CN113735651A - 一种修复土壤改良剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种土壤修复改良剂,其为一种新型、含生物菌种的土壤肥料。其中,生物菌种由多种益生菌组成,使土壤内有益菌群大量增加,恢复土壤微生物群落的多样性,加强透气性,有效解决土壤板结问题,改良土壤微生态环境。将有机复合肥、无机肥料与微生物培养物结合使用,可以弥补单一种类化肥的缺陷,对恢复土壤地力、提高作物品质和数量、及减少化肥用量有着重要意义。
Description
技术领域
本发明属于农业土壤改造领域,涉及一种修复土壤改良剂及其制备方法。
背景技术
在农业生产过程中,为了增加农作物的产量,使经济效益最大化,很多农民使用大量的化肥,并且将有机肥料弃之不用,严重忽视了对土壤进行循环利用的好处,导致土地的质量越来越差,土壤养分严重流失。主要表现在基础土壤肥力逐步下降,土壤中的一部分养分含量大大的减少,使土壤的缓冲能力变差,并且土壤的物理性状也在大幅度降低。据统计,现阶段,我国的很多耕地土壤养分缺失严重,甚至有一部分耕地的中、微量元素已经不复存在。这些因素严重影响了我国农业可持续发展。
在当今社会中,肥料市场中普遍存在高浓度复合肥的配比小、低浓度复合肥配比大的现象,这样的肥料产品结构非常不合理,并且肥料中的养分也不达标。在农作物耕作过程中,很多农民在利用肥料时,依旧按照传统的使用肥料的方法即只重视应用氮肥、磷肥的使用,而严重忽视了对微生物养分肥料的应用。这样农作物在生长过程中,不能够吸收到足够的营养,导致收成较差、产量下降。除此之外,对土壤施肥不够及时的现象也是降低土壤肥力的因素之一,土壤养分不能得到补充,使土壤的盐碱化速度加快,破坏了土壤的恢复能力。
土壤修复改良剂为一种新型、含生物菌种的土壤肥料。其中,生物菌种具有繁殖快速、生命力强、安全无毒、耐高温,在造粒烘干过程中不失活,能长期保存等特点,且含有丰富且高价值活性菌,具有改良土壤结构的功效。生物菌种由多种益生菌组成,使土壤内有益菌群大量增加,恢复土壤微生物群落的多样性,加强透气性,有效解决土壤板结问题,改良土壤微生态环境。
枯草芽孢杆菌其菌体在生长过程中产生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,能够抑制土壤中病菌、害虫的滋生,为农作物根系的健康生长提供良好的环境。并且对环境无污染,能产生多种抗菌素和酶,能使作物提高抗逆能力,降低农作物病害发生。且,使用枯草芽孢杆菌均表现为对土壤呼吸作用的刺激效应,并且土壤中枯草芽孢杆菌质量分数越大,对土壤呼吸强度的刺激作用越大,即刺激强度和施药质量分数呈正相关。
产朊假丝酵母能够分解出矿物中的钾、硅,也能分解出磷灰石中的磷,具有溶磷、释钾和固氮功能,同时能在生长繁殖过程中产生有机酸、氨基酸、多糖、激素等有利于植物吸收和利用的物质。该菌在土壤中繁殖后,分泌植物生长刺激素及多种酶。菌体内的钾在菌体死亡后,游离出来,又可被植物吸收利用。作为微生物肥料中的一种重要功能菌,可提高土壤速效钾、磷含量,提高作物产量和品质等多种效。
沼泽红假单胞菌具有促进土壤微生物增殖的作用,沼泽红假单胞菌可在土壤中增殖,并刺激土壤中固氮菌和放线菌的增殖,从而使土壤中有益菌数量大大增加。
将有机复合肥、无机肥料与微生物培养物结合使用,可以弥补单一种类化肥的缺陷,对恢复土壤地力、提高作物品质和数量、及减少化肥用量有着重要意义。现有技术中也出现了一些修复土壤改良剂,但是对土壤的修复效果却很难让人满意,因此,研发出一种农业土壤修复用一种修复土壤改良剂显得至关重要。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊,而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述及现有技术中存在的问题,提出了本发明。
因此,本发明的目的是根据现有技术的不足,提供一种修复土壤改良剂及其制备方法。
为解决上述技术问题,根据本发明的一个方面,本发明提供了如下技术方案:一种修复土壤改良剂及其制备方法,包括,
将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌分别培养,按比例制成发酵母液接种于发酵基质中进行厌氧发酵所得的微生物培养物,再加入有机复合肥、无机肥料,与微生物培养物按比例混合均匀得到修复土壤改良剂;
将得到的修复土壤改良剂进行干燥、消毒、杀虫、筛选、分类存放待用。
作为本发明所述修复土壤改良剂的制备方法的一种优选方案,其中:所述枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的分别培养,包括分别按照各自的培养基、培养步骤条件进行纯菌种培养、发酵,然后按比例混合制成发酵母液。
作为本发明所述修复土壤改良剂的制备方法的一种优选方案,其中:所述各自的培养基,包括,
枯草芽孢杆菌的培养基:牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g,NaCl 5.0g,琼脂20.0g;
产朊假丝酵母的培养基:麦芽提取物30.0g,细菌蛋白胨5.0g,琼脂15.0g;
沼泽红假单胞菌的培养基:K2HPO4 1.0g,MgSO4 0.5g,酵母提取物10.0g,蒸馏水1000ml。
作为本发明所述修复土壤改良剂的制备方法的一种优选方案,其中:所述培养步骤,包括
枯草芽孢杆菌的培养步骤:配置培养液,搅拌均匀后调节PH 7、121℃下高温灭菌15min后备用;将枯草芽孢杆菌菌种活化后,将单菌落按10%的添加量添加到培养液中培养接种,稳定在30~32℃培养。
产朊假丝酵母的培养步骤:配置培养液,搅拌均匀后调节PH值至5.2~5.6,进行灭菌处理后备用;将产朊假丝酵母培养菌种以7%~10%的接种量接种到上述培养液中,在28~30℃下发酵培养。
沼泽红假单胞菌的培养步骤:配置培养液,搅拌均匀后调节pH 7.0~7.2、121℃下高温灭菌15min后备用;沼泽红假单胞菌菌种活化应将单菌落按10%的添加量添加到培养液中培养接种,稳定在30~32℃密封、40瓦钨丝灯光照培养。
作为本发明所述修复土壤改良剂的制备方法的一种优选方案,其中:所述按比例制成发酵母液,包括枯草芽孢杆菌45~70%,产朊假丝酵母15~30%,沼泽红假单胞菌10~30%。
作为本发明所述修复土壤改良剂的制备方法的一种优选方案,其中:所述发酵基质,包括玉米15%,豆粕30%,麸皮65%。
作为本发明所述修复土壤改良剂的制备方法的一种优选方案,其中:所述厌氧发酵,包括,
将发酵母液按40%比例,以平板划线法接种于搅拌均匀并经蒸汽灭菌后的固体发酵基质中,搅拌10分钟接入特制的厌氧发酵袋内,将发酵袋热合封口,移入25℃发酵室内厌氧发酵8天即可使用;其中,厌氧发酵袋为8层尼龙复合镶嵌有单向排气阀,当菌体生长呼吸所产的气体达到一定压力时,排气阀自动向外排气,外面的气体无法进入发酵袋内,保证了培养物不被杂菌污染。
作为本发明所述修复土壤改良剂的制备方法的一种优选方案,其中:所述有机复合肥,包括沤肥、泥肥、厩肥等一种或多种。
作为本发明所述修复土壤改良剂的制备方法的一种优选方案,其中:所述无机肥料,包括氮肥50~70g/kg,磷肥40~60g/kg,钾肥60~70g/kg。
作为本发明所述修复土壤改良剂的制备方法的一种优选方案,其中:所述按比例混合,其中,有机复合肥、无机肥料与微生物培养物的质量比为5:3:2。
本发明的有益效果:
本发明使用的枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌能产生多种分解酶,能够分解出矿物中的钾、硅,也能分解出磷灰石中的磷,具有溶磷、释钾和固氮功能,同时能在生长繁殖过程中产生有机酸、氨基酸、多糖、激素等有利于植物吸收和利用的物质,抑制土壤中病菌、害虫的滋生。还能在板结密实、缺氧的环境下快速生长,不产生有毒、有害物质,促进作物生长,提高作物抗性。
本发明通过将有机肥料、无机肥与微生物培养物进行融合,生产修复还原和改善土壤肥力的微生物再生肥,以促进人工繁殖的有益微生物快速、大量的繁殖生长。使有益微生物增殖和土壤活性酶大量提高,恢复土壤微生物群落的多样性,加强透气性,有效解决土壤板结问题,改良土壤微生态环境,提高土壤养分含量。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明,但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广,因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次,此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例,也不是单独的或选择性的其他实施例互相排斥的实施例。
本发明中所用原料,若无特殊说明,均为市售。
其中,枯草芽孢杆菌菌种购于北京北纳创联生物技术研究院,其编号为BNCC188062。
产朊假丝酵母菌菌种购于北京北纳创联生物技术研究院,其编号为BNCC185498。
沼泽红假单胞菌菌种购于北京北纳创联生物技术研究院,其编号为BNCC336448。
实施例1:
将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌按照各自的培养基、培养步骤条件进行纯菌种培养、发酵,然后按质量比7:2:1混合制成发酵母液;
将发酵母液按40%比例,以平板划线法接种于搅拌均匀并经蒸汽灭菌后的固体发酵基质中,搅拌10分钟接入特制的厌氧发酵袋内,将发酵袋热合封口,移入25℃发酵室内厌氧发酵8天即可使用。
将发酵后的微生物培养物,再加入有机复合肥、无机肥料,质量比5:3:2。混合均匀得到修复土壤改良剂,将得到的修复土壤改良剂进行干燥、消毒、杀虫、后存放备用。
于一亩(666平方米)pH为9.5的无种植土壤中,均匀添加修复土壤改良剂100kg。每周随机取样1m2,取样25次,风干得到风干土样,进行测量后取平均值。所得数据如表1所示。
本发明测量土壤pH值的具体操作为:称取通过1mm孔径筛的风干土样25g,放入50ml烧杯中,加入蒸馏水25ml,用玻璃棒搅拌1分钟,使土体充分散开来,放置半小时(避免空气中存在氨或挥发性酸的影响)后,用酸度计测定。
本发明采用水合热重铬酸钾氧化-比色法测量土壤有机质,具体操作为:称取过0.25mm筛的风干土样0.5g,放入20ml硬质试管中,加入0.136mol/L重铬酸钾-硫酸溶液10ml,停放20min;预热石蜡油浴锅升温至185~190℃,将硬质试管***铁丝笼中,并将铁丝笼放入上述油浴锅中加热,在温度170~180℃下保持沸腾5min后取出冷却;冷却后,将试管内溶物洗入250ml三角瓶中,使瓶内总体积为60~80ml,加邻啡罗琳指示剂3~5滴,用0.2N标准硫酸亚铁滴定,待溶液由黄色经过绿色突变为棕红色即为滴定终点。记录所消耗硫酸亚铁体积数。以如下公式计算:
其中:V0——滴定空白液时所用去的硫酸亚铁毫升数;ml
V1——滴定样品液时所用去的硫酸亚铁毫升数;ml
N——硫酸亚铁当量浓度。
1.1——氧化校正常数。
1.724——1g碳转化为有机质的经验常数。
0.003——碳的毫克当量
表1修复土壤改良剂对土壤的影响
经添加修复土壤改良剂的土壤,其pH值明显得到改善,有机质含量也得到提高,有效改良土壤基质。经4周时间观察发现,有添加修复土壤改良剂土壤中种植的作物,作物长势较快,叶片宽、厚、嫩,且无落叶,颜色嫩绿色无黄叶,根系较粗壮、白嫩;没有添加修复土壤改良剂土壤中种植的作物,其作物有落叶、黄叶,茎秆不够挺拔,根系衰老,呈黄褐色。
实施例2:
将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌按照各自的培养基、培养步骤条件进行纯菌种培养、发酵,然后混合制成发酵母液,其中各菌株比例如表2所示。
将发酵母液按40%比例,以平板划线法接种于搅拌均匀并经蒸汽灭菌后的固体发酵基质中,搅拌10分钟接入特制的厌氧发酵袋内,将发酵袋热合封口,移入25℃发酵室内厌氧发酵8天即可使用。
将发酵后的微生物培养物,再加入有机复合肥、无机肥料,混合均匀得到修复土壤改良剂,质量比5:3:2。将得到的修复土壤改良剂进行干燥、消毒、杀虫、后存放备用。
于一亩(666平方米)土壤中,均匀添加修复土壤改良剂100kg。于4周后随机取样1m2,取样25次,进行测量并取平均值,所得数据如表2所示。
本发明测量土壤脲酶活性的具体操作为:称取5g土样于50ml三角瓶中,加入1ml甲苯,振荡均匀,15min后加入10ml 10%尿素溶液合和20ml pH为6.7的柠檬酸盐缓冲溶液,摇匀后在37℃恒温箱培育24小时。培养结束后过滤,过滤后取1ml滤液加入50ml容量瓶中,再加4ml 1.35mol/L的苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液(活性氯浓度为0.9%),随加随摇匀。20min后显色,定容。1h内在分光光度计于578nm波长处比色。
在测定样品吸光值之前,分别取0、1、3、5、7、9、11、13ml氮工作液,移于50ml容量瓶中,补加蒸馏水至20ml。再加入4ml苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液,随加随摇匀。20min后显色,定容。1h内在分光光度计上于578nm波长处比色。然后以氮工作液浓度为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制标准曲线。
所述氮的工作液为0.4717g硫酸铵溶于水并稀释至1000ml,得到1ml含有0.1mg氮的标准液;再将此液稀释10倍(吸取10ml标准液定容至100ml)制成氮的工作液。
每一个样品设置一个无基质对照,以蒸馏水代替基质,其他操作与样品实验相同。每个实验设置一个无土对照,不加土样,其他操作与样品实验相同。
以24h后1g土壤中NH3-N的毫克数表示土壤酶活性(Ure)。结果计算:
其中:a样品——样品吸光值经标准曲线求得的NH3-N毫克数;mg
a无土——无土对照吸光值经标准曲线求得的NH3-N毫克数;mg
a无基质——无基质对照吸光值经标准曲线求得的NH3-N毫克数;mg
V——显色液体积;ml
n——分取倍数,即浸出液体积/吸取滤液体积
m——烘干土重;g
本发明使用统计学方法测量植物发病率,具体植物发病率公式为:
表2枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌混合比例对土壤的影响
枯草芽孢杆菌其在土壤中发挥的作用较强,能够产生多种活性物质,并且抑制土壤中病菌、害虫的滋生,能提高植物的抗病害、抗倒伏能力。产朊假丝酵母能够分解出矿物中的钾、硅,也能分解出磷灰石中的磷,具有溶磷、释钾和固氮功能,同时能在生长繁殖过程中产生有机酸、氨基酸、多糖、激素等有利于植物吸收和利用的物质。沼泽红假单胞菌具有促进土壤微生物增殖的作用。所以本发明采用将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌按质量比为5~7:1~3:1~3混合。
由实施例2及表2可得,对土壤中添加所制得发酵后的微生物培养物,能有效提高土壤中脲酶活性,以及有效降低土壤发病率。所添加枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌按质量比为7:2:1混合时,所制得发酵母液发酵后制备的修复土壤改良剂使得土壤脲酶的活性最好,其脲酶活性与土壤的微生物数量、有机质含量,全氮和速效氮含量呈正相关。且植物发病率最低可为0。
实施例3:
将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌按照各自的培养基、培养步骤条件进行纯菌种培养、发酵,然后按比例7:2:1混合制成发酵母液。
将发酵母液按40%比例,以平板划线法接种于搅拌均匀并经蒸汽灭菌后的固体发酵基质中,搅拌10分钟接入特制的厌氧发酵袋内,将发酵袋热合封口,移入25℃发酵室内厌氧发酵8天即可使用。
将发酵后的微生物培养物,再加入有机复合肥、无机肥料,质量比5:3:2。混合均匀得到修复土壤改良剂,将得到的修复土壤改良剂进行干燥、消毒、杀虫、后存放备用。所添加有机复合肥、无机肥料与微生物培养物的比例及对土壤的影响如表3所示。
于一亩(666平方米)土壤中,均匀添加修复土壤改良剂100kg。于4周后随机取样1m2,取样25次,进行测量并取平均值,所得数据如表3所示。
本发明采用凯氏定氮法测量土壤全氮,具体操作为:
准确称取过60目筛的风干土样0.5g,移入干燥的凯氏瓶中,加入1.5g的还原性混合催化剂(硫酸钾100g、五水硫酸铜10g、硒粉1g均匀混合后研磨),再加入4ml浓度98%的浓硫酸,放到通风柜内的消毒器上消煮1.5h,直至内容物变为清澈的淡蓝色。消煮完成后冷却。将三角瓶置于冷凝管的承接管下,管口淹没在含2.5ml混合指示剂(溴甲酚绿0.5g和甲基红0.1g,溶解在100ml 95%的乙醇溶液中,用NaOH或HCl调节PH至4.5)的2%的硼酸溶液中,打开冷凝水中的水流,进行蒸馏。当接受液变蓝后蒸馏5min,将冷凝管下端离开硼酸液面,再用蒸馏水冲净管外。用0.01当量的盐酸标准溶液滴定至红色为止,记录所有消耗的盐酸标准溶液的体积。
所述盐酸标准溶液为比重1.19的浓盐酸0.84ml,用蒸馏水稀释至1000ml,用基准物质标定。
设置一组空白组,除不加试样外其余步骤完全相同。结果计算:
V2——滴定样品液时所用去的盐酸标准溶液体积;ml
V3——滴定空白组时所用去的盐酸标准溶液体积;ml
D——盐酸标准溶液的当量浓度。
W——土壤样品重,g
0.014——氮的毫克当量
本发明采用碳酸氢钠法测量土壤速效磷,具体操作为:
准确称取过1mm筛的风干土样2.50g于250ml三角瓶中,加50ml 0.5M的NaHCO3(PH为8.5)溶液,再加一角匙无磷活性炭,塞紧瓶塞,在20~25℃下振荡30min取出,用干燥漏洞和无磷滤纸过滤于三角瓶中,同时做试剂的空白实验。吸取滤液10ml于50ml容量瓶中,用5ml钼锑抗试剂显色,并用蒸馏水定容摇匀。在室温下放置30min,用红色滤光片或660nm波长的光进行比色,以空白溶液的透光率为100(即光密度为0)读出测定液的光密度,在标准曲线上查出显色液的磷浓度(mg/kg)。
吸取含磷5mg/kg的标准溶液0、1、2、3、4、5、6毫升分别加入50ml容量瓶中,加0.5MNaHCO3液10ml,加水至30毫升后再加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mg/kg磷标准系列溶液。与待测溶液同时比色,读取吸收值,在方格座标纸上以吸收值为纵座标磷mg/kg数为横座标,绘制成标准曲线。
所述无磷活性炭粉,为活性炭粉用1:1HCl浸泡过夜,然后用平板漏斗抽气过滤,用水洗净,直至无HCl为止。再加0.5M NaHCO3液浸泡过夜,在平板漏斗上抽气过滤,用水洗净NaHCO3,最后检查至无磷为止,烘干备用。
所述钼锑抗显色剂,为酒石酸锑钾KSbOC4H4O6 0.5g溶于100ml水中制成5%的溶液。另称取钼酸铵20g溶于450ml水中徐徐加入208.3ml浓硫酸,边加边搅动,再将0.5%的酒石酸锑钾溶液100ml加入到钼酸铵液中,最后加至1升充分摇匀,贮于棕色瓶中此为钼锑混合液。临用前当天称取1.5g左旋抗坏血酸溶液于100ml钼锑混合液中混匀,此即钼锑抗试剂。
结果计算:
V4——由工作曲线查得显色液的磷数;mg/kg
50——显色液体积;ml
A——分取倍数=浸提液总体积(50ml)/吸取浸出液毫升数
M——烘干土样;g
本发明采用火焰光度法测量土壤速效钾,具体操作为:
准确称取通过1mm筛孔的风干土5.00g于100mL三角瓶中,加入1mol L-1NH4OAc溶液50mL,塞紧橡皮塞振荡30min,用干的普通定性滤纸过滤。滤液盛于小三角瓶中同钾标准系列溶液一起在火焰光度计上测定。记录其检流计上的读数然后从标准曲线上求得其浓度。
以500mg/kg或100mg/kg钾标准液稀释成0、1、3、5、10、15、20、30、50mg/kg钾系列液,用1mol L-1中性醋酸铵液稀释定容以抵销醋酸铵的干扰,以浓度为横座标绘制曲线。
所述1mol L-1中性醋酸铵液,为化学纯醋酸铵77.09g,加水溶解定容至1升,最后调节pH到7.0。
结果计算:
V5——加入浸提剂的量;ml
M1——烘干土样;g
查得的mg/kg数——从标准曲线上查出相应的mg/kg数
表3有机复合肥、无机肥料与微生物培养物的比例及对土壤的影响
由实施例3及表3可得,当微生物培养物中枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌其比例为7:2:1混合时,且有机复合肥、无机肥料与微生物培养物的混合比例为5:3:2时,所制得发酵母液发酵后制备的修复土壤改良剂使得土壤酶的活性最好,植物发病率最低可为0,且土壤中其他养分如全氮、速效磷、速效钾的含量也有极大改善,可达到土壤养分2级以上标准。
本发明使用的枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌能产生多种分解酶,能够分解出矿物中的钾、硅,也能分解出磷灰石中的磷,具有溶磷、释钾和固氮功能,同时能在生长繁殖过程中产生有机酸、氨基酸、多糖、激素等有利于植物吸收和利用的物质,抑制土壤中病菌、害虫的滋生。还能在板结密实、缺氧的环境下快速生长,不产生有毒、有害物质,促进作物生长,提高作物抗性。
本发明通过将有机肥料、无机肥与微生物培养物进行融合,生产修复还原和改善土壤肥力的微生物再生肥,以促进人工繁殖的有益微生物快速、大量的繁殖生长。使有益微生物增殖和土壤活性酶大量提高,恢复土壤微生物群落的多样性,加强透气性,有效解决土壤板结问题,改良土壤微生态环境。
应说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的精神和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (10)
1.一种修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:包括,
将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌分别培养,按比例制成发酵母液接种于发酵基质中进行厌氧发酵所得的微生物培养物,再加入有机复合肥、无机肥料,与微生物培养物按比例混合均匀得到修复土壤改良剂;
将得到的修复土壤改良剂进行干燥、消毒、杀虫、筛选、分类存放待用。
2.如权利要求1所述修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:所述枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、沼泽红假单胞菌的分别培养,包括分别按照各自的培养基、培养步骤条件进行纯菌种培养、发酵,然后按比例混合制成发酵母液。
3.如权利要求2所述修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:所述各自的培养基,包括,
枯草芽孢杆菌的培养基:牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g,NaCl 5.0g,琼脂20.0g;
产朊假丝酵母的培养基:麦芽提取物30.0g,细菌蛋白胨5.0g,琼脂15.0g;
沼泽红假单胞菌的培养基:K2HPO4 1.0g,MgSO4 0.5g,酵母提取物10.0g,蒸馏水1000ml。
4.如权利要求2所述修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:所述培养步骤,包括
枯草芽孢杆菌的培养步骤:配置培养液,搅拌均匀后调节PH 7、121℃下高温灭菌15min后备用;将枯草芽孢杆菌菌种活化后,将单菌落按10%的添加量添加到培养液中培养接种,稳定在30~32℃培养。
产朊假丝酵母的培养步骤:配置培养液,搅拌均匀后调节PH值至5.2~5.6,进行灭菌处理后备用;将产朊假丝酵母培养菌种以7%~10%的接种量接种到上述培养液中,在28~30℃下发酵培养。
沼泽红假单胞菌的培养步骤:配置培养液,搅拌均匀后调节pH 7.0~7.2、121℃下高温灭菌15min后备用;沼泽红假单胞菌菌种活化应将单菌落按10%的添加量添加到培养液中培养接种,稳定在30~32℃密封、40瓦钨丝灯光照培养。
5.如权利要求2所述修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:所述按比例制成发酵母液,包括枯草芽孢杆菌45~70%,产朊假丝酵母15~30%,沼泽红假单胞菌10~30%。
6.如权利要求1所述修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:所述发酵基质,包括玉米15%,豆粕30%,麸皮65%。
7.如权利要求1所述修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:所述厌氧发酵,包括,
将发酵母液按40%比例,以平板划线法接种于搅拌均匀并经蒸汽灭菌后的固体发酵基质中,搅拌10分钟接入特制的厌氧发酵袋内,将发酵袋热合封口,移入25℃发酵室内厌氧发酵8天即可使用;其中,厌氧发酵袋为8层尼龙复合镶嵌有单向排气阀,当菌体生长呼吸所产的气体达到一定压力时,排气阀自动向外排气,外面的气体无法进入发酵袋内,保证了培养物不被杂菌污染。
8.如权利要求1所述修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:所述有机复合肥,包括沤肥、泥肥、厩肥等一种或多种。
9.如权利要求1所述修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:所述无机肥料,包括氮肥50~70g/kg,磷肥40~60g/kg,钾肥60~70g/kg。
10.如权利要求1所述修复土壤改良剂的制备方法,其特征在于:所述按比例混合,其中,有机复合肥、无机肥料与微生物培养物的质量比为5:3:2。
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