CN111534468A - 一种复合微生物制剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种复合微生物制剂及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于微生物制剂及其制备工艺和应用技术领域，公开了一种复合微生物制剂及其制备方法和应用。该复合微生物制剂是通过利用将芽孢杆菌属细菌、乳酸杆菌属细菌、醋酸杆菌属细菌和培养液混合获得。该复合微生物制剂是将生物农药的活性和生物肥料的活性相互联系，使得利用该复合微生物制剂对植物不仅明显能够改善其生长速度，高效地缩短植物的生长周期，而且具有显著地抗虫能力。该制剂的制备过程简单便捷，所需设备少、劳动力少。该复合微生物制剂为纯生物制剂，无毒无害，属于环境友好型成品。

Description

一种复合微生物制剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于微生物制剂及其制备工艺和应用技术领域，具体涉及一种复合微生物制剂及其制备方法和应用。
背景技术
目前农业领域最关心的多是对农作物等品种的改良与生产量的增加，加强对病虫害的防治等。迄今为止为了增产和防治病虫害而使用了化学肥料和农药。这种物质的使用对暂时增产是有效果的，但是诱发了环境污染，通过生物农畜给人类带来了不少危害。
为了减少这种危害，不使用化肥和农药，运用目前的所有理论和技术，促进农业和环境的协调发展。尽量控制生产中药剂的使用，减少环境负荷，保护农业生态圈，减少农业环境产生的污染而实行了有机农业。用这种方法生产的有机农产品的生产费用比一般农产品高，这是因为比起一般农产品，除草作业、病虫害防治、收获等需要很多劳动力。因此，最近为了提高消费者喜爱的高品质农产品的生产效率，针对环境污染和残留毒性的应对方案，新的农药和肥料的研发和易分解对毒性弱的复合微生物的研究备受关注。
微生物作为生物肥料备受瞩目的原因是，具有多样的植物生长促进机制。植物生长促进微生物中根瘤菌(rhizobacteria)在植物根系周围2～3mm范围内寄生。作为细菌，能够使生物促进生长的诱因是植物生长荷尔蒙的产生，不溶性磷的溶解，固氮能力，植物生长激素的抗生素，包括植物病原真菌的分泌抑制等几种。各种植物激素不仅有生长素类吲哚-3-乙酸(IAA)和吲哚-3-丁酸(IBA)，赤霉素、细胞***素、苄基腺嘌呤(BA)、玉米素，反式玉米素等多样的植物生长素是由根瘤菌产生的，直接或间接地促进了植物的生长，对植物生长的影响极大。由于许多磷存在于土壤中，但大多数磷以不溶性磷酸盐的形式存在，因此不适用于植物。此外，土壤微生物对这种不溶性磷酸盐吸收利用，分解产生游离态的磷，为植物提供了重要的养分，促进了植物的生长发育。
对这种复合微生物的研究，是人类安全的生活和附加帮助建立生产价值高的无公害农产品的农业基础给予了帮助。但从目前的研究结果来看，大多数研究都没有将生物农药的活性和作为生物肥料的活性相互联系，而是各自独立研究。即目前对生物农药活性化和生物肥料活性同时具有多功能微生物制剂的研究不多。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题，本发明目的在于提供一种复合微生物制剂及其制备方法和应用。
本发明所采用的技术方案为：一种复合微生物制剂，该制剂主要采用芽孢杆菌属细菌菌液、乳酸杆菌属细菌菌液、醋酸杆菌属细菌菌液和培养液制备而成；
芽孢杆菌属细菌菌液、乳酸杆菌属细菌菌液、醋酸杆菌属细菌菌液和培养液的浓度比为1-50:0.5-50：1-30：1-50；优选为5-15:2-15：6-16：5-15。
上述提供的该复合微生物制剂是通过利用将芽孢杆菌属细菌、乳酸杆菌属细菌、醋酸杆菌属细菌和培养液混合获得。该复合微生物制剂是将生物农药的活性和生物肥料的活性相互联系，使得利用该复合微生物制剂对植物不仅明显能够改善其生长速度，高效地缩短植物的生长周期，而且具有显著地抗虫能力。
优选地，芽孢杆菌属细菌菌液中的细菌菌种包括枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌、短杆菌、慢芽孢杆菌、蜂房芽孢杆菌和巴氏芽孢杆菌中的一种或多种；
优选为枯草芽孢杆菌。
枯草芽孢杆菌(拉丁学名：Bacillus subtilis)：是芽孢杆菌属的一种，菌落表面粗糙不透明，污白色或是微黄色。枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。
优选地，乳酸杆菌属细菌菌液中的细菌菌种包括短乳杆菌、发酵乳酸杆菌、植物乳杆菌、罗伊乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热乳杆菌中的一种或多种；
优选为短乳杆菌。
短乳杆菌(拉丁学名：Lactobacillus breris)：为乳杆菌目，乳杆菌科，短乳杆菌属，该菌株分离自牛奶、酸乳酒、干酪、酸泡菜等物。常规置于4摄氏度冰箱中保藏。
优选地，醋酸杆菌属细菌菌液中的细菌菌种包括纹膜醋酸杆菌、酿酒杆菌、产胞内醋酸杆菌、鄂尔多斯醋杆菌、印度尼西亚醋杆菌、罗旺醋杆菌、丙型醋酸杆菌、产氮醋酸杆菌、酒醋杆菌、东方醋酸杆菌、巴氏醋杆菌和热带醋酸杆菌中的一种或多种；
优选为热带醋酸杆菌。
纹膜醋酸杆菌：培养时液面形成乳白色、皱褶状的黏性菌膜。摇动时，液体变混。能产生葡糖糖酸，醋酸，生长温度范围4-42摄氏度，最适生长温度为30摄氏度，能耐14-15％的酒精。
热带醋酸杆菌(拉丁学名：Clostridium thermoaceticum)：属于严格厌氧菌，进行厌氧性的醋酸发酵，该发酵属于用于酿造糖醋的主要途径。
优选地，培养液包括SOC培养液、LB培养液和2×TY培养液中的一种或多种。
优选地，制剂包括喷雾剂、粉剂和液体制剂中的一种或多种。
一种复合微生物制剂的制备方法，该制备方法包括按照相应比例选取芽孢杆菌属细菌、乳酸杆菌属细菌、醋酸杆菌属细菌和培养液混合制备得到。
优选地，芽孢杆菌属细菌菌液中的菌株、乳酸杆菌属细菌菌液中的菌株、醋酸杆菌属细菌菌液中的菌株在复合微生物制剂中的浓度为105-108菌落数/mL，优选为106-107菌落数/mL。
一种复合微生物制剂的应用，采用直接喷洒施加物表面或加入稀释剂后喷洒施加物表面。
优选地，稀释剂包括水。
本发明的有益效果为：
本发明提供了一种复合微生物制剂，该复合微生物制剂是通过利用将芽孢杆菌属细菌、乳酸杆菌属细菌、醋酸杆菌属细菌和培养液混合获得。该复合微生物制剂是将生物农药的活性和生物肥料的活性相互联系，使得利用该复合微生物制剂对植物不仅明显能够改善其生长速度，高效地缩短植物的生长周期，而且具有显著地抗虫能力。该制剂的制备过程简单便捷，所需设备少、劳动力少。该复合微生物制剂为纯生物制剂，无毒无害，属于环境友好型成品。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步阐释。本领域技术人员将会理解，下列所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件进行。所用试剂均为可以通过市售购买获得的常规产品。
如下所述各实施例中所选原料的用量，均是以成品复合微生物制剂总量为10L为基准进行配置。
实施例1：
按照相应比例选取枯草芽孢杆菌菌液2.9L、短乳杆菌菌液1.3L、热带醋酸杆菌菌液2.9L和SOC培养液2.9L混合制备得到10L成品制剂。
实施例2：
按照相应比例选取苏云金芽孢杆菌菌液2.9L、短乳杆菌菌液1.3L、热带醋酸杆菌菌液2.9L和SOC培养液2.9L混合制备得到10L成品制剂。
实施例3：
按照相应比例选取枯草芽孢杆菌菌液2.7L、干酪乳杆菌菌液1.9L、热带醋酸杆菌菌液2.7L和LB培养液2.7L混合制备得到10L成品制剂。
实施例4：
按照相应比例选取枯草芽孢杆菌菌液2.7L、鼠李糖乳杆菌菌液1.9L、热带醋酸杆菌菌液2.7L和LB培养液2.7L混合制备得到10L成品制剂。
实施例5：
按照相应比例选取苏云金芽孢杆菌菌液2.7L、鼠李糖乳杆菌菌液1.3L、热带醋酸杆菌菌液3.3L和2×TY培养液2.7L混合制备得到10L成品制剂。
实施例6：
按照相应比例选取苏云金芽孢杆菌菌液2.7L、鼠李糖乳杆菌菌液1.3L、纹膜醋酸杆菌菌液3.3L和2×TY培养液2.7L混合制备得到10L成品制剂。
实施例7：
按照相应比例选取短杆菌菌液2.4L、乳酸乳杆菌菌液2.4L、热带醋酸杆菌菌液2.8L和2×TY培养液2.4L混合制备得到10L成品制剂。
实施例8：
按照相应比例选取枯草芽孢杆菌菌液2.4L、乳酸乳杆菌菌液2.4L、热带醋酸杆菌菌液2.8L和2×TY培养液2.4L混合制备得到10L成品制剂。
各培养液的制备方式：
SOC培养液：组份浓度：2％(W/V质量浓度)胰蛋白胨，0.5％(W/V质量浓度)酵母粉，0.05％(W/V质量浓度)NaCl，2.5mM(毫摩尔)KCl，10mM(毫摩尔)MgCl2，20mM(毫摩尔)葡萄糖。
配制量:100ml
配制方法
1、配制1M的葡萄糖溶液：将18g的葡萄糖溶解在90mL的去离子水中，定容至100mL，用0.22μm滤膜过滤除菌。
2、向100mL SOB培养液中加入除菌的1M葡萄糖溶液2mL，均匀混合。
3、调节ph值等于7。
4、4℃保存。
LB培养液：
配置量：1000ml
组分浓度：5g酵母粉；10g胰蛋白胨或蛋白胨；10g NaCl。
2×TY液体培养液：
配置量：1000ml
组分浓度：16g胰蛋白胨；10g酵母粉；5g NaCl。
枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、短杆菌、短乳杆菌、乳酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、干酪乳杆菌、热带醋酸杆菌以及各类菌种的菌液：均是选自上海土友生物科技股份有限公司。同时对于上述菌种，同一类的菌种或菌液均能够完成该复合微生物制剂的配制，并能够达到相应的有益效果。
在上述各实施例制备得到的试验试剂中菌落数的能够通过前期配置进行控制，同时后期进行实验测算得到。
实验例
选取处于同一土壤环境，包括温度、湿度、年降雨量等因素均处于同一水平的且面积相同的试验田7块，编号为1-7，其中将编号为1-6作为试验组，编号7作为对照组。在上述7块试验田中种植同一个品种的大白菜，且为同期种植。在实验开始前，在各试验田中使用沤粪发酵而制作的堆肥作为底肥，使用在对照组和实验组上，并没有用农药和化学肥料。
对于试验组选用上述提供的该复合微生物制剂中的各实施例配制得到的成品制剂1000mL，对照组选用CN 106748152复合微生物肥料及其制备方法中的实施例3中制备得到的复合微生物肥料。
实验试剂：选用的试验组和对照组成品均稀释100倍后进行使用，稀释剂为水。每次喷施800mL各试验成品稀释后的产品。
数据检测指标：白菜植株长度、叶片宽度、病虫害。
试验时限及过程：在试验初始期喷施一次各试验成品稀释剂，14天后针对上述数据检测指标进行检测并记录数据，随之再喷施第二次各试验成品稀释剂，28天后第二次针对上述数据检测指标进行检测并记录数据。
试验结果检测如下表所示：
表1白菜植株生长检测表
Figure BDA0002501156160000081
Figure BDA0002501156160000091
通过上述试验数据结果显示可以看出，该复合微生物制剂稀释剂中实施例7和实施例8对白菜的喷施效果最好，并且无任何病虫害的产生，既有效地促进了白菜的生长，同时有效地达到了抗虫的目的。与此同时，其他各实施例1到实施例6同样具有促进植株生长和抗虫的作用。对照组对于植株的生长同样具有促进植株生长的作用，但是其效果明显较上述各实施例呈下降的态势，并且在第一次查看病虫害的记录数据中体现出仍有病虫害的出现。
因此，用上述各实施例中提供的该复合微生物制剂处理的实验组的白菜生长程度有显著改善，病虫害少。
本发明提供了一种复合微生物制剂，该复合微生物制剂是通过利用将芽孢杆菌属细菌、乳酸杆菌属细菌、醋酸杆菌属细菌和培养液混合获得。该复合微生物制剂是将生物农药的活性和生物肥料的活性相互联系，使得利用该复合微生物制剂对植物不仅明显能够改善其生长速度，高效地缩短植物的生长周期，而且具有显著地抗虫能力。该制剂的制备过程简单便捷，所需设备少、劳动力少。该复合微生物制剂为纯生物制剂，无毒无害，属于环境友好型成品。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，本发明不局限于上述可选的实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品。上述具体实施方式不应理解成对本发明的保护范围的限制，本领域的普通技术人员应当理解，在不背离本发明的精神和范围的情况下，可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换，与此同时这些修改或者替换，并不会使相应的技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围；本发明的保护范围应当以权利要求书中界定的为准，并且说明书可以用于解释权利要求书。

Claims (10)

1.一种复合微生物制剂，其特征在于，所述制剂主要采用芽孢杆菌属细菌菌液、乳酸杆菌属细菌菌液、醋酸杆菌属细菌菌液和培养液制备而成；
所述芽孢杆菌属细菌菌液、乳酸杆菌属细菌菌液、醋酸杆菌属细菌菌液和培养液的浓度比为1-50:0.5-50：1-30：1-50；优选为5-15:2-15：6-16：5-15。
2.根据权利要求1所述的一种复合微生物制剂，其特征在于，所述芽孢杆菌属细菌菌液中的细菌菌种包括枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌、短杆菌、慢芽孢杆菌、蜂房芽孢杆菌和巴氏芽孢杆菌中的一种或多种；
优选为枯草芽孢杆菌。
3.根据权利要求1所述的一种复合微生物制剂，其特征在于，所述乳酸杆菌属细菌菌液中的细菌菌种包括短乳杆菌、发酵乳酸杆菌、植物乳杆菌、罗伊乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热乳杆菌中的一种或多种；
优选为短乳杆菌。
4.根据权利要求1所述的一种复合微生物制剂，其特征在于，所述醋酸杆菌属细菌菌液中的细菌菌种包括纹膜醋酸杆菌、酿酒杆菌、产胞内醋酸杆菌、鄂尔多斯醋杆菌、印度尼西亚醋杆菌、罗旺醋杆菌、丙型醋酸杆菌、产氮醋酸杆菌、酒醋杆菌、东方醋酸杆菌、巴氏醋杆菌和热带醋酸杆菌中的一种或多种；
优选为热带醋酸杆菌。
5.根据权利要求1所述的一种复合微生物制剂，其特征在于，所述培养液包括SOC培养液、LB培养液和2×TY培养液中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的一种复合微生物制剂，其特征在于，所述制剂包括喷雾剂、粉剂和液体制剂中的一种或多种。
7.根据权利要求1-6任一所述的一种复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括按照相应比例选取芽孢杆菌属细菌、乳酸杆菌属细菌、醋酸杆菌属细菌和培养液混合制备得到。
8.根据权利要求7所述的一种复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，所述芽孢杆菌属细菌菌液中的菌株、乳酸杆菌属细菌菌液中的菌株、醋酸杆菌属细菌菌液中的菌株在复合微生物制剂中的浓度为105-108菌落数/mL，优选为106-107菌落数/mL。
9.根据权利要求1-6任一所述的一种复合微生物制剂的应用，其特征在于，采用直接喷洒施加物表面或加入稀释剂后喷洒施加物表面。
10.根据权利要求9所述的一种复合微生物制剂的应用，其特征在于，所述稀释剂包括水。
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