CN113373157B - Gf14c基因在提高水稻耐盐抗性中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了GF14C基因在提高水稻耐盐抗性中的应用。所述的基因为GF14C基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第32位碱基‑第802位碱基序列所示。本发明首次从水稻品种BC‑10中成功克隆到提高水稻耐盐抗性的基因‑GF14C基因,利用Camv35S启动子构建超表达GF14C基因的水稻转化载体。该载体转化水稻后能显著提高GF14C基因的表达量,伴随着表达量的提高,转化植株的耐盐抗性有明显的提高,在盐胁迫条件下,GF14C的过量表达转基因植株比对照平均提高19%的存活率。因此,GF14C是在盐胁迫中发挥正向调控作用的防卫基因。本发明超表达GF14C基因的技术可以应用于水稻的基因遗传工程育种,并能够应用于生产实践中,提高水稻的耐盐抗性,从而保障目前粮食短缺的情况下水稻的生产安全。
Description
技术领域:
本发明属于水稻领域,具体涉及GF14C基因在提高水稻耐盐抗性中的应用。
背景技术:
目前世界人口数量呈累积性增加,而耕地面积却不断减少,粮食安全问题日益突出。水稻是主要的粮食作物,在生长过程中又常常因为遭遇极端天气、干旱、盐碱等恶劣种植环境而导致减产,因此,提高水稻在逆境条件下的产量是保障粮食安全的关键。
土壤盐碱化是在农业发展之前就存在的问题,并且随着灌溉等农业活动的增加,土壤盐碱化越来越严重。目前,全球约143亿亩的土地受到盐分胁迫,并且这一数字仍然随着时间而增加。土壤含盐量高,加大了土壤溶液浓度,使水稻吸水困难,种子发芽和幼苗生长都受到影响;水稻生长吸收不到足够的水分,甚至被盐水吸掉自身的水分,同时,水稻在吸收水分和养料的时期吸收大量盐类会引起中毒,降低生活能力、抑制生长、推迟发育,甚至死亡。在我国沿海地区,大量海岸线附近的土地因为含盐量高,不能进行水稻生产。培育水稻耐盐品种,是扩大水稻种植面积、提高水稻在盐碱地中的产量,进而保证粮食安全的关键途径。
水稻的耐盐性是多基因控制的复杂性状,很难进行常规育种,详细解析水稻耐盐的分子调控机理,挖掘功能基因,进行耐盐分子育种是水稻耐盐育种取得突破的关键。过去二十多年,在植物耐盐方面取得的最重要进展是挖掘到耐盐相关的SOS(Salt OverlySensitive)基因SOS1、SOS2和SOS3。但是,对于植物是如何感知盐胁迫信号并进行信号转导、如何调控、调控了哪些盐胁迫相关基因的表达等科学问题依旧不清楚。
发明内容:
本发明的目的编码提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的基因在提高水稻耐盐抗性中的应用,所述的提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
所述的基因为GF14C基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第32位碱基-第802位碱基序列所示。应当理解,考虑到密码子的简并性,在不改变氨基酸序列的前提下,对上述编码基因的核苷酸序列进行修改,也属于本发明的保护范围内。
优选,是用于水稻的基因遗传工程育种。
优选,是在水稻中超表达上述提高水稻耐盐抗性的基因从而提高水稻耐盐抗性。
本发明首次从水稻品种BC-10中成功克隆到提高水稻耐盐抗性的基因-GF14C基因,利用Camv35S启动子构建超表达GF14C基因的水稻转化载体。该载体转化水稻后能显著提高GF14C基因的表达量,伴随着表达量的提高,转化植株的耐盐抗性有明显的提高,在盐胁迫条件下,GF14C的过量表达转基因植株比对照提高19%的存活率。因此,GF14C是在盐胁迫中发挥正向调控作用的防卫基因。本发明超表达GF14C基因的技术可以应用于水稻的基因遗传工程育种,并能够应用于生产实践中,提高水稻的耐盐抗性,从而保障目前粮食短缺的情况下水稻的生产安全。
附图说明:
图1是PHQSN载体图谱;
图2是转基因植株中GF14C基因表达水平检测,其中CK表示野生型丽江新团黑谷,OX-4、OX-9、OX-12、OX-15是转基因植株;
图3是在高盐处理的第4天过表达GF14C基因会使水稻植株的离子渗透率降低;
图4是过表达GF14C基因使水稻植株在高盐处理下的存活率增加,其中CK表示野生型丽江新团黑谷,OX-4、OX-9、OX-12、OX-15是转基因植株;
图5是过表达GF14C基因使水稻植株的耐盐抗性增强,其中CK表示野生型丽江新团黑谷,OX-4、OX-9、OX-12、OX-15是转基因植株。
具体实施方式:
以下实施例是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
实施例1:
1.GF14C基因的克隆,超表达载体构建
取水稻品种BC-10的叶片,用TriZol Reagent(Invitrogen公司,其货号为:15596026)提取叶片总RNA,采用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测总RNA的纯度及量,取1μg的总RNA做起始逆转录反应,所采用的逆转录酶为PrimeScript(TAKARA公司),逆转录反应的步骤参考该逆转录酶的使用说明。以逆转录产物为模板,采用引物F:CGGAATTC(EcoR1酶切位点)CGCCACCGAAGTAATCCCTT和R:GAAGATCT(BglII酶切位点)CCAATAACATGCGGAGCCAT进行PCR扩增,PCR所用的聚合酶为KOD FX(Toyobo公司)。反应体系为50uL,按照KOD FX的说明书配制PCR反应体系。反应条件为:94℃5min;94℃30sec,60℃30sec,68℃60sec,35个循环;68℃10min。PCR扩增获得约843bp的片段。采用琼脂糖凝胶电泳回收该片段后,用EcoR1和BglII对PCR片段和pHQSN载体(载体图如图1所示,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示)分别进行双酶切,酶切后分别回收目标片段和载体片段,用T4连接酶(NEB公司)16℃连接16小时,连接体系为:T4连接酶1uL,10Xbuffer 1uL,GF14C基因酶切片段6ul(200ng),pHQSN载体酶切片段2uL(50ng)。取1uL连接产物,用电击法转化到大肠杆菌DH5α中,转化产物涂布卡那霉素抗性的LB固体培养基。37℃培养过夜,挑10个单克隆进行提取质粒,酶切鉴定。选择两个阳性克隆进行测序检测,测序发现,扩增片段序列全长843个碱基,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,包含一个开放阅读框,为771个碱基,即为GF14C基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第32位碱基-第802位碱基序列所示,编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。并获得携带有GF14C基因的超表达载体pHQSN,命名为:超表达载体pHQSN-OX,其是将GF14C基因片段***到超表达载体pHQSN的Camv35S启动子下游的EcoR1和BglII的酶切位点之间。
2、GF14C基因的转化
采用农杆菌EHA105介导的遗传转化方法将超表达载体pHQSN-OX转入水稻品种丽江新团黑谷中。转化原代(T0代)通过PCR及定量PCR检测(GF14CqF(ACTGCTGCAGAATCTAAGGTG)和GF14CqR(CCAGAGCAATATCCTGAGCA)引物(产物长度是145bp)),从DNA水平和RNA水平鉴定阳性转化植株。阳性植株自交得到转基因1代(T1代)株系,每个株系选择10株经PCR检测为阳性的植株繁种,得到T2代植株,T2代株系再进行PCR检测,找到来源于不同T0代植株的T2代纯合株系4个(OX-4、OX-9、OX-12、OX-15)。对4个株系的幼苗叶片进行荧光定量PCR,检测目标基因GF14C的表达量,以野生型结果为对照。
荧光定量PCR鉴定GF14C基因在转基因植株中过表达效果程序如下:
取PCR检测阳性的转基因植株(OX-4、OX-9、OX-12、OX-15)三叶期幼苗叶片进行总RNA提取采用的试剂为TriZol Reagent(Invitrogen公司,其货号为:15596026),根据该试剂的说明书的步骤进行,并用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测总RNA的纯度及量,取1μg的总RNA做起始逆转录反应,所采用的逆转录酶为PrimeScript(Takara公司),逆转录反应的步骤参考该逆转录酶的使用说明。以逆转录产物为模板,采用引物GF14CqF(ACTGCTGCAGAATCTAAGGTG)和GF14CqR(CCAGAGCAATATCCTGAGCA)引物对检测GF14C基因的表达情况,采用水稻持家基因EF1a基因的EF1aqF(TTTCACTCTTGGTGTGAAGCAGAT)和EF1aqR(GACTTCCTTCACGATTTCATCGTAA)引物对检测水稻EF1a基因的表达作为内参,以野生型丽江新团黑谷作为对照。检测结果见图2。结果证明4个转基因植株系相对于野生型,GF14C基因的表达量提高。
3.GF14C基因超表达转基因植株耐盐抗性鉴定
把上述纯合的4个超表达转基因T2代株系(OX-4、OX-9、OX-12、OX-15)和野生型丽江新团黑谷植株的种子,在49℃环境下放置96h打破休眠,放置室温之后浸水36h,在30℃环境下萌发48h,选择发芽状态一致的种子播种到水培板,在培养箱中用木村营养液培养10天至3叶期之后。倒掉营养液,注入新的氯化钠浓度是120mmol/L的木村培养液。在处理前(0h)和处理后(2d、3d、4d)取叶片进行离子渗透率检测。继续在培养箱中培养7天之后,将培养液换回不含氯化钠的营养液。恢复生长10天后,统计存活率并且拍照。实验进行3次生物学重复。
结果如图3显示,在高盐处理的第4d,GF14C超表达转基因植株离子渗透率显著低于野生型对照,符合植物在逆境下的自我保护机制。同时如图4和图5显示,在野生型植株的存活率是0的盐胁迫条件下,4个GF14C超表达体系(OX-4、OX-9、OX-12、OX-15)的植株存活率分别是13%、16%、21%与26%。证明GF14C基因过表达转基因植株高盐抗性明显高于野生型。
综上所述,水稻品种BC-10的基因GF14C是水稻耐盐抗性的功能基因,超表达基因GF14C的转基因植株,其耐盐抗性有明显的提高。
序列表
<110> 广东省农业科学院水稻研究所
<120> GF14C基因在提高水稻耐盐抗性中的应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 843
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 1
cgccaccgaa gtaatccctt aattggtcaa aatgtctcgg gaggagaatg tctacatggc 60
caagctggcc gagcaggctg aaaggtatga ggagatggtt gagtacatgg agaaggttgc 120
aaagactgta gatgtggaag agctcactgt tgaggagcgc aacctcttgt ctgttgctta 180
caagaatgtg attggtgccc gccgtgcctc ctggcgtatt gtctcatcca ttgaacagaa 240
ggaggagggt cgtggcaatg aggaacatgt tactctgatc aaggagtacc gtggcaagat 300
tgaagctgag ctgagcaaga tttgcgatgg tatcctgaag ttgcttgact cacaccttgt 360
gccctcatct actgctgcag aatctaaggt gttttacctc aagatgaagg gtgattacca 420
caggtacctt gcggaattta agactggtgc cgagagaaag gaagctgctg agagcacaat 480
ggtggcttac aaggctgctc aggatattgc tctggcggat cttgctccca cccatcccat 540
aaggcttgga ctggcactta acttctctgt gttctactac gagattctaa actctccaga 600
caaggcttgc aaccttgcta agcaggcgtt tgacgaagcc atctccgagt tggataccct 660
cggggaggag tcttacaagg acagcacttt gatcatgcag ctcctgaggg acaacttgac 720
cctctggacc tctgacctca cggaggacgg tggtgatgag gtgaaagaag cctccaaggg 780
cgacgcctgc gagggccagt aaaatgggaa gatcgatcga tcgatggctc cgcatgttat 840
tgg 843
<210> 2
<211> 256
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 2
Met Ser Arg Glu Glu Asn Val Tyr Met Ala Lys Leu Ala Glu Gln Ala
1 5 10 15
Glu Arg Tyr Glu Glu Met Val Glu Tyr Met Glu Lys Val Ala Lys Thr
20 25 30
Val Asp Val Glu Glu Leu Thr Val Glu Glu Arg Asn Leu Leu Ser Val
35 40 45
Ala Tyr Lys Asn Val Ile Gly Ala Arg Arg Ala Ser Trp Arg Ile Val
50 55 60
Ser Ser Ile Glu Gln Lys Glu Glu Gly Arg Gly Asn Glu Glu His Val
65 70 75 80
Thr Leu Ile Lys Glu Tyr Arg Gly Lys Ile Glu Ala Glu Leu Ser Lys
85 90 95
Ile Cys Asp Gly Ile Leu Lys Leu Leu Asp Ser His Leu Val Pro Ser
100 105 110
Ser Thr Ala Ala Glu Ser Lys Val Phe Tyr Leu Lys Met Lys Gly Asp
115 120 125
Tyr His Arg Tyr Leu Ala Glu Phe Lys Thr Gly Ala Glu Arg Lys Glu
130 135 140
Ala Ala Glu Ser Thr Met Val Ala Tyr Lys Ala Ala Gln Asp Ile Ala
145 150 155 160
Leu Ala Asp Leu Ala Pro Thr His Pro Ile Arg Leu Gly Leu Ala Leu
165 170 175
Asn Phe Ser Val Phe Tyr Tyr Glu Ile Leu Asn Ser Pro Asp Lys Ala
180 185 190
Cys Asn Leu Ala Lys Gln Ala Phe Asp Glu Ala Ile Ser Glu Leu Asp
195 200 205
Thr Leu Gly Glu Glu Ser Tyr Lys Asp Ser Thr Leu Ile Met Gln Leu
210 215 220
Leu Arg Asp Asn Leu Thr Leu Trp Thr Ser Asp Leu Thr Glu Asp Gly
225 230 235 240
Gly Asp Glu Val Lys Glu Ala Ser Lys Gly Asp Ala Cys Glu Gly Gln
245 250 255
<210> 3
<211> 9928
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
agagatagat ttgtagagag agactggtga tttcagcgtg tcctctccaa atgaaatgaa 60
cttccttata tagaggaagg tcttgcgaag gatagtggga ttgtgcgtca tcccttacgt 120
cagtggagat atcacatcaa tccacttgct ttgaagacgt ggttggaacg tcttcttttt 180
ccacgatgct cctcgtgggt gggggtccat ctttgggacc actgtcggca gaggcatctt 240
gaacgatagc ctttccttta tcgcaatgat ggcatttgta ggtgccacct tccttttcta 300
ctgtcctttt gatgaagtga cagatagctg ggcaatggaa tccgaggagg tttcccgata 360
ttaccctttg ttgaaaagtc tcaatagccc tttggtcttc tgagactgta tctttgatat 420
tcttggagta gacgagagtg tcgtgctcca ccatgttatc acatcaatcc acttgctttg 480
aagacgtggt tggaacgtct tctttttcca cgatgctcct cgtgggtggg ggtccatctt 540
tgggaccact gtcggcagag gcatcttgaa cgatagcctt tcctttatcg caatgatggc 600
atttgtaggt gccaccttcc ttttctactg tccttttgat gaagtgacag atagctgggc 660
aatggaatcc gaggaggttt cccgatatta ccctttgttg aaaagtctca atagcccttt 720
ggtcttctga gactgtatct ttgatattct tggagtagac gagagtgtcg tgctccacca 780
tgttgggccc ggcgcgccaa gcttgcatgc ctgcaggtcc ccagattagc cttttcaatt 840
tcagaaagaa tgctaaccca cagatggtta gagaggctta cgcagcaggt ctcatcaaga 900
cgatctaccc gagcaataat ctccaggaaa tcaaatacct tcccaagaag gttaaagatg 960
cagtcaaaag attcaggact aactgcatca agaacacaga gaaagatata tttctcaaga 1020
tcagaagtac tattccagta tggacgattc aaggcttgct tcacaaacca aggcaagtaa 1080
tagagattgg agtctctaaa aaggtagttc ccactgaatc aaaggccatg gagtcaaaga 1140
ttcaaataga ggacctaaca gaactcgccg taaagactgg cgaacagttc atacagagtc 1200
tcttacgact caatgacaag aagaaaatct tcgtcaacat ggtggagcac gacacacttg 1260
tctactccaa aaatatcaaa gatacagtct cagaagacca aagggcaatt gagacttttc 1320
aacaaagggt aatatccgga aacctcctcg gattccattg cccagctatc tgtcacttta 1380
ttgtgaagat agtggaaaag gaaggtggct cctacaaatg ccatcattgc gataaaggaa 1440
aggccatcgt tgaagatgcc tctgccgaca gtggtcccaa agatggaccc ccacccacga 1500
ggagcatcgt ggaaaaagaa gacgttccaa ccacgtcttc aaagcaagtg gattgatgtg 1560
atatctccac tgacgtaagg gatgacgcac aatcccacta tccttcgcaa gacccttcct 1620
ctatataagg aagttcattt catttggaga gaacacgggg gactctagaa catggatccc 1680
tacagggtaa atttctagtt tttctccttc attttcttgg ttaggaccct tttctctttt 1740
tatttttttg agctttgatc tttctttaaa ctgatctatt ttttaattga ttggttatgg 1800
tgtaaatatt acatagcttt aactgataat ctgattactt tatttcgtgt gtctatgatg 1860
atgatgatag ttacagaacc gtcgacggat ccccgggaat tctaagagga gtccaccatg 1920
gtagatctga ctagtgttaa cgctagccac caccaccacc accacgtgtg aattacaggt 1980
gaccagctcg aatttccccg atcgttcaaa catttggcaa taaagtttct taagattgaa 2040
tcctgttgcc ggtcttgcga tgattatcat ataatttctg ttgaattacg ttaagcatgt 2100
aataattaac atgtaatgca tgacgttatt tatgagatgg gtttttatga ttagagtccc 2160
gcaattatac atttaatacg cgatagaaaa caaaatatag cgcgcaaact aggataaatt 2220
atcgcgcgcg gtgtcatcta tgttactaga tcgggaatta aactatcagt gtttgacagg 2280
atatattggc gggtaaacct aagagaaaag agcgtttatt agaataacgg atatttaaaa 2340
gggcgtgaaa aggtttatcc gttcgtccat ttgtatgtgc atgccaacca cagggttccc 2400
ctcgggatca aagtactttg atccaacccc tccgctgcta tagtgcagtc ggcttctgac 2460
gttcagtgca gccgtcttct gaaaacgaca tgtcgcacaa gtcctaagtt acgcgacagg 2520
ctgccgccct gcccttttcc tggcgttttc ttgtcgcgtg ttttagtcgc ataaagtaga 2580
atacttgcga ctagaaccgg agacattacg ccatgaacaa gagcgccgcc gctggcctgc 2640
tgggctatgc ccgcgtcagc accgacgacc aggacttgac caaccaacgg gccgaactgc 2700
acgcggccgg ctgcaccaag ctgttttccg agaagatcac cggcaccagg cgcgaccgcc 2760
cggagctggc caggatgctt gaccacctac gccctggcga cgttgtgaca gtgaccaggc 2820
tagaccgcct ggcccgcagc acccgcgacc tactggacat tgccgagcgc atccaggagg 2880
ccggcgcggg cctgcgtagc ctggcagagc cgtgggccga caccaccacg ccggccggcc 2940
gcatggtgtt gaccgtgttc gccggcattg ccgagttcga gcgttcccta atcatcgacc 3000
gcacccggag cgggcgcgag gccgccaagg cccgaggcgt gaagtttggc ccccgcccta 3060
ccctcacccc ggcacagatc gcgcacgccc gcgagctgat cgaccaggaa ggccgcaccg 3120
tgaaagaggc ggctgcactg cttggcgtgc atcgctcgac cctgtaccgc gcacttgagc 3180
gcagcgagga agtgacgccc accgaggcca ggcggcgcgg tgccttccgt gaggacgcat 3240
tgaccgaggc cgacgccctg gcggccgccg agaatgaacg ccaagaggaa caagcatgaa 3300
accgcaccag gacggccagg acgaaccgtt tttcattacc gaagagatcg aggcggagat 3360
gatcgcggcc gggtacgtgt tcgagccgcc cgcgcacgtc tcaaccgtgc ggctgcatga 3420
aatcctggcc ggtttgtctg atgccaagct ggcggcctgg ccggccagct tggccgctga 3480
agaaaccgag cgccgccgtc taaaaaggtg atgtgtattt gagtaaaaca gcttgcgtca 3540
tgcggtcgct gcgtatatga tgcgatgagt aaataaacaa atacgcaagg ggaacgcatg 3600
aaggttatcg ctgtacttaa ccagaaaggc gggtcaggca agacgaccat cgcaacccat 3660
ctagcccgcg ccctgcaact cgccggggcc gatgttctgt tagtcgattc cgatccccag 3720
ggcagtgccc gcgattgggc ggccgtgcgg gaagatcaac cgctaaccgt tgtcggcatc 3780
gaccgcccga cgattgaccg cgacgtgaag gccatcggcc ggcgcgactt cgtagtgatc 3840
gacggagcgc cccaggcggc ggacttggct gtgtccgcga tcaaggcagc cgacttcgtg 3900
ctgattccgg tgcagccaag cccttacgac atatgggcca ccgccgacct ggtggagctg 3960
gttaagcagc gcattgaggt cacggatgga aggctacaag cggcctttgt cgtgtcgcgg 4020
gcgatcaaag gcacgcgcat cggcggtgag gttgccgagg cgctggccgg gtacgagctg 4080
cccattcttg agtcccgtat cacgcagcgc gtgagctacc caggcactgc cgccgccggc 4140
acaaccgttc ttgaatcaga acccgagggc gacgctgccc gcgaggtcca ggcgctggcc 4200
gctgaaatta aatcaaaact catttgagtt aatgaggtaa agagaaaatg agcaaaagca 4260
caaacacgct aagtgccggc cgtccgagcg cacgcagcag caaggctgca acgttggcca 4320
gcctggcaga cacgccagcc atgaagcggg tcaactttca gttgccggcg gaggatcaca 4380
ccaagctgaa gatgtacgcg gtacgccaag gcaagaccat taccgagctg ctatctgaat 4440
acatcgcgca gctaccagag taaatgagca aatgaataaa tgagtagatg aattttagcg 4500
gctaaaggag gcggcatgga aaatcaagaa caaccaggca ccgacgccgt ggaatgcccc 4560
atgtgtggag gaacgggcgg ttggccaggc gtaagcggct gggttgtctg ccggccctgc 4620
aatggcactg gaacccccaa gcccgaggaa tcggcgtgac ggtcgcaaac catccggccc 4680
ggtacaaatc ggcgcggcgc tgggtgatga cctggtggag aagttgaagg ccgcgcaggc 4740
cgcccagcgg caacgcatcg aggcagaagc acgccccggt gaatcgtggc aagcggccgc 4800
tgatcgaatc cgcaaagaat cccggcaacc gccggcagcc ggtgcgccgt cgattaggaa 4860
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ggccggcatg gccagtgtgt gggattacga cctggtactg atggcggttt cccatctaac 5100
cgaatccatg aaccgatacc gggaagggaa gggagacaag cccggccgcg tgttccgtcc 5160
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gtaccgcgag atcacagaag gcaagaaccc ggacgtgctg acggttcacc ccgattactt 5460
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ggcagaagcc agatggttgt tcaagacgat ctacgaacgc agtggcagcg ccggagagtt 5580
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tttgaaggag gaggcggggc aggctggccc gatcctagtc atgcgctacc gcaacctgat 5700
cgagggcgaa gcatccgccg gttcctaatg tacggagcag atgctagggc aaattgccct 5760
agcaggggaa aaaggtcgaa aaggtctctt tcctgtggat agcacgtaca ttgggaaccc 5820
aaagccgtac attgggaacc ggaacccgta cattgggaac ccaaagccgt acattgggaa 5880
ccggtcacac atgtaagtga ctgatataaa agagaaaaaa ggcgattttt ccgcctaaaa 5940
ctctttaaaa cttattaaaa ctcttaaaac ccgcctggcc tgtgcataac tgtctggcca 6000
gcgcacagcc gaagagctgc aaaaagcgcc tacccttcgg tcgctgcgct ccctacgccc 6060
cgccgcttcg cgtcggccta tcgcggccgc tggccgctca aaaatggctg gcctacggcc 6120
aggcaatcta ccagggcgcg gacaagccgc gccgtcgcca ctcgaccgcc ggcgcccaca 6180
tcaaggcacc ctgcctcgcg cgtttcggtg atgacggtga aaacctctga cacatgcagc 6240
tcccggagac ggtcacagct tgtctgtaag cggatgccgg gagcagacaa gcccgtcagg 6300
gcgcgtcagc gggtgttggc gggtgtcggg gcgcagccat gacccagtca cgtagcgata 6360
gcggagtgta tactggctta actatgcggc atcagagcag attgtactga gagtgcacca 6420
tatgcggtgt gaaataccgc acagatgcgt aaggagaaaa taccgcatca ggcgctcttc 6480
cgcttcctcg ctcactgact cgctgcgctc ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc 6540
tcactcaaag gcggtaatac ggttatccac agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat 6600
gtgagcaaaa ggccagcaaa aggccaggaa ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt 6660
ccataggctc cgcccccctg acgagcatca caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg 6720
aaacccgaca ggactataaa gataccaggc gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc 6780
tcctgttccg accctgccgc ttaccggata cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt 6840
ggcgctttct catagctcac gctgtaggta tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa 6900
gctgggctgt gtgcacgaac cccccgttca gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta 6960
tcgtcttgag tccaacccgg taagacacga cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa 7020
caggattagc agagcgaggt atgtaggcgg tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa 7080
ctacggctac actagaagga cagtatttgg tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt 7140
cggaaaaaga gttggtagct cttgatccgg caaacaaacc accgctggta gcggtggttt 7200
ttttgtttgc aagcagcaga ttacgcgcag aaaaaaagga tctcaagaag atcctttgat 7260
cttttctacg gggtctgacg ctcagtggaa cgaaaactca cgttaaggga ttttggtcat 7320
gcattctagg tactaaaaca attcatccag taaaatataa tattttattt tctcccaatc 7380
aggcttgatc cccagtaagt caaaaaatag ctcgacatac tgttcttccc cgatatcctc 7440
cctgatcgac cggacgcaga aggcaatgtc ataccacttg tccgccctgc cgcttctccc 7500
aagatcaata aagccactta ctttgccatc tttcacaaag atgttgctgt ctcccaggtc 7560
gccgtgggaa aagacaagtt cctcttcggg cttttccgtc tttaaaaaat catacagctc 7620
gcgcggatct ttaaatggag tgtcttcttc ccagttttcg caatccacat cggccagatc 7680
gttattcagt aagtaatcca attcggctaa gcggctgtct aagctattcg tatagggaca 7740
atccgatatg tcgatggagt gaaagagcct gatgcactcc gcatacagct cgataatctt 7800
ttcagggctt tgttcatctt catactcttc cgagcaaagg acgccatcgg cctcactcat 7860
gagcagattg ctccagccat catgccgttc aaagtgcagg acctttggaa caggcagctt 7920
tccttccagc catagcatca tgtccttttc ccgttccaca tcataggtgg tccctttata 7980
ccggctgtcc gtcattttta aatataggtt ttcattttct cccaccagct tatatacctt 8040
agcaggagac attccttccg tatcttttac gcagcggtat ttttcgatca gttttttcaa 8100
ttccggtgat attctcattt tagccattta ttatttcctt cctcttttct acagtattta 8160
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tcccgctgac gccgtcccgg actgatgggc tgcctgtatc gagtggtgat tttgtgccga 8520
gctgccggtc ggggagctgt tggctggctg gtggcaggat atattgtggt gtaaacaaat 8580
tgacgcttag acaacttaat aacacattgc ggacgttttt aatgtactga attaacgccg 8640
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attgatagaa gtattttaca aatacaaata catactaagg gtttcttata tgctcaacac 8760
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gtccagacgg ccgcgcttct gcgggcgatt tgtgtacgcc cgacagtccc ggctccggat 9000
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agagcctgcg cgacggacgc actgacggtg tcgtccatca cagtttgcca gtgatacaca 9420
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tagaaaccat cggcgcagct atttacccgc aggacatatc cacgccctcc tacatcgaag 9780
ctgaaagcac gagattcttc gccctccgag agctgcatca ggtcggagac gctgtcgaac 9840
ttttcgatca gaaacttctc gacagacgtc gcggtgagtt caggcttttt catatctcat 9900
tgccccccgg gatctgcgaa agctcgag 9928
Claims (4)
1.编码提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的基因在提高水稻耐盐抗性中的应用,所述的提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的基因为GF14C基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第32位碱基-第802位碱基序列所示。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于,是用于水稻的基因遗传工程育种。
4.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于,是在水稻中超表达编码提高水稻耐盐抗性的功能蛋白的基因从而提高水稻耐盐抗性。
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Family Applications (1)
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CN111961672A (zh) * | 2020-08-04 | 2020-11-20 | 东北师范大学 | 水稻耐盐胁迫基因OsDnaJ15的克隆及应用 |
-
2021
- 2021-06-11 CN CN202110653753.2A patent/CN113373157B/zh active Active
Patent Citations (2)
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---|---|---|---|---|
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Non-Patent Citations (4)
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---|
Molecular Analysis and Expression Patterns of the 14-3-3 Gene Family from Oryza Sativa;Yuan Yao等;《Journal of Biochemistry and Molecular Biology》;20070531;第40卷(第3期);摘要,表1,图4 * |
Soy 14-3-3 protein SGF14c, a new regulator of tolerance to salt–alkali stress;Youwen Qiu等;《Plant Biotechnol Rep》;20151028(第9期);摘要 * |
The important functionality of 14-3-3 isoforms in rice roots revealed by;Zhixing Zhang等;《Journal of Proteomics》;20170222(第158期);第20-30页 * |
The Rice 14-3-3 Gene Family and its Involvement in;Fang Chen;《DNA Research》;20060421;第13卷;第53-63页 * |
Also Published As
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