CN112730688B - 一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法 - Google Patents

一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法，包括以下步骤：取罗布麻叶配方颗粒0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入提取溶剂，提取10‑30min，放冷，摇匀，滤过，取续滤液；取金丝桃苷、咖啡酸、绿原酸、紫云英苷、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷对照品适量，加70%甲醇制成溶液；柱长为250 mm，内径为4.6 mm，硅胶粒径为5μm；二极管阵列检测器，检测波长为220‑360nm；柱温：20℃‑30℃；流速：0.8‑1.2mL/min；流动相：以乙腈为流动相A，以0.2%磷酸溶液为流动相B，梯度脱洗；分别精密吸取参照物溶液、对照药材溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定。

Description

一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法
技术领域
本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法。
背景技术
罗布麻直立半灌木，高1.5-3米，一般高约2米，最高可达4米；枝条对生或互生，圆筒形，光滑无毛，***或淡红色。叶对生，仅在分枝处为近对生，叶片椭圆状披针形至卵圆状长圆形，长1-5厘米，宽0.5-1.5厘米，顶端急尖至钝，具短尖头，基部急尖至钝，叶缘具细牙齿，两面无毛；叶脉纤细，在叶背微凸或扁平，在叶面不明显，侧脉每边10-15条，在叶缘前网结；叶柄长3-6毫米；叶柄间具腺体，老时脱落。罗布麻叶，中药材名。本品为夹竹桃科植物罗布麻的叶。夏季采收，除去杂质，干燥。功能主治为：清泻肝火、平肝熄风。用于肝火炽盛之头痛眩晕、惊风抽搐。本品有降低血压的作用。目前对于罗布麻叶配方颗粒的定性研究文献较为缺少，对罗布麻叶配方颗粒质量监控困难。
发明内容
为解决前述问题，本发明提供了一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)、供试品溶液的制备：取罗布麻叶配方颗粒0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入提取溶剂，称定重量，提取10-30min，放冷，再称定重量，用提取溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(2)、参照物溶液的制备：取罗布麻叶对照药材0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；取金丝桃苷、咖啡酸、绿原酸、紫云英苷、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷对照品适量，精密称定，加70％甲醇制成溶液；
(3)、色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250mm，内径为4.6mm，硅胶粒径为5μm；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为220-360nm；柱温：20℃-30℃；流速：0.8-1.2mL/min；流动相：以乙腈为流动相A，以0.2％磷酸溶液为流动相B，梯度脱洗；
(4)、测试：分别精密吸取参照物溶液、对照药材溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
优选的，步骤(1)中，所述供试品提取溶剂为乙醇或50％乙醇或50％甲醇或70％甲醇或甲醇或水。
优选的，步骤(1)中，所述提取方式为回流提取或超声提取。
优选的，步骤(1)中，所述提取溶剂为50mL。
优选的，步骤(1)中，所述提取时间为10min或20min或30min。
优选的，步骤(2)中，取金丝桃苷、咖啡酸、绿原酸、紫云英苷、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷对照品适量，精密称定，加70％甲醇制成每1mL各含30μg的溶液，即得。
优选的，步骤(3)中，所述色谱条件如下：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250mm，内径为4.6mm，硅胶粒径为5μm；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为320nm，理论板数按金丝桃苷计算应不低于8000；柱温：25℃；流速：1.0mL/min；流动相：以乙腈为流动相A，以0.2％磷酸溶液为流动相B，梯度脱洗；梯度洗脱程序为：
0-10min，流动相A由11％(v/v)升至15％(v/v)；
10-15min，流动相A保持15％(v/v)；
15-25min，流动相A由15％(v/v)升至20％(v/v)；
25-40min，流动相A由20％(v/v)升至25％(v/v)；
40-55min，流动相A由25％(v/v)升至40％(v/v)。
优选的，所述的特征图谱中中应呈现7个特征峰，其中与金丝桃苷参照物相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±8％之内，各峰规定值为：峰1 0.272、峰2 0.408、峰3 0.443、峰4 0.541、峰5 1.000(S)、峰6 1.025、峰71.194。
本技术方案的有益效果如下：
(1)本发明的HPLC特征图谱检测方法，可以比较全面地反映罗布麻叶配方颗粒所含化学成分的种类和数量，能够更加有效地体现出罗布麻叶配方颗粒中成分的整体性和综合作用。
(2)本发明的罗布麻叶配方颗粒的HPLC特征图谱检测方法，以相应的罗布麻叶对照药材以及化学对照品作为对照，一方面表明了罗布麻叶配方颗粒和罗布麻叶对照药材之间的化学成分对应关系，且方法简单，稳定性好，精密度高；另一方面罗布麻叶配方颗粒可能与其他部分中药配方颗粒性状上相似，无法从其性状上鉴别其是否为罗布麻叶，通过此方法，能够有效的对罗布麻叶配方颗粒进行鉴别，为罗布麻叶配方颗粒的鉴别提供了新方法，防止临床上配方颗粒的混用，保证用药安全。
附图说明
图1为金丝桃苷紫外吸收光谱图；
图2为咖啡酸紫外吸收光谱图；
图3为绿原酸紫外吸收光谱图；
图4为紫云英苷紫外吸收光谱图；
图5为新绿原酸紫外吸收光谱图；
图6为隐绿原酸紫外吸收光谱图；
图7为异槲皮苷紫外吸收光谱图；
图8为罗布麻叶配方颗粒不同波长色谱图；
图9为罗布麻叶配方颗粒采用不同柱温时的色谱图；
图10为罗布麻叶配方颗粒采用不同流速时的色谱图；
图11为罗布麻叶配方颗粒采用不同溶剂时的色谱图；
图12为罗布麻叶配方颗粒采用不同提取方式时的色谱图；
图13为罗布麻叶配方颗粒采用不同提取时间时的色谱图；
图14为罗布麻叶配方颗色谱图的色谱峰指认；
图15为罗布麻叶配方颗粒采用不同仪器时的色谱图；
图16为罗布麻叶配方颗粒采用不同色谱柱时的色谱图；
图17为3批罗布麻叶配方颗粒特征图谱验证图；
图18为罗布麻叶配方颗粒对照特征图谱；峰1：新绿原酸；峰2：绿原酸；峰3：隐绿原酸；峰4：咖啡酸；峰5：金丝桃苷；峰6：异槲皮苷；峰7：紫云英苷。
具体实施方式
1、实验仪器及材料
高效液相色谱仪：岛津20-AT高效液相色谱仪、安捷伦1260型高效液相色谱仪、Waters2998-e2695型高效液相色谱仪；
电子天平：ME204E/02、MS205DU、XP26(梅特勒-托利多仪器有限公司)；
超纯水机：细胞型1810A(上海摩勒科学仪器有限公司)；
超声波清洗器：KQ5200DB型(600W，40KHz；昆山市超声仪器有限公司)；
色谱柱：AgiLent 5TC-C18(2)250×4.6mm(安捷伦)、KromasiL C18 5μm 4.6×250mm、岛津5μm C18 250×4.60mm。
金丝桃苷(中国食品药品检定研究院，批号：111521-201708，含量以95.1％计)，
咖啡酸(中国食品药品检定研究院，批号：110885-201703，含量以99.7％计)，
绿原酸(中国食品药品检定研究院，批号：110753-201415，含量以96.2％计)，
紫云英苷(四川省维克奇生物科技有限公司，批号：wkq17111511)，
新绿原酸(成都普菲德生物技术有限公司，批号：17062003，含量以98％计)，
隐绿原酸(成都普菲德生物技术有限公司，批号：17061401，含量以98％计)，
异槲皮苷(中国食品药品检定研究院，批号：111809-201403，含量以92.9％计)，
罗布麻叶对照药材(中国食品药品检定研究院，批号：120979-201505)。
乙腈(SIGMA公司，色谱纯)；水为超纯水，其它试剂均为分析纯。
罗布麻叶配方颗粒GR-LBMY-01、GR-LBMY-02、GR-LBMY-03。
2、拟定高效液效检测方法
参照物溶液的制备取金丝桃苷、咖啡酸、绿原酸、紫云英苷、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷对照品适量，精密称定，加70％甲醇制成每1mL各含30μg的溶液，即得。
对照药材溶液的制备取罗布麻叶对照药材0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率600W，频率40kHz)20分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品，混匀，取适量，研细，取罗布麻叶配方颗粒0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇50mL，称定重量，超声20分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250mm，内径为4.6mm，硅胶粒径为5μm；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为320nm，理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于8000；柱温：25℃；流速：1.0mL/min；流动相：以乙腈为流动相A，以0.2％磷酸溶液为流动相B，梯度脱洗；梯度洗脱程序为：
0-10min，流动相A由11％(v/v)升至15％(v/v)；
10-15min，流动相A保持15％(v/v)；
15-25min，流动相A由15％(v/v)升至20％(v/v)；
25-40min，流动相A由20％(v/v)升至25％(v/v)；
40-55min，流动相A由25％(v/v)升至40％(v/v)。
测定法分别精密吸取参照物溶液，对照药材溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
3、色谱条件考察
3.1、波长考察
在以上拟定的实验条件基础上，利用二极管阵列检测器分别对金丝桃苷、咖啡酸、绿原酸、紫云英苷、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷、供试品溶液进行全波段扫描，并分别提取供试品溶液在220nm、250nm、270nm、286nm、300nm、320nm、340nm、360nm波长下的色谱图。如图1-图8所示。
结果表明，在检测波长为320nm时色谱峰信息量较大，色谱图基线更平稳，故检测波长确定为320nm。
3.2、柱温考察
在以上拟定的实验条件基础上，分别对柱温为20℃、25℃、30℃时进行考察。如图9所示和表1。
表1柱温考察—特征峰相对保留时间比值
Figure GDA0003565769980000051
结果表明，柱温对各色谱峰的相对保留时间影响不大，各柱温条件下，色谱图峰形均较为对称，分离度均好，故最终选择25℃作为罗布麻叶配方颗粒特征图谱方法的柱温。
3.3、流速考察
在以上拟定的实验条件基础上，分别对流速为0.8mL/min、1mL/min、1.2mL/min时进行了考察。如图10所示和表2。
表2流速考察—特征峰相对保留时间
Figure GDA0003565769980000052
结果表明，流速分别为0.8mL/min、1.0mL/min、1.2mL/min时，各特征峰的相对保留时间RSD为0.22％～9.96％，在流速为1.0mL/min时，色谱图峰形较好，分离度适中。故流速确定为1.0mL/min。
4、供试品溶液的制备考察
4.1、提取溶剂考察
考察了乙醇、50％乙醇、50％甲醇、70％甲醇、甲醇、水作为提取溶媒，结果表明，用70％甲醇作为提取溶剂所得的色谱峰信息量大，分离度好，故选用70％甲醇作为提取溶剂。如图11所示。
4.2、提取方式考察
比较了回流提取与超声提取，色谱峰信息大致相同，最终选择操作简便的超声进行提取。如图12所示。
4.3、提取时间考察
比较了超声提取10分钟、20分钟、30分钟，最终选择超声提取20分钟。如图13所示。
4.4、最终确定供试品制备方法
取本品颗粒(批号：GR-LBMY-01)0.25g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇50mL，称定重量，超声20分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
5、方法学考察
5.1、色谱峰指认
供试品溶液的制备：按以上拟定的实验条件，制备罗布麻叶配方颗粒供试品溶液。
参照物溶液的制备：取金丝桃苷、槲皮素、咖啡酸、绿原酸、紫云英苷、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷对照品适量，精密称定，加70％甲醇制成每1mL各含30μg的溶液，即得。
对照药材溶液的制备：取罗布麻叶对照药材约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率600W，频率40kHz)20分钟，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
阴性对照溶液的制备：按以上拟定的实验条件，制备缺罗布麻叶配方颗粒阴性对照溶液。
对罗布麻叶配方颗粒特征图谱峰进行定位。如图14所示。
5.2、精密度试验
取罗布麻叶配方颗粒(批号：GR-LBMY-01)供试品溶液，按拟定实验方法连续进样6次，每次10μL，计算各特征峰的相对保留时间及相对峰面积。如表3和表4所示。
表3精密度考察-保留时间
Figure GDA0003565769980000061
表4精密度考察-峰面积
Figure GDA0003565769980000071
结果表明，该仪器精密度良好。
5.3、重复性考察
精密称取罗布麻叶配方颗粒(批号：GR-LBMY-01)6份，按拟定实验方法进行制备及测定。如表5和表6所示。
表5重复性考察-相对保留时间比值
Figure GDA0003565769980000072
表6重复性考察-相对峰面积比值
Figure GDA0003565769980000073
Figure GDA0003565769980000081
结果表明，该方法重复性好。
5.4、中间精密度考察
5.41、不同仪器考察
在以上拟定的实验条件基础上，分别精密称取罗布麻叶配方颗粒(批号：GR-LBMY-01)两份，制备供试品溶液，分别在岛津20-AT、Waters2998-e2695、安捷伦1260型高效液相色谱仪上进行测定。如图15、表7和表8所示。
表7仪器耐用性考察-相对保留时间比值
Figure GDA0003565769980000082
表8仪器耐用性考察-相对峰面积比值
Figure GDA0003565769980000083
结果表明，用上述3种仪器对供试品进行检测时，各特征峰相对保留时间的RSD范围为0.13％-5.32％。
5.42、不同人员和时间考察
在以上拟定的实验条件基础上，由不同人员(A、B)在不同时间(T1、T2)分别精密称取罗布麻叶配方颗粒(批号：GR-LBMY-01)各两份，制备供试品，进行测定。如表9和表10所示。
表9人员和时间考察-相对保留时间比值
Figure GDA0003565769980000091
表10人员和时间考察-相对峰面积比值
Figure GDA0003565769980000092
结果表明，由不同的人员在不同的时间对同一个样品进行测定，方法稳定性较好。
5.5、耐用性考察
5.51、色谱柱耐用性考察
在以上拟定的实验条件基础上，分别对色谱柱为AgiLent 5TC-C18(2)250×4.6mm(安捷伦)、KromasiL C18 5μm 4.6×250mm、岛津5μm C18 250×4.60mm。进行考察。如图16、表11和表12所示。
表11色谱柱耐用性考察-相对保留时间比值
Figure GDA0003565769980000101
表12色谱柱耐用性考察-相对峰面积比值
Figure GDA0003565769980000102
结果表明，用上述3种色谱柱对样品进行检测，特征峰相对保留时间的RSD在0.15％～4.46％，特征峰相对峰面积的RSD在0.82％～13.46％。
5.52、稳定性考察
在以上拟定的实验条件基础上，取同一供试品溶液，分别于0h，3h，6h，9h，12h，24h时测定。如表13和表14所示。
表13稳定性考察-保留时间
Figure GDA0003565769980000111
表14稳定性考察-峰面积
Figure GDA0003565769980000112
结果表明，其相对应的特征峰保留时间的RSD在0.16％～0.26％，样品溶液在24小时内较稳定。
综上所述，各特征峰相对保留时间的RSD在以上各项考察中均符合要求，该方法良好。将上述7个特征峰纳入后续考察。
下面通过几个具体的实施例来进一步说明实现本发明目的技术方案，需要说明的是，本发明要求保护的技术方案包括但不限于以下实施例。
实施例1
3批罗布麻叶配方颗粒验证结果
采用拟定的方法对本品3批样品进行特征图谱的测定，计算相对保留时间、相对峰面积。如图17、表15和表16所示。
表15 3批罗布麻叶配方颗粒相对保留时间
Figure GDA0003565769980000121
表16 3批罗布麻叶配方颗粒相对峰面积
Figure GDA0003565769980000122
根据相对保留时间稳定及各批次样品均能检出且峰相对较高的原则，共选择了7个重复性较好的峰作为特征峰。结果表明，当峰5作为S峰时，3批次罗布麻叶配方颗粒特征峰相对保留时间RSD在0.01％～0.06％，3批次罗布麻叶配方颗粒7个特征峰相对保留时间RSD均小于4％。
实施例2
相对保留时间规定值限度的制定
方法学各考察项目及验证结果汇总见表17和表18：
表17方法学各项目结果RSD％汇总标准—相对保留时间
Figure GDA0003565769980000123
Figure GDA0003565769980000131
表18方法学各项目结果RSD％汇总标准—相对峰面积
Figure GDA0003565769980000132
由上表可知流速对各特征峰的影响最大，故将流速定为1mL/min，参考仪器和色谱柱耐用性结果，为了增加方法的重现性和适用性，故将各峰的相对保留时间规定值暂定为8％；而耐用性与验证结果对相对峰面积结果影响较大，故相对峰面积不列入标准。
最终规定：供试品特征图谱中应呈现7个特征峰，其中与金丝桃苷参照物相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±8％之内。规定值为：0.272(峰1)、0.408(峰2)、0.443(峰3)、0.541(峰4)、1.000(峰5，S)、1.025(峰6)、1.194(峰7)。
采用中药色谱指纹图谱相似度评价***(2012版)对3批罗布麻叶配方颗粒进行合成，建立了罗布麻叶配方颗粒特征图谱的对照图谱。如图18所示。
以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）、供试品溶液的制备：取罗布麻叶配方颗粒0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入提取溶剂，称定重量，提取10-30min，放冷，再称定重量，用提取溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
（2）、参照物溶液的制备：取罗布麻叶对照药材0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇，密塞，称定重量，超声处理，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；取金丝桃苷、咖啡酸、绿原酸、紫云英苷、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成溶液；
（3）、色谱条件如下：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250 mm，内径为4.6mm，硅胶粒径为5μm；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为320nm，理论板数按金丝桃苷计算应不低于8000；柱温：25℃；流速：1.0mL/min；流动相：以乙腈为流动相A，以0.2%磷酸溶液为流动相B，梯度脱洗；梯度洗脱程序为：
0-10min，流动相A由体积比11％升至体积比15％；
10-15min，流动相A保持体积比15％；
15-25min，流动相A由体积比15％升至体积比20％；
25-40min，流动相A由体积比20％升至体积比25％；
40-55min，流动相A由体积比25％升至体积比40％；
（4）、测试：分别精密吸取参照物溶液、对照药材溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.根据权利要求1所述的一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法，其特征在于：步骤（1）中，所述供试品提取溶剂为乙醇或50%乙醇或50%甲醇或70%甲醇或甲醇或水。
3.根据权利要求1所述的一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法，其特征在于：步骤（1）中，所述提取方式为回流提取或超声提取。
4.根据权利要求1所述的一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法，其特征在于：步骤（1）中，所述提取溶剂为50mL。
5.根据权利要求1所述的一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法，其特征在于：步骤（1）中，所述提取时间为10min或20min或30min。
6.根据权利要求1所述的一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法，其特征在于：步骤（2）中，取金丝桃苷、咖啡酸、绿原酸、紫云英苷、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷对照品适量，精密称定，加70%甲醇制成每1mL各含30μg的溶液，即得。
7.根据权利要求1所述的一种罗布麻叶配方颗粒特征图谱鉴别方法，其特征在于：所述的特征图谱中应呈现7个特征峰，其中与金丝桃苷参照物相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±8％之内，各峰规定值为：峰1 0.272、峰2 0.408、峰3 0.443、峰4 0.541、峰5 1.000（S）、峰6 1.025、峰7 1.194。
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CN101357147B (zh) * 2008-08-29 2012-08-22 周亚球 一种有指纹图谱的罗布麻叶提取物及其制备和分析方法
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