CN113197904A - 一种治疗咳嗽的中药活性成分组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于中药技术领域，公开了一种治疗咳嗽的中药活性成分组合物及其制备方法，所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸15‑35份、α‑雪松醇15‑25份、β‑谷甾醇15‑40份、甘草酸铵18‑25份组成。本发明提供的治疗咳嗽的中药活性成分组合物药效物质基础明确，由委陵菜酸、α‑雪松醇、β‑谷甾醇、甘草酸铵配伍，结构明确，组分固定且质量可控，为中药活性成分组合物的安全性和有效性奠定基础；作用机制清楚，采用经典药理学和***生物学研究相结合的方式，减少对咳嗽中枢的刺激从而达到止咳的目的；本发明的组合物能够改善体内抗氧化平衡***的紊乱，有效清除机体中的过量自由基，减轻氧化损伤。

Description

一种治疗咳嗽的中药活性成分组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种治疗咳嗽的中药活性成分组合物及其制备方法。
背景技术
目前，咳嗽是由于气管、支气管黏膜或胸膜受炎症、异物、物理或化学性刺激引起的一种常见的呼吸道症状，具有清除呼吸道异物和分泌物的保护性作用。《河间六书·咳嗽论》述：“寒、暑、燥、湿、风、火六气，皆令人咳嗽。”。其咳嗽原因不同所表现症状亦不相同，常见咳嗽分为持续性咳嗽、痉挛性咳嗽、干性咳嗽、湿性咳嗽、过敏性咳嗽、变应性咳嗽等。
咳嗽的诊断主要参考：(1)以咳逆有声或咳痰为主要临床症状；(2)急性咳嗽，外周血白细胞总数和中性粒细胞比例增高；(3)外感咳嗽，起病急，可伴有寒热等表证；内伤咳嗽，每因外感反复发作，病程较长，咳而伴喘；(4)肺部X线摄片检查，正常或肺纹理增粗；(5)听诊可闻及两肺野呼吸音增粗，或伴散在干湿性罗音。
目前，中医和西医治疗咳嗽的方式不同。中医主要根据咳嗽的病因采取合适的方式进行治疗，如使用润肺止咳药配伍清热解毒药治疗肺热咳嗽，例如用维药热感赛比斯坦颗粒止咳化痰，清肺润肺，治疗风热感冒咳嗽，呼吸道感染效果尤佳；西医治疗咳嗽以消炎为主，如使用抗病毒药物配伍抗生素等治疗感冒引起的咳嗽，例如福多斯坦配合阿莫西林治疗咳嗽痰多等。然而抗生素的大量使用，虽然一定程度上缓解了咳嗽病症，但细菌耐药性的增加，给身体健康带来了压力，而中药或中成药具有抗菌、抗病毒、调节免疫与机体机能、副作用低等特点，所以用中药治疗预防和治疗咳嗽是今后的一个重要方向。因咳嗽是目前常见的疾病，所以对此类药物制剂需求广泛。
通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：使用抗生素治疗咳嗽，细菌耐药性的增加，给身体健康带来了压力。由于抗生素耐药性自身并不是一个疾病实体，以及它看不见摸不着的特征，且抗生素耐药性所致的咳嗽病程延长、死亡率的增加等后果往往会被病人的各种临床综合症所掩盖，所以目前在检测抗生素耐药性方面以及克服细菌耐药性方面还存在着种种困难。当人类使用抗生素来杀死细菌时，在某些情况下，这些细菌可以通过自发变异基因来进行应对，这将改变它们的结构使得抗生素无法杀死它们。然后，该细菌可以通过简单的交配(技术上称为"共轭")将这些基因传递给其它细菌，而这些具有耐药性的细菌可以从一种生物传播到另一种生物。其中最棘手的部分是细菌可以在细菌种群中彼此分享这些基因，这样，它们甚至可以不必基因相似就能传递耐药性。由于体内充满了数以万亿计的不同类型的细菌，人类和动物又可以互相传递这些具有抗药性的细菌。此外，在所有这些问题中，最关键的是我们可以在自己的身体内部让那些具有耐药性的细菌彼此传播。因此，即便一个人或动物在生命中只接触过一次抗生素，它们也可能包含有容易传播的变异细菌。而抗生素的大量使用，致使了病原体很快形成了耐药性，从而导致机体的免疫***功能下降。
而中药成分组合物经过传统的中草药炮制技术和超微破壁粉碎工艺制成以及现代萃取技术相结合的应用，很好的保留了中成药的天然结构和生物活性，在增免疫、抗病毒方面有着独特的优势，同时，由于原料天然、绿色、无公害、产品安全高效，无耐药性，可以有效减少抗生素的使用和抗生素的替代。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种治疗咳嗽的中药活性成分组合物及其制备方法。
本发明是这样实现的，一种用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其他疾病的化合物，所述用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其他疾病的化合物选自委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵中的一种或多种。
进一步，所述用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的疾病的化合物的立体异构体、药学上可接受的盐，或者化合物药学上可接受的酯类，或酰胺类或溶剂化物或其水合物分散片、薄膜衣片、胶囊、干混悬剂、颗粒剂、固体制剂、注射剂、外用制剂、喷剂、液体制剂、或复方制剂，在药物制备中的应用，其特征在于，所述药物用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其它疾病。
本发明的另一目的在于提供一种应用所述用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其他疾病的化合物的治疗咳嗽的中药活性成分组合物，所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸10-40份、α-雪松醇10-30份、β-谷甾醇10-40份、甘草酸铵15-30份组成。
进一步，所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸15-35份、α-雪松醇15-25份、β-谷甾醇15-40份、甘草酸铵18-25份组成。
进一步，所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸20-30份、α-雪松醇18-25份、β-谷甾醇20-35份、甘草酸铵20-25份组成。
进一步，所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由组成委陵菜酸25-28份、α-雪松醇23-25份、β-谷甾醇25-30份、甘草酸铵23-25份组成。
本发明的另一目的在于提供一种所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物在制备治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物的应用方法，所述咳嗽以及呼吸道疾病包括：持续性咳嗽、干咳、湿咳和咳嗽引起的呼吸道感染、肺炎、咳嗽变异性哮喘、肺气肿以及胸膜炎。
进一步，所述咳嗽包括发热、咽痒、咳痰、胸闷、气喘；所述呼吸道感染呼吸道黏膜发炎、慢性咽炎、慢性支气管炎；所述肺炎包括高热、脓性痰、呼吸困难、胸痛；所述咳嗽变异性哮喘包括刺激性干咳；所述肺气肿包括乏力、体重下降、食欲减退、上腹胀满、呼吸困难；所述胸膜炎包括胸痛、咳嗽、胸闷、气急、呼吸困难。
本发明的另一目的在于提供一种应用所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物制备的治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物，所述治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物包括：治疗咳嗽的中药活性成分组合物与一种或多种药学可接受的载体或惰性辅料；所述药学可接受的载体或惰性辅料包括：稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、矫味剂；所述矫味剂包括香味剂、甜味剂。
进一步，所述治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物为药学可接受的剂型；所述药学可接受的剂型为液体制剂、颗粒剂、丸剂、片剂。
本发明的另一目的在于提供一种治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物的制备方法，所述治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物的制备方法包括进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物液体制剂的制备，进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物颗粒剂的制备，进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物丸剂的制备，进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物片剂的制备。
进一步，相关中药有效成分的提取制备，包括：
委陵菜酸的提取：
1)以榅桲子为原料，先用乙醇溶液提取，提取液浓缩后，依次用石油醚、三氯甲烷室温萃取，去掉石油醚、三氯甲烷馏分后，再用乙酸乙酯萃取，萃取液回收乙酸乙酯，浓缩至膏状，干燥得到粗提物；2)粗提物先上硅胶色谱柱进行洗脱，洗脱剂为三氯甲烷、甲醇和水的混合物，先经第一次制备型HPLC，然后经Sephadex LH-20柱层析，最后经第二次制备型HPLC；层析和两次HPLC的流动相均为甲醇溶液，最后可得到高纯度的产品。
α-雪松醇的提取：
称量干燥的巴旦木细粉，过40目筛备用，将盛有一定量水的漏斗置于克氏蒸馏头上，150mL水和苯甲醛放入蒸馏甁中并置于热源上，装好冷凝管和接收瓶。将烧瓶中的水和巴旦木细粉加热至沸，当水蒸汽与化合物一起蒸出时，从分液漏斗逐渐加水。蒸馏过程中，混浊液随热蒸气冷凝集聚在接受甁中，当蒸馏近结束时，蒸出液由混浊变澄清。有机物和水的混合物蒸气经过冷凝管冷凝成乳浊液进入接受器。再将水和有机物的混合物置于分液漏斗中，取有机层，再经过重结晶的方法得到该产物。
β-谷甾醇的提取：
将黄瓜籽烘干后粉碎，过40目筛，称取10.0g置于圆底烧瓶中，加入75％乙醇100ml，在索式回流器回流提取100min，第二次用50ml75％的乙醇回流80min，第三次加50ml75％的乙醇回流60min。回流结束后，合并3次回流液，在旋转蒸发仪上减压蒸发，回收乙醇，残留物加入***溶解，过滤，滤液置于分液漏斗中，先加入蒸馏水使***呈水饱和状态，再加入5％的NaOH溶液振摇，静置分层，重复三次，合并水液，加盐酸调PH为3左右，再加入水饱和***萃取3次，水浴蒸干溶剂，得到β-谷甾醇产物。
甘草酸铵的提取：
将甘草原料烘干后粉碎，过40目筛，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤渣同法再处理一次，合并滤液，蒸至近干，残渣加甲醇适量溶解，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀滤过，取续滤液，再经大孔吸附树脂处理后，减压蒸干，即得。
进一步，所述进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物液体制剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；将治疗咳嗽的中药活性成分组合物溶于10ml的已过滤的纯净水中得到混合液；向混合液中加入混合液质量千分之一的DMSO，涡旋3分钟，对混合物进行完全溶解，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物。
进一步，所述进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物颗粒剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；向治疗咳嗽的中药活性成分组合物中加入麦芽糊精、微晶纤维素、滑石粉，得混合粉末；向混合粉末中加入体积分数为5％的淀粉浆制软材，将软材过筛，得到湿颗粒；将湿颗粒干燥，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物颗粒剂。
进一步，所述进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物片剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；向治疗咳嗽的中药活性成分组合物中加入载体或赋形剂，湿法制粒后压片包衣，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物片剂。
进一步，所述进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物丸剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；向治疗咳嗽的中药活性成分组合物中加入载体或赋形剂，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物丸剂。
结合上述的所有技术方案，本发明所具备的优点及积极效果为：本发明将热感赛比斯坦颗粒中的榅桲子、巴旦木、黄瓜籽、甘草四种原材料中提取出来的委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵的这几个功能成分组合成一个复方药物组合物，在制备成制剂时，本发明所用功能成分群总重量远远低于热感赛比斯坦颗粒原材料水煎液或提取物组合的活性成分总重量，这对制备成制剂应用提供了很大的方便。在本发明中各原料之间协同配合增强，具有很好的清热败火、散瘀止痛、镇咳止咳的作用，从根本上达到燥湿祛痰、对干咳，喉咙疼痛以及支气管炎等均有显著的治疗效果，见效快，毒副作用小。
本发明提供的中药活性成分组合物药效物质基础明确，由委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵配伍，结构明确，组分固定且质量可控，为中药活性成分组合物的安全性和有效性奠定基础；作用机制清楚：采用经典药理学和***生物学研究相结合的方式，通过药效学研究证实该中药活性成分组合物可有效减少小鼠血清中的TNF-α、IL-6、IL-13、TLR2、IgE等细胞因子及炎性介质的释放，进而减轻气道感染性及***性炎性反应来降低咳嗽的高敏感性，减少对咳嗽中枢的刺激从而达到止咳的目的，此外，本发明的组合物也有效提高了小鼠肺组织中SOD的含量，同时减少小鼠肺组织中MDA的含量，来改善体内抗氧化平衡***的紊乱，有效清除机体中的过量自由基，减轻氧化损伤。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例提供的6组小鼠经辣椒素雾化诱咳后的咳嗽潜伏期比较示意图。
图2是本发明实施例提供的6组小鼠经辣椒素雾化诱咳后的咳嗽次数比较示意图。
图3是本发明实施例提供的4组小鼠在不同的给药情况下止咳率比较示意图。
图4是本发明实施例提供的6组小鼠在不同的处理方式下血清中炎症因子的比较示意图。
图5是本发明实施例提供的6组小鼠在不同处理方式下SOD、MDA水平比较示意图。
图6是本发明实施例提供的6组小鼠在不同处理方式下SOD、MDA水平比较效果图。
图7是本发明实施例提供的6组小鼠经辣椒素雾化诱咳后的排痰量比较示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本/释本发明，并不用于限定本发明。
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种治疗咳嗽的中药活性成分组合物及其制备方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。
本发明实施例提供的用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其他疾病的化合物选自委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵中的一种或多种。
本发明实施例提供的用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的疾病的化合物的立体异构体、药学上可接受的盐，或者化合物药学上可接受的酯类，或酰胺类或溶剂化物或其水合物分散片、薄膜衣片、胶囊、干混悬剂、颗粒剂、固体制剂、注射剂、外用制剂、喷剂、液体制剂、或复方制剂，在药物制备中的应用，其特征在于，所述药物用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其它疾病。
本发明实施例提供的治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸10-40份、α-雪松醇10-30份、β-谷甾醇10-40份、甘草酸铵15-30份组成。
本发明实施例提供的治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸15-35份、α-雪松醇15-25份、β-谷甾醇15-40份、甘草酸铵18-25份组成。
本发明实施例提供的治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸20-30份、α-雪松醇18-25份、β-谷甾醇20-35份、甘草酸铵20-25份组成。
本发明实施例提供的治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由组成委陵菜酸25-28份、α-雪松醇23-25份、β-谷甾醇25-30份、甘草酸铵23-25份组成。
本发明实施例提供的咳嗽以及呼吸道疾病包括：持续性咳嗽、干咳、湿咳和咳嗽引起的呼吸道感染、肺炎、咳嗽变异性哮喘、肺气肿以及胸膜炎。
本发明实施例提供的咳嗽包括发热、咽痒、咳痰、胸闷、气喘；所述呼吸道感染呼吸道黏膜发炎、慢性咽炎、慢性支气管炎；所述肺炎包括高热、脓性痰、呼吸困难、胸痛；所述咳嗽变异性哮喘包括刺激性干咳；所述肺气肿包括乏力、体重下降、食欲减退、上腹胀满、呼吸困难；所述胸膜炎包括胸痛、咳嗽、胸闷、气急、呼吸困难。
本发明实施例提供的治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物包括：治疗咳嗽的中药活性成分组合物与一种或多种药学可接受的载体或惰性辅料；所述药学可接受的载体或惰性辅料包括：稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、矫味剂；所述矫味剂包括香味剂、甜味剂。
本发明实施例提供的治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物为药学可接受的剂型；所述药学可接受的剂型为液体制剂、颗粒剂、丸剂、片剂。
本发明实施例提供的治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物的制备方法包括进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物液体制剂的制备，进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物颗粒剂的制备，进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物丸剂的制备，进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物片剂的制备。
本发明实施例提供的进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物液体制剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；将治疗咳嗽的中药活性成分组合物溶于10ml的已过滤的纯净水中得到混合液；向混合液中加入混合液质量千分之一的DMSO，涡旋3分钟，对混合物进行完全溶解，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物。
本发明实施例提供的进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物颗粒剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；向治疗咳嗽的中药活性成分组合物中加入麦芽糊精、微晶纤维素、滑石粉，得混合粉末；向混合粉末中加入体积分数为5％的淀粉浆制软材，将软材过筛，得到湿颗粒；将湿颗粒干燥，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物颗粒剂。
本发明实施例提供的进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物片剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；向治疗咳嗽的中药活性成分组合物中加入载体或赋形剂，湿法制粒后压片包衣，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物片剂。
本发明实施例提供的进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物丸剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；向治疗咳嗽的中药活性成分组合物中加入载体或赋形剂，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物丸剂。
下面结合实施例对本发明作进一步描述。
实施例1
称取委陵菜酸10mg，α-雪松醇10mg，β-谷甾醇10mg，甘草酸铵15mg，总重量为45mg，研磨成粉后混合，溶于10ml的已过滤的纯净水中，再加入千分之一的DMSO，涡旋3分钟混合物完全溶解，得到本发明的组合物。
实施例2
该组合物由以下成分制备得到：委陵菜酸15g，α-雪松醇10g，β-谷甾醇10g，甘草酸铵15g。
取上述组分，加入赋形剂或载体，根据现有颗粒剂制备方法可得。
该组合物颗粒剂可采用下述现有方法制得：
称取上述组合物原料，研磨成粉后混合均匀，而后加入麦芽糊精，微晶纤维素，滑石粉适量，得混合粉末，然后向混合粉末中加入体积分数为5％的淀粉浆制软材，将软材过筛，得到湿颗粒，最后将湿颗粒干燥，即得到该组合物的颗粒剂。
实施例3
该中药活性成分组合物片剂，由以下成分制得：委陵菜酸30g，α-雪松醇20g，β-谷甾醇20g，甘草酸铵25g。
取上述组分，参照实施例2加入载体或赋形剂，湿法制粒后压片包衣，制得该组合物片剂。
实施例4
该组合物丸剂，由以下组分制备得到：委陵菜酸28g，α-雪松醇23g，β-谷甾醇25g，甘草酸铵25g。
取上述组分，加入载体或赋形剂，根据现有丸剂制备方法制得该组合物丸剂。
应该说明的是，上述组合物剂型制备方法只是示例性的，并不对本发明所保护的范围做限制，为了制备该组合物颗粒剂、丸剂或片剂，还可以采用此领域通常使用的技术，在此不一一举出。
实施例5
以实施例1制得的组合物进行药理学实验来说明本发明治疗咳嗽的效果。
Balb/c小鼠，体重18-25g，共用48只小鼠。随机分为空白组、模型组、热感赛比斯坦颗粒组、中药活性成分组合物低剂量组、中药活性成分组合物中剂量组、中药活性成分组合物高剂量组，每组8只，实验时除空白组外，对其它五组进行烟熏，0.4mg/ml的LPS滴鼻，30mg/ml甲状腺素灌胃，造模成功后，热感赛比斯坦颗粒组、中药活性成分组合物组灌胃给予相应药物，空白组和模型组给予生理盐水。
1、小鼠咳嗽敏感性测定
末次给药24h后，用辣椒素作为诱咳液雾化小鼠3min，观察小鼠5min内的咳嗽次数。
2、抗炎作用实验
采用眼球摘取法收集各组的外周全血，4℃，4500r/min的条件下离心10min，取上清即为小鼠血清，采用ELISA法测定各组小鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-13、TLR2、TGF-β1、IgE的水平含量。
3、抗氧化作用实验
各组小鼠眼球取血完毕后,立即取出部分肺组织放入冻存管中于-20℃下冻存，用预冷的PBS缓冲液冲洗肺组织，取部分肺组织进行组织匀浆，5000rpm离心10min后取上清，采用ELISA法检测各组小鼠肺组织中SOD、MDA的水平含量。
4、祛痰作用实验
4.1酚红曲线的绘制
精密称取酚红0.010g，置于容量瓶中，加入5％碳酸氢钠溶液至100ml，分别吸取该酚红溶液0.025、0.075、0.125、0.175、0.250、1.250、2.500ml置于25ml容量瓶中、用5％碳酸氢钠溶液稀释至刻度，摇匀，避光放置30min，于754-型紫外可见分光光度计546nm处测定吸收度，以浓度为横坐标，吸收度为纵坐标作出标准曲线。
4.2操作方法
如上述实验分组一致，末次给药1h后，腹腔注射浓度为0.1ml/10g的酚红溶液，半小时后处死，剥去气管周围组织，取出甲状软骨至气管分支的一段气管，放入盛有生理盐水的试管中，再加入0.1mmol的NaOH，避光放置30min后，在紫外可见分光光度计546nm处测定吸光度，根据4.1制得的标准曲线计算酚红含量。
5、结果
(1)小鼠咳嗽敏感性情况
经辣椒素雾化诱咳后，空白组小鼠的咳嗽潜伏期较长，咳嗽次数少，模型组以及给药组的小鼠的咳嗽潜伏期有不同程度的缩短以及咳嗽次数增多；与模型组相比，阳性药组和给药组小鼠的咳嗽潜伏期和咳嗽次数有不同程度的延长和减少，差异均具有统计学意义(如表1、图1、图2、图3所示)。
表1中药成分组合物对辣椒素诱咳小鼠的影响(n＝8)
Figure BDA0003001015240000121
Figure BDA0003001015240000131
注：与空白组相比，P<0.05；与模型组相比，P<0.05.
(2)抗炎作用
与空白组比较，模型组小鼠TLR2、TNF-α、IL-6、IL-13、IgE水平含量均显著升高，阳性组以及给药组小鼠血清中的水平含量稍有增高；但与模型组比较，阳性组和给药组小鼠血清中其水平含量均降低。结果表明该中药活性成分组合物可呈剂量依赖性减少小鼠血清中的IL-6、IL-13、TLR2、TNF-α、TNF-α、IgE的水平含量(如图4所示)。
(3)抗氧化作用
与空白组相比，模型组小鼠肺组织中SOD水平含量显著下降，MDA水平升高，阳性组和给药组SOD水平含量稍有下降，MDA水平有所上升；与模型组相比，阳性组和给药组SOD水平含量较高，MDA水平较低。结果表明：该组合物可有效增高小鼠肺组织中SOD水平含量，降低小鼠肺组织中的MDA水平(如图5、图6所示)。
(4)祛痰作用
与模型组比较，中药活性成分组合物组和阳性对照组均能明显增加小鼠气管酚红排泌量，且随着组合物的剂量的增加，小鼠气管酚红排泌量增加，祛痰作用更明显，并呈剂量-效应关系；与阳性对照比较，高剂量的中药活性成分组合物组的祛痰作用更明显(如图7所示)。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其他疾病的化合物，其特征在于，所述用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其他疾病的化合物选自委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵中的一种或多种。
2.如权利要求1所述用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的疾病的化合物，其特征在于，所述用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的疾病的化合物的立体异构体、药学上可接受的盐，或者化合物药学上可接受的酯类，或酰胺类或溶剂化物或其水合物分散片、薄膜衣片、胶囊、干混悬剂、颗粒剂、固体制剂、注射剂、外用制剂、喷剂、液体制剂、或复方制剂，在药物制备中的应用，其特征在于，所述药物用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其它疾病。
3.一种如权利要求1～2所述用于治疗咳嗽以及咳嗽引起的其他疾病的化合物的治疗咳嗽的中药活性成分组合物，其特征在于，所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸10-40份、α-雪松醇10-30份、β-谷甾醇10-40份、甘草酸铵15-30份组成。
4.如权利要求3所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物，其特征在于，所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸15-35份、α-雪松醇15-25份、β-谷甾醇15-40份、甘草酸铵18-25份组成。
5.如权利要求3所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物，其特征在于，所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由委陵菜酸20-30份、α-雪松醇18-25份、β-谷甾醇20-35份、甘草酸铵20-25份组成。
6.如权利要求3所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物，其特征在于，所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物按照质量份数计由组成委陵菜酸25-28份、α-雪松醇23-25份、β-谷甾醇25-30份、甘草酸铵23-25份组成。
7.一种如权利要求3～6任意一项所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物在制备治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物的应用方法，其特征在于，所述咳嗽以及呼吸道疾病包括：持续性咳嗽、干咳、湿咳和咳嗽引起的呼吸道感染、肺炎、咳嗽变异性哮喘、肺气肿以及胸膜炎。
8.如权利要求7所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物在制备治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物的应用方法，其特征在于，所述咳嗽包括发热、咽痒、咳痰、胸闷、气喘；所述呼吸道感染呼吸道黏膜发炎、慢性咽炎、慢性支气管炎；所述肺炎包括高热、脓性痰、呼吸困难、胸痛；所述咳嗽变异性哮喘包括刺激性干咳；所述肺气肿包括乏力、体重下降、食欲减退、上腹胀满、呼吸困难；所述胸膜炎包括胸痛、咳嗽、胸闷、气急、呼吸困难。
9.一种应用如权利要求3～6任意一项所述治疗咳嗽的中药活性成分组合物制备的治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物，其特征在于，所述治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物包括：治疗咳嗽的中药活性成分组合物与一种或多种药学可接受的载体或惰性辅料；所述药学可接受的载体或惰性辅料包括：稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、矫味剂；所述矫味剂包括香味剂、甜味剂；
所述治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物为药学可接受的剂型；所述药学可接受的剂型为液体制剂、颗粒剂、丸剂、片剂。
10.一种如权利要求9所述治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物的治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物的制备方法，其特征在于，所述治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物的制备方法包括进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物液体制剂的制备，进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物颗粒剂的制备，进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物丸剂的制备，进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物片剂的制备；
所述进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物液体制剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；将治疗咳嗽的中药活性成分组合物溶于10ml的已过滤的纯净水中得到混合液；向混合液中加入混合液质量千分之一的DMSO，涡旋3分钟，对混合物进行完全溶解，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物；
所述进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物颗粒剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；向治疗咳嗽的中药活性成分组合物中加入麦芽糊精、微晶纤维素、滑石粉，得混合粉末；向混合粉末中加入体积分数为5％的淀粉浆制软材，将软材过筛，得到湿颗粒；将湿颗粒干燥，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物颗粒剂；
所述进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物片剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；向治疗咳嗽的中药活性成分组合物中加入载体或赋形剂，湿法制粒后压片包衣，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物片剂；
所述进行治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物丸剂的制备，包括：
按质量份数称取委陵菜酸、α-雪松醇、β-谷甾醇、甘草酸铵，研磨成粉后混合，得到治疗咳嗽的中药活性成分组合物；向治疗咳嗽的中药活性成分组合物中加入载体或赋形剂，得到治疗咳嗽以及呼吸道疾病药物丸剂。
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