规方法，所用材料、试剂等均可从生物或化学试剂公司购买。
实施例1：唾液链球菌QS-20的分离筛选和鉴定
1、 分离鉴定
新鲜母乳用生理盐水，按照不同的浓度进行稀释并涂布于MRS固体培养基，37℃倒置培养48h。挑取菌体光滑、呈白色或乳白色单菌落进行革兰氏染色并镜检，选择杆状且革兰氏阳性菌，在MRS固体培养基上划线纯化2-3次。挑取划线纯化的单菌落接种于MRS液体培养基继续37℃培养24~48h后，将菌液与灭菌甘油按照1∶1比例混合置于-80℃冰箱保藏待用。
（1）采用天根基因组试剂盒提取基因组DNA；
（2） 16S rDNA PCR扩增，采用通用引物，
上游引物27F：GAGAGTTTGATCCTGGCTCAG，
下游引物1492R：TACGGCTACCTTGTTACGAC。
PCR反应体系为50ul：Taq Reaction Buffer(10×) 5ul，PCR Dye 5ul，dNPTs1ul，Taq Dymerase 0.5ul，DNA模板2ul，27F 2ul，1492R2ul，加水补充至50ul。
PCR扩增程序为：95℃预变性5min；循环30次（95℃、30s变性；55℃、30s退火；72℃、90s延伸）；72℃延伸7min，末端延伸20℃、3min。
（3） PCR扩增产物测序
PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳进行检测，送至青岛擎科生物技术公司进行测序。测得序列通过BLAST程序与GenBank数据库进行同源性比对。
从三份不同的母乳样品中利用透明圈法分离获得16株细菌，进行16S rDNA扩增均得到约1500 bp的目的条带（图1），其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
将目的条带测序后进行***进化树分析，由图2的***进化树可知QS-20菌株与Streptococcus salivarius亲缘关系最近，因此其属于唾液链球菌。
将菌株QS-20进行菌种保藏，所述唾液链球菌QS-20的保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2022年1月13日；分类命名为：唾液链球菌Streptococcus salivarius，保藏编号为CGMCC 7.456，该生物材料的存活性检测结果为：存活。
2、形态学观察
对QS-20菌株进行菌落形态和革兰氏染色细胞形态观察，结果如图3所示。QS-20菌株白色凸起菌落，表面光滑，菌落直径0.2-1mm，细胞呈球形或者卵圆形，直径不超过1 μm，呈链状排列，在液体培养基中常呈沉淀生长。QS-20菌株在添加有碳酸钙的MRS培养基上可以产酸形成透明圈，革兰氏染色的结果表明QS-20菌株为革兰氏阳性菌，同时该菌株的过氧化氢酶实验呈现阴性，该结果进一步说明QS-20菌株为革兰氏阳性菌中的链球菌，这与进化树分析结果一致。
实施例2：唾液链球菌QS-20的生化性质
1、唾液链球菌QS-20菌株的生长曲线和产酸曲线
参见图4，QS-20菌株可以在较短时间内快速进入对数生长期，适应性强，适应周期短，5-15h进入指数生长期，后进入稳定期，52 h之内没有明显的衰亡期。在指数生长期内，唾液链球菌QS-20的产酸性较强，pH明显下降，因此适合作为发酵剂。
2、唾液链球菌QS-20菌株抗氧化活性测定
DPPH自由基被抗氧化剂还原后，成为稳定的DPPH分子，使颜色由深紫色变为淡黄色，DPPH的紫色强度与样品的抗氧化活性成反比。DPPH具有稳定结构，若能将其清除，则表明受试菌株具有降低过氧化氢、清除各类自由基的连锁反应作用。将唾液链球菌QS-20菌株接种于MRS肉汤液体培养基中，测定不同培养时间发酵上清液抗氧化活性。
结果如图5所示，可以看出QS-20菌株具有很高的DPPH清除率，在12h之后清除率达到70%以上，36h可以达到80%以上，显示出较强的抗氧化活性。
3、唾液链球菌QS-20菌株的耐酸能力测定
将QS-20菌株接种到pH 3.0的MRS肉汤液体培养基中培养3、5h，以不含菌体的pH3.0的液体培养基为空白，测定OD600 nm，以培养时间为横坐标，吸光度值为从坐标，画折线趋势图。
结果如图6可知，在3h内吸光值逐渐增加，说明QS-20菌株可以存活并生长；在5h的吸光值与3h相比，变化不大，说明菌株的生长受到抑制。由此可知，该菌株在酸性条件下的最大存活耐受时间为0-3h。
4、唾液链球菌QS-20菌株耐胆盐能力测定
将QS-20菌株接种到含不同胆盐浓度（0.1%、0.2%、0.3%）的MRS肉汤液体培养基中培养3、5h，以不含菌体的不同浓度胆盐的液体培养基为空白，测定OD600nm的吸光度，以培养时间为横坐标，吸光度值为从坐标，画折线趋势图。
结果如图7可知，唾液链球菌QS-20在5h内能够存活并生长，3h以后高浓度的胆盐会对菌株的生长起到一定的抑制作用。
实施例3：唾液链球菌QS-20的抑菌能力分析
培养大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌，并检测唾液链球菌QS-20对上述菌株的抑菌活性。
图8的结果显示，唾液链球菌QS-20菌株对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌均有抑制活性，其中对于枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌的抑制活性较强。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
序列表
<110> 青岛农业大学
<120> 一株具有抗氧化活性的唾液链球菌QS-20及其应用
<141> 2022-04-08
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1447
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
gggcggggtg tctttactgc agtagaacgc tgaagagagg agcttgctct tcttggatga 60
gttgcgaacg ggtgagtaac gcgtaggtaa cctgccttgt agcgggggat aactattgga 120
aacgatagct aataccgcat aacaatggat gacacatgtc atttatttga aaggggcaat 180
tgctccacta caagatggac ctgcgttgta ttagctagta ggtgaggtaa cggctcacct 240
aggcgacgat acatagccga cctgagaggg tgatcggcca cactgggact gagacacggc 300
ccagactcct acgggaggca gcagtaggga atcttcggca atgggggcaa ccctgaccga 360
gcaacgccgc gtgagtgaag aaggttttcg gatcgtaaag ctctgttgta agtcaagaac 420
gagtgtgaga gtggaaagtt cacactgtga cggtagctta ccagaaaggg acggctaact 480
acgtgccagc agccgcggta atacgtaggt cccgagcgtt gtccggattt attgggcgta 540
aagcgagcgc aggcggtttg ataagtctga agttaaaggc tgtggctcaa ccatagttcg 600
ctttggaaac tgtcaaactt gagtgcagaa ggggagagtg gaattccatg tgtagcggtg 660
aaatgcgtag atatatggag gaacaccggt ggcgaaagcg gctctctggt ctgtaactga 720
cgctgaggct cgaaagcgtg gggagcgaac aggattagat accctggtag tccacgccgt 780
aaacgatgag tgctaggtgt tggatccttt tcgggattca gtgccgcagc taacgcatta 840
agcactccgc ctggggagta cgaccgcaag gttgaaactc aaaggaattg acgggggccc 900
gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc gaagcaacgc gaagaacctt accaggtctt 960
gacatcccga tgctatttct agagatagaa agttacttcg gtacatcggt gacaggtggt 1020
gcatggttgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa cgagcgcaac 1080
ccctattgtt agttgccatc attcagttgg gcactctagc gagactgccg gtaataaacc 1140
ggaggaaggt ggggatgacg tcaaatcatc atgcccctta tgacctgggc tacacacgtg 1200
ctacaatggt tggtacaacg agttgcgagt cggtgacggc aagctaatct cttaaagcca 1260
atctcagttc ggattgtagg ctgcaactcg cctacatgaa gtcggaatcg ctagtaatcg 1320
cggatcagca cgccgcggtg aatacgttcc cgggccttgt acacaccgcc cgtcacacca 1380
cgagagtttg taacacccga agtcggtgag gtaacctttg gagccagccg cctaaggtca 1440
agatgtt 1447
Claims (8)
1.一株具有抗氧化活性的唾液链球菌QS-20，其特征在于，所述唾液链球菌QS-20的分类名为Streptococcus salivarius，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC 7.456。
2.根据权利要求1所述的具有抗氧化活性的唾液链球菌QS-20，其特征在于，所述唾液链球菌QS-20为白色凸起菌落，表面光滑，菌落直径0.2-1mm，细胞呈球形或者卵圆形，直径不超过1 μm，呈链状排列。
3.根据权利要求1所述的具有抗氧化活性的唾液链球菌QS-20，其特征在于，所述唾液链球菌QS-20的16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
4.权利要求1-3任一项所述的唾液链球菌QS-20在用于制备抗氧化剂中的应用，其特征在于，所述唾液链球菌QS-20通过清除DPPH自由基达到抗氧化的作用。
5.根据权利要求4所述的唾液链球菌QS-20在用于制备抗氧化剂中的应用，其特征在于，所述抗氧化剂的作用时间为12h~36h。
6.权利要求1-3任一项所述的唾液链球菌QS-20在用于制备产酸耐酸发酵剂中的应用。
7.根据权利要求6所述的唾液链球菌QS-20在用于制备发酵剂中的应用，其特征在于，所述发酵剂的发酵时间为0h~3h。
8.权利要求1-3任一项所述的唾液链球菌QS-20在用于制备抑菌剂中的应用，其特征在于，所述抑菌剂能够抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2022103636278 | 2022-04-08 | ||
| CN202210363627 | 2022-04-08 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115093989A CN115093989A (zh) | 2022-09-23 |
| CN115093989B true CN115093989B (zh) | 2023-06-06 |
Family
ID=83288671
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210562002.4A Active CN115093989B (zh) | 2022-04-08 | 2022-05-23 | 一株具有抗氧化活性的唾液链球菌qs-20及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115093989B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116574634B (zh) * | 2023-03-13 | 2023-11-03 | 广东悦创生物科技有限公司 | 一株唾液链球菌嗜热亚种jf2及其在制备抗炎和解脂食品药品中的应用 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH054927A (ja) * | 1991-06-28 | 1993-01-14 | Aizo Matsushiro | 乳酸菌含有組成物及びその製造方法 |
| BRPI0605568A (pt) * | 2006-12-06 | 2008-07-22 | Vera Fantinato | composição, produto alimentìcio, leite fermentado, processo de preparação de leite fermentado e uso de bactérias streptococcus salivarius subsp salivarius |
| CN101538545B (zh) * | 2009-04-08 | 2011-07-20 | 任发政 | 一种唾液乳杆菌及其食品组合物 |
| RU2567148C1 (ru) * | 2014-12-24 | 2015-11-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" | ШТАММ Streptococcus salivarius ВКПМ В-11177, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА КИСЛОМОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ И ПРОБИОТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ |
| KR102173646B1 (ko) * | 2018-06-28 | 2020-11-03 | 주식회사 세바바이오텍 | 피부 유래 스트렙토코쿠스 살리바리우스 ｓｂｋ４ 신균주 및 이를 이용한 기능성 화장료 조성물 |
| JP6651202B1 (ja) * | 2018-10-17 | 2020-02-19 | 株式会社北岡本店 | ストレプトコッカス・サリバリウスに属する新規乳酸菌およびその利用 |
| RU2698032C1 (ru) * | 2018-11-08 | 2019-08-21 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Горский государственный аграрный университет" | Штамм лактобактерий Streptococcus salivarius - продуцент молочной кислоты и антибиотических веществ |
| JP2023540973A (ja) * | 2020-09-04 | 2023-09-27 | ユニバーシタット アントウェルペン | 新規プロバイオティックストレプトコッカス・サリバリウス株とその用途 |
-
2022
- 2022-05-23 CN CN202210562002.4A patent/CN115093989B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115093989A (zh) | 2022-09-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107586741B (zh) | 一种植物乳杆菌及其在水果酵素产品中的应用 | |
| CN109182165B (zh) | 一株瑞士乳杆菌及其在蜜蜂养殖过程中的应用 | |
| CN108611299B (zh) | 一株产抑菌肽的植物乳杆菌及其应用 | |
| CN113652373B (zh) | 一株芽孢杆菌及其应用 | |
| CN115093989B (zh) | 一株具有抗氧化活性的唾液链球菌qs-20及其应用 | |
| CN110982759A (zh) | 一株具有抗氧化能力的植物乳杆菌及其应用 | |
| CN111363703B (zh) | 一株具有抗菌抗氧化活性魏斯氏菌菌株及应用 | |
| CN117551568A (zh) | 一株具有产苯乳酸能力的植物乳杆菌ts | |
| CN109897800B (zh) | 一株富硒坚强肠球菌a8-1及其应用 | |
| CN114717150B (zh) | 一种植物乳杆菌crs33及其应用 | |
| CN113308419B (zh) | 一株发酵用的谷糠乳杆菌及其应用 | |
| CN113061550B (zh) | 一株乳杆菌新菌株z6及其在食品中的应用 | |
| CN113621539B (zh) | 一株具有呕吐毒素脱毒功能的产酶抑菌型枯草芽孢杆菌的筛选及应用 | |
| CN106591176B (zh) | 一种戊糖乳杆菌及其应用 | |
| CN116064324A (zh) | 一株鼠李糖乳杆菌及其培养方法和在防治腹泻和肠炎方面的应用 | |
| Sivakumar et al. | Media optimization for exopolysaccharide producing Klebsiella pneumoniae KU215681 under varying cultural conditions | |
| CN111040969B (zh) | 一种复合乳杆菌剂及其在水牛青贮饲料中的应用 | |
| CN113215067A (zh) | Vbnc状态短乳杆菌cshrr5-3菌株及其应用 | |
| CN113355265B (zh) | 一种植物乳杆菌及其应用 | |
| CN116716203B (zh) | 一株具有高抗氧化性的植物乳杆菌sc75-2-2及其应用 | |
| CN117070423B (zh) | 一株植物乳植杆菌LPPerfectus001及其应用 | |
| CN113801809B (zh) | 一种屎肠球菌及其应用 | |
| CN116496929B (zh) | 一种猪源芽孢杆菌及其应用 | |
| CN111471628B (zh) | 一株新的链球菌及其制剂在抑制口腔致病菌中的应用 | |
| CN106967630B (zh) | 一种发酵乳杆菌及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |