CN114057771B - 大环化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

大环化合物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114057771B
CN114057771B CN202111459591.5A CN202111459591A CN114057771B CN 114057771 B CN114057771 B CN 114057771B CN 202111459591 A CN202111459591 A CN 202111459591A CN 114057771 B CN114057771 B CN 114057771B
Authority
CN
China
Prior art keywords
ylmethyl
alkyl
group
amino
methyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202111459591.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114057771A (zh
Inventor
张培龙
李功
兰文丽
薛宝玉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Anshi Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Beijing Anshi Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Anshi Biotechnology Co ltd filed Critical Beijing Anshi Biotechnology Co ltd
Publication of CN114057771A publication Critical patent/CN114057771A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114057771B publication Critical patent/CN114057771B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings

Abstract

本申请涉及大环化合物及其制备方法和应用，所述大环化合物具有下式I所示的结构：其中，A、B、D、R1、R2、R3、R4、R5、Z、X、m、n、p如说明书所定义。本申请的大环化合物既能克服EGFR C797S突变，又能克服EGFR T790M突变，而且选择性较高。

Description

大环化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及大环化合物及其制备方法和应用，特别涉及抑制、调节和/或调控EGFR激酶的信号转导的化合物、它们的制备方法、含有它们的药物组合物以及它们的应用。
背景技术
蛋白激酶是信号传导途径的酶组分，它催化末端磷酸盐从ATP迁移至蛋白的酪氨酸、丝氨酸和/或苏氨酸残基的羟基。因此，抑制蛋白激酶功能的化合物是评估蛋白激酶活动的生理学结果的有价值的工具。哺乳动物的正常或突变蛋白激酶的过表达或不适当表达已经成为广泛研究的主题，并已经被证实在许多疾病，包括糖尿病、血管生成、银屑病、再狭窄、眼病、精神***症、类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、心血管疾病和癌症的发展中起到重要作用。蛋白激酶抑制剂在治疗人和动物疾病方面具有特别的用途。
EGFR是受体酪氨酸激酶ErbB受体家族成员。当EGFR在胞外与其配体EGF结合后，受体发生同型或异型二聚化和自身磷酸化，激活下游级联信号通路，最终促进细胞生长、增殖和***等。EGFR的过度表达(上调)或过度活动已证实与许多癌症相关，包括头颈部癌、卵巢癌、***、膀胱癌、食道癌、胃癌、乳腺癌、子宫内膜癌、结肠直肠癌、非小细胞肺癌、和胶质母细胞瘤。
EGFR作为一种致癌基因产生了针对EGFR小分子抑制剂的靶向治疗。在非小细胞肺癌(NSCLC)中，50％-80％患者由EGFR突变引起。已经应用于临床的第一代EGFR抑制剂如易瑞沙、特罗凯等，它们对于NSCLC的治疗取得了很大成功。但临床有非常明显的皮疹和腹泻等副作用，而且在使用一年后，患者对药物出现耐药性。临床数据显示，大约有50％的患者获得性耐药源于T790M(20号外显子第790位点苏氨酸被甲硫氨酸取代)突变体产生。第二代抑制剂如阿法替尼、达可替尼等，它们与EGFR的结合活性更强，但对T790M突变体的选择性差，在可耐受剂量下，无法在体内达到有效浓度。
第三代抑制剂奥希替尼既可作为二线治疗经第一、第二代治疗后T790M突变患者，也可作为一线治疗未经EGFR-TKIs治疗的EGFR敏感突变的患者，但是经第三代EGFR抑制剂奥希替尼治疗9.9-18.9个月后也不可避免产生C797S(20号外显子797位点半胱氨酸突变成丝氨酸)耐药突变。
Thress KS最早报道了服用奥希替尼治疗T790M突变有40％患者发生C797S耐药突变，此外Lee JY等人也报道了对于T790M突变患者服用奥希替尼后会有24％患者产生C797S耐药突变，且Papadimitrakopoulou V.A.对AURA3临床试验中73例服用奥希替尼疾病进展的患者分析发现，有15％患者发生C797S耐药突变。FLAURA研究中奥希替尼作为一线治疗与第一代EGFR抑制剂(吉非替尼或厄洛替尼)标准治疗相比也表现超高的疗效，对该研究中91例服用奥希替尼耐药进展患者研究发现有7％患者发生C797S耐药突变。
耐药突变产生的结果导致EGFR对ATP亲和力大大提高，削弱药物小分子和ATP的竞争结合。Zhu SJ等人[Oncotarget,2018,9(17),13652-13665]发现有3种提高小分子亲和力的方法：共价/不可逆抑制、超高活性非共价/可逆抑制或非ATP竞争性抑制也称变构抑制。
2019年勃林格殷格翰公司在[J.Med.Chem.2019,62,10272-10293]的文章中报道一种既能克服奥希替尼耐药的C797S三突变，同时对野生型wtEGFR具有高度选择性的非共价的大环化合物BI-4020，但是该化合物未进入临床阶段。推测原因可能是非共价化合物的活性不能克服T790M双突变引起的耐药。对于C797S突变，目前市场上还没有有效的药物对其进行治疗，临床中针对C797S突变的药物较少，且主要是针对C797S三突变的可逆抑制剂，这些药物对T790M双突变活性较弱。因此在BI-4020的结构基础上通过引入弹头，形成不可逆抑制，对开发选择性的既能克服C797S突变，又能克服T790M突变的***EGFR抑制剂的具有重要意义。
发明内容
为了解决现有技术的缺陷，本发明提供一种大环化合物，该大环化合物既能克服EGFR C797S突变，又能克服EGFR T790M突变，而且选择性较高。
本发明是通过以下技术方案来实现的。
一方面，本发明提供具有如下式I所示结构的化合物：
其中，
环A和环B各自独立地为6-10元单环芳环或二环芳环、包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂芳环或二环杂芳环、或包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂环或二环杂环，所述的6-10元单环芳环或二环芳环、包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂芳环或二环杂芳环、或包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂环或二环杂环可以任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基所取代：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6烷基-酰基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元杂芳基、被一个或多个Rm取代或未被取代的6-10元芳基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基-C1-6烷基、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRb、-P(＝O)RaRb、-P(＝O)RaNRbRc、-P(＝S)RaRb、-P(＝S)RaNRbRc、RbS(＝O)2N(Ra)-，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6烷基-酰基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基-C1-6烷基、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRb、-P(＝O)RaRb、-P(＝O)RaNRbRc、-P(＝S)RaRb、-P(＝S)RaNRbRc、RbS(＝O)2N(Ra)-可选择地和它们所连接的碳原子一起形成环，所述的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6烷基-酰基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元杂芳基、被一个或多个Rm取代或未被取代的6-10元芳基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基-C1-6烷基-可以任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基所取代：卤素、氰基、氨基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、4-7元杂环基和4-7元杂环基-C1-6烷基；
环D为6-10元单环芳环或二环芳环、包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂芳环或二环杂芳环、包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂环或二环杂环、或C5-7环烷；
R1、R2、R4和R5其中1个为弹头基团，当R1为弹头基团时，R2、R4和R5各自独立地为R6；当R2为弹头基团时，R1、R4和R5各自独立地为R6；当R4为弹头基团时，R1、R2和R5各自独立地为R6；或当R5为弹头基团时，R1、R2和R4各自独立地为R6；
R3和R6各自独立地为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、C3-6环烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-氨基、4-6元杂环基-C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基-氨基、氢原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基、C1-6烷基-羰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基酰基-C1-6烷基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基-C1-6烷基、C1-6烷基-OC(O)-C1-6烷基、或包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基，所述包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、C1-6烷基-氨基、C3-6环烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-氨基、4-6元杂环基-C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基-氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基、C1-6烷基-羰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基酰基-C1-6烷基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基-C1-6烷基、C1-6烷基-OC(O)-C1-6烷基、或包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷基-O(O)C-、C1-6烷基-羰基、氧代、卤素、羟基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、被1个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、氧代、卤素取代的包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的5-7元杂环基；
或者，R3与环D上除与R3连接的原子之外的任意原子一起，或者，R3和R6与所连接的原子一起任选地形成由3-10个原子组成的杂环，所述杂环包含1-3个选自N，O或S杂原子并且杂环上可选地进一步被一个或多个选自C1-6烷基、卤素、6-10元芳基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的5-10元杂芳基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的5-10元杂环基、卤代C1-6烷基、羟基、氰基、卤素、C1-6烷氧基、4-6元杂环基烷基、C1-6烷基氨基和二(C1-6烷基)氨基所取代；
弹头基团为R7、-Y1(CRaRb)qNR7R8、
R7为或C1-6烷基C(O)；
Y1、Y2和Y3各自独立地为化学键、O、NR8、S、S(O)2、CR8R16、羰基、-氨基-酰基、-酰基-氨基、-O(CO)-或-(CO)O-；
M为化学键、被一个或多个Rm取代或未被取代的-C1-6烷基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的-C3-6环烷基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的-C3-6环烷基-C1-6烷基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的-4-7元杂环基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的-4-7元杂环基-C1-6烷基-；
R8为氢原子、C1-6烷基、C3-6环烷基、或包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子且任选的被氧代取代的5-7元杂环基；
R9和R10独立地为氢原子、卤素、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-6环烷基、或杂环基烷基；
R11为氢原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基可以任选地被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：卤素、羟基、氰基；
R12和R13各自独立地为氢原子、C1-6烷基、C3-7环烷基、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基、或R12和R13与NR12R13中的N一起形成包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基，所述C1-6烷基、C3-7环烷基、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基、或R12和R13与NR12R13中的N一起形成包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、卤素、羟基、氰基、氧代、C1-6烷基-氨基、卤代C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含N，O或S杂原子的3-7元杂环基和C1-6烷基-羰基；
R14和R15独立地为氢原子、C1-6烷基、或R14和R15与所连接的碳原子一起形成C3-6环烷基；
R16为氢原子、C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基、或C3-6环烷氧基；
Ra、Rb、Rc和Rd各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、羟基、氰基、氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基，所述的C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基可以任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基。
或者Ra和Rb与所连接的碳原子一起形成环、Rc和Rd与所连接的碳原子一起形成环，所述的环为C3-6环烷或包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环，所述的C3-6环烷、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基。
环E为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环、或包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子5-10元桥环或螺环饱和或部分不饱和杂环，所述4-7元饱和或部分不饱和杂环和5-10元桥环或螺环饱和或部分不饱和杂环基可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
环G为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环、C3-6环烷、6-10元单环芳环或二环芳环、或者包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子5-10元桥环或螺环饱和或部分不饱和杂环，所述4-7元饱和或部分不饱和杂环、C3-6环烷、6-10元单环芳环或二环芳环、5-10元桥环或螺环饱和或部分不饱和杂环可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
Rm为C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、氧代、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6酰基-氨基、C1-6烷基-O(CO)-或C3-6环烷基-O(CO)-；
q和t各自独立地为0、1、2或3；
w为1、2或3；
X为O、S、CR17R18、NR17、CO或S(O)2；
R17为氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、C1-6烷基-羰基或C1-6烷基-砜基；
R18为氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6烷基-酰基-氨基、C1-6烷基-O(O)C-、C1-6烷基-C(O)O-或C1-6烷基-砜基；
Z为N、O、S、CO、S(O)2、-氨基-酰基、-酰基-氨基、-O(CO)-、-(CO)O-、CR19、C3-7环烷基或3-7元杂环基，所述C3-7环烷基和3-7元杂环基可以任选独立地被一个或多个R18所取代；
R19独立地为氢原子、C1-6烷基或C3-6环烷基；
m和n独立地为0、1、2、3或4；
p为0、1、2或3。
在某些实施方式中，环A和环B各自独立地为苯环、或包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的5-6元杂芳环，所述的苯环或5-6元杂芳环可以任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基所取代：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基，所述的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基可以任选地被一个或多个独立地选自以下取代基所取代：卤素、氰基、氨基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C1-6烷基-氨基和4-7元杂环基；
优选地，在式I中，环A和环B各自独立地为苯环、吡啶、嘧啶、哒嗪、吡嗪、吡唑、吡咯、噻吩、咪唑、噁唑、异噁唑、呋喃、噻唑、异噻唑，所述的苯环、吡啶、嘧啶、哒嗪、吡嗪、吡唑、吡咯、噻吩、咪唑、噁唑、异噁唑、呋喃、噻唑和异噻唑可以任选地被一个或多个独立地选自以下取代基所取代：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-4烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基和C3-6环烷基-氨基。
在某些实施方式中，环D为苯环、包含1-3个独立地选自N，O和S杂原子的5-6元杂芳环、包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的5-7元杂环或环己环；
优选地，在式I中，环D为苯环、吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、哌啶、哌嗪、吡唑、咪唑或环己烷。
在某些实施方式中，R1、R2、R4和R5其中1个为弹头基团，当R1为弹头基团时，R2、R4和R5各自独立地为R6，当R2为弹头基团时，R1、R4和R5各自独立地为R6；当R4为弹头基团时，R1、R2和R5各自独立地为R6；或当R5为弹头基团时，R1、R2和R4各自独立地为R6；
R3和R6各自独立地为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、氢原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、或包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基，所述包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、或包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷基-O(O)C-、C1-6烷基-羰基、氧代、卤素、羟基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)-氨基、可被1个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、氧代、卤素取代的包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的5-7元杂环基；
弹头基团为R7、-Y1(CRaRb)qNR7R8、
R7为
Y1、Y2和Y3各自独立地为化学键、O或NR8；
R8为氢原子、C1-6烷基或C3-6环烷基；
R9和R10独立地为氢原子、卤素或氰基；
R12和R13各自独立地为氢原子、C1-6烷基、C3-6环烷基、或R12和R13与NR12R13中的N一起形成包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元杂环，所述C1-6烷基、C3-6环烷基和形成的包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元杂环可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含N，O或S杂原子的3-7元杂环基和C1-6烷基-羰基；
R14和R15独立地为氢原子、C1-6烷基或R14和R15与所连接的碳原子一起形成C3-6环烷基；
Ra、Rb、Rc和Rd各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、羟基、氰基、氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基，所述的C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基可以任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基；
或者Ra和Rb与所连接的碳原子一起形成环、Rc和Rd与所连接的碳原子一起形成环，所述的环为C3-6环烷或包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环，所述的C3-6环烷、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基；
环E为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和杂环、或包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子7-10元桥环或螺环饱和杂环，所述4-7元饱和杂环、7-10元桥环或螺环饱和杂环可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
环G为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和杂环、C3-6环烷、或包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子7-10元桥环或螺环饱和杂环，所述4-7元饱和杂环、C3-6环烷、7-10元桥环或螺环饱和杂环可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
Rm为C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、卤素、羟基、氰基、氨基、氧代、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷基-OC(O)-或C3-6环烷基-OC(O)-；
q和t各自独立地为0、1、2或3；
w为1、2或3；
优选地，在式I中，R1、R2、R4和R5其中1个为弹头基团，当R1为弹头基团时，R2、R4和R5各自独立地为R6；当R2为弹头基团时，R1、R4和R5各自独立地为R6；当R4为弹头基团时，R1、R2和R5各自独立地为R6；或当R5为弹头基团时，R1、R2和R4各自独立地为R6；
R3和R6各自独立地为氢原子、卤素、甲基、乙基、三氟甲基、甲氧基、异丙氧基、氰基、羟基、羟甲基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲基羰基、甲氧基羰基、4-甲基哌嗪-1-基羰基、二甲氨基甲基、二甲氨基乙氧基、羟基乙氧基、二甲氨基乙氧基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、N,N-二甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基、N,N-二甲基乙二氨基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、六氢吡喃基、四氢呋喃基，所述4-甲基哌嗪-1-基羰基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、六氢吡喃基、四氢呋喃基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基、甲氧基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲基羰基、甲氧基羰基、氧代和二甲氨基；
弹头基团为：
在某些实施方式中，X为O或S；
Z为N、O、S、-氨基-酰基、-酰基-氨基、或CR19；
R19独立地为氢原子、C1-6烷基或C3-6环烷基；
优选地，在式I中，Z为N、O或CR19；
R19独立地为氢原子、甲基、乙基、异丙基、环丙基或环丁基。
在某些具体实施方案中，式I中：
环A和环B各自独立地为苯环、或包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的5-6元杂芳环，所述的苯环或5-6元杂芳环可以任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基所取代：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基，所述的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基可以任选地被一个或多个独立地选自以下取代基所取代：卤素、氰基、氨基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C1-6烷基-氨基和4-7元杂环基；
环D为苯环、包含1-3个独立地选自N，O和S杂原子的5-6元杂芳环、包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的5-7元杂环或环己环；
R1、R2、R4和R5其中1个为弹头基团，当R1为弹头基团时，R2、R4和R5各自独立地为R6；当R2为弹头基团时，R1、R4和R5各自独立地为R6；当R4为弹头基团时，R1、R2和R5各自独立地为R6；或当R5为弹头基团时，R1、R2和R4各自独立地为R6；
R3和R6各自独立地为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、氢原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、或包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基，所述包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、或包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷基-O(O)C-、C1-6烷基-羰基、氧代、卤素、羟基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)-氨基、可被1个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、氧代、卤素取代的包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的5-7元杂环基；
弹头基团为R7、-Y1(CRaRb)qNR7R8、
R7为
Y1、Y2和Y3各自独立地为化学键、O或NR8；
R8为氢原子、C1-6烷基或C3-6环烷基；
R9和R10独立地为氢原子、卤素或氰基；
R12和R13各自独立地为氢原子、C1-6烷基、C3-6环烷基、或R12和R13与NR12R13中的N一起形成包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元杂环，所述C1-6烷基、C3-6环烷基和形成的包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元杂环可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含N，O或S杂原子的3-7元杂环基和C1-6烷基-羰基；
R14和R15独立地为氢原子、C1-6烷基或R14和R15与所连接的碳原子一起形成C3-6环烷基；
Ra、Rb、Rc和Rd各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、羟基、氰基、氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基，所述的C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基可以任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基；
或者Ra和Rb与所连接的碳原子一起形成环、Rc和Rd与所连接的碳原子一起形成环，所述的环为C3-6环烷或包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环，所述的C3-6环烷、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基；
环E为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和杂环、或包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子7-10元桥环或螺环饱和杂环，所述4-7元饱和杂环、7-10元桥环或螺环饱和杂环可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
环G为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和杂环、C3-6环烷、或包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子7-10元桥环或螺环饱和杂环，所述4-7元饱和杂环、C3-6环烷、7-10元桥环或螺环饱和杂环可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
Rm为C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、卤素、羟基、氰基、氨基、氧代、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷基-OC(O)-和C3-6环烷基-OC(O)-；
q和t各自独立地为0、1、2或3；
w为1、2或3；
X为O或S；
Z为N、O、S、-氨基-酰基、-酰基-氨基、或CR19；
R19独立地为氢原子、C1-6烷基或C3-6环烷基；
m和n独立地为0、1、2、3或4；
p为0、1、2或3。
在另一些具体实施方案中，在式I中：
环A和环B各自独立地为苯环、吡啶、嘧啶、哒嗪、吡嗪、吡唑、吡咯、噻吩、咪唑、噁唑、异噁唑、呋喃、噻唑、异噻唑，所述的苯环、吡啶、嘧啶、哒嗪、吡嗪、吡唑、吡咯、噻吩、咪唑、噁唑、异噁唑、呋喃、噻唑和异噻唑可以任选地被一个或多个独立地选自以下取代基所取代：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-4烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基和C3-6环烷基-氨基；
环D为苯环、吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、哌啶、哌嗪、吡唑、咪唑或己烷；
R1、R2、R4和R5其中1个为弹头基团，当R1为弹头基团时，R2、R4和R5各自独立地为R6；当R2为弹头基团时，R1、R4和R5各自独立地为R6；当R4为弹头基团时，R1、R2和R5各自独立地为R6；或当R5为弹头基团时，R1、R2和R4各自独立地为R6；
R3和R6各自独立地为氢原子、卤素、甲基、乙基、三氟甲基、甲氧基、异丙氧基、氰基、羟基、羟甲基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲基羰基、甲氧基羰基、4-甲基哌嗪-1-基羰基、二甲氨基甲基、二甲氨基乙氧基、羟基乙氧基、二甲氨基乙氧基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、N,N-二甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基、N,N-二甲基乙二氨基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、六氢吡喃基、四氢呋喃基，所述4-甲基哌嗪-1-基羰基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、六氢吡喃基、四氢呋喃基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基、甲氧基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲基羰基、甲氧基羰基、氧代和二甲氨基。
弹头基团为：
/>
X为O或S；
Z为N、O或CR19；
R19独立地为氢原子、甲基、乙基、异丙基、环丙基或环丁基；
m和n独立地为0、1、2、3或4；
p为0、1、2或3。
在又一些具体实施方案中，在式I中：
环A和环B各自独立地为苯环、吡啶、嘧啶、哒嗪、吡嗪、吡唑、咪唑、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑，所述的苯、吡啶、嘧啶、哒嗪、吡嗪、吡唑、咪唑、噁唑、异噁唑、噻唑和异噻唑可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：甲基、乙基、异丙基、乙烯基、乙炔基、氟代乙基、甲氧基、乙氧基、环丙基、环戊基、甲氧基、乙氧基、环丙氧基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、羟基乙基、羟基丙基、氨基乙基、氧代、氟、氯、溴、羟基、氰基、氰基乙基、氰基丙基、氨基、甲氨基、乙氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、二甲基氨基甲基、二甲基氨基乙基、甲基氨基乙基、环丙氨基；
环D为苯环、吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、哌啶或哌嗪；
R1、R2、R4和R5其中1个为弹头基团，当R1为弹头基团时，R2、R4和R5各自独立地为R6；当R2为弹头基团时，R1、R4和R5各自独立地为R6；当R4为弹头基团时，R1、R2和R5各自独立地为R6；或当R5为弹头基团时，R1、R2和R4各自独立地为R6；
R3和R6独立地为氢原子、氟、氯、溴、甲基、乙基、三氟甲基、甲氧基、异丙氧基、氰基、羟基、羟甲基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲基羰基、甲氧基羰基、4-甲基哌嗪-1-基羰基、二甲氨基甲基、二甲氨基乙氧基、羟基乙氧基、二甲氨基乙氧基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、N,N-二甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基、N,N-二甲基乙二氨基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、六氢吡喃基、四氢呋喃基，所述4-甲基哌嗪-1-基羰基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、六氢吡喃基、四氢呋喃基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：氟、氯、溴、甲基、乙基、异丙基、环丙基、甲氧基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲基羰基、甲氧基羰基、氧代和二甲氨基；
弹头基团为：
X为O或S；
Z为N、O或CR19；
R19独立地为氢原子、甲基、乙基或环丙基；
m和n独立地为0、1、2、3或4；
p为0、1、2或3。
在一个更具体的具体实施方案中，式I所示的化合物选自下列的化合物：
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
另一方面，本申请提供包含上述化合物以及药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物；优选地，所述药物组合物为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、栓剂、注射剂、溶液剂、混悬剂、膏剂、贴剂、洗剂、滴剂、擦剂或喷雾剂。
再一方面，本申请提供包含上述化合物和/或药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。在某些实施方式中，所述抗肿瘤药物应用于以下病症：头颈部癌、黑色素瘤、膀胱癌、食道癌、间变性大细胞淋巴瘤、肾细胞癌、乳腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、***、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、***癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝细胞癌、胃肠道基质瘤、甲状腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、多发性骨髓瘤或间皮瘤。
在某些实施方式中，所述肿瘤为携带EGFR基因突变的恶性肿瘤；优选地，EGFR基因突变选自：Del19 EGFR基因突变、L858R EGFR基因突变、T790M EGFR基因突变和C797S EGFR基因突变中的一种或多种。
又一方面，本申请提供一种治疗有需要的患者中肿瘤的方法，包括向所述患者给予治疗有效量的上述化合物或药物组合物，所述的患者优选哺乳动物，所述哺乳动物优选为人。
在某些实施方式中，给药方式包括口腔、粘膜、舌下、眼部、局部、肠道外、直肠、脑池、***、腹膜、膀胱、鼻部给药。
在某些实施方式中，所述肿瘤包括：头颈部癌、黑色素瘤、膀胱癌、食道癌、间变性大细胞淋巴瘤、肾细胞癌、乳腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、***、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、***癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝细胞癌、胃肠道基质瘤、甲状腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、多发性骨髓瘤或间皮瘤。
在某些实施方式中，本申请提供一种制备式I化合物的方法，该方法包括如下反应步骤：
(1)使化合物1与化合物2在碱性条件下反应，形成化合物3；
(2)使化合物3与化合物4发生Mitsunobu反应或亲核取代反应或偶联反应形成化合物5；
(3)将化合物5还原为化合物6；
(4)使化合物6与BrCN反应，形成化合物7；
(5)将化合物7水解为化合物8；
(6)使化合物8发生分子内缩合反应，形成化合物9；
(7)将化合物9脱保护基或者使化合物9先偶联或取代再脱保护基为化合物10；
(8)使化合物10与化合物11反应，形成式I所示化合物；
优选地，步骤(1)中碱性条件下使用的碱选自碳酸钾；
步骤(5)中水解使用的碱选自氢氧化锂。
在某些实施方式中，所述制备式I化合物的方法包括如下反应步骤：
(1)使化合物1与化合物2在碱性条件下反应，形成化合物3；
(2)将化合物3还原为化合物11；
(3)使化合物11与BrCN反应，形成化合物12；
(4)使化合物12与化合物13发生反应，形成化合物14；
(5)将化合物14关环形成化合物9；
(6)将化合物9脱保护基或者使化合物9先偶联或取代再脱保护基为化合物10；
(7)使化合物10与化合物11反应，形成式I所示化合物；
优选地，步骤(1)中碱性条件下使用的碱选自碳酸钾；
其中，当R1为弹头基团时，R22为氢原子、-Y1(CRaRb)qNHR8、 R20为带有保护基团的R22、卤素、带保护基的氧基、带保护基的氨基等，R18、R19、R21、R23、R24和R25为R6；当R2为弹头基团时，R23为-Y1(CRaRb)qNHR8、/> R21为带有保护基团的R23、卤素、带保护基的氧基、带保护基的氨基等，R18、R19、R20、R22、R24和R25为R6；当R4为弹头基团时，R24为-Y1(CRaRb)qNHR8、/> R18为带有保护基团的R24、卤素、带保护基的氧基、带保护基的氨基等，R19、R20、R21、R22、R23和R25为R6；或当R5为弹头基团时，R25为-Y1(CRaRb)qNHR8、 R19为带有保护基团的R25、卤素、带保护基的氧基、带保护基的氨基等，R18、R20、R21、R22、R23和R24为R6；
上述的带保护基的基团中，保护基团包括但不限于叔丁氧羰基、苄氧羰基、苄基或二甲氧基苄基；
L为羟基、卤素或离去基团；
此外，A、B、D、E、G、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R8、Ra、Rb、Rc、Rd、Y1、Y2、Y3、Z、X、p、q、m、n、t、弹头基团如前述所定义；
本发明的其它特点和优势可见下面的详细叙述。以下实施例和具体实施方式旨在清楚说明本发明的技术方案及其技术效果和优势，并非限制本发明的范围。
作为EGFR激酶抑制剂的大环化合物的结构
本发明涉及式I化合物或者其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、前药分子、水合物或溶剂化物：
其中，
环A和环B各自独立地为6-10元单环芳环或二环芳环、包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂芳环或二环杂芳环、或包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂环或二环杂环，所述的6-10元单环芳环或二环芳环、包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂芳环或二环杂芳环、或包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂环或二环杂环可以任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基所取代：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6烷基-酰基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元杂芳基、被一个或多个Rm取代或未被取代的6-10元芳基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基-C1-6烷基、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRb、-P(＝O)RaRb、-P(＝O)RaNRbRc、-P(＝S)RaRb、-P(＝S)RaNRbRc、RbS(＝O)2N(Ra)-，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6烷基-酰基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基-C1-6烷基、-S(＝O)2Ra、-S(＝O)2NRaRb、-P(＝O)RaRb、-P(＝O)RaNRbRc、-P(＝S)RaRb、-P(＝S)RaNRbRc、RbS(＝O)2N(Ra)-可选择地和它们所连接的碳原子一起形成环，所述的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6烷基-酰基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元杂芳基、被一个或多个Rm取代或未被取代的6-10元芳基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的4-7元杂环基-C1-6烷基-可以任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基所取代：卤素、氰基、氨基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、4-7元杂环基和4-7元杂环基-C1-6烷基；
环D为6-10元单环芳环或二环芳环、包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂芳环或二环杂芳环、包含1-4个独立地选自N，O和S杂原子的5-10元单环杂环或二环杂环、或C5-7环烷；
R1、R2、R4和R5其中1个为弹头基团，当R1为弹头基团时，R2、R4和R5各自独立地为R6；当R2为弹头基团时，R1、R4和R5各自独立地为R6；当R4为弹头基团时，R1、R2和R5各自独立地为R6；或当R5为弹头基团时，R1、R2和R4各自独立地为R6；
R3和R6各自独立地为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、C3-6环烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-氨基、4-6元杂环基-C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基-氨基、氢原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基、C1-6烷基-羰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基酰基-C1-6烷基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基-C1-6烷基、C1-6烷基-OC(O)-C1-6烷基、或包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基，所述包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、C1-6烷基-氨基、C3-6环烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-氨基、4-6元杂环基-C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基-氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C3-6环烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基、C1-6烷基-羰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基酰基-C1-6烷基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基-C1-6烷基、C1-6烷基-OC(O)-C1-6烷基、或包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷基-O(O)C-、C1-6烷基-羰基、氧代、卤素、羟基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、被1个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、氧代、卤素取代的包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的5-7元杂环基；
或者，R3与环D上除与R3连接的原子之外的任意原子一起，或者，R3和R6与所连接的原子一起任选地形成由3-10个原子组成的杂环，所述杂环包含1-3个选自N，O或S杂原子并且杂环上可选地进一步被一个或多个选自C1-6烷基、卤素、6-10元芳基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的5-10元杂芳基、包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的5-10元杂环基、卤代C1-6烷基、羟基、氰基、卤素、C1-6烷氧基、4-6元杂环基烷基、C1-6烷基氨基和二(C1-6烷基)氨基所取代；
弹头基团为R7、-Y1(CRaRb)qNR7R8、
R7为或C1-6烷基C(O)；
Y1、Y2和Y3各自独立地为化学键、O、NR8、S、S(O)2、CR8R16、羰基、-氨基-酰基、-酰基-氨基、-O(CO)-或-(CO)O-；
M为化学键、被一个或多个Rm取代或未被取代的-C1-6烷基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的-C3-6环烷基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的-C3-6环烷基-C1-6烷基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的-4-7元杂环基-、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的-4-7元杂环基-C1-6烷基-；
R8为氢原子、C1-6烷基、C3-6环烷基、或包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子且任选的被氧代取代的5-7元杂环基；
R9和R10独立地为氢原子、卤素、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-6环烷基、或杂环基烷基；
R11为氢原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)氨基、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基可以任选地被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：卤素、羟基、氰基；
R12和R13各自独立地为氢原子、C1-6烷基、C3-7环烷基、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基、或R12和R13与NR12R13中的N一起形成包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基，所述C1-6烷基、C3-7环烷基、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基、或R12和R13与NR12R13中的N一起形成包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-10元杂环基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、卤素、羟基、氰基、氧代、C1-6烷基-氨基、卤代C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含N，O或S杂原子的3-7元杂环基和C1-6烷基-羰基；
R14和R15独立地为氢原子、C1-6烷基、或R14和R15与所连接的碳原子一起形成C3-6环烷基；
R16为氢原子、C1-6烷基、C3-6环烷基、C1-6烷氧基、或C3-6环烷氧基；
Ra、Rb、Rc和Rd各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、羟基、氰基、氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基，所述的C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基可以任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基。
或者Ra和Rb与所连接的碳原子一起形成环、Rc和Rd与所连接的碳原子一起形成环，所述的环为C3-6环烷或包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环，所述的C3-6环烷、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基。
环E为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环、或包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子5-10元桥环或螺环饱和或部分不饱和杂环，所述4-7元饱和或部分不饱和杂环和5-10元桥环或螺环饱和或部分不饱和杂环基可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
环G为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环、C3-6环烷、6-10元单环芳环或二环芳环、或者包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子5-10元桥环或螺环饱和或部分不饱和杂环，所述4-7元饱和或部分不饱和杂环、C3-6环烷、6-10元单环芳环或二环芳环、5-10元桥环或螺环饱和或部分不饱和杂环可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
Rm为C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、氧代、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6酰基-氨基、C1-6烷基-O(CO)-或C3-6环烷基-O(CO)-；
q和t各自独立地为0、1、2或3；
w为1、2或3；
X为O、S、CR17R18、NR17、CO或S(O)2；
R17为氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、C1-6烷基-羰基或C1-6烷基-砜基；
R18为氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷基-氨基-酰基、二(C1-6烷基)-氨基-酰基、C3-6环烷基-氨基-酰基、C1-6烷基-酰基-氨基、C1-6烷基-O(O)C-、C1-6烷基-C(O)O-或C1-6烷基-砜基；
Z为N、O、S、CO、S(O)2、-氨基-酰基、-酰基-氨基、-O(CO)-、-(CO)O-、CR19、C3-7环烷基或3-7元杂环基，所述C3-7环烷基和3-7元杂环基可以任选独立地被一个或多个R18所取代；
R19独立地为氢原子、C1-6烷基或C3-6环烷基；
m和n独立地为0、1、2、3或4；
p为0、1、2或3。
在某些实施方式中，环A和环B各自独立地为苯环、或包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的5-6元杂芳环，所述的苯环或5-6元杂芳环可以任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基所取代：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基，所述的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、氰基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基可以任选地被一个或多个独立地选自以下取代基所取代：卤素、氰基、氨基、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C1-6烷基-氨基和4-7元杂环基；
优选地，在式I中，环A和环B各自独立地为苯环、吡啶、嘧啶、哒嗪、吡嗪、吡唑、吡咯、噻吩、咪唑、噁唑、异噁唑、呋喃、噻唑、异噻唑，所述的苯环、吡啶、嘧啶、哒嗪、吡嗪、吡唑、吡咯、噻吩、咪唑、噁唑、异噁唑、呋喃、噻唑和异噻唑可以任选地被一个或多个独立地选自以下取代基所取代：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、卤代C1-4烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、卤代C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤代C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、氧代、卤素、羟基、氰基、氰基-C1-6烷基、氨基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基和C3-6环烷基-氨基。
在某些实施方式中，环D为苯环、包含1-3个独立地选自N，O和S杂原子的5-6元杂芳环、包含1-2个独立地选自N，O和S杂原子的5-7元杂环或环己环；
优选地，在式I中，环D为苯环、吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、哌啶、哌嗪、吡唑、咪唑或环己烷。
在某些实施方式中，R1、R2、R4和R5其中1个为弹头基团，当R1为弹头基团时，R2、R4和R5各自独立地为R6，当R2为弹头基团时，R1、R4和R5各自独立地为R6；当R4为弹头基团时，R1、R2和R5各自独立地为R6；或当R5为弹头基团时，R1、R2和R4各自独立地为R6；
R3和R6各自独立地为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、氢原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、或包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基，所述包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的3-11元单环或桥环或螺环杂环基-C0-3烷基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷氧基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷氧基-羰基、或包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的3-7元杂环基-羰基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷基-O(O)C-、C1-6烷基-羰基、氧代、卤素、羟基、C1-6烷基氨基、二(C1-6烷基)-氨基、可被1个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、氧代、卤素取代的包含1-3个独立地选自N，O或S的杂原子的5-7元杂环基；
弹头基团为R7、-Y1(CRaRb)qNR7R8、
R7为
Y1、Y2和Y3各自独立地为化学键、O或NR8；
R8为氢原子、C1-6烷基或C3-6环烷基；
R9和R10独立地为氢原子、卤素或氰基；
R12和R13各自独立地为氢原子、C1-6烷基、C3-6环烷基、或R12和R13与NR12R13中的N一起形成包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元杂环，所述C1-6烷基、C3-6环烷基和形成的包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元杂环可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、被一个或多个Rm取代或未被取代的包含N，O或S杂原子的3-7元杂环基和C1-6烷基-羰基；
R14和R15独立地为氢原子、C1-6烷基或R14和R15与所连接的碳原子一起形成C3-6环烷基；
Ra、Rb、Rc和Rd各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、羟基、氰基、氧代、C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基，所述的C1-6烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、二(C1-6烷基)-氨基、二(C1-6烷基)-氨基-C1-6烷基、C3-6环烷基-氨基、3-7元杂环基、3-7元杂环基-C1-6烷基可以任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基；
或者Ra和Rb与所连接的碳原子一起形成环、Rc和Rd与所连接的碳原子一起形成环，所述的环为C3-6环烷或包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环，所述的C3-6环烷、包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和或部分不饱和杂环任选地被一个或者多个以下基团所取代：卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C3-6环烷基和C1-6烷氧基；
环E为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和杂环、或包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子7-10元桥环或螺环饱和杂环，所述4-7元饱和杂环、7-10元桥环或螺环饱和杂环可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
环G为包含1-3个独立地选自N，O或S杂原子的4-7元饱和杂环、C3-6环烷、或包含1-5个独立地选自N，O或S的杂原子7-10元桥环或螺环饱和杂环，所述4-7元饱和杂环、C3-6环烷、7-10元桥环或螺环饱和杂环可以任选独立地被一个或多个Rm所取代；
Rm为C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、C3-6环烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、羟基-C1-6烷基、氨基-C1-6烷基、C1-6烷基-氨基-C1-6烷基、卤素、羟基、氰基、氨基、氧代、C1-6烷基-氨基、二(C1-6烷基)-氨基、C3-6环烷基-氨基、C1-6烷基-羰基、C1-6烷基-OC(O)-或C3-6环烷基-OC(O)-；
q和t各自独立地为0、1、2或3；
w为1、2或3；
优选地，在式I中，R1、R2、R4和R5其中1个为弹头基团，当R1为弹头基团时，R2、R4和R5各自独立地为R6；当R2为弹头基团时，R1、R4和R5各自独立地为R6；当R4为弹头基团时，R1、R2和R5各自独立地为R6；或当R5为弹头基团时，R1、R2和R4各自独立地为R6；
R3和R6各自独立地为氢原子、卤素、甲基、乙基、三氟甲基、甲氧基、异丙氧基、氰基、羟基、羟甲基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲基羰基、甲氧基羰基、4-甲基哌嗪-1-基羰基、二甲氨基甲基、二甲氨基乙氧基、羟基乙氧基、二甲氨基乙氧基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、N,N-二甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基、N,N-二甲基乙二氨基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、六氢吡喃基、四氢呋喃基，所述4-甲基哌嗪-1-基羰基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、六氢吡喃基、四氢呋喃基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基、甲氧基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲基羰基、甲氧基羰基、氧代和二甲氨基；
弹头基团为：
在某些实施方式中，X为O或S；
Z为N、O、S、-氨基-酰基、-酰基-氨基、或CR19；
R19独立地为氢原子、C1-6烷基或C3-6环烷基；
优选地，在式I中，Z为N、O或CR19；
R19独立地为氢原子、甲基、乙基、异丙基、环丙基或环丁基。
除非另外指出，阐明下列定义以举例说明和定义用于描述本发明的各种术语的含义和范围。
表示连接位点。
碳氢基团中碳原子含量的最小值和最大值通过前缀表示，例如，前缀(Ca-b)烷基表示任何含“a”至“b”个碳原子的烷基。因此，例如，(C1-6)烷基是指包含1至6个碳原子的烷基。所述的烷基是支链的或直链的。
本申请化合物中所述的原子包括其同位素，例如，氢可以是氘或氚。
“烷基”是指直链或带有支链的，单价的，饱和烃基，包括但不限于如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基以及其它类似基团。优选C1-8烷基。更优选C1-6烷基。更优选C1-4烷基。
“环烷基”是指饱和的单环、联环、螺环、并环或桥环烷基，可能与其它基团组合。环烷基包括但不限于如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基。优选C3-8环烷基。更优选C3-6环烷基。更优选C3-4环烷基。
“烯基”指直链、带有支链或环状的含有一个或多个双键的烃基，包括但不限于乙烯基、丙烯基、(E)-2-甲基乙烯基、(Z)-2-甲基乙烯基、(E)-丁-2-烯基、(Z)-丁-2-烯基、(E)-丁-1-烯基、(Z)-丁-1-烯基。优选C2-6烯基。更优选C2-4烯基。
“炔基”指直链、带有支链或环状的含有一个或多个三键的烃基，包括但不限于乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基。优选C2-6炔基。更优选C2-4炔基。
“烷氧基”是指与一氧原子键合的直链或带有支链的，单价的，饱和烷基，包括但不限于如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基以及其它类似基团。优选C1-8烷氧基。更优选C1-6烷氧基。更优选C1-4烷氧基。
“卤素”是指氟，氯，溴或碘，优选氟，氯和溴。
“卤代烷基”是指本文定义的烷基，其中一个或多个氢已经被相同或不同卤素取代。包括但不限于如-CH2Cl，-CHF2，-CH2CF3，-CH2CCl3，全氟烷基(例如，-CF3)等。
“芳基”是指取代或未取代的单环或多环芳香基团，包括但不限于如苯基、萘基。优选6-10元单环或双环芳香基团。更优选苯基或萘基。最优选苯基。
“杂环基”是指取代或未取代的3-10元非芳香族单环饱和环系，其中包含1-3个独立地选自N，O，或S杂原子，其余环原子是碳原子。杂环基部分的实例包括但不限于：氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，高哌嗪基，氧代哌啶基、氧代哌嗪基、氧代高哌嗪基、四氢呋喃基、咪唑啉基，***啉基，噁唑烷基，异噁唑烷基，噻唑烷基，异噻唑烷基，奎宁环基，噻二唑烷基，二氢呋喃基，四氢呋喃基，二氢吡喃基，四氢吡喃基，硫代吗啉基，硫代吗啉基亚砜，硫代吗啉基砜等。优选4－7元杂环基。更优选4-6元杂环基。
“杂芳基”是指取代或未取代的5元或6元单杂芳环系，或取代或未取代的9元或10元稠合或双杂芳环系，其中包含1-4个独立选自N，O，或S杂原子，其余环原子是碳原子。杂芳基部分的实例包括但不限于：噻吩基，呋喃基，咪唑基，异噁唑基，噁唑基，吡唑基，吡咯基，噻二唑基，***基，吡啶基，哒嗪基，嘧啶基，吲哚基，吲唑基，喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基或苯并噻唑基。
“桥环”是指任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环基团，可以含有一个或多个双键，但是没有一个环具有完全共轭的π电子体系，环原子可以是全碳原子也可以其中一个或多个环原子选自N，O，S，SO或SO2。优选为7-10环。
“螺环”是指任意两个环共用碳原子的多环基团，可以含有一个或多个双键，但是没有一个环具有完全共轭的π电子体系，环原子可以是全碳原子也可以其中一个或多个环原子选自N，O，S，SO或SO2。优选为5-10环。
根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环基团，优选为双环、三环或四环，更优选为双环或三环。
一个环状基团可通过多种方式与另一基团键合。如果未明确键合方式，则表示包括所有可能的方式。例如，“吡啶基”包括2-、3-、或4-吡啶基，而“噻吩基”包括2-或3-噻吩基。
“药学上可接受的盐”指常规的酸加成盐或碱加成盐，其保留式I化合物的生物有效性和性质，其由适宜的非毒性有机或无机酸或有机或无机碱形成。酸加成盐的例子包括衍生自无机酸和衍生自有机酸的那些盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸。所述有机酸例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、乙磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、马来酸、羟基马来酸、乳酸、富马酸、酒石酸、苹果酸、羟乙基磺酸、苯磺酸、三氟乙酸、扁桃酸等。碱加成盐的例子包括衍生自无机酸和衍生自有机酸的那些盐，所述无机碱例如铵盐、钙盐、铁盐、铝盐、钠盐、钾盐、锌盐、镁盐。所述有机碱包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，例如三甲胺、三乙胺、三丙胺、二乙醇胺、乙二胺、乙醇胺、等。将药用化合物(即药物)化学改性成盐是药剂师公知的技术，用以获得化合物的改善的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性。
“前药”指可以在体内转化为本发明所涉及的化合物及其药学可接受的盐的结构的前药。
作为EGFR激酶抑制剂的大环化合物的制备方法
本申请还涉及制备式I化合物的方法。本发明的化合物可以由任何常规手段制备。实施例中提供了合成这些化合物的合适的方法。在多步骤合成路线中，反应的次序在特定情况下是可以调整的。
在某些实施方式中，本申请提供了一种制备式I化合物的方法，该方法包括如下反应步骤：
(1)使化合物1与化合物2在碱性条件下反应，形成化合物3；
(2)使化合物3与化合物4发生Mitsunobu反应或亲核取代反应或偶联反应形成化合物5；
(3)将化合物5还原为化合物6；
(4)使化合物6与BrCN反应，形成化合物7；
(5)将化合物7水解为化合物8；
(6)使化合物8发生分子内缩合反应，形成化合物9；
(7)将化合物9脱保护基或者使化合物9先偶联或取代再脱保护基为化合物10；
(8)使化合物10与化合物11反应，形成式I所示化合物；
优选地，步骤(1)中碱性条件下使用的碱选自碳酸钾；
步骤(5)中水解使用的碱选自氢氧化锂。
在某些实施方式中，所述制备式I化合物的方法包括如下反应步骤：
(1)使化合物1与化合物2在碱性条件下反应，形成化合物3；
(2)将化合物3还原为化合物11；
(3)使化合物11与BrCN反应，形成化合物12；
(4)使化合物12与化合物13发生反应，形成化合物14；
(5)将化合物14关环形成化合物9；
(6)将化合物9脱保护基或者使化合物9先偶联或取代再脱保护基为化合物10；
(7)使化合物10与化合物11反应，形成式I所示化合物；
优选地，所述步骤(1)中碱性条件下使用的碱选自碳酸钾
其中，当R1为弹头基团时，R22为氢原子、-Y1(CRaRb)qNHR8、 R20为带有保护基团的R22、卤素、带保护基的氧基、带保护基的氨基等，R18、R19、R21、R23、R24和R25为R6；当R2为弹头基团时，R23为-Y1(CRaRb)qNHR8、/> R21为带有保护基团的R23、卤素、带保护基的氧基、带保护基的氨基等，R18、R19、R20、R22、R24和R25为R6；当R4为弹头基团时，R24为-Y1(CRaRb)qNHR8、/> R18为带有保护基团的R24、卤素、带保护基的氧基、带保护基的氨基等，R19、R20、R21、R22、R23和R25为R6；或当R5为弹头基团时，R25为-Y1(CRaRb)qNHR8、/> R19为带有保护基团的R25、卤素、带保护基的氧基、带保护基的氨基等，R18、R20、R21、R22、R23和R24为R6；
上述的带保护基的基团中，保护基团包括但不限于叔丁氧羰基、苄氧羰基、苄基或二甲氧基苄基；
L为羟基、卤素或离去基团；
此外，A、B、D、E、G、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R8、Ra、Rb、Rc、Rd、Y1、Y2、Y3、Z、X、p、q、m、n、t、弹头基团如前述所定义；
作为EGFR激酶抑制剂的大环化合物药物组合物
本发明还提供了包括所述作为EGFR激酶抑制剂的化合物以及药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。
在此提到的术语“药物组合物”是指将本发明中的化合物中的一个或多个或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或前药与其他的化学成分，例如药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂混合。药物组合物的目的是促进给药给动物的过程。
“药学上可接受的载体”是指一种药学上可接受的物质，成分或者介质，比如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或灌封材料，其参与将本发明涉及的化合物从某一位置，体液、组织、器官(内部或外部)、或身体部分装载或传递到另一位置，体液、器官(内部或外部)、或身体部分。药学上可接受的载体可以是介质、稀释剂、赋形剂或者其它没有过度毒性或者副作用并能用于接触动物组织的材料。典型的药学上可接受的载体包括糖类、淀粉、纤维素类、麦芽糖、黄蓍胶、明胶、林格氏溶液、海藻酸、生理盐水、缓冲剂等。
每种药学上可接受的载体应该与其它组成成分相容，例如与本发明中提供的化合物形成制剂，对生物活体组织或者器官没有过度毒性、刺激、过敏性反应、免疫原性或其它问题或并发症，且有较合理的效益风险比。
一些药学上可接受的载体的物质包括：(1)糖类，比如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，比如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素和其衍生物，比如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、醋酸纤维素；(4)西黄蓍胶粉；(5)麦芽糖；(6)明胶；(7)滑石粉；(8)赋形剂，比如可可脂和栓剂蜡；(9)油类，比如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇类，比如丙二醇；(11)多元醇类，比如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)脂类，比如油酸乙酯、月桂酸乙酯；(13)琼脂胶；(14)缓冲剂，比如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)灭菌无热原水；(17)生理盐水；(18)林格氏溶液；(19)醇类，比如乙醇和丙醇；(20)磷酸缓冲液；(21)其它在药物剂型中无毒性可相容的物质，比如丙酮。
药物组合物可能包括药学上可接受的辅料，以模拟生理条件，比如pH调节和缓冲剂、毒性调节剂等等，如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等。
药物成分可制成任何合适的剂型，如固体剂型(例如片剂、胶囊、粉末、颗粒等)和液体剂型(例如水溶液、乳浊液、酏剂、糖浆等)。药物组合物的制备方法工艺已众所周知，可根据常规工艺进行制备，比如在Remington，The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro ed.20th edition,Williams&Wilkins PA,USA)(2000)中提供。
在某些实施方式中，本发明中提供的化合物或药物组合物可以被制成适于药物释放的剂型，通过注射途径给药(如皮下、静脉、肌肉、动脉、鞘膜、囊内、框内、心脏内、真皮内、腹膜内、经气管、表皮、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、胸骨内、和/或输液)和非注射途径给药(如口服、肠道、口腔、鼻、鼻内、粘膜、表皮、贴膏剂、真皮、眼药、肺部、舌下、直肠、***或表皮局部给药)。
合适的剂型包括(但不局限于)注射用途的剂型比如乳状液、溶液和混悬液，口服用途的剂型如片剂、胶囊、丸剂、糖衣丸、粉末和颗粒，局部用药或经皮肤吸收的剂型如喷剂、软膏、糊剂、乳霜、洗剂、凝胶、溶液、药物贴片和吸入剂，***或直肠给药的剂型如栓剂。这些剂型可根据化合物以及合适的赋形剂在合适条件下制备，制备方法及工艺众所周知，比如由Remington：在The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro ed.20thedition,Williams&Wilkins PA,USA)(2000)提供。
在某些实施方式中，本申请提供了包含上述化合物以及药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。在某些实施方式中，药物组合物为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、栓剂、注射剂、溶液剂、混悬剂、膏剂、贴剂、洗剂、滴剂、擦剂、喷雾剂
作为EGFR激酶抑制剂的大环化合物药物组合物的应用
本发明的另一个方面提供了上述化合物和/或药物组合物在制备药物以及治疗疾病中的应用。
在某些实施方式中，本发明提供了上述化合物和/或药物组合物在制备抗肿瘤的药物中的应用。
在某些实施方式中，本申请提供了包含上述化合物和/或药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。在某些实施方式中，所述抗肿瘤药物应用于以下病症：头颈部癌、黑色素瘤、膀胱癌、食道癌、间变性大细胞淋巴瘤、肾细胞癌、乳腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、***、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、***癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝细胞癌、胃肠道基质瘤、甲状腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、多发性骨髓瘤或间皮瘤。
在某些实施方式中，本申请提供了一种治疗有需要的患者中肿瘤的方法，包括向所述患者给予有效量的上述化合物或药物组合物，所述患者优选哺乳动物，所述哺乳动物优选人。在某些实施方式中，给药方式包括口腔、粘膜、舌下、眼部、局部、肠道外、直肠、脑池、***、腹膜、膀胱、鼻部给药。
本发明涉及的化合物或药物组合物可通过任何合适的途径进入生物体内，比如通过口服、静脉注射、鼻内、外用、肌注、真皮内注射、经皮给药或皮下途径。在某些实施方式中，本发明涉及的化合物或药物组合物的给药方式包括口腔、粘膜、舌下、眼部、局部、肠道外、直肠、脑池、***、腹膜、膀胱、鼻部给药。
在某些实施方式中，本发明涉及的化合物或药物组合物可以与第二活性物质同时进行施用，这样能在生物体内达到叠加甚至协同的作用。例如，本发明涉及的化合物可以和第二活性物质组合成一个药物组合物，或者以单独的组合物同时施用，或者以单独的组合物依次施用。能与本发明化合物同时施用、用于治疗癌症的第二活性物质包括但不局限于：氟尿嘧啶、阿霉素、柔红霉素、它莫西芬、亮丙瑞林、戈舍瑞林、氟他米特、尼鲁米特、非那雄胺、***、氨鲁米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗、比卡鲁胺、博来霉素、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、秋水仙碱、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素d、正定霉素、双烯雌酚、己烯雌酚、多西紫杉醇、阿霉素、亚德里亚霉素、表柔比星、***、雌氮芥、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟达拉滨、氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟***、氟他米特、吉西他滨、染料木黄酮、戈舍瑞林、三苯氧胺、替尼泊苷、睾酮、二氯化二茂钛、拓普泰康、曲妥单抗、维甲酸、长春花碱、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、干扰素、伊立替康、来曲唑、甲酰四氢叶酸、喷司他丁、光神霉素、甲基苄肼、雷替曲塞、卟菲尔钠、利妥昔、链脲菌素、苏拉明、亮丙瑞林、左旋咪唑、环己亚硝脲、氮芥、甲羟孕酮、甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、巯乙磺酸钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、诺考达唑、奥曲肽、紫杉醇、帕米磷酸、硫鸟嘌呤、三胺硫磷、氯甲烷、拓扑替康二茂钛、曲妥单抗、维甲酸、长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞斌。
在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与非化学方法同时使用进行癌症治疗。在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与放射疗法同时进行。在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与外科手术，肿瘤热治疗，超声聚焦疗法，冷冻疗法或以上几种疗法结合使用。
在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与类固醇同时使用。合适的类固醇包括但不局限于：安西缩松、倍氯米松、倍他米松、布***、氯***、氯倍他索、皮质甾酮、可的松、羟泼尼缩松、去羟米松、***、双氟拉松、双氟米松、二氟孕甾丁酯、甘草次酸、氟扎可松、氟米松、氟尼缩松、氟氯奈德、肤轻松醋酸酯、氟轻松醋酸酯、氟可丁丁酯、氟可龙、丙酮缩氟氢羟龙、醋酸氟培龙、醋酸氟泼尼定、氟泼尼龙、氟氢缩松、丙酸氟、醛基缩松、丙酸氯倍他索、哈西缩松、卤米松、氢化可的松、氯替泼诺碳酸乙酯、甲哌地强龙、甲羟松、甲***、6-甲氢化***、在任糠酸盐、帕拉米松、***龙、***、和25-二乙胺醋强的松龙。
在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与免疫治疗剂同时使用。合适的免疫治疗剂包括：肿瘤细胞多药耐药性逆转剂(比如维拉帕米)、雷帕霉素、霉酚酸酯、沙利度胺、环磷酰胺、环孢霉素、和单克隆抗体类。
具体实施方式
实施例1.(2-氨基乙基)(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成
第一步：2,2,2-三氟-N-(2-((2-羟基乙基)氨基)乙基)乙酰胺
0℃下，往100mL圆底烧瓶中依次加入2-(2-氨基乙胺)乙醇(10.0g,96.0mmol)，干燥的***(30mL)和三氟乙酸乙酯(13.6g,96.0mmol)，所得的混合液在室温下搅拌2h，有白色沉淀物形成。过滤，滤饼使用***洗涤2次(20mL×2)，干燥得2,2,2-三氟-N-(2-((2-羟基乙基)氨基)乙基)乙酰胺(14.6g,白色固体)，产率：74.9％。
第二步：(2-羟乙基)(2-(2,2,2-三氟乙酰氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
室温下，往干燥的500mL圆底烧瓶中依次加入2,2,2-三氟-N-(2-((2-羟基乙基)氨基)乙基)乙酰胺(13.4g,0.066mol)，四氢呋喃(200mL)和Boc2O(14.5g，0.066mol)，混合液在室温下搅拌6h。反应完毕后，减压浓缩，加入水(100mL)，用乙酸乙酯萃取(150mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(100mL×1)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品(2-羟乙基)(2-(2,2,2-三氟乙酰氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(20.4g,无色油状物)，产率：100.0％。
MS(ESI+)m/z＝323.9[M+Na]+.
第三步：(2-氨基乙基)(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯
室温下，往500mL圆底烧瓶中依次加入(2-羟乙基)(2-(2,2,2-三氟乙酰氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(20.4g,0.0677mol)，甲醇(50mL)，水(10mL)和碳酸钾(5.0g)，升温至60℃搅拌48h。反应完毕后，减压浓缩，除去甲醇，往剩余物中加入水(30mL)，用乙酸乙酯萃取(50mL×2)，舍弃乙酸乙酯相，水相减压浓缩，得到粗品(2-氨基乙基)(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯(15.8g,无色油状物)。产率：91.4％。
MS(ESI+)m/z＝205.2[M+H]+.
实施例2.5-氨基-4-甲基戊烷-1-醇的合成
第一步：(2,6-二甲基庚-5-烯-1-基)氨基甲酸叔戊酯
将3,7-二甲基辛-6-烯酸(3.5g,20.56mmol)溶于甲苯(300mL)中，升温至50℃，加入三乙胺(2.5g,24.67mmol)，然后缓慢加入叠氮磷酸二苯酯(5.65g,20.56mmol)，升温至70℃并搅拌12h，加入2-甲基丁烷-2-醇(3.6g,41.16mmol)，升温至110℃并搅拌2h后，再加入2-甲基丁烷-2-醇(3.6g,41.16mmol)。反应混合液在110℃下搅拌12h。减压浓缩，往所得剩余物中加入水(100mL)，用乙酸乙酯(200mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝6/1～5/1纯化得到(2,6-二甲基庚-5-烯-1-基)氨基甲酸叔戊酯(2.5g,无色油状物)，产率：41.5％。
第二步：(5-羟基-2-甲基戊基)氨基甲酸叔戊酯
/>
室温下，在干燥的100mL圆底烧瓶中依次加入(2,6-二甲基庚-5-烯-1-基)氨基甲酸叔戊酯(2.5g,10.11mmol)和甲醇(20mL)，降温至-78℃，缓慢通入臭氧至反应体系变为天蓝色为止，继续搅拌20min至无色。降温至0℃，缓慢加入硼氢化钠(0.95g,25.1mmol)，加毕，缓慢升温至室温并搅拌12h。减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝5/1～1/1纯化得到(5-羟基-2-甲基戊基)氨基甲酸叔戊酯(450mg,无色油状物)，产率：27.9％。
第三步：5-氨基-4-甲基戊烷-1-醇
室温下，在干燥的100mL圆底烧瓶中依次加入(5-羟基-2-甲基戊基)氨基甲酸叔戊酯(450mg,1.95mmol)和4M盐酸的二氧六环溶液(10mL)，室温搅拌2h，减压浓缩得到粗品5-氨基-4-甲基戊烷-1-醇(600mg,无色油状物)。
实施例3.(R)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙烷-2-基4-甲苯磺酸盐的合成
第一步：(R)-(2-羟丙基)氨基甲酸叔丁酯
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入(R)-1-氨基丙烷-2-醇(1.5g,0.02mol)和DCM(20mL)，降温至0℃，缓慢加入Boc2O(4.8g,0.022mol)和三乙胺(4.0g,0.04mol)，升温至室温搅拌2h。加入水(20mL)，用二氯甲烷萃取(20mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝5/1纯化得到(R)-(2-羟丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.4g,白色固体)，产率：68.6％。
第二步：(R)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙烷-2-基4-甲苯磺酸盐
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入叔丁基(R)-(2-羟丙基)氨基甲酸酯(900mg,5.1mmol)和吡啶(5mL)，降温至0℃，缓慢加入对甲苯磺酰氯(1.07g,5.6mmol)，升温至室温搅拌4-5h。减压浓缩，所得剩余物使用薄层层析法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝10/1纯化得到(R)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙烷-2-基4-甲苯磺酸盐(640mg,白色固体)，产率：38.1％。
实施例4-16.对甲苯磺酸盐化合物的合成
以市售Boc保护或不保护的氨基(环)烷基醇或杂环基(烷基)醇为原料，按照合成(R)-1-((叔丁氧羰基)氨基)丙烷-2-基4-甲苯磺酸盐(实施例3)方法制备以下对甲苯磺酸盐化合物。
表1对甲苯磺酸盐化合物
/>
实施例17. 2-((叔丁氧羰基)氨基)乙基-1,1-二氘4-甲苯磺酸盐的合成
第一步：叔丁基(2-羟乙基-2,2-二氘)氨基甲酸酯
室温下，在250mL圆底烧瓶中加入THF(50mL)，降温至0℃分批加入氘代四氢铝锂(1.66g,39.6mmol)，然后分批加入(叔丁氧羰基)甘氨酸甲酯(5g,26.4mmol)，室温搅拌过夜。反应完毕后，加十水合硫酸钠(1.7g)淬灭，过滤，滤液旋干得到粗品叔丁基(2-羟乙基-2,2-二氘)氨基甲酸酯(3.6g,黄色油状物)，产率：83.7％。
第二步：2-((叔丁氧羰基)氨基)乙基-1,1-二氘4-甲苯磺酸盐
在100mL圆底烧瓶中加入叔丁基(2-羟乙基-2,2-二氘)氨基甲酸酯(2.5g,15.3mmol)和二氯甲烷(25mL)，然后加入对甲苯磺酰氯(4.4g,23.0mmol)和三乙胺(3.1g,30.6mmol)，室温搅拌过夜。反应完毕后，缓慢倒入水中，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品2-((叔丁氧羰基)氨基)乙基-1,1-二氘4-甲苯磺酸盐(3.5g,黄色固体)，产率：72.0％。
MS(ESI+)m/z＝218.0[M-100+H]+.
实施例18. 2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)乙基4-甲苯磺酸盐的合成
室温下，100mL圆底烧瓶中依次加入(2-羟乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.5g,15.3mmol)和二氯甲烷(25mL)，然后加入对甲苯磺酰氯(4.4g,23.0mmol)和三乙胺(3.1g,30.6mmol)，室温搅拌过夜。反应完毕后，倒入水中淬灭，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)乙基4-甲苯磺酸盐(3.5g,黄色固体)，产率：72.0％。
实施例19.N6-((苄氧基)羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸的合成
在50mL干燥的圆底烧瓶中依次加入(叔丁氧基羰基)赖氨酸(2g,8.13mmol)，THF(20mL)和碳酸钠(1.7g,16.26mmol)，0℃下滴加CbzCl(1.66g,9.72mmol)，室温搅拌过夜。反应完毕后，加水(20mL)稀释，用乙酸乙酯洗涤(20mL×1)，水相用2M HCl调节pH＝2，用乙酸乙酯(20mL×6)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品N6-((苄氧基)羰基)-N2-(叔丁氧基羰基)赖氨酸(1.8g,黄色油状)，产率：66.7％。
实施例20. 2-甲酰氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯的合成
在100mL三口圆底烧瓶中加入1-(叔丁基)2-甲基氮杂环丁烷-1,2-二甲酸酯(500mg,2.32mmol)和二氯甲烷(10mL)，氮气保护下，-78℃下滴加二异丁基氢化铝(4.65mL,4.65mmol)，滴加完毕在-78℃搅拌2h。反应完毕后，加入水(15mL)，用二氯甲烷萃取(5mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到2-甲酰氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(300mg,黄色液体)，产率：69.8％。
实施例21. 2-(3-溴丙基)环氧乙烷的合成
冰水浴下，在250mL圆底烧瓶中依次加入5-溴戊烯(10.0g,67.1mmol)和二氯甲烷(200mL)，然后分批加入间氯过氧苯甲酸(23.2g,134.2mmol)，加毕，室温搅拌16h。反应完毕后，分批加入亚硫酸氢钠(20g)淬灭反应，所得混合液用二氯甲烷萃取(50mL×5)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，得到粗品2-(3-溴丙基)环氧乙烷(7.0g,无色透明液体)，产率：56.9％。
实施例22. 4-(二甲氧基甲基)-2-氟硝基苯的合成
室温下，将3-氟-4-硝基苯甲醛(8.5g,0.05mol)和原甲酸三甲酯(8.0g,0.075mol)加入甲醇(100mL)中，然后加入对甲苯磺酸(50mg)，升温至70℃并搅拌18h。反应混合液减压浓缩除去甲醇，向所得剩余物中加入水(50mL)，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并乙酸乙酯相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗品4-(二甲氧基甲基)-2-氟-1-硝基苯(10.0g,黑色油状物)，产率：83.1％。
实施例23. 4-(苄氧基)-2-氟-1-硝基苯的合成
室温下，在250mL圆底烧瓶中依次加入3-氟-4-硝基苯酚(5.0g,31.8mmol)，乙腈(150mL)，K2CO3(13.2g,95.4mmol)和溴苄(5.98g,35.0mmol)，加热至回流搅拌2h。反应完毕后，减压浓缩，剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系乙酸乙酯/石油醚＝1/4纯化得到4-(苄氧基)-2-氟-1-硝基苯(6.5g,黄色固体)，产率：78.9％。
MS(ESI+)m/z＝248.0[M+H]+.
实施例24. 3-(苄氧基)-2-氟-1-硝基苯的合成
以2-氟-3-硝基苯酚为原料，按照合成4-(苄氧基)-2-氟-1-硝基苯(实施例23)的方法合成3-(苄氧基)-2-氟-1-硝基苯。
实施例25.(2-氟-3-硝基苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯的合成
第一步：1-(2-氟-3-硝基苯基)-N-甲基甲胺
室温下，往250mL圆底烧瓶中依次加入2-氟-3-硝基苯甲醛(1.5g,8.87mmol)，甲醇(50mL)，醋酸(2mL)和甲胺(0.330g,10.64mmol)，室温下搅拌1-2h，然后缓慢加入氰基硼氢化钠(1.12g,17.74mmol)，加毕，在室温下搅拌16h。减压浓缩，除去溶剂甲醇，所得剩余物中加入水(50mL)，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，舍弃乙酸乙酯相，剩余水相，减压浓缩，得到粗品1-(2-氟-3-硝基苯基)-N-甲基甲胺(3.0g,黄色油状物)。
MS(ESI+)m/z＝185.1[M+H]+.
第二步：(2-氟-3-硝基苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯
室温下，往干燥的500mL圆底烧瓶中依次加入1-(2-氟-3-硝基苯基)-N-甲基甲胺(3.0g,16.3mmol)，二氯甲烷(100mL)，DIPEA(4.2g,32.58mmol)和Boc2O(4.26g,16.55mmol)，室温下搅拌3-4h。反应完毕后，减压浓缩，剩余物中加入水(100mL)，用二氯甲烷萃取(100mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(100mL×1)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩所得粗品(2-氟-3-硝基苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁基酯(4g,黄色油状物)，产率：82.9％。
实施例26.(2-氟-3-硝基苯乙基)氨基甲酸叔丁基酯的合成
第一步：(Z)-2-氟-1-硝基-3-(2-硝基乙烯基)苯
将2-氟-3-硝基苯甲醛(3.0g,17.7mmol)加入乙酸(20mL)中，然后依次加入硝基甲烷(1.3g,21.3mmol)和乙酸铵(0.82g,10.6mmol)，升温至120℃搅拌4-5h，反应完毕后，减压浓缩，向剩余物中加入水(50mL)，用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(100mL×1)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系乙酸乙酯/石油醚＝1/5纯化得到(Z)-2-氟-1-硝基-3-(2-硝基乙烯基)苯(1.8g,黄色固体)，产率：43.1％。
第二步：2-(2-氟-3-硝基苯基)乙烷-1-胺
0℃下，将三氟化硼***(15mL)滴加到硼氢化钠(2.2g,57.7mmol)的干燥四氢呋喃(50mL)悬液中，室温下搅拌0.25h，然后缓慢滴加(Z)-2-氟-1-硝基-3-(2-硝基乙烯基)苯(1.8g,8.5mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液，回流下搅拌6.5h，冷却到室温，反应混合液缓慢加入冰水(30mL)，用二氯甲烷(20mL)萃取，舍弃有机相，水相用饱和碳酸氢钠溶液调节pH＝7～8，然后用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品2-(2-氟-3-硝基苯基)乙烷-1-胺(3.0g,黄色固体)。
MS(ESI+)m/z＝185.1[M+H]+.
第三步：(2-氟-3-硝基苯乙基)氨基甲酸叔丁基酯
室温下，在500mL圆底烧瓶中依次加入2-(2-氟-3-硝基苯基)乙烷-1-胺(3.0g,16.3mmol)，二氯甲烷(100mL)，Boc2O(4.3g,19.5mmol)和三乙胺(3.3g,32.6mmol)，室温下搅拌12h。反应完毕后，减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系乙酸乙酯/石油醚＝1/5纯化得到(2-氟-3-硝基苯乙基)氨基甲酸叔丁基酯(1.3g,黄色油状物)，收率：26.6％。
MS(ESI+)m/z＝307.1[M+Na]+.
实施例27.(3-(2-氟-3-硝基苯基)丙-2-炔-1-基)氨基甲酸叔丁酯的合成
氮气保护下，室温下，往250mL圆底烧瓶中依次加入1-溴-2-氟-3-硝基苯(5.0g,0.03mol)，1,4-二氧六环(50mL)，丙-2-炔-1-基氨基甲酸叔丁酯(4.23g,0.03mol)，N,N-二异丙基乙胺(3.4g,0.03mol)，碘化亚铜(0.04g,0.2mmol)，双三苯基磷二氯化钯(0.64g,0.9mol)和三叔丁基膦(0.15g,1.3mol)，升温至45℃并搅拌15h。反应完毕后，使用硅藻土过滤，滤液加入乙酸乙酯(60mL)，用水(20mL×3)和饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝10/1纯化得到(3-(2-氟-3-硝基苯基)丙-2-炔-1-基)氨基甲酸叔丁酯(3.4g,黄色油状物)，产率：45.4％。
实施例28. 2-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(2-羟基苯基)异烟酸甲酯的合成
第一步：2-氯-6-(2-羟基苯基)异烟酸甲酯
氮气保护下，室温往250mL圆底烧瓶中依次加入2,6-二氯异烟酸甲酯(14.0g,0.068mol)，乙二醇二甲醚(140mL)，水(30mL)，2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二杂氧戊硼烷-2-基)苯酚(16.5g,0.0748mol)，碳酸铯(33.2g,0.102mol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(1.5g,0.002mmol)，升温至90℃并搅拌16h。减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝20/1纯化得到2-氯-6-(2-羟基苯基)异烟酸甲酯(10.0g,黄色固体)，产率：50.2％。
MS(ESI+)m/z＝263.7[M+H]+.
第二步：2-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(2-羟基苯基)异烟酸甲酯
氮气保护下，室温往250mL圆底烧瓶中依次加入2-氯-6-(2-羟基苯基)异烟酸甲酯(10g,0.03mol)，二氧六环(100mL)，BocNH2(5.32g,0.04mol)，碳酸铯(24.0g,0.07mmol)，Xphos(3.6g,0.0075mol)和双(二亚芐基丙酮)钯(13.3mg,0.02mmol)，升温至85℃搅拌16h。反应完毕后，减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝20/1纯化得到2-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(2-羟基苯基)异烟酸甲酯(5.6g,黄色固体)，产率：42.8％。
MS(ESI+)m/z＝344.7[M+H]+.
实施例29. 2-(5-羟基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯的合成
氮气保护下，室温将2-氯-6-甲基异烟酸甲酯(20.0g,0.11mol)加入苯甲醚(200mL)，然后加入1-甲基-5-羟基吡唑(21.2g,0.2156mol)，碳酸钠(29.4g,0.237mol)和PdCl2(dppf)(2.36g,0.003mol)。升温至130℃并搅拌16h，减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝50/1～30/1纯化得到2-(5-羟基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(16.5g,***固体)，产率：55.7％。
MS(ESI+)m/z＝248.2[M+H]+.
实施例30. 2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸的合成
第一步：2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸甲酯
室温下，在50mL圆底烧瓶中将2-(5-羟基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(2.7g,10.9mmol)溶于乙腈(30mL)，依次加入K2CO3(2.41g，17.44mmol)和SEMCl(2.91g,17.44mmol)，室温搅拌5h。反应完毕后，将反应混合液倒入水中(20mL)，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有机相，用食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系乙酸乙酯/石油醚＝1/10～1/5纯化得到2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸甲酯(2.4g,黄色油状物)，产率：55.1％。
MS(ESI+)m/z＝377.9[M+H]+.
第二步：2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸
室温下，在干燥的100mL圆底烧瓶中依次加入2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸甲酯(2.4g,6.4mmol)，THF(10mL)和1M LiOH水溶液(20mL)，室温下搅拌5h。反应完毕后，减压除掉有机相，剩余物用0.5M稀盐酸调节pH＝3-4，抽滤，滤饼干燥得到2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸(1.79g,淡黄色固体)，产率：73.4％。
MS(ESI+)m/z＝363.9[M+H]+.
实施例31. 11,26-二甲基-3-氧代-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷基-8-甲酸叔丁酯的合成(中间体A1)
第一步：(2-羟乙基)(2-((2-硝基苯基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
室温下，往250mL圆底烧瓶中依次加入(2-氨基乙基)(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯(5.79g,0.028mol)，DMF(50mL)，2-氟硝基苯(4.0g,0.028mol)和DIPEA(7.3g,0.056mol)，室温下搅拌16h。反应完毕后，加入水(150mL)，用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(50mL×1)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系乙酸乙酯/石油醚＝1/5纯化得到(2-羟乙基)(2-((2-硝基苯基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(8.0g,黄色油状物)，产率：99.0％。
MS(ESI+)m/z＝348.2[M+Na]+.
第二步：2-(5-(2-((叔丁氧羰基)(2-((2-硝基苯基)氨基)乙基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯
冰水浴下，往250mL圆底烧瓶中依次加入(2-羟乙基)(2-((2-硝基苯基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.25g,0.01mol)，无水四氢呋喃(150mL)，2-(5-羟基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(2.47g,0.01mol)，三苯基膦(3.14g,0.012mol)和偶氮二甲酸二异丙酯(2.4g,0.012mol)，升温至室温搅拌4h。反应完毕后，减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝20/1纯化得到2-(5-(2-((叔丁氧羰基)(2-((2-硝基苯基)氨基)乙基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(6.5g,黄色油状物)，产率：70.0％。
MS(ESI+)m/z＝555.1[M+H]+.
第三步：2-(5-(2-((2-氨基苯基)氨基)乙基)(叔丁氧羰基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯
室温下，往250mL圆底烧瓶中依次加入2-(5-(2-((叔丁氧羰基)(2-((2-硝基苯基)氨基)乙基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(4.0g,7.2mmol)，甲醇(100mL)和钯碳(0.4g,10％)，用氢气置换气体3次，室温下搅拌12h。反应完毕后，使用硅藻土过滤，滤液减压浓缩，得到2-(5-(2-((2-氨基苯基)氨基)乙基)(叔丁氧羰基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(5.0g,红色油状物)，产率：88.3％。
MS(ESI+)m/z＝525.2[M+H]+.
第四步：2-(5-(2-((2-(2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基)(叔丁氧羰基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯
室温下，往250mL圆底烧瓶中依次加入2-(5-(2-((2-氨基苯基)氨基)乙基)(叔丁氧羰基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(5.0g,9.5mmol)，甲醇(50mL)，水(50mL)和溴化氰(1.5g,14.0mmol)，升温至70℃搅拌4-5h。反应完毕后，减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝15/1纯化得到2-(5-(2-((2-(2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基)(叔丁氧羰基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(2.7g,棕色固体)，产率：51.5％。
MS(ESI+)m/z＝549.9[M+H]+.
第五步：2-(5-(2-((2-(2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基)(叔丁氧羰基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸
室温下，往250mL圆底烧瓶中依次加入2-(5-(2-((2-(2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基)(叔丁氧羰基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(1.7g,0.0031mol)，四氢呋喃(50mL)，水(20mL)和氢氧化锂一水合物(0.25g,0.006mol)。室温搅拌4-5h。反应完毕后，减压除去四氢呋喃，所得剩余物加入水(10mL)，并使用1M的盐酸调节pH＝6-7，用乙酸乙酯萃取(50mL×5)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(50mL×1)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品2-(5-(2-((2-(2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基)(叔丁氧羰基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸(1.0g,棕色固体)，产率：54.4％。
MS(ESI+)m/z＝535.9[M+H]+.
第六步：11,26-二甲基-3-氧代-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷基-8-羧酸叔丁酯
室温下，往100mL圆底烧瓶中依次加入2-(5-(2-((2-(2-氨基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基)(叔丁氧羰基)氨基)乙氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸(500mg,0.93mmol)，二氯甲烷(15mL)，DIPEA(240mg,1.86mmol)和苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(388mg,1.02mmol)，混合液室温搅拌1-2h。反应完毕后，减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝15/1纯化得到11,26-二甲基-3-氧代-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷基-8-羧酸叔丁酯(370mg,淡黄色油状物)，产率：76.3％。
MS(ESI+)m/z＝517.9[M+H]+.
实施例32-41.中间体A2-A4和中间体B1-B7的合成
以市售或合成的取代的2-氟-1-硝基苯和羟基氨为原料，运用合成中间体A1(实施例31)的方法制备中间体A2-A4和B1-B7。
表2中间体A2-A4和中间体B1-B7
/>
实施例42.(E)-56-(羟甲基)-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮的合成(中间体B8)
第一、第二和第三步：2-氨基-1-(5-羟基戊基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
以3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯和5-氨基戊醇为原料，按照合成中间体A1(实施例31)第一、第三和第四步的方法制备2-氨基-1-(5-羟基戊基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯。
MS(ESI+)m/z＝278.1[M+H]+.
第四步：1-(5-羟基戊基)-2-(2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酰胺)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入2-氨基-1-(5-羟基戊基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(0.65g,1.8mmol)，DMF(20mL)，2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸(0.5g,1.8mmol)，HATU(1.03g,2.7mmol)和DIPEA(0.7g,5.4mmol)，室温下搅拌3h。反应完毕后，向反应液中加入水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(50mL×5)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(50mL×3)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法分离纯化得到1-(5-羟基戊基)-2-(2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酰胺)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(500mg,浅黄色油状物)，产率：38.9％。
MS(ESI+)m/z＝623.0[M+H]+.
第五步：2-(2-(5-羟基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酰胺)-1-(5-羟基戊基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯
冰水浴下，将1-(5-羟基戊基)-2-(2-甲基-6-(1-甲基-5-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酰胺)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(500mg,0.803mmol)溶于4M氯化氢的二氧六环溶液(15mL)，室温搅拌1h。减压浓缩，所得剩余物加水(10mL)，用饱和碳酸氢钠水溶液调节pH＝6-7，减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系甲醇/二氯甲烷＝1/6纯化得到2-(2-(5-羟基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酰胺)-1-(5-羟基戊基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(300mg,紫色固体)，产率：67.5％。
MS(ESI+)m/z＝493.0[M+H]+.
第六步：(E)-11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷基-56-羧酸甲酯
室温下，将2-(2-(5-羟基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酰胺)-1-(5-羟基戊基)-1H-苯并[d]咪唑-6-羧酸甲酯(300mg,0.609mmol)溶于THF(15mL)，然后加入DIAD(184mg,0.914mmol)和PPh3(239.64mg,0.914mmol)，室温搅拌3h。反应完全后，减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系甲醇/二氯甲烷＝1/100～1/20纯化得到(E)-11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑十一烷基-56-羧酸甲酯(210mg,淡黄色油状物)，产率：69.0％.
MS(ESI+)m/z＝474.8[M+H]+.
第七步：(E)-56-(羟甲基)-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮
冰水浴下，将(E)-11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷基-56-羧酸甲酯(84mg,0.177mmol)溶于THF(3mL)，分批加入LiAlH4(26.7mg,0.708mmol)，搅拌1h。反应完全后，向反应液中滴加水(2mL)，抽滤，滤液减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系甲醇/二氯甲烷＝1/100～1/20纯化得到(E)-56-(羟甲基)-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(58mg,白色固体)，产率：66.1％。
MS(ESI+)m/z＝447.0[M+H]+.
实施例43.11,26-二甲基-56-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-氧代-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷基-8-羧酸叔丁酯的合成(中间体A5)
室温下，在100mL圆底烧瓶中将中间体B1(200mg,0.37mmol)溶于二氯甲烷(20mL)，然后加入1-甲基哌嗪(40mg,0.4mmol)和醋酸(110mg,1.83mmol)，室温下搅拌1h，缓慢加入三乙酰氧基硼氢化钠(300mg,1.46mmol)，在室温下搅拌4-5h。反应完毕后，反应液直接减压浓缩，所得剩余物使用薄层层析法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝15/1分离纯化得到11,26-二甲基-56-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-氧代-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷基-8-羧酸叔丁酯(110mg,黄色固体)，产率：38.13％。
MS(ESI+)m/z＝630.8[M+H]+.
实施例44-49.中间体A6-A11的合成
以中间体B和氮杂环化合物为原料，运用合成中间体A5(实施例43)的方法制备中间体A6-A11。
表3中间体A6-A11
/>
实施例50.(E)-(2-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成(中间体A12)
第一步：(E)-57-((3,4-二甲氧基苄基)氨基)-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮
氮气保护下，室温下在100mL圆底烧瓶中依次加入中间体B3(15.0g,0.03mol)，1,4-二氧六环(100mL)，(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(7.5g,0.045mol)，Pd2(bda)3(2.75g,0.003mol)，BINAP(3.73g,0.006mol)和叔丁醇钠(5.77g,0.06mol)，100℃搅拌过夜。反应完毕后，降至室温，过滤，滤液加水(100mL)稀释，乙酸乙酯萃取(100mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物使用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝20/1纯化得到(E)-57-((3,4-二甲氧基苄基)氨基)-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(11.4g,黄色固体)，产率：69.0％。
第二步：(E)-57-氨基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入(E)-57-((3,4-二甲氧基苄基)氨基)-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(4.0g,7.27mmol)和TFA(20mL)，室温下搅拌3h。反应完毕后，减压浓缩得到(E)-57-氨基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(2.8g,黄色固体)，产率：89.2％。
第三步：(E)-(2-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
氮气保护下，室温下在100mL单口圆底烧瓶中加入(E)-57-氨基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(200mg,0.46mmol)，(2-氧乙基)氨基甲酸叔丁酯(73.78mg,0.46mmol)，4-A分子筛(200mg)和甲醇/醋酸混合液(10/1,5.5mL)，室温搅拌1h。然后加入氰基硼氢化钠(58.25mg,0.93mmol)，室温搅拌过夜。反应完毕后，加入水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，经过薄层层析法以洗脱体系二氯甲烷/甲醇＝20/1纯化得到(E)-(2-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(90mg,黄色液体)，产率：15.2％。
MS(ESI+)m/z＝575.3[M+H]+.
实施例51.(E)-(2-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成(中间体A13)
氮气保护下，室温下在50mL单口圆底烧瓶中加入(E)-(2-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(330mg,0.58mmol)，甲醛(78.23mg,2.61mmol)，4A分子筛(300mg)和甲醇/醋酸(10/1,5mL)混合液，室温搅拌1h。向反应液中加入氰基硼氢化钠(72.82mg,1.16mmol)，继续搅拌3h。反应完毕后，加入水(20mL)，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，粗品使用硅胶柱层析色谱法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝10/1纯化得到(E)-(2-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)(甲基)氨基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,黄色固体)，产率：44.0％.
MS(ESI+)m/z＝589.7[M+H]+.
实施例52-55.中间体A14-A17的合成
以中间体(E)-57-氨基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮和烷基醛或酮为原料，运用合成中间体A12(实施例50)第三步的方法制备中间体A14-A17。
表4中间体A14-A17
实施例56.(S,E)-(1-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成(中间体A18)
氮气保护下，将N-BOC-L-丙氨酸(877mg,4.64mmol)溶于THF(30mL)，加入NMM(375mg,3.7mmol)，降温至-20℃，滴加氯甲酸异丁酯(876.6mg,4.64mmol)，-20℃搅拌1h，然后滴加(E)-57-氨基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(200mg,0.46mmol)的THF(15mL)溶液及NMM(234mg,2.32mmol)，室温搅拌过夜。反应完毕后加水(30mL)，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品(S,E)-(1-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(70mg,黄色固体)，产率：25.1％。
MS(ESI+)m/z＝603.1[M+H]+.
实施例57-61.中间体A19-A23的合成
以中间体(E)-57-氨基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮和氨基酸为原料，运用合成中间体A18(实施例56)的方法制备中间体A19-A23。
表5中间体A19-A23
实施例62.(E)-(1-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)-6-(二甲氨基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯的合成(中间体A24)
第一步：(E)-(6-氨基-1-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在氢化瓶中依次加入中间体A23(450mg,0.57mmol)，甲醇(10mL)和钯碳(100mg)，通入氢气，40℃搅拌4h。过滤，滤液减压浓缩得到粗品(E)-(6-氨基-1-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(240mg,黄色油状)，产率：64.3％。
MS(ESI+)m/z＝660.2[M+H]+.
第二步：(E)-(1-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)-6-(二甲氨基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
室温下，在50mL圆底烧瓶中将(E)-(6-氨基-1-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(240mg,0.36mmol)溶于甲醇(10mL)，加入醋酸(0.2mL)，降温至0℃分批加入氰基硼氢化钠(46mg,0.73mmol)，室温搅拌1h。降温至0℃滴加甲醛(137mg,1.82mmol)，室温搅拌4h。反应完毕后，加入氯化铵淬灭反应，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物用薄层层析法以洗脱体系二氯甲烷/甲醇＝10/1纯化得到(E)-(1-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)氨基)-6-(二甲氨基)-1-氧代己烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg,黄色固体)，产率：32％。
MS(ESI+)m/z＝689.3[M+H]+.
实施例63.(E)-(1-(11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯的合成(中间体A25)
氮气保护下，室温下在100mL圆底烧瓶中依次加入中间体B3(200mg,0.4mmol)，1,4-二氧六环(10mL)，吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(112.78mg,0.6mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(36.97mg,0.04mmol)，1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(50.27mg,0.08mmol)和叔丁醇钠(77.59g,0.81mmol)，100℃搅拌过夜。反应完毕后，降至室温，过滤，滤液加水(10mL)稀释，乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物经过薄层层析法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝20/1纯化得到(E)-(1-(11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,黄色油状物)，产率：12.4％。
MS(ESI+)m/z＝601.4[M+H]+.
实施例64.(E)-(2-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-56-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的合成(中间体A26)
第一步：(E)-56-羟基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮
室温下，将中间体B4(200mg,0.38mmol)溶于MeOH/EtOAc(10mL,1/1)，然后加入钯碳(10％,30mg)，氢气置换气体三次，室温搅拌16h。抽滤，滤液减压浓缩得到粗品(E)-56-羟基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(150mg,棕黄色油状物)，产率：72.5％。所得粗品未经纯化直接用于下一步反应。
MS(ESI+)m/z＝433.1[M+H]+.
第二步：(E)-(2-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-56-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
室温下，将(E)-56-羟基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(25mg,0.058mmol)溶于DMF(2mL)，然后加入碳酸钾(24mg,0.173mmol)和N-Boc-溴乙胺(39mg,0.174mmol)，升温至70℃搅拌2h。反应完毕后，加入水(10mL)，用乙酸乙酯萃取(10mL×5)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(15mL×3)，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品(E)-(2-((11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-56-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(31mg,棕黄色油状物)。所得粗品未经纯化直接用于下一步反应。
MS(ESI+)m/z＝576.1[M+H]+.
实施例65-83.中间体A27-A45的合成
以中间体B和烷基溴代物或合成的对甲苯磺酰基化合物为原料，运用合成中间体A26(实施例64)的方法制备中间体A27-A45。
表6中间体A27-A45
/>
/>
/>
实施例84.(S,E)-(11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑并唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-9-基)氨基甲酸叔丁酯的合成(中间体A46)
第一步：(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-((2-硝基苯基)氨基)戊酸
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入(S)-5-氨基-2-((叔丁氧羰基)氨基)戊酸(1.0g,4.3mmol)，乙腈(20mL)，碳酸钾(770mg,5.59mmol)和2-氟硝基苯(730mg,5.2mmol)，升温至70℃搅拌16h。将反应液降温至室温，抽滤，滤液减压浓缩得到粗品(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-((2-硝基苯基)氨基)戊酸(1.53g,红色油状物)。所得粗品未经纯化直接用于下一步反应。
MS(ESI+)m/z＝375.8[M+Na]+.
第二步：(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-((2-硝基苯基)氨基)戊酸甲酯
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-((2-硝基苯基)氨基)戊酸(3.0g,8.5mmol)，甲醇(50mL)和TMSCH2N2(2.91g,25.5mmol)，室温搅拌16h，减压浓缩，所得剩余物使用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝0～1/1纯化得到(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-((2-硝基苯基)氨基)戊酸甲酯(1.9g,黄色油状物)，产率：57.7％。
MS(ESI+)m/z＝390.0[M+Na]+.
第三步：(S)-(1-羟基-5-((2-硝基苯基)氨基)戊烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
室温下，在100mL圆底烧瓶中将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-((2-硝基苯基)氨基)戊酸甲酯(1.0g,2.7mmol)溶于无水四氢呋喃(20mL)，降温至0℃，缓慢滴加硼氢化锂(356mg,16.2mmol)的无水四氢呋喃混合液(20mL)。滴加完毕后，升温至室温，搅拌12h，将反应液倒入水(20mL)中，混合液减压浓缩，所得剩余物使用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系乙酸乙酯/石油醚＝0～1/1纯化得到(S)-(1-羟基-5-((2-硝基苯基)氨基)戊烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(810mg,红色油状物)，产率：87％。
MS(ESI+)m/z＝362.0[M+Na]+.
第四、第五、第六、第七和第八步：(S,E)-(11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-9-基)氨基甲酸叔丁酯
以(S)-(1-羟基-5-((2-硝基苯基)氨基)戊烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯为原料，按照合成中间体A1(实施例31)第二、第三、第四、第五和第六步的方法制备中间体A46。
实施例85.(R,E)-(11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-9-基)氨基甲酸叔丁酯的合成(中间体A47)
以(R)-5-氨基-2-((叔丁氧羰基)氨基)戊酸和2-氟硝基苯为原料，按照合成中间体A46(实施例84)的方法制备中间体A47。
实施例86.(E)-(3-氧代-52,53-二氢-51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(1,2)-苯并环十一烷-26-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体A48)
第一步：2-(2-(5-溴戊基)氧基)苯基)-6-(叔丁氧羰基)氨基)异烟酸甲酯
/>
室温下，在250mL圆底烧瓶中依次加入2-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(2-羟基苯基)异烟酸甲酯(5.6g,0.016mol)，乙腈(50mL)，碳酸钾(2.70g,0.019mol)和1,5-二溴戊烷(4.12g,0.018mol)，升温至85℃搅拌16h。反应完毕后，混合液减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝10/1纯化得到2-(2-(5-溴戊基)氧基)苯基)-6-(叔丁氧羰基)氨基)异烟酸甲酯(1.5g,黄色油状物)，产率18.8％。
MS(ESI+)m/z＝492.8[M+H]+.
第二步：2-(2-((5-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)戊基)氧基)苯基)-6-((叔丁氧羰基)氨基)异烟酸甲酯
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入1H-苯并[d]咪唑-2-胺(0.58g,4.3mol)，乙腈(15mL)，碳酸钾(2.9g,3.9mol)和2-(2-(5-溴戊基)氧基)苯基)-6-(叔丁氧羰基)氨基)异烟酸甲酯(1.5g,3.6mmol)，加热回流搅拌24h。反应完毕后，混合液减压浓缩，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝10/1纯化得到2-(2-((5-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)戊基)氧基)苯基)-6-((叔丁氧羰基)氨基)异烟酸甲酯(498mg,黄色固体)，产率：27.8％。
MS(ESI+)m/z＝545.9[M+H]+.
第三步：2-(2-((5-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)戊基)氧基)苯基)-6-((叔丁氧羰基)氨基)异烟酸
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入2-(2-((5-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)戊基)氧基)苯基)-6-((叔丁氧羰基)氨基)异烟酸甲酯(498mg,1.07mmol)，四氢呋喃和水混合液(6mL,5/1)，氢氧化锂一水合物(449mg,10.7mmol)，室温搅拌3h。反应完毕后，减压除去四氢呋喃，所得残余物加入水(10mL)，并使用1M的盐酸调Ph＝6-7，用乙酸乙酯萃取(20mL)，有机相减压浓缩得到粗品2-(2-((5-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)戊基)氧基)苯基)-6-((叔丁氧羰基)氨基)异烟酸(0.695mg,黄色油状物)，产率：31.5％。
MS(ESI+)m/z＝531.8[M+H]+.
第三步：(E)-(3-氧代-52,53-二氢-51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(1,2)-苯并环十一烷-26-基)氨基甲酸叔丁酯
/>
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入2-(2-((5-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)戊基)氧基)苯基)-6-((叔丁氧羰基)氨基)异烟酸(190mg,0.35mmol)，二氯甲烷(3mL)，三乙胺(72.2mg,0.71mmol)和2-(1H-苯并三偶氮L-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(137.7mg,0.42mmol)，室温搅拌0.5h。反应完毕后，加入二氯甲烷(20mL)稀释，用饱和食盐水(10mL×3)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系石油醚/乙酸乙酯＝10/1纯化得到(E)-(3-氧代-52,53-二氢-51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(1,2)-苯并环十一烷-26-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,黄色固体)，产率：65.4％。
MS(ESI+)m/z＝513.9[M+H]+.
实施例87.(E)-8-丙烯酰-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷-3-酮的合成(终产物1)
第一步：(E)-11,26-二甲基-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷基-3-酮
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入中间体A1(370mg,0.71mmol)和盐酸二氧六环溶液(5mL,4mol/L)，混合液室温搅拌2-3h。反应完毕后，滤液减压浓缩得到粗品11,26-二甲基-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷基-3-酮(160mg,黄色固体)，产率：53.4％。
MS(ESI+)m/z＝418.1[M+H]+.
第二步：(E)-8-丙烯酰-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷-3-酮(终产物1)
室温下，往100mL圆底烧瓶中依次加入11,26-二甲基-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷基-3-酮(83mg,0.2mmol)，二氯甲烷(5mL)和DIPEA(51.6mg,2.0mmol)，降温至0℃，缓慢加入丙烯酰氯(18mg,0.2mmol)，加入完毕，0℃下搅拌30min。反应完毕后，减压浓缩所得剩余物使用薄层层析法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝15/1分离纯化得到产物(E)-8-丙烯酰-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷-3-酮(37mg,白色固体)，产率：38.9％。
MS(ESI+)m/z＝472.1[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.81(s,1H),8.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.93-7.92(m,1H),7.71-7.45(m,3H),7.29-7.28(m,2H),7.01-7.00(m,1H),6.35-6.22(m,1H),5.82(t,J＝8.0Hz,1H),4.52-4.30(m,4H),4.22-3.91(m,4H),3.79(d,J＝23.1Hz,3H),2.57(s,3H).
实施例88-134.终产物4-8、49、50、55、58、60、62、67-69、73、74、76-78、80-83、102、109、114、115、118-122、124-126、131-133、135、137-141、147、152、154的合成
以中间体A为原料，按照合成终产物1(实施例87)的方法制备终产物4-8、49、50、55、58、60、62、67-69、73、74、76-78、80-83、102、109、114、115、118-122、124-126、131-133、135、137-141、147、152、154。
表7终产物4-8、49、50、55、58、60、62、67-69、73、74、76-78、80-83、102、109、114、115、118-122、124-126、131-133、135、137-141、147、152、154
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
实施例135.(E)-8-(-4-(二甲氨基)丁-2-烯酰基)-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H，51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷-3-酮的合成(终产物10)
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入(E)-4-(二甲氨基)丁-2-烯酸盐酸(34mg,0.26mmol)，二氯甲烷(5mL)，N,N-二异丙基乙胺(62mg,0.48mmol)，苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(97mg,0.26mmol)和(E)-11,26-二甲基-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷基-3-酮(100mg,0.24mmol)，室温搅拌1-2h。反应完毕后，减压浓缩，所得剩余物用制备液相色谱法[色谱柱：Gemini-C18150x 21.2mm，5um；流动相：ACN/H2O(0.1％TFA)，梯度：10-40％]纯化得到产物8-(-4-(二甲氨基)丁-2-烯酰基)-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H，51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷-3-酮(10.9mg,黄色固体)。
MS(ESI+)m/z＝528.9[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.83(s,1H)8.34(d,J＝11.4Hz,1H),8.15(s,1H),7.88(s,1H),7.64-7.43(m,3H),7.30-7.27(m,2H),6.77-6.72(m,2H),4.48-4.29(m,4H),4.11-4.08(m,2H),4.02-3.89(m,1H),3.79(d,J＝24.6Hz,3H),3.20-3.07(m,3H),2.55(d,J＝11.3Hz,3H),2.23(s,6H).
实施例136-138.终产物52、92、93的合成
以中间体A水解得到的胺与市售酸为原料，按照合成终产物10(实施例135)的方法制备终产物。
表8终产物52、92、93
/>
实施例139.(E)-3-(11,26-二甲基-52,53-二氢-11H，51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷-8-基)-3-氧代丙腈的合成(终产物17)
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入2-氰基乙酸(33mg,0.4mmol)，四氢呋喃(5mL)，二环己基碳二亚胺(30mg,0.23mmol)，4-二甲氨基吡啶(2mg,0.02mmol)和11,26-二甲基-11H,51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷基-3-酮(80mg,0.2mmol)，升温至70℃搅拌12h。反应完毕后，减压除去溶剂，所得剩余物用制备液相色谱法[色谱柱：Gemini-C18 150x 21.2mm，5um；流动相：ACN/H2O(0.1％TFA)，梯度：10-40％]纯化得到产物(E)-3-(11,26-二甲基-52,53-二氢-11H，51H-11-氧杂-4,8-二氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑基环十一烷-8-基)-3-氧代丙腈(1.5mg,黄色固体)。
MS(ESI+)m/z＝485.0[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.79(s,1H),8.32-8.29(m,1H),7.88(s,1H),7.78(d,J＝7.9Hz,1H),7.64-7.40(m,2H),7.38-7.18(m,2H),4.45-4.34(m,6H),4.03-3.97(m,4H),3.76-3.73(m,3H),2.55(s,3H).
实施例140.(E)-N-(11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-7-基)丙烯酰胺的合成(终产物18)
第一步：2-甲基-6-(1-甲基-5-(3-(环氧丙烷-2-基)丙氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸甲酯
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入2-(5-羟基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸甲酯(2.5g,10.1mmol)，乙腈(50mL)，碳酸钾(2.09,15.1mmol)和2-(3-溴丙基)环氧乙烷(2.67g,16.1mmol)，加热至70℃搅拌16h。反应完毕后，混合液减压浓缩，所得剩余物使用硅胶柱色谱法以洗脱体系石油醚/乙酸乙酯＝1/1纯化得到2-甲基-6-(1-甲基-5-(3-(环氧丙烷-2-基)丙氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸甲酯(1.7g,淡黄色油状物)，产率：50.8％。
MS(ESI+)m/z＝331.9[M+H]+.
第二步：2-(5-((5-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-4-羟基戊基)氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸酸
室温下，封管中加入2-甲基-6-(1-甲基-5-(3-(环氧丙烷-2-基)丙氧基)-1H-吡唑-4-基)异烟酸甲酯(700mg,2.1mmol)，2-氨基苯并咪唑(282mg,2.1mmol)，MeOH/H2O混合液(20mL,2.5/1)和KOH(237mg,4.22mmol)，于100℃微波下搅拌1h。反应完毕后，减压浓缩得到粗品2-(5-((5-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-4-羟基戊基)氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸酸(970mg,浅黄色油状物)，所得粗品未经纯化直接用于下一步反应。
MS(ESI+)m/z＝451.1[M+H]+.
第三步：(E)-7-羟基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮
室温下，于100mL茄形瓶中依次加入2-(5-((5-(2-氨基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-4-羟基戊基)氧基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-甲基异烟酸酸(600mg,1.33mmol)，DMF(20mL)，HATU(1.52g,4mmol)，HOAT(544mg,4mmol)，DMAP(163mg,1.33mmol)和DIPEA(1.37g,10.7mmol)，室温下搅拌16h。反应完全后向混合液中加入水(15mL)，用乙酸乙酯萃取(10mL×5)，合并有机相，用饱和食盐水洗涤(15mL×3)，有机相减压浓缩，所得剩余物使用制备液相色谱[色谱柱：Gemini-C18 150x 21.2mm，5um；流动相：ACN/H2O(0.1％FA)，梯度：10-40％]纯化得到(E)-7-羟基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(0.2g,淡黄色固体)，产率：32.1％。
MS(ESI+)m/z＝433.1[M+H]+.
第四步：(E)-11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-7-基甲磺酸酯
冰水浴下，在50mL圆底烧瓶中将(E)-7-羟基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(70mg,0.162mmol)溶于二氯甲烷(15mL)，然后加入三乙胺(49.1mg,0.49mmol)和甲基磺酰氯(37.1mg,0.32mmol)，在该温度下搅拌1h。反应完毕后，减压浓缩，所得剩余物用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝30/1纯化得到(E)-11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-7-基甲磺酸酯(67mg,黄色油状物)，产率：56.8％。
MS(ESI+)m/z＝510.7[M+H]+.
第五步：(E)-7-叠氮-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮
/>
氮气保护下，室温下，在干燥的100mL圆底烧瓶中依次加入(E)-11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-7-基甲磺酸酯(110mg,21.5mmol)，DMF(10mL)和叠氮化钠(16.8mg,25.84mmol)，加热至100℃搅拌16h。反应完毕后，向反应体系中加入水(50mL)，抽滤，收集滤饼并干燥得到(E)-7-叠氮-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(57mg,淡黄色固体)，产率：48.6％。
MS(ESI+)m/z＝458.1[M+H]+.
第六步：(E)-7-氨基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入(E)-7-叠氮-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(72mg,0.157mmol)，甲醇(10mL)和钯碳(10％,20mg)，氢气置换气体三次，室温下搅拌5h。反应完毕后，过滤，滤液减压浓缩，所得剩余物经薄层层析法以洗脱剂体系二氯甲烷/甲醇＝20/1纯化得到(E)-7-氨基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(35mg,浅黄色油状物)，产率：41.2％。
MS(ESI+)m/z＝431.8[M+H]+.
第七步：(E)-N-(11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-7-基)丙烯酰胺
冰水浴下，将(E)-7-氨基-11,26-二甲基-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-3-酮(35mg,0.081mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三乙胺(16.4mg,0.16mmol)，然后再加入丙烯酰氯(9.53mg,0.11mmol)与二氯甲烷(4mL)的混合物，加毕，继续搅拌1h。减压浓缩，所得剩余物经制备液相色谱法纯化[色谱柱：Gemini-C18 150x 21.2mm，5um；流动相：ACN/H2O(0.1％FA)，梯度：10-40％]得到(E)-N-(11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-7-基)丙烯酰胺(6mg,黄色固体)。
MS(ESI+)m/z＝485.8[M+H]+.1H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.79(s,1H),8.30(s,1H),8.08(s,1H),7.89(s,1H),7.66-7.37(m,4H),6.10-5.90(m,2H),5.62-5.55(m,1H),4.14-4.10(m,1H),3.98(s,3H),2.82(s,3H),2.71-2.46(m,4H),2.10-1.98(m,2H),1.55-1.45(m,2H).
实施例141.(E)-2-(2-氯-2-氟乙酰胺)-N-(1-((11,26-二甲基-3氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)丙酰胺的合成(终产物136)
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入(E)-2-氨基-N-(11,26-二甲基-3-氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)丙酰胺(40mg,0.08mmol)，二氯甲烷(2mL)，2-氯-2-氟乙酸钠(12.84mg,0.1mmol)，1-丙基磷酸酐(75.98mg,0.12mmol)和N,N-二异丙基乙胺(20.58mg,0.16mmol)，室温下搅拌过夜。反应完毕后，加入二氯甲烷(10mL)，用水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，粗品用制备液相色谱法[色谱柱：symmetry 7um 19-150mm；流动相：ACN/H2O(0.1％TFA)，梯度：10-40％]纯化得到(E)-2-(2-氯-2-氟乙酰胺)-N-(1-((11,26-二甲基-3氧代-52,53-二氢-11H,51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶基-1(4,5)-吡唑环十一烷-57-基)丙酰胺(5.9mg,白色固体)。
MS(ESI+)m/z＝597.2[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.65(s,1H),8.15(s,1H),7.83(s,1H),7.50-7.48(m,1H),7.29-7.26(m,1H),7.10-7.08(m,1H),6.70-6.30(m,1H),4.60-4.80(m,1H),4.30-4.38(m,4H),3.81(s,3H),2.70(s,3H),2.10-2.13(m,4H),1.88-1.93(m,2H),1.62-1.68(m,3H).
实施例142.(E)-2-氯-2-氟-N-(3-氧代-52,53-二氢-51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(1,2)-苯并环十一烷-26-基)乙酰胺的合成(终产物153)
室温下，在100mL圆底烧瓶中依次加入(E)-26-氨基-52,53-二氢-51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(1,2)-苯并环十一烷-3-酮(30.0mg,0.073mmol)，DMF(5mL)，DIPEA(46.9mg,0.36mmol)，2-氯-2-氟乙酸(19.5mg,0.15mmol)，降温至0℃，缓慢加入T3P(91.9mg,0.29mmol)，HOBt(39.24mg,0.29mmol)，加入完毕，室温下搅拌16h。反应完毕后，所得粗品用高压制备液相色谱法[色谱柱：Gemini-C18 150x 21.2mm，5um；流动相：ACN/H2O(0.1％FA)，梯度：65-80％]纯化得到(E)-2-氯-2-氟-N-(3-氧代-52,53-二氢-51H-11-氧杂-4-氮杂-5(2,1)-苯并[d]咪唑-2(2,4)-吡啶-1(1,2)-苯并环十一烷-26-基)乙酰胺(3.3mg,黄色固体)。
MS(ESI+)m/z＝508.0[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.74(s,1H),11.26(s,1H),9.08(s,1H),8.49(s,1H),8.24(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.54-7.50(m,2H),7.42-7.37(m,1H),7.26-7.21(m,2H),7.15(d,J＝8.1Hz,1H),7.08-7.04(m,1H),6.93(d,J＝49.6Hz,1H),4.19(dd,J＝8.0,5.6Hz,2H),1.98-1.93(m,6H),1.59-1.41(m,2H).
实施例143.
一、体外酶学实验
采用HTRF KinEASE-TK试剂盒，通过检测EGFR蛋白激酶反应后ATP的剩余量来测定其活性。测试的发光信号强度与反应剩余ATP的量正相关，与化合物活性正相关，与激酶活性负相关。
1.实验设计
在所选激酶上测定化合物，并设定溶媒对照，共检测10个浓度，每个浓度2个复孔。
2.试剂和耗材
3.实验过程
3.1配置1x激酶缓冲液
酶缓冲液用5mM MgCl2；1mM DTT；1mM MnCl2水溶液稀释到5倍。
3.2化合物筛选
a)用Echo移液器将化合物转移到384孔板中。
b)盖上盖子，在1000g转数下离心1分钟。
c)用激酶缓冲液稀释EGFR L858R/T790M/C797S或EGFR Del19/T790M/C797S
一倍。
d)加5μl稀释的EGFR L858R/T790M/C797S或EGFR Del19/T790M/C797S到384孔板中。
e)在1000g转数下离心30秒，室温静置10min。
f)用激酶缓存液稀释TK-substrate-biotin和ATP的混合液一倍。
g)加入5μl TK-substrate-biotin和ATP混合液开始反应。
h)在1000g转数下离心30秒，盖上盖子，室温静置10min。
i)用HTRF稀释Sa-XL 665检测缓冲液4倍。
j)每孔中加入5μl Sa-XL 665和5μl TK-antibody-Cryptate。
e)在1000g转数下离心30秒，室温静置1h。
l)在Envision 2104多标记微孔板检测仪中读取615nm(Cryptate)和665nm(XL665)荧光信号。
4.IC50计算
使用GraphPad Prism 6.0软件分析数据，利用非线性S曲线回归来拟合数据得出剂量-效应曲线，并由此计算IC50值。
酶抑制百分率(％)＝100-(Signal化合物-Signal平均_PC)/(Signal平均_VC-Signal平均_PC)×100
5.实验结果
表9化合物对EGFR L858R/T790M/C797S和EGFR Del19/T790M/C797S酶抑制IC50(nM)
注：LR/TM/CS：L858R/T790M/C797S；EGFR Del/TM/CS：Del19/T790M/C797S；/：未测试
本发明化合物对EGFR L858R/T790M/C797S和EGFR Del19/T790M/C797S酶活性抑制IC50如表9所示。
从表9中可以看出，本发明化合物对EGFR L858R/T790M/C797S和EGFR Del19/T790M/C797S三突变酶具有较好抑制活性，IC50值在纳摩尔水平。
二、细胞增殖抑制实验
CellTiter-GloTM活细胞检测试剂盒采用萤光素酶作检测物，发光过程中萤光素酶需要ATP的参与。向细胞培养基中加入CellTiter-GloTM试剂，测量发光值，光信号和体系中ATP量成正比，而ATP又和活细胞数正相关。因此通过使用CellTiter-Glo试剂盒检测ATP含量，可以检测出细胞的增殖情况。
本实验采用celltiter-Glo(CTG)法测量前述制备的化合物在肿瘤细胞株NCI-H1975、Ba/F3(EGFR-L858R/C797S/T790M)、Ba/F3(EGFR-Del19/C797S/T790M)和A431中增殖抑制作用，并计算50％抑制浓度IC50。
1.实验设计
在所选细胞上测定化合物，并设定溶媒对照，共检测10个浓度，每个浓度2个复孔。
2.试剂和耗材
3.实验过程
3.1细胞培养和接种
a)收获处于对数生长期的细胞并采用血小板计数器进行细胞计数。用台盼蓝排斥法检测细胞活力，确保细胞活力在90％以上。
b)调整细胞浓度；分别添加30μL细胞悬液至384孔板中。
将384孔板中的细胞置于37℃、5％CO2、95％湿度条件下培养过夜。
3.2药物稀释和加药
a)配制10倍药物溶液，最高浓度为10mM，10个浓度，3倍稀释，在接种有细胞的384孔板中每孔加入10μL药物溶液，每个药物浓度设置2个复孔。Brigatinib、Osimertinib或BI4020做阳性对照药，DMSO为空白对照。
b)将已加药的384孔板中的细胞置于37℃、5％CO2、95％湿度条件下继续培养72小时，之后进行CTG分析。
3.3终点读板
a)融化CTG试剂并平衡细胞板至室温30分钟。
b)每孔加入等体积的CTG溶液。
c)在定轨摇床上振动5分钟使细胞裂解。
d)将细胞板放置于室温20分钟以稳定冷光信号。
e)读取冷光值。
4.数据处理
使用GraphPad Prism 5.0软件分析数据，利用非线性S曲线回归来拟合数据得出剂量-效应曲线，并由此计算IC50值。
细胞存活率(％)＝(Lum待测药-Lum培养液对照)/(Lum细胞对照-Lum培养液对照)×100％.
5.实验结果
表10化合物对各个细胞株抑制增殖活性IC50(nM)
/>
注：LR/TM/CS：L858R/T790M/C797S；EGFR Del/TM/CS：Del19/T790M/C797S；/：未测试
本发明化合物对NCI-H1975、Ba/F3(EGFR-L858R/C797S/T790M)、Ba/F3(EGFR-Del19/C797S/T790M)和A431细胞株抑制增殖活性IC50如表10所示。
从表10中可以看出，本发明化合物对NCI-H1975双突变细胞株、Ba/F3(EGFR-L858R/C797S/T790M)三突变细胞株和Ba/F3(EGFR-Del19/C797S/T790M)三突变细胞株具有较好增殖抑制活性，对EGFR野生型细胞株A431抑制作用较弱，表明本发明化合物具有较好的细胞抑制活性和选择性。

Claims (23)

1.一种式I所示的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体：
其中，在式I中，
环A为吡啶或嘧啶；
环B为苯环、吡唑、异噁唑、异噻唑、咪唑、噁唑、吡啶或哒嗪；其中环B可以任选地被一个或多个独立地选自以下取代基所取代：羟基乙基或羟基丙基；
环D为苯环；
R1、R2和R4其中1个为弹头基团；当R1为弹头基团时，选自：
R2为氢原子、卤素、甲基、乙基、三氟甲基、二甲氨基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基；R4为氢原子或甲基；
当R2为弹头基团时，选自：
R1为氢原子或甲基；R4为氢原子或甲基；
当R4为弹头基团时，选自：
R1为氢原子或甲基；R2为氢原子、卤素、甲基、乙基、三氟甲基、二甲氨基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基；
R5为氢或甲基；
R3为氢原子、卤素、甲基、乙基、三氟甲基、二甲氨基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基；
X为O或S；
Z为N或CR19；
R19为氢原子；
m和n独立地为1、2、3或4；
p为0、1、2或3。
2.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
当R1为弹头基团时，选自：
R2为氢原子、卤素、甲基、乙基、三氟甲基、二甲氨基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基；R4为氢原子或甲基。
3.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
当R1为弹头基团时，选自：
R2为氢原子、卤素、甲基、乙基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基；R4为氢原子或甲基。
4.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
当R1为弹头基团时，选自：
R2为氢原子、甲基、乙基、哌啶基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述哌啶基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：甲基、乙基；R4为氢原子或甲基。
5.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
当R2为弹头基团时，选自：
R1为氢原子或甲基；R4为氢原子或甲基。
6.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
当R2为弹头基团时，选自：
R1为氢原子或甲基；R4为氢原子或甲基。
7.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
当R2为弹头基团时，选自：
R1为氢原子或甲基；R4为氢原子或甲基。
8.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
当R4为弹头基团时，选自：
R1为氢原子或甲基；R2为氢原子、卤素、甲基、乙基、三氟甲基、二甲氨基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基。
9.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
当R4为弹头基团时，选自：
R1为氢原子或甲基；R2为氢原子、卤素、甲基、乙基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基。
10.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
当R4为弹头基团时，选自：
R1为氢原子或甲基；R2为氢原子、甲基、乙基、哌啶基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述哌啶基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：甲基、乙基。
11.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
R3为氢原子、卤素、甲基、乙基、二甲氨基甲基、N,N,N’-三甲基乙二氨基甲基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、4-(二甲氨基)哌啶-1-基甲基、4-(3-甲氧基吖啶-1-基)哌啶-1-基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、4-乙酰哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基。
12.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
R3为氢原子、卤素、甲基、乙基、吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述吡咯烷基甲基、吗啉代甲基、氮杂环丁烷基甲基、哌啶基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：卤素、甲基、乙基、异丙基、环丙基。
13.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
R3为氢原子、卤素、甲基、乙基、哌啶基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基，所述哌啶基甲基、哌嗪-1-基甲基、4-甲基哌嗪-1-基甲基、2-(二甲氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基甲基可以任选地被一个或多个独立地选自下组的取代基所取代：甲基、乙基。
14.根据权利要求1所述的大环化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体，其中，
环A为吡啶；
环B为苯环、吡唑。
15.选自下列的化合物：
/>
/>
/>
/>
/>
/>
/>
16.包含如权利要求1-15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体以及药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。
17.根据权利要求16所述的药物组合物，其中，所述药物组合物为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、栓剂、注射剂、溶液剂、混悬剂、膏剂、贴剂、滴剂。
18.根据权利要求1-15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、消旋体、互变异构体在制备抗肿瘤药物中的应用；
其中，所述肿瘤为携带EGFR基因突变的恶性肿瘤。
19.根据权利要求18所述的应用，其中，所述抗肿瘤药物应用于肺癌。
20.根据权利要求18或19所述的应用，其特征在于，所述EGFR基因突变选自：Del19EGFR基因突变、L858R EGFR基因突变、T790M EGFR基因突变和C797S EGFR基因突变中的一种或多种。
21.根据权利要求16或17所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用；
其中，所述肿瘤为携带EGFR基因突变的恶性肿瘤。
22.根据权利要求21所述的应用，其中，所述抗肿瘤药物应用于肺癌。
23.根据权利要求21或22所述的应用，其特征在于，所述EGFR基因突变选自：Del19EGFR基因突变、L858R EGFR基因突变、T790M EGFR基因突变和C797S EGFR基因突变中的一种或多种。
CN202111459591.5A 2020-12-03 2021-12-02 大环化合物及其制备方法和应用 Active CN114057771B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2020114105057 2020-12-03
CN202011410505 2020-12-03

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114057771A CN114057771A (zh) 2022-02-18
CN114057771B true CN114057771B (zh) 2023-10-03

Family

ID=80228607

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111459591.5A Active CN114057771B (zh) 2020-12-03 2021-12-02 大环化合物及其制备方法和应用

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN114057771B (zh)
WO (1) WO2022117051A1 (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022204544A1 (en) * 2021-03-26 2022-09-29 Theseus Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic egfr inhibitors for the treatment of cancer
CN115368378A (zh) * 2021-05-21 2022-11-22 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 取代的大环化合物及包含该化合物的组合物及其用途
TW202330550A (zh) * 2021-11-30 2023-08-01 大陸商正大天晴藥業集團股份有限公司 含有環烷基或鹵代烷基的化合物
CN117024443A (zh) * 2022-05-09 2023-11-10 元启(苏州)生物制药有限公司 Egfr抑制剂及其用途
WO2024017358A1 (zh) * 2022-07-21 2024-01-25 贝达药业股份有限公司 大环化合物及其药物组合物和应用
WO2024016986A1 (zh) * 2022-07-21 2024-01-25 贝达药业股份有限公司 大环化合物及其药物组合物和应用
WO2024046221A1 (en) * 2022-09-02 2024-03-07 Dizal (Jiangsu) Pharmaceutical Co., Ltd. Egfr inhibitors and uses thereof

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105008371A (zh) * 2013-02-07 2015-10-28 默克专利股份公司 大环哒嗪酮衍生物
CN106536506A (zh) * 2014-03-20 2017-03-22 卡佩拉医疗公司 苯并咪唑衍生物作为erbb酪氨酸激酶抑制剂用于治疗癌症
CN110291092A (zh) * 2017-01-25 2019-09-27 特普医药公司 涉及二芳基巨环化合物的组合疗法
WO2020260252A1 (en) * 2019-06-24 2020-12-30 Boehringer Ingelheim International Gmbh New macrocyclic compounds and derivatives as egfr inhibitors
CN114163454A (zh) * 2020-09-11 2022-03-11 上海翰森生物医药科技有限公司 含吡啶多环类衍生物抑制剂、其制备方法和应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113527335A (zh) * 2020-04-15 2021-10-22 南京圣和药业股份有限公司 作为egfr抑制剂的大环类化合物及其应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105008371A (zh) * 2013-02-07 2015-10-28 默克专利股份公司 大环哒嗪酮衍生物
CN106536506A (zh) * 2014-03-20 2017-03-22 卡佩拉医疗公司 苯并咪唑衍生物作为erbb酪氨酸激酶抑制剂用于治疗癌症
CN110291092A (zh) * 2017-01-25 2019-09-27 特普医药公司 涉及二芳基巨环化合物的组合疗法
WO2020260252A1 (en) * 2019-06-24 2020-12-30 Boehringer Ingelheim International Gmbh New macrocyclic compounds and derivatives as egfr inhibitors
CN114163454A (zh) * 2020-09-11 2022-03-11 上海翰森生物医药科技有限公司 含吡啶多环类衍生物抑制剂、其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN114057771A (zh) 2022-02-18
WO2022117051A1 (zh) 2022-06-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN114057771B (zh) 大环化合物及其制备方法和应用
EP2880035B1 (en) Novel pyrrolopyrimidine compounds as inhibitors of protein kinases
RU2659786C2 (ru) 5-[[4-[[морфолин-2-ил]метиламино]-5-(трифторметил)-2-пиридил]амино]пиразин-2-карбонитрил, его терапевтические применения
TWI527800B (zh) 作為聚（二磷酸腺苷酸－核醣）聚合酶（ｐａｒｐ）之抑制劑之１－（芳基甲基）喹唑啉－２，４（１ｈ，３ｈ）－二酮及其應用
EP3398950B1 (en) Novel kinase inhibitor against wild-type egfr and mutated egfr
TW202043212A (zh) Shp2抑制劑及其應用
TW202144345A (zh) Ｋｒａｓ突變蛋白抑制劑
KR102359993B1 (ko) 피리미도[5,4-b]인돌리진 또는 피리미도[5,4-b]피롤리진 화합물, 그의 제조방법 및 용도
JP7320823B2 (ja) プテリジノン誘導体のｅｇｆｒ阻害剤としての使用
CN105073751B (zh) 作为酪蛋白激酶1δ/ε抑制剂的新的取代的咪唑
CN109906227A (zh) 8,9-二氢咪唑[1,2-a]嘧啶并[5,4-e]嘧啶-5(6H)-酮类化合物
CN115403531A (zh) 作为激酶抑制剂的化学实体、组合物及方法
EP3640248A1 (en) Aminopyrimidine compound, preparation method therefor and use thereof
JP2021536436A (ja) キノリン誘導体から調製される新規な阻害剤
US10501466B2 (en) WDR5 inhibitors and modulators
US20150210702A1 (en) Novel pyrrolopyrimidine compounds as inhibitors of protein kinases
JP2023504866A (ja) 大環構造を有するフッ素含有複素環誘導体およびその用途
CN111989332B (zh) 作为cdk抑制剂的大环化合物、其制备方法及其在医药上的应用
RU2641693C2 (ru) Соединения 5-(пиридин-2-иламино)-пиразин-2-карбонитрила и их терапевтическое применение
WO2004043379A2 (en) Chemical compounds
WO2018157737A1 (zh) 一种多靶点激酶抑制剂
TW202333667A (zh) 嘧啶或吡啶類衍生物及其醫藥用途
JP2021514398A (ja) Ｅｇｆｒ阻害剤の組合せ医薬製剤およびその使用法
CN105541792B (zh) 多环类pi3k抑制剂
WO2020118753A1 (zh) 一种喹啉结构的pan-KIT激酶抑制剂及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant