CN111793585B - 布氏乳杆菌及其培养法和在农业种植中的应用 - Google Patents

布氏乳杆菌及其培养法和在农业种植中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种布氏乳杆菌NYQ1‑1，为布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri，其保藏号为：CGMCCNo.18761。本发明还同时公开了上述布氏乳杆菌NYQ1‑1的用途，使得植物在酸性土壤中容易定殖；促进对土壤中养分转化，促进植物的生根和生长。

Description

布氏乳杆菌及其培养法和在农业种植中的应用
技术领域
本发明属于农业微生物领域，特别涉及布氏乳杆菌及其培养法和在农业种植中的应用。
背景技术
农业作为我国的第一产业，促进其可持续发展对于其他产业具有重要的引领作用。但农业生产中化肥的使用，会引起土壤破坏、环境污染等一系列问题，与可持续发展理念相违背。改进当前农业生产中化肥农药过量施用的生产技术模式，改善土壤结构，增加土壤中有益微生物的数量和活性，维持根际微生物区系平衡，促进植物生长，提高土壤中肥料的利用率，提高土壤的供肥能力日益成为研究热点，对于恢复良好的农田生态环境，实现农业生产与自然和谐相处、共同发展，促进农业生态、经济、社会的可持续发展是十分必要的。
近些年，在微生物学和肥料学等研究的推动下，微生物肥料的研发及应用技术和成果在国内有了质的飞跃，也是未来肥料发展的一大方向。微生物肥料是指含有特定微生物活体的制品，通过其中所含微生物的活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，提高农作物产量，改善产品质量及农业生态环境。此外还具有提高土壤肥力、增强植物抗逆能力、协助作物吸收营养、减少化肥使用等作用，在可持续农业战略发展中的地位日趋重要。
菌种的选择又是微生物肥料研发的一个核心技术，因为我国南北方土壤理化指标存在明显差异性，其中pH为一主要因素，同一菌种在不同土壤环境中生长情况不尽相同。芽孢杆菌作为一类重要的植物促生菌，具有生长快、营养简单、抗逆性等优点，是目前微生物有机肥最为常用的菌种。但芽孢杆菌适宜在中性偏碱的土壤中生长，在我国南方地区的酸性土壤中难以存活，目前未发现可在酸性土壤中生存且对植物生长具有促进作用的菌株。因此筛选出适宜在酸性土壤中生长，且具有养分转化、植物促生多效功能的优良菌株，并研发养分高效利用、抗病促生的环保型生物肥料，成为我国当前的迫切需求。
布氏乳杆菌为革兰氏阳性菌，菌体短杆状，无芽孢，是一种异型发酵的乳酸菌，应用于食品制造(泡菜、果蔬制品)、农业(生产有机复合菌肥)、青贮饲料、微生物饲料添加剂、污水净化等方面；但是尚未告知能作为生物肥料。
布氏乳杆菌一般适宜的pH为4.5～5.8，甚至更低。
发明内容
本发明要解决的问题是提供一种可在酸性土壤中生存的多效植物促生菌及其培养条件优化，以及在农业种植中的应用。
为了解决上述技术问题，本发明提供一种布氏乳杆菌NYQ1-1，为布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri，其保藏号为：CGMCCNo.18761。
本发明还同时提供了上述布氏乳杆菌NYQ1-1的培养方法(布氏乳杆菌NYQ1-1菌液的制备方法)，包括如下步骤：
1)、制备种子液：
将布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri(CGMCCNo.18761)于MRS液体培养基中，于(37±0.5)℃静置培养(30±2)h，得布氏乳杆菌种子液(发酵处于对数期的布氏乳杆菌种子液)；
2)、按照1:100的体积比接种量，将布氏乳杆菌种子液加入至培养基中，于(32±2)℃静置培养48～72小时(优选48h)；得布氏乳杆菌NYQ1-1菌液；
所述培养基为：于1L简单液体培养基中添加葡萄糖20.0g；所述1L简单液体培养基为蛋白胨10.0g，酵母膏5.0g，糖蜜10.0g，蒸馏水定容至1L，自然pH。
本发明还同时提供了上述布氏乳杆菌NYQ1-1的用途：使得植物在酸性土壤中容易定殖。
作为本发明的布氏乳杆菌NYQ1-1用途的改进：促进对土壤中养分转化，促进植物的生根和生长。
作为本发明的布氏乳杆菌NYQ1-1用途的进一步改进：布氏乳杆菌NYQ1-1菌液稀释100～400体积倍(优选稀释250～350倍，最优为稀释300倍)后，作为植物的沾根定值剂。
本发明提供了多效植物促生菌作为肥料在农业种植中的应用，所述的肥料为微生物菌剂，所述微生物为布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri。
进一步，对所述布氏乳杆菌的培养基成分进行优化，该布氏乳杆菌在简单培养基上生长情况：以1L简单液体培养基T1(组分：蛋白胨10.0g，酵母膏5.0g，糖蜜10.0g)作为基础培养基，分别添加以下其中一种：柠檬酸氢二铵、葡萄糖、吐温8.0、乙酸钠、磷酸氢二钾，121℃灭菌20min，冷却后，按照相同接种量(1％)接种布氏乳杆菌，结果表明在T1基础培养基中加入葡萄糖，该布氏乳杆菌生长进入稳定期的时间滞后于其他成分，但在发酵结束后菌体量远大于其他成分培养基中的菌体量。在该培养基中，布氏乳杆菌在接种后7h左右进入对数生长期，48h后趋于稳定。
再进一步，本发明所述的布氏乳杆菌在复杂培养基上生长情况：以1L复杂液体培养基T2(组分：蛋白胨10.0g，酵母膏5.0g，糖蜜10.0g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g)作为基础培养基，分别添加以下其中一种：柠檬酸氢二铵、葡萄糖、吐温8.0、乙酸钠、磷酸氢二钾，121℃灭菌20min，冷却后，按照相同接种量(1％)接种布氏乳杆菌，结果表明在T2培养基中加入葡萄糖，布氏乳杆菌发酵结束后菌体量大于其他成分培养基中的菌体量。
更进一步，将上述两类培养基中菌体生长情况进行对比，结果表明：无论是简单培养基还是复杂培养基，均为添加了葡萄糖的情况下，发酵结束时菌体量达到较大值，但相比于复杂培养基，在简单培养基中添加葡萄糖反而菌体量更大，且发酵速度更快。
本发明所述的微生物菌剂在农业种植中的应用，所述的微生物菌剂为布氏乳杆菌菌液。在水稻插秧时，用布氏乳杆菌菌液稀释100～400倍(稀释前活菌数为5亿cfu/mL以上)沾根定值，与对照组(采用清水沾根定植)相比，试验组的化肥施用量减少20％。
本发明涉及一株可在酸性土壤环境中生存，具有解磷、产植物生长激素、健根促长等多功效的根际促生菌在农业种植中的应用。
本发明的布氏乳杆菌NYQ1-1的保藏信息如下：保藏名称：布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号：CGMCC No.18761，保藏时间2019年10月29日。
本发明具有如下有益效果：本发明的微生物菌剂在酸性土壤中容易定殖，对土壤中养分转化效果明显，对植物的生根、生长有良好的促进作用。发明所述的布氏乳杆菌是一种具有解磷、产植物生长激素、健根促等多功效的根际促生菌。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
图1为布氏乳杆菌在简单培养基T1中分别添加柠檬酸氢二铵(T1-1)、葡萄糖(T1-2)、吐温8.0(T1-3)、乙酸钠(T1-4)、磷酸氢二钾(T1-5)发酵过程生长曲线。
图2为布氏乳杆菌在复杂培养基T2中分别添加柠檬酸氢二铵(T2-1)、葡萄糖(T2-2)、吐温8.0(T2-3)、乙酸钠(T2-4)、磷酸氢二钾(T2-5)发酵过程生长曲线。
图3为布氏乳杆菌在培养基T1-2、T2-2中的生长曲线对比图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
以下所有的培养基使用前均需要常规灭菌(121℃灭菌20min)。
显色MRS固体培养基：蛋白胨10g，酵母膏5g，柠檬酸2g，葡萄糖20g，吐温8.01mL，乙酸钠5g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，琼脂2g，体积分数0.4％溴酚蓝6mL，蒸馏水1L，自然pH。用于平板或者斜面的制备。
MRS液体培养基：蛋白胨10g，酵母膏5g，柠檬酸2g，葡萄糖20g，吐温8.01mL，乙酸钠5g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，蒸馏水1L；自然pH。
NBRIP培养基：蛋白胨10g，酵母膏5g，柠檬酸2g，葡萄糖20g，吐温8.01mL，乙酸钠5g，K2HPO4 2g，MgSO4 0.58g，MnSO4 0.25g，Ca3(PO4)2 5g，MgCl2·6H2O 5g，MgSO4·7H2O0.25g，KCl 0.2g，(NH4)2SO4 0.1g，蒸馏水1mL，pH 7.0。
在菌株产植物激素吲哚乙酸IAA能力测定方法中，当测定IAA范围0.3～20mg/L时，采用PC比色液，当测定IAA范围5～200mg/L时，采用S2比色液。
PC比色液：称取FeCl3 12g溶于300mL蒸馏水，然后缓慢加入429.7mL 98％H2SO4，待冷却后定容至1L。
S2比色液：将4.5gFeCl3溶于300mL蒸馏水，然后缓慢加入587.4mL 98％H2SO4，待冷却后定容至1L。
实施例1、植物促生菌分离筛选：
1)、采样：本发明从台州甜瓜连作基地采集植株长势较好的根际土样中进行菌株分离筛选：根际土样6袋。
2)、菌株分离：采用显色MRS固体培养基分离法进行分离，所述的分离法为：从每袋土样中称取5g的样品，置于45ml无菌水中，在摇床上振荡30min，然后吸取振荡均匀的土壤悬液0.5ml至9.5ml的无菌水中，稀释直至10-6，吸取稀释倍数为10-4、10-5、10-6的悬液各0.1ml，涂布于显色MRS固体培养基平板；涂布后的该平板在30℃培养箱中培养72h，根据菌落显色能力，选出不同显色能力的20株菌。
3)、菌株鉴定：提取菌株的基因组DNA，扩增16S rDNA序列，在NCBI数据库进行比对，对得到的菌株进行初步鉴定，选出6个不同种属的菌株。
4)、溶磷能力初筛：采用平板法初筛，对上述分离出的6株菌株通过其溶磷能力的比较。
对上述分离选出的6株菌株通过其溶磷能力的比较进行初筛选：
平板法进行初筛过程：用经火焰灼烧的接种环冷却后，将6株菌株分别点接在显色MRS固体培养基，30℃温度下培养3d，对周围出现溶磷圈(原培养基为蓝色，溶磷圈呈淡黄色)的菌落，测量溶磷圈的直径(D)和菌落的直径(d)，计算D/d，初步筛选溶磷效果较好的4个菌株，所得结果如下表1所述。
4)、在NBRIP培养基上采用摇瓶法对菌株的溶磷能力进行定量复筛：于250mL三角瓶中装入NBRIP培养基50mL，121℃、20min高压灭菌备用；将在MRS液体培养基中过夜培养的6株细菌离心收集菌体，用无菌水悬浮制成菌悬液1×106cfu·mL-1,取0.5mL菌悬液接种于上述灭菌的NBRIP培养基(50mL)中，以接入等体积(0.5mL)无菌水为对照CK；每个处理重复3次，30℃、170r ·min-1摇床培养7d，发酵液经10000rpm离心10min，上清液分别用钼锑抗比色法和雷兹PHS－3D pH计测定磷含量和pH，所得结果如下表1所述。
5)、菌株产植物激素吲哚乙酸IAA能力测定：
将上述3)初筛的6株菌经MRS液体培养基培养12h(37℃、170r/min)后，用无菌水调节OD600值为0.05，制成菌悬浮液，在含有100mg/L色氨酸的MRS培养液(50ml)中接入100μL菌悬浮液，做3个重复，以加100μL无菌水的培养液为空白对照，一起置于30℃、转速为170r/min的控温振荡器中培养4d后，分别取接菌悬浮液的培养液和空白对照200μL，10000rpm高速离心去除菌体后，向所得上清液中加200μL的Salkowski显色液，置室温下避光静置，30min内观察其颜色变化，3个重复均变红为阳性，表示能分泌IAA，颜色越深表示分泌数量多；3个重复均不变色为阴性，表示不分泌IAA。
对产IAA的菌株进一步对其产IAA的定量测定：培养条件同上5)，在离去菌体得到上清液后，在上清液中加分别加200μL的PC比色液和S2比色液，检测变色溶液在530nm下的吸光值，以未接种的培养基作为对照调零，并使用含有吲哚乙酸的标准溶液，绘制标准曲线。根据标曲计算菌株产IAA含量，所得结果如下表1所述。
说明：在未确定样品中IAA含量范围时，同时使用两种比色液，在用标准曲线计算IAA含量时根据具体含量选用合适比色液。
综合比较6个菌株在溶磷、产植物激素吲哚乙酸的能力，选择出其中的布氏乳杆菌作为本发明所述的菌株。
本发明所述的多效菌株--布氏乳杆菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所述。序列比对结果：布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri。
本发明的布氏乳杆菌进行了保藏，保藏信息如下：保藏名称：布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号：CGMCC No.18761，保藏时间2019年10月29日。
表1
Figure BDA0002629239160000051
Figure BDA0002629239160000061
实施例2
以本发明所述的布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri为出发菌株，于1L简单液体培养基T1(组分：蛋白胨10.0g，酵母膏5.0g，糖蜜10.0g，余量为蒸馏水)中分别添加以下任一：柠檬酸氢二铵2.0g、葡萄糖20.0g、吐温8.0 1.0mL、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g，将布氏乳杆菌分别在这几种不同成分培养基中静置培养，以简单培养基T1作为对照CK(T1)；
具体如下：在50ml的培养基中加入0.5ml布氏乳杆菌种子液，温度为32±2℃，静置培养，用全自动生长曲线分析仪每隔1h在600nm下测定菌液OD值。
布氏乳杆菌种子液的制备方法为：将布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri(CGMCCNo.18761)于MRS液体培养基中，于37±0.5℃静置培养30h，得发酵处于对数期的布氏乳杆菌种子液。
所得结果如图1所述，根据图1可得知：在T1基础培养基中加入葡萄糖，该布氏乳杆菌生长进入稳定期的时间滞后于其他成分，但在发酵结束后菌体量远大于其他成分培养基中的菌体量。在该培养基中，布氏乳杆菌在接种后7h左右进入对数生长期，48h后趋于稳定。
实施例3
以本发明所述的布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri为出发菌株，于1L复杂液体培养基T2(组分：蛋白胨10.0g，酵母膏5.0g，糖蜜10.0g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，余量为蒸馏水)中分别添加以下任一：柠檬酸氢二铵2.0g、葡萄糖20.0g、吐温8.0 1.0mL、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g，将布氏乳杆菌分别在这几种不同成分培养基中静置培养，以培养基T2作为对照CK(T2)，
具体如下：在50ml的培养基中加入0.5ml布氏乳杆菌种子液，温度控制在32±2℃，静置培养，用全自动生长曲线分析仪每隔1h在600nm下测定菌液OD值。
所得结果如图2所述，根据图2可得知：在T2培养基中加入葡萄糖，布氏乳杆菌发酵结束后菌体量大于其他成分培养基中的菌体量。
图3为布氏乳杆菌在培养基T1-2、T2-2中的生长曲线对比图，根据该图3可得知：无论是简单培养基还是复杂培养基，均为添加了葡萄糖的情况下，发酵结束时菌体量达到较大值，但相比于复杂培养基，在简单培养基中添加葡萄糖反而菌体量更大，且发酵速度更快。
实验1、秧苗沾根施用布氏乳杆菌菌剂试验
1试验目的
为验证布氏乳杆菌在农业种植沾根后的效果，评价其肥效，于2020年3月到2020年5月，在金华市义乌市进行水稻秧苗沾根施用布氏乳杆菌菌剂的试验，具体如下：
2时间与地点
2.1试验时间：2020年3月-2020年5月
2.2试验地点：金华市义乌市义亭镇众纳农场(119°58′40.01″E,29°16′22.32″N)。
3材料与方法
3.1供试土壤：(砂壤)
试验点均为我省重点农区，受亚热带湿润季风气候影响，年温适中，雨量充沛，气候环境优越。义乌市供试土壤为砂壤，土壤呈酸性，有机质含量中等，氮钾含量极丰富。试验点土壤类型及理化性状如表2。
表2、试验点土壤类型及理化性状
Figure BDA0002629239160000071
3.2供试作物：水稻(南粳9108)
3.3供试菌剂：
菌剂的制备方法为：
1)、制备种子液：
将布氏乳杆菌Lactobacillus buchneri(CGMCCNo.18761)于MRS液体培养基中，于37±0.5℃静置培养30h，得发酵处于对数期的布氏乳杆菌种子液；
2)、按照1:100体积比的接种量，将布氏乳杆菌种子液加入至培养基中，于(32±2)℃静置发酵培养48h；得布氏乳杆菌NYQ1-1菌液；该菌液经检测，有效活菌数≥5亿cfu/mL。以此菌液作为菌剂。
所述培养基为：于1L简单液体培养基中添加葡萄糖20.0g；所述1L简单液体培养基为蛋白胨10.0g，酵母膏5.0g，糖蜜10.0g，蒸馏水定容至1L，自然pH。
3.4试验方法
3.4.1试验设计
试验共设五个处理，每个试验处理设3次重复。处理如下：
处理1使用清水沾根(空白对照)
处理2将布氏乳杆菌稀释100倍，对秧苗进行沾根；
处理3将布氏乳杆菌稀释200倍，对秧苗进行沾根；
处理4将布氏乳杆菌稀释300倍，对秧苗进行沾根；
处理5将布氏乳杆菌稀释400倍，对秧苗进行沾根；
沾根时间均为20分钟。
3.4.2实验方法
1.首先选择5个等同大小的区域(30平方)；
2.分别对水稻秧苗进行沾根，然后定植进试验区域；
3.观察记录其生长状态(根长，株高，茎粗)，拍照记录；
4.实验重复3次，取样统计结果，每个区域取长势均匀的秧苗100株，得出平均值。
于定植后的第15天进行取样统计结果，植株的日常管理和施肥均相同，按照常规的管理方式进行。
3.4.3测定与统计分析方法
1.数据测定：统计其株高，根长以及茎粗，取样统计结果。
2.统计分析方法：采用spss数据处理***进行统计分析。
4结果与分析
4.1布氏乳杆菌对秧苗沾根生长的影响
从表3中可以看出：与处理1相比，处理4秧苗各项数值都有大幅增加，较处理1株高增加32.6％，根长增加85％，茎粗增加52.63％；其余处理相比较处理1都有明显提高，表明布氏乳杆菌对秧苗沾根起到了重要作用。
表3、布氏乳杆菌对秧苗沾根生长的影响
Figure BDA0002629239160000081
实验结果：平均值±标准差，不同字母代表p＜0.05水平差异性显著
从表3中可以看出，施用布氏乳杆菌沾根使得秧苗生长旺盛。为了选出最优处理，对试验点不同处理的秧苗沾根进行了多重比较，结果表明，处理4最优，与处理1的差异达到显著性水平。
5结论
所生产的布氏乳杆菌菌剂--布氏乳杆菌NYQ1-1菌液(有效活菌数≥5亿cfu/ml)在秧苗沾根上存在明显效果，稀释到300倍对秧苗沾根有显著的促进作用，其余稀释浓度的布氏乳杆菌对秧苗沾根都有促进作用。
对比试验：
将目前现有的布氏乳杆菌8-2N、布氏乳杆菌HEW-A666、CGMCC No.12850布氏乳杆菌按照上述“菌株产植物激素吲哚乙酸IAA能力测定”，这些布氏乳杆菌产植物激素能力均＜30。
将上述布氏乳杆菌按照实验1中的菌液稀释300倍进行沾根实验，所得结果显示株高、根长、茎粗仅仅约为清水(处理1)的1.～1.1倍，即，基本无显著性差异。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
序列表
<110> 杭州新原起生物科技有限公司
<120> 布氏乳杆菌及其培养法和在农业种植中的应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1499
<212> DNA
<213> Lactobacillus buchneri
<400> 1
cttagacggc tggtccccga aggttacctc accggctttg ggtgttacaa actctcatgg 60
tgtgacgggc ggtgtgtaca aggcccggga acgtattcac cgtggcatgc tgatccacga 120
ttactagcga ttccaacttc atgtaggcga gttgcagcct acaatccgaa ctgagaacgg 180
ctttaagaga ttagcttgac ctcgcggttt cgcgactcgt tgtaccgtcc attgtagcac 240
gtgtgtagcc caggtcataa ggggcatgat gatttgacgt catccccacc ttcctccggt 300
ttgtcaccgg cagtcttgct agagtgccca actgaatgct ggcaactaac aataagggtt 360
gcgctcgttg cgggacttaa cccaacatct cacgacacga gctgacgaca accatgcacc 420
acctgtcatt ctgtccccga agggaacgcc taatctctta ggttggcaga agatgtcaag 480
acctggtaag gttcttcgcg tagcatcgaa ttaaaccaca tgctccaccg cttgtgcggg 540
cccccgtcaa ttcctttgag tttcaacctt gcggtcgtac tccccaggcg gagtgcttaa 600
tgcgttagct gcagcactga agggcggaaa ccctccaaca cttagcactc atcgtttacg 660
gcatggacta ccagggtatc taatcctgtt cgctacccat gctttcgagc ctcagcgtca 720
gttacagacc agacagccgc cttcgccact ggtgttcttc catatatcta cgcatttcac 780
cgctacacat ggagttccac tgtcctcttc tgcactcaag tctcccggtt tccgatgcac 840
ttctccggtt aagccgaagg ctttcacatc agacctaaaa aaccgcctgc gctcgcttta 900
cgcccaataa atccggacaa cgcttgccac ctacgtatta ccgcggctgc tggcacgtag 960
ttagccgtgg ctttctggtt ggataccgtc aagatgtcaa cagttactct gacacctgtt 1020
cttctccaac aacagagttt tacgagccga aacccttcat cactcacgcg gcgttgctcc 1080
atcagacttt cgtccattgt ggaagattcc ctactgctgc ctcccgtagg agtttgggcc 1140
gtgtctcagt cccaatgtgg ccgattaccc tctcaggtcg gctacgtatc atcgccttgg 1200
taagccgtta ccttaccaac aagctaatac gccgcgggtc catcctaaag tgacagccga 1260
agccgtcttt taaaccaaaa ccaggtggtt ttggttgtta tacggtatta gcacctgttt 1320
ccaagtgtta tcccctactt caagggcagg ttacccacgt gttactcacc agttcgccac 1380
tcgtctcaat gttaaatctt tcaagtgcaa gcacctaaaa tcattaacgg agacgcgttc 1440
gacttgcatg tattaggcag ccgccagcgt tcgtcctgag ccaggattcc aaactctaa 1499

Claims (4)

1.布氏乳杆菌NYQ1-1，其特征是：为布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)，其保藏号为：CGMCC No.18761。
2.布氏乳杆菌NYQ1-1的培养方法，其特征是包括如下步骤：
1)、制备种子液：
将保藏号为CGMCC No.18761的布氏乳杆菌于MRS液体培养基中，于(37±0.5)℃静置培养(30±2)h，得布氏乳杆菌种子液；
2)、按照1:100的体积比接种量，将布氏乳杆菌种子液加入至培养基中，于(32±2)℃静置培养48～72小时；得布氏乳杆菌NYQ1-1菌液；
所述培养基为：于1L简单液体培养基中添加葡萄糖20.0g；所述1L简单液体培养基为蛋白胨10.0g，酵母膏5.0g，糖蜜10.0g，蒸馏水定容至1L。
3.如权利要求1所述的布氏乳杆菌NYQ1-1的用途，其特征在于：使得植物在酸性土壤中容易定植；从而促进对土壤中养分转化并促进植物的生根和生长。
4.根据权利要求3所述的布氏乳杆菌NYQ1-1的用途，其特征在于：布氏乳杆菌NYQ1-1菌液稀释100～400体积倍后，作为植物的沾根定植剂。
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