CN110419623A - 一种犬用高活性益生菌片剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种犬用高活性益生菌片剂，包括以下重量份数的原辅料：益生菌1‑5份，益生元1‑5份，葡萄糖15‑20份，改性膳食纤维25‑35份，羊奶粉20‑25份，酶解鸡肉粉25‑30份，微晶纤维素5‑10份，增味剂1‑2份，硬脂酸镁0.5‑1份，海藻糖0.1‑0.5份，VC钠盐0.01‑0.1份。进一步的，本发明还公开了一种犬用高活性益生菌片剂制备方法，本发明提供了一种犬用消化力极强、高活性益生菌片剂，为宠物肠道提供一个健康的微生态环境。
Description
技术领域
本发明属于犬用保健品领域，尤其涉及一种犬用高活性益生菌片剂及其制备方法。
背景技术
益生菌（Probiotics）是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于机体肠道、生殖***内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。拥有健康体质，从健康肠道开始。肠道健康是犬保持健康活力的基础。肠道的功能远不止是消化吃进去的食物。犬肠道中的微生物种群对犬只健康会产生重要影响。通过改善肠道健康来加强免疫***。研究表明，大部分免疫细胞生活在肠道中，因此肠道健康对提升犬免自身疫力，抵御疾病至关重要。
犬肠道微生物的研究较早，随着分子生物学技术发展的成熟，研究学者发现犬肠道内存在着大量的不同种类的微生物，而且不同品种犬的肠道微生物组成也不同，即使是同一品种犬，不同肠段的微生物组成差异性也很大，其中乳酸杆菌、双歧杆菌、芽孢杆菌、肠球菌等是犬肠道内分布较为广泛的几种益生菌。
益生菌菌种的选择，是益生菌产品质量的关键，被誉为产品的灵魂。乳酸杆菌、双歧杆菌、芽孢杆菌、肠球菌、酵母菌等益生菌常作为犬用微生态制剂的生产菌株。由于双歧杆菌为严格的厌氧菌，培养条件要求高，产业化生产难度大，在畜牧业上应用较少，因此犬源益生菌的使用主要集中在乳酸杆菌、芽孢杆菌和肠球菌上。选择共生性益生菌进入体内，活性高，易增殖，专业益生菌活着抵达肠道，精确把控苏醒时间，有效作用于肠道。
随着饲养宠物犬的人越来越多，宠物需要的饲料要求也越来越精细化。然而，现在宠物饲料原材料基本相同，主要成分类似，长期食用的犬粮、零食等为加工食品，各种食品添加剂的摄入会持续破坏犬胃肠道菌群平衡，容易产生便秘、拉稀、消化不良、胃肠炎等肠胃疾病。生病时一般上宠物医院，但是长期服用药物会造成依赖性，同时药物是化学合成的，存在着或多或少的副作用，而且宠物一般比较抗拒吃药，***。此外，目前也未有可供宠物长期食用的饲料添加剂以解决现有技术的问题。针对这一问题，饲喂宠物专用的益生菌类保健产品无疑是一种更好的选择。
目前，关于犬用益生菌片剂的研究较少，本发明以葡萄糖、酶解改性膳食纤维、微晶纤维素、羊奶粉、酶解鸡肉粉、益生元、增味剂等辅料为主要原料制备颗粒，再混合活性成份益生菌冻干粉剂及硬脂酸镁进行压片，最终得到益生菌片剂，该片剂的活菌数能达到20亿cfu/g以上。目前，市售的宠物益生菌制剂主要为固体分散剂或胶囊剂，其中含有的益生菌菌粉大多是由单一菌种的菌粉和辅料经过复配后加工而成，菌粉经过多次加工后，菌种活力下降，不足以达到预期的保健效果。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术宠物益生菌制剂大多是由单一菌种的菌粉和辅料经过复配后加工而成，菌粉经过多次加工后，菌种活力下降，不足以达到预期的保健效果。提供一种犬用高活性益生菌片剂及其制备方法，该益生菌片剂活菌存活率高，饲喂方便，易于吸收，保健效果明显，并且本发明所用的干法造粒技术和独特的包被技术，具有成本低、出料速度快、工艺条件稳定、重现性好、益生菌存活率高等优点，适合规模化生产。为实现上述发明目的，本发明的技术方案为：
一种犬用高活性益生菌片剂，包括以下重量份数的原辅料：益生菌1-5份，益生元1-5份，葡萄糖15-20份，改性膳食纤维25-35份，羊奶粉20-25份，酶解鸡肉粉25-30份，微晶纤维素5-10份，增味剂1-2份，硬脂酸镁0.5-1份，海藻糖0.2-0.5份，VC钠盐0.2-0.5份。
进一步的，所述益生菌为益生菌冻干粉剂。
进一步的，所述益生菌冻干粉剂包括：嗜酸乳杆菌（Lactobacillusacidophilus)、枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）和粪肠球菌（Enterococcusfaecalis）其中，所述嗜酸乳杆菌的活菌含量大于200亿cfu/g，枯草芽孢杆菌活菌含量大于100亿cfu/g，粪肠球菌活菌含量大于200亿cfu/g，所述益生菌冻干粉剂的活菌含量为100亿cfu/g~200亿cfu/g。
进一步的，本发明还公开了一种益生菌冻干粉剂的制备方法，包括如下步骤：
1）活化保存的各斜面菌种，分别摇瓶培养：嗜酸乳杆菌和粪肠球菌直接用灭菌的鲜牛乳培养，30-37℃培养48-50小时，枯草芽孢杆菌用可溶性淀粉培养基培养，pH7.0~7.5，100-140℃高压灭菌20-30分钟；
2）嗜酸乳酸菌、粪肠球菌和枯草芽孢杆菌的一级液体均以每罐20L扩大培养：接种量均为10%-20%；
3）嗜酸乳酸菌、粪肠球菌和枯草芽孢杆菌的二级液体均以每罐200L扩大培养：接种量均为10%-20%；
4）将上述各培养液经离心收集获得菌体，加入0.1%-1%的海藻糖及0.01%-0.1%的VC钠盐，所述百分比为收集获得的湿菌体质量百分比，冻干成菌粉，在冻干的菌粉中加入1%-2%的益生元，所述百分比为冻干的菌粉质量百分比，混合均匀即得益生菌冻干粉剂成品。
进一步的，所述改性膳食纤维由菊粉、苹果纤维、燕麦纤维及麸皮中的一种或多种经生物酶酶解制得，该改性膳食纤维的制备方法包括如下步骤：
1）将菊粉、苹果纤维、燕麦纤维及麸皮按质量比5-8：6-9：7-10：2-4均匀混合，加入以该混合物质量为2-4倍的水，室温200-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min；
2）用乳酸调节pH值为5.0-6.5，再加入质量分数为步骤1）中该混合物0.1-0.3%的生物酶，于45-55℃酶解20-48min；
3）酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3μm即得改性膳食纤维。
进一步的，所述生物酶为木聚糖酶、纤维素酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比4-7：3-5：2-4：1-3：1-3的混合酶。
本发明还公开了一种犬用高活性益生菌片剂制备方法，包括如下步骤：
1）配制辅料：按重量份数进行配制，葡萄糖15-20份、改性膳食纤维25-35份，羊奶粉20-25份，酶解鸡肉粉25-30份，微晶纤维素5-10份，增味剂1-2份，硬脂酸镁0.5-1份；
2）干法造粒：将辅料混合后加入干法造粒机造粒，收集20-120目的颗粒用于原料混合；
3）原料混合：将步骤2）中收集的20-120目颗粒、制备好的益生菌冻干粉剂及硬脂酸镁按10-100：1：0.01-1的质量比混合，混合后得到可直接压片的原料；
4）压片：将混合的原料投入压片机压片，调节压力为20-40kN，得到益生菌片剂。
本发明中益生元为低聚果糖：低聚果糖又称蔗果低聚糖，是由1～3个果糖基通过β(2—1)糖苷键与蔗糖中的果糖基结合生成的蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖等的混合物。100克干重菊芋中约有60—70克菊粉，菊粉是通过线性的β—2，1—糖苷链连接的果聚糖，其末端为一蔗糖基。故以菊芋粉为原料用菊糖内切酶水解作用，经精制最终可得低聚果糖浆。
低聚果糖的作用：
1．低聚果糖不易被人体吸收，热量值很低，不会导致肥胖，可以生产减肥食品、低卡路里食品；低聚果糖甜度低，可生产无糖或低糖食品，深受人们的喜爱。
2．低聚果糖具有良好的生理功能，生产的功能性保健食品可降血压、健肠助消化、改善胃肠道功能。
3．低聚果糖具有明显的抑制淀粉回生的作用，这一特点用于食品时非常突出，利用低聚果糖生产的饼干、烘焙食品色泽美观、松软可口、组织均匀、保存性佳，可大大延长存放期。
4．利用低聚果糖的水溶性膳食纤维性质，可开发新型功能保健酒，易消化吸收，具有滋补营养性，强化体质耐力，明显有益人体健康。
5．低聚果糖在一25～5摄氏度的低温下贮存仍很稳定，可以应用在冰淇淋之类的冷食中。
6．低聚果糖应用于奶粉，对排毒洁肠、双向调节微生态平衡很有作用。
7．低聚果糖用于乳酸菌饮料，解决人们乳糖耐受性问题，增加水溶性可吸收钙的含量，使乳制品更易消化吸收。
8．低聚果糖作为益生素，用于动物饲料生产，只消灭有害菌，不杀死有益菌，对动物安全无毒性。
9．低聚果糖添加于化妆品，可以抑制脸部皮肤表面有害菌的生长，并能有效减缓色素沉淀，淡化并消除色斑，对皮肤保健有良好的作用。
l0．低聚果糖可与各地特产植物(如绞股蓝、芦荟等)搭配开发生产国际流行的第三代保健品。
与现有技术相比，本发明具有的有益效果：
1）益生菌冻干粉剂采用目前研究公认的安全高效的活性菌种组合（乳杆菌+肠球菌+芽孢杆菌），好氧型和厌氧型的菌种配合，配伍合理，每片活性保证在10亿cfu/g以上，这样能够保证足够数量的活菌到达犬肠道定植，以至于发挥其作用；
2）用生物酶将膳食纤维中的大分子组分酶解成可溶性小分子化合物，同时酶解作用专性强、可溶性膳食纤维纯度高，能够为益生菌带来丰富的食物，这样的话益生菌在肠道的生长及繁殖能力增加，越来越多的益生菌能够活着定植在肠道中，肠道微生态环境得到改善。
3）采用片剂的饲喂方式，便于犬肠道吸收，另外干法造粒技术具有成本低、出料速度快、工艺条件稳定、重现性好、益生菌存活率高等优点。
具体实施方式
以下通过具体的实施例来进一步说明本发明的内容，但应该理解，具体实施例并不以任何方式限制本发明。
实施例1
一、按下列步骤进行益生菌冻干粉剂的制备：
1）将4℃保存的各菌种斜面活化，分别摇瓶培养（200ml），枯草芽孢杆菌用可溶性淀粉培养基培养，具体配方如下：可溶性淀粉20g、KNO3 1g、NACl 0.5g、K2HPO4 0.5g、MgSO4.7H2O0.5g、FeSO4 0.01g、琼脂15-20g、蒸馏水1000mL；pH 7.3、121℃高压灭菌20分钟；嗜酸乳杆菌和粪肠球菌直接用灭菌鲜牛乳培养；枯草芽孢杆菌在30℃下培养24小时，嗜酸乳杆菌和粪肠球菌在30℃下培养48小时。
2）一级液体扩大培养：枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和粪肠球菌分别单独扩大培养，培养基和培养条件同上（20L罐）：接种量15%；
3）二级液体分别扩大培养（200L罐），接种量15%；
4）将上述各培养液经离心收集获得菌体，加入海藻糖（添加比例0.1%）及VC钠盐（添加比例0.01%），冻干成菌粉，在冻干的菌粉中加入益生元（低聚果糖）（添加比例1%），混合均匀即得益生菌冻干粉剂成品。
经实验室微生物学检测益生菌冻干粉剂的活性为150亿cfu/g左右。
二、按下列步骤进行酶解膳食纤维的制备：
1）将菊粉、苹果纤维、燕麦纤维及麸皮按质量比6:8:8:4均匀混合，加入该混合物质量的4倍的水，室温条件下以300W、40KHz条件超声提取15min；
2）用乳酸调节混合液pH值为5.0，加入混合物质量0.3%的生物酶，于45℃条件下酶解48min，所用生物酶为木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶、单宁酶的混合物；
3）酶解液经减压浓缩、冷冻干燥后低温粉碎至粒径为0.1-0.3μm即得改性膳食纤维；
三、接下来按以下份量配比制备：
1）配制辅料：以下组分按重量份进行配制，其中葡萄糖15份、改性膳食纤维30份，羊奶粉20份，酶解鸡肉粉25份，微晶纤维素5份，增味剂1份；
2）干法造粒：将辅料混合后加入干法造粒机造粒，收集20-120目的颗粒用于原料混合；
3）原料混合：将步骤2）中收集的20-120目颗粒、之前制备的益生菌冻干粉剂及硬脂酸镁按 100:1:0.02的重量比混合，混合后得到可直接压片的原料。
4）压片：将混合的原料投入压片机压片,调节压力为35kn，得到益生菌片剂。
由该工艺制作的益生菌片剂，片剂边缘有粗糙感，有轻微掉粉现象，掉粉率在1%左右，另外经实验室微生物学实验检测活性在15亿cfu/g左右 ，不过该片剂适口性好，给犬连续饲喂约20天后，犬身体健康，精力充沛，之前的食欲不振及腹泻现象减退。
实施例2
一、按下列步骤进行益生菌冻干粉剂的制备：
1）将4℃保存的各菌种斜面活化，分别摇瓶培养（200ml），枯草芽孢杆菌用可溶性淀粉培养基培养，具体配方如下：可溶性淀粉20g、KNO3 1g、NACl 0.5g、K2HPO4 0.5g、MgSO4.7H2O0.5g、FeSO4 0.01g、琼脂15-20g、蒸馏水1000mL；pH 7.3、121℃高压灭菌20分钟；嗜酸乳杆菌和粪肠球菌直接用灭菌鲜牛乳培养；枯草芽孢杆菌在37℃下培养48小时，嗜酸乳杆菌和粪肠球菌在37℃下培养48小时。
2）一级液体扩大培养：枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和粪肠球菌分别单独扩大培养，培养基和培养条件同上（20L罐）：接种量20%；
3）二级液体分别扩大培养（200L罐），接种量20%；
4）将上述各培养液经离心收集获得菌体，按比例加入海藻糖（添加比例0.5%）及VC钠盐（添加比例0.05%），冻干成菌粉，在冻干的菌粉中加入益生元（低聚果糖）（添加比例2%），混合均匀即得益生菌冻干粉剂成品。
经实验室微生物学检测益生菌冻干粉剂的活性为200亿cfu/g左右。
二、按下列步骤进行酶解膳食纤维的制备：
1）将菊粉、苹果纤维、燕麦纤维及麸皮按质量比5:6:7:3均匀混合，加入该混合物质量的3倍的水，室温条件下以300W、40KHz条件超声提取15min；
2）用乳酸调节混合液pH值为6.0，加入混合物质量0.2%的生物酶，于50℃条件下酶解40min，所用生物酶为木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶、单宁酶的混合物；
3）酶解液经减压浓缩、冷冻干燥后低温粉碎至粒径为0.1-0.3μm即得改性膳食纤维；
三、接下来按以下份量配比制备：
1）配制辅料：以下组分按重量份进行配制，其中葡萄糖20份、改性膳食纤维25份，羊奶粉20份，酶解鸡肉粉25份，微晶纤维素5份，增味剂1份；
2）干法造粒：将辅料混合后加入干法造粒机造粒，收集20-120目的颗粒用于原料混合；
3）原料混合：将所制得的所述颗粒、益生菌冻干粉剂及硬脂酸镁按90:1:0.05的重量比混合，其中益生菌冻干粉剂中嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌及粪肠球菌粉剂的比例为1:2:1，混合后得到可直接压片的原料。
4）压片：将混合的原料投入压片机压片,调节压力为40kn，得到益生菌片剂。
由该工艺制作的益生菌片剂，片剂边缘光滑细腻，无掉粉现象，脆碎度合理，另外经实验室微生物学实验检测活性在20亿cfu/g左右，同时适口性好，给犬连续饲喂约20天后，犬身体健康，精力充沛，之前的食欲不振及腹泻现象减退。
Claims (8)
1.一种犬用高活性益生菌片剂，其特征在于，包括以下重量份数的原辅料：益生菌1-5份，益生元1-5份，葡萄糖15-20份，改性膳食纤维25-35份，羊奶粉20-25份，酶解鸡肉粉25-30份，微晶纤维素5-10份，增味剂1-2份，硬脂酸镁0.5-1份，海藻糖0.2-0.5份，VC钠盐0.2-0.5份。
2.如权利要求1所述的一种犬用高活性益生菌片剂，其特征在于，所述益生菌为益生菌冻干粉剂。
3.如权利要求2所述的一种犬用高活性益生菌片剂，其特征在于，所述益生菌冻干粉剂包括：嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和粪肠球菌，所述嗜酸乳杆菌的活菌含量大于200亿cfu/g，枯草芽孢杆菌活菌含量大于100亿cfu/g，粪肠球菌活菌含量大于200亿cfu/g，所述益生菌冻干粉剂的活菌含量为100亿cfu/g~200亿cfu/g。
4.一种如权利要求3所述的益生菌冻干粉剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1）活化保存的各斜面菌种，分别摇瓶培养：嗜酸乳杆菌和粪肠球菌直接用灭菌的鲜牛乳培养，30-37℃培养48-50小时，枯草芽孢杆菌用可溶性淀粉培养基培养，pH7.0~7.5，100-140℃高压灭菌20-30分钟；
2）嗜酸乳酸菌、粪肠球菌和枯草芽孢杆菌的一级液体均以每罐20L扩大培养：接种量均为10%-20%；
3）嗜酸乳酸菌、粪肠球菌和枯草芽孢杆菌的二级液体均以每罐200L扩大培养：接种量均为10%-20%；
4）将上述各培养液经离心收集获得菌体，加入0.1%-1%的海藻糖及0.01%-0.1%的VC钠盐，所述百分比为收集获得的湿菌体质量百分比，冻干成菌粉，在冻干的菌粉中加入1%-2%的益生元，所述百分比为冻干的菌粉质量百分比，混合均匀即得益生菌冻干粉剂成品。
5.如权利要求1所述的一种犬用高活性益生菌片剂，其特征在于，所述改性膳食纤维由菊粉、苹果纤维、燕麦纤维及麸皮中的一种或多种经生物酶酶解制得。
6.一种如权利要求5所述的改性膳食纤维的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1）将菊粉、苹果纤维、燕麦纤维及麸皮按质量比5-8：6-9：7-10：2-4均匀混合，加入以该混合物质量为2-4倍的水，室温200-300W、35-40KHz条件超声提取10-15min；
2）用乳酸调节pH值为5.0-6.5，再加入质量分数为步骤1）中该混合物0.1-0.3%的生物酶，于45-55℃酶解20-48min；
3）酶解液减压浓缩、冷冻干燥、低温粉碎至粒径为0.1-0.3μm即得改性膳食纤维。
7.如权利要求6所述的改性膳食纤维的制备方法，其特征在于，所述生物酶为木聚糖酶、纤维素酶、漆酶、果胶酶、单宁酶按质量比4-7：3-5：2-4：1-3：1-3的混合酶。
8.一种如权利要求1-7任一项所述的犬用高活性益生菌片剂制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1）配制辅料：按重量份数进行配制，葡萄糖15-20份、改性膳食纤维25-35份，羊奶粉20-25份，酶解鸡肉粉25-30份，微晶纤维素5-10份，增味剂1-2份，硬脂酸镁0.5-1份；
2）干法造粒：将辅料混合后加入干法造粒机造粒，收集20-120目的颗粒用于原料混合；
3）原料混合：将步骤2）中收集的20-120目颗粒、制备好的益生菌冻干粉剂及硬脂酸镁按10-100：1：0.01-1的质量比混合，混合后得到可直接压片的原料；
4）压片：将混合的原料投入压片机压片，调节压力为20-40kN，得到益生菌片剂。
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