CN114480431A - 玉米ZmBES1/BZR1-10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用 - Google Patents

玉米ZmBES1/BZR1-10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了玉米ZmBES1/BZR1‑10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用,本发明明确了玉米ZmBES1/BZR1‑10基因和植物耐旱性及籽粒发育的关系,验证了ZmBES1/BZR1‑10基因在提高植物耐旱性和籽粒大小的应用上的效果。本发明从玉米幼苗叶片中分离出ZmBES1/BZR1‑10基因,构建35S‑ZmBES1/BZR1‑10‑eGFP载体,通过农杆菌介导法将该载体转化入植物过量表达,转基因后的植物耐旱性和种子产量显著提升,说明过量表达ZmBES1/BZR1‑10基因可以显著提高转基因植物的耐旱性和产量,在培育耐旱高产植物领域有广阔的应用前景。

Description

玉米ZmBES1/BZR1-10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用
技术领域
本发明涉及农作物培育领域,特别是涉及玉米ZmBES1/BZR1-10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用。
背景技术
玉米、水稻等是我国重要的粮食作物,高产和高抗性是研究者在育种过程中考虑的重要指标。而干旱已经成为影响农业生产的严重问题,近些年,利用基因工程手段改良农作物的农艺性状或者抗性,已经是一种比较常见的技术手段,这也为农作物产量和抗性的提高提供了一种新的解决途径。经过多年大量的研究,人们在生理生化、代谢、遗传进化等方面对于农作物抗干旱等逆境胁迫机制已经具有积累的丰富的经验和资料,并且随着人们对于基因了解的深入,将基因和传统育种相结合培育高产高抗干旱品种已经是急需解决的问题,虽然已经有多种农作物基因水平抗性研究的相关报道,但是在玉米、水稻等农作物的栽培种植上,一直还没有高效抗旱增产基因的有效分离和应用相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供玉米ZmBES1/BZR1-10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用,以解决上述现有技术存在的问题,该基因可以明显促进转基因植物的耐旱性和产量。
为实现上述目的,本发明提供了如下方案:
本发明提供玉米ZmBES1/BZR1-10基因,所述玉米ZmBES1/BZR1-10基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
本发明还提供所述的玉米ZmBES1/BZR1-10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用,应用于促进植物的耐旱性提高且籽粒的粒长和千粒重增大。
本发明还提供一种利用所述的玉米ZmBES1/BZR1-10基因培育耐旱和高产植物的方法,通过上调植物中ZmBES1/BZR1-10基因的表达,以获得耐旱性和籽粒大小改良的植株。
优选的是,所述上调植物中ZmBES1/BZR1-10基因的表达具体包括:设计ZmBES1/BZR1-10基因的扩增引物进行该基因的PCR扩增,利用扩增产物和载体构建包含ZmBES1/BZR1-10基因的重组质粒,再利用农杆菌介导将所述重组质粒转化入植物中,进行ZmBES1/BZR1-10基因过量表达,即可获得耐旱和高产量的植物。
优选的是,所述扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2-3所示。
优选的是,所述的重组质粒为35S-ZmBES1/BZR1-10-eGFP,核苷酸序列如SEQ IDNO:4所示。
优选的是,所述植物包括拟南芥或水稻中的一种。
本发明公开了以下技术效果:
本发明从玉米幼苗叶片中分离出ZmBES1/BZR1-10基因,并将该基因转入拟南芥和水稻中培育出转基因植株,通过实验验证发现,转基因植株相对野生型水对照,明显能够促进根长和鲜重的增加,并且干旱胁迫后的植株的各项生理指标明显好于野生型对照,说明ZmBES1/BZR1-10基因可以显著增加转基因植物的耐旱性。同时该基因还能明显促进转基因植株籽粒的粒长和千粒重,说明改基因还能提高转基因植物的产量。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为转基因拟南芥在培养上基生长状况;
图2为转基因拟南芥根长测量结果;
图3为转基因拟南芥鲜重测量结果;
图4为转基因水稻干旱处理结果;A:处理前;B:干旱处理后;C:复水后;
图5为干旱处理后转基因水稻和野生型NIP叶片的相对电导率测定;
图6为干旱处理后转基因水稻和野生型NIP叶片的相对含水量测定;
图7为纯合转基因拟南芥根尖荧光观察;
图8为纯合转基因拟南芥种子;
图9为转基因拟南芥种子粒长粒宽;*与**分别表示p<0.05,p<0.01;
图10为转基因拟南芥种子千粒重;*与**分别表示p<0.05,p<0.01;
图11为转基因水稻阳性PCR检测;
图12为转基因水稻种子表型鉴定;
图13为转基因水稻种子粒长粒宽*与**分别表示p<0.05,p<0.01;
图14为为转基因水稻种子千粒重;
图15为pCAMBIA1300-35S-eGFP载体图谱。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式,该详细说明不应认为是对本发明的限制,而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式,并非用于限制本发明。另外,对于本发明中的数值范围,应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明,否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料,但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入,用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时,以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下,可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化,这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等,均为开放性的用语,即意指包含但不限于。
实施例1玉米ZmBES1/BZR1-10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用
1、基因克隆及载体构建
取五叶期玉米B73幼苗叶片,液氮速冻研磨,使用总RNA提取试剂盒Trizol(TaKaRa)并按照其说明书提取总RNA。用PrimeScriptTM RT regeant Kit试剂盒(Takara公司),以总RNA为模板进行cDNA的合成。利用Primer 5.0设计克隆引物,以B73cDNA为模板,具体PCR引物如表1。使用PrimerStar(Takara公司)高保真酶进行扩增,PCR扩增反应体系如表2,温度循环程序为:94℃,3min;98℃,10s,最适退火温度10s;72℃,20s;30个循环;72℃5min;4℃保持。扩增产物测序,其序列如SEQ ID NO:1所示。
表1 ZmBES1/BZR1-10克隆引物
Figure BDA0003572804410000041
表2 PCR扩增反应体系
Figure BDA0003572804410000042
1.1转化拟南芥载体35S-ZmBES1/BZR1-10-eGFP构建
根据双子叶植物表达载体pCAMBIA2300-35S-eGFP多克隆位点,在其上游引物引入Sma I酶切位点,下游引物引入Spe I位点,具体序列如下:
表3构建pCAMBIA2300载体引物
Figure BDA0003572804410000043
按表2所示反应体系加样,进行扩增。温度循环程序为:94℃3min;98℃10s,最适退火温度10s,72℃20s,30个循环;72℃5min;4℃保持。
对PCR产物进行回收。将回收产物,pCAMBIA2300-35S-eGFP质粒进行双酶切,按表4反应体系进行加样。将酶切体系混匀,置于30℃水浴锅中,酶切6~8h,酶切产物加入上样缓冲液后,直接电泳,回收酶切产物,按表5进行酶切片段连接。
表4双酶切反应体系
Figure BDA0003572804410000044
Figure BDA0003572804410000051
表5连接体系
Figure BDA0003572804410000052
连接产物转化大肠杆菌,并进行菌落PCR检测。提取重组质粒经限制性内切酶酶切鉴定之后,组质粒菌液送测序公司进行DNA的序列测序鉴定,经测序正确的质粒(重组质粒35S-ZmBES1/BZR1-10-eGFP的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示)将于下一步拟南芥转化。
1.2转化水稻载体35S-ZmBES1/BZR1-10-eGFP构建
根据单子叶植物表达载体pCAMBIA1300-35S-eGFP(图15)多克隆位点,在其上游引物入Hind III酶切位点,下游引物引入BamH I位点,具体序列如表6。利用PrimerStar(Takara公司)高保真酶进行扩增,PCR扩增反应体系如表2。之后对PCR产物进行回收。
表1构建pCAMBIA1300载体引物
Figure BDA0003572804410000053
将表达载体pCAMBIA1300-35S-eGFP质粒进行双酶切,按表4反应体系进行加样。将酶切体系混匀,置于30℃水浴锅中,酶切6~8h,酶切产物加入上样缓冲液后,直接电泳,回收酶切产物,使用ClonExpress II One Step Cloning Kit(诺唯赞),反应体系如表7,反应条件:37℃30mins。
表2同源重组酶反应体系
Figure BDA0003572804410000054
Figure BDA0003572804410000061
连接产物转化大肠杆菌,并进行菌落PCR检测。提取重组质粒经限制性内切酶酶切鉴定之后,组质粒菌液送测序公司进行DNA的序列测序鉴定,经测序正确的质粒(重组质粒35S-ZmBES1/BZR1-10-eGFP的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示)将于下一步水稻转化。
2、拟南芥、水稻转化及阳性鉴定
2.1利用花絮侵染法转化拟南芥
探索玉米ZmBES1/BZR1-10的功能,我们用农杆菌介导的花絮浸染法将重组质粒35S-ZmBES1/BZR1-10-eGFP(核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示)转化拟南芥哥伦比亚野生型Col(即WT)。
2.1.1花序浸染法转化
(1)取含有重组质粒的农杆菌,在含有Kana和Rif的YEP平板上划线,28℃培养2~3d。
(2)挑取农杆菌单菌落接种在3mL含Kana和Rif的YEP液体培养基中,28℃,200r/min,振荡过夜培养。
(3)在100mL液体YEP培养基中(含Kana和Rif),接种1mL过夜培养的起始农杆菌菌液,28℃振荡培养至菌液OD600值为1.2~1.5。
(4)4℃5000r/min离心10min收集细胞,用5%蔗糖溶液悬浮菌体并调OD600值至0.8~1.0,按1%~2%的比例加入表面活性剂silwetL-77。
(5)用拟南芥专用营养土盆栽培养拟南芥野生型Col,开花后修剪已形成果荚和已经开放的花,用上述侵染液浸泡花序1.5~2.0min,黑暗培养10h。
(6)在适宜的条件下培养3~4周,收集种子,进行下一步筛选处理。
2.1.2抗性培养基筛选
(1)将收获的侵染后种子,分装至1.5mL的EP管,用500μL的70%酒精浸泡30s。
(2)吸掉酒精后,用500μL的10%次氯酸钠浸泡5~10min,期间不断摇晃离心管以至种子与次氯酸钠充分接触。
(3)用灭菌水清洗种子4~6次,待种子沉下后,弃上层ddH2O;200μL的0.1%琼脂水悬浮种子。
(4)将种子点播至含40mg/L的卡那霉素(Kana)的1/2MS培养基中培养。
(5)重复上述步骤,直至收获T3代纯合的阳性苗。
对获得的阳性株系进行基因组PCR鉴定
(1)取植物新鲜组织100mg,加入液氮充分碾磨。加入400μL缓冲液FP1和6μL的RNaseA(10mg/mL),漩涡振荡1min,室温放置10min。
(2)加入130μL缓冲液FP2,充分混匀,涡旋振荡1min,12000r/min(13400×g)离心5min,将上清转移至新的离心管中。
(3)可选步骤:将上清液再次12000r/min(13400×g)离心5min,将上清转移至新的离心管中。
(4)向上清液中加入0.7倍体积的异丙醇,充分混匀,此时会出现絮状基因组DNA。12000r/min(13400×g)离心2min,弃上清,保留沉淀。
(5)加入600μL 70%乙醇,涡旋振荡5s,12000r/min(13400×g)离心2min,弃上清。
(6)重复步骤(5)。
(7)开盖倒置,室温5~10min,彻底晾干残余的乙醇。
(8)加入适量洗脱缓冲液TE,65℃水浴10~60min溶解DNA,期间颠倒混匀数次助溶,最终得到DNA溶液。
(9)使用PCR引物如表8,以提取的基因组DNA为模板进行PCR检测,程序为94℃,3min;94℃30s,最适退火温度30s,72℃60s/kb,35个循环;72℃5min;4℃保存。
表3转基因水稻检测引物
Figure BDA0003572804410000071
(10)收获转化的拟南芥T2代种子消毒后,播种于含有卡那霉素的1/2MS固体培养基上,7~8d后,全部为绿色健壮的植株既纯合转化体,而非纯和转化体则表现为3:1的分离(正常生长和黄化死亡植株所成的比例)。奠定为纯合的T3代种子用作进一步分析。
经过卡那霉素筛选,挑选纯合转基因株系W10-13、W10-19和W10-21用于后续研究。
2.2水稻转化
将重组质粒35S-ZmBES1/BZR1-10-eGFP(核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示)载体送未米生物公司(南京)转化水稻野生型“日本晴”(NIP)。
3、转基因株系耐旱性分析
3.1转基因拟南芥模拟干旱处理
将纯合的转基因拟南芥株系W10-13、W10-19、W10-21和野生型(WT)用5%次氯-钠溶液消毒后,播种于1/2MS培养基和含有200mM甘露醇的1/2MS培养基上,正常条件下培养15d观察根长变化。并测定根长和鲜重。
3.2转基因水稻干旱处理
将PCR鉴定确定阳性植株R10-7、R10-9、R10-10,并将R10-7、R10-9、R10-10和野生型(NIP)播种在含水的土壤中,20天后停止浇水,观察表型。
3.纯和株系产量分析
3.1拟南芥种子表型鉴定
将纯合的转基因拟南芥株系W10-19和W10-21和野生型(WT)用5%次氯酸钠溶液消毒后,播种于含有1/2MS培养基上,15d后移栽至含有营养土:蛭石=3:1土壤的50mm×50mm的花盆中,每盆播种4株,放在相同条件下培养直收种,测量种子粒长、粒宽和千粒重。
3.2水稻种子表型鉴定
将纯合的转基因水稻株系R10-9、R10-10和野生型(NIP)播种于水田中,相同条件下培养直收种,测量种子粒长、粒宽和千粒重。
4、结果分析
4.1转基因拟南芥在培养基上模拟干旱处理以及产量分析
在1/2MS培养基上,转基因株系W10-13、W10-19、W10-19和野生型WT的生长状况无明显变化,但是在含有200mM甘露醇的1/2MS培养基上,转基因株系的生长状况明显优于野生型(图1)。根长鲜重测量发现,转基因株系W10-13、W10-19、W10-21相较于野生型WT根长极显著增加(图2)。鲜重测量发现,转基因株系W10-13、W10-19、W10-21相较于野生型WT鲜重极显著增加(图3)。以上结果表明,在模拟干旱处理下,目的基因ZmBES1/BZR1-10可以显著增加拟南芥的耐旱性。
通过抗性筛选以及根尖荧光观察,确定目的基因ZmBES1/BZR1-10在拟南芥稳定表达(图7),对纯合转基因拟南芥的种子粒长、粒宽和千粒重分析,结果表明过表达株系W10-19和W10-21种子的粒长极显著增加,W10-21粒宽显著增加(图8和图9)。千粒重测量发现,过表达株系W10-19和W10-21的千粒重明显增加(图10)。
4.2转基因水稻干旱处理及产量分析
转基因株系R10-7、R10-9、R10-10和野生型(NIP)播种在含水的土壤中。处理前,转基因株系和NIP的生长状况无明显变化(图4A),但是干旱处理后,NIP叶片全部萎蔫,而转基因株系叶片仍有部分发绿(图4B),复水后,转基因株系长势明显好于NIP(图4C)。对干旱后的各株系生理指标测定显示,干旱处理后转基因株系的相对电导率明显小于野生型NIP(图5),相对含水量明显高于野生型NIP(图6)。以上结果表明,目的基因ZmBES1/BZR1-10可以显著增加水稻的耐旱性。
通过PCR对目的基因检测,确定阳性株系(图11)。对阳性株系的粒长、粒宽和千粒重分析,结果表明过表达株系R10-9和R10-10的粒长极显著增加,粒宽无明显变化;千粒重相比于对照NIP显著增加(图12-图14)。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述,并非对本发明的范围进行限定,在不脱离本发明设计精神的前提下,本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进,均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。
序列表
<110> 四川农业大学
<120> 玉米ZmBES1/BZR1-10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用
<160> 4
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 954
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
atgacgtccg gggcggcggc ggcgggaggt ctggggcgga cgccgacgtg gaaggagcgg 60
gagaacaaca agcgccggga gcgccggcgg agggccatcg ccgccaagat cttcacgggc 120
ctccgcgccc tcggcaacta caagctgccc aagcactgcg acaacaacga ggtgctcaag 180
gcgctctgcc gcgaggcggg gtgggtcgtc gaggacgacg gcaccaccta ccggaagggt 240
tgcaggccgc cgccggggat gctgagcccg tgctcgtcgt cgcagctgct gagcgcgccg 300
tcctcgagct tcccgagccc ggtgccgtcc taccacgcca gcccggcgtc gtcgagcttc 360
ccgagcccga cgcgcctcga ccacagcagc ggcggcagca gcacccacaa ccccgccgcg 420
gcggccgcgg cggccgccgc ctccctgctc ccgttcctcc ggggcctgcc gaacctgccg 480
ccgctccgcg tgtccagcag cgcgcccgtc acgccgccgc tctcctcgcc cacggcggcg 540
gcggcgtcgc ggccgcccac caaggtccgc aggcccaact gggacgccgc cgccgccgtc 600
gtcgccgctg accccttccg gcaccccttg ttcgcggtct ccgcccccgc cagccccacc 660
cgcgcgcgcc ggcgcgagca cccggacacc atcccggagt gcgacgagtc cgacgtctgc 720
tccgcggtcg actccgcccg gtggatcagc ttccaggcca ccacggcgcc cgcgtcgccc 780
acgtacaacc tcgtccaccc ggcctccgac tccatggagc tggacgggac gacggcagcc 840
gtcgaggagt tcgagttcga caagggccgc gtcgtcacgc cgtgggaagg cgagcggatc 900
cacgaggtcg ccgccgagga gctcgagctc acgctcggcg tcggcgccaa gtga 954
<210> 2
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
atgacgtccg gggcggcg 18
<210> 3
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
tcacttggcg ccgacgccga gc 22
<210> 4
<211> 2483
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
aattcccatg gagtcaaaga ttcaaataga ggacctaaca gaactcgccg taaagactgg 60
cgaacagttc atacagagtc tcttacgact caatgacaag aagaaaatct tcgtcaacat 120
ggtggagcac gacacgcttg tctactccaa aaatatcaaa gatacagtct cagaagacca 180
aagggcaatt gagacttttc aacaaagggt aatatccgga aacctcctcg gattccattg 240
cccagctatc tgtcacttta ttgtgaagat agtggaaaag gaaggtggct cctacaaatg 300
ccatcattgc gataaaggaa aggccatcgt tgaagatgcc tctgccgaca gtggtcccaa 360
agatggaccc ccacccacga ggagcatcgt ggaaaaagaa gacgttccaa ccacgtcttc 420
aaagcaagtg gattgatgtg atatctccac tgacgtaagg gatgacgcac aatcccacta 480
tccttcgcaa gacccttcct ctatataagg aagttcattt catttggaga ggacagggta 540
cccggggatc ctctagagtc gacatgacgt ccggggcggc ggcggcggga ggtctggggc 600
ggacgccgac gtggaaggag cgggagaaca acaagcgccg ggagcgccgg cggagggcca 660
tcgccgccaa gatcttcacg ggcctccgcg ccctcggcaa ctacaagctg cccaagcact 720
gcgacaacaa cgaggtgctc aaggcgctct gccgcgaggc ggggtgggtc gtcgaggacg 780
acggcaccac ctaccggaag ggttgcaggc cgccgccggg gatgctgagc ccgtgctcgt 840
cgtcgcagct gctgagcgcg ccgtcctcga gcttcccgag cccggtgccg tcctaccacg 900
ccagcccggc gtcgtcgagc ttcccgagcc cgacgcgcct cgaccacagc agcggcggca 960
gcagcaccca caaccccgcc gcggcggccg cggcggccgc cgcctccctg ctcccgttcc 1020
tccggggcct gccgaacctg ccgccgctcc gcgtgtccag cagcgcgccc gtcacgccgc 1080
cgctctcctc gcccacggcg gcggcggcgt cgcggccgcc caccaaggtc cgcaggccca 1140
actgggacgc cgccgccgcc gtcgtcgccg ctgacccctt ccggcacccc ttgttcgcgg 1200
tctccgcccc cgccagcccc acccgcgcgc gccggcgcga gcacccggac accatcccgg 1260
agtgcgacga gtccgacgtc tgctccgcgg tcgactccgc ccggtggatc agcttccagg 1320
ccaccacggc gcccgcgtcg cccacgtaca acctcgtcca cccggcctcc gactccatgg 1380
agctggacgg gacgacggca gccgtcgagg agttcgagtt cgacaagggc cgcgtcgtca 1440
cgccgtggga aggcgagcgg atccacgagg tcgccgccga ggagctcgag ctcacgctcg 1500
gcgtcggcgc caagactagt accatggtga gcaagggcga ggagctgttc accggggtgg 1560
tgcccatcct ggtcgagctg gacggcgacg taaacggcca caagttcagc gtgtccggcg 1620
agggcgaggg cgatgccacc tacggcaagc tgaccctgaa gttcatctgc accaccggca 1680
agctgcccgt gccctggccc accctcgtga ccaccctgac ctacggcgtg cagtgcttca 1740
gccgctaccc cgaccacatg aagcagcacg acttcttcaa gtccgccatg cccgaaggct 1800
acgtccagga gcgcaccatc ttcttcaagg acgacggcaa ctacaagacc cgcgccgagg 1860
tgaagttcga gggcgacacc ctggtgaacc gcatcgagct gaagggcatc gacttcaagg 1920
aggacggcaa catcctgggg cacaagctgg agtacaacta caacagccac aacgtctata 1980
tcatggccga caagcagaag aacggcatca aggtgaactt caagatccgc cacaacatcg 2040
aggacggcag cgtgcagctc gccgaccact accagcagaa cacccccatc ggcgacggcc 2100
ccgtgctgct gcccgacaac cactacctga gcacccagtc cgccctgagc aaagacccca 2160
acgagaagcg cgatcacatg gtcctgctgg agttcgtgac cgccgccggg atcactctcg 2220
gcatggacga gctgtacaag taactgcagg catgccaggg ctctcaatgg agtttgaatc 2280
aaatcttcca gctgctttaa tgagatatgc gagacgccta tgatcgcatg atatttgctt 2340
tcaattctgt tgtgcacgtt gtaaaaaacc tgagcatgtg tagctcagat ccttaccgcc 2400
ggtttcggtt cattctaatg aatatatcac ccgttactat cgtattttta tgaataatat 2460
tctccgttca atttactgat tga 2483

Claims (7)

1.玉米ZmBES1/BZR1-10基因,其特征在于,所述玉米ZmBES1/BZR1-10基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的玉米ZmBES1/BZR1-10基因在提高植物耐旱性和产量中的应用,其特征在于,应用于促进植物的耐旱性提高且籽粒的粒长和千粒重增大。
3.一种利用如权利要求1所述的玉米ZmBES1/BZR1-10基因培育耐旱和高产植物的方法,其特征在于,通过上调植物中ZmBES1/BZR1-10基因的表达,以获得耐旱性和籽粒大小改良的植株。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述上调植物中ZmBES1/BZR1-10基因的表达具体包括:设计ZmBES1/BZR1-10基因的扩增引物进行该基因的PCR扩增,利用扩增产物和载体构建包含ZmBES1/BZR1-10基因的重组质粒,再利用农杆菌介导将所述重组质粒转化入植物中,进行ZmBES1/BZR1-10基因过量表达,即可获得耐旱和高产量的植物。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2-3所示。
6.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的重组质粒为35S-ZmBES1/BZR1-10-eGFP,核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
7.如权利要求2-6任一项所述的方法,其特征在于,所述植物包括拟南芥或水稻中的一种。
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