CN110946813B

CN110946813B - 一种含燕窝的复合发酵提取物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN110946813B
Application number: CN201911097583.3A
Authority: CN
Inventors: 张娟; 袁阳明; 陈然; 钟文楚; 杨杏
Original assignee: Opal Cosmetics Huizhou Co Ltd
Current assignee: Opal Cosmetics Huizhou Co Ltd
Priority date: 2019-11-12
Filing date: 2019-11-12
Publication date: 2022-09-16
Anticipated expiration: 2039-11-12
Also published as: CN110946813A

Abstract

本发明属于日化领域。一种含燕窝的复合发酵提取物，由燕窝、芦荟、蜂蜜混合后经乳酸芽孢杆菌发酵制得，其中，燕窝、芦荟、蜂蜜的混合比率以重量比计为1：0.1‑1：0.1‑1。本发明含燕窝的复合发酵提取物具有良好的抗炎、抗氧化和保湿能力；其制备方法最大程度的保存了燕窝大分子蛋白活性物质燕窝酸的高活性，提取效率高；将其应用于头皮护理类化妆品中，可使产品具有良好的抗菌消炎效果，有效减缓头皮炎症、头皮瘙痒刺激等问题，进而提供良好的头皮护理功效。

Description

一种含燕窝的复合发酵提取物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于日化领域，涉及一种含燕窝的复合发酵提取物及其制备方法和应用。

背景技术

目前的洗护产品除了能修复损坏的毛鳞片使毛发柔软顺滑以及良好的去屑能力之外，效果相形见绌，头皮出油、头皮瘙痒、毛囊炎等问题未得到解决。申请人经过市场调查研究发现，头屑问题最令人困扰，但随着冲洗型洗发水的功效的升级，困扰大多数人群的问题并非头屑问题本身，而是头痒以及头皮红点等问题，而往往去屑产品所具有的强力去屑作用不仅不能缓解头痒以及头皮红点等问题，反而去屑剂的过度沉积以及其自身的刺激性使得头痒等问题愈发严重。

中药提取物因其提取工艺简单、成本低、廉副作用少、效果好、使用感清爽以及无累积损害、适宜长期使用而备受青睐。如中国专利CN 107485662 B一种中药组合物，通过控制多种中药的配比参数粗提取制成的具有头皮去油、抑菌的作用。目前以中药为主的头皮护理产品提取制作工艺简单、所用中药成分复杂众多、作用成分和作用靶点不明确、效果不明显甚至并无产品声称的效果。

中国专利101084873A一种化妆品用燕窝提取物的制备工艺和中国专利CN102102119 B燕窝寡肽组合物及其制备方法和使用，公开了酶解法制备燕窝提取以及对酶解法的进一步升级，更高的效率制备燕窝寡肽，但是作为大分子蛋白的唾液酸在酶解之后就失去了其独有的抗炎作用，只能应用于护肤产品中，作为可能具有修复细胞作用的活性短肽使用。燕窝唾液酸的使用历史悠久，但仅停留在传统精细化学研究和药用的方面，暂无人将其使用在化妆品上，因而申请人通过结合化妆品可用的制备知识，将其合理地提取并使用在头皮护理类化妆品上。

相比于传统的萃取工艺，生物发酵技术是现阶段社会从植物中制得所需有效大分子成分最高效的方法，中国专利：一种发酵生产唾液酸的方法（CN 104046671 B）表明了使用微生物发酵技术可以制备唾液酸，但该专利使用的菌种为大肠杆菌，大肠杆菌为致病菌之一，会诱发炎症和长痘，不适用于化妆品。相同的，中国专利：一种雨燕科金丝燕属鸟类燕窝的酵母发酵物（申请号:CN 107405365 A），使用酵母菌对燕窝进行发酵，然而在化妆品的法规中霉菌和酵母菌的检出总数不得大于100CFU/mL，因而使用酵母菌进行发酵所制得的产品也不宜用于化妆品中。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种含燕窝的复合发酵提取物、其制备方法以及含有其的洗发水和护理液。本发明含燕窝的复合发酵提取物具有良好的抗炎、抗氧化和保湿能力；其制备方法最大程度的保存了燕窝大分子蛋白活性物质燕窝酸的高活性，提取效率高；将其应用于头皮护理类化妆品中，可使产品具有良好的抗菌消炎效果，有效减缓头皮炎症、头皮瘙痒刺激等问题，进而提供良好的头皮护理功效。

本发明的技术方案如下：

一种含燕窝的复合发酵提取物，由燕窝、芦荟、蜂蜜混合后经乳酸芽孢杆菌发酵制得，其中，燕窝、芦荟、蜂蜜的混合比率以重量比计为1：0.1-1：0.1-1。

进一步的，所述燕窝为轻毛燕盏燕窝，所述芦荟为库拉索芦荟，蜂蜜为百花蜜。

一种所述的含燕窝的复合发酵提取物的制备方法，包括以下步骤，以下各组分按重量百分比计算：

A.将20-25份乳清粉、5-10份葡萄糖、1-2份硫酸镁、1-2份磷酸氢二钾、0.5-1份硫酸锰溶解于950-980份水中，灭菌后制得发酵培养基；

B.将乳酸芽孢杆菌DU-106冻干菌种接种至发酵培养基中，接种量为0.1-0.2%，置于180-190r/min，25-30℃摇床中发酵24-36h后取出，采用0.22-0.25μm滤膜过滤后制得乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液；

C.将燕窝、芦荟晒干，燕窝、芦荟干品研磨成粉，加入蜂蜜混合均匀后移至反应釜中，按燕窝、芦荟和蜂蜜的总质量计算，加入1800-2000%的水和1-2%的乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液，以10-20r/min的转速搅拌10-60min，在15-35℃下发酵24-72h，制得发酵液；

D.将发酵液高压灭菌30-40min，冷却至常温后，在2000-3000r/min的转速下离心20-30min，过滤取上清液，冷冻干燥后制成粉末状，即得含燕窝的复合发酵提取物。

一种改善头皮瘙痒和炎症的洗发水，包括以下按重量百分比计算的组分：上述的含燕窝的复合发酵提取物0.01-5%、月桂醇聚醚硫酸酯铵8-12%、月桂醇硫酸酯铵1-3%、月桂酰胺丙基甜菜碱1-3%、香精0.1-1%、乙二醇二硬脂酸酯0.5-1.5%、鲸蜡硬脂醇0.1-0.5%、聚季铵盐-100.1-0.5%、丙烯酸（酯）类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.1-1%、聚二甲基硅氧烷醇0.5-2%、卡松0.01-0.1%、苯氧乙醇0.5-1.0%、氯化钠0.5-1.0%以及余量的水。

一种改善头皮瘙痒和炎症的护理液，包括以下按重量百分比计算的组分：上述的含燕窝的复合发酵提取物0.01-10%、脱醛酒精0.1-5%、薄荷脑0.05-0.20%、甘油1-10%、对羟基苯乙酮0.1-1.0%、戊二醇1.0-2.0%以及余量的水。

本发明具有如下有益效果：

本发明选用的酸杆菌为可食用的有益菌，与人体头皮的有害菌马拉色菌是属于竞争关系，乳酸芽孢杆菌的良好增长能够在一定程度上抑制马拉色菌的增长。经申请人研究发现，利用乳酸芽孢杆菌发酵的复合发酵提取物，经高温高压灭活后还含有大量乳酸芽孢杆菌的代谢物，其与燕窝的活性成分相辅相成，具有调理头皮、维持头皮环境稳态以及改善头皮健康的效果，能有效缓解头皮发痒剂头皮炎症。

本发明选用的燕窝富含唾液酸和水溶性氨基酸，唾液酸可提高组织免疫力，同时还具有抗炎、抑菌、抗氧化的作用，可有效缓解由炎症以及因头皮油脂氧化代谢的危害物而导致的头皮瘙痒问题，燕窝中的水溶性氨基酸主要是由含硫的氨基酸半胱氨酸和谷氨酸组成，与头发组成成分相似，有效护理头皮，为毛发生长提供一个良好的头皮环境。选用的芦荟和蜂蜜具有良好的保湿能力，与燕窝按比例复配之后所制得的复合发酵提取物，可有效抑制头皮瘙痒和减缓毛囊炎、头皮炎症，同时，蜂蜜富含大量糖类营养物质，有利于促进乳酸芽孢杆菌在产品中的发酵，可以缩短发酵时间，提高生产效率。

本发明的制备方法全程绿色提取、用料安全无副作用，通过用乳酸芽孢杆菌代替大肠杆菌和酵母菌发酵，在芦荟和蜂蜜的协同下，以燕窝为主要原料的复合物进行复合发酵，最大程度的保存了燕窝大分子蛋白活性物质燕窝酸，提取效率高，所制得的复合发酵提取物其具有优良的保湿、抗氧化、抗炎活性，有效成分活性高，与化妆品常用成分配伍性良好，将其应用于化妆品中并通过对所选天原料架构的合理搭建，可使产品具有良好的抗菌消炎效果，有效减缓头皮炎症、头皮瘙痒刺激等问题，进而提供良好的头皮护理功效。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行详细的说明，实施例仅是本发明的优选实施方式，不是对本发明的限定。

实施例1

A.将20份乳清粉、5份葡萄糖、1份硫酸镁、1份磷酸氢二钾、0.5份硫酸锰溶解于950份水中，灭菌后制得发酵培养基；

B.将乳酸芽孢杆菌DU-106冻干菌种接种至发酵培养基中，接种量为0.1%，置于180r/min，25℃摇床中发酵24h后取出，采用0.22μm滤膜过滤后制得乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液；

C.将10份燕窝、1份芦荟晒干，燕窝、芦荟干品研磨成粉，加入1份蜂蜜混合均匀后移至反应釜中，加入240份水和24份乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液，以10r/min的转速搅拌10min，在15℃下发酵24h，制得发酵液；

D.将发酵液高压灭菌30min，冷却至常温后，在2000r/min的转速下离心20min，过滤取上清液，冷冻干燥后制成粉末状，即得含燕窝的复合发酵提取物。

实施例2

A.将23份乳清粉、8份葡萄糖、1.5份硫酸镁、1.5份磷酸氢二钾、0.8份硫酸锰溶解于970份水中，灭菌后制得发酵培养基；

B.将乳酸芽孢杆菌DU-106冻干菌种接种至发酵培养基中，接种量为0.15%，置于185r/min，28℃摇床中发酵30h后取出，采用0.23μm滤膜过滤后制得乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液；

C.将10份燕窝、5份芦荟晒干，燕窝、芦荟干品研磨成粉，加入5份蜂蜜混合均匀后移至反应釜中，加入400的水和40%的乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液，以15r/min的转速搅拌30min，在25℃下发酵48h，制得发酵液；

D.将发酵液高压灭菌35min，冷却至常温后，在2500r/min的转速下离心25min，过滤取上清液，冷冻干燥后制成粉末状，即得含燕窝的复合发酵提取物。

实施例3

A.将25份乳清粉、10份葡萄糖、2份硫酸镁、2份磷酸氢二钾、1份硫酸锰溶解于980份水中，灭菌后制得发酵培养基；

B.将乳酸芽孢杆菌DU-106冻干菌种接种至发酵培养基中，接种量为0.2%，置于190r/min，30℃摇床中发酵36h后取出，采用0.25μm滤膜过滤后制得乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液；

C.将10份燕窝、10份芦荟晒干，燕窝、芦荟干品研磨成粉，加入10份蜂蜜混合均匀后移至反应釜中，按燕窝、芦荟和蜂蜜的总质量计算，加入600份水和120份乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液，以20r/min的转速搅拌60min，在35℃下发酵72h，制得发酵液；

D.将发酵液高压灭菌40min，冷却至常温后，在3000r/min的转速下离心30min，过滤取上清液，冷冻干燥后制成粉末状，即得含燕窝的复合发酵提取物。

对比例

B.将酵母菌冻干菌种接种至发酵培养基中，接种量为0.2%，置于190r/min，30℃摇床中发酵36h后取出，采用0.25μm滤膜过滤后制得酵母菌发酵液；

C.将10份燕窝、10份芦荟晒干，燕窝、芦荟干品研磨成粉，加入10份蜂蜜混合均匀后移至反应釜中，按燕窝、芦荟和蜂蜜的总质量计算，加入600份水和120份酵母菌发酵液，以20r/min的转速搅拌60min，在35℃下发酵72h，制得发酵液；

洗发水

下表为本发明改善头皮瘙痒和炎症的洗发水样品1-4的配方表（单位：%），其制备方法为本领域常规的搅拌混合。

护理液

下表为本发明改善头皮瘙痒和炎症的护理液样品5-8的配方表（单位：%），其制备方法为本领域常规的搅拌混合。

一、体外抗炎效果测试

将本发明含燕窝的复合发酵提取物实施例1-3和对比例分别配置成0.5、1、1.5、2、2.5mg/mL的稀溶液待用；在各反应管中加不同浓度的样品100ul，空白对照管加双蒸水100ul，每管再加入牛透明质酸酶50uL，37℃水浴20分钟后，每管再加入12.5Mm／L氯化钙100uL，37℃水浴20分钟；透明质酸酶钙激活后，加入透明质酸钠250uL，混合均匀，37℃水浴40分钟，加0.4N氢氧化钠和0.4M／L硼酸钾各100uL，沸水中水浴3分钟，冷却至室温，各管吸取200uL至96孔微量板检测孔中，每管测定3孔，取平均值。采用岛津CS-9301PC酶标分析仪，在波长585nm测OD值，以双蒸水作为空白对照，以OD值计算透明质酸酶活性抑制率。

透明质酸酶活性抑制率的计算方法为：透明质酸酶活性抑制率%=[(OD_空白对照-OD_样品)/OD_对照]*100%。

测试结果见下表。

可见，本发明含燕窝的复合发酵提取物具有良好的抗炎能力，在提取物浓度为2.5mg/mL时，实施例1对透明质酸的抑制率高达73.84%，实施例2对透明质酸的抑制率高达73.84%，实施例3对透明质酸的抑制率高达84.97%。

二、体外抗氧化效果测试

将本发明含燕窝的复合发酵提取物实施例1-3和对比例分别配置成0.5、1、1.5、2、2.5mg/mL的稀溶液待用；用无水乙醇将维生素E粉末配置成0.5、1、1.5、2、2.5mg/mL的稀溶液待用；羟基自由基实验：按照下表的加入量在比色管中依次加入9mmol/LFeSO₄，9mmol/L乙醇-水杨酸，接着加入适量的去离子水，最后加入8.8mmol/LH₂O₂后摇匀，37℃水浴加热15min后取出，测其吸光度A，参比溶液为去离子水，根据下表测试各溶液的吸光度A1、A2、A3。

羟基自由基抑制率的计算方法为：抑制率%=（A1+A3-A2）/A1*100%。

测试结果见下表。

可见，本发明含燕窝的复合发酵提取物具有良好的抗氧化作用，在含量为2.5mg/ml时，实施例1对羟基自由基的抑制率达94.25%，实施例2对羟基自由基的抑制率达87.03%，实施例1对羟基自由基的抑制率达95.87%，高于相同剂量的维生素E 83.28%和对比例86.62%。

三、体外保湿效果测试

于实验进行前12h，用氯化钙过饱和溶液、氯化钾过饱和溶液在实验所用的密封恒湿器中制备相对湿度分别为30%的恒湿环境，并将甘油和将本发明含燕窝的复合发酵提取物实施例1-2，分别置于35℃干燥箱内干燥至恒重。将医用胶布贴于载玻片上并称重，记为m₁。然后将燕窝提取物配置成1%、2%、3%、4%、5%的水溶液，甘油配置成5%的水溶液待用，并取2.000g（精确到0.002g）粘附在双面胶上，记为m₂。将制备好样品置于恒湿器内，室温放置，分别在2h，4h，6h，8h时，迅速拿出样品称量，记为m₃。

保湿率的计算方法为：

测试结果见下表。

可见，本发明含燕窝的复合发酵提取物具有良好，其保湿能力在稀释为3%水溶液时便高于5%含量的甘油，在含量为5%的水溶液时，8h后实施例2保湿率为40.27%，实施例1保湿率为32.60%，远高于同等浓度的甘油28.27%。

四、改善头皮瘙痒和炎症效果的测试

1.洗发水性能测试

选取80名志愿者随机分成4组，每组分别使用本发明改善头皮瘙痒和炎症的洗发水样品1-4清洗头发，受试时间为30日，每日使用样品一次，30日后受试者反馈使用感受，统计各使用感受人数占比。测试结果见下表：

2.护理液性能测试

选取80名志愿者随机分成4组，每组在使用不含消炎成分的洗发水清洗头发后，分别使用本发明改善头皮瘙痒和炎症的护理液样品5-8涂抹头发，受试时间为30日，每日使用样品一次，30日后受试者反馈使用感受，统计各使用感受人数占比。测试结果见下表：

可见，本发明改善头皮瘙痒和炎症的洗发水、护理液可有效改善头皮瘙痒、头皮炎症、红点。

本发明含燕窝的复合发酵提取物具有良好的抗炎、抗氧化和保湿能力；其制备方法最大程度的保存了燕窝大分子蛋白活性物质燕窝酸的高活性，提取效率高；将其应用于头皮护理类化妆品中，可使产品具有良好的抗菌消炎效果，有效减缓头皮炎症、头皮瘙痒刺激等问题，进而提供良好的头皮护理功效。

Claims

1.一种含燕窝的复合发酵提取物，其特征在于，由燕窝、芦荟、蜂蜜混合后经乳酸芽孢杆菌发酵制得，其中，燕窝、芦荟、蜂蜜的混合比率以重量比计为1：0.1-1：0.1-1；

所述含燕窝的复合发酵提取物的制备方法，包括以下步骤，以下各组分按重量百分比计算：

将20-25份乳清粉、5-10份葡萄糖、1-2份硫酸镁、1-2份磷酸氢二钾、0.5-1份硫酸锰溶解于950-980份水中，灭菌后制得发酵培养基；

将乳酸芽孢杆菌DU-106冻干菌种接种至发酵培养基中，接种量为0.1-0.2%，置于180-190r/min，25-30℃摇床中发酵24-36h后取出，采用0.22-0.25μm滤膜过滤后制得乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液；

将燕窝、芦荟晒干，燕窝、芦荟干品研磨成粉，加入蜂蜜混合均匀后移至反应釜中，按燕窝、芦荟和蜂蜜的总质量计算，加入1800-2000%的水和1-2%的乳酸芽孢杆菌DU-106发酵液，以10-20r/min的转速搅拌10-60min，在15-35℃下发酵24-72h，制得发酵液；

将发酵液高压灭菌30-40min，冷却至常温后，在2000-3000r/min的转速下离心20-30min，过滤取上清液，冷冻干燥后制成粉末状，即得含燕窝的复合发酵提取物。

2.根据权利要求1所述的含燕窝的复合发酵提取物，其特征在于，所述燕窝为轻毛燕盏燕窝，所述芦荟为库拉索芦荟，蜂蜜为百花蜜。

3.一种改善头皮瘙痒和炎症的洗发水，其特征在于，包括以下按重量百分比计算的组分：权利要求1-2任一项所述的含燕窝的复合发酵提取物0.01-5%、月桂醇聚醚硫酸酯铵8-12%、月桂醇硫酸酯铵1-3%、月桂酰胺丙基甜菜碱1-3%、香精0.1-1%、乙二醇二硬脂酸酯0.5-1.5%、鲸蜡硬脂醇0.1-0.5%、聚季铵盐-10 0.1-0.5%、丙烯酸（酯）类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物0.1-1%、聚二甲基硅氧烷醇0.5-2%、卡松0.01-0.1%、苯氧乙醇0.5-1.0%、氯化钠0.5-1.0%以及余量的水。

4.一种改善头皮瘙痒和炎症的护理液，其特征在于，包括以下按重量百分比计算的组分：权利要求1-2任一项所述的含燕窝的复合发酵提取物0.01-10%、脱醛酒精0.1-5%、薄荷脑0.05-0.20%、甘油1-10%、对羟基苯乙酮0.1-1.0%、戊二醇1.0-2.0%以及余量的水。