CN110638738A - 一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法及应用 - Google Patents
一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法及应用,包括如下步骤:S1、采摘新鲜开放的玫瑰花,将玫瑰花瓣进行挑选、清洗、冻干、低温粉碎成玫瑰粉;S2、向泡好的茶水中加入玫瑰粉、蜂蜜、柠檬酸、维生素C进行水浴,水浴温度4‑6℃,水浴时间12‑24 h;S3、将S2中发酵底物置于‑20℃下冷冻16‑24h,取出,室温下解冻,重复此冻融过程一次。本发明方法成本可控、效率高、无“三废”排放问题,可实现工业化,制备的生态营养液富含黄酮、多酚、多糖、氨基酸等多种生物活性物质,具有维持皮肤微生态平衡的作用,最终达到补水保湿、平衡油脂、消炎抗菌、延缓衰老的绿色养肤目的。
Description
技术领域
本发明涉及生物相关技术领域,具体为一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法及应用。
背景技术
玫瑰是蔷薇科蔷薇属的落叶灌木。玫瑰花既是优质的美化、绿化环境的观赏资源,因其含有丰富的多糖、挥发油、黄酮类、鞣质、氨基酸等多种活性物质,所以具有抗菌消炎、排毒养颜、抗氧化等护肤功效,在日化行业具有广阔前景。
目前,玫瑰主要用于制作玫瑰精油、玫瑰花茶、玫瑰酱等,多采用蒸馏法和浸提法,生产过程中利用率较低,造成原料浪费。采用益生菌,通过植物发酵技术制备的护肤原料与化妆品,其代谢物及溶胞物一方面具有低免疫原性,更有利于构建皮肤友好生态环境。另一方面,将益生
菌加入到天然植物中,经过微生物发酵,植物原料与益生菌相互增益,增加有效物质的活性和含量,同时在多种糖苷酶等生物酶作用下,大分子化合物降解为小分子物质,产生更多能被皮肤快速吸收的次级代谢产物,真正起到护肤的功效。
目前,通过益生菌发酵制备玫瑰生态营养液的研究还很有限,鉴于此,无论是生产工艺还是在护肤及化妆品中的应用都有进一步发展的必要性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法及应用,该方法采用纯天然植物原料、利用固定化菌体生物技术制得的玫瑰生态营养液,具有补水保湿、平衡油脂、消炎抗菌的活性小分子物质,通过调节面部皮肤微生态,实现延缓衰老的功效,符合绿色养肤理念。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法及应用,包括如下步骤:
S1、采摘新鲜开放的玫瑰花,将玫瑰花瓣进行挑选、清洗、冻干、低温粉碎成玫瑰粉;
S2、向泡好的茶水中加入玫瑰粉、蜂蜜、柠檬酸、维生素 C进行水浴,水浴温度4-6℃,水浴时间12-24 h;
S3、将S2中发酵底物置于-20℃下冷冻16-24 h,取出,室温下解冻,重复此冻融过程一次;
S4、向 S3中加入适量糖,并进行巴氏灭菌;
S5、将硅藻土与水按一定比例混匀,灭菌,加入适量鼠李糖乳杆菌 MF031、植物乳杆菌MF033、酿酒酵母 MF012 制成发酵菌剂;
S6、将发酵菌剂加入S4中,然后发酵 24 小时到168小时;
S7、将 S6得到的发酵物离心,上清液选用滤膜过滤,加入5 wt%-10 wt%燕麦-β-葡聚糖、5wt%-20wt%低聚果糖得到生态营养液;固相部分采用超声波高速剪切破碎菌体,得到生态营养液;
优选的,S1中,所述的玫瑰花为金边玫瑰或平阴重瓣红玫瑰,冻干温度为-50℃,粉碎目数为100-500目。
优选的,S2中,所述的茶水为红茶,且浸泡温度为80℃。
优选的,S2中,所述的玫瑰的质量为发酵体系质量的0.1wt%-5wt%,所述的蜂蜜的质量为发酵体系质量的1 wt%-5 wt%,所述的柠檬酸的质量为发酵体系质量的0.01wt%-0.2wt%,所述的维生素C的质量为发酵体系质量的0.005 wt%-0.02 wt%,所述的茶叶质量为发酵体系质量的0.05wt%-0.5wt%。
优选的,S中,所述的两次冻融过程中冷冻温度为-20℃,冷冻时间为 16-24h。
优选的,S4中,所述的巴氏灭菌为将混合原料加热至68-70℃,并保持此温度30min 后快速冷却至4-5℃。
优选的,S5中,所述的发酵菌剂的制备方法是先将硅藻土与水以25-50:100(w:v)的比例制成硅藻泥,121℃灭菌20 min 后,加入S5中所述的鼠李糖乳杆菌MF031、植物乳杆菌MF033、酿酒酵母MF012中的一种或多种;加入总质量为硅藻泥体系质量的10wt%-20wt%,搅拌均匀,室温吸附2-6 h。
优选的,S6中所述的发酵菌剂的质量为发酵体系质量的1wt%-2.5wt%;所述的发酵温度为25-37℃。
优选的,S7中,所述的离心条件为4000rpm,15 min;所述的除菌方式为微滤,滤膜空隙为0.22um;所述的固相部分处理方法为将发酵物超声破碎 30 min。
一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的应用,将制备的生态营养液按10 wt%-40wt%比例加入,制成爽肤水、面霜、泥膏型面膜。
本发明提供了一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法及应用,具备以下有益效果:
本发明先将新鲜玫瑰花瓣采摘、清洗、冻干、粉碎、过筛,置于 4-6℃蜂蜜-柠檬酸-维生素C的茶水中低温浴24 h,然后-20℃反复冻融2次,加入适量糖,巴氏灭菌,加入发酵菌剂发酵,所用菌剂为鼠李糖乳杆菌MF031、植物乳杆菌MF033、酿酒酵母MF012中的一种或多种,利用硅藻泥吸附方式对益生菌固定化。发酵结束后,离心,上清液采用滤膜除菌后加入燕麦-β-葡聚糖、低聚果糖等制成生态营养液,进一步制成爽肤水、精华液、面霜等,本发明对原料进行低温预处理,除菌方式温和,更多地保留了原料自身的营养成分,发挥固定化菌体优势,通过发酵方式使玫瑰有益成分高效溶出,提升原料自身抗炎杀菌、延缓皮肤衰老的护肤功效。采用纯天然植物发酵,制备绿色安全、低免疫原性护肤品,构建皮肤友好微生态,符合现代人们的绿色养肤理念。
具体实施方式
实施例1:
1)发酵培养基的制备:
采摘新鲜开放的玫瑰花瓣冻干、粉碎,得到 100 目的玫瑰花粉末;向发酵瓶中加入 80℃去离子水,加入发酵体系质量的 0.05 wt%红茶,浸泡 20 min;向茶水中加入发酵体系质量的 1 wt%蜂蜜、0.01 wt%柠檬酸、0.005 wt%抗坏血酸(Vc), 搅拌至完全溶解后,加入发酵体系质量的 0.1 wt%玫瑰花粉末,搅拌均匀,4-6℃低温水浴 12 h。于-20℃下冷冻 16h,取出,室温下解冻,重复此冻融过程一次;加入发酵体系质量的 0.2 wt%葡萄糖,水浴加热至 68-70℃,并保持此温度 30 min, 快速置于 4-5℃冰箱使发酵底物迅速冷却。
2)发酵菌剂的制备:
将硅藻土与水以 25:100(w:v)的比例制成硅藻泥,121℃灭菌 20 min 后,加入总质量为硅藻泥体系质量的 3 wt%鼠李糖乳杆菌 MF031、4 wt%植物乳杆菌MF033、3 wt%酿酒酵母MF012,搅拌均匀,室温吸附2 h。
3)发酵过程:
向发酵培养基中加入质量为发酵体系质量的 1 wt%的发酵菌剂,37℃培养箱发酵24h。
4)发酵后处理:
发酵结束后,4000 rpm 离心 15 min,上清液采用孔径为 0.22 um 滤膜除菌后加入5wt%燕麦-β-葡聚糖、5 wt%低聚果糖得到生态营养液。
实施例2:
1)发酵培养基的制备:
采摘新鲜开放的玫瑰花瓣冻干、粉碎,得到 100 目的玫瑰花粉末。向发酵瓶中加入 80℃去离子水,加入发酵体系质量的 0.1 wt%红茶,浸泡 20 min。向茶水中加入发酵体系质量的 2 wt%蜂蜜、0.05 wt%柠檬酸、0.01 wt%抗坏血酸(Vc),搅拌至完全溶解后,加入发酵体系质量的 1 wt%玫瑰花粉末,搅拌均匀,4-6℃低温水浴 12 h。于-20℃下冷冻 24 h,取出,室温下解冻,重复此冻融过程一次。加入发酵体系质量的0.2 wt%葡萄糖,水浴加热至68-70℃,并保持此温度30 min,快速置于4-5℃冰箱使发酵底物迅速冷却。
2)发酵菌剂的制备:
先将硅藻土与水以 25:100(w:v)的比例制成硅藻泥,121℃灭菌 20 min 后,加入总质量为硅藻泥体系质量的5 wt%鼠李糖乳杆菌 MF031、5 wt%植物乳杆MF033,搅拌均匀,室温吸附4 h。
3)发酵过程:向发酵培养基中加入质量为发酵体系质量 2wt%的发酵菌剂,37℃培养箱发酵72小时。
4)发酵后处理:
发酵结束后,4000 rpm 离心 15 min,上清液采用孔径为 0.22 um 滤膜除菌后加入 5wt%燕麦-β-葡聚糖、10 wt%低聚果糖得到生态营养液。
实施例3:
1)发酵培养基的制备:
采摘新鲜开放的玫瑰花瓣冻干、粉碎,得到 200 目的玫瑰花粉末。向发酵瓶中加入 80℃去离子水,加入发酵体系质量的 0.2 wt%红茶,浸泡 20 min。向茶水中加入发酵体系质量的 3 wt%蜂蜜、0.1 wt%柠檬酸、0.01 wt%抗坏血酸(Vc),搅拌至完全溶解后,加入发酵体系质量的3 wt%玫瑰花粉末,搅拌均匀,4-6℃低温水浴 16 h。于-20℃下冷冻20 h,取出,室温下解冻,重复此冻融过程一次,加入发酵体系质量的0.2 wt%葡萄糖,水浴加热至 68-70℃,并保持此温度 30 min,快速置于4-5℃冰箱使发酵底物迅速冷却。
2)发酵菌剂的制备:
先将硅藻土与水以 35:100(w:v)的比例制成硅藻泥,121℃灭菌 20 min 后,加入总质量为硅藻泥体系质量的10 wt%鼠李糖乳杆菌 MF031、10 wt%植物乳杆菌MF033,搅拌均匀,室温吸附6h。
3)发酵过程:向发酵培养基中加入质量为发酵体系质量的1wt%的发酵菌剂,30℃培养箱发酵120小时。
4)发酵后处理:
发酵结束后,4000 rpm 离心 15 min,上清液采用孔径为 0.22 um 滤膜除菌后加入10 wt%燕麦-β-葡聚糖、20 wt%低聚果糖得到生态营养液。
实施例4:
1)发酵培养基的制备:
采摘新鲜开放的玫瑰花瓣冻干、粉碎,得到500目的玫瑰花粉末。向发酵瓶中加入 80℃去离子水,加入发酵体系质量的0.5 wt%红茶,浸泡 20 min。向茶水中加入发酵体系质量的5 wt%蜂蜜、0.2 wt%柠檬酸、0.02 wt%抗坏血酸(Vc),搅拌至完全溶解后,加入发酵体系质量的5 wt%玫瑰花粉末,搅拌均匀,4-6℃低温水浴 12 h,于-20℃下冷冻24 h,取出,室温下解冻,重复此冻融过程一次,加入发酵体系质量的0.2wt%葡萄糖,水浴加热至 68-70℃,并保持此温度30min,快速置于 4-5℃冰箱使发酵底物迅速冷却。
2)发酵菌剂的制备:
先将硅藻土与水以 50:100(w:v)的比例制成硅藻泥,121℃灭菌 20 min 后,加入总质量为硅藻泥体系质量的8wt%鼠李糖乳杆菌 MF031、8 wt%植物乳杆菌MF033、4wt%酿酒酵母MF012,搅拌均匀,室温吸附 6 h。
3)发酵过程:向发酵培养基中加入质量为发酵体系质量的2.5 wt%的发酵菌剂,25℃培养箱发酵168小时。
4)发酵后处理:
发酵结束后,4000 rpm 离心15 min,上清液采用孔径为0.22 um 滤膜除菌后加入10wt%燕麦-β-葡聚糖、20 wt%低聚果糖得到生态营养液。
实施例5:
1)发酵培养基的制备:
采摘新鲜开放的玫瑰花瓣冻干、粉碎,得到 500 目的玫瑰花粉末。向发酵瓶中加入 80℃去离子水,加入发酵体系质量的 5 wt%玫瑰花粉末、0.5 wt%红茶,浸泡20 min。向茶水中加入发酵体系质量的 5 wt%蜂蜜、0.2 wt%柠檬酸、0.02 wt%抗坏血酸(Vc),0.2 wt%葡萄糖,搅拌至完全溶解后,加入发酵体系质量的搅拌均匀,121℃,15 min 灭菌。
2)发酵菌剂的制备:先将硅藻土与水以 50:100(w:v)的比例制成硅藻泥,121℃灭菌 20 min 后,加入总质量为硅藻泥体系质量的 8 wt%鼠李糖乳杆菌 MF031、8 wt%植物乳杆菌MF033、4 wt%酿酒酵母 MF012,搅拌均匀,室温吸附 6 h。
3)发酵过程:向发酵培养基中加入质量为发酵体系质量的 2.5 wt%的发酵菌剂,25℃培养箱发酵168小时。
4)发酵后处理:
发酵结束后,4000 rpm 离心 15 min,上清液采用孔径为 0.22 um 滤膜除菌后加入10 wt%燕麦-β-葡聚糖、15 wt%低聚果糖得到生态营养液。
对实施例1-5制备的发酵原液进行检测,检测方法如下:
1、黄酮浓度
1)标准溶液配制
精密称取芦丁对照品 0.06 g, 加 60%甲醇适量, 置水浴中加热溶解,放冷, 以 60%甲醇定容于 100 mL 容量瓶中,摇匀备用,配成芦丁含量为 0.6 g/L 的标准液,备用。
2)标准曲线的制作
加 2.5 mL 不同稀释倍数的标准液,加 400 uL5%NaNO2,静置 5 min,加400uL10%Al(NO3)3,静置 6 min,加 600 uL10%NaOH,静置 6 min,30%乙醇定容至10 mL,静止 10 min,510 nm 处测吸光度。
3)待测样的检测
将 2)中标准液改为待测液即可。
2、氨基酸含量
参考 QB/T 2409-1998
3、多糖含量
参考 SN/T 4260-2015
4、DPPH 清除自由基能力
1)制作 Vc 浓度的标准曲线
用无水乙醇溶液准确配制 0.06 mg/mL,0.05 mg/mL,0.04 mg/mL,0.03 mg/mL,0.02mg/mL,0.01 mg/mL,0.005 mg/mL,0.0025 mg/mL,0.00125 mg/mL 的 Vc溶液备用。
2)使用紫外分光光度计测定
取 2 mL 待测液与 2 mL 配制好的 DPPH 甲醇溶液混匀,在室温黑暗条件下静置 25-30 min 后使用紫外分光光度计在 517 nm 条件下测定其吸光度值。得出各组数据后用以下公式计算出清除率。
其中:A2—相同体积样品溶液+相同体积 DPPH 无水乙醇溶液;
A1—相同体积样品溶液+相同体积无水乙醇溶液;
A0—相同体积无水乙醇溶液+相同体积 DPPH 无水乙醇溶液。
5、还原力测定
将 450μL样品加浓度为 0.2 mol/L、pH 值为 6.6 的磷酸缓冲液至 2.5 mL,然后加入2.5 mL 质量浓度为 1%铁***(w/v),于 50℃温度条件中反应,30min 后,加入 2.5 mL质量浓度为 10%的三氯乙酸(w/v),利用高速离心机在 3000rpm 的条件下离心10 min,取出后立刻吸取上清液 2.5 mL 于容量瓶中,加入蒸馏水2.5 mL、质量浓度为 0.1%的三氯化铁(w/v) 0.5 mL。用蒸馏水作为空白对照,分光光度计在波长为700 nm 时测定吸光度A,每个处理均做3个重复实验。根据吸光度值的高低来判断还原力的强弱。
得到检测结果如表1所示:
表1各阶段获得玫瑰液各成分含量表
实施例6:
选择实施例2得到的生态营养液应用于一种玫瑰爽肤水的制备,包括如下步骤:
S1、去离子水100%、甘油3%、1,3-丁二醇3%、透明质酸钠0.01%、尿囊素0.2%、EDTA 二钠0.05%、生态营养液30%、烟酰胺0.1%、乳糖酸0.1%、柠檬酸钠0.1%、聚赖氨酸0.05%;
S2、将去离子水、甘油、1,3-丁二醇、透明质酸钠、尿囊素、EDTA 二钠加入主锅,开启搅拌,分散均匀至无不溶物,开始加热;
S3、加热至80-85℃,保温 20min,开始降温;
S4、降温至45℃以下,加入生态营养液、烟酰胺、乳糖酸、柠檬酸钠、聚赖氨酸搅拌均匀至无不溶物;
S5、降温至常温,出料,得到玫瑰爽肤水成品。
实施例7:
选择实施例3得到的生态营养液应用于一种玫瑰面霜的制备,包括如下步骤:
S1、甘油5%、PEG-100 2.5%、橄榄油3%、硬脂酸甘油酯0.5%、棕榈酸异丙酯2%、甘草提取物1%、水100%、生态营养液20%、透明质酸钠0.2%、丙二醇4%、卡波940 0.5%、氨甲基丙醇0.1%、防腐剂适量;
S2、将甘油、PEG-100、橄榄油、硬脂酸甘油酯、棕榈酸异丙酯、甘草提取物加入容器A中,加热至 80℃-85℃;
S3、将水、生态营养液、透明质酸钠、丙二醇、卡波940加入容器B中,加热至90℃;
S4、将容器A中的物质加入容器B中,均质5 min;
S5、冷却至45℃后,加入氨甲基丙醇和防腐剂,均质 2 min;
S6、降温至常温,出料,得到玫瑰面霜成品。
实施例8:
选择实施例 5 得到的生态营养液和固相物应用于一种泥膏型面膜的制备,包括如下步骤:
S1、水100%、生态营养液5%、甘油10%、汉生胶0.3%、硅酸铝镁1%、丁二醇5%、透明质酸钠0.1%;发酵固相物5%、甘草提取物0.2%、高岭土10%、黏土2%、火山泥3%、防腐剂适量
S2、将水、生态营养液、甘油、汉生胶、硅酸铝镁、丁二醇、透明质酸钠加入容器中,搅拌均匀至无不溶物,加热至 80℃-85℃,保持
10 min;
S2、冷却至 65℃左右,将发酵固相物、甘草提取物、高岭土、黏土、火山泥依次加入容器中,加入过程中不断搅拌;
S3、冷却至 45℃后,加入防腐剂,均质2 min;
S4、降至常温,出料,得到泥膏型面膜。
对实施例6-8制备的样品进行微生物指标测定,检测结果如下表所示:
表2玫瑰样品微生物指标检测结果
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (10)
1.一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、采摘新鲜开放的玫瑰花,将玫瑰花瓣进行挑选、清洗、冻干、低温粉碎成玫瑰粉;
S2、向泡好的茶水中加入玫瑰粉、蜂蜜、柠檬酸、维生素 C进行水浴,水浴温度4-6℃,水浴时间12-24 h;
S3、将S2中发酵底物置于-20℃下冷冻16-24 h,取出,室温下解冻,重复此冻融过程一次;
S4、向 S3中加入适量糖,并进行巴氏灭菌;
S5、将硅藻土与水按一定比例混匀,灭菌,加入适量鼠李糖乳杆菌 MF031、植物乳杆菌MF033、酿酒酵母 MF012 制成发酵菌剂;
S6、将发酵菌剂加入S4中,然后发酵 24 小时到168小时;
S7、将 S6得到的发酵物离心,上清液选用滤膜过滤,加入5 wt%-10 wt%燕麦-β-葡聚糖、5wt%-20wt%低聚果糖得到生态营养液;固相部分采用超声波高速剪切破碎菌体,得到生态营养液。
2.根据权利要求1所述的一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法,其特征在于,S1中,所述的玫瑰花为金边玫瑰或平阴重瓣红玫瑰,冻干温度为-50℃,粉碎目数为100-500目。
3.根据权利要求1所述的一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法,其特征在于,S2中,所述的茶水为红茶,且浸泡温度为80℃。
4.根据权利要求1所述的一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法,其特征在于,S2中,所述的玫瑰的质量为发酵体系质量的0.1wt%-5wt%,所述的蜂蜜的质量为发酵体系质量的1 wt%-5 wt%,所述的柠檬酸的质量为发酵体系质量的0.01wt%-0.2wt%,所述的维生素C的质量为发酵体系质量的0.005 wt%-0.02 wt%,所述的茶叶质量为发酵体系质量的0.05wt%-0.5wt%。
5.根据权利要求1所述的一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法,其特征在于,S中,所述的两次冻融过程中冷冻温度为-20℃,冷冻时间为 16-24h。
6.根据权利要求1所述的一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法,其特征在于,S4中,所述的巴氏灭菌为将混合原料加热至68-70℃,并保持此温度30 min 后快速冷却至4-5℃。
7.根据权利要求1所述的一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法,其特征在于,S5中,所述的发酵菌剂的制备方法是先将硅藻土与水以25-50:100(w:v)的比例制成硅藻泥,121℃灭菌20 min 后,加入S5中所述的鼠李糖乳杆菌MF031、植物乳杆菌MF033、酿酒酵母MF012中的一种或多种;加入总质量为硅藻泥体系质量的10wt%-20wt%,搅拌均匀,室温吸附2-6 h。
8.根据权利要求1所述的一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法,其特征在于,S6中所述的发酵菌剂的质量为发酵体系质量的1wt%-2.5wt%;所述的发酵温度为25-37℃。
9.根据权利要求1所述的一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法,其特征在于,S7中,所述的离心条件为4000rpm,15 min;所述的除菌方式为微滤,滤膜空隙为0.22um;所述的固相部分处理方法为将发酵物超声破碎 30 min。
10.一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的应用,其特征在于:将制备的生态营养液按10wt%-40wt%比例加入,分别制成爽肤水、面霜、泥膏型面膜。
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