CN111317701B

CN111317701B - 一种皮肤屏障修护复合物、护肤乳液及其制备方法

Info

Publication number: CN111317701B
Application number: CN202010255854.XA
Authority: CN
Inventors: 温伟红; 徐洁琼; 容惠; 姚文玉
Original assignee: Guangzhou Biotechnology Co ltd
Current assignee: Guangzhou Biotechnology Co ltd
Priority date: 2020-04-02
Filing date: 2020-04-02
Publication date: 2023-03-28
Anticipated expiration: 2040-04-02
Also published as: CN111317701A

Abstract

本发明提供一种皮肤屏障修护复合物、护肤乳液及其制备方法。所述皮肤屏障修护复合物包括：修复皮肤屏障的组合物、积雪草提取物、库拉索芦荟叶提取物、熊果叶提取物、胀果甘草根提取物和燕麦蛋白提取物；所述修复皮肤屏障的组合物包括：海茴香愈伤组织培养物滤液、四氢甲基嘧啶羧酸和水解红藻提取物。所述皮肤屏障修护复合物不仅具有修护肌肤屏障的功效，还能抵御过量自由基、提高肌肤自身抗氧化能力，抑制黑色素沉着，促进肌肤的新陈代谢。由所述皮肤屏障修护复合物制备得到的护肤乳液美白修护功效明显，能够有效改善皮肤光老化，帮助细胞糖化逆转，促进皮肤胶原蛋白，具有减缓皮肤老化、改善色斑、美白提亮、减少皱纹的功效。

Description

一种皮肤屏障修护复合物、护肤乳液及其制备方法

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种皮肤屏障修护复合物、护肤乳液及其制备方法。

背景技术

随着工作生活结构的变化，人们每天长时间面对电脑、手机等辐射性电器，导致皮肤严重缺水，如果不能及时补充水分，将出现皮肤暗沉进而导致色素沉积，严重的出现黑斑。尤其是对于晒伤或受损皮肤，如果不及时修复，即会出现黑斑。而且，随着人体老化进程，皮肤不断变薄，失去弹性，出现老年性黑斑，并且更加容易遭受刺激。通常面部肌肤衰老总是伴随着干燥、缺水、以及老年斑的出现。为了对皮肤进行美白修复，现在通用的做法是采用高浓度的化学合成类修复液，如维C乳膏、水杨酸、维A醇等，但这类美白产品普遍存在的缺陷是，只着眼于快速的美白效果，而忽视对皮肤屏障损伤的修护，长期使用不仅会把皮肤变的敏感，严重的会把皮肤变的泛红甚至是红肿，而且还可能会出现刺激皮肤、导致毛发生长加快的情况。

CN109568159A公开了美白修复美容组合物，由8～12wt％保湿剂、不超过6wt％的皮肤调理剂、0.5～1.5wt％植物提取物、1.0～1.75wt％的辅料、余量为水制备而成，通过在美容组合物中添加皮肤调理剂，植物提取物等活性组分，彼此之间协同作用，实现皮肤美白，祛除皮肤黄色，修复肤色变化和炎症反应。

CN110101597A公开了一种针对皮肤皮肤屏障修护复合物，该美白且修复皮肤屏障损伤功能的组合物包括如下质量百分比的各组分：甘草多糖0.1％～10％、银耳多糖0.1％～10％、秋葵多糖0.1％～10％、天山雪莲多糖0.1％～10％，所述组合物可以对美白引起皮肤屏障功能损伤具有良好的修复作用，减轻因美白引起的皮肤干燥和过敏等问题。

因为，亟需研发一款能够对皮肤美白，同时还能够修护受损皮肤屏障的护肤品。

发明内容

本发明的目的在于提供一种皮肤屏障修护复合物、护肤乳液及其制备方法。所述皮肤屏障修护复合物可达到同时修护角质屏障、免疫屏障，并增强微生态屏障功效，而且还能有效抑制黑色素转移至角质细胞，抑制黑色素沉着，促进肌肤的新陈代谢，进而减轻色素沉积；由此制得的护肤乳液美白修护功效明显，能够有效改善皮肤光老化，帮助细胞糖化逆转，进而达到减缓皮肤老化、改善色斑、美白和减少皱纹。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种皮肤屏障修护复合物，所述皮肤屏障修护复合物包括：修复皮肤屏障的组合物、积雪草提取物、库拉索芦荟叶提取物、熊果叶提取物、胀果甘草根提取物和燕麦蛋白提取物；

所述修复皮肤屏障的组合物包括：海茴香愈伤组织培养物滤液、四氢甲基嘧啶羧酸和水解红藻提取物。

本发明中，所述皮肤屏障修护复合物包括：修复皮肤屏障的组合物、积雪草提取物、库拉索芦荟叶提取物、熊果叶提取物、胀果甘草根提取物和燕麦蛋白提取物，各组分配伍合理，具有协同增效作用，不仅抵御过量自由基、提高肌肤自身抗氧化能力，同时修护角质屏障、修护免疫屏障及增强微生态屏障功效，而且，还能有效抑制黑色素转移至角质细胞，抑制黑色素沉着，促进肌肤的新陈代谢，进而减轻色素沉积。

本发明中，所述修复皮肤屏障的组合物中海茴香愈伤组织培养物滤液、四氢甲基嘧啶羧酸和水解红藻提取物相互配合，协同增效，从而全面修复皮肤屏障。通过修护角质屏障、修护免疫屏障及增强微生态屏障，将有害侵扰因素隔绝在皮肤之外，构筑完整健康的肌肤防御线，从根本上解决各种皮肤问题。此外，所述修复皮肤屏障的组合物还具有抗炎舒缓的功效，对于皮肤的炎症反应和不适症状进行快速有效地安抚，维持皮肤的稳态与基础健康。

其中，所述海茴香愈伤组织培养物滤液为精选珍稀盐土植物海茴香，经特殊工艺培养出干细胞活性因子，有效调节角质更新，强化肌肤角质屏障，提升肌肤抵御力。所述四氢甲基嘧啶羧酸提取自沙漠盐湖带嗜盐菌维生因子，能够有效保护皮肤免疫屏障，使肌肤免受外界伤害，长葆青春活力。所述水解红藻提取物优选纯净海域的杜尔维利藻，有效改善皮肤微生态环境，使常驻菌群数量达到有益的均衡状态，令肌肤能够维持健康的代谢，达到理想的水润、光泽、健康状态。

所述积雪草提取物可以促进皮肤真皮层中的胶原蛋白形成，使纤维蛋白再生，深层滋养，增强肌肤柔软度与弹性，改善肤色黯淡、发黄现象，抗氧化作用，还可以祛除老化的角质层，促进皮肤新陈代。

所述库拉索芦荟叶提取物能有效降低酪氨酸酶活性，防止黑色素的生成及沉着，去除黄气，提亮肤色，修复皮肤创伤，舒缓镇定，修复敏感肌肤。

所述熊果叶提取物能够迅速渗入肌肤，在不影响皮肤细胞增殖浓度的同时，有效地抑制皮肤中酪氨酸酶的活性，阻断黑色素的形成，通过自身与酪氨酸酶的结合，加速黑色素的分解与***，从而减少皮肤色素沉积，抵御过量自由基、提高肌肤自身抗氧化能力，祛除色斑和雀斑。

所述胀果甘草根提取物中的胶原蛋白成分能够使皮肤更加紧致，同时其中的抗衰老成分能够显著抵抗黑色素的沉积，抵御过量自由基、提高肌肤自身抗氧化能力，达到皮肤美白的效果。

所述燕麦蛋白提取物燕麦中含有大量的抗氧化成分，这些物质可以有效地抑制黑色素形成过程中氧化还原反应的进行，减少黑色素的形成，淡化色斑，保持白皙靓丽的皮肤。

优选地，所述皮肤屏障修护复合物按重量份数计包括：修复皮肤屏障的组合物1-10份、积雪草提取物1-5份、库拉索芦荟叶提取物1-5份、熊果叶提取物0.1-3份、胀果甘草根提取物0.1-3份和燕麦蛋白提取物0.1-3份。

所述皮肤屏障修护复合物中，修复皮肤屏障的组合物的重量份数为1-10份，例如可以是1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份等。

所述皮肤屏障修护复合物中，积雪草提取物的重量份数为1-5份，例如可以是1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份等。

所述皮肤屏障修护复合物中，库拉索芦荟叶提取物的重量份数为1-5份，例如可以是1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份等。

所述皮肤屏障修护复合物中，熊果叶提取物的重量份数为0.1-3份，例如可以是0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份等。

所述皮肤屏障修护复合物中，胀果甘草根提取物的重量份数为0.1-3份，例如可以是0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份等。

所述皮肤屏障修护复合物中，燕麦蛋白提取物的重量份数为0.1-3份，例如可以是0.1份、0.5份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份等。

优选地，所述海茴香愈伤组织培养物滤液、四氢甲基嘧啶羧酸和水解红藻提取物的质量比为(3-9):(2-5):(1-3)。

其中，“3～9”可以是3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9等；

其中，“2～5”可以是2、2.2、2.5、2.8、3、3.2、3.5、3.8、4、4.2、4.5、4.8、5等；

其中，“1～3”可以是1、1.2、1.4、1.5、1.6、1.8、2、2.2、2.4、2.6、2.8、3等。

第二方面，本发明提供一种护肤乳液，所述护肤乳液包括如第一方面所述的皮肤屏障修护复合物。

优选地，所述护肤乳液按质量百分含量计包括：1-10％的第一方面所述的皮肤屏障修护复合物、5-20％皮肤调理剂、10-30％保湿剂、1-10％润肤剂和0.3-1.5％乳化剂，余量为水。

以所述护肤乳液总质量为100％计，第一方面所述的皮肤屏障修护复合物的含量为1-10％，例如可以是1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％等。

以所述护肤乳液总质量为100％计，皮肤调理剂的含量为5-20％，例如可以是5％、6％、8％、10％、12％、14％、16％、18％、20％等。

以所述护肤乳液总质量为100％计，保湿剂的含量为10-30％，例如可以是10％、12％、14％、16％、18％、20％、22％、24％、26％、28％、30％等。

以所述护肤乳液总质量为100％计，润肤剂的含量为1-10％，例如可以是1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％等。

以所述护肤乳液总质量为100％计，乳化剂的含量为0.3-1.5％，例如可以是0.3％、0.5％、0.7％、0.9％、1.1％、1.3％、1.5％等。

优选地，所述皮肤调理剂包括皱波角叉菜提取物、神经酰胺3、透明质酸硅烷醇、脱羧肌肽、烟酰胺、棕榈酰三肽-1、棕榈酰三肽-5、九肽-1中的任意一种或至少两种的组合，优选为皱波角叉菜提取物、神经酰胺3、透明质酸硅烷醇、烟酰胺、棕榈酰三肽-1、棕榈酰三肽-5和九肽-1的组合。所述皮肤调理剂各组分协同增效加速皮肤细胞的生成、修复受损的细胞、促进皮肤合成更多的胶原蛋白，延缓细胞老化、淡化色斑，从而消除细小皱纹、美白细嫩肌肤。

优选地，所述透明质酸硅烷醇由大分子透明质酸和硅烷三醇组成，所述透明质酸硅烷醇对角质细胞具有刺激作用，可使表皮厚度快速增加，更好地保湿和保护皮肤；皮肤被激素破坏的情况下，细胞外缘的鞭毛会被破坏，透明质酸硅烷醇会修复细胞外缘的鞭毛，去吸收有益物质，同时排除有害物质，使现有细胞更健康。

优选地，所述大分子透明质酸和硅烷三醇的质量比为(0.5-2):1，例如可以是0.5:1、0.6:1、0.8:1、1:1、1.2:1、1.4:1、1.6:1、1.8:1、2:1等。

优选地，所述大分子透明质酸的分子量为150万-180万道尔顿，例如可以是150万道尔顿、155万道尔顿、160万道尔顿、165万道尔顿、170万道尔顿、175万道尔顿、180万道尔顿。

优选地，所述保湿剂包括透明质酸钠、海藻糖、甘油、水解透明质酸钠、糖类同分异构体(锁水磁石)、1,2-己二醇、丁二醇、泛醇、木糖醇、脱水木糖醇或木糖醇基葡糖苷中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，所述透明质酸钠的分子量为80万-100万道尔顿，例如可以是80万道尔顿、82万道尔顿、84万道尔顿、86万道尔顿、88万道尔顿、90万道尔顿、92万道尔顿、94万道尔顿、96万道尔顿、98万道尔顿、100万道尔顿。

优选地，所述水解透明质酸钠的分子量为20万-40万道尔顿，例如可以是20万道尔顿、22万道尔顿、24万道尔顿、26万道尔顿、28万道尔顿、30万道尔顿、32万道尔顿、34万道尔顿、36万道尔顿、38万道尔顿、40万道尔顿。

优选地，所述润肤剂包括角鲨烷、牛油果树果脂、环五聚二甲基硅氧烷、环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷或聚二甲基硅氧烷醇中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，所述乳化剂包括C20-22醇和/或C20-22醇磷酸酯。

优选地，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.5-2％的抗氧化剂，例如可以是0.5％、0.6％、0.8％、1％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％、2％等。

优选地，所述抗氧化剂包括对羟基苯乙酮和/或生育酚乙酸酯。

优选地，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.1-2％的增稠剂，例如可以是0.1％、0.3％、0.5％、0.8％、1％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％、2％等。

优选地，所述增稠剂包括丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、异十六烷、聚山梨醇酯-80、水解小核菌胶或卡波姆中的任意一种或至少两种的组合。

优选地，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.05-0.5％的pH调节剂，例如可以是0.05％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％等。

优选地，所述pH调节剂为三乙醇胺。

优选地，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.02-0.1％的螯合剂，例如可以是0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

优选地，所述螯合剂为EDTA二钠。

优选地，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.01-0.1％的芳香剂，例如可以是0.01％、0.02％、0.04％、0.06％、0.08％、0.1％等。

优选地，所述芳香剂为香精。

第三方面，本发明提供一种如第二方面所述的护肤乳液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(1)将保湿剂和水进行水相混合，得到水相混合液；将润肤剂和乳化剂进行油相混合，得到油相混合液；

(2)将步骤(1)得到的水相混合液和油相混合液混合均质，得到均质液；

(3)将步骤(2)得到的均质液、第一方面所述的皮肤屏障修护复合物及皮肤调理剂，混合搅拌，得到所述护肤乳液。

优选地，所述制备方法包括以下步骤：

(1)将保湿剂、增稠剂、螯合剂和水进行水相混合，得到水相混合液；将润肤剂和乳化剂进行油相混合，得到油相混合液；

(3)将步骤(2)得到的的均质液、第一方面所述的皮肤屏障修护复合物、皮肤调理剂、抗氧化剂、pH调节剂和芳香剂，混合搅拌，得到所述护肤乳液。

优选地，步骤(1)中所述水相混合的温度为80-85℃，例如可以是80℃、81℃、82℃、83℃、84℃、85℃等，所述水相混合的时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min、10min等。

优选地，步骤(1)中所述油相混合的温度为78-80℃，例如可以是78℃、78.5℃、79℃、79.5℃、80℃等，所述油相混合的时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min、10min等。

优选地，步骤(2)中所述混合均质的温度为80-82℃，例如可以是80℃、80.5℃、81℃、81.5℃、82℃等，所述混合均质的时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min、10min等。

优选地，步骤(3)中所述混合搅拌的温度为40-50℃，例如可以是40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃等，所述混合搅拌的时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min、10min等。

优选地，所述护肤乳液的制备方法包括以下步骤：

(1)将保湿剂、增稠剂、螯合剂和水在80-85℃下搅拌混合5-10min，得到水相混合液；将润肤剂和乳化剂在78-80℃下搅拌混合5-10min，得到油相混合液；

(2)将步骤(1)得到的水相混合液和油相混合液在80-82℃下混合均质5-10min，得到均质液；

(3)将步骤(2)得到的的均质液、第一方面所述的皮肤屏障修护复合物、皮肤调理剂、抗氧化剂、pH调节剂和芳香剂，在40-50℃下混合搅拌5-10min，得到所述护肤乳液。

相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明所述皮肤屏障修护复合物可达到修护角质屏障、修护免疫屏障及增强微生态屏障功效，抵御过量自由基、提高肌肤自身抗氧化能力，同时还能有效抑制黑色素转移至角质细胞，抑制黑色素沉着，促进肌肤的新陈代谢，进而减轻色素沉积。

(2)由所述皮肤屏障修护复合物制备得到的护肤乳液美白修护功效明显，能够有效改善皮肤光老化，帮助细胞糖化逆转，促进皮肤胶原蛋白、弹性蛋白的表达，还具有减缓皮肤老化、改善色斑、美白提亮、减少皱纹的功效。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。

下述实施例中提供的修复皮肤屏障的组合物均由下述制备方法得到：

制备例1

本制备例制备一种海茴香愈伤组织培养物滤液，所述海茴香愈伤组织培养物滤液的制备方法包括以下步骤：

(1)愈伤组织诱导培养：将海茴香外植体接种到琼脂培养基中进行愈伤组织诱导培养，所述诱导培养的温度为20℃，所述诱导培养的时间为14天，得到愈伤组织；

(2)愈伤组织颗粒悬浮培养：将步骤(1)得到的愈伤组织接种到MS培养基中，在振荡培养箱中以100r/min转速进行震荡培养，所述震荡培养的温度为20℃，所述震荡培养的时间为14天，得到增殖愈伤组织；

(3)愈伤组织扩大培养：将步骤(2)得到的增殖愈伤组织接种至无菌细胞袋中进行扩大培养，所述扩大培养的温度为25℃，所述扩大培养的时间为24天，得到所述海茴香愈伤组织培养物；

(4)分离：将步骤(3)得到的海茴香愈伤组织培养物通过100目的纱布进行过滤，再在25℃下进行真空干燥，得到所述茴香愈伤组织培养物滤液。

制备例2

本制备例制备四氢甲基嘧啶羧酸，所述四氢甲基嘧啶羧酸的制备方法包括以下步骤：

(A)沙漠嗜盐细菌的培养：将沙漠嗜盐细菌接种于SCDLP液体培养基中，在振荡培养箱中以1000r/min的转速进行培养，所述培养的温度为20℃，所述培养的时间为48h，得到沙漠嗜盐细菌菌体；

(B)渗透压冲击：将步骤(A)得到的沙漠嗜盐细菌菌体重悬于高渗透压溶液(所述高渗透压溶液按质量百分比计包括：18％的蔗糖、0.1％的EDTA，余量为水)中浸泡1h，过滤，得到沉淀沙漠嗜盐细菌菌体；

(C)电渗析：将步骤(B)得到的沙漠嗜盐细菌菌体通过电渗析处理，得到四氢甲基嘧啶羧酸。

制备例3

本制备例制备一种水解红藻提取物，所述水解红藻提取物的制备方法包括以下步骤：

(a)提取：将杜尔维利藻清洗，粉碎并过100-200目筛，得到红藻粉；向红藻粉中加入水在70℃下进行一次提取，所述一次提取的时间为10h，所述水和红藻粉的质量比为20:1，得到一次提取液，将一次提取液过滤后浓缩，再加入体积比浓度为80％的乙醇水溶液进行二次提取，静置取沉淀，得红藻多糖粗料；

(b)水解：将步骤(a)得到的红藻多糖粗料加水溶解后，加入30wt％的过氧化氢水溶液，50℃下混合搅拌1h，得到水解红藻提取液；

(c)超滤：将步骤(b)得到的水解红藻提取液通过超滤膜处理浓缩脱盐，所述超滤的时间30min，所述超滤的温度30℃，得到水解红藻提取物。

制备例4

本制备例提供一种修复皮肤屏障的组合物，所述修复皮肤屏障的组合物的制备方法为：取制备例1的海茴香愈伤组织培养物滤液7份、制备例2的四氢甲基嘧啶羧酸3份和制备例3的水解红藻提取物2份，在20℃下混合搅拌20min，得到所述修复皮肤屏障的组合物。

下述实施例中除修复皮肤屏障的组合物各组分由上述制备方法制备得到，其他组分均为市售商品。

实施例1

本实施例提供一种皮肤屏障修护复合物，所述皮肤屏障修护复合物按重量份数计包括：修复皮肤屏障的组合物5份、积雪草提取物3份、库拉索芦荟叶提取物4份、熊果叶提取物2份、胀果甘草根提取物1份和燕麦蛋白提取物1份。

实施例2

本实施例提供一种皮肤屏障修护复合物，所述皮肤屏障修护复合物按重量份数计包括：修复皮肤屏障的组合物4份、积雪草提取物4份、库拉索芦荟叶提取物3份、熊果叶提取物2份、胀果甘草根提取物1份和燕麦蛋白提取物2份。

实施例3

本实施例提供一种皮肤屏障修护复合物，所述皮肤屏障修护复合物按重量份数计包括：修复皮肤屏障的组合物7份、积雪草提取物1.5份、库拉索芦荟叶提取物1.5份、熊果叶提取物2份、胀果甘草根提取物2份和燕麦蛋白提取物2份。

实施例4

本实施例提供一种皮肤屏障修护复合物，所述皮肤屏障修护复合物按重量份数计包括：修复皮肤屏障的组合物10份、积雪草提取物1份、库拉索芦荟叶提取物1份、熊果叶提取物1份、胀果甘草根提取物1份和燕麦蛋白提取物1份。

实施例5

本实施例提供一种皮肤屏障修护复合物，所述皮肤屏障修护复合物按重量份数计包括：修复皮肤屏障的组合物1份、积雪草提取物5份、库拉索芦荟叶提取物5份、熊果叶提取物3份、胀果甘草根提取物3份和燕麦蛋白提取物3份。

对比例1-6

对比例1-6提供皮肤屏障修护复合物，按重量份数计各对比例的配方如下表1所示(如表中“4”代表该对应组分的含量为4重量份)：

表1

应用实施例1

本应用实施例提供一种护肤乳液，所述护肤乳液按质量百分含量计包括如下组分：

所述护肤乳液的制备方法包括以下步骤：

(1)将上述保湿剂、增稠剂、螯合剂和水在85℃下搅拌混合5min，得到水相混合液；将润肤剂和乳化剂在78℃下搅拌混合10min，得到油相混合液；

(2)将步骤(1)得到的水相混合液和油相混合液在82℃下混合均质7min，得到均质液；

(3)将步骤(2)得到的的均质液、第一方面所述的皮肤屏障修护复合物、皮肤调理剂、抗氧化剂、pH调节剂和芳香剂，在45℃下混合搅拌6min，得到所述护肤乳液。

应用实施例2-5

与应用实施例1相比区别仅在于，将其中的实施例1制备的皮肤屏障修护复合物分别替换为实施例2-5制备的皮肤屏障修护复合物，其余组分及含量同应用实施例1。

应用实施例6

与应用实施例1相比区别仅在于，皮肤调理剂中不添加皱波角叉菜提取物，所述神经酰胺3含量增至1.4％，其余组分及含量同应用实施例1。

应用实施例7

与应用实施例1相比区别仅在于，皮肤调理剂中不添加脱羧肌肽，所述神经酰胺3含量增至1.3％，其余组分及含量同应用实施例1。

应用实施例8

与应用实施例1相比区别仅在于，皮肤调理剂中不添加棕榈酰三肽-1，所述棕榈酰三肽-5含量增至3％，所述九肽-1含量增至3％，其余组分及含量同应用实施例1。

应用实施例9

与应用实施例1相比区别仅在于，皮肤调理剂中不添加棕榈酰三肽-5，所述棕榈酰三肽-1含量增至3％，所述九肽-1含量增至3％，其余组分及含量同应用实施例1。

应用实施例10

与应用实施例1相比区别仅在于，皮肤调理剂中不添加九肽-1，所述棕榈酰三肽-1含量增至3％，所述棕榈酰三肽-5含量增至3％，其余组分及含量同应用实施例1。

应用对比例1

与应用实施例1相比，不添加实施例1制备的皮肤屏障修护复合物，缺少部分以水补至100％，其余组分及含量同应用实施例1。

应用对比例2-7

与应用实施例1相比，将其中的实施例1制备的皮肤屏障修护复合物分别替换为对比例1-6制备的皮肤屏障修护复合物，其余组分及含量同应用实施例1。

试验例1

安全性能测试

对应用实施例1-10提供的护肤乳液和应用对比例1-7提供的护肤乳液进行安全性能测试，方法如下：

(1)红细胞溶血实验

红细胞悬液的制备：选择健康家兔，心脏取血9mL，加入2％的草酸钾溶液1mL，离心，弃去上清液，用20mmol/L的PBS溶液将沉淀物稀释至20mL，4℃保存备用。选择样品用PBS溶液稀释至不同浓度，每个样品设置5个浓度梯度。取10mL待测样品的稀释液，加入200μL上述红细胞悬液(控制样品终浓度分别为5、10、20、50、100mg/mL)，以蒸馏水作为全溶血对照，PBS溶液作为阴性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计测试其在560nm处的吸光度(A₅₆₀)，按如下公式计算溶血率；

绘制溶血率-样品浓度标准曲线，计算50％红细胞发生溶血时的样品浓度(HD₅₀)。

(2)蛋白变性实验：

将样品用PBS溶液稀释至10g/L，取10mL待测样品的稀释液，加入200μL上述红细胞悬液，以蒸馏水作为空白对照，1mg/mL十二烷基硫酸钠(SDS)溶液作为阳性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计分别测试其在540nm和575nm处的吸光度A₅₄₀和A₅₇₅，按照如下公式计算蛋白变性指数(DI)；

其中，R₁＝空白对照组A₅₇₅/空白对照组A₅₄₀，R₂＝实验组A₅₇₅/实验组A₅₄₀，R₃＝阳性对照组A₅₇₅/阳性对照组A₅₄₀。

根据L/D值对待测样品的刺激性进行评价，其中L/D值为HD₅₀/DI，红细胞溶血实验刺激性分级标准如下表2所示：

表2

L/D	分级
		>100	无刺激性
10<L/D≤100	微刺激性
		1<L/D≤10	轻度刺激性
0.1<L/D≤1	中度刺激性

上述红细胞溶血实验和蛋白变性实验的测试结果如下表3所示：

表3

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由安全性能测试可知，由上述试验结果可知，本发明应用实施例1-10所制备的护肤乳液温和无刺激；本发明所制备的护肤乳液的50％红细胞发生溶血时的样品浓度HD₅₀在20000mg/L以上，大于应用对比例1-7制备的护肤乳液的HD₅₀，同时蛋白质变性指数DI均在0.75％以下，亦明显小于应用对比例1-7制备的护肤乳液，说明本发明所述护肤乳液能够显著降低毒副作用和刺激性，更加安全可靠。

试验例2

对应用实施例1～10和应用对比例1～7提供的护肤乳液进行美白效果测试，方法如下：

(1)酪氨酸酶活性抑制试验

以3×10⁴个细胞/孔的细胞密度将B16黑素瘤细胞(melanoma cell)转接至96孔板中，在37℃的培养箱内，利用添加有10％胎牛血清、1％抗真菌抗生素的DMEM培养基培养24h。利用100μL、66mM且pH为6.8的磷酸缓冲液将细胞清洗后，将100μL含有1％TritonX-100的PBS添加至各孔中，然后利用37℃的混合机溶解30min。将上清液50μL移至新板的孔中，在实验组中添加溶解在PBS中的50μL各组测试样品，同时对照组仅添加50μL的PBS。在实验组之间以不产生时间上的差异的方式迅速添加5mM左旋多巴(Levodopa,L-DOPA)溶液50μL，并利用平板读取器(Plate Reader)测定吸光度(475nm)，将其作为初始多巴铬(DOPAchrome)的量。

而后，利用37℃的混合机进行搅拌45min，再次测定吸光度(475nm)作为反应体系最终的吸光度，并测定保存后的DOPA chrome的量，由此测定酪氨酸酶活性受到多大的阻碍，根据所获得的测定值，算出将对照组的酪氨酸酶活力设为1时，添加待测样品的各实验组对酪氨酸酶的抑制率。

(2)黑色素合成抑制实验

将B16黑色素瘤细胞以1×10⁵个/mL的密度接种于96孔板中，每孔90μL，CO₂孵箱中孵育24小时后，每孔加入样品溶液。同时设立培养基和细胞的空白对照组。

将培养板置于孵箱中孵育72小时后，弃去上清液，PBS(磷酸缓冲盐溶液)洗涤两遍，然后每孔加入0.5mL胰酶消化细胞3min，每孔加入2mL维持液终止消化。混匀后，每种浓度取出0.5mL做细胞计数。其余细胞悬液以2500r/min离心分离5min，弃去上清液，于沉淀中加入NaOH溶液，加热使黑色素溶解，选择490nm波长在酶联免疫检测仪下测定吸光度值。

计算样品对黑色素合成抑制率(％)公式如下所示：

其中，A₁为药物孔吸光度值，P₁为药物孔细胞密度，A₂为对照孔吸光度值；P₂为对照孔细胞密度，I'为对应样品对黑色素合成抑制率(％)；

(3)抗光老化测试

蓝光下表皮角质形成细胞氧化应激测试，具体测试方法为：使用蓝光辐射氧化Organotypical皮肤模型，经测试样品抗光老化组合物预处理后进行蓝光照射，蓝光强度为15J/cm²。由于中高剂量的ROS(活性氧簇)会通过细胞氧化应激反应诱导细胞凋亡甚至导致其坏死，因此测量ROS在表皮角质形成细胞积累能够反映出测试样品的抗光老化能力。

(4)抗糖化测试

选取85位年龄在18-50岁之间的女性志愿者，分别在脸部使用个测试样品，受试对象每天使用两次，连续使用30天，测试期间不使用其它任何产品。采用德国MAP580皮肤测试仪测试：

具体测试结果如表4所示：

表4

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由表4的测试数据可知，本发明提供的护肤乳液后相对酪氨酸酶的抑制率在70％以上，对黑色素合成抑制率在60％以上，ROS表皮角质形成细胞积累量在15％以下，糖化抑制率在65％以上。说明本发明所述护肤乳液各组分配伍合理，具有协同增效作用能够有效抑制黑色素转移至角质细胞，抑制黑色素沉着，促进肌肤的新陈代谢，进而减轻色素沉积；能够有效清除自由基，抑制蓝光条件下人体表皮角质细胞ROS的生成，进而保护皮肤细胞不受蓝光照射的损伤，并同时抑制糖化反应。因此，本发明提供的美白精华能够从多个方面实现美白效果，令皮肤健康白皙。

试验例3

对应用实施例1～10和应用对比例1～7提供的护肤乳液进行自由基清除测试，方法如下：

(1)对超氧阴离子自由基清除能力的测定

取0.05mol/L pH为8.2的Tris-HCl缓冲液4.5mL，于25℃水浴锅中预热20min，再分别加入上述测试样品，再加入0.4mL 25mmol/L的邻苯三酚溶液，混匀后，于25℃水浴中反应5min，加入8mol/L的HCl 1.0mL终止反应。

以Tris-HCl缓冲液作参比，在299nm处测吸光度值。空白对照用1mL蒸馏水来替代样品，计算得到清除率。清除率公式(D)(％)＝[1-(A₄/A₃)]×100％；式中A₃为空白对照的吸光度值；A₄为样品的吸光度值；

(2)对羟自由基的清除能力的测定

在25mL比色管中依次加入2mmol/L FeSO₄ 3mL，1mmol/L H₂O₂ 3mL，摇匀，接着加入6mmol/L水杨酸3mL，摇匀，于37℃水浴加热15min后取出，测其吸光度A_o。然后分别加入100mg·L^-1的待测样品，摇匀，继续水浴加热15min，取出测其吸光度A_x。按上述方法，另取比色管，重复依次加入以上各液体，不加水杨酸，摇匀，水浴加热15min，测值A_xo。其中计算羟自由基清除率的公式为：羟自由基清除率(％)＝A₀-(A_x-A_x0)/A₀×100％；式中A₀为空白对照体系的吸光度值；A_x为加入待测样品体系的吸光度值；A_x0为不加显色剂H₂O₂溶液本底的吸光度值。

具体测试结果如表5所示：

表5

由表5的测试数据可知，本发明提供的护肤乳液对超氧阴离子自由基的清除率在63％以上，对羟自由基的清除率抑制率在62％以上，具有很好地自由基清除效果，抗氧化功效。由于色斑最终形成的原因是体内自由基氧化的结果，当人体抗氧化酶活性下降，不能及时抵抗自由基的侵害时，色斑就在脸上形成了，而本申请的护肤乳液能够很好地清除并抵抗自由基的侵害，由此减缓过氧化氢酶催化脂类过氧化分解MDA的过程，从而根本上解决皮肤的老化暗沉问题。

试验例4

美白、抗衰效果评测

选取85位年龄在18-50岁之间的女性志愿者，分别在脸部使用应用实施例1～10和应用对比例1～7提供的护肤乳液，每天早晚各使用1次，共使用4周。

(1)采用皮肤红黑色素测试仪(Hexameter MX18)评估受试对象使用面膜组合物前、后皮肤黑色素含量变化。所用仪器的测量范围是0-999，测量数值越高，说明皮肤中黑色素含量越高。受试对象使用本发明制备的面膜组合物前、后面部肌肤黑色素的减少量；

(2)VISIA皮肤分析评价：受试志愿者面部清洁后采用VISIA面部图像分析仪进行面部拍摄，分析面部色素斑、纹理、皱纹的检测数据，数值越高代表色素斑、纹理的现象越明显。一疗程结束后将VISIA面部图像分析仪得到的信息与治疗前的信息进行对比，分析受试志愿者的面部色素斑、纹理和皱纹的改善情况，统计数据如表8所示，p＜0.02，具有统计学意义。

(3)提亮功效：利用皮肤色差测试仪(探头CL400及多探头皮肤测试***MPA10)分别测试治疗前和治疗后受试志愿者的面部肤色情况，并计算ITA°。测试条件为22℃、湿度50％的恒温恒湿环境。

具体测试结果如表6所示：

表6

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由表6测试数据可知，对比治疗前后的VISIA测试结果可知，使用应用实施例1～10提供的护肤乳液治疗期间无不良反应病例发生，总体肤感较好、清爽，受试对象的黑色素减少量明显，受试志愿者的皮肤色斑和纹理情况均有显著改善，面部肤色的提亮效果明显，疗效评价为有效。说明本发明所述护肤乳液能够有效促进皮肤胶原蛋白、弹性蛋白的表达，还具有减缓皮肤老化、改善色斑、美白提亮、减少皱纹的功效。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的皮肤屏障修护复合物、护肤乳液及其制备方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims

1.一种皮肤屏障修护复合物，其特征在于，所述皮肤屏障修护复合物按重量份数计包括：修复皮肤屏障的组合物1-10份、积雪草提取物1-5份、库拉索芦荟叶提取物1-5份、熊果叶提取物0.1-3份、胀果甘草根提取物0.1-3份和燕麦蛋白提取物0.1-3份；

所述修复皮肤屏障的组合物包括质量比为(3-9):(2-5):(1-3)的海茴香愈伤组织培养物滤液、四氢甲基嘧啶羧酸和水解红藻提取物；

所述水解红藻提取物为纯净海域的杜尔维利藻提取物；

所述海茴香愈伤组织培养物滤液的制备方法包括以下步骤：

(4)分离：将步骤(3)得到的海茴香愈伤组织培养物通过100目的纱布进行过滤，再在25℃下进行真空干燥，得到所述茴香愈伤组织培养物滤液；

所述水解红藻提取物的制备方法包括以下步骤：

2.一种护肤乳液，其特征在于，所述护肤乳液包括如权利要求1所述的皮肤屏障修护复合物。

3.根据权利要求2所述的护肤乳液，其特征在于，所述护肤乳液按质量百分含量计包括：

1-10％权利要求1所述的皮肤屏障修护复合物、5-20％皮肤调理剂、10-30％保湿剂、1-10％润肤剂和0.3-1.5％乳化剂，余量为水。

4.根据权利要求3所述的护肤乳液，其特征在于，所述皮肤调理剂包括皱波角叉菜提取物、神经酰胺3、氢化卵磷脂、透明质酸硅烷醇、烟酰胺、棕榈酰三肽-1、棕榈酰三肽-5或九肽-1中的任意一种或至少两种的组合。

5.根据权利要求4所述的护肤乳液，其特征在于，所述透明质酸硅烷醇由大分子透明质酸和硅烷三醇组成。

6.根据权利要求5所述的护肤乳液，其特征在于，所述大分子透明质酸和硅烷三醇的质量比为(0.5-2):1。

7.根据权利要求5所述的护肤乳液，其特征在于，所述大分子透明质酸的分子量为150万-180万道尔顿。

8.根据权利要求3所述的护肤乳液，其特征在于，所述保湿剂包括透明质酸钠、海藻糖、甘油、水解透明质酸钠、糖类同分异构体、1,2-己二醇、丁二醇、泛醇、木糖醇、脱水木糖醇或木糖醇基葡糖苷中的任意一种或至少两种的组合。

9.根据权利要求8所述的护肤乳液，其特征在于，所述透明质酸钠的分子量为80万-100万道尔顿。

10.根据权利要求8所述的护肤乳液，其特征在于，所述水解透明质酸钠的分子量为20万-40万道尔顿。

11.根据权利要求3所述的护肤乳液，其特征在于，所述润肤剂包括角鲨烷、牛油果树果脂、环五聚二甲基硅氧烷、环己硅氧烷、聚二甲基硅氧烷或聚二甲基硅氧烷醇中的任意一种或至少两种的组合。

12.根据权利要求3所述的护肤乳液，其特征在于，所述乳化剂包括C20-22醇和/或C20-22醇磷酸酯。

13.根据权利要求3所述的护肤乳液，其特征在于，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.5-2％的抗氧化剂。

14.根据权利要求13所述的护肤乳液，其特征在于，所述抗氧化剂包括对羟基苯乙酮和/或生育酚乙酸酯。

15.根据权利要求3所述的护肤乳液，其特征在于，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.1-2％的增稠剂。

16.根据权利要求15所述的护肤乳液，其特征在于，所述增稠剂包括丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、异十六烷、聚山梨醇酯-80、水解小核菌胶或卡波姆中的任意一种或至少两种的组合。

17.根据权利要求3所述的护肤乳液，其特征在于，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.05-0.5％的pH调节剂。

18.根据权利要求17所述的护肤乳液，其特征在于，所述pH调节剂为三乙醇胺。

19.根据权利要求3所述的护肤乳液，其特征在于，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.02-0.1％的螯合剂。

20.根据权利要求19所述的护肤乳液，其特征在于，所述螯合剂为EDTA二钠。

21.根据权利要求3所述的护肤乳液，其特征在于，以所述护肤乳液总质量为100％计，所述护肤乳液还包括0.01-0.1％的芳香剂。

22.根据权利要求21所述的护肤乳液，其特征在于，所述芳香剂为香精。

23.根据权利要求3-12中任一项所述的护肤乳液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(3)将步骤(2)得到的均质液、权利要求1所述的皮肤屏障修护复合物及皮肤调理剂，混合搅拌，得到所述护肤乳液。