CN1132620C - 一种注射用参麦无菌粉末及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
注射用参麦无菌粉末是由红参和麦冬的有效部位组成的中药注射剂，其特征是分别采用水提法提取红参和麦冬的有效成分，用大孔树脂吸附除杂并用脱色树脂脱色后经多步过滤、干燥得固体提取物，分别含人参总皂甙和麦冬总皂甙≥87%，二者以一定比例配成溶液经过滤，喷雾干燥制得注射用参麦无菌粉末，再分装即可。
Description
本发明属于制药领域，涉及一种以植物药红参和麦冬提取的有效部位加适当赋形剂组成的注射用参麦无菌粉末及其制备方法。
参麦注射剂的处方来源于明代秦景明记载的“参麦饮”古方，由红参、麦冬二味中药等量组方而成。红参味甘微苦，性微温，入脾、肺，能大补元气，补脾益气生津，宁神益智；麦冬味苦，微苦，性微寒，归心、肺、胃三经，能润肺清心、养胃生津。二药合用具有大补元气，益气固脱，养精生津之功效。参麦注射液已广泛用于临床治疗心血管、呼吸***疾病、恶性肿瘤的化疗增效减毒、腹膜透析的免疫增强等。然而该制剂含有大量色素类等杂质，为黄褐色液体，注射时刺激性大，药物有效成分皂甙在水中不稳定易水解，常使制剂产生沉淀及浑浊，制剂质量标准不完善，产品质量控制难度大。CN1086728A涉及一篇“参麦粉针剂及其制备方法”的专利，CN1122704A涉及一篇“参麦注射冻干粉”的专利，药材的提取都采用乙醇提取，浸提液颜色深，杂质尤其是脂溶性杂质多，纯化难度大，浸提液未经纯化或仅采用活性炭除杂，最后成品较粗杂，直接影响药品疗效和产品稳定性等。
本发明的目的在于提供一种制备工艺更先进、配比更科学、质量更可控，由红参和麦冬有效部位组成的注射用参麦无菌粉末的制备方法。其特征是分别采用水提法提取红参和麦冬有效成分，用大孔树脂吸附杂质并用脱色树脂脱色后经多步过滤，干燥得固体提取物，分别含人参总皂甙和麦冬总皂甙≥87％。以红参有效部位10-20g，麦冬有效部位1.0-2.0g加注射用辅料100-200g、注射用水配成500-1000ml溶液经过滤，喷雾干燥得无菌粉末，分装即可。
本发明所述注射用参麦无菌粉末的制备工艺如下
一、药材前处理
药材红参、麦冬分别经拣选、洗净、烘干、粉碎成片状或颗粒状。
二、提取
1、人参提取：
称取一定量的红参加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持2小时，过滤，药渣加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持1.5小时，过滤，药渣再加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持1小时，过滤，合并滤液，速流离心除去沉淀物得人参水提液。
2、麦冬提取：
称取一定量的麦冬加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持2小时，过滤，药渣加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持1.5小时，过滤，药渣再加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持1小时，过滤。合并三次滤液，离心除去沉淀物即得麦冬水提液。
三、纯化除杂
1、人参水提液的纯化
人参水提液用10M氢氧化钠调节pH8.5-9.5，匀速通过吸附树脂层析柱，吸附完毕后，用1％氢氧化钠洗至无色，然后用新鲜蒸馏水洗至pH中性时，用75％-85％乙醇洗脱，至无皂甙反应，洗脱后的乙醇液匀速过精制脱色树脂层析柱，收集流出液静置12-24小时，过滤，减压薄膜浓缩至无乙醇，过滤，获透明浅黄色红参提取液，无菌条件下冷冻干燥，得红参有效部位干提取物，人参总皂甙含量≥87％。
2、麦冬水提液的纯化
麦冬水提液用10M氢氧化钠调节pH8.5-9.5，匀速通过吸附树脂层析柱，过滤，用1％氢氧化钠洗层析柱至层析液无色，然后改用蒸馏水洗至pH呈中性，用75％-85％乙醇洗脱到无皂甙反应，乙醇洗脱液匀速通过脱色树脂柱，收集流过的乙醇液，静置24-48小时，过滤，减压浓缩至无乙醇。过滤，获透明浅黄色麦冬提取液，无菌条件下冷冻干燥，得麦冬有效部分干提取物，麦冬皂甙含量≥87％。
四、注射用参麦无菌粉末制备
1、配方：
人参有效部位提取物10-20g；
麦冬有效部位提取物1.0-2.0g；
注射用辅料 100-200g；
注射用水加至 500-1000ml。
2、制法：
在无菌操作室内称取辅料100-200g置无菌溶器中，加注射用水450ml，搅拌使溶解，再加10-20g红参有效部位提取物和1.0-2.0g麦冬有效部位提取物，加水补足至500-1000ml，轻轻搅拌至全部溶解，在正压条件下，用两个串连的微孔滤器过滤药液，在无菌条件下经过喷雾干燥，制成参麦无菌粉末，分装于西林瓶中，加塞，压铝盖，封瓶。5ml西林瓶每瓶装量为80-100mg，10ml西林瓶每瓶装量为160-200mg。
工艺条件筛选
一、红参有效部分浸提条件筛选
文献报道作为红参有效部分的人参皂甙一般都是采用乙醇回流浸提。用这种方法提取主要不足之处是：浸提液颜色深，杂质尤其是脂溶性杂质多，纯化难度大，工艺相对复杂，成本高。为此，本试验对红参有效部分最佳浸提条件进行了比较研究，现总结如下：
样品制备：
红参置80℃烘箱中烘12hr，用粉碎机粉碎，过20目筛。乙醇回流浸提红参皂甙：按照《四川省药品标准》186页参麦注射液制法醇浸提取红参皂甙。具体做法是：称100g红参粉置于烧瓶中，加乙醇300ml浸泡72小时，过滤，滤液备用。药渣加300ml乙醇，置水浴上回流浸提三次，每次2小时。各次提取液取样测皂甙含量。
水煮浸提红参皂甙：称100g红参粉，置于烧瓶中，加100ml蒸馏水，煮沸后在80-90℃条件下保持2小时，过滤，滤液备用。药渣再用100ml蒸馏水按前述方，式浸提两次，浸提时间分别为1.5小时和1小时，滤液分别取样，测定皂甙含量。
每处理重复3次，实验结果(见表1)表明水煮浸提红参皂甙与用乙醇回流浸提无显著差异，仅略低于乙醇提取。
表1 浸提条件对红参皂甙浸提率影响浸提方式 各次浸提率： 1 2 3 合计 总皂甙(g/100g)水煮浸提 51.6％ 26％ 18％ 95.6％ 1.75乙醇回流 58％ 27％ 15％ 100％ 1.83
但乙醇提取，成本高得多，相比较，以采用水煮浸提法较好。
麦冬有效部分浸提方法比较试验
文献报道，作为麦冬有效部分的麦冬皂甙，一般浸提也采用乙醇回流浸提，用该方法浸提麦冬皂甙色素杂质，尤其是脂溶性杂质多，加之麦冬有效成分含量本身就很低，后续纯化十分困难，工艺操作较复杂，成本高，为此，本实验对麦冬有效部分浸提最佳条件进行了研究，结果总结如下：
将麦冬置60℃烘箱中烘12hr，粉碎机粉碎成粗粉，过20目筛，备用。
乙醇回流浸提麦冬皂甙：称100g麦冬干粉于干净蒸馏瓶中，加80％乙醇500ml，回流浸提2小时，过滤备用。药渣加80％乙醇250ml回流浸提二次，各次时间为1.5小时、1小时，每次回流完毕取样测浸提液皂甙含量。
水煮浸提液麦冬皂甙：称100g麦冬粉，置蒸馏瓶中，加1升蒸馏水，煮沸后在80-90℃下保温2小时，过滤，滤液备用。药渣用1升蒸馏水水煮浸提二次，各次时间为1.5小时和1小时，每次水煮浸提完毕取样测皂甙含量。
各处理重复3次
试验结果表明水煮浸提麦冬皂甙与乙醇回流浸提麦冬皂甙无显著差异(表2)
表2 不同浸提方式对麦冬皂甙得率的影响浸提方式 各次得率
1 2 3 合计 总皂甙量(g)水煮浸提 54％ 26％ 17.6％ 97.6％ 0.165乙醇回流浸提 67％ 25％ 8％ 100％ 0.169
三、红参、麦冬皂甙精制
脱色树脂柱控制参数25ml醇液/g脱色树脂，经过该脱色柱后，红参、麦冬醇液体积分别为29.5升和28.8升，静置过夜(12hr)。用4号玻砂漏斗过滤，再用5号破砂漏斗过滤，薄膜减压浓缩(温度80-90℃，真空68cm)无醇为止。无菌条件下，再用5号玻砂漏斗过滤，冷冻干燥，分别获红参总皂甙180g，麦冬皂甙16.8g，而用醇回流浸提，并按上述方法提取，精制红参皂甙和麦冬皂甙得量分别为176.8g和15.95g。稍低于水提法，主要原因是由于杂质多，精制时皂甙损失量大所致。三批提取结果见表3、表4。
表3 三批红参总皂甙提取试验结果批号 总皂甙(g) 得率 纯度G-9804 180.2 1.80％ 94％G-9805 186.8 1.87％ 92％G-9806 166.5 1.67％ 87％
三批人参皂甙按国家药典“注射剂”项下要求进行了溶血、热原、微生物、澄明度等项检查，结果表明，三批红参总皂甙在5mg/ml浓度下，观察4小时均无溶血现象发生，热原、澄明度和微生物均完全符合要求。
表4 三批麦冬总皂甙提取试验结果批号 麦冬总皂甙(g) 得率 纯度R-9804 16.8 1.68‰ 94％R-9805 16.4 1.64‰ 92％R-9806 16.8 1.68‰ 91％
上述三批麦冬皂甙按国家药典“注射剂”项下要求进行了溶血、热原、微生物、澄明度等项检查，结果表明：三批麦冬皂甙在2.5mg/ml浓度下，观察4小时均无溶血现象发生，热原、澄明度和微生物均完全符合要求。
四、注射用参麦无菌粉末质量检查
试制注射用参麦无菌粉末1000支共三批。三批样品按1％抽样率取样，并按照国家药典“注射剂”项下要求进行检查，结果表明符合国家药典“注射剂”项下要求。见表5
表5 三批注射用无菌粉末检测结果批号 总皂甙含量*(mg/瓶) 色谱定性鉴别** 微生物 溶血 热原 澄明度
(皂甙斑数)9807 14.0 8 — — — 透明9808 13.9 8 — — — 透明9809 14.2 8 — — — 透明
*制剂含量测定采用树脂-显色法测定
**展开剂：正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶1)，载体：硅胶G。
Claims (2)
1.一种注射用参麦无菌粉末，其特征在于它是由药材红参和麦冬经拣选、洗净、烘干、粉碎成片状或颗粒状，分别称取一定量的处理过的红参和麦冬加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持2小时，过滤，药渣加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持1.5小时，过滤，药渣再加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持1小时，过滤，合并滤液，速流离心除去沉淀物得人参和麦冬水提液；人参、麦冬水提液分别用10M氢氧化钠调节PH8.5-9.5，匀速过吸附树脂层析柱，先后用1％氢氧化钠、水洗至PH中性，用75％-85％乙醇洗脱至无皂甙反应，匀速过精制脱色树脂层析柱，洗脱液静置过滤，减压浓缩至无乙醇；过滤，无菌条件下冷冻干燥，分别得红参和麦冬有效部位的固体提取物，含人参、麦冬总皂甙分别≥87％；加必要的赋形剂组成的中药注射用无菌粉末。
2.一种制备注射用参麦无菌粉末的方法，包括以下步骤：
(1)红参和麦冬经拣选、洗净、烘干、粉碎成片状或颗粒状，分别称取一定量的处理过的红参和麦冬加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持2小时，过滤，药渣加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持1.5小时，过滤，药渣再加10-20倍的水煮沸后在80-90℃保持1小时，过滤，合并三次滤液，速流离心除去沉淀物得人参和麦冬水提液；
(2)人参、麦冬水提液分别用10M氢氧化钠调节PH8.5-9.5，匀速过吸附树脂层析柱，先后用1％氢氧化钠、水洗至PH中性，用75％-85％乙醇洗脱至无皂甙反应，匀速过精制脱色树脂层析柱，洗脱液静置过滤，减压浓缩至无乙醇；过滤，无菌条件下冷冻干燥，分别得红参和麦冬有效部位的固体提取物，含人参、麦冬总皂甙分别≥87％。
(3)无菌条件下称取注射用辅料100-200g，红参有效部位10-20g、麦冬有效部位1.0-2.0g，加注射用水溶解并稀释至500-1000ml，用两个串连的微孔滤器过滤药液，喷雾干燥得参麦无菌粉末，分装、封瓶，5ml西林瓶每瓶装量80-100mg，10ml西林瓶每瓶装量160-200mg。
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| 药学通报1981,16(10) 1981-10-31 喻伟华等红参静脉注射液的制备和质量控制;中国药房1994,5(1) 1994-01-31 王志超等超滤法和水醇法制备参麦注射液的实验比较研究 * |
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