CN107822945A - 一种赛天然酵母组合物、制备方法及在化妆品中应用 - Google Patents

Abstract

一种赛天然酵母组合物及其在化妆品中应用。本发明提供一种经长时间低温培养、发酵并经过后期特殊处理得到的赛天然酵母组合物，其原料来源天然纯正、酵母提取利用率高、产品气味优化效果明显、添加剂使用率显著减少，天然酵母中含有丰富的活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物等物质，能有效补充人体所需氨基酸、维生素、矿物质等营养成份，同时该赛天然酵母组合物还含有天然植物调理剂和粉状原料，不仅可以供给酵母培养以及维持酵母发酵，使用在人体皮肤时还可以深层调理肌肤，维持肌肤健康平衡状态，另外天然酵母、天然植物调理剂和粉状原料组合制备的赛天然酵母组合物在护肤美容方面具有多种优越的功效和协同作用。

Description

一种赛天然酵母组合物、制备方法及在化妆品中应用

技术领域

本发明涉及美容日用化工领域，特别涉及一种赛天然酵母组合物、制备方法及在化妆品中应用

背景技术

随着人们生活水平的提高及对美丽和健康追求观念的增强，在精细化工技术蓬勃发展的当今，人们更倾向于选择天然性更纯正、安全系数更高、稳定性更持久、实用性更强的日化用品。但市场上的日化用品即琳琅满目，档次也参差不齐，这让消费者很难抉择。

酵母是人类利用最早、应用范围最广的微生物。酵母细胞是由约35％～50％的蛋白质、5％～10％的核酸、35％～40％的碳水化合物、2.8％～3.0％的脂质、3％～5％的水分、5.5％～6％的灰分和少量维生素组成，其中碳水化合物包含有海藻糖、糖原、甘露聚糖、葡聚搪和木聚糖等。酵母提取物(yeast extract)是酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的物质。近年来随着生物技术的发展，酵母的各种使用价值不断被挖掘出来。酵母除了可以被利用来酿酒、制作面包等发酵食品、作为细胞蛋白资源用来缓解蛋白质食品短缺、制作食品调味剂以及制作保健食品以外，酵母在化妆品行业的开发与应用正日益受到重视。但目前化妆品中使用的酵母存在酵母来源天然性不纯正、酵母提取利用率不高、酵母发酵物气味不良难以掩盖、使用时添加量少和需要添加剂等共性问题亟待解决。

发明内容

为解决现有酵母产品的技术问题，本发明提供一种经长时间低温培养、发酵并经过后期特殊处理得到的赛天然酵母组合物，其原料来源天然纯正、酵母提取利用率高、产品气味优化效果明显、添加剂使用率显著减少，天然酵母中含有丰富的活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物等物质，能有效补充人体所需氨基酸、维生素、矿物质等营养成份，同时该赛天然酵母组合物还含有天然植物调理剂和粉状原料，不仅可以供给酵母培养以及维持酵母发酵，使用在人体皮肤时还可以深层调理肌肤，维持肌肤健康平衡状态，另外天然酵母、天然植物调理剂和粉状原料组合制备的赛天然酵母组合物在护肤美容方面具有多种优越的功效和协同作用，通过添加相关基质辅料可以做成不同剂型的天然性更纯正、安全系数更高、稳定性更持久、实用性更强的日化用品。

本发明提供的第一种技术方案是这样实现的：

一种赛天然酵母组合物，该组合物包括如下重量比的组分：

其中，天然酵母经培养、发酵、处理为活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物，活性酵母为活化后未被酶解的酵母菌种；酵母内容物(Yeastextract)：是酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素、矿物质天然活性物质，其中氨基酸占酵母内容物含量30％以上，总蛋白占酵母内容物50％以上，核苷酸占酵母内容物10％以上；酵母发酵物为活性酵母分解营养物质，包括乙醇、二氧化碳、乳酸；天然酵母中活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物的重量比为1-2:20-30:5-8，组合物中天然酵母添加量为0.5-5.0％。

进一步的，天然酵母是天然植物培植发酵菌种，所述菌种为鲁氏接合酵母CGMCC2.1915(该参数表示相应菌种的编号，菌种的通用名称)、郎必可假丝酵母CGMCC2.1763、酿酒酵母CGMCC2.1和红发夫酵母ATCC66270中的任一种，每种菌种添加量均为0.5-5.0％。

进一步的，植物调理剂由银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草、蔗糖组成，并且各成分质量比为3-5:1-3:1-2:1-2:2-3:1-3。并且植物调理剂中的银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草、蔗糖最佳重量比3.5:1.5:1:1:2:1。

进一步的，天然粉状原料由葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白、维生素C组成，并且各成分质量比为10-15:1-2:1-3:1-2:3-5。并且天然粉状原料中的葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白、维生素C按最佳质量比12:1:1.5:1:3.5。

本发明提供的第二种技术方案是这样实现的：赛天然酵母组合物制备方法：

a、天然酵母菌种优选活化后的鲁氏接合酵母、郎必可假丝酵母、酿酒酵母和红发夫酵母中的任一种，保存备用；

b、按质量比银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草、蔗糖为3-5:1-3:1-2:1-2:2-3:1-3组成植物调理剂，混合粉碎成1000克粗粉，加10倍量水，水煮2小时，过滤处理，滤渣加8倍量水，水煮1小时，过滤处理；滤渣再加8倍量的水，水煮1小时，过滤处理，滤液合并，于50℃下减压浓缩至相对密度为1.0g/ml的清膏，使用时，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，灭菌后备用；

c、按质量比葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白、维生素C为10-15:1-2:1-3:1-2:3-5组成天然粉状原料并混合均匀，灭菌后备用；

d、取上述备用酵母菌种在恒温(25～30℃)、恒湿(50～57％)、pH(4.0-7.0)条件下用天然植物调理剂的蔗糖溶液摇床培养或者发酵罐好氧培养1-2天得到天然酵母原液，把液状天然酵母与粉状原料低温25～30℃搅拌混合，静止放置1-4天，测pH5.0-5.5，结束发酵，得到酵母发酵混合物；

e、取上述酵母发酵混合物，加入0.5g1:1-1:3混合的果胶酶和酵母抽提酶，于50-60℃酶解2-8h，100℃稳定化处理10min，2000-3000RPM离心，取上清液用0.22μm微孔滤膜过滤后调节pH5.0-5.5，即为赛天然酵母组合物，保存备用；

f、将上述赛天然酵母组合物缓慢加入到预先用基质辅料配置好的剂型中，轻轻搅拌使其完全分散；

g、调节pH4.0-9.0，制成相应剂型产品备用。

本发明提供的第三种技术方案是：

赛天然酵母组合物在制备化妆品中的应用，该组合物包括如下重量比的组分：

赛天然酵母组合物 1.0％-100.0％

基质辅料 0％-99.0％

其中，赛天然酵母组合物为权利要求1-6任一所述，基质辅料用于产品的赋形。

本发明赛天然酵母组合物：该组合物由天然酵母、植物调理剂、粉状原料按不同质量百分比及在一定的工艺条件下制得，并添加相关基质辅料做成不同剂型的产品。主要组分各自的具体成分、功效及相互协同作用原理如下：

(1)天然酵母：

天然酵母是天然植物培植发酵菌种，所述菌种为鲁氏接合酵母、郎必可假丝酵母、酿酒酵母和红发夫酵母中的任一种。天然酵母经培养、发酵、处理后得到活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物，活性酵母：少量活化后未被酶解的酵母菌种；酵母内容物(Yeastextract)：是酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素、微量元素等天然活性成分的物质，其中氨基酸占酵母内容物含量30％以上，总蛋白占酵母内容物50％以上，核苷酸占酵母内容物10％以上具有保湿、赋活等功效，广泛应用于化妆品领域，氨基酸是皮肤角质层中自然保湿因子(NMF)的主要成分，易被皮肤吸收，使老化的表皮恢复弹性，延缓皮肤衰老；核酸及核苷酸是人体的主要遗传物质，具有促进新陈代谢、提高蛋白质合成速度等作用，增强免疫机能、增强SOD活性，提高皮肤抗自由基能力；此外，产品中少量的维生素和矿物质等营养元素还可以为皮肤提供充足的营养；酵母发酵物：这里指活性酵母分解营养物质的少量产物，主要包括乙醇、二氧化碳、乳酸等。

(2)植物调理剂：

由银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草五种植物按照一定比例在蔗糖溶液中混合、浓缩成清膏，再提取所得，该植物调理剂结合配方中的其他有效成分不仅可以供给酵母培养以及维持酵母发酵，还可以深层调理肌肤，维持肌肤健康平衡状态。

银耳：多糖类化合物是银耳的主要活性成分，最具代表性的是银耳酸性异多糖(Acidicheteroglucan)，其结构是以α-甘露聚糖为主链，以β-(1，2)L-木糖、β-(1，2)葡萄糖醛酸和少量的岩藻为侧链。其他几种多糖体是中性杂多糖，由木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄醛酸组成。银耳提取物对胶原蛋白酶活性的抑制，以及对若干生化成分生成的促进作用显示有活肤抗皱作用；提取物有很好的保湿作用，可用作保湿剂；对皮肤的过敏也有一定的抑制作用，可用作舒缓抗敏剂；银耳富有天然特性胶质，加上它的滋阴作用，长期使用可以润肤，并有祛除脸部黄褐斑、雀斑的功效。可作为抗氧化剂、保湿剂、皮肤调理剂使用。

栀子花：又名栀子、黄栀子，龙胆目茜草科。栀子花含有三萜成分，栀子花酸A、B和子酸。含挥发油，包括乙酸苄酯、乙酸芳樟酯，另含色素甙、木蜜醇等。另外，还含有碳水化合物、蛋白质、粗纤维及多种维生素。一般主要提取其乙酸苄酯，是极好的茉莉型等花香香精和皂用香精。提取物具有抗氧化，活肤的作用，可用于抗衰剂；同时具有抗炎的作用，也能用作保湿剂。具有改善肌肤状态，调理肌肤健康的作用，同时香气宜人，易于接受。

龙血树：龙血树提取物蕴含塔斯品碱(Taspine)和原花青(PAC)。塔斯品碱有非常强的抗氧化性，还可以强化皮肤角质屏障，并修复因衰老及外界伤害引起的面部暗沉、肤色不均的肌肤，显著改善肤色和肌肤纹理；原花青素是目前国际公认的清除人体自由基最有效的天然抗氧化剂。它能够强效抗击炎症及修复损伤，同时建立肌肤保湿屏障，改善红血丝和敏感。对皮肤具有抗氧化、抗衰老和改善肤色的作用。

三七：中药名。甘、微苦，温。有促进微循环，促进新细胞的合成，抗炎等作用。对浮肿有抑制，对核因子受体活化也有抑制，这是反映抗炎能力的一个指标，三七提取物可用作抗炎剂；三七提取物能够消除氧自由基，增强内源性超氧歧化酶的活性，加强机体对氧自由基的清除能力，减轻氧自由基引起的连锁反应，降低血中脂质的过氧化；三七提取物有抑菌性，三七总皂苷对某些真菌有较强的抑制作用，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有一定的抑制作用。对皮肤有抗炎、抗氧化和抑菌的作用。

益母草：提取物对天然保湿因子生成有很好的促进作用，对皮肤有保湿作用；对B-16细胞有很好的抑制率，因此可用于防治雀斑、皮肤色素沉着；具有抗氧化性，结合对谷胱甘肽还原酶的活化作用，可以认为其抗衰。对人体皮肤保湿、抗氧化和提亮祛斑作用明显。

蔗糖：是甜菜、甘蔗和水果中含量极高的小分子营养物质和湿润剂，有着良好的保湿作用，一定浓度的蔗糖溶液具有渗透作用，可以促进有效成分快速进入皮肤而起功效作用，同时高浓度的蔗糖溶液还能抑制有害微生物的生长。主要是营养、保湿、促渗、抑菌的作用。

(3)天然粉状原料：

由葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白和维生素C按照一定比例和方法搭配使用，不仅可以供给酵母培养以及维持酵母发酵，还具有一定的协同保湿性，可以深层修复和滋养肌肤，对皮肤黏膜和皮肤有一定功效作用。

葡萄糖：简称为葡糖，化学名称是2,3,4,5,6-五羟基己醛。是自然界分布最广且最为重要的一种单糖，它是一种多羟基醛。是活细胞的能量来源和新陈代谢中间产物，即生物的主要供能物质。加入化妆品中能产生保湿、稳定、改善肤色、抗衰老和抗菌等功能。

透明质酸：又名玻璃酸，是一种高分子的聚合物，由单位D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的高级酸性粘多糖，它是肌肤水嫩的重要基础物质，本身也是人体的一种成分，它具有特殊的保水作用，份量更高达其本身重量的100倍，是目前发现的自然界中保湿性最好的物质，它还可以改善皮肤营养代谢，使皮肤柔嫩、光滑、去皱、增加弹性、防止衰老，在保湿的同时又是良好的透皮吸收促进剂，与其他营养成分配合使用，可以起到促进营养吸收的更理想效果。

聚谷氨酸：据了解，聚谷氨酸(γ-PGA)是一种水溶性、生物降解、不含毒性的使用微生物发酵法制得的生物高分子，它是一种有粘性的物质，在“纳豆”中被首次发现。γ-PGA是一种特殊的阴离子自然聚合物，是以左、右旋光性的谷氨酸为单元体，在α-氨基和γ-羧基之间经酰胺键结所构成的同型聚酰胺多肽，γ-PGA的分子量从5万到2百万道尔顿不等。特殊的分子结构，使其具有极强的保湿能力，能有效地增加皮肤的保湿能力，促进皮肤健康，其超强的保湿能力更优于常见的保湿成分，为新一代的生物科技保湿剂。

胶原蛋白：高效保湿成份、活肤、诱导组织再生，人体***中之主要黏合物质，分子量大，保湿能力较多元醇类更佳，主要用以支撑细胞，特别适用于肌肤去角质后、皮肤处于最薄阶段所作的理疗性保。胶原蛋白有良好的渗透性和保湿力,主要应用于愈疤、抗皱、皮肤粗糙患者的调理剂。胶原蛋白及其水解物配伍性强，可与许多功能性成分配合以提高它们的功效，在发用产品中使用可有效护理头发。

维生素C：化妆品中维生素C是天然的抗氧化剂，用于预防和治疗皮肤晒伤。人体本身不能产生维C，必须从外界摄取。在化妆品中，维C通过与铜离子在酪氨酸酶活动部位相互作用以减少多巴醌等多步黑色素合成过程来干扰黑色素的产生，具有很好的美白祛斑的效果。同时也有消炎的作用。

(4)基质辅料：通过添加相关基质辅料可以做成不同剂型的化妆产品，基质辅料优选去离子水、甘油、丁二醇、甜菜碱、甘油聚醚-26、甘草酸二钾、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、海藻糖、PEG-40氢化蓖麻油、氢氧化钾、EDTA-二钠、戊二醇、聚乙二醇-400、卡波姆、羟乙基纤维素、硫辛酸、氢化橄榄油、三乙醇胺、香精、异壬酸异壬酯、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷、MONTANOV L、SIMULGEL EG、烟酰胺、生育酚、红没药醇、乙酰壳糖胺、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、氢氧化钾、LC、月桂酸、羟苯甲酯聚乙二醇-14M、瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵、D-泛醇、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、Cosmocil CQ、PLURONIC L64、0.05％GREEN 6、异构十六烷、环五聚二甲基硅氧烷、山梨(糖)醇、蜂蜜粉、薄荷、山梨酸钾、苯甲酸钠、抗坏血酸、月桂醇硫酸酯钠、水合硅石、木糖醇、壳聚糖、海藻酸钠、糖精钠、微晶纤维、甜菊糖、月桂酰谷氨酸钠、碳酸氢钠、明胶、甘露糖醇、麦芽糖、甜橙汁、蓝莓汁、葡萄汁、维生素C、乳糖、麦芽糊精、氨基酸、甘草、硬脂酸镁、二氧化硅、茶叶提取物、安赛蜜、丙二醇、吐温-80、F-68、非那雄胺、K220、AES、CAB、6501、珠光双酯、乳化硅油、瓜尔胶C-14-S、柠檬酸、开松、芦荟提取物、十八醇、阳离子表面活性剂、羊毛脂、苯甲醇、颜料、平平加、A25、EP-200、白蜂蜡、甲酯、丙酯、羊毛脂、VA64、甲基椰油酰基牛磺酸钠、月桂酰两性基乙酸钠、月桂酰肌氨酸钠、椰油酰胺甲基MEA、癸基单油酸甘油酯、聚甘油-10油酸酯、辛酸/癸酸甘油酯类聚甘油-10酯类、PEG-120甲基葡糖二油酸酯、椰油酰羟乙磺酸酯钠、月桂基葡糖苷、MS621、聚季铵盐-10、柠檬酸钠、甘油月桂酸酯、脱氢乙酸、辛酸/癸酸甘油酯、乳木果油、白油、鲸蜡硬脂醇、乳化硅油、AVC、甘油硬脂酸酯、聚山梨醇酯-60、硬脂醇聚醚-21、橄榄油、环戊硅氧烷、卵磷脂、苯氧乙醇、乙基己基甘油、硬脂酸、十六醇、私盘-60、K12、甘油、水杨酸苯酯、二氧化钛、椰子酰胺基丙基甜菜碱、DOW、氯化钠、酮康唑、硼酸、羟苯乙酯、SP-115B、对氯间二甲苯酚、乳酸、乳酸钠、硼砂、聚乙二醇4000、酒石酸、乙醇、羟乙基脲、1618醇、M68、A165、异硬脂酸异丙酯、DC1401、生育酚醋酸酯中的一种或两种以上，用于产品的赋形及其他作用。

总之，本发明优点如下：

1、赛天然酵母组合物中的天然酵母是酵母菌种在恒温(25～30℃)、恒湿(50～57％)、pH(4.0-7.0)条件下用天然植物调理剂的蔗糖溶液组成的培养基培育出天然酵母原液，把液状天然酵母与粉状原料低温搅拌混合，在不妨碍酵母活性化的状态下让酵母发酵一定时间，然后经过一定的工艺条件进行处理得到，其原料来源天然纯正、酵母提取利用率高、产品气味优化效果明显、添加剂使用率显著减少，即天然酵母经培养、发酵、处理后得到活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物等物质，能有效补充人体所需氨基酸、维生素、矿物质等营养成份，加工过程中经长时间低温发酵可提高产品稳定性、优化产品气味、增加产品功效价值、减少添加剂的使用。

2、赛天然酵母组合物中添加的天然植物调理剂、粉状原料，不仅可以供给酵母培养以及维持酵母发酵，使用在人体皮肤时还可以深层调理肌肤，维持肌肤健康平衡状态，另外天然酵母、天然植物调理剂和粉状原料组合制备的赛天然酵母组合物在护肤美容方面具有多种优越的功效和协同作用，具体有益效果如下：在活性酵母菌代谢过程中产生的大量酶对该植物调理剂和粉状原料进行转化和分解，使大分子物质转化成易于吸收的小分子物质；同时，植物调理剂和粉状原料的加入为活性酵母的生长和发酵提供充足的营养基质，转化和分解后的小分子又为活性酵母提供长久保持活性而又舒适清香的微生态环境；另外，天然粉状原料的加入还可以有效促进酵母内容物、酵母发酵物以及植物转化分解物中的有效成分快速渗透进皮肤，参与人体皮肤的新陈代谢作用，以达到更好的护肤美容效果。

3、天然植物调理剂在蔗糖溶液中浓缩、提取后，其中的活性成分在蔗糖分子的作用下紧密聚集在一起，可以高效的抑制白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌等有害菌，从而降低由它们所引起的皮肤黏膜感染和炎症反应的发生；同时植物调理剂中的有效成分还可以促进皮肤黏膜分泌功效成分，进而抑制炎症和拮抗内毒素的炎症刺激作用，达到增强皮肤黏膜免疫力的效果；植物调理剂内含多种有效成分可以调节皮脂分泌、抑制黑色素产生、清除自由基、舒缓刺激，结合相关功效成分可以使皮肤达到更为理想的状态，在补水保湿、提亮肤色、抗氧化抗衰老和镇静舒缓等方面达到协同效果；一定浓度的蔗糖溶液具有渗透作用，可以促进有效成分快速进入皮肤而起功效作用。

4、天然粉状原料中的各成分经一定比例及方法复配处理得到后，能够帮助皮肤补水保湿、提亮肤色、抗炎、抗过敏、舒缓并促进细胞修复；同时成分稳定性好，和皮肤有很好的相容性，降低皮肤炎症反应，防止皮肤过敏发生，提高皮肤的抗刺激能力；粉状原料结合相关功效成分具有显著的协同增强功效作用，从而可以更好的对肌肤进行深层滋养，维持肌肤最佳的健康状态。

5、本发明赛天然酵母组合物通过添加相关基质辅料可以做成不同剂型的天然性更纯正、安全系数更高、稳定性更持久、实用性更强的日化用品，包括但不限于化妆水、面膜、祛痘精华、乳霜、洗面奶、卸妆液、素颜霜、洗发水、护发素、沐浴露、沐浴泡腾片、身体乳、防晒霜、口咽喷剂、牙膏、牙片、口服液、膳食软胶囊、私部泡沫、私部凝胶。

附图说明

图1为透皮吸收性实验结果图。

具体实施方式

为详细说明本发明的技术内容、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式并配合附图详予说明。

1.方案内容

1.1一种赛天然酵母组合物

该组合物包括如下重量比的组分：天然酵母0.5-5.0％，植物调理剂50.0-80.0％，粉状原料1.5-5.0％，去离子水10.0-48.0％；其中，天然酵母是天然植物培植发酵菌种，所述菌种为鲁氏接合酵母CGMCC2.1915、郎必可假丝酵母CGMCC2.1763、酿酒酵母CGMCC2.1和红发夫酵母ATCC66270中的任一种，并且天然酵母经培养、发酵、处理为活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物，活性酵母：少量活化后未被酶解的酵母菌种；酵母内容物(Yeastextract)：是酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素、矿物质等天然活性成分的物质，其中氨基酸占酵母内容物含量30％以上，总蛋白占酵母内容物50％以上，核苷酸占酵母内容物10％以上；酵母发酵物：这里指活性酵母分解营养物质的少量产物，包括乙醇、二氧化碳、乳酸；天然酵母中活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物的重量比为1-2:20-30:5-8，组合物中天然酵母添加量为0.5-5.0％。

上述的植物调理剂由银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草、蔗糖组成，并且各成分质量比为3.5:1.5:1:1:2:1。

上述天然粉状原料由葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白、维生素C组成，并且各成分质量比为12:1:1.5:1:3.5。

1.2一种赛天然酵母组合物制备方法

a、天然酵母菌种优选活化后的鲁氏接合酵母CGMCC2.1915、郎必可假丝酵母CGMCC2.1763、酿酒酵母CGMCC2.1和红发夫酵母ATCC66270中的任一种，保存备用；

b、按质量比银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草、蔗糖为3-5:1-3:1-2:1-2:2-3:1-3组成植物调理剂，其中各成分最佳重量比3.5:1.5:1:1:2:1，混合粉碎成1000克粗粉，加10倍量水，水煮2小时，过滤处理，滤渣加8倍量水，水煮1小时，过滤处理；滤渣再加8倍量的水，水煮1小时，过滤处理，滤液合并，于50℃下减压浓缩至相对密度为1.0g/ml的清膏，使用时，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，灭菌后备用；

c、按质量比葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白、维生素C为10-15:1-2:1-3:1-2:3-5组成天然粉状原料，按最佳质量比12:1:1.5:1:3.5分别称取葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白和维生素C混合均匀，灭菌后备用；

d、取上述备用酵母菌种在恒温(25～30℃)、恒湿(50～57％)、pH(4.0-7.0)条件下用天然植物调理剂的蔗糖溶液摇床培养或者发酵罐好氧培养1-2天得到天然酵母原液，把液状天然酵母与粉状原料低温25～30℃搅拌混合，静止放置1-4天，测pH5.0-5.5，结束发酵，得到酵母发酵混合物；

e、取上述酵母发酵混合物，加入0.5g1:1-1:3混合的果胶酶和酵母抽提酶，于50-60℃酶解2-8h，100℃稳定化处理10min，2000-3000RPM离心，取上清液用0.22μm微孔滤膜过滤后调节pH5.0-5.5，即为赛天然酵母组合物，保存备用；

f、将上述赛天然酵母组合物缓慢加入到预先用基质辅料配置好的剂型中，轻轻搅拌使其完全分散；

g、调节pH4.0-9.0，制成相应剂型产品备用。

1.3一种赛天然酵母组合物在化妆品中应用

1.3.1赛天然酵母组合物(重量比例)

赛天然酵母组合物70.0％(天然酵母2.0％、植物调理剂65.0％、粉状原料3.0％)，加去离子水至100。

1.3.2赛天然酵母组合物调理喷雾(重量比例)

赛天然酵母组合物5.0％、甜菜碱1.0％、甘油聚醚-26 2.0％、甘草酸二钾0.1％、对羟基苯乙酮0.3％、1,2-己二醇0.3％、PEG-40氢化蓖麻油0.1％、氢氧化钾0.015％、EDTA-二钠0.05％，加去离子水至100。

1.3.3赛天然酵母组合物面膜(重量比例)

赛天然酵母组合物10.0％、甘油5.0％、丁二醇3.0％、戊二醇1.5％、聚乙二醇-4001.0％、甘油聚醚-26 1.0％、山梨糖醇0.2％、卡波姆0.15％、羟乙基纤维素0.08％、硫辛酸0.01％、甘草酸二钾0.1％、氢化橄榄油0.1％、对羟基苯乙酮0.3％、1,2-己二醇0.3％、PEG-40氢化蓖麻油0.1％、三乙醇胺0.14％、EDTA-二钠0.05％、香精0.01％，加去离子水至100。

1.3.4赛天然酵母组合物祛痘精华(重量比例)

赛天然酵母组合物25.0％、甘油4.0％、丁二醇3.0％、烟酰胺3.0％、蔗糖2.0％、泛醇1.5％、水杨酸1.0％、辛酰羟肟酸0.7％、1,2-己二醇0.3％、3-o-乙基抗坏血酸0.3％、生育酚0.5％、红没药醇0.1％、羟乙基纤维素0.2％、纤维素胶0.4％、甘草酸二钾0.05％、EDTA二钠0.05％、Solubilisant LRI 5.0％，加去离子水至100。

1.3.5赛天然酵母组合物乳液(重量比例)

赛天然酵母组合物8.0％、甘油5.0％、丁二醇3.0％、异壬酸异壬酯4.0％、角鲨烷2.0％、甘油聚醚-26 1.0％、聚二甲基硅氧烷1.0％、MONTANOV L 0.6％、SIMULGEL EG0.5％、烟酰胺0.5％、生育酚0.1％、红没药醇0.2％、卡波0.18％、三乙醇胺0.14％、乙酰壳糖胺0.1％、对羟基苯乙酮0.3％、1,2-己二醇0.3％、EDTA-二钠0.05％、香精0.02％，加去离子水至100。

1.3.6赛天然酵母组合物清痘洗面乳(重量比例)

赛天然酵母组合物6.0％、甘油25.0％、肉豆蔻酸17.0％、棕榈酸7.5％、硬脂酸7.3％、氢氧化钾7.2％、LC 3.0％、月桂酸2.0％、羟苯甲酯0.2％、香精0.5％、聚乙二醇-14M0.1％、EDTA二钠0.1％、瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵0.07％，加去离子水至100。

1.3.7赛天然酵母组合物素颜霜(重量比例)

赛天然酵母组合物3.0％、甘油8.0％、甜菜碱2.0％、羟乙基脲7.0％、泛醇0.1％、甲酯0.2％、EG0.8％、1618醇1.0％、M68 2.0％、A165 1.0％、聚二甲基硅氧烷2.0％、尿囊素0.2％、乳木果油1.5％、异硬脂酸异丙酯6.0％、DC14011.0％、白油3.0％、生育酚醋酸酯0.5％、丙酯0.1％、钛白粉2.5％、异壬酸异壬酯3.0％，加去离子水至100。

1.3.8赛天然酵母组合物卸妆液(重量比例)

赛天然酵母组合物1.0％、D-泛醇0.7％、氯化钠0.55％、磷酸二氢钾0.1％、磷酸氢二钾0.1％、Cosmocil CQ 0.7％、PLURONIC L64 0.04％、0.05％GREEN 6 0.38％、异构十六烷10.0％、D5 16％，加去离子水至100。

1.3.9赛天然酵母组合物洗发香波(重量比例)

赛天然酵母组合物5.0％、AES(70％)18％、CAB(30％)5.0％、6501 2.0％、珠光双酯1.5％、乳化硅油(60％)2.0％、瓜尔胶C-14-S 0.3％、柠檬酸0.2％、氯化钠0.8％、开松(1.5％)0.08％、香精0.5％、EDTA-二钠0.1％，加去离子水至100。1.3.10赛天然酵母组合物护发素(重量比例)

赛天然酵母组合物10.0％、芦荟提取物20.0％、十八醇5.0％、阳离子表面活性剂8.0％、羊毛脂2.0％、苯甲酸钠0.2％、苯甲醇0.3％、氯化钠1.0％、香精0.02％、颜料0.01％，加去离子水至100。

1.3.11赛天然酵母组合物发蜡(重量比例)

赛天然酵母组合物1.5％、平平加25.0％、A25 1.0％、EP-200 2.6％、白蜂蜡8.0％、甲酯0.2％、丙酯0.1％、羊毛脂1.0％、丙二醇10.0％、VA64 2.0％、香精0.02％，加去离子水至100。

1.3.12赛天然酵母组合物沐浴露(重量比例)

赛天然酵母组合物6.0％、甲基椰油酰基牛磺酸钠6.0％、月桂酰两性基乙酸钠6.0％、月桂酰肌氨酸钠5.0％、椰油酰胺甲基MEA3.0％、癸基单油酸甘油酯2.0％、聚甘油-10油酸酯2.0％、辛酸/癸酸甘油酯类聚甘油-10酯类2.0％、PEG-120甲基葡糖二油酸酯1.5％、椰油酰羟乙磺酸酯钠1.0％、月桂基葡糖苷1.0％、MS621 1.0％、聚季铵盐-100.4％、柠檬酸钠0.1％、EDTA二钠0.1％、甘油月桂酸酯0.3％、柠檬酸0.3％、泛醇0.5％、脱氢乙酸0.5％、苯甲醇0.3％、香精0.25％，加去离子水至100。

1.3.13赛天然酵母组合物沐浴泡腾片(重量比例)

赛天然酵母组合物30.0％、柠檬酸20.0％、碳酸氢钠20.0％、氯化钠8.5.％、山梨醇8.0％、薄荷5.0％、聚乙二醇4000 2.0％、氨基酸起泡剂5.0％、苯甲酸钠0.5％、乙醇0.5％、香精0.5％。

1.3.14赛天然酵母组合物身体乳(重量比例)

赛天然酵母组合物15.0％、甘油5.0％、辛酸/癸酸甘油酯5.0％、乳木果油3.0％、丁二醇3.0％、白油2.0％、鲸蜡硬脂醇1.0％、乳化硅油1.0％、AVC0.6％、异壬酸异壬酯1.0％、甘油硬脂酸酯1.0％、聚山梨醇酯-60 2.0％、硬脂醇聚醚-21 0.5％、生育酚0.5％、泛醇0.5％、橄榄油0.5％、环戊硅氧烷0.2％、卵磷脂0.2％、苯氧乙醇0.3％、乙基己基甘油0.2％、EDTA-二钠0.1％，加去离子水至100。

1.3.15赛天然酵母组合物防晒霜(重量比例)

赛天然酵母组合物2.0％、硬脂酸10.0％、十六醇1.5％、羊毛脂1.0％、白油5.0％、单硬脂酸甘油酯0.5％、吐温-80 2.7％、私盘-60 0.5％、K12 0.3％、甘油2.5％、水杨酸苯酯1.0％、二氧化钛1.0％，加去离子水至100。

1.3.16赛天然酵母组合物口咽修护喷剂(重量比例)

赛天然酵母组合物10.0％、甘油2.0％、山梨(糖)醇2.0％、蜂蜜粉0.5％、薄荷0.1％、山梨酸钾0.5％、苯甲酸钠0.2％，加去离子水至100。

1.3.17赛天然酵母组合物护理牙膏(重量比例)

赛天然酵母组合物8.0％、抗坏血酸1.0％、月桂醇硫酸酯钠2.0％、水合硅石18％、山梨(糖)醇30％、木糖醇5.0％、聚乙二醇4005.0％、壳聚糖1.0％、羟乙基纤维素0.5％、海藻酸钠3.0、薄荷1.5％、糖精钠0.2％，加去离子水至100。

1.3.18赛天然酵母组合物刷牙牙片(重量比例)

赛天然酵母组合物5.0％、微晶纤维25.5％、山梨(糖)醇30.5％、木糖醇25.0％、甜菊糖0.25％、月桂酰谷氨酸钠1.0％、薄荷5.0％、海藻酸钠3.0％、碳酸氢钠1.0％、抗坏血酸1.0％、甘草0.5％、硬脂酸镁1.0％、二氧化硅0.5、香精0.75％。

1.3.19赛天然酵母组合物口服液(重量比例)

赛天然酵母组合物2.5％、甜橙汁5.0％、蓝莓汁2.0％、葡萄汁2.0％、维生素C1.0％、乳糖0.2％、麦芽糊精0.2％、氨基酸0.1％、氯化钠0.1％，加去离子水至100。

1.3.20赛天然酵母组合物膳食软胶囊(重量比例)

赛天然酵母组合物4.0％、明胶42％、甘油23％、山梨(糖)醇5.0％、甘露糖醇1.5％、麦芽糖2.5％、颜料0.1％、PEG400 28％，加去离子水至100。

1.3.21赛天然酵母组合物私部泡沫(重量比例)

赛天然酵母组合物10.0％、月桂酰肌氨酸钠6.0％、SP-115B3.0％、月桂酰两性基乙酸钠2.0％、甘油1.5％、1,3-丙二醇1.0％、苯氧乙醇0.3％、羟苯甲酯0.3％、羟苯乙酯0.2％、乙基己基甘油0.2％、对氯间二甲苯酚0.3％、乳酸0.05％、乳酸钠0.05％，加去离子水至100。

1.3.22赛天然酵母组合物私部凝胶(重量比例)

赛天然酵母组合物25.0％、硼砂2.5％、卡波姆1.7％、甘油1.5％、苯氧乙醇0.3％、羟苯甲酯0.3％、羟苯乙酯0.2％、乙基己基甘油0.2％，加去离子水至100。

2.功效实验

2.1保湿性实验

实验选择能够完全受到试验结果影响的没有皮肤疾病的男女20名(男5名，女15名)为对象进行实验，以测试赛天然酵母组合物的保湿效果。具体方法如下：各个实验对象在试样前，先用水清洗实验部位后，再适应外部环境30分钟。实验的环境条件是：保持室内温度22-24℃，室内湿度45-50％，并在同一场所进行实验。在手臂内侧以2*2cm2涂抹样品如表1所示各10ul，并干燥1分钟。然后在涂抹的部位再各涂抹上20ul的超纯水，用毛巾擦干水分后以1分为间隔(0分钟、1分钟、2分钟、3分钟、4分钟、5分钟、6分钟、7分钟、8分钟、9分钟、10分钟)，用Corneometer CM 825对每个涂抹部位的皮肤表面水分进行测定保湿效果。测量结果如表2所示，单位是Corneometer value(Cv)。

表1 各样品成分组成情况如下：

注：“-”表示未添加。

表2 各样品保湿效果测定结果如下：

	0分	2	4	6	8	10
							样品1	156.3	66.2	58.6	50.1	48.4	46.2
样品2	160.6	70.2	60.5	52.2	49.1	47.5
							样品3	157.5	68.1	59.4	51.2	49.5	46.7
样品4	163.7	74.3	63.0	54.0	50.2	48.7
							样品5	163.9	74.9	63.5	54.6	50.5	49.5
样品6	165.4	76.8	65.9	56.4	51.4	50.8
							样品7	164.4	75.4	64.6	55.6	50.9	50.1
样品8	167.6	79.8	67.5	57.2	52.2	51.5
							样品9	166.6	78.8	67.1	56.9	51.6	50.9
样品10	168.0	80.2	67.9	57.8	53.7	52.6
							样品11	168.5	80.9	68.4	58.3	55.9	55.1
样品12	172.6	72.5	62.8	56.2	52.7	51.3
							样品13	176.9	76.9	66.5	62.4	58.2	56.8
样品14	181.6	82.4	72.0	65.8	61.3	60.1
							样品15	180.0	81.2	70.0	64.4	60.1	59.7
样品16	186.2	85.8	73.5	67.2	63.5	62.9
							样品17	187.8	87.5	75.8	69.5	64.1	63.8
样品18	190.2	92.3	78.1	72.4	68.1	67.4
							对照组1	156.3	66.4	58.5	50.1	48.3	46.4
对照组2	144.2	60.5	51.3	43.6	42.0	40.3
							对照组3	160.5	72.7	62.4	53.2	51.1	49.4

结论：

(1)由表1、2可知，天然酵母、植物调理剂和粉状原料三者按一定重量比培养、发酵、处理后得到的赛天然酵母组合物比单一的天然酵母、植物调理剂、粉状原料溶液保湿效果更好，说明赛天然酵母组合物在保湿效果方面具有明显的协同增强作用；

(2)由表1、2可知，质量分数在0.5-5.0％范围内的天然酵母、在50.0-80.0％范围内的植物调理剂、在1.5-5.0％范围内的粉状原料经培养、发酵、处理后得到的赛天然酵母组合物在保湿效果方面均具有协同增强作用；

(3)对比样品可知，天然酵母、植物调理剂和粉状原料三者添加量为2.0％、65.0％、3.0％时，保湿协同增强作用最合理，低于这个值保湿效果不够，高于这个值保湿效果增幅变缓而出现料体浪费、成本增加等问题。

2.2透皮吸收性实验

依据体外透皮吸收试验将处理好的鼠皮角质层向上固定于Franz扩散池上，在接收池

中加入30％乙醇-生理盐水，置于恒温水浴的智能透皮试验仪中，设定温度(37.0±0.5)℃，

转速200r·min－1。平衡1h，排尽接收池内的气泡后加入样品。扩散池供给面积上均匀涂抹样品如表3所示各1g，每组平行3次，分别在0、0.1、0.3、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0时吸取接收液1mL，并补入同温同体积的接收液。吸取的接收液经过滤后加入试管，再准确加入2mLCTAB试液，自加入时开始计时，轻轻振动摇晃足够长时间，期间尽量避免反应液产生泡沫，静置至接近10min，然后将反应液倒入1cm比色皿中，10min时测定波长在400nm时的吸光度(A400)，根据透明质酸在该波长下的标准曲线得到透明质酸的透皮吸收率。

表3 各样品成分组成情况如下:

注：“-”表示未添加。

结论：如图1透皮吸收性实验结果图，以透明质酸透皮吸收率为纵坐标，时间(t)为横坐标，绘制透明质酸透皮吸收率-时间曲线，见图1，结果显示12h内透明质酸的吸收率为样品一＞样品三＞样品二＞对照组，表明天然酵母、植物调理剂和粉状原料三者按一定重量比培养、发酵、处理后得到的赛天然酵母组合物可显著提高透明质酸的透皮吸收率；结果显示0.5h内皮肤对透明质酸的吸收最快，该赛天然酵母组合物在0.5h内对透明质酸的透皮吸收率影响最显著；实验通过对透明质酸透皮吸收率的研究表明该赛天然酵母组合物具有一定的促渗吸收功效。

2.3研究赛天然酵母组合物的复合配方实验

现采用人体实验的方法检测赛天然酵母组合物在人体的生物活性，即镇定舒缓、抗炎修复、滋养调理活性，研究该活性赛天然酵母组合物以预防和调理皮肤不适。

本实验所有试验者均为不同程度的皮肤不适者，各样品赛天然酵母组合物成分组成如表4所示，实验组1采用天然酵母2.0％+植物调理剂65.0％+粉状原料3.0％制备的组合物样品每晚睡前涂抹1次；实验组2采用天然酵母2.0％+植物调理剂65.0％制备的组合物样品每晚睡前涂抹1次；实验组3采用天然酵母2.0％+粉状原料3.0％制备的组合物样品每晚睡前涂抹1次；阳性对照采用天然酵母2.0％制备的组合物样品每晚睡前涂抹1次；阴性对照采用生理盐水每晚睡前涂抹1次；比较五组调理7天后症状改善情况。

表4 各实验组样品溶液成分组成情况如下:

	天然酵母	植物调理剂	粉状原料	去离子水
					实验组1	2.0％	65.0％	3.0％	至100
实验组2	2.0	65.0％	-	至100
					实验组3	2.0	-	3.0％	至100
阳性对照组	2.0	-	-	至100
					阴性对照组	-	-	-	生理盐水至100

注：“-”表示未添加。

皮肤感觉不适、过敏、炎症、细纹、异味、污渍等症状评价：

显效：症状显著改善或消失，试验者满意；有效：症状有改善或减轻，试验者仍有不适，要求继续调理；无效：症状无明显减轻，试验者不满意。

统计学方法：采用SPSS12.0统计学软件进行统计学处理，计量和计数资料组间比较采用t检验和x2检验，以p<0.05为有统计学意义差异。

结果如下：

如表5所示，第8天症状改善情况：实验组1显效10例，总有效率100％；实验组2显效5例，有效2例，无效3例，总有效率70％，显效率与实验组1比较P<0.01；实验组3显效3例，有效3例，无效4例，总有效率60％，显效率与实验组1比较P<0.01；阳性对照显效0例，有效2例，无效8例，总有效率20％，显效率与实验组1比较P<0.01。

表5 第8天各组试验者症状改善情况比较如下：

结论：

实验组1(天然酵母2.0％+植物调理剂65.0％+粉状原料3.0％制备的组合物样品)明显比实验组2(天然酵母2.0％+植物调理剂65.0％制备的组合物样品)、实验组3(天然酵母2.0％+粉状原料3.0％制备的组合物样品)、阳性对照有效。本发明赛天然酵母组合物用人体实验表明(1)天然酵母、植物调理剂和粉状原料三者按一定重量比培养、发酵、处理后得到的赛天然酵母组合物对预防和调理皮肤不适效果显著；(2)天然酵母、植物调理剂和粉状原料三者按一定重量比培养、发酵、处理后得到的赛天然酵母组合物在短期内镇定舒缓、抗炎修复、滋养调理皮肤问题有一定功效，长期使用效果会更佳；(3)天然酵母、植物调理剂和粉状原料三者按一定重量比培养、发酵、处理后得到的赛天然酵母组合物在预防和调理皮肤不适方面有明显的协同增强作用。

2.4研究赛天然酵母组合物复合配方的最佳配比实验

分别将配比0.5％、2.0％、5.0％的天然酵母，配比50.0％、65.0％、80.0％的植物调理剂，配比1.5％、3.0％、5.0％的粉状原料制备成赛天然酵母组合物，去离子水补至质量百分比总和100％。本实验所有试验者均为不同程度的皮肤不适者，实验1-27以天然酵母、植物调理剂和粉状原料三者按不同配比制备的组合物样品每天早晚涂抹2次进行三因素三水平的正交实验，观察调理后的情况；阳性对照28-30分别采用配比0.5％、2.0％、5.0％的天然酵母制备的组合物样品每天早晚涂抹2次，观察调理后的情况；31为阴性对照使用生理盐水每天早晚涂抹2次，观察调理后的情况；每组5个病人，比较调理7天后症状改善情况。

表6 正交实验因素表：

皮肤感觉不适、过敏、炎症、细纹、异味、污渍等症状评价标准同上。

统计学方法：采用SPSS12.0统计学软件进行统计学处理，计量和计数资料组间比较采用t检验和x2检验，以p<0.05为有统计学意义差异。

表7 第8天各组试验者症状改善情况比较如下：

结论：

经人体使用实验，结果表明使用配比0.5％、2.0％、5.0％的天然酵母，配比50.0％、65.0％、80.0％的植物调理剂，配比1.5％、3.0％、5.0％的粉状原料制备的赛天然酵母组合物在镇定舒缓、抗炎修复、滋养调理皮肤问题方面均有一定的功效，但不局限此范围；当配比为2.0％的天然酵母，配比为65.0％的植物调理剂，配比为3.0％的粉状原料制备成赛天然酵母组合物时，功效体现最明显，该配比是最佳配比。

2.5抑菌实验

取临床分离菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌少许，分别接种于肉汤培养基中，于37℃下培养18h。(绿脓杆菌肉汤培养基中添加20％的小牛血清)取18h培养的各菌株营养肉汤培养物，将其制成菌悬液用于实验。分别取灭菌试管11支，第1支加入营养肉汤液体培养基9ml，第2-10支加入5ml，第11支加入10ml，分别取样品溶液如表8所示1ml加入第1支试管，混合均匀后取5ml加入第2支，依次稀释至第10支，第11支不加样品做为对照。每管加入大肠杆菌悬液0.1ml，37℃的温度下培养24h，取出观察细菌生长情况。金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌同上述实验观察生长情况。如试管变浑浊，即表示细菌生长，样品无抑菌作用；如试管清亮则表示细菌生长受到抑制。实验结果如表9所示，本发明赛天然酵母组合物对临床分离菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌均有较强的抑菌作用。

表8 抑菌实验各样品溶液成分组成

	天然酵母	植物调理剂	粉状原料	去离子水
					样品1	2.0％	65.0％	3.0％	至100
样品2	2.0％	65.0％	-	至100
					样品3	2.0％	-	3.0％	至100
样品4	-	65.0％	3.0％	至100
					样品5	2.0％	-	-	至100
样品6	-	65.0％	-	至100
					样品7	-	-	3.0％	至100

注：“-”表示未添加。

表9 各样品溶液对应抑菌试验中最后清亮的试管编号

注：“-”表示未清亮。

将按照一定比例稀释后的上述清亮的肉汤试管和对照组转种肉汤琼脂平板，观察24h，无细菌生长的最小浓度即为杀菌浓度，记为C，单位为mg/mL，结果如表10所示，说明本发明赛天然酵母组合物对临床分离常见的皮肤致病菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌均有较强的杀菌作用，可以有效抑制这些皮肤致病菌的活性以预防和调理皮肤不适；同时通过对比可以看出，天然酵母、植物调理剂和粉状原料三者按一定重量比培养、发酵、处理后得到的赛天然酵母组合物在抑菌方面还具有协同增强作用。

表10 各样品溶液杀菌情况

	C(大肠杆菌)	C(金黄色葡萄球菌)	C(绿脓杆菌)	C(白色念珠菌)
					样品1	0.12	0.15	0.17	0.11
样品2	0.22	0.37	0.40	0.25
					样品3	0.76	0.50	0.80	0.66
样品4	0.47	0.52	0.55	0.60
					样品5	-	-	-	-
样品6	0.43	0.51	0.75	0.52
					样品7	0.73	0.84	0.81	0.92
对照组	-	-	-	-

注：“-”表示无杀菌性。

2.6急性经口毒性实验

根据检验依据《消毒技术规范》(第三版)第一分册实验技术规范之3.4(卫法监发[1999]第448号)。将动物(普通级NIH小鼠20只，雌雄各半，体重18～22g)供水禁食12小时，蒸馏水为溶剂，受试物(天然酵母2.0％、植物调理剂65.0％、粉状原料3.0％制备成的赛天然酵母组合物)设剂量为5500mg/kg，按0.2ml/20g体重用灌胃针头将受试物一次灌给动物。给药后立即观察并记录动物的中毒表现、死亡数和死亡时间，每天观察二次，观察期两周。根据急性毒性分级标准进行毒性分级。实验结果：观察期内，受试小鼠未出现明显症状，无死亡发生。

表11 受试物对NIH小鼠急性经口毒性试验结果

性别	剂量(mg/kg)	动物数(只)	死亡数(只)	死亡率(％)
					雌	5500	10	0	0
雄	5500	10	0	0

结论：本发明赛天然酵母组合物对NIH小鼠的急性经LD50＞5000mg/kg，属实际无毒级。

2.7***黏膜刺激实验

按《消毒技术规范》(第三版)第一分册《实验技术规范》(***，2012.4)中第3.5进行。选取健康大白兔28只，分为实验组24只、赋形剂组2只和空白对照组2只。实验组：将涂有样品1-12试验样品的2.0cm长的小圆棉条置入试验动物***内，每种样品各2只；赋形剂组：以同样大小的棉条浸以灭菌生理盐水，置入动物***内；空白组：不做处理。4小时后除去棉条，24小时后处死动物，取出局部***组织，观察有无充血、水肿等现象。

表12 ***黏膜刺激实验各样品成分组成

表13 ***黏膜刺激实验结果如下：

	红斑症状	水肿症状	刺激反应积分
				样品1	-	-	0
样品2	-	-	0
				样品3	-	-	0
样品4	-	-	0
				样品5	-	-	0
样品6	-	1	1
				样品7	-	-	0
样品8	-	-	-
				样品9	1	-	1
样品10	-	-	0
				样品11	-	-	0
样品12	2	1	3
				赋形剂组	-	-	0
空白组	-	-	0

注：“-”表示无红斑或水肿症状；“0”表示没有***刺激反应。

观察期内，试验组样品1-5、样品7-8、样品10-11、赋形剂组、空白对照组动物局部***组织未出现红斑或水肿症状，刺激反应积分均值为0，根据《消毒技术规范》(第三版)第一分册《实验技术规范》(***，2012.4)中相关标准判定，这些样品对健康大白兔***黏膜无刺激性；而试验组样品6、样品9、样品12动物局部***组织不同程度的出现红斑或水肿症状，刺激反应积分不为0，根据《消毒技术规范》(第三版)第一分册《实验技术规范》(***，2012.4)中相关标准判定，这些样品对健康大白兔***黏膜有不同程度的刺激性。

结果表明，高含量植物调理剂的赛天然酵母组合物会使***组织出现红斑或水肿症状，会对***黏膜产生刺激性，当植物调理剂含量达到80.0％时刺激性明显；还可以看出一定含量的天然酵母和粉状原料可以有效缓解高浓度的植物调理剂引起的***组织红斑、水肿等副作用，避免刺激性的发生；同时本发明赛天然酵母组合物中的各成分经处理后还可以协同修复滋养***受损黏膜，增强***黏膜免疫力，遏制生殖道感染和炎症反应，维持机体正常健康。

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利保护范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (10)

1.一种赛天然酵母组合物，该组合物包括如下重量比的组分：

其中，天然酵母经培养、发酵、处理为活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物，活性酵母为活化后未被酶解的酵母菌种；酵母内容物为酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素、矿物质天然活性物质，其中氨基酸占酵母内容物含量30％以上，总蛋白占酵母内容物50％以上，核苷酸占酵母内容物10％以上；酵母发酵物为活性酵母分解营养物质，包括乙醇、二氧化碳、乳酸；

并且，天然酵母中活性酵母、酵母内容物和酵母发酵物的重量比为1-2:20-30:5-8，所述组合物中天然酵母添加量为0.5-5.0％。

2.如权利要求1所述的赛天然酵母组合物，其特征在于，所述天然酵母是天然植物培植发酵菌种，所述菌种为鲁氏接合酵母CGMCC2.1915(相应菌种的编号，菌种的通用名称。)、郎必可假丝酵母CGMCC2.1763、酿酒酵母CGMCC2.1和红发夫酵母ATCC66270中的任一种，每种菌种添加量均为0.5-5.0％。

3.如权利要求1所述的赛天然酵母组合物，其特征在于，植物调理剂由银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草、蔗糖组成，并且各成分质量比为3-5:1-3:1-2:1-2:2-3:1-3。

4.如权利要求3所述的赛天然酵母组合物，其特征在于，所述植物调理剂中的银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草、蔗糖最佳重量比3.5:1.5:1:1:2:1。

5.如权利要求1所述的赛天然酵母组合物，其特征在于，所述天然粉状原料由葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白、维生素C组成，并且各成分质量比为10-15:1-2:1-3:1-2:3-5。

6.如权利要求5所述的赛天然酵母组合物，其特征在于，所述天然粉状原料中的葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白、维生素C按最佳质量比12:1:1.5:1:3.5。

7.赛天然酵母组合物制备方法，其特征在于，制备步骤包括：

a、天然酵母菌种优选活化后的鲁氏接合酵母、郎必可假丝酵母、酿酒酵母和红发夫酵母中的任一种，保存备用；

b、按质量比银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草、蔗糖为3-5:1-3:1-2:1-2:2-3:1-3组成植物调理剂，混合粉碎成1000克粗粉，加10倍量水，水煮2小时，过滤处理，滤渣加8倍量水，水煮1小时，过滤处理；滤渣再加8倍量的水，水煮1小时，过滤处理，滤液合并，于50℃下减压浓缩至相对密度为1.0g/ml的清膏，使用时，加乙醇使含醇量达60％，静置24小时，过滤，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，灭菌后备用；

c、按质量比葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白、维生素C为10-15:1-2:1-3:1-2:3-5组成天然粉状原料并混合均匀，灭菌后备用；

d、取上述备用酵母菌种在恒温(25～30℃)、恒湿(50～57％)、pH(4.0-7.0)条件下用天然植物调理剂的蔗糖溶液摇床培养或者发酵罐好氧培养1-2天得到天然酵母原液，把液状天然酵母与粉状原料低温25～30℃搅拌混合，静止放置1-4天，测pH5.0-5.5，结束发酵，得到酵母发酵混合物；

e、取上述酵母发酵混合物，加入0.5g1:1-1:3混合的果胶酶和酵母抽提酶，于50-60℃酶解2-8h，100℃稳定化处理10min，2000-3000RPM离心，取上清液用0.22μm微孔滤膜过滤后调节pH5.0-5.5，即为赛天然酵母组合物，保存备用。

8.如权利要求7所述的赛天然酵母组合物制备方法，其特征在于，上述方法还包括：

f、将所述赛天然酵母组合物缓慢加入到预先用基质辅料配置好的剂型中，轻轻搅拌使其完全分散；

g、调节pH4.0-9.0，制成相应剂型产品备用。

9.根据权利要求7中所述的制备方法，其特征在于，所述天然酵母菌种优选活化后的鲁氏接合酵母CGMCC2.1915、郎必可假丝酵母CGMCC2.1763、酿酒酵母CGMCC2.1和红发夫酵母ATCC66270中的任一种；所述植物调理剂中的银耳、栀子花、龙血树、三七、益母草、蔗糖最佳重量比3.5:1.5:1:1:2:1；所述天然粉状原料中的葡萄糖、透明质酸、聚谷氨酸、胶原蛋白、维生素C按最佳质量比12:1:1.5:1:3.5。

10.权利要求1-6任一所述的赛天然酵母组合物在制备化妆品中的应用。