CN110114344B - 新型嘧啶化合物及其制备方法，以及含有该化合物作为预防或治疗癌症和炎症性疾病的活性成分的药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及新型嘧啶化合物其制备方法，以及含有该化合物作为预防或治疗癌症和炎症性疾病的活性成分的药物组合物。本发明的新型嘧啶化合物显著抑制DRAK活性，而DRAK能够抑制TGF‑β的信号***，已知TGF‑β抑制癌症生长，因此新型嘧啶化合物可用作预防或治疗癌症的药物组合物，可用作预防或治疗炎性疾病的药物组合物。

Description

新型嘧啶化合物及其制备方法，以及含有该化合物作为预防 或治疗癌症和炎症性疾病的活性成分的药物组合物
技术领域
本发明涉及一种新型嘧啶化合物及其制备方法，以及含有该化合物作为预防或治疗癌症和炎症性疾病的活性成分的药物组合物。
背景技术
TGF-β(转化生长因子-β)是一种细胞因子，调节各种体内生理过程，如细胞增殖、分化、凋亡、迁移、细胞外基质(ECM)的产生、血管生成和发育等。活性TGF-β是25kDa二聚体的形式。一旦细胞分泌这种细胞因子并被激活，它就会与细胞膜上的丝氨酸/苏氨酸受体激酶结合，从而传递信号。细胞膜上的TGF-β受体分为I型和II型。当受体与TGF-β结合时，两种类型的受体形成异四聚体复合物，并且一直处于活动状态的II型受体磷酸化I型受体，激活激酶。
在由TGF-β介导的信号转导中，将细胞外信号传递到细胞核中的介质是一种称为Smad的转录因子。由II型受体磷酸化的I型受体对Smad进行磷酸化并激活。磷酸化的Smad蛋白进入细胞核并与其中的转录因子协同调节各种基因的表达(Masque J.Seoane J，WottonD.，Gene Dev，19：2783-2810,2005)。
对TGF-β的细胞应答随细胞类型和刺激条件例如促进或抑制增殖、细胞死亡和分化等而变化。属于TGF-β家族的细胞因子使用各种I型和II型受体。目前为止，已经识别了7种称为ALK(激活素受体样激酶)的I型受体，并识别了5种II型受体。各种类型的细胞中，TGF-β使用ALK5和TR-2(睾丸受体-2)受体。
已识别出8种Smad蛋白，按其功能分为3组，例如受体活化型Smad(R-Smad，Smad1、Smad2、Smad3、Smad5和Smad8)、共同通路型Smad(Co-Smad，Smad4)和抑制性Smad(I-Smad，Smad6和Smad 7)。通常，TGF-β/激活素/Nodal组使用Smad 2和Smad 3，BMP/GDF/MIS组使用R-Smad的Smad1、Smad5和Smad8。当配体结合时，I型受体直接磷酸化R-Smad羧基末端的SSXS基序，磷酸化的R-Smad与Smad4结合，Smad4是共同通路型Smad，进入细胞核并与DNA上的Smad结合元件结合(SBE)。SBE经常成为其他转录因子的结合位点，表明Smad蛋白与其他转录因子结合并与它们配合以调节基因表达。与R-Smad和Co-Smad不同，I-Smad(Smad6、7)不具有被I型受体磷酸化并抑制TGF-β信号传导的羧基末端。最广为人知的对TGF-β的细胞响应是细胞生长停滞。TGF-β诱导上皮细胞、内皮细胞、血细胞和神经元的生长停滞。TGF-β的刺激诱导细胞周期的任何阶段的信号转导，但诱导G1细胞周期的停滞。
上皮细胞中TGF-β的刺激诱导细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂如p21Cip1/WAF1和p151nk4b的转录，从而激活抗增殖反应并诱导G1细胞周期停滞。另外，TGF-β抑制生长因子和降解抑制剂ld1、ld2和ld3的转录。此外，已知TGF-β诱导各种细胞死亡响应。
如上所述，TGF-β及其信号转导共同通路型Smad不仅在诸如细胞生长、发育和分化的生理功能中发挥重要作用，而且在癌症和纤维化等各种疾病的发展和进展中起重要作用。因此，已经积极地进行了用于调节信号转导的活性***的研究及其筛选方法。
另一方面，蛋白激酶是一种光合转移酶，它是诱导丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸的羟基磷酸化的催化酶。在信号转导***中，受体酪氨酸激酶在细胞生长和增殖中起重要作用，但当由于基因过表达、基因突变和基因扩增等各种原因而异常激活时，可能导致各种疾病，正因如此，其一直是治疗药物开发的主要目标。
DRAK(死亡相关蛋白激酶相关凋亡激酶)是参与TGF-β信号转导的蛋白质，通过形成同源二聚体作为丝氨酸/苏氨酸激酶而变得活跃。
如上所述，DRAK1和DRAK2介导的TGF-β参与基本细胞功能，例如细胞增殖、分化、迁移和凋亡。TGF-β配体通过与I型和II型TGF-β受体、丝氨酸/苏氨酸激酶结合来传递信号，并通过使用I型TGF-β受体底物Smad 2和Smad 3作为介体，激活参与细胞生长抑制的TGF-β特异性基因的表达。此时，为了通过TGF-β信号转导***维持细胞的稳态，Smad6和Smad7蛋白在抑制TGF-β信号传导中起作用。TGF-β信号可以抑制细胞生长，并抑制肿瘤。
与正常细胞不同，癌细胞显示出对TGF-β的抗性，这似乎归因于负调节因子如Smad7、TMEPA I和FKBP12的过度表达，已知其参与抑制/负反馈环以控制TGF-β/Smads信号转导通路。
为了解TGF-β相关疾病，除了已知的TGF-β信号转导***的负调节因子外，有必要开发一种新型调节剂。
在最近的细胞报告(Cell Report)的论文中，据报道DRAK2(死亡相关蛋白激酶相关细胞凋亡激酶2)是一种参与T细胞活化和自身免疫疾病的丝氨酸/苏氨酸激酶，与I型TGF-β受体结合，在通过使用酵母双杂交***鉴定与TGF-β受体结合的蛋白质的过程中证实了这一点。还证实了DRAK2通过与上皮细胞癌中的I型TGF-β受体结合而消极抑制TGF-β/Smads信号传导，从而干预TGF-β的癌形成的抑制能力。
DRAK1和DRAK2蛋白的功能主要针对免疫***疾病，但提出了在更多种组织中研究的必要性。特别地，这些作为TGF-β信号传导的新拮抗剂起作用的蛋白质可以是开发TGF-β相关疾病的治疗剂的有希望的靶标。
因此，本申请的发明人尝试开发具有DRAK活性抑制效果的化合物。结果，本申请的发明人证实，本发明的嘧啶化合物及其药学上可接受的盐可用作DRAK抑制剂，因此可用作癌症和炎性疾病的预防或治疗剂，从而完成本发明。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种新型嘧啶化合物或其药学上可接受的盐。
本发明的另一个目的是提供一种制备所述新型嘧啶化合物的方法。
本发明的另一个目的是提供一种药物组合物，包含所述新型嘧啶化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗癌症的活性成分。
本发明的另一个目的是提供一种药物组合物，包含所述新型嘧啶化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗炎性疾病的活性成分。
本发明的另一个目的是提供一种保健功能食品，包含所述新型嘧啶化合物或其药学上可接受的盐作为预防或改善癌症的活性成分。
为了实现上述目的，本发明提供一种通式1表示的化合物，或其药学可接受的盐：
[通式1]
Figure BDA0002107558360000021
通式1中，
n是1或2的整数；
R1是-H、卤素或C1-10直链或支链烷基；
R2是-H或卤素；
R3是-H、卤素、C1-10直链或支链烷基、C1-10直链或支链烷氧基、
Figure BDA0002107558360000031
其与R4和每个相邻的碳连接形成
Figure BDA0002107558360000032
和
R4是-H、卤素、未被卤素取代的C1-10直链或支链烷基或被一个或多个卤素取代的C1-10直链或支链烷基。
本发明还提供了一种制备所述通式1表示的化合物的方法，包括以下步骤：通过使通式2表示的化合物与通式3表示的化合物反应制备通式4表示的化合物(步骤1)；通过使上述步骤1中制备的通式4表示的化合物与通式5表示的化合物在酸的存在下反应，制备通式1表示的化合物(步骤2)，如下反应式1所示。
反应式1
Figure BDA0002107558360000033
在反应式1中，
n、R1、R2、R3和R4各自独立地如在通式1中所限定的。
此外，本发明提供了一种药物组合物，包含由上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗癌症的活性成分。
本发明还提供一种药物组合物，包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗炎性疾病的活性成分。
本发明还提供一种保健功能食品，其包含上通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或改善癌症的活性成分。
本发明还提供一种预防或治疗癌症的方法，包括以下步骤：给需要的受试者服用包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物或保健功能食品。
本发明还提供了包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗癌症的活性成分的药物组合物或保健功能食品的用途。
本发明还提供了一种预防或治疗炎性疾病的方法，包括如下步骤：给需要的受试者服用包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物或保健功能食品。
此外，本发明提供了包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗炎性疾病的活性成分的所述药物组合物或所述保健功能食品的用途。
有益效果
本发明的新型嘧啶化合物显著抑制DRAK的活性，已知DRAK用于干扰能够抑制癌症生长中的TGF-β信号转导***。因此，本发明的新型嘧啶化合物可以用作预防或治疗癌症和炎性疾病的药物组合物。
具体实施方式
下面详细介绍本发明。
本发明提供了一种通式1表示的化合物，或其药学可接受的盐：
[通式1]
Figure BDA0002107558360000041
通式1中，
n是1或2的整数；
R1是-H、卤素或C1-10直链或支链烷基；
R2是-H或卤素；
R3是-H、卤素、C1-10直链或支链烷基、C1-10直链或支链烷氧基、
Figure BDA0002107558360000042
其与R4和每个相邻的碳连接形成
Figure BDA0002107558360000043
和
R4是-H、卤素、未被卤素取代的C1-10直链或支链烷基或被一个或多个卤素取代的C1-10直链或支链烷基。
优选地，
n是1或2的整数；
R1是-H、卤素或C1-8直链或支链烷基；
R2是-H或卤素；
R3是-H、卤素、C1-8直链或支链烷基、C1-8直链或支链烷氧基
Figure BDA0002107558360000051
其与R4和每个相邻的碳连接形成
Figure BDA0002107558360000052
和
R4是-H、卤素、未被卤素取代的C1-8直链或支链烷基或被一个或多个卤素取代的C1-10直链或支链烷基。
更优选地，
n是1或2的整数；
R1是-H、-Cl或-CH3；
R2是-H或-Cl；
R3是-H、-F、-Cl、-Br、甲基、乙烷基、异丙基、戊烷基、己基、辛基、-OCH3、
Figure BDA0002107558360000053
其与R4和每个相邻的碳连接形成
Figure BDA0002107558360000054
和
R4是-H、-Cl、-CH3或-CF3。
最优选地，上述通式1表示的化合物选自由以下化合物组成的组：
(1)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氯苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(2)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3,5-二氯苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(3)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-异丙苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(4)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-戊基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(5)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-辛基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(6)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3-氯-4-甲苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(7)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3-氯-4-氟苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(8)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(9)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氟苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(10)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氧基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(11)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-乙基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(12)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-己基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(13)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-(4-硝基苯磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(14)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3,4-二甲苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(15)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(16)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴-3-(三氟甲基)苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺；
(17)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴苯肼)-5-氯嘧啶-2,4-二胺；
(18)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3-氯-4-甲氧基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(19)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氯苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(20)N4-(3-氨基丙基)-N2-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺；
(21)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)嘧啶-2,4-二胺；
(22)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)嘧啶-2,4-二胺；
(23)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(5,6,7,8-四氢化萘-2-基)嘧啶-2,4-二胺；
(24)6-(4-(3-氨基丙胺基)-5-氯嘧啶-2-基氨基)-3,4-二氢化萘-1(2H)-酮；
(25)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(26)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-(哌啶-4-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(27)N4-(3-氨基丙基)-N2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(28)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氟苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(29)N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(30)N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(5,6,7,8-四氢化萘-2-基)嘧啶-2,4-二胺；
(31)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(32)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴-3-(三氟甲基)苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(33)N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(4-苯氧基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(34)N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(4-(4-硝基苯磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(35)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(36)N4-(3-氨基丙基)-N2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(37)N4-(3-氨基丙基)-N2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(38)N4-(3-氨基丙基)-N2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(39)N4-(3-氨基丙基)-N2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(40)N4-(4-正氨基丁基)-N2-(4-氯苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺；和
(41)N4-(4-正氨基丁基)-N2-(3,5-二氯苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺。
本发明所述的通式1表示的化合物可以药学上可接受的盐的形式使用，其中所述盐优选是由药学上可接受的游离酸形成的酸加成盐。这里的酸加成盐可以由以下酸获得：无机酸，例如盐酸、硝酸、磷酸、硫酸、氢溴酸、氢碘酸、亚硝酸和亚磷酸；无毒有机酸，例如脂肪族单/二羧酸盐、苯基取代的链烷酸盐、羟基链烷酸盐、链烷二酸盐、芳香酸和脂肪族/芳香族磺酸；或有机酸，例如乙酸、苯甲酸、柠檬酸、乳酸、马来酸、葡萄糖酸、甲磺酸、4-甲苯磺酸、酒石酸和富马酸。药学上无毒的盐的例子有硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、氟化物、醋酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、癸酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、延胡索酸盐、马来酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己烷-1,6-二酸盐、苯酸盐、氯苯甲酸盐、苯甲酸甲酯、二硝基苯甲酸盐、羟苯酸盐、甲氧基苯甲酸酯，邻苯二甲酸酯、对苯二酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、氯苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、羟基丁酸盐、乙醇酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐，萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁桃酸盐。
可以通过本领域技术人员已知的常规方法制备本发明中的酸加成盐。例如，将通式1表示的衍生物溶解在有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷和乙腈中，向其中加入有机酸或无机酸以诱导沉淀。然后，过滤沉淀物并干燥，得到所述酸加成盐。或者在减压条件下蒸馏溶剂和过量的酸，并干燥得到所述酸加成盐。或者将沉淀物在有机溶剂中结晶，得到相同的酸加成盐。
可以使用碱来制备药学上可接受的金属盐。通过以下方法得到碱金属或碱土金属盐：将化合物溶解在过量的碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物溶液中；过滤不溶性复合盐；蒸发剩余的溶液并使其干燥。此时，金属盐优选制备为药学上合适的形式如钠盐、钾盐或钙盐。使碱金属或碱土金属盐与适当的银盐(例如硝酸银)反应制备得到相应的银盐。
本发明不仅包括通式1表示的化合物，还包括其药学上可接受的盐，以及可能由其制备的溶剂化物、立体异构体或水合物。
本发明还提供了一种制备上式1表示的化合物的方法，包括以下步骤：通过使通式2表示的化合物与通式3表示的化合物反应制备通式4表示的化合物(步骤1)；通过使上述步骤1中制备的通式4表示的化合物与通式5表示的化合物在酸的存在下反应，制备通式1表示的化合物(步骤2)，如下反应式1所示。
[反应式1]
Figure BDA0002107558360000071
在反应式1中，
n、R1、R2、R3和R4各自独立地如在通式1中所限定的。
在下文中，逐步更详细地描述由本发明的通式1表示的化合物的制备方法。
在由本发明的通式1表示的化合物的制备方法中，步骤1是通过使通式2表示的化合物与通式3表示的化合物反应制备通式4表示的化合物。
此时，反应温度没有特别限制，但反应可在0℃-100℃，优选10℃-70℃，更优选20℃-40℃，最优选25℃下进行。
反应时间也没有特别限制，但反应可以进行1-10小时，优选2-8小时，更优选3-6小时，最优选5小时。
在根据本发明的制备通式1表示的化合物的方法中，步骤2是通过使上述步骤1中制备的通式4表示的化合物与通式5表示的化合物反应来制备通式1表示的化合物。
此时，反应温度没有特别限制，但反应可在30℃-150℃，优选50℃-140℃，更优选60℃-120℃，最优选100℃下进行。
反应时间也没有特别限制，但反应可以进行6-20小时，优选10-18小时，更优选12-18小时，最优选16小时。
酸的使用也没有限制，只要所使用的酸对-Boc具有去保护作用，例如盐酸。
本发明还提供了一种药物组合物，包含上式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗癌症的活性成分。本文中，所述癌症选自以下组中的一种或多种：假性粘液瘤、肝内胆管癌、肝母细胞瘤、肝癌、甲状腺癌、结肠癌、睾丸癌、骨髓增生异常综合征、胶质母细胞瘤、口腔癌、唇癌、蕈样真菌病、急性髓性白血病、急性淋巴细胞白血病、基底细胞癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞癌、男性乳腺癌、脑癌、垂体腺瘤、多发性骨髓瘤、胆囊癌、胆管癌、结肠癌、慢性髓细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、成视网膜细胞瘤、脉络膜黑色素瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、壶腹癌、膀胱癌、腹膜癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、非鼻窦癌(sinunasal cancer)、非小细胞肺癌、非霍奇金淋巴瘤、舌癌、星形细胞瘤、小细胞肺癌、儿童脑癌、小儿淋巴瘤、儿童期白血病、小肠癌、脑膜瘤、食道癌、胶质瘤、成神经细胞瘤、肾癌、肾肿瘤、心脏肿瘤、十二指肠癌、恶性软组织肿瘤、恶性骨肿癌、恶性淋巴瘤、恶性间皮瘤、恶性黑色素瘤、眼癌、外阴癌、输尿管癌、尿道癌、原发灶不明的肿瘤、胃淋巴瘤、胃癌、胃类癌、胃肠间质癌、肾母细胞瘤、乳腺癌、肉瘤、***癌、咽癌、妊娠滋养细胞疾病、***、子宫内膜癌、子宫肉瘤、***癌、骨转移癌、脑转移癌、纵隔肿癌、直肠癌、直肠类癌、***癌、脊髓肿癌、前庭神经鞘瘤、胰腺癌、唾液腺癌、卡波西肉瘤、佩吉特病、扁桃腺癌、鳞状细胞癌、肺腺癌、肺癌、肺鳞状细胞癌、皮肤癌、***癌、横纹肌肉瘤、喉癌、胸膜癌、胸腺癌或其组合。
本发明还提供了一种药物组合物，包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗炎性疾病的活性成分。本文中，所述炎性疾病选自以下组中的一种或多种：自身免疫疾病的炎性结肠炎、克罗恩病、白塞病、多发性硬化、黄斑变性、关节炎、1型糖尿病、脑炎、病毒性脑膜炎或其组合。
通过与通常使用的稀释剂或赋形剂如填充剂、增量剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂和表面活性剂混合，可以制备本发明的通式1表示的化合物用于口服或肠胃外给药。
口服给药的制剂的例子有片剂、丸剂、硬/软胶囊、溶液、悬浮液、乳剂、糖浆、颗粒剂和酏剂等。除了包含活性组分外，这些制剂可包括稀释剂(例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸)和润滑剂(例如二氧化硅、滑石、硬脂酸盐及其镁盐或钙盐和/或聚乙二醇)。片剂可包括粘合剂，例如硅酸铝镁、淀粉糊、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮，必要时可含有崩解剂，例如淀粉、琼脂糖、海藻酸或其钠盐，或共沸混合物和/或吸收剂，另外还可以包括着色剂、调味剂和甜味剂。
包含通式1表示的化合物作为活性成分的药物组合物可以肠胃外给药，肠胃外给药包括皮下注射、静脉注射、肌内注射和胸腔内注射。
为了制备组合物作为肠胃外给药的制剂，将通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐与稳定剂或缓冲剂混合以制备溶液或悬浮液，然后将其配制成安瓿或小瓶。本发明的组合物可以被灭菌处理，并添加有防腐剂、稳定剂、可湿性粉剂或乳化剂、调节渗透压的盐和/或缓冲剂、以及其它治疗上有用的物质，可以通过常规的混合、制粒或包衣方法配制该组合物。
包含通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物的有效剂量，可以根据患者的年龄、体重、性别、给药形式、健康状况和疾病严重程度而变化。以体重70kg的成年患者为例，剂量通常为0.1～1000mg/天，优选为1～500mg/天。根据医生或药剂师的判断，在预定的时间间隔内，本发明的组合物可以给药一天一次或数次。
本发明还提供了一种保健功能食品，包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或改善癌症的活性成分。
本发明还提供了一种预防或治疗癌症的方法，包括以下步骤：给需要的受试者服用包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物或保健功能食品。
本发明还提供了包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗癌症的活性成分的药物组合物或保健功能食品的用途。
本发明还提供了一种预防或治疗炎性疾病的方法，包括如下步骤：给需要的受试者服用包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物或保健功能食品。
此外，本发明提供了包含上述通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为预防或治疗炎性疾病的活性成分的所述药物组合物或所述保健功能食品的用途。
本发明的新型嘧啶化合物在低浓度下表现出非常优异的DRAK抑制活性，因此它可以有效地用作预防或治疗癌症和炎性疾病的药物组合物，这已经得到以下实验的支持。
如以下实施例中所示，本发明的实际和目前优选的实施例是说明性的。
然而，应当理解，本领域技术人员在考虑本申请公开内容的情况下，可以在本发明的精神和范围内进行修改和改进。
实施例1：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氯苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000091
步骤1：(3-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备
在0℃下将2,4,5-三氯嘧啶(5.7mmol，1.05g)加入到异丙醇(40mL)中，然后搅拌。向其中缓慢加入叔丁基(3-氨基丙基)氨基甲酸酯(5.7mmol，1g)和三乙胺(TEA)(29mmol，4mL)，在室温下反应5小时。反应完成后，反应混合物在室温下冷却，然后减压除去溶剂。通过mplc(中压液相色谱)分离混合物，得到(3-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯，为白色固体，收率为89％。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.99(br s，1H)，6.46(br s，1H)，4.85(br s，1H)，3.58(m，2H)，3.21(m，2H)，1.73(m，2H)，1.45(s，9H)；
C12H18Cl2N4O2的质量(M+H+)计算值为320.1，实测值为321.1。
步骤2：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氯苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
将(3-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.27mmol，86mg)和4-氯苯胺(0.54mmol，87mg)溶解在含有0.08N HCl的2-乙氧基乙醇中，然后在100℃加热16小时。反应完成后，将混合物在室温下冷却，减压除去溶剂。通过制备级TLC(制备级薄层(平面)色谱法)分离混合物，得到N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氯苯基)嘧啶-2,4-二胺，为固体，收率为40％。
1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ10.30(br s，1H)，8.32(br s，1H)，8.15(s,，1H)，7.98(br s，2H)，7.67(d，J＝8.70 Hz，2H)，7.40(d，J＝8.76 Hz,2H)，3.50(m，2H)，2.79(m，2H)，1.89(m，2H)；
C13H15Cl2N5的质量(M+H+)计算值为311.0，实测值为312.1。
实施例2：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3,5-二氯苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000101
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为12％，不同之处在于使用3,5-二氯苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ8.06(s，1H)，7.64(s，2H)，7.29(s，2H)，3.66(t，J＝6.55Hz，2H)，3.00(t，J＝8.00 Hz，2H)，2.04(m，2H)；
C13H14Cl3N5的质量(M+H+)计算值为345.0，实测值为346.0。
实施例3：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-异丙苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000102
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为21％，不同之处在于使用4-异丙基***替代4-氯代***。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.94(s，1H)，7.43(d，J＝8.46 Hz，2H)，7.33(d，J＝8.46Hz，2H)，3.65(t，J＝6.57 Hz，2H)，2.93(m，3H)，2.02(m，2H)，1.28(d，J＝6.90 Hz，6H)；
C16H22ClN5的质量(M+H+)计算值为319.1，实测值为320.0。
实施例4：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-戊基苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000103
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为26％，不同之处在于使用4-戊基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.92(s，1H)，7.43(d，J＝8.28 Hz，2H)，7.24(d，J＝8.25Hz，2H),3.64(t，J＝6.48 Hz，2H)，2.97(t，J＝7.53 Hz,2H)，2.63(t，J＝7.53 Hz，2H)，2.01(m，2H)，1.63(m，2H)，1.36(m，4H)，0.92(t，J＝6.57 Hz,3H)；
C18H26ClN5的质量(M+H+)计算值为347.1，实测值为348.1。
实施例5：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-辛基苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000111
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为49％，不同之处在于使用4-辛基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.87(s，1H)，7.36(d，J＝8.40 Hz，2H)，7.21(d，J＝8.40Hz，2H)，3.59(t，J＝6.57 Hz，2H)，2.91(t，J＝7.68 Hz，2H)，2.58(t，J＝8.28 Hz,2H)，1.93(m，2H)，1.58(m，2H)，1.25(m，8H)，0.85(t，J＝6.99 Hz，H)；
C21H32ClN5的质量(M+H+)计算值为389.2，实测值为390.2。
实施例6：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3-氯-4-甲苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000112
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为38％，不同之处在于使用3-氯-4-甲基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.96(s，1H)，7.83(s，1H)，7.28(m，2H)，3.65(t，J＝6.60Hz，2H)，3.01(t，J＝7.68 Hz，2H)，2.35(s，3H)，2.02(m，2H)；
C14H17Cl2N5的质量(M+H+)计算值为325.1，实测值为326.1。
实施例7：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3-氯-4-氟苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000113
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为11％，不同之处在于使用3-氯-4-氟苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD,300 MHz)δ8.04(dd,J＝6.72 Hz,2.64 Hz,1H),7.90(s,1H),7.40(m,1H),7.15(m 1H),3.62(t,J＝6.42 Hz,2H),3.01(t,J＝7.47 Hz,2H),2.03(m,2H)；
C13H14Cl2FN5的质量(M+H+)计算值为329.0，实测值为330.0。
实施例8：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000121
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为20％，不同之处在于使用3,4-二氯苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ8.11(s，1H)，7.98(s，1H)，7.43(m，2H)，3.65(t，J＝6.57Hz,2H)，2.99(t，J＝8.01 Hz，2H)，2.02(m，2H)；
C13H14Cl3N5的质量(M+H+)计算值为345.0，实测值为346.0。
实施例9：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氟苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000122
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为40％，不同之处在于使用4-氟苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，500 MHz)δ7.99(s，1H)，7.53(m，2H)，7.24(t，J＝8.60 Hz，2H)，3.64(t，J＝6.60 Hz，2H)，2.96(t，J＝7.70 Hz，2H)，2.01(m，2H)；
C13H15Cl3FN5的质量(M+H+)计算值为295.1，实测值为296.1。
实施例10：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-苯氧基苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000123
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为89％，不同之处在于使用4-苯氧基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，500 MHz)δ7.96(s，1H)，7.48(d，J＝8.75 Hz,2H)，7.41(m，2H)，7.17(t，J＝7.5 Hz,1H)，7.10(m,2H)，7.05(d，J＝7.90 Hz,2H)，3.66(t，J＝6.65 Hz，2H)，2.98(t，J＝7.70Hz，2H)，2.02(m，2H)；
C19H20ClN5O的质量(M+H+)计算值为369.1，实测值为370.1。
实施例11：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-乙基苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000131
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为55％，不同之处在于使用4-乙基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，500 MHz)δ7.94(s，1H)，7.40(d，J＝8.25 Hz，2H)，7.33(d,J＝8.35Hz，2H)，3.66(t，J＝6.70 Hz，2H)，2.98(t，J＝7.75 Hz，2H)，2.70(m，2H)，2.02(m，2H)，1.27(t，J＝7.60 Hz，3H)；
C15H20ClN5的质量(M+H+)计算值为305.1，实测值为305.9。
实施例12：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-己基苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000132
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为20％，不同之处在于使用4-己基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，500 MHz)δ7.94(s，1H)，7.39(d，J＝8.15 Hz，2H)，7.31(d，J＝8.25Hz，2H)，3.66(t，J＝6.50 Hz,2H)，2.99(t,J＝7.60 Hz，2H)，2.67(t，J＝7.60 Hz，2H)，2.04(m，2H)，1.64(m，2H)，1.36(m，6H)，0.92(t，J＝6.80 Hz，3H)；
C19H28ClN5的质量(M+H+)计算值为361.2，实测值为362.2。
实施例13：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-(4-硝基苯磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二 胺的制备
Figure BDA0002107558360000133
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为30％，不同之处在于使用4-(4-硝基苯磺酰基)苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，500 MHz)δ8.44(d，J＝8.85 Hz，2H)，8.25(d，J＝8.80 Hz，2H)，8.11(s，1H)，8.09(d，J＝8.90 Hz，2H)，7.87(d，J＝8.80 Hz，2H)，3.70(t，J＝6.70 Hz，2H)，3.01(t，J＝7.65 Hz，2H)，2.04(m，2H)；
C19H19ClN6O4S的质量(M+H+)计算值为462.1，实测值为463.1。
实施例14：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3,4-二甲苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000141
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为64％，不同之处在于使用3,4-二甲基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.91(s，1H)，7.21(m，3H)，3.66(t，J＝6.42 Hz，2H)，2.98(t，J＝7.71 Hz，2H)，2.30(s，3H)，2.28(s，3H)，2.02(m，2H)；
C15H20ClN5的质量(M+H+)计算值为305.1，实测值为306.1。
实施例15：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺 的制备
Figure BDA0002107558360000142
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为70％，不同之处在于使用4-氟-3-(三氟甲基)苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ8.07(s，1H)，8.05(m，1H)，7.80(m，1H)，7.46(m，1H)，3.65(t，J＝6.63 Hz，2H)，2.96(t，J＝7.80 Hz，2H)，2.00(m，2H)；
C14H14ClF4N5的质量(M+H+)计算值为363.1，实测值为364.1。
实施例16：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴-3-(三氟甲基)苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺 的制备
Figure BDA0002107558360000143
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为18％，不同之处在于使用4-溴-3-(三氟甲基)苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ8.35(s，1H)，7.98(s，1H)，7.69(m，2H)，3.65(t，J＝6.42Hz,2H)，2.99(t，J＝7.65 Hz，2H)，2.02(m，2H)；
C14H14BrClF3N5的质量(M+H+)计算值为423.0，实测值为424.0。
实施例17：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000144
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为35％，不同之处在于使用4-溴苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.99(s,，1H),7.54(m，4H)，3.64(t，J＝6.70 Hz，2H)，2.98(t，J＝6.57 Hz，2H)，2.97(t，J＝7.68 Hz，2H)，1.99(m，2H)；
C13H15BrClN5的质量(M+H+)计算值为355.0，实测值为356.0。
实施例18：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3-氯-4-甲氧基苯基)嘧啶-2,4-二胺的制 备
Figure BDA0002107558360000151
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为42％，不同之处在于使用3-氯-4-甲氧基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.97(s，1H)，7.72(d，J＝2.19 Hz，1H)，7.34(dd，J＝8.85Hz，2.55 Hz，1H)，7.15(d，J＝8.88 Hz，1H)，3.92(s，3H)，3.64(t，J＝6.72 Hz，2H)，2.98(t，J＝7.80Hz，2H)，2.00(m，2H)；
C14H17Cl2N5O的质量(M+H+)计算值为341.1，实测值为342.1。
实施例19：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氯苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000152
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为45％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.58(s,1H)，7.59(m，4H)，3.65(t，J＝6.12 Hz，2H)，2.98(t，J＝7.38 Hz，2H)，2.09(s，3H)，2.02(m，2H)；
C14H18ClN5的质量(M+H+)计算值为291.1，实测值为292.0。
实施例20：N4-(3-氨基丙基)-N2-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-5-氯嘧啶- 2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000153
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为21％，不同之处在于使用苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ10.64(br s，1H)，8.02(s，1H)，7.94(br s，1H)，7.38(s，2H)，7.01(d，J＝8.44 Hz，1H)，6.87(dd，J＝8.35 Hz，1.65 Hz，2H)，5.99(s，2H)，3.47(m，2H)，2.80(m，2H)，1.88(m，2H)；
C14H16ClN5O2的质量(M+H+)计算值为321.1，实测值为322.0。
实施例21：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)嘧啶-2,4-二胺的 制备
Figure BDA0002107558360000161
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为34％，不同之处在于使用2,3-二氢-1H-茚-5-胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ9.02(s，1H)，7.88(s，1H)，7.68(s，1H)，7.36(m，2H)，7.07(d，J＝8.10 Hz，1H)，3.46(m，2H)，2.80(m，4H)，2.62(m，2H)，1.99(m，2H)，1.65(m，2H)；
C16H20ClN5的质量(M+H+)计算值为317.14，实测值为318.1。
实施例22：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)嘧 啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000162
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为25％，不同之处在于使用2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ10.59(br s，1H)，8.87(br s，1H)，8.20(s，1H)，8.15(br s，2H)，7.20(d，J＝1.71 Hz，1H)，6.91(m，2H)，4.25(m，4H)，3.50(m，2H)，2.81(m，2H)，1.91(m，2H)；
C15H18ClN5O2的质量(M+H+)计算值为335.11，实测值为336.1。
实施例23：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(5,6,7,8-四氢化萘-2-基)嘧啶-2,4-二胺 的制备
Figure BDA0002107558360000163
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为30％，不同之处在于使用5,6,7,8-四氢化萘-2-胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ10.14(br s，1H)，8.41(br s，1H)，8.14(s，1H)，8.05(br s，2H)，7.37(s，1H)，7.28(d，J＝7.35 Hz，1H)，7.02(d，J＝7.89 Hz，1H)，3.51(m，2H)，2.81(m，2H)，2.70(m，4H)，1.91(m，2H)，1.73(m，4H)；
C17H22ClN5的质量(M+H+)计算值为331.1，实测值为331.9。
实施例24：6-(4-(3-氨基丙胺基)-5-氯嘧啶-2-基氨基)-3,4-二氢化萘-1(2H)-酮 的制备
Figure BDA0002107558360000171
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为20％，不同之处在于使用6-氨基-3,4-二氢化萘-1(2H)-酮代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，500 MHz)δ8.10(s，1H)，8.04(d，J＝8.55 Hz，1H)，7.60(d，J＝8.55Hz，1H)，7.54(br s，1H)，3.72(t，J＝6.60 Hz，2H)，3.04(m，4H)，2.68(t，J＝6.30 Hz，2H)，2.17(m，2H)，2.08(m，2H)；
C17H20ClN5O的质量(M+H+)计算值为345.14，实测值为346.1。
实施例25：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺的制 备
Figure BDA0002107558360000172
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为30％，不同之处在于使用4-(哌嗪-1-基)苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ10.64(br s，1H)，9.41(br s，1H)，8.92(br s，1H)，8.22(s，1H)，8.16(br s，2H)，7.45(d，J＝8.82 Hz，2H)，7.08(d，J＝8.80 Hz，2H)，3.51(m，2H)，3.39(br s，4H)，3.21(br s，4H)，2.77(m，2H)，1.88(m，2H)；
C17H24ClN7的质量(M+H+)计算值为361.1，实测值为361.8。
实施例26：N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-(哌啶-4-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺的制 备
Figure BDA0002107558360000173
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为15％，不同之处在于使用4-(哌啶-4-基)苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.97(s，1H)，7.51(d，J＝8.43 Hz，2H)，7.38(d，J＝8.52Hz，2H)，3.66(t，J＝6.63 Hz，2H)，3.53(m，2H)，3.16(m，2H)，2.98(t，J＝7.41 Hz，2H)，2.00(m，6H)；
C18H25ClN6的质量(M+H+)计算值为360.1，实测值为361.1。
实施例27：N4-(3-氨基丙基)-N2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺的制 备
Figure BDA0002107558360000181
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为27％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用3-氯-4-甲基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.80(s，1H)，7.56(s，1H)，7.30(br s，2H)，3.66(t，J＝6.57 Hz，2H)，3.02(t，J＝7.62 Hz，2H)，2.33(s，3H)，2.06(br s，5H)；
C15H20ClN5的质量(M+H+)计算值为305.1，实测值为306.1。
实施例28：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氟苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000182
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为49％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，使用4-氟苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.54(s，1H)，7.52(m，2H)，7.18(m，2H)，3.63(t，J＝6.54Hz，2H)，2.95(t，J＝7.65 Hz，2H)，2.06(s，3H)，2.00(m，2H)；
C14H18FN5的质量(M+H+)计算值为275.1，实测值为276.0。
实施例29：N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺的 制备
Figure BDA0002107558360000183
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为4％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用4-(哌嗪-1-基)苯基胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，500 MHz)δ7.48(s，1H)，7.39(d，J＝8.65 Hz,2H)，7.14(d，J＝8.75Hz，2H)，3.65(t，J＝6.50 Hz，2H)，3.44(m，8H)，2.99(t，J＝7.50 Hz，2H)，2.06(br s，5H)；
C18H27FN7的质量(M+H+)计算值为341.2，实测值为342.1。
实施例30：N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(5,6,7,8-四氢化萘-2-基)嘧啶-2,4-二 胺的制备
Figure BDA0002107558360000184
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为31％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用5,6,7,8-四氢化萘-2-胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.48(s，1H)，7.17(m，3H)，3.65(t，J＝6.57 Hz，2H)，2.98(t，J＝7.59 Hz，2H)，2.79(br s，4H)，2.05(br s，5H)，1.83(br s，4H)；
C18H25N5的质量(M+H+)计算值为311.2，实测值为312.1。
实施例31：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二 胺的制备
Figure BDA0002107558360000191
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为3％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用4-氟-3-(三氟甲基)苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ8.23(m，1H)，7.71(m，1H)，7.68(s，1H)，7.23(t，J＝9.72Hz，1H)，3.63(t，J＝6.09 Hz，2H)，2.98(t，J＝7.32 Hz，2H)，2.00(br s，5H)；
C15H17F4N5的质量(M+H+)计算值为343.1，实测值为344.0。
实施例32：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴-3-(三氟甲基)苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二 胺的制备
Figure BDA0002107558360000192
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为2％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用4-溴-3-(三氟甲基)苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ8.39(s，1H)，7.71(s，1H)，7.66(br s，2H)，3.64(t，J＝6.06 Hz，2H)，2.99(t，J＝7.44 Hz，2H)，2.01(br s，5H)；
C15H17BrF3N5的质量(M+H+)计算值为403.0，实测值为403.9。
实施例33：N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(4-苯氧基苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000193
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为3％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用4-苯氧基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.57(s，1H)，7.50(d，J＝8.75 Hz，2H)，7.37(m，2H)，7.13(t，J＝7.44 Hz，1H)，7.03(m，4H)，3.63(m，2H)，2.96(t，J＝7.44 Hz，2H)，2.04(m，5H)；
C20H23N5O的质量(M+H+)计算值为349.1，实测值为350.1。
实施例34：N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(4-(4-硝基苯磺酰基)苯基)嘧啶-2,4- 二胺的制备
Figure BDA0002107558360000201
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为3％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用4-(4-硝基苯磺酰基)苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ8.41(d，J＝8.88 Hz，2H)，8.19(d，J＝8.88 Hz，2H)，7.91(m，4H)，7.73(s，1H)，3.68(m，2H)，3.00(t，J＝7.29 Hz，2H)，1.98(br s，5H)；
C20H22N6O4S的质量(M+H+)计算值为442.1，实测值为440.9。
实施例35：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000202
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为8％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用4-溴苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.53(m，5H)，3.64(t，J＝6.15 Hz，2H)，2.97(t，J＝7.17Hz，2H)，2.01(m，5H)；
C14H18BrN5的质量(M+H+)计算值为335.1，实测值为336.0。
实施例36：N4-(3-氨基丙基)-N2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)-5-甲基 嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000203
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为35％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.48(s，1H)，7.14(br s，1H)，6.87(br s，2H)，4.27(brs，4H)，3.63(t，J＝6.69 Hz，2H)，3.01(t，J＝8.53 Hz，2H)，2.05(br s，5H)；
C16H21N5O2的质量(M+H+)计算值为315.1，实测值为316.1。
实施例37：N4-(3-氨基丙基)-N2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺的制 备
Figure BDA0002107558360000204
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为36％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用3,4-二甲基苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.48(s，1H)，7.25(s，1H)，7.20(br s，2H)，3.65(t，J＝6.48 Hz，2H)，2.97(t，J＝7.68 Hz，2H)，2.30(s，3H)，2.28(s，3H)，2.05(br s，5H)；
C16H23N5的质量(M+H+)计算值为285.2，实测值为286.1。
实施例38：N4-(3-氨基丙基)-N2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000211
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为26％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用3-氯-4-氟苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ7.89(m，1H)，7.60(br s，1H)，7.43(m，1H)，7.30(m，1H)，3.65(t，J＝6.69 Hz，2H)，3.00(t，J＝7.68 Hz，2H)，2.08(br s，5H)；
C14H17ClFN5的质量(M+H+)计算值为309.1，实测值为310.0。
实施例39：N4-(3-氨基丙基)-N2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000212
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，产率为26％，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶，用3,4-二氯苯胺代替4-氯苯胺。
1H NMR(CD3CD，300 MHz)δ8.03(s，1H)，7.61(s，1H)，7.53(d，J＝8.73 Hz，1H)，7.41(dd，J＝8.73 Hz，2.34 Hz，1H)，3.67(t，J＝6.72 Hz，2H)，3.03(t，J＝7.62 Hz，2H)，2.08(br s，5H)；
C14H17Cl2N5的质量(M+H+)计算值为325.1，实测值为323.9。
实施例1-39中制备的化合物的具体结构如下表1所示。
实施例40：N4-(4-正氨基丁基)-N2-(4-氯苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000213
步骤1：(4-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)丁基)氨基甲酸叔丁酯的制备
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于步骤1中使用的是(4-氨基丁基)氨基甲酸叔丁酯(产率：46％)。
1H NMR(CDCl3,300 MHz)δ8.00(s,1H),5.65(br s,1H),4.62(br s,1H),3.55(m,2H),3.18(m,2H),1.68(m,4H),1.44(s,9H)。
步骤2：N4-(4-氨基丁基)-5-氯-N2-(4-氯苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于步骤2中使用的是(4-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)丁基)氨基甲酸叔丁酯(产率：30％)。
1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ10.27(br s，1 H)，8.26(br s，2 H)，8.14(s，1 H)，7.91(br s，2 H)，7.68(d，J＝8.91 Hz，2 H)，7.41(d，J＝8.85 Hz，2 H)，3.42(m，2 H)，2.78(m，2 H)，1.61(m，4 H)；
C14H17Cl2N5的质量(M+H+)计算值为325.1，实测值为326.1。
实施例41：N4-(4-正氨基丁基)-N2-(3,5-二氯苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000221
采用与实施例2相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于使用(3-氨基丁基)氨基甲酸叔丁酯代替(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(产率：12％)。
1H NMR(CD3OD，300 MHz)δ7.91(s，1 H)，7.77(s，2 H)，6.98(s，1 H)，3.59(m，2 H)，2.98(m，2 H)，1.80(m，4 H)；
C14H16Cl3N5的质量(M+H+)计算值为359.0，实测值为360.1。
对比例1：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氯苯基)-5-氟嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000222
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于使用2,4-二氯-5-氟嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶。
对比例2：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氯苯基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000223
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于使用2,4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶。
对比例3：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氯苯基)-5-甲氧基嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000224
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于使用2,4-二氯-5-甲氧基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶。
对比例4：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氯苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000231
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于使用2,4-二氯嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶。
对比例5：N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氯苯基)-5-硝基嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000232
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于使用2,4-二氯-5-硝基嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶。
对比例6：N4-3-氨基丙基)-5-溴-N2-(4-氯苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000233
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于使用5-溴-2,4-二氯嘧啶代替2,4,5-三氯嘧啶。
对比例7：N4-(2-氨基乙基)-5-氯-N2-(4-氯苯基)嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000234
采用与实施例1相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于使用(3-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯代替(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯。
对比例8：N4-(2-氨基乙基)-N2-(4-氯苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺的制备
Figure BDA0002107558360000235
采用与实施例19相同的合成工艺，获得目标化合物，不同之处在于使用(3-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯代替(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯。
实施例1-41中制备的化合物的具体结构如下表1所示，对比例1-8中制备的化合物的具体结构如下表2所示。
【表1】
Figure BDA0002107558360000241
Figure BDA0002107558360000251
Figure BDA0002107558360000261
【表2】
Figure BDA0002107558360000262
实验例1：DRAK1和DARK2活性抑制的评价
1-1.实验准备
DRAK1和DRAK2重组蛋白购自新格诺康(SignalChem Inc)。使用普罗米加公司(Promega Inc)提供的ADP-Glo TM试剂盒来测量激酶活性。用于激酶反应的缓冲液A由60mMTris-Cl(pH 7.5)，30mM MgCl 2和0.15％BSA组成。在实验之前，将1 M的溶液稀释，加入DTT，制得1mM的DTT。
1-1.实验方法
将底物MRCL3肽和ATP与酶混合以测量DRAK1和DRAK2活性。在适当的时间后，定量分析反应产物ADP。
使用缓冲溶液A制备3x浓度的3x底物溶液，使得ATP和MRCL3肽的最终浓度都为1μM，并将每种溶液各2.5μl加入至Optiplate 384(珀金埃尔默(perkin-elmer))微量培养板中。
使用缓冲液A使ATP和MRCL3肽的最终浓度分别为1μM，然后制备3x底物溶液。将制备的底物溶液加入至Optiplate 384(珀金埃尔默)微孔板(2.5μl/孔)中。然后，加入浓度为最终浓度的三倍的实施例1～39的化合物和对比例1-6的化合物(2.5μl/孔)。最后，再加入用缓冲液A适当稀释的DRAK1或DRAK2酶溶液(2.5μl/孔)。800rpm离心1分钟，然后在30℃诱导酶反应。
2小时后，酶反应终止。为了去除残留的ATP，将ADP-GloTM中含有的ADP-GloTM试剂以7.5μl的浓度添加到每个孔中，该浓度与之前添加的试剂总量相同，然后以相同的RPM和时间离心。在室温下反应40分钟诱导其他反应。为了将激酶活性产生的ADP转化为ATP，向每个孔中加入15ul激酶检测缓冲液，然后离心。离心完成5分钟后，使用Envision多功能酶标仪测定反应产物的发光值，并测量化合物的酶活性抑制效果。然后，使用Prism程序确定每种化合物的IC50。
1-3.实验结果
上述新型嘧啶化合物和对比例化合物对DRAK1和DRAK2酶活性抑制作用测量结果如下表3所示。
Figure BDA0002107558360000271
Figure BDA0002107558360000281
(表3 ND表示未测定)。
如表3所示，本发明的实施例1-41的化合物具有良好的DRAK1和DRAK2抑制活性。比较例的部分化合物也选择性地表现出良好的DRAK2抑制作用。
实验例2：DRAK2选择性的评价
为了评价本发明实施例化合物对DRAK2的选择性是否优于对DRAK1的选择性，以下实验采用与实验例1相同的方法进行。实施例1和19的化合物用作实验组，对比例6的化合物用作对照。结果如表4所示。
【表4】
Figure BDA0002107558360000282
如表4所示，本发明化学通式1中R1为Br的对比例6的化合物表现出DRAK1和DRAK2抑制活性，而本发明实施例1和19的化合物仅表现DRAK2抑制活性，表明该化合物具有良好的DRAK2选择性。
因此，由于本发明实施例的化合物不抑制DRAK1，而仅表现出对DRAK2的良好的抑制活性，因此，能够明显防止由DRAK1抑制引起的副作用。
另一方面，本发明的通式1表示的化合物可根据其用途配制成各种形式。
以下是包含本发明通式1表示的化合物作为活性成分的组合物配方的实施例，但是本发明不限于此。
实验例3：DRAK2抑制活性的评估
为了根据n的数目评价通式1表示的化合物的DRAK2抑制活性，对实施例1、19和40，对比例7和8的化合物，按照与实验例1相同的方式进行实验，测量对DRAK2的IC50，结果如表5所示。
【表5】
Figure BDA0002107558360000283
Figure BDA0002107558360000291
如表5所示，实施例1、19和40的化合物(其中n为1或2)表现出比对比例7和8的化合物(其中n为0)明显更低的IC50。
制备实施例1：药物制剂的制备
1-1.制备粉末剂
通式1的化合物 500mg
乳糖 100mg
滑石 10mg
按照常规的粉末剂制备方法，将上述各组分混合，填充在密闭包装中。
1-2.制备片剂
Figure BDA0002107558360000292
按照常规的片剂制备方法，混合上述各组分。
1-3.制备胶囊
Figure BDA0002107558360000293
按照常规的胶囊制备方法，混合上述各组分，并将其填充到明胶胶囊中。
1-4.制备可注射溶液
通式1的化合物 500mg
灭菌蒸馏水 适量
pH调节剂 适量
按照常规的可注射溶液制备方法，混合上述各组分，并将混合物加入2ml安瓿，消毒。
1-5.制备液体制剂
Figure BDA0002107558360000301
将所有上述组分溶解在纯净水中。加入柠檬香料后，再加入纯净水将总体积调节至100ml。按照常规的液体制剂制备方法，将混合物放入棕色瓶中，并对其进行灭菌。
工业实用性
本发明的新型嘧啶化合物显著抑制DRAK活性，已知DRAK活性干扰在抑制癌症生长中起作用的TGF-β信号转导***。因此，本发明的新型嘧啶化合物可以用作预防或治疗癌症和炎性疾病的药物组合物。

Claims (8)

1.一种通式1表示的化合物，或其药学可接受的盐，
Figure FDA0002438707700000011
通式1中，
n是1或2的整数；
R1是-Cl或-CH3；
R2是-H或-Cl；
R3是-H、-F、-Cl、-Br、甲基、乙基、异丙基、戊基、己基、辛基、-OCH3、
Figure FDA0002438707700000012
其与R4和每个相邻的碳连接形成
Figure FDA0002438707700000013
和R4是-H、-Cl、-CH3或-CF3。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中，通式1表示的化合物选自由以下化合物组成的组：
(1)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氯苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(2)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3,5-二氯苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(3)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-异丙苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(4)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-戊基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(5)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-辛基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(6)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3-氯-4-甲苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(7)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3-氯-4-氟苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(8)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3,4-二氯苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(9)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氟苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(10)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-苯氧基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(11)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-乙基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(12)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-己基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(13)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-(4-硝基苯磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(14)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3,4-二甲苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(15)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(16)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴-3-(三氟甲基)苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺；
(17)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺；
(18)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(3-氯-4-甲氧基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(19)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氯苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(20)N4-(3-氨基丙基)-N2-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺；
(21)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)嘧啶-2,4-二胺；
(22)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)嘧啶-2,4-二胺；
(23)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(5,6,7,8-四氢化萘-2-基)嘧啶-2,4-二胺；
(24)6-(4-(3-氨基丙胺基)-5-氯嘧啶-2-基氨基)-3,4-二氢化萘-1(2H)-酮；
(25)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(26)N4-(3-氨基丙基)-5-氯-N2-(4-(哌啶-4-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(27)N4-(3-氨基丙基)-N2-(3-氯-4-甲基苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(28)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氟苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(29)N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(30)N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(5,6,7,8-四氢化萘-2-基)嘧啶-2,4-二胺；
(31)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(33)N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(4-苯氧基苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(34)N4-(3-氨基丙基)-5-甲基-N2-(4-(4-硝基苯磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；
(35)N4-(3-氨基丙基)-N2-(4-溴苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(36)N4-(3-氨基丙基)-N2-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二恶英-6-基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(37)N4-(3-氨基丙基)-N2-(3,4-二甲基苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(38)N4-(3-氨基丙基)-N2-(3-氯-4-氟苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(39)N4-(3-氨基丙基)-N2-(3,4-二氯苯基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺；
(40)N4-(4-正氨基丁基)-N2-(4-氯苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺；和
(41)N4-(4-正氨基丁基)-N2-(3,5-二氯苯基)-5-氯嘧啶-2,4-二胺。
3.一种制备根据权利要求1所述的通式1表示的化合物的方法，包括以下步骤：
步骤1：通过使通式2表示的化合物与通式3表示的化合物反应制备通式4表示的化合物；
步骤2：通过使上述步骤1中制备的通式4表示的化合物与通式5表示的化合物在酸的存在下反应，制备通式1表示的化合物，
如下反应式1所示：
[反应式1]
Figure FDA0002438707700000051
在反应式1中，
n、R1、R2、R3和R4各自独立地如在通式1中所限定的。
4.如权利要求1所述的通式1表示的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗与DRAK1和DRAK2相关的癌症的药物组合物中的用途。
5.根据权利要求4所述的用途，其中，所述癌症选自以下组中的一种或多种：假性粘液瘤、肝内胆管癌、肝母细胞瘤、肝癌、甲状腺癌、结肠癌、睾丸癌、骨髓增生异常综合征、胶质母细胞瘤、口腔癌、唇癌、蕈样真菌病、急性髓性白血病、急性淋巴细胞白血病、基底细胞癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞癌、男性乳腺癌、脑癌、垂体腺瘤、多发性骨髓瘤、胆囊癌、胆管癌、结肠癌、慢性髓细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、成视网膜细胞瘤、脉络膜黑色素瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、壶腹癌、膀胱癌、腹膜癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、非鼻窦癌、非小细胞肺癌、非霍奇金淋巴瘤、舌癌、星形细胞瘤、小细胞肺癌、儿童脑癌、小儿淋巴瘤、儿童期白血病、小肠癌、脑膜瘤、食道癌、胶质瘤、成神经细胞瘤、肾癌、肾肿瘤、心脏肿瘤、十二指肠癌、恶性软组织肿瘤、恶性骨肿癌、恶性淋巴瘤、恶性间皮瘤、恶性黑色素瘤、眼癌、外阴癌、输尿管癌、尿道癌、原发灶不明的肿瘤、胃淋巴瘤、胃癌、胃类癌、胃肠间质癌、肾母细胞瘤、乳腺癌、肉瘤、***癌、咽癌、妊娠滋养细胞疾病、***、子宫内膜癌、子宫肉瘤、***癌、骨转移癌、脑转移癌、纵隔肿癌、直肠癌、直肠类癌、***癌、脊髓肿癌、前庭神经鞘瘤、胰腺癌、唾液腺癌、卡波西肉瘤、佩吉特病、扁桃腺癌、鳞状细胞癌、肺腺癌、肺癌、肺鳞状细胞癌、皮肤癌、***癌、横纹肌肉瘤、喉癌、胸膜癌、胸腺癌或其组合。
6.如权利要求1所述的通式1的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其中，所述炎性疾病选自以下组中的一种或多种：自身免疫疾病的炎性结肠炎、克罗恩病、白塞病、多发性硬化、黄斑变性、关节炎、1型糖尿病、脑炎、病毒性脑膜炎或其组合。
8.一种用于预防或改善癌症的药物组合物，包含权利要求1所述的通式1的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109516959A (zh) * 2018-12-03 2019-03-26 陕西师范大学 2-芳氨基-4-取代嘧啶类衍生物及其在制备抗肿瘤药物中的应用
KR102467444B1 (ko) * 2019-11-11 2022-11-15 서울대학교산학협력단 이소-엑시구아민 A(iso-exiguamine A) 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 IDO-1 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
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CA3161667A1 (en) 2019-12-16 2021-06-24 Pil Ho Kim Novel pyrimidine derivative and use thereof
CN115443269A (zh) * 2020-03-31 2022-12-06 施万生物制药研发Ip有限责任公司 经取代的嘧啶和使用方法
WO2023083330A1 (zh) * 2021-11-12 2023-05-19 百极优棠(广东)医药科技有限公司 Drak2抑制剂及其制备方法和应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101506176A (zh) * 2006-06-15 2009-08-12 贝林格尔.英格海姆国际有限公司 2-苯胺基-4-氨基亚烷基氨基嘧啶

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3445467A (en) 1964-05-25 1969-05-20 Ciba Geigy Corp Biphenyl diphenylalkane and diphenylether compounds,amino - substituted on the phenyl rings
EP2090571B1 (de) * 2001-10-17 2012-05-16 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG Pyrimidinderivate, Arzneimittel enthaltend diese Verbindungen, deren Verwendung und Verfahren zu ihrer Herstellung
EA200500721A1 (ru) * 2002-11-28 2005-12-29 Шеринг Акциенгезельшафт Пиримидины, ингибирующие chk, pdk и акт, их получение и применение в качестве лекарственных средств
PL1660458T3 (pl) 2003-08-15 2012-07-31 Novartis Ag 2,4-pirymidynodwuaminy stosowane w leczeniu chorób nowotworowych, chorób zapalnych i zaburzeń układu immunologicznego
JP2009155223A (ja) * 2007-12-25 2009-07-16 Pharma Design Inc ＤＡＰＫｓ阻害剤
KR101452235B1 (ko) 2012-02-03 2014-10-22 서울대학교산학협력단 신규한 피리미딘계 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 ｒａｇｅ 수용체 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
CN105143206B (zh) 2012-11-27 2019-01-15 托马斯·黑勒戴药物研究基金会 用于治疗癌症的嘧啶-2,4-二胺衍生物
US9850216B2 (en) * 2013-08-06 2017-12-26 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Inhibitors of ACK1/TNK2 tyrosine kinase

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101506176A (zh) * 2006-06-15 2009-08-12 贝林格尔.英格海姆国际有限公司 2-苯胺基-4-氨基亚烷基氨基嘧啶

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