CN114669282B - 一种内毒素吸附剂及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种内毒素吸附剂的制备方法，包括以下步骤：(1)通过静电纺丝法制备得到聚合物基纳米纤维膜；(2)对聚合物基纳米纤维膜进行亲水化预处理，随后转移至水中浸泡得到湿态聚合物基纳米纤维膜；(3)将湿态聚合物基纳米纤维膜转移至多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液中室温下反应，反应结束后清洗、干燥后制得所述的内毒素吸附剂；本发明利用多巴胺与聚乙烯亚胺的迈克尔加成反应或席夫碱反应，在聚合物基纳米纤维膜表面沉积聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层；制得的内毒素吸附剂对内毒素的特异性吸附效果好、吸附容量高、且对血液中总蛋白、纤维蛋白原和白蛋白的吸附少、对血细胞的粘附少、血液相容性好。

Description

一种内毒素吸附剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种内毒素吸附剂及其制备方法和应用。
背景技术
脓毒症是一种由人体对感染的反应失调所导致的危及生命的器官功能障碍。尽管医疗技术在不断发展，但脓毒症患者的死亡率仍高达30-50％。当前对脓毒症的治疗手段有限，以抗感染和脏器功能支持为主。然而随着多重耐药菌的流行，以及脓毒症患者多脏器衰竭的发生，以抗生素和液体复苏为主的治疗方案，往往难以逆转脓毒症的病程进展。随着医学家对脓毒症发病机制认识的不断深入，多种血液净化技术被用于去除患者血液中的内毒素或者炎性细胞因子，以阻断脓毒症的病程进展。内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁中的成分之一，有很强的炎症诱导作用，目前已有研究表明内毒素与脓毒症的发生密切相关。因此，以内毒素为靶点的血液净化技术被认为是脓毒症的新型治疗策略，得到了广泛的研究和关注。
血液灌流主要依靠吸附剂对病原物质的特异性/非特异性吸附，达到去除病原物质、净化血液的目的，进而治愈疾病。理想的内毒素亲和吸附剂需要具备血液相容性、理化稳定性、高比表面积和对内毒素的高选择性吸附能力。
血液灌流吸附材料包括活性炭、无机多孔材料和有机高分子材料三大类。然而，由于活性炭存在颗粒脱落导致的生物相容性差以及无机多孔材料存在的结构设计性差等问题，导致活性炭和无机多孔材料在血液灌流吸附剂的设计中不再是首选材料。高分子材料以其种类繁多、结构设计性强、便于改性等优点，被广泛应用于生物医药领域。高分子作为基质材料的血液灌流吸附剂主要分为颗粒型、中空纤维型和纳米纤维型三种。由于血液中存在诸多有形和无形成分，流道复杂的颗粒型血液灌流吸附剂更容易产生凝血，因而在使用中通常需要注射大量抗凝剂，然而大剂量抗凝剂可能在体内引起难以控制的出血，甚至造成多器官功能障碍。中空纤维作为血液灌流吸附剂，其有效吸附面积较低，血液灌流的效率也较低。采用纳米纤维膜构建血液灌流吸附剂可以同时实现抗凝血与高灌流效率。
公开号为CN112871139A的中国专利文献公开了一种全血灌流吸附剂，该吸附剂为天然高分子纳米纤维与无机功能填料、有机功能填料和/或有机包覆材料复合的大尺寸纳米纤维多孔网络微球，其中，所述无机功能填料和有机功能填料被包裹于天然高分子纳米纤维微球内，所述有机包覆材料包覆于天然高分子纳米纤维微球的表面；该全血灌流吸附剂为粒径0.2～5mm的微球，具有纳米纤维多孔网络结构，流道较为复杂。
公开号为CN114011389A的中国专利文献公开了一种用于脓毒血症的血液净化材料，该血液净化材料的载体为中空纤维，表面共价偶联修饰有阳离子配基、含氨基的抗凝剂和多糖，制备方法较为复杂。
此外，贻贝启发的基于神经递质多巴胺的氧化-沉积-粘附化学过程，由于可以在几乎所有种类的材料表面形成超强黏性的薄膜而不发生脱落，在表面改性领域受到了广泛关注。同时，该薄膜由于含有丰富的邻苯二酚和醌式基团，能够与含有氨基、巯基的物质发生二次化学反应，从而赋予改性层表面多种功能性。但多巴胺的自聚沉积存在沉积速度慢的缺点，因此也有研究采用氧化剂、紫外照射等手段诱导多巴胺快速聚合。但是以上手段制得的聚多巴胺涂层也存在着粗糙度高、易形成聚多巴胺颗粒、氧化剂残留对生物体有害等缺陷，限制了多巴胺改性法在生物材料领域的应用。
发明内容
本发明提供了一种内毒素吸附剂的制备方法，该方法操作简单高效、反应条件温和，制得的内毒素吸附剂对内毒素的特异性吸附效果好、吸附容量高、且对血液中总蛋白、纤维蛋白原和白蛋白的吸附少、对血细胞的粘附少、血液相容性好。
具体采用的技术方案如下：
一种内毒素吸附剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)通过静电纺丝法制备得到聚合物基纳米纤维膜；
(2)对聚合物基纳米纤维膜进行亲水化预处理，随后转移至水中浸泡得到湿态聚合物基纳米纤维膜；
(3)将湿态聚合物基纳米纤维膜转移至多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液中室温下反应，反应结束后清洗、干燥后制得所述的内毒素吸附剂；
所述的聚合物基纳米纤维膜包括聚砜纳米纤维膜、聚醚砜纳米纤维膜、聚氨酯纳米纤维膜或聚乳酸纳米纤维膜。
本发明利用多巴胺(DA)的氧化、自聚和沉积性，将其与带有丰富氨基官能团的聚乙烯亚胺(PEI)发生迈克尔加成反应或席夫碱反应，实现共价结合并沉积到聚合物基纳米纤维膜上，在聚合物基纳米纤维膜表面形成了聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层；多巴胺与聚乙烯亚胺共沉积一方面避免了多巴胺形成较大的聚集体，保证了聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层的均匀性和连续性，并且缩短了多巴胺的沉积时间；另一方面，聚乙烯亚胺在聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层中引入了荷正电官能团，赋予了制得的PEI-PDA共沉积改性纳米纤维膜(即内毒素吸附剂)特异性结合内毒素的功能。
优选的，步骤(1)中，所述的聚合物基纳米纤维膜为聚砜纳米纤维膜，由质量浓度为16-20wt％的聚砜纺丝液通过静电纺丝法制备得到。
优选的，将聚合物基纳米纤维膜真空干燥、正反面热压后再进行亲水化预处理，其中，热压处理的参数为：190-200℃，20-40s；真空干燥使得残余溶剂挥发，热压处理能够增强聚合物基纳米纤维膜的机械性能，使其不会在后续使用出现纤维脱落影响性能的状况。
优选的，所述的亲水化预处理方法为：将聚合物基纳米纤维膜浸润于无水乙醇中。无水乙醇能够使聚合物基纳米纤维膜亲水化，改善后续改性过程的效果。
优选的，步骤(3)中，多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液的配制方法为：配制10mM的Tris-HCl缓冲液，调节pH值为8-9，将多巴胺与聚乙烯亚胺加入至Tris-HCl缓冲液中得到多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液。
所述的多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液中，多巴胺的浓度为2-4mg/mL，聚乙烯亚胺的浓度为2-4mg/mL。
步骤(3)中，反应时间为24-96h。
本发明还提供了所述的内毒素吸附剂的制备方法制得的内毒素吸附剂，所述的内毒素吸附剂包括聚合物基纳米纤维膜本体和聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层。
优选的，所述的聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层的厚度为2-6nm。
本发明还提供了所述的内毒素吸附剂在血液灌流领域中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
(1)本发明方法对聚合物基纳米纤维膜进行一步法改性，操作简单高效、设备要求低、反应条件温和。
(2)与PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜相比，本发明提供的内毒素吸附剂中聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层均匀性、连续性和稳定性好，在电镜下无大颗粒聚集体出现，并且沉积时间大大减少。
(3)与文献中报道的商品化脓毒症血液灌流吸附剂相比，本发明提供的内毒素吸附剂具有更高的内毒素吸附容量，达到10343EU/g，且对血液中总蛋白、纤维蛋白原和白蛋白的吸附少，对血细胞的粘附少，血液相容性好。
附图说明
图1为实施例1-5中制得的聚砜纳米纤维膜的扫描电镜图片；
图2为实施例1-5中制得的内毒素吸附剂的扫描电镜图片；
图3为实施例5中聚砜纳米纤维膜、内毒素吸附剂以及对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜的接触角结果；
图4为实施例5中聚砜纳米纤维膜、内毒素吸附剂以及对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜的XPS结果；
图5为实施例5中内毒素吸附剂表面的聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层的透射电镜图片；
图6为实施例5中聚砜纳米纤维膜和内毒素吸附剂对缓冲液中内毒素的动态吸附率折线图；
图7为实施例5中聚砜纳米纤维膜、内毒素吸附剂以及对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜对兔全血中内毒素的动态吸附率折线图；
图8为实施例5中聚砜纳米纤维膜、内毒素吸附剂以及对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜对兔血浆中总蛋白、白蛋白和纤维蛋白原的非特异性吸附率柱状图；
图9为实施例5中内毒素吸附剂吸附内毒素前后的SEM图片。
具体实施方式
下面结合附图与实施例，进一步阐明本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明，而不用于限制本发明的范围。
实施例1
(1)将16g经真空干燥的聚砜树脂溶解于84g N-甲基吡咯烷酮(NMP)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)的混合溶剂中(NMP与DMF的质量为1：9)，室温下机械搅拌24h得到聚砜纺丝液；
(2)将步骤(1)的聚砜纺丝液置于注射器中静电纺丝得到聚砜纳米纤维膜，静电纺丝工艺的参数为：纺丝喷头内径为0.41mm，电压15kV，纺丝液流速1mL/h，采用转筒收集器，接收距离20cm；
(3)将步骤(2)的聚砜纳米纤维膜置于60℃的真空烘箱中进行2h的干燥处理，随后在190℃下进行正反面各30s的热压处理；
(4)将步骤(3)热压后的聚砜纳米纤维膜浸润于无水乙醇中进行亲水化预处理，取出后转移至去离子水中浸泡10h得到湿态聚砜纳米纤维膜；
(5)配制10mM的Tris-HCl缓冲液，调节pH值为8.5，将多巴胺(DA)与聚乙烯亚胺(PEI)加入至所述的Tris-HCl缓冲液中得到多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液，混合溶液中，DA和PEI浓度均为2mg/mL；将步骤(4)的湿态聚砜纳米纤维膜转移至上述DA与PEI的混合溶液中，室温下反应24h，结束后清洗、干燥后制得PEI-PDA共沉积改性聚砜纳米纤维膜，即所述的内毒素吸附剂。
实施例2
(1)将18g经真空干燥的聚砜树脂溶解于82g NMP和DMF的混合溶剂中(NMP与DMF的质量比为1：9)，室温下机械搅拌24h得到聚砜纺丝液；
(2)将步骤(1)的聚砜纺丝液置于注射器中静电纺丝得到聚砜纳米纤维膜，静电纺丝工艺的参数为：纺丝喷头内径为0.41mm，电压15kV，纺丝液流速1mL/h，采用转筒收集器，接收距离20cm；
(3)将步骤(2)的聚砜纳米纤维膜置于60℃的真空烘箱中进行2h的干燥处理，随后在200℃下进行正反面各30s的热压处理；
(4)将步骤(3)热压后的聚砜纳米纤维膜浸润于无水乙醇中进行亲水化预处理，取出后转移至去离子水中浸泡10h得到湿态聚砜纳米纤维膜；
(5)配制10mM的Tris-HCl缓冲液，调节pH值为8.5，将DA与PEI加入至所述的Tris-HCl缓冲液中得到多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液，混合溶液中，DA浓度为4mg/mL，PEI浓度为2mg/mL；将步骤(4)的湿态聚砜纳米纤维膜转移至上述DA与PEI的混合溶液中，室温下反应36h，结束后清洗、干燥后制得PEI-PDA共沉积改性聚砜纳米纤维膜，即所述的内毒素吸附剂。
实施例3
(1)将20g经真空干燥的聚砜树脂溶解于80g NMP和DMF的混合溶剂中(NMP与DMF的质量比为1：9)，室温下机械搅拌24h得到聚砜纺丝液；
(2)将步骤(1)的聚砜纺丝液置于注射器中静电纺丝得到聚砜纳米纤维膜，静电纺丝工艺的参数为：纺丝喷头内径为0.41mm，电压15kV，纺丝液流速1mL/h，采用转筒收集器，接收距离20cm；
(3)将步骤(2)的聚砜纳米纤维膜置于60℃的真空烘箱中进行2h的干燥处理，随后在190℃下进行正反面各30s的热压处理；
(4)将步骤(3)热压后的聚砜纳米纤维膜浸润于无水乙醇中进行亲水化预处理，取出后转移至去离子水中浸泡10h得到湿态聚砜纳米纤维膜；
(5)配制10mM的Tris-HCl缓冲液，调节pH值为8.5，将DA与PEI加入至所述的Tris-HCl缓冲液中得到多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液，混合溶液中，DA浓度为2mg/mL，PEI浓度为4mg/mL；将步骤(4)的湿态聚砜纳米纤维膜转移至上述DA与PEI的混合溶液中，室温下反应48h，结束后清洗、干燥后制得PEI-PDA共沉积改性聚砜纳米纤维膜，即所述的内毒素吸附剂。
实施例4
(1)将18g经真空干燥的聚砜树脂溶解于82g NMP和DMF的混合溶剂中(NMP与DMF的质量比为2：8)，室温下机械搅拌24h得到聚砜纺丝液；
(2)将步骤(1)的聚砜纺丝液置于注射器中静电纺丝得到聚砜纳米纤维膜，静电纺丝工艺的参数为：纺丝喷头内径为0.41mm，电压15kV，纺丝液流速1mL/h，采用转筒收集器，接收距离20cm；
(3)将步骤(2)的聚砜纳米纤维膜置于60℃的真空烘箱中进行2h的干燥处理，随后在200℃下进行正反面各30s的热压处理；
(4)将步骤(3)热压后的聚砜纳米纤维膜浸润于无水乙醇中进行亲水化预处理，取出后转移至去离子水中浸泡10h得到湿态聚砜纳米纤维膜；
(5)配制10mM的Tris-HCl缓冲液，调节pH值为8.5，将DA与PEI加入至所述的Tris-HCl缓冲液中得到多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液，混合溶液中，DA与PEI浓度均为2mg/mL；将步骤(4)的湿态聚砜纳米纤维膜转移至上述DA与PEI的混合溶液中，室温下反应96h，结束后清洗、干燥后制得PEI-PDA共沉积改性聚砜纳米纤维膜，即所述的内毒素吸附剂。
实施例5
(1)将20g经真空干燥的聚砜树脂溶解于80g NMP和DMF的混合溶剂中(NMP与DMF的质量比为1：9)，室温下机械搅拌24h得到聚砜纺丝液；
(2)将步骤(1)的聚砜纺丝液置于置于注射器中静电纺丝得到聚砜纳米纤维膜，静电纺丝工艺的参数为：纺丝喷头内径为0.41mm，电压15kV，纺丝液流速1mL/h，采用转筒收集器，接收距离20cm；
(3)将步骤(2)的聚砜纳米纤维膜置于60℃的真空烘箱中进行2h的干燥处理，随后在190℃下进行正反面各30s的热压处理；
(4)将步骤(3)热压后的聚砜纳米纤维膜浸润于无水乙醇中进行亲水化预处理，取出后转移至去离子水中浸泡10h得到湿态聚砜纳米纤维膜；
(5)配制10mM的Tris-HCl缓冲液，调节pH值为8.5，将DA与PEI加入至所述的Tris-HCl缓冲液中得到多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液，混合溶液中，DA与PEI浓度均为2mg/mL；将步骤(4)的湿态聚砜纳米纤维膜转移至上述DA与PEI的混合溶液中，室温下反应36h，结束后清洗、干燥后制得PEI-PDA共沉积改性聚砜纳米纤维膜，即所述的内毒素吸附剂。
对比例1
(1)将20g经真空干燥的聚砜树脂溶解于80g NMP和DMF的混合溶剂中(NMP和DMF的质量比为1：9)，室温下机械搅拌24h得到均相铸膜液；
(2)将步骤(1)的均相铸膜液置于注射器中静电纺丝得到聚砜纳米纤维膜，静电纺丝工艺的参数为：纺丝喷头内径为0.41mm，电压15kV，纺丝液流速1mL/h，采用转筒收集器，接收距离20cm；
(3)将步骤(2)的聚砜纳米纤维膜置于60℃的真空烘箱中进行2h的干燥处理，随后在190℃下进行正反面各30s的热压处理；
(4)将步骤(3)热压后的聚砜纳米纤维膜浸润于无水乙醇中，取出后转移至去离子水中浸泡10h得到湿态聚砜纳米纤维膜；
(5)配制10mM的Tris-HCl缓冲液，调节pH值为8.5，将DA加入至所述的Tris-HCl缓冲液中得到多巴胺溶液，DA的浓度为2mg/mL；将步骤(4)的湿态聚砜纳米纤维膜转移至多巴胺溶液中，室温下反应72h，结束后清洗、干燥后制得PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜。
样品分析
(1)形貌、元素及亲疏水性能分析
实施例1-5中，聚砜纳米纤维膜的SEM图片如图1所示，内毒素吸附剂的SEM图片如图2所示，通过图1和图2的对比可知，PEI-PDA共沉积改性层均匀性和连续性好，在电镜下无大颗粒聚集体出现，PEI-PDA共沉积改性层的厚度为2-6nm。
对实施例5中聚砜纳米纤维膜、内毒素吸附剂以及对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜进行亲疏水性测试，结果如图3所示，可以看出，与聚砜纳米纤维膜和对比例1的PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜相比，实施例5制得的内毒素吸附膜有着更小的水接触角，证明其有着更好的亲水性和抗黏附性。
对实施例5中聚砜纳米纤维膜、内毒素吸附剂以及对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜进行元素分析，结果如图4所示，可以看出，通过在聚砜(特征元素为C、O、S)纳米纤维表面构筑聚多巴胺-聚乙烯亚胺(特征元素为C、O、N)共沉积层，硫元素信号消失，氮元素信号峰出现，证明了共沉积层为无缺陷、连续的改性层；与对比例1相比，氮元素峰信号更强，证明成功在聚砜纳米纤维表面引入了丰富的氨基官能团。
实施例5中内毒素吸附剂表面聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层的透射电镜图片如图5所示，结果显示改性层为连续的空心管结构，进一步证明了本发明方法可以在聚合物基纳米纤维膜表面构建连续无缺陷的改性层。
(2)内毒素吸附剂对不同体系中内毒素的动态吸附效果
分别将一定量内毒素工作标准品溶解于Tris-HCl缓冲液、肝素钠抗凝兔全血中，分别配制成内毒素浓度为1EU/mL的内毒素缓冲溶液和含内毒素兔全血。
取实施例5中的内毒素吸附剂为实验组，以实施例5步骤(3)中制得的聚砜纳米纤维膜和/或对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜为对照组，将实验组和对照组的膜样品置于可更换膜滤头中，通过连续吸附实验测试实验组和对照组的膜样品对不同体系中内毒素的吸附率；
实验结果分别如图6和图7所示，图6结果表明：在缓冲液中实施例5制得的内毒素吸附剂可以在3小时内保持100％的内毒素吸附率，而聚砜纳米纤维膜在3小时内仅能清除60％的内毒素；通过进一步将的兔全血测试结果表明，仅有实施例5的内毒素吸附剂可以在兔全血中保持对内毒素80％左右的吸附率(3小时内)，对比例1的PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜和聚砜纳米纤维膜则无法在血液中有效吸附内毒素。
(3)内毒素吸附剂对兔血浆中总蛋白、白蛋白和纤维蛋白原的吸附效果
分别取面积为4cm×5cm的实施例5中的内毒素吸附剂、实施例5步骤(3)中制得的聚砜纳米纤维膜和对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜，将其置于离心管中，加入抗凝兔血浆50mL，放入恒温振荡培养箱中振荡吸附，吸附完毕后取样，采用全自动生化分析仪和凝血仪检测吸附前后血浆总蛋白、白蛋白、纤维蛋白原浓度，计算膜样品对血浆总蛋白、白蛋白、纤维蛋白原的吸附率。
实验结果如图8所示，实施例5制备的内毒素吸附剂相较于对比例1和聚砜膜，对血液中蛋白质的非特异性吸附少，血液相容性更高。
(4)内毒素吸附剂的溶血性能
在离心管中加入8mL肝素钠抗凝兔全血和10mL 0.9％的生理盐水，混匀，得到兔血稀释液。
取5支离心管编号为1～5号。1号离心管中加入0.2mL兔血稀释液，并加入10mL0.9％的生理盐水作为阴性对照；2号离心管中加入0.2mL兔血稀释液，并加入10mL去离子水作为阳性对照；3-5号离心管中分别加入0.2mL兔血稀释液和10mL 0.9％的生理盐水，再分别在相应的离心管中加入实施例5中的内毒素吸附剂、实施例5步骤(3)中制得的聚砜纳米纤维膜和对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜，将上述5支离心管放入恒温振荡培养箱中振荡、离心后取上清液测定吸光度，计算得到实施例5中的内毒素吸附剂、实施例5步骤(3)中制得的聚砜纳米纤维膜和对比例1中PDA沉积改性聚砜纳米纤维膜的溶血率。
溶血率H定义为：
Figure BDA0003585126330000101
其中，As为样品的吸光度；An为阴性对照组的吸光度；Ap为阳性对照组的吸光度。
表1不同膜样品的溶血性能
Figure BDA0003585126330000102
通过表1可以看出，三种膜均符合国家标准要求的生物材料需要溶血率低于5％，但实施例5制得的内毒素吸附剂有着最低的溶血率，证明其有着较好的血液相容性。
(5)内毒素吸附剂对血液成分的影响
将实施例5中的内毒素吸附剂加入到兔血中轻摇混匀后置于37℃的恒温振荡培养箱中孵育2小时，同时设置空白对照组，考察吸附剂对血细胞的粘附性。
取出内毒素吸附剂，对其上粘附的血细胞进行固定、干燥，采用扫描电镜观察粘附于吸附剂上的血细胞形貌。
结果如图9所示，吸附后内毒素吸附剂上没有明显的血细胞粘附情况，仅有少量血小板碎片，同样证明本发明方法制备的内毒素吸附剂有着较好的血液相容性。
综上所述，本发明制得的内毒素吸附剂对内毒素具有较好的特异性吸附作用，吸附率在3小时内可保持80％，能够从血浆中有效地清除内毒素，可满足临床对于脓毒症血液灌流治疗的基本需求；且具有良好的血液相容性，对血液成分没有明显影响，特别适用于脓毒症患者的血液净化治疗。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述的仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种内毒素吸附剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）通过静电纺丝法制备得到聚合物基纳米纤维膜；
（2）对聚合物基纳米纤维膜进行亲水化预处理，随后转移至水中浸泡得到湿态聚合物基纳米纤维膜；
（3）将湿态聚合物基纳米纤维膜转移至多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液中室温下反应，反应结束后清洗、干燥后制得所述的内毒素吸附剂；所述的内毒素吸附剂包括聚合物基纳米纤维膜本体和聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层；
所述的聚合物基纳米纤维膜包括聚砜纳米纤维膜、聚醚砜纳米纤维膜、聚氨酯纳米纤维膜或聚乳酸纳米纤维膜；
将聚合物基纳米纤维膜真空干燥、正反面热压后再进行亲水化预处理；所述的亲水化预处理方法为：将聚合物基纳米纤维膜浸润于无水乙醇中；
所述的多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液中，多巴胺的浓度为2-4 mg/mL，聚乙烯亚胺的浓度为2-4 mg/mL；反应时间为24-96 h。
2.根据权利要求1所述的内毒素吸附剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述的聚合物基纳米纤维膜为聚砜纳米纤维膜，由质量浓度为16-20 wt%的聚砜纺丝液通过静电纺丝法制备得到。
3.根据权利要求1所述的内毒素吸附剂的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液的配制方法为：配制Tris-HCl缓冲液，调节pH值为8-9，将多巴胺与聚乙烯亚胺加入至Tris-HCl缓冲液中得到多巴胺与聚乙烯亚胺的混合溶液。
4.根据权利要求1-3任一所述的内毒素吸附剂的制备方法制得的内毒素吸附剂，其特征在于，所述的内毒素吸附剂包括聚合物基纳米纤维膜本体和聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层。
5.根据权利要求4所述的内毒素吸附剂，其特征在于，所述的聚多巴胺/聚乙烯亚胺改性层的厚度为2-6 nm。
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