CN111265594A - 用于修复伤口的药物制剂及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于修复伤口的药物制剂及其制备方法，所述药物制剂包括以下组分：寡壳聚糖，紫珠草、五倍子、南竹子、甘油、聚乙二醇及蒸馏水；其制备方法如下：向反应瓶中依次加入紫珠草、五倍子、南竹子、乙醇，搅拌均匀，加热回流，提取过滤液，减压浓缩，冷却，放置，过滤去除不溶物，浓缩至干，加入蒸馏水溶解，冷却，放置，过滤去除不溶物，再依次加入寡壳聚糖、甘油、分子量为600的聚乙二醇，搅拌使其充分溶解，加蒸馏水定容，得到用于修复伤口的药物制剂。本发明所述药物制剂无毒、伤口修复效果显著、刺激性小，用于修复伤口具有较大的临床应用价值和社会效益；本发明所述药物制剂的制备原料易得、制备方法简单，便于实现工业化。

Description

用于修复伤口的药物制剂及制备方法
技术领域
本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种用于修复伤口的药物制剂及制备方法。
背景技术
传统伤口修复药物制剂大多存在毒性大、刺激性大，或者高分子材料异物感明显、效果差等问题。壳聚糖是由甲壳素经过生物降解或其他方法得到的次生产物，有一定的生理活性，如修复伤口、抑菌等，但其水溶性差、作用于伤口后修复效果低。寡壳聚糖是壳聚糖以特定条件降解的衍生物，有空间构型独特、水溶性高、化学结构稳定、生理活性强等优点，但是单独应用于伤口修复效果仍不显著。研究发现，将寡壳聚糖与天然植物提取物以一定条件和比例结合，可形成稳定的结合物，制成伤口修复制剂，可解决传统伤口修复药物制剂存在毒性大、刺激性大，或者高分子材料异物感明显、效果差等问题。
发明内容
本发明的目的是克服上述现有技术的不足，提供一种无毒、高效、刺激性小的用于修复伤口的药物制剂及制备方法。
为实现上述目的，本发明提出了如下技术方案：
本发明的第一方面，提供一种用于修复伤口的药物制剂，所述药物制剂包括以下重量份数的组分：寡壳聚糖1～10份，紫珠草1～5份，五倍子1～5份，南竹子1～5份，甘油1～5份，分子量为600的聚乙二醇1～5份，蒸馏水65～94份。
本发明所述药物制剂的最佳重量分数配比为：寡壳聚糖5份，紫珠草2份，五倍子2份，南竹子2份，甘油2份，分子量为600的聚乙二醇2份，蒸馏水85份。
其中，所述紫珠草主要作用为抗菌止血，所述五倍子主要作用为止血解毒，所述南竹子的主要作用为清热除湿。
优选的，所述寡壳聚糖平均分子量为650～1900，这个分子量段的寡壳聚糖水溶性高，易制成溶液，有更好的生物活性，临床使用效果更好。
本发明的第二方面，提供一种用于修复伤口的药物制剂的制备方法：向反应瓶中依次加入紫珠草、五倍子、南竹子、乙醇，搅拌均匀，加热回流1～3次，每次0.5～3小时，提取过滤液，减压浓缩至糖浆状，冷却至0～10℃，放置0.5～48小时，过滤去除不溶物，浓缩至干，加入蒸馏水溶解，冷却至0～10℃，放置12～72小时，过滤去除不溶物，再依次加入寡壳聚糖、甘油、分子量为600的聚乙二醇，搅拌使其充分溶解，加适量蒸馏水定容，得到用于修复伤口的药物制剂。
其中，所述寡壳聚糖制备方法如下：将壳聚糖溶于乙酸中，搅拌溶解，加入含酶量为52u的混合酶，45℃下水解30分钟，110℃下灭酶15分钟，离心取上清液，冷冻干燥，得到寡壳聚糖，所述壳聚糖(单位：克)：乙酸(单位：毫升)：混合酶(单位：毫升)为1:35～40:0.9～1.1。
优选的，所述混合酶由45wt％的苹果蛋白酶和55wt％的木瓜蛋白酶组成，选用此比例的混合酶，可以提高酶降解效率和寡壳聚糖产率，更重要的是，对生成的寡壳聚糖的分子量范围有重大的影响。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明所述药物制剂无毒、伤口修复效果显著、刺激性小，可用于制备修复伤口药物，用于修复伤口具有较大的临床应用价值和社会效益；除此之外，本发明所述药物制剂的制备原料易得、制备方法简单，便于实现工业化。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。
实施例1
将壳聚糖20g用乙酸800ml溶解，壳聚糖浓度为0.025g/ml，加入苹果蛋白酶和木瓜蛋白酶组成的混合酶20ml水解，45℃水解30mim，110℃灭酶15min，离心取上清液，冷冻干燥，得寡壳聚糖18.52g。经LC-MS测试，确认其为寡壳聚糖，平均分子量为1260，纯度≥99％。
其中，所述壳聚糖购自济南海得贝海洋工程有限公司，脱乙酰化度为95％，水分为4.6％，灰分为0.5％，粘均分子量为10万。
本实施例所得寡壳聚糖LC-MS测试结果为：平均分子量为1260，纯度≥99％。
实施例2
一种用于修复伤口的药物制剂，包括以下重量组分：寡壳聚糖5g，紫珠草2g，五倍子2g，南竹子2g，甘油2g，分子量为600的聚乙二醇2g，蒸馏水85mL；其中所述寡壳聚糖为实施例1所制备。
上述用于修复伤口的药物制剂的制备方法如下：向1000ml烧瓶中，加入2g紫珠草、2g五倍子、2g南竹子，与500ml 80％乙醇一起混合，充分搅拌使其混合均匀，加热回流3小时后滤去不溶物，减压浓缩至100ml。再将浓缩液冷却至1℃，放置24小时后过滤除去不溶物，将滤液浓缩至干，加入50ml蒸馏水溶解，冷却至1℃，放置48小时后过滤出去不溶物，再加入5g寡壳聚糖、2g甘油、2g聚乙二醇600，搅拌使其充分溶解，加蒸馏水定容至100ml，即得药物制剂。
实施例3
一种用于修复伤口的药物制剂，包括以下重量组分：寡壳聚糖5g，紫珠草1g，五倍子3g，南竹子2g，甘油4g，分子量为600的聚乙二醇3g，蒸馏水82mL；其中所述寡壳聚糖为实施例1所制备。
上述用于修复伤口的药物制剂的制备方法如下：向1000ml烧瓶中，加入1g紫珠草、3g五倍子、2g南竹子，与500ml 80％乙醇一起混合，充分搅拌使其混合均匀，加热回流3小时后滤去不溶物，减压浓缩至100ml。再将浓缩液冷却至1℃，放置24小时后过滤除去不溶物，将滤液浓缩至干，加入50ml蒸馏水溶解，冷却至1℃，放置48小时后过滤出去不溶物，再加入5g寡壳聚糖、4g甘油、3g聚乙二醇600，搅拌使其充分溶解，加蒸馏水定容至100ml，即得药物制剂。
实施例4
一种用于修复伤口的药物制剂，包括以下重量组分：寡壳聚糖7g，紫珠草4g，五倍子1g，南竹子2g，甘油4g，分子量为600的聚乙二醇1g，蒸馏水81mL；其中所述寡壳聚糖为实施例1所制备。
上述用于修复伤口的药物制剂的制备方法如下：向1000ml烧瓶中，加入4g紫珠草、1g五倍子、2g南竹子，与500ml 80％乙醇一起混合，充分搅拌使其混合均匀，加热回流3小时后滤去不溶物，减压浓缩至100ml。再将浓缩液冷却至1℃，放置24小时后过滤除去不溶物，将滤液浓缩至干，加入50ml蒸馏水溶解，冷却至1℃，放置48小时后过滤出去不溶物，再加入7g寡壳聚糖、4g甘油、1g聚乙二醇600，搅拌使其充分溶解，加蒸馏水定容至100ml，即得药物制剂。
实施例5
对实施例2制备所得用于修复伤口的药物制剂进行急性毒性实验。
实验动物：昆明小鼠70只，体重17～22g，雌雄各半，购自上海斯莱克实验动物有限公司。
动物分组：采用雌雄分别随机均衡分组法，共分为7组，每组10只，其中一组为空白对照组。
实验样品：实施例2中制得。
剂量确定：剂量设计为3ml/kg，10ml/kg，50ml/kg，100ml/kg。
给药：一次性灌胃给药：给药前禁食3～5h，给药后禁食1～2h，禁食不禁水。采用分批给药，对照组、3ml/kg组、10ml/kg组第一批给药，给药后确定所设剂量合适，再给予50ml/kg组和100ml/kg组。给药后连续观察7天以上，随后每天上下午各观察一次，连续观察14天。详细记录各项观察指标，见表1。
实验结果：
表1
组别 剂量(ml/kg) 数量(只) 存活率(％)
1 0 10 100
2 3 10 100
3 10 10 100
4 50 10 100
5 100 10 100
结论：受试物在本实验中灌胃给药剂量达到100ml/kg时(相当于5.5mg/kg的固体药物)，未出现死亡。按照急性毒性分级标准判定，本受试药物可视为无毒。
实施例6
对实施例2制备所得用于修复伤口的药物制剂进行创面修复试验。
试验动物：C57小鼠，16-18g，雄性，购自上海斯莱克实验动物有限公司。
试验方法：将试验小鼠分成空白组，对照组1(3M医用胶带)，对照组2(德国易理妥)，对照组3(洁悠神)，实验组(实施例2中制得)，每组20只。小鼠背部去毛切口造模，创面用碘伏消毒，然后用适量的生理盐水清创，然后在表面覆盖对照组1产品，对照组2产品；喷涂对照组3产品与实验组药物，自然干燥，最后用无菌纱布覆盖。分别就3天、7天及14天的伤口恢复情况进行对照。实验结果见表2。
实验结果:
表2
Figure BDA0001890982960000051
结论：实验组动物伤口愈合速度快，且伤口愈合后无明显瘢痕，各项数据均大幅优于对照组和空白组。
实施例7
对实施例2制备所得用于修复伤口的药物制剂进行临床试验。
试验方法：选取志愿患者40人，分为4组，分别为试验组(实施例2中制得)、对照组1(3M医用胶带)、对照组2(德国易理妥)、对照组3(洁悠神)，每组患者的外伤性质、类型、尺寸均基本类似。将伤口清创后，在伤口表面覆盖或喷涂试验、对照药物，自然干燥，最后用无菌纱布覆盖。分别就3天、5天及7天的伤口恢复情况进行对照。实验结果见表3。
试验结果：
表3
Figure BDA0001890982960000052
试验结论：实验组伤口愈合速度快，大幅优于各对照组。
综上，本发明实施例5、实施例6、实施例7分别对本发明所述药物制剂进行了急性毒性实验、动物实验和临床实验，实验结果证明本发明所述药物制剂无毒、伤口修复效果显著、刺激性小，可用于制备修复伤口药物，用于修复伤口具有较大的临床应用价值和社会效益；除此之外，本发明所述药物制剂的制备原料易得、制备方法简单，便于实现工业化。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (6)

1.一种用于修复伤口的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂包括以下重量份数的组分：寡壳聚糖1～10份，紫珠草1～5份，五倍子1～5份，南竹子1～5份，甘油1～5份，分子量为600的聚乙二醇1～5份，蒸馏水65～94份。
2.如权利要求1所述的用于修复伤口的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂包括以下重量份数的组分：寡壳聚糖5份，紫珠草2份，五倍子2份，南竹子2份，甘油2份，分子量为600的聚乙二醇2份，蒸馏水85份。
3.如权利要求1或2所述的用于修复伤口的药物制剂，其特征在于，所述寡壳聚糖平均分子量为650～1900。
4.制备权利要求1所述的用于修复伤口的药物制剂的方法，其特征在于，向反应瓶中依次加入紫珠草、五倍子、南竹子、乙醇，搅拌均匀，加热回流1～3次，每次0.5～3小时，提取过滤液，减压浓缩至糖浆状，冷却至0～10℃，放置0.5～48小时，过滤去除不溶物，浓缩至干，加入蒸馏水溶解，冷却至0～10℃，放置12～72小时，过滤去除不溶物，再依次加入寡壳聚糖、甘油、分子量为600的聚乙二醇，搅拌使其充分溶解，加适量蒸馏水定容，得到用于修复伤口的药物制剂。
5.如权利要求4所述的用于修复伤口的药物制剂的制备方法，其特征在于，所述寡壳聚糖制备方法如下：将壳聚糖溶于乙酸中，搅拌溶解，加入含酶量为52u的混合酶，45℃下水解30分钟，110℃下灭酶15分钟，离心取上清液，冷冻干燥，得到寡壳聚糖，其中所述壳聚糖(单位：克)：乙酸(单位：毫升)：混合酶(单位：毫升)为1:35～40:0.9～1.1。
6.如权利要求5所述的寡壳聚糖制备方法中，其特征在于，所述混合酶由45wt％的苹果蛋白酶和55wt％的木瓜蛋白酶组成。
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