CN111308032A - 一种小罗伞药材的质量控制方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种小罗伞药材的质量控制方法，涉及中药材技术领域。包括(1)药材粉末显微鉴别；(2)药材水分、总灰分及浸出物含量范围：水分不得过15.0％，总灰分不得过9.0％，浸出物照醇溶性浸出物测定法(《中国药典》2015年版四部通则2201)项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于12.0％；(3)薄层色谱鉴别；供试品色谱中，应与小罗伞对照药材溶液色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。本发明建立了一种科学、完整、可靠、有效的小罗伞药材的质量控制方法，该方法专属性较强，具有良好的重现性；同时，采用该方法建立了小罗伞药材的质量标准，能够有效的评价和控制药材的内在质量和用药品质。

Description

一种小罗伞药材的质量控制方法
技术领域
本发明涉及中药材技术领域，具体涉及一种小罗伞药材的质量控制方法。
背景技术
小罗伞为紫金牛科植物小罗伞Ardisia punctata Lindl的根或全株。全年均可采挖，洗 净，鲜用或干燥。小罗伞始载于《实用中草药手册》，根或全株供药用，有通经补血、祛风湿 之功效。在《中药大辞典》、《中药辞海》等药学专著中均有收载。大多数本草都以小罗伞为名 记载，民间用药也习称小罗伞，所以将小罗伞定为正名。别名：血党、活血眙、腺点紫金牛(《广 西实用中草药新选》)，山血丹、沿海紫金牛、斑叶朱砂根、小凉伞、珍珠盖凉伞(广州空军《常 用中草药手册》)。
小罗伞为灌木或小灌木，高1-2m；茎幼时被细微柔毛，无皱纹，除侧生特殊花枝外，无 分枝。叶片革质或近坚纸质，长圆形至椭圆状披针形，顶端急尖或渐尖，稀钝，基部楔形，长10-15cm，宽2-3.5cm，近全缘或具微波状齿，齿尖具边缘腺点，边缘反卷，叶面无毛， 中、侧脉微***，背面被细微柔毛，脉***，除边缘外其余无腺点或腺点极疏，侧脉8-12 对，连成远离边缘的边缘腺；叶柄长1-1.5cm，被微柔毛。亚伞形花序，单生或稀为复伞形 花序，着生于侧生特殊花枝顶端；花枝长3-11cm，顶端下弯，且具少数退化叶或叶状苞片， 被细微柔毛；花梗长8-12mm；果时达2.5cm；花长约5mm，花萼仅基部连合，被微柔毛，萼 片长圆状披针形或卵形，顶端急尖，长2-3mm，具缘毛或几无毛，具腺点；花瓣白色，椭圆 状卵形，顶端圆形，具明显的腺点，里面被微柔毛，外面无毛；雄蕊较花瓣略短，花药披针 形，顶端具小尖头，背部具腺点；雌蕊与花瓣等长，子房卵珠形，被微柔毛，具腺点；胚珠 5枚，1轮。果球形，直径约6mm，深红色，微肉质，具疏腺点。花期5-7月，少数于4、8、 11月，果期10-12月，有时有的植株上部枝条开花，下部枝条果熟。
目前，小罗伞主要具有活血调经，祛风除湿的作用，其特有的药效已被民间广泛认同。 目前市场上已开始对含有小罗伞作为有效成分的药品进行开发，但由于缺少好的质量控制方 法，难以控制小罗伞药材的质量，给正常的生产经营带来了困难，因此需要对其质量控制方 法进行规范，以控制小罗伞药材的质量。目前，小罗伞药材尚未建立相关标准。现有技术仅 涉及小罗伞药材性状(《贵州省中药材、民族药材质量标准》)的检查，针对性不强，使用这 些方法难以达到真正控制药材质量的目的。
发明内容
为解决上述背景技术中存在的问题，本发明提供了一种小罗伞药材的质量控制方法，能够 有效的评价和控制药材的内在质量和用药品质。
为了实现上述技术目的，本发明采用以下技术方案：
一种小罗伞药材的质量控制方法，包括(1)药材粉末显微鉴别；粉末为棕褐色，淀粉粒 较多，单粒类圆形、椭圆形、多角形或不规则形，直径约4～30μm，脐点点状或裂缝状，复 粒由2～20粒组成，石细胞类圆形、椭圆形、长方形或不规则形，直径约15～90μm，壁较厚或极厚，纹孔及孔沟明显；(2)药材水分、总灰分及浸出物含量范围：水分不得过15.0％，总灰分不得过8.0％，浸出物照醇溶性浸出物测定法(《中国药典》2015年版四部通则2201) 项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于12.0％；(3)薄层色谱鉴别；供试品色谱中， 应与岩白菜素对照品溶液色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
其中，所述薄层色谱采用硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，以 体积比为1:1的1％三氯化铁试液与1％铁***试液混合溶液作为显色剂。
本发明中，所述薄层色谱按以下操作进行：取供试品溶液5-10μl，对照品溶液5-10μl， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4-6:5-7:0.8-1.2:0.5的正己烷-乙酸乙酯-甲醇- 甲酸溶液作为展开剂，展开，取出，晾干；喷以体积比为1:1的1％三氯化铁试液与1％铁氰化 钾试液混合溶液，显色；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
优选的，所述展开剂正己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸的体积比为5:6:1:0.5。
本发明中，所述供试品采用以下方法制备：所述供试品采用以下方法制备：取供试品粉末 置具塞锥形瓶中，加有机溶剂，超声处理，滤过，浓缩,作为供试品溶液。
优选的，所述供试品采用以下方法制备：取本品粉末约0.5g,加甲醇30ml，超声处理30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液。
本发明中，所述对照品采用以下方法制备：取岩白菜素对照品，加甲醇制成每1mL含1mg 的溶液，作为对照品溶液。
其中，小罗伞药材的质量控制方法，还包括含量测定，所述含量测定采用的流动相为甲醇 -水溶液，柱温25℃，检测波长为275nm。
进一步的，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为20:80的甲醇-水溶液为流动 相；柱温25℃，流速为1.0ml/min；检测波长为275nm；理论板数按岩白菜素峰计算不得低于 3000，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
优选的，取岩白菜素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含65ug的溶液，即得对 照品溶液；取药材粉末(过三号筛)0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80％甲醇50ml， 密塞，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：本发明通过药材的显微鉴别，并结合水分、 总灰分、浸出物和薄层色谱法，建立了一种科学、完整、可靠、有效的小罗伞药材的质量控制 方法，该方法专属性较强，具有良好的重现性；同时，本发明的质量控制方法还包括采用以岩 白菜素为对照品的含量检测方法。采用该方法建立了小罗伞药材的质量标准，能够有效的评价 和控制药材的内在质量和用药品质。
附图说明
图1：小罗伞药材粉末的显微特征图，图中：1、淀粉粒2、石细胞；
图2：小罗伞于温度：25℃，湿度：54％时，用于薄层鉴别方法色谱图；图中：1、样品(产 地:广西)，2、样品(产地：四川)，3、样品(产地：广东)，4、样品(产地：云南)、5、样 品(产地:贵州)，6、7小罗伞对照药材；
图3：小罗伞于温度：5℃，湿度：63％时，用于薄层鉴别方法色谱图；图中：1、样品(产 地:广西)，2、样品(产地：四川)，3、样品(产地：广东)，4、样品(产地：云南)、5、样 品(产地:贵州)，6、7小罗伞对照药材；
图4：小罗伞于温度：40℃，湿度：40％时，用于薄层鉴别方法色谱图；图中：1、样品(产地:广西)，2、样品(产地：四川)，3、样品(产地：广东)，4、样品(产地：云南)、5、 样品(产地:贵州)，6、7小罗伞对照药材；
图5：小罗伞于温度：25℃，湿度：72％时，用于薄层鉴别方法色谱图；图中：1、样品(产地:广西)，2、样品(产地：四川)，3、样品(产地：广东)，4、样品(产地：云南)、5、 样品(产地:贵州)，6、7小罗伞对照药材；
图6：小罗伞于温度：25℃，湿度：32％时，用于薄层鉴别方法色谱图；图中：1、样品(产地:广西)，2、样品(产地：四川)，3、样品(产地：广东)，4、样品(产地：云南)、5、 样品(产地:贵州)，6、7小罗伞对照药材；
图7：小罗伞于温度：25℃，湿度：54％时，以青岛海洋硅胶G板用于薄层鉴别方法色谱 图；图中：1、样品(产地:广西)，2、样品(产地：四川)，3、样品(产地：广东)，4、样 品(产地：云南)、5、样品(产地:贵州)，6、7小罗伞对照药材；
图8：小罗伞于温度：25℃，湿度：54％时，以手铺硅胶G板用于薄层鉴别方法色谱图； 图中：1、样品(产地:广西)，2、样品(产地：四川)，3、样品(产地：广东)，4、样品(产 地：云南)、5、样品(产地:贵州)，6、7小罗伞对照药材；
图9：HPLC方法的专属性色谱图；
图10：HPLC中岩白菜素线性图；
图11：HPLC中岩白菜素拟合线性图；
具体实施方式
为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例对本发明进行进一步详 细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例
1、实验仪器及药材
药材:
由贵州盛世龙方制药股份有限公司提供，并鉴定为紫金牛科植物小罗伞Ardisiapunctata Lindl的根或全株，凭证标本存放于贵州盛世龙方制药股份有限公司。样品产地：(1)广西、(2)广东、(3)四川、(4)云南及(5)贵州。
仪器与试药：
电子天平AUW-220D型(日本岛津)；数控超声波清洗器KQ-500DE型(江苏省昆山市超声仪器有限公司)；数显恒温水浴锅HH-4(国华电器有限公司)；恒温干燥箱101-1型(上海浦鸿仪器厂)、干燥器；电子天平(Shimadzu Libror AEL 40SM赛多利斯),WFH-201B 紫外透射反射仪(上海精科实业有限公司),岛津LC2010液相色谱仪，奥林巴斯MD-50 型生物显微镜与配套的显像***,以及常规显微制片的刀片、载玻片盖玻片、镊子、水 合氯醛、稀甘油、蒸馏水、正己烷(分析纯，重庆川东化工(集团)有限公司)、乙酸乙酯(分 析纯，重庆川东化工(集团)有限公司)、甲醇(分析纯，重庆川东化工(集团)有限公司)、 甲酸(分析纯，重庆川东化工(甲醇(色谱纯，赛默飞世尔科技(中国)有限公司)、水(娃 娃哈纯化水)等。
2.1显微鉴别：
通过对5个药材样品(广西、四川、广东、云南、贵州)的粉末进行观察和测量，如图1所示，其显微鉴别特征总结如下：
粉末为棕褐色。淀粉粒较多，单粒类圆形、椭圆形、多角形或不规则形，直径约4～30μ m，脐点点状或裂缝状，复粒由2～20粒组成。石细胞类圆形、椭圆形、长方形或不规则形， 直径约15～90μm，壁较厚或极厚，纹孔及孔沟明显。
2.2薄层鉴别
2.2.1以岩白菜素为对照品的薄层色谱方法鉴别
取本品粉末约0.5g,加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml 使溶解,作为供试品溶液。另取岩白菜素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照 品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验，吸取上述2种溶液各3～ 5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(5:6:1:0.5)为展开剂， 展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁试液与1％铁***试液(体积比为1:1)混合溶液。供 试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。将该方法列入新修订质量标 准正文。
2.2.2薄层色谱方法学耐用性考察
①温度的考察：进行了室温(25℃)、低温(5℃)和高温(40℃)的考察，结果均较好。(见附图2、3、4)
②湿度的考察：进行了高湿度(72％)和低湿度(32％)的考察，结果均较好。(见附图5、6)
③不同薄层硅胶G板的考察：共试验两种薄层硅胶G板，分别为青岛海洋化工有限公司及 手铺硅胶G板。(见附图7、8)
结论：在此试验条件下，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 结果表明，分离度好，斑点显色清晰，故选择将此项列入质量标准正文。
2.3水分的检查
取不同产地小罗伞药材粉末(过2号筛)约2.0g，照(《中国药典》2015年版四部通则0832) 水分测定法第二法测定。样品测定结果为11.2～12.5％，根据测定结果，最高测定值为12.5％， 以最高测定值的120％设限，为15.0％，结合药材特性、采收加工及贮藏过程等因素，拟定水分 不得过15.0％，因此，建议收入质量标准正文。不同产地样品测定见表1。
2.4总灰分的检查
取不同产地小罗伞药材粉末(过2号筛)约4.0g，照(《中国药典》2015年版四部通则2302) 灰分测定法测定。样品测定结果为2.8～6.9％，根据测定结果，最高测定值为6.9％，以最高测 定值的120％设限，为8.3％，结合药材特性、采收加工及贮藏过程等因素，拟定总灰分不得过 8.0％，因此，建议收入质量标准正文。不同产地样品测定见表1。
2.5酸不溶性灰分的检查
取总灰分检查中所得的灰分，照(《中国药典》2015年版四部通则2302)灰分测定法测定。 样品测定结果为0.1～0.4％，平均值为0.3％，由于酸不溶性灰分较少，故不列入标准草案正文。 不同产地样品测定见表1。
2.6浸出物的测定
2.6.1水溶性浸出物的测定：测定用的供试品需粉碎，使能通过二号筛，并混合均匀。
(1)冷浸法：取小罗伞药材粉末(样品产地：广东)约2.0g，精密称定，置100ml的锥形瓶中，精密加水50ml，密塞，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅 速滤过，精密量取续滤液20ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥 3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(％)。结果见表2。
(2)热浸法：取小罗伞药材粉末(样品产地：广东)约2.0g，精密称定，置100ml的 锥形瓶中，精密加入水50ml，塞紧,称定重量,静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾， 并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶,密塞,再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀,用 干燥滤器滤过。精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(％)。结果见表2。
表2小罗伞药材的水溶性浸出物含量(％)
产地 冷浸法 热浸法
广东 13.6％ 21.8％
试验结果：在小罗伞药材中采用热浸法测得的浸出物含量比冷浸法高，故选择热浸法。
2.6.2.醇溶性浸出物测定：照醇溶性浸出物测定法项下热浸法测定。以乙醇、稀乙醇、80％ 乙醇作溶剂。取小罗伞药材粉末(样品产地：广东)供试品约2.0g，精密称定，3份，分别置 100ml的锥形瓶中，精密加入乙醇(为95％乙醇，下同)、稀乙醇(为49.5％-50.5％乙醇，下同)、 80％乙醇50ml，密塞，按2.6.1(2)法试验。结果见表3。
表3小罗伞药材的醇溶性浸出物含量(％)
溶剂 浸出物
乙醇 29.2％
80％乙醇 14.4％
稀乙醇 31.0％
试验结果：根据测定结果，用稀乙醇作溶剂，按《中国药典》2015年版四部通则2201) 浸出物测定法项下热浸法，测定了5个不同产地的样品，测定结果见表1,根据测定结果，最 低值为15.6％，以最低测定值的80％设限，为12.5％，拟定浸出物标准不得少于12.0％，建议收 入标准正文。
表1小罗伞水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物测定结果
Figure BDA0002364844030000071
Figure BDA0002364844030000081
2.7含量测定
2.7.1测定方法
2.7.1.1色谱条件的选择：
(1)色谱条件色谱柱：WELCHR0M C18(5um，250×4.6mm)；流动相：甲醇-水(20：80)；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：275nm。
(2)流动相：采用甲醇-水(20:80)为流动相，待测成分岩白菜素与其他杂质较好分离。
(3)检测波长：选择岩白菜素的检测波长为275nm。
(4)理论塔板数：根据不同品牌色谱柱测定结果，理论塔板数按岩白菜素峰计算应不低于 3000。
2.7.1.2供试品溶液的制备：
取本品粉末(过三号筛)约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80％甲醇50ml， 密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率35KHZ)20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.7.1.3对照品溶液的制备：取岩白菜素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含 65ug的溶液，即得。
2.7.1.4提取方法的选择
取小罗伞(样品产地：广东)样品，混匀,取2份，每份约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，一份浸渍1小时，一份超声处理(250W，频率35kHz)20min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
分别精密吸取对照品溶液和两份供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，照上述色谱条件测 定，记录色谱图(见附图)。结果见下表4：
表4提取方法选择
Figure BDA0002364844030000091
结果表明，超声的含量比浸渍的含量高，因此，提取方法选择超声。
2.7.1.5取样量的考察
取小罗伞(样品产地：广东)样品，混匀,取3份，分别为0.2g、0.3g、0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率35KHZ) 20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分别 精密吸取对照品溶液和三份供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，照上述色谱条件测定，记 录色谱图(见附图)。结果见下表5：
表5取样量考察
Figure BDA0002364844030000092
结果表明，取样0.2g、0.3g、0.5g的含量偏差为1.05％，含量偏差不大，故选择取样量 为0.2g。
2.7.1.6提取时间的选择
取小罗伞(样品产地：广东)样品，混匀,取3份，每份约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率35KHZ)20分钟、 40分钟、60分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分别精密 吸取岩白菜素对照品溶液和三份供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，照上述色谱条件测定， 记录色谱图(见附图)。结果见下表6：
表6提取时间选择
Figure BDA0002364844030000093
Figure BDA0002364844030000101
结果表明，超声20分钟、40分钟、60分钟含量偏差为0.39％，故提取时间选用20分钟。
2.7.1.7提取溶剂的选择
取小罗伞(样品产地：广东)样品，混匀,取3份，每份约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇、乙醇、80％甲醇各50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W， 频率35KHZ)20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇、乙醇、80％甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，取续滤液，即得。分别精密吸取岩白菜素对照品溶液和三份供试品溶液各10μl，注入 液相色谱仪，照上述色谱条件测定，记录色谱图(见附图)。结果见下表7：
表7提取溶剂的选择
Figure BDA0002364844030000102
结果表明，甲醇、乙醇提取的含量相差不大，80％甲醇提取的含量较高，故选择80％甲醇 为溶剂。
2.7.2方法学验证
2.7.2.1专属性
取小罗伞(样品产地：广东)样品按供试品溶液制备方法制备样品溶液，按上述色谱条件， 分别取对照品溶液、样品溶液注入液相色谱仪，样品溶液色谱在对照品溶液色谱相应位置有相 应的色谱峰，见专属性色谱图。
2.7.2.2线性关系的考察
按上述色谱条件，精密吸取岩白菜素对照品溶液(112.2416μg/ml)2μl，4μl，6μl，8μl，10μl，14μl依次注入液相色谱仪，测定峰面积。以对照品进样量X为横坐标，峰面 积Y为纵坐标，进行线性回归计算，绘制工作曲线(图8、图9)，得出线性回归方程为：Y＝1706883.0410X+19636.9429,R＝0.9998(结果见表8)，拟合过原点方程为：Y＝1727262.5410 X，随机选择一组数据分别带入线性回归方程和拟合过原点方程进行验证，当X＝1.4268时，线 性回归方程Y＝2455051.803，拟合过原点方程Y＝2464492.739，偏差为0.19％，说明拟合过原 点方程成立。岩白菜素在0.2038～1.4268μg的范围内对照品的进样量与峰面积呈良好的线性 关系。见线性图8、图9。
表8岩白菜素线性关系考察
Figure BDA0002364844030000111
2.7.2.3精密度试验
精密吸取对照品溶液10μl,重复进样6次，照上述色谱条件测定，测定对照品峰面积，记 录色谱图(见附图)，求出相对标准偏差，结果表明精密度良好，结果见下表9。
表9岩白菜素精密度实验结果
Figure BDA0002364844030000112
2.7.2.4重复性试验
取小罗伞(样品产地：广东)，按质量标准草案中供试品溶液的制备方法制备供试品溶液 6份，按上述色谱条件测定岩白菜素的含量，结果见下表10及重复性色谱图，说明有较好重 复性好。
表10岩白菜素重复性试验结果
Figure BDA0002364844030000121
2.7.2.5稳定性试验
取小罗伞(样品产地：广东)，按质量标准草案中供试品溶液的制备方法制备供试品溶液。 在室温下每隔一段时间进样10μl，照上述色谱条件测定，测定峰面积，记录色谱图(见附图)， 计算含量，求相对标准偏差，结果表明，该样品在12小时内稳定(RSD＝0.63％)，结果见下表 11。
表11岩白菜素稳定性试验结果
Figure BDA0002364844030000122
2.7.2.6准确度试验
取已测定含量的小罗伞(样品产地：广东，岩白菜素平均含量16.6249mg/g)0.1g，精密 称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含岩白菜素对照品(0.032516mg/ml)的80％甲醇溶液50ml， 按供试品溶液制备方法制备样品溶液，并按上述色谱条件测定岩白菜素的含量，计算回收率， 结果见下表12及准确度色谱图，说明有较好回收率。
表12岩白菜素回收率试验数据(n＝6)
Figure BDA0002364844030000131
2.7.2.7耐用性
采用不同品牌十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，分别测定了小罗伞(样品产地： 广东)中岩白菜素的含量，考察不同品牌的色谱柱的影响。色谱图见耐用性色谱图，含量测定 结果见下表13。结果表明不同品牌十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱对含量测定无影 响。
表13不同品牌色谱柱的测定结果
Figure BDA0002364844030000132
2.7.3样品测定
取5个不同产地样品，按质量标准草案方法测定岩白菜素含量(结果见表14)。按下式计 算含量：
Figure BDA0002364844030000133
式中：A样——供试品中岩白菜素峰面积积分值
A对——岩白菜素对照品峰面积积分值
C对——岩白菜素对照品浓度(mg/ml)
M样——供试品取样量(g)
50—供试品稀释体积(ml)
表14不同产地小罗伞中岩白菜素的含测结果
Figure BDA0002364844030000141
根据以上5个不同产地药材测定结果，含量最低值为1.4％，以最低测定值的80％设限，结 合药材产地、采收季节及炮制加工等因素，暂定本品按干燥品计算，含岩白菜素(C14H16O9)计， 不得少于1.0％。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说， 在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明 的保护范围。

Claims (10)

1.一种小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：包括(1)药材粉末显微鉴别；粉末为棕褐色，淀粉粒较多，单粒类圆形、椭圆形、多角形或不规则形，直径约4～30μm，脐点点状或裂缝状，复粒由2～20粒组成，石细胞类圆形、椭圆形、长方形或不规则形，直径约15～90μm，壁较厚或极厚，纹孔及孔沟明显；(2)药材水分、总灰分及浸出物含量范围：水分不得过15.0％，总灰分不得过8.0％，浸出物照醇溶性浸出物测定法(《中国药典》2015年版四部通则2201)项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于12.0％；(3)薄层色谱鉴别；供试品色谱中，应与岩白菜素对照品溶液色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
2.根据权利要求1所述的小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：所述薄层色谱采用硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，以体积比为1:1的1％三氯化铁试液与1％铁***试液混合溶液作为显色剂。
3.根据权利要求2所述的小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：所述薄层色谱按以下操作进行：取供试品溶液5-10μl，对照品溶液5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4-6:5-7:0.8-1.2:0.5的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸溶液作为展开剂，展开，取出，晾干；喷以体积比为1:1的1％三氯化铁试液与1％铁***试液混合溶液，显色；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4.根据权利要求3所述的小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：所述展开剂正己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸的体积比为5:6:1:0.5。
5.根据权利要求3所述的小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：所述供试品采用以下方法制备：取供试品粉末置具塞锥形瓶中，加有机溶剂，超声处理，滤过，浓缩,作为供试品溶液。
6.根据权利要求5所述的小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：所述供试品采用以下方法制备：取本品粉末约0.5g,加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液。
7.根据权利要求3所述的小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：所述对照品采用以下方法制备：取岩白菜素对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。
8.根据权利要求1所述的小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：还包括含量测定，所述含量测定采用的流动相为甲醇-水溶液，柱温25℃，检测波长为275nm。
9.根据权利要求8所述的小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为20:80的甲醇-水溶液为流动相；柱温25℃，流速为1.0ml/min；检测波长为275nm；理论板数按岩白菜素峰计算不得低于3000，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
10.根据权利要求9所述的小罗伞药材的质量控制方法，其特征在于：取岩白菜素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含65ug的溶液，即得对照品溶液；取药材粉末(过三号筛)0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80％甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
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