CN111450020A - 一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法 - Google Patents

一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，包括如下步骤：(1)生产制种：将酿酒酵母、所述产朊假丝酵母分别转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中进行培养，待培养基浑浊后取出，冷藏待用；(2)菌种复合培养：称取经步骤(1)培养的菌种，并加入液体培养基中进行培养；(3)原料复合发酵：将经步骤(2)复合培养的菌种加入复合发酵物中进行发酵；(4)离心液制备：将经步骤(3)发酵后的物料用压榨机压榨出液体，离心，取上清液进行杀菌处理；(5)不同剂型的制备。本发明通过微生物发酵技术对植物的有效成分进行生物转化，并且利用特定植物原料生产具有护肤效果的含有L‑焦谷氨酸、甘露糖‑6‑磷酸成分的生物制剂。

Description

一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法
技术领域
本发明涉及护肤化妆品技术领域，尤其涉及一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法。
背景技术
产朊假丝酵母是与啤酒酵母、克鲁维酵母一起被许多国家认证为一种可作为食品添加剂的微生物，也是中国***门允许的可用于保健食品的微生物。酵母β-葡聚糖是酵母细胞壁的结构多糖，具有不同的功能特性，有利于抗菌抗炎反应；促进霉毒素的吸收；减少低密度脂蛋白中的胆固醇颗粒等作用；还具有抗癌、抗诱变、抗氧化以及促进伤口愈合、保湿的特性。
皮肤是人体最大的器官，皮肤保湿和抗氧化作用对于护肤至关重要。含有天然保湿和抗氧化功能的酵母β-葡聚糖的护肤品可以有效刺激皮肤内部天然保湿因子的自然生成，平衡外界环境刺激下的皮肤细胞的过氧化状态，减少色素生成和沉积，保护皮肤细胞活性，帮助皮肤重回平衡状态，起到修复皮肤屏障、加强皮肤深层锁水保湿机能、保持皮肤细胞年轻态的功效。
随着对酵母等有益菌的研究的深入，利用它们的发酵能力开发出发酵植物代谢产物来丰富护肤品原料的种类，为此提供了一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，通过微生物发酵技术对植物的有效成分进行生物转化，并且利用特定植物原料生产具有护肤效果的含有L-焦谷氨酸、甘露糖-6-磷酸成分的生物制剂。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：
提供一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)生产制种：将从中国普通微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae，CGMCC 2.3854)、产朊假丝酵母(Candida utilis，CGMCC2.0615)分别转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中进行培养，待培养基浑浊后取出，冷藏待用；
(2)菌种复合培养：按一定重量百分比称取经步骤(1)培养的菌种加入液体培养基中，于发酵罐搅拌均匀后进行培养；
(3)原料复合发酵：将经步骤(2)复合培养的菌种按比例加入复合发酵物中，混合均匀后补充纯净水，放入固体发酵罐搅拌均匀后培养发酵；
其中，所述复合发酵物包括以下重量百分比的组分：水飞蓟20-30％、芦荟20-30％、百里香15-30％、沙棘提取物10-20％、冰糖2-5％、纯净水0-33％；
(4)离心液制备：将经步骤(3)发酵后的物料用压榨机压榨出液体，并用管式离心机离心，取上清液进行杀菌处理，贮藏待用；
(5)不同剂型皮肤护理制剂的制备：
膏体制剂制备：称取经步骤(4)制备的离心液，加入护肤化妆品基础膏体配方中，用真空制膏机制成膏体制剂；
液体制剂制备：称取经步骤(4)制备的离心液，加入护肤水基础配方中，混合均匀后补充去离子水，搅拌使溶液重复溶解后即得液体制剂。
优选地，步骤(1)中，所述培养的具体过程为：在28-32℃条件下，180-220rpm振荡培养18-36小时；所述冷藏的具体过程为：放入2-4℃冰箱内保存。
优选地，步骤(2)中，各菌种的重量百分比为：酿酒酵母30-50％、产朊假丝酵母50-70％。
优选地，步骤(2)中，所述液体培养基包括以下重量百分比的组分：糖蜜1-5％、酵母浸粉0.1-1％、氯化钠0.1-1％、余量纯净水。
优选地，步骤(2)中，所述菌种与所述液体培养基的添加比为1：(30-120)；所述培养的具体过程为：28-40℃条件下培养20-72小时。
优选地，步骤(3)中，所述复合发酵物的制备方法为：将水飞蓟、芦荟和百里香洗净后分别通过粉碎机粉碎成半固体，再加入沙棘提取物、冰糖和纯净水混合搅拌均匀；所述菌种与所述复合发酵物的添加质量比为1：(10-50)；所述补充纯净水的纯净水占体系总质量的比为30-70％。
优选地，步骤(3)中，所述培养的具体过程为：28-40℃条件下密闭培养10-15天，且每4个小时搅拌一次。
优选地，步骤(4)中，所述杀菌处理的具体过程为：在80-100℃下杀菌10-30分钟；所述贮藏的温度为2-4℃。
优选地，步骤(5)中，膏体制剂包括以下重量百分比的组分：离心液15-30％、常见的护肤化妆品基础膏体配方70-85％；所述液体制剂包括以下重量百分比的组分：离心液35-50％、常见的护肤水基础配方50-65％。
优选地，步骤(5)中，所述常见的护肤化妆品基础膏体配方包括以下重量百分比的组分：硬脂酸7.5％、非离子乳化剂4.5％、16-18醇4.8％、环戊硅氧烷2.3％、羊毛脂5.0％、白油5.0％、甘油4.5％、1,3丁二醇3.0％、去离子水63.4％；所述常见的护肤水基础配方包括以下重量百分比的组分：柠檬酸钙3％、维生素B20.5％、维生素B50.5％、甘油4.5％、乳化剂3％、橄榄油4％、乙醇3％、去离子水81.5％。
本发明采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
本发明采用国家卫计委公告的《可用于食品的菌种名单》中的菌种，采用植物原料，进行发酵后提取而成的生物制剂，经本发明工艺处理后的发酵产物中富含L-焦谷氨酸、甘露糖-6-磷酸成分，可以起到较强的保湿功能，在皮肤中的渗透性强，作为高营养性的、易被吸收的添加剂，对皮肤起到保湿等调理作用；同时具有调节免疫***、增加伤口愈合、抗发炎等效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为本发明的限定。
需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
本发明公开了一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)生产制种：将从中国普通微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae，CGMCC 2.3854)、产朊假丝酵母(Candida utilis，CGMCC2.0615)分别转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中进行培养，待培养基浑浊后取出，冷藏待用；
(2)菌种复合培养：按一定重量百分比称取经步骤(1)培养的菌种加入液体培养基中，于发酵罐搅拌均匀后进行培养；
(3)原料复合发酵：将经步骤(2)复合培养的菌种按比例加入复合发酵物中，混合均匀后补充纯净水，放入固体发酵罐搅拌均匀后培养发酵；
其中，所述复合发酵物包括以下重量百分比的组分：水飞蓟20-30％、芦荟20-30％、百里香15-30％、沙棘提取物10-20％、冰糖2-5％、纯净水0-33％；
(4)离心液制备：将经步骤(3)发酵后的物料用压榨机压榨出液体，并用管式离心机离心，取上清液进行杀菌处理，贮藏待用；
(5)不同剂型皮肤护理制剂的制备：
膏体制剂制备：称取经步骤(4)制备的离心液，加入护肤化妆品基础膏体配方中，用真空制膏机制成膏体制剂；
液体制剂制备：称取经步骤(4)制备的离心液，加入护肤水基础配方中，混合均匀后补充去离子水，搅拌使溶液重复溶解后即得液体制剂。
作为一个优选实施例，步骤(1)中，所述培养的具体过程为：在28-32℃条件下，180-220rpm振荡培养18-36小时；所述冷藏的具体过程为：放入2-4℃冰箱内保存。
作为一个优选实施例，步骤(2)中，各菌种的重量百分比为：酿酒酵母30-50％、产朊假丝酵母50-70％。
作为一个优选实施例，步骤(2)中，所述液体培养基包括以下重量百分比的组分：糖蜜1-5％、酵母浸粉0.1-1％、氯化钠0.1-1％、余量纯净水。
作为一个优选实施例，步骤(2)中，所述菌种与所述液体培养基的添加比为1:(30-120)；所述培养的具体过程为：28-40℃条件下培养20-72小时。
作为一个优选实施例，步骤(3)中，所述复合发酵物的制备方法为：将水飞蓟、芦荟和百里香洗净后分别通过粉碎机粉碎成半固体，再加入沙棘提取物、冰糖和纯净水混合搅拌均匀；所述菌种与所述复合发酵物的添加质量比为1:(10-50)；所述补充纯净水的纯净水占体系总质量的比为30-70％。
作为一个优选实施例，步骤(3)中，所述培养的具体过程为：28-40℃条件下密闭培养10-15天，且每4个小时搅拌一次。
作为一个优选实施例，步骤(4)中，所述杀菌处理的具体过程为：在80-100℃下杀菌10-30分钟；所述贮藏的温度为2-4℃。
作为一个优选实施例，步骤(5)中，膏体制剂包括以下重量百分比的组分：离心液15-30％、常见的护肤化妆品基础膏体配方70-85％；所述液体制剂包括以下重量百分比的组分：离心液35-50％、常见的护肤水基础配方50-65％。
作为一个优选实施例，步骤(5)中，所述常见的护肤化妆品基础膏体配方包括以下重量百分比的组分：硬脂酸7.5％、非离子乳化剂4.5％、16-18醇4.8％、环戊硅氧烷2.3％、羊毛脂5.0％、白油5.0％、甘油4.5％、1,3丁二醇3.0％、去离子水63.4％；所述常见的护肤水基础配方包括以下重量百分比的组分：柠檬酸钙3％、维生素B20.5％、维生素B50.5％、甘油4.5％、乳化剂3％、橄榄油4％、乙醇3％、去离子水81.5％。
实施例1
一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)生产制种：将从中国普通微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae，CGMCC 2.3854)、产朊假丝酵母(Candida utilis，CGMCC2.0615)分别转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在28℃条件下，180rpm振荡培养32小时，待培养基浑浊后取出，放入4℃冰箱保存待用；
(2)菌种复合培养：按酿酒酵母30％、产朊假丝酵母70％的重量百分比称取经步骤(1)培养的菌种，并按1：100的比例加入液体培养基中，放入发酵罐搅拌均匀后在28℃条件下培养48小时；
其中，液体培养基包括以下重量百分比的组分：糖蜜3％、酵母浸粉0.5％、氯化钠0.5％、其它用纯净水补足重量。
(3)原料复合发酵：将水飞蓟、芦荟和百里香洗净后分别通过粉碎机粉碎成半固体，再加入沙棘提取物、冰糖和纯净水混合搅拌均匀，制得复合发酵物；将经步骤(2)复合培养的菌种按1:30的比例加入复合发酵物中，混合均匀后补充纯净水，控制水分在60％，放入固体发酵罐搅拌均匀后在30℃密闭条件下培养10天，每4个小时搅拌一次；
其中，所述复合发酵物包括以下重量百分比的组分：水飞蓟20％、芦荟20％、百里香15％、沙棘提取物10％、冰糖3％、纯净水32％。
(4)离心液制备：将经步骤(3)发酵后的物料用压榨机压榨出液体，并用管式离心机离心，取上清液在90℃条件下杀菌30分钟，并于4℃贮藏待用；
(5)液体制剂制备：称取经步骤(4)制备的离心液35％，加入65％常见的护肤水基础配方中，混合均匀后补充去离子水，搅拌使溶液重复溶解后即得液体制剂；
其中，所述常见的护肤水基础配方包括以下重量百分比的组分：柠檬酸钙3％、维生素B20.5％、维生素B50.5％、甘油4.5％、乳化剂3％、橄榄油4％、乙醇3％、去离子水81.5％。
实施例2
一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)生产制种：将从中国普通微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae，CGMCC 2.3854)、产朊假丝酵母(Candida utilis，CGMCC2.0615)分别转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中，在28℃条件下，180rpm振荡培养32小时，待培养基浑浊后取出，放入4℃冰箱保存待用；
(2)菌种复合培养：按酿酒酵母45％、产朊假丝酵母55％的重量百分比称取经步骤(1)培养的菌种，并按1:30的比例加入液体培养基中，放入发酵罐搅拌均匀后在32℃培养72小时；
其中，液体培养基包括以下重量百分比的组分：糖蜜5％、酵母浸粉1％、氯化钠0.5％、其它用纯净水补足重量。
(3)原料复合发酵：将水飞蓟、芦荟和百里香洗净后分别通过粉碎机粉碎成半固体，再加入沙棘提取物、冰糖和纯净水混合搅拌均匀，制得复合发酵物；将经步骤(2)复合培养的菌种按1：10的比例加入复合发酵物中，混合均匀后补充纯净水，控制水分在35％，放入固体发酵罐搅拌均匀后在32℃密闭条件下培养12天，每4个小时搅拌一次；
其中，所述复合发酵物包括以下重量百分比的组分：水飞蓟25％、芦荟25％、百里香20％、沙棘提取物20％、冰糖5％、纯净水5％。
(4)离心液制备：将经步骤(3)发酵后的物料用压榨机压榨出液体，并用管式离心机离心，取上清液在100℃条件下杀菌20分钟，并于4℃贮藏待用；
(5)膏体制剂制备：称取经步骤(4)制备的离心液30％，加入70％常见的护肤化妆品基础膏体配方中，用真空制膏机制成膏体制剂；
其中，所述常见的护肤化妆品基础膏体配方包括以下重量百分比的组分：硬脂酸7.5％、非离子乳化剂4.5％、16-18醇4.8％、环戊硅氧烷2.3％、羊毛脂5.0％、白油5.0％、甘油4.5％、1,3丁二醇3.0％、去离子水63.4％。
应用例
样品处理：
发酵前样：准确称取10.01g发酵前料(含水53％)，加入90ml蒸馏水，封口煮沸30min，冷却后，加入180ml乙醇，超声30min，离心后取上清液作为发酵前样；
发酵后样：准确称取10.02g发酵后料(含水60％)，加入90ml蒸馏水，封口煮沸30min，冷却后，加入180ml乙醇，超声30min，离心后取上清液作为发酵后样；
1、样品中L-焦谷氨酸的检测：以L-焦谷氨酸的标准品为对照，HPLC测定样品中的含量，色谱柱：YMC-Pack Pro C18，5μ，4.6*250mm；柱温：室温；进样量：10μl；检测波长：205nm和370nm；流动相：磷酸二氢钾、磷酸二氢铵和乙腈(9：1)，等梯度洗脱；洗脱流速：1ml/min。检测结果如表1所示：
表1样品中L-焦谷氨酸的含量(mg/g)：
样品 L-焦谷氨酸
发酵前 未检出
发酵后 22.8
2、样品中甘露糖-6-磷酸的检测：以Ion-PacAG18离子交换柱(50mm×4mm)为保护柱，在Ion-pacAS18离子交换色谱柱(250mm×4mm)上分离，以25mmol/L氢氧化钾溶液为流动相；等度淋洗；流速1.0mL/min；安培检测器和电导检测器串联检测，外标法定量。采用安培检测器检测时，进样量为25μL，6-磷酸甘露糖的线性范围为0.06-10.00mg/L。检测结果如表2所示：
表2样品中甘露糖-6-磷酸的含量(mg/g)：
样品 甘露糖-6-磷酸
发酵前 未检出
发酵后 31.8
由表1和表2中数据可见，水飞蓟、芦荟、百里香、沙棘等混合植物原料经过酵母菌复合菌的复合发酵，样品中产生了新的成分，该成分有助于护肤作用。
以上所述仅为本发明较佳的实施例，并非因此限制本发明的实施方式及保护范围，对于本领域技术人员而言，应当能够意识到凡运用本发明说明书内容所作出的等同替换和显而易见的变化所得到的方案，均应当包含在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)生产制种：将从中国普通微生物菌种保藏管理中心购买的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae，CGMCC 2.3854)、产朊假丝酵母(Candida utilis，CGMCC2.0615)分别转接入马铃薯液体培养基的锥形瓶中进行培养，待培养基浑浊后取出，冷藏待用；
(2)菌种复合培养：按一定重量百分比称取经步骤(1)培养的菌种加入液体培养基中，于发酵罐搅拌均匀后进行培养；
(3)原料复合发酵：将经步骤(2)复合培养的菌种按比例加入复合发酵物中，混合均匀后补充纯净水，放入固体发酵罐搅拌均匀后培养发酵；
其中，所述复合发酵物包括以下重量百分比的组分：水飞蓟20-30％、芦荟20-30％、百里香15-30％、沙棘提取物10-20％、冰糖2-5％、纯净水0-33％；
(4)离心液制备：将经步骤(3)发酵后的物料用压榨机压榨出液体，并用管式离心机离心，取上清液进行杀菌处理，贮藏待用；
(5)不同剂型皮肤护理制剂的制备：
膏体制剂制备：称取经步骤(4)制备的离心液，加入护肤化妆品基础膏体配方中，用真空制膏机制成膏体制剂；
液体制剂制备：称取经步骤(4)制备的离心液，加入护肤水基础配方中，混合均匀后补充去离子水，搅拌使溶液重复溶解后即得液体制剂。
2.根据权利要求1所述的利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述培养的具体过程为：在28-32℃条件下，180-220rpm振荡培养18-36小时；所述冷藏的具体过程为：放入2-4℃冰箱内保存。
3.根据权利要求1所述的利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，各菌种的重量百分比为：酿酒酵母30-50％、产朊假丝酵母50-70％。
4.根据权利要求1所述的利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述液体培养基包括以下重量百分比的组分：糖蜜1-5％、酵母浸粉0.1-1％、氯化钠0.1-1％、余量纯净水。
5.根据权利要求1所述的利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述菌种与所述液体培养基的添加比为1：(30-120)；所述培养的具体过程为：28-40℃条件下培养20-72小时。
6.根据权利要求1所述的利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述复合发酵物的制备方法为：将水飞蓟、芦荟和百里香洗净后分别通过粉碎机粉碎成半固体，再加入沙棘提取物、冰糖和纯净水混合搅拌均匀；所述菌种与所述复合发酵物的添加质量比为1：(10-50)；所述补充纯净水的纯净水占体系总质量的比为30-70％。
7.根据权利要求1所述的利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述培养的具体过程为：28-40℃条件下密闭培养10-15天，且每4个小时搅拌一次。
8.根据权利要求1所述的利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述杀菌处理的具体过程为：在80-100℃下杀菌10-30分钟；所述贮藏的温度为2-4℃。
9.根据权利要求1所述的利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，膏体制剂包括以下重量百分比的组分：离心液15-30％、常见的护肤化妆品基础膏体配方70-85％；所述液体制剂包括以下重量百分比的组分：离心液35-50％、常见的护肤水基础配方50-65％。
10.根据权利要求1所述的利用酵母菌发酵产物制作皮肤健康护理制剂的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述常见的护肤化妆品基础膏体配方包括以下重量百分比的组分：硬脂酸7.5％、非离子乳化剂4.5％、16-18醇4.8％、环戊硅氧烷2.3％、羊毛脂5.0％、白油5.0％、甘油4.5％、1,3丁二醇3.0％、去离子水63.4％；所述常见的护肤水基础配方包括以下重量百分比的组分：柠檬酸钙3％、维生素B20.5％、维生素B50.5％、甘油4.5％、乳化剂3％、橄榄油4％、乙醇3％、去离子水81.5％。
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